一株贝莱斯芽孢杆菌RH2及其应用的制作方法
本发明属于农业微生物与绿色生物防治，具体涉及一株贝莱斯芽孢杆菌rh2及其应用。
背景技术：
1、水稻纹枯病是水稻生产中的重要真菌性病害之一，主要由立枯丝核菌（
rhizoctonia solani）侵染引起，可危害水稻叶鞘、叶片及茎秆，造成植株倒伏、结实率下降和产量损失。目前，生产上对水稻纹枯病的防治仍以井冈霉素、噻呋酰胺等化学药剂为主，长期使用可能导致病原菌抗药性增强、田间防效不稳定、农药残留及生态环境压力等问题。根结线虫是重要的植物寄生线虫，可侵染多种作物根系并影响植株正常生长；其生活环境复杂、寄主范围较广，防控难度较大，现有防治措施也面临减量用药和绿色替代需求。因此，开发兼具真菌性病害防治活性和植物寄生线虫防控活性的微生物资源，有利于拓展生防菌剂的作用范围和农业应用场景。
2、现有技术中已公开多株用于水稻纹枯病防治的芽孢杆菌及其制剂，但部分菌株主要针对单一病原菌，或者缺少水稻植株水平的防效验证；另有部分微生物资源表现出抑菌或杀线虫活性，但对水稻纹枯病与根结线虫两类有害生物的兼具活性公开不足。因而，筛选获得一株既能显著抑制立枯丝核菌、降低水稻纹枯病病斑扩展，又能对根结线虫表现出较强毒杀活性的贝莱斯芽孢杆菌，对于丰富水稻绿色防控微生物资源、减少化学农药依赖并开发多功能生防制剂具有重要意义。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一株贝莱斯芽孢杆菌rh2及其应用。
2、为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
3、一株贝莱斯芽孢杆菌rh2，所述贝莱斯芽孢杆菌rh2保藏于中国典型培养物保藏中心（cctcc），分类命名为
bacillus velezensis rh2，保藏编号为cctcc no：m 2026638，保藏日期为2026年04月10日，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。
4、一种所述贝莱斯芽孢杆菌rh2在防治水稻纹枯病和/或根结线虫中的应用。
5、所述水稻纹枯病由立枯丝核菌（
rhizoctonia solani）引起。
6、所述根结线虫优选为根结线虫二龄幼虫。
7、所述的贝莱斯芽孢杆菌rh2在制备防治水稻纹枯病的微生物菌剂和/或防治根结线虫的微生物制剂中的应用。
8、一种防治水稻纹枯病的微生物制剂，所述微生物制剂的活性成分为所述贝莱斯芽孢杆菌rh2的菌体、芽孢、发酵液、发酵上清液或无菌发酵滤液中的一种或几种。
9、优选的，微生物制剂的发酵上清液比例为40%（发酵液上清液：无菌水=40:60）。
10、将贝莱斯芽孢杆菌rh2接种于lb液体培养基中，在25～37℃、160～220 r/min条件下培养24～72 h，获得贝莱斯芽孢杆菌rh2的发酵液；
11、对贝莱斯芽孢杆菌rh2发酵液进行离心和/或过滤，获得发酵上清液或无菌发酵滤液。
12、所述防治水稻纹枯病的微生物制剂用于抑制立枯丝核菌生长，并降低水稻纹枯病病斑扩展程度。
13、一种防治根结线虫的微生物制剂，所述微生物制剂的活性成分为所述贝莱斯芽孢杆菌rh2的菌体、芽孢、发酵液、发酵上清液或无菌发酵滤液中的一种或几种。
14、将贝莱斯芽孢杆菌rh2接种于lb液体培养基中，在25～37℃、160～220 r/min条件下培养24～72 h，获得贝莱斯芽孢杆菌rh2的发酵液；
15、对贝莱斯芽孢杆菌rh2发酵液进行离心和/或过滤，获得发酵上清液或无菌发酵滤液。
16、所述防治根结线虫的微生物制剂用于杀灭根结线虫二龄幼虫。
17、进一步地，所述防治水稻纹枯病的微生物制剂或防治根结线虫的微生物制剂还包括农业上可接受的载体、助剂、保护剂、润湿剂、分散剂、稳定剂、营养物质或有机肥基质中的一种或几种。
18、所述防治水稻纹枯病的微生物制剂或防治根结线虫的微生物制剂中贝莱斯芽孢杆菌rh2的有效活菌含量优选为1×108～1×1010cfu/ml。
19、所述防治水稻纹枯病的微生物制剂或防治根结线虫的微生物制剂的剂型为水剂、悬浮剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、颗粒剂或种子处理剂。
