(S)-N-乙基-3-((9-乙基-2-(((2R,3S)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9H-嘌呤-6-基)氨基)-吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式的制作方法

本公开整体涉及n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的固态形式，特别是(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式。本公开还涉及包含(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)-吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式的药物组合物；包含(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式的药物组合物用于治疗或预防细胞周期蛋白依赖性激酶2（cdk2）介导的病症的用途；包含含有(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式的药物组合物的试剂盒；以及用于制备(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)-吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式的方法。

背景技术：

1、细胞周期蛋白依赖性激酶（cdk），包括cdk2，是参与细胞周期调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。cdk2驱动细胞进展进入细胞周期的s期和m期。cdk2的过表达与多种癌症类型中的细胞周期和肿瘤生长的异常调节相关联。cdk2的单体形式是无活性的，但当它与其两个调节配偶体细胞周期蛋白a或细胞周期蛋白e中的一者形成异二聚体复合物时被活化。细胞周期蛋白e在细胞周期的g1期晚期与cdk2结合是细胞周期从g1期向s期转变所必需的。然后需要细胞周期蛋白a与cdk2结合以通过细胞周期的s期。活化的cdk2-细胞周期蛋白a/e复合物控制多种转录因子的磷酸化，这些转录因子调节多种影响细胞周期进程的致癌信号传导途径。cdk2活化还导致成视网膜细胞瘤蛋白（prb）的过度磷酸化和失活，成视网膜细胞瘤蛋白是有助于维持细胞处于静止状态（即，细胞周期的g0期）的肿瘤抑制蛋白。

2、产生细胞周期蛋白e的ccne1基因的过表达发生在许多肿瘤细胞中，这导致那些细胞变得依赖于cdk2和细胞周期蛋白e。例如，在实体瘤癌症诸如乳腺癌、卵巢癌、肺癌、结肠直肠癌、胃癌、子宫内膜癌和骨癌中以及在血癌诸如白血病和淋巴瘤中已经观察到异常的细胞周期蛋白e活性。此外，细胞周期蛋白e的扩增和/或过表达已被报道为在er阳性her2阴性乳腺癌中对cdk4/6疗法的抗性的潜在机制。同样，细胞周期蛋白a的异常表达与染色体不稳定性和肿瘤增殖相关联，而细胞周期蛋白a的抑制导致肿瘤生长减缓。

3、cdk2活性的抑制是目前未开发的用于治疗癌症和与cdk2活性相关联的其他疾病的治疗方法。尽管付出了巨大的努力，但目前还没有批准的能够普遍抑制cdk2活性或专门抑制cdk2活性的药理学药剂。努力识别此类抑制剂一直具有挑战性，部分是由于两个主要障碍。首先，对cdk2降解的机制仍知之甚少。其次，迄今为止开发的cdk2抑制剂通常缺乏必要的特异性或以其他方式表现出脱靶cdk驱动的毒性。各种cdk之间的序列和结构相似性通常很高，并且cdk结合位点之间的相似性使得大多数cdk2抑制剂的特异性差和/或毒性高。因此，需要cdk2抑制剂，特别是具有药理学上合适的性质并且具有适于制造药物物质和配制对应药物产品的物理特性的cdk2抑制剂。

4、本公开通过提供适用于治疗cdk2介导的病症（诸如乳腺癌和卵巢癌）的药物组合物和方法中的cdk2抑制剂(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式解决了这种巨大的未满足的需求。

技术实现思路

1、在一个方面，本公开提供了n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式。

2、在另一个方面，本公开提供了(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)-吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式。

3、在另一个方面，本公开提供了(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)-吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式a。

4、在另一个方面，本公开提供了药物组合物，其包含(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式a，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。

5、在另一个方面，本公开提供了通过向有需要的受试者施用包含治疗有效量的(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式a的药物组合物来治疗或预防细胞周期蛋白依赖性激酶2（cdk2）介导的病症的方法。

6、在另一个方面，本公开提供了包含(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式a的药物组合物用于治疗或预防细胞周期蛋白依赖性激酶2（cdk2）介导的病症的用途。

7、在另一个方面，本公开提供了(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)-吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式a用于制造用于治疗或预防细胞周期蛋白依赖性激酶2（cdk2）介导的病症的药物的用途。

