上调端粒酶的多核苷酸及其用途和治疗方法与流程

本发明提供一种组合物，其包含一种或多种上调端粒酶的多核苷酸及其使用的方法。

背景技术：

1、端粒酶为一种核糖核蛋白聚合酶，其通过添加端粒重复序列ttaggg来维持端粒末端。端粒酶包含一种蛋白质成分，其具有由端粒酶逆转录酶（telomerase reversetranscriptase，tert）基因编码的逆转录酶活性，以及由端粒酶rna成分（telomerase rnacomponent，terc）基因编码的非编码rna，其作为端粒重复序列的模板。端粒酶的表达与细胞老化相关，因其于出生后的体细胞中通常受到抑制而导致端粒逐渐缩短。体细胞中端粒酶表达的失调可能与肿瘤发生有所关联。小鼠研究显示，在双股断裂处可能发生端粒重复序列的重新合成（de novo synthesis），因而端粒酶亦参与染色体的修复。此外，已发现端粒酶表达的增加与细胞衰老（senescence）及老化（aging）相关，而过度表达已显示可改善特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，ipf）（https://doi.org/10.1083/jcb.202002120）。因此，有需要上调端粒酶的表达，以治疗肺部疾病，并有可能逆转纤维化。

技术实现思路

1、一种医药组合物，其包含治疗有效量的一种或多种上调端粒酶的多核苷酸，其中，所述一种或多种上调端粒酶的多核苷酸的每一个的核苷酸序列与seq id no. 26、seq idno. 29、seq id no. 19、seq id no. 20、seq id no. 21、seq id no. 22、seq id no. 23、seq id no. 24、seq id no. 25、seq id no. 17、seq id no. 27、seq id no. 28、seq idno. 18、seq id no. 30、seq id no. 31、seq id no. 32、seq id no. 33、seq id no. 34、seq id no. 35、seq id no. 36、seq id no. 37、seq id no. 38、seq id no. 39或其组合的相同性为至少约80%、约85%、约90%、约95%或约100%。

2、一种增加受试者中tert、terc或其组合的表达的方法，其包含对所述受试者施用治疗有效量的本发明任一实施例中所述的一种或多种上调端粒酶的多核苷酸。

3、一种治疗受试者的端粒酶相关疾病的方法，其包含增加所述受试者的端粒酶表达的步骤。在一实施例中，增加本发明的受试者的端粒酶表达的步骤包含对所述受试者施用治疗有效量的本发明任一实施例中所述的一种或多种上调端粒酶的多核苷酸。

1.一种医药组合物，其包含一种或多种上调端粒酶的多核苷酸，其中，所述一种或多种上调端粒酶的多核苷酸的每一个的核苷酸序列与seq id no. 26、seq id no. 29、seq idno. 19、seq id no. 20、seq id no. 21、seq id no. 22、seq id no. 23、seq id no. 24、seq id no. 25、seq id no. 17、seq id no. 27、seq id no. 28、seq id no. 18、seq idno. 30、seq id no. 31、seq id no. 32、seq id no. 33、seq id no. 34、seq id no. 35、seq id no. 36、seq id no. 37、seq id no. 38、seq id no. 39或其组合的相同性为至少约80%、约85%、约90%、约95%或约100%。

2.根据权利要求1所述的医药组合物，其中，所述一种或多种上调端粒酶的多核苷酸通过调控一种或多种tert、terc或其组合的反义调控因子的表达量而上调tert、terc或其组合的表达量。

3.根据权利要求2所述的医药组合物，其中，所述tert、terc或其组合的反义rna调控因子的核苷酸序列与aw207347（seq id no. 1）、ai825849（seq id no. 2）、aw136367（seq idno. 3）、ai380754（seq id no. 4）、aw293800（seq id no. 5）、bm695101（seq id no. 6）、cv370609（seq id no. 7）、mg677549（seq id no. 8）、bf802688（seq id no. 9）、aa748707（seq id no. 10）、aa811084（seq id no. 11）、ai824948（seq id no. 12）、aw270031（seqid no. 13）、aw276315（seq id no. 14）、db345416（seq id no. 15）或enst00000666708.1（seq id no. 16）的相同性为至少约80%、约85%、约90%、约95%或约100%。

4.根据权利要求1所述的医药组合物，其中，所述一种或多种上调端粒酶的多核苷酸包含小干扰rna（sirna）、短发夹rna（shrna）、微小rna（mirna）、核酶（ribozyme）、脱氧核酶（deoxyribozyme）、适体（aptamer）或其组合。