20、一种防治水稻纹枯病的方法，将防治水稻纹枯病的微生物制剂施用于水稻植株或其生长环境。
21、施用方式包括叶面喷施、茎基部喷施、灌根、蘸根、浸种、拌种、土壤撒施或随水冲施。
22、优选地，在水稻纹枯病发生初期采用叶面喷施或茎基部喷施方式施用。
23、水稻植株为水稻种子、秧苗、植株叶面、茎基部；生长环境为根际土壤或稻田水层。
24、防治水稻纹枯病的微生物制剂在水稻分蘖期、拔节期、孕穗期或纹枯病发生初期施用。
25、防治水稻纹枯病的微生物制剂施用可单独进行，也可与常规水肥管理措施配合进行。一种防治根结线虫的方法，防治根结线虫的微生物制剂施用于植物根部或根际土壤。
26、本发明具有以下有益效果：
27、（1）本发明通过平板对峙试验、发酵上清液抑菌试验、水稻盆栽防效试验和根结线虫室内毒杀试验，对贝莱斯芽孢杆菌rh2的生物防治活性进行了验证。平板对峙试验表明，贝莱斯芽孢杆菌rh2对立枯丝核菌的抑制率达到83.0%；发酵上清液比例为40%时，对立枯丝核菌的抑制率达到82.0%。水稻盆栽试验表明，rh2菌悬液和rh2发酵液均能明显抑制水稻纹枯病病斑扩展，防治效果分别为73.5%和77.8%；
28、（2）本发明贝莱斯芽孢杆菌rh2发酵液、发酵上清液和无菌发酵滤液对根结线虫二龄幼虫具有较强毒杀活性，处理6h后的线虫死亡率均达到97%以上；
29、（3）本发明贝莱斯芽孢杆菌rh2菌株培养方便，可采用菌体、芽孢、发酵液、发酵上清液或无菌发酵滤液等多种形式进行制剂开发，为水稻纹枯病与根结线虫的协同绿色防控提供了新的微生物资源。
1.一株贝莱斯芽孢杆菌（bacillus velezensis）rh2，其特征在于：所述贝莱斯芽孢杆菌rh2保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为bacillus velezensis rh2，保藏编号为cctcc no：m 2026638，保藏日期为2026年04月10日，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。
2.一种权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌rh2在防治水稻纹枯病和/或根结线虫中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述水稻纹枯病由立枯丝核菌rhizoctonia solani引起。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述根结线虫为根结线虫二龄幼虫。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述贝莱斯芽孢杆菌rh2在制备防治水稻纹枯病的微生物菌剂和/或防治根结线虫的微生物制剂中的应用。
6.一种防治水稻纹枯病的微生物制剂，其特征在于：所述微生物制剂的活性成分为权利要求1所述贝莱斯芽孢杆菌rh2的菌体、芽孢、发酵液、发酵上清液或无菌发酵滤液中的一种或几种。
7.一种防治根结线虫的微生物制剂，其特征在于：所述微生物制剂的活性成分为权利要求1所述贝莱斯芽孢杆菌rh2的菌体、芽孢、发酵液、发酵上清液或无菌发酵滤液中的一种或几种。
8.一种防治水稻纹枯病的方法，其特征在于：将权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌rh2或权利要求6所述的防治水稻纹枯病微生物制剂施用于水稻植株或其生长环境。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：施用方式为浸种、拌种、蘸根、灌根、叶面喷施、茎基部喷施、土壤撒施或随水冲施。
10.一种防治根结线虫的方法，其特征在于：将权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌rh2或权利要求7所述的防治根结线虫的微生物制剂施用于植物根部或根际土壤。