8、在另一个方面，本公开提供了包含含有(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式a的药物组合物的试剂盒。

9、在另一个方面，本公开提供了用于制备(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式a的方法。

1.一种n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式。

2.一种(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)吡咯烷-1-磺酰胺的结晶形式。

3.根据权利要求2所述的结晶形式，所述结晶形式由粉末x射线衍射图表征，所述粉末x射线衍射图包含一个、两个、三个或四个选自由以下组成的组的峰：8.1±0.2°2θ、13.9±0.2°2θ、16.1±0.2°2θ、16.7±0.2°2θ和22.6±0.2°2θ。

4.根据权利要求3所述的结晶形式，其中所述粉末x射线衍射使用cu辐射进行。

5.根据权利要求3或权利要求4所述的结晶形式，其中所述粉末x射线衍射使用以反射几何形状、45kv的管电压和40ma的灯丝发射操作的bruker d8 advantage衍射仪来进行。

6.根据权利要求3至5中任一项所述的结晶形式，所述结晶形式进一步由差示扫描量热法曲线表征，所述差示扫描量热法曲线包含具有约122℃±5℃的起始温度的熔融吸热。

7.根据权利要求3至5中任一项所述的结晶形式，所述结晶形式进一步由差示扫描量热法曲线表征，所述差示扫描量热法曲线包含具有约128℃±5℃处的峰的熔融吸热。

8.根据权利要求3至5中任一项所述的结晶形式，所述结晶形式进一步由差示扫描量热法曲线表征，所述差示扫描量热法曲线包含具有约122℃±5℃的起始温度和约128℃±5℃处的峰的熔融吸热。

9.根据权利要求6至8中任一项所述的结晶形式，其中所述差示扫描量热法在tainstruments差示扫描量热仪q2000型上进行，其中将样品置于铝盘中并且在氮气下以10℃/分钟的速率加热至300℃的温度。

10.根据权利要求3至9中任一项所述的结晶形式，所述结晶形式进一步由热重分析热谱图表征，其中所述结晶形式从约25℃至约100℃表现出小于约1.0重量%的重量损失。

11.根据权利要求3至10中任一项所述的结晶形式，所述结晶形式进一步由重量蒸气吸附曲线图表征，其中所述结晶形式在25℃±0.1℃下从约0%相对湿度至约80%相对湿度表现出小于约1.0重量%的可逆水分吸收。

12.根据权利要求3至5中任一项所述的结晶形式，其中所述结晶形式进一步由以下表征：

13.根据权利要求3至5中任一项所述的结晶形式，其中所述结晶形式进一步由以下表征：

14.根据权利要求3至5中任一项所述的结晶形式，其中所述结晶形式进一步由以下表征：

15.根据权利要求3至14中任一项所述的结晶形式，所述结晶形式进一步由固态13c nmr谱表征，所述固态13c nmr谱包含一个、两个、三个或四个选自由以下组成的组的峰：161.2±0.2ppm、137.6±0.2ppm、113.1±0.2ppm、72.3±0.2ppm和60.0±0.2ppm。

16.根据权利要求3至15中任一项所述的结晶形式，其中所述结晶形式是结晶无水物。

17.根据权利要求3至16中任一项所述的结晶形式，其中所述结晶形式包含小于5重量%的(s)-n-乙基-3-((9-乙基-2-(((2r,3s)-2-羟基戊-3-基)氨基)-9h-嘌呤-6-基)氨基)-吡咯烷-1-磺酰胺的任何其他结晶形式。

18.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至17中任一项所述的结晶形式，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。

19.一种治疗或预防患有或易患cdk2介导的病症的受试者的cdk2介导的病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至17中任一项所述的结晶形式。

20.根据权利要求1至17中任一项所述的结晶形式用于制造用于治疗或预防cdk2介导的病症的药物的用途。

21.一种试剂盒，所述试剂盒包含单位剂型和标签或包装插页，所述单位剂型包括包含在包装材料内的根据权利要求1至17中任一项所述的结晶形式，所述标签或包装插页指示所述单位剂型能够用于治疗cdk2介导的病症。