5.根据权利要求1所述的医药组合物，其中，所述一种或多种上调端粒酶的多核苷酸包含一种或多种第一上调端粒酶的多核苷酸及一种或多种第二上调端粒酶的多核苷酸，其中，所述一种或多种第一上调端粒酶的多核苷酸的核苷酸序列与seq id no. 26的核苷酸序列的相同性为至少约80%、约85%、约90%、约95%或约100%，以及所述一种或多种第二上调端粒酶的多核苷酸的核苷酸序列与seq id no. 29的相同性为至少约80%、约85%、约90%、约95%或约100%。

6.根据权利要求1所述的医药组合物，进一步包含纳米颗粒，其中，所述纳米颗粒包封所述一种或多种上调端粒酶的多核苷酸。

7.根据权利要求6所述的医药组合物，其中，所述纳米颗粒包含脂质纳米颗粒、聚合物纳米颗粒、脂质-聚合物杂合纳米颗粒、脂质体、外泌体、或病毒或类病毒颗粒。

8.根据权利要求7所述的医药组合物，进一步包含融合蛋白及包装结构域，其中，所述纳米颗粒包含外泌体，其中，所述一种或多种上调端粒酶的多核苷酸融合至所述包装结构域，其中，所述融合蛋白包含融合至包装蛋白的与外泌体相关的跨膜蛋白，其中，所述包装结构域包含ur结构域、l2结构域或其组合，以及其中，所述包装结构域能够与所述包装蛋白结合。

9.根据权利要求8所述的医药组合物，其中，所述一种或多种上调端粒酶的多核苷酸进一步融合至核定位序列sirloin。

10.根据权利要求8所述的医药组合物，其中，所述融合蛋白包含cd63-u1a、cd81-u1a、ptgfrn-u1a或其组合。

11.根据权利要求8所述的医药组合物，其中，所述外泌体进一步包含ago2蛋白或其s387a突变体。

12.根据权利要求8所述的医药组合物，其中，所述外泌体进一步包含经修饰肌费林蛋白的蛋白。

13.根据权利要求12所述的医药组合物，其中，所述经修饰肌费林蛋白的蛋白包含所述肌费林蛋白的蛋白的c2f、c2g或跨膜结构域、或其组合。

14.根据权利要求12所述的医药组合物，其中，所述经修饰肌费林蛋白的蛋白进一步包含连接蛋白43的蛋白或其s368a突变体。

15.根据权利要求8所述的医药组合物，其中，所述外泌体使用基于外泌体的包装与传递系统制备，其包含一种或多种货物rna编码质体及一种或多种融合蛋白编码质体，其中，所述一种或多种货物rna编码质体各自编码融合至所述包装结构域的所述一种或多种上调端粒酶的多核苷酸，以及其中，所述一种或多种融合蛋白编码质体各自编码所述融合蛋白，所述融合蛋白包含融合至所述包装蛋白的与所述外泌体相关的跨膜蛋白。

16.根据权利要求15所述的医药组合物，其中，所述基于外泌体的包装与传递系统进一步包含编码经修饰肌费林蛋白的蛋白、连接蛋白43的蛋白或其s368a突变体、或其组合的质体。

17.一种增加受试者中tert、terc或其组合的表达的方法，其包含对所述受试者施用治疗有效量的如权利要求1所述的医药组合物的步骤。

18.根据权利要求17所述的方法，其中，所述受试者罹患与端粒酶相关的疾病，其包含端粒病、老化相关疾病、细胞衰老相关疾病或其组合。

19.根据权利要求18所述的方法，其中，所述端粒酶相关疾病包含与tert或terc相关的慢性肺部疾病，其包含慢性阻塞性肺病、肺癌或特发性肺纤维化；与tert或terc相关的慢性肝病，其包含肝纤维化或肝硬化；或与tert或terc相关的骨髓衰竭（bmf），其包含先天性角化不良症（dc）或再生不良性贫血。

20.一种治疗受试者的端粒酶相关疾病的方法，其包含对所述受试者施用治疗有效量的根据权利要求1所述的医药组合物的步骤。

21.根据权利要求20所述的方法，其中，所述端粒酶相关疾病包含端粒病、老化相关疾病、细胞衰老相关疾病或其组合。

22.根据权利要求20所述的方法，其中，所述端粒酶相关疾病包含与tert或terc相关的慢性肺部疾病，其包含慢性阻塞性肺病、肺癌或特发性肺纤维化；与tert或terc相关的慢性肝病，其包含肝纤维化或肝硬化；或与tert或terc相关的骨髓衰竭（bmf），其包含先天性角化不良症（dc）或再生不良性贫血。