Hippo信号通路抑制剂在制备角膜内皮修复药物中的应用

本申请涉及生物医药，尤其是涉及hippo信号通路抑制剂在制备角膜内皮修复药物中的应用。

背景技术：

1、角膜内皮细胞(corneal endothelial cell，cec)在维持角膜透明度中发挥着至关重要的作用。cec之间形成的紧密连接zo-1，粘附连接n-cadherin等在房水和基质之间形成了一层物理屏障，这种物理屏障与cec的主动性“液泵”功能共同保持角膜基质的相对脱水状态，从而维持角膜透明。因此，cec在维持我们的正常视力中发挥关键性作用。任何原因导致的cec结构或功能受损，都会引起角膜水肿，混浊，严重者将丧失视力。

2、cec的增殖能力在不同物种间差异显著。家兔、猪、鼠等的cec在体内和体外培养条件下都具有很强的增殖能力，而猫、猴、成年人类的cec在体内则基本不会发生有丝分裂，在体外培养时增殖能力也十分有限。但在强有力的促有丝分裂因素的作用下，成年人的cec可以进入并完成细胞周期，具有再生的潜能。研究认为成年人类的cec虽然具有有丝分裂的潜能，但是细胞周期始终停留在g1期，导致cec无法进入完整的细胞周期后完成增殖。

3、由于成人cecs无法在体内再生，由角膜内皮功能障碍引起的角膜内皮病变已成为最严重的致盲性角膜疾病之一。目前治疗角膜内皮功能障碍最有效的方法是角膜移植。但由于角膜供体极度匮乏，只有不到1.5％的患者可以接受角膜移植，这限制了该疗法的广泛应用。

4、hippo信号通路是一条高度保守的信号通路，由一系列蛋白激酶及转录共激活因子组成，可调节细胞增殖和凋亡，在胚胎发育和组织器官生长发育中至关重要。最近研究表明，hippo信号通路在心脏、肝脏、肌肉等多种组织器官的发育与再生中发挥重要作用。但是关于hippo信号通路在角膜内皮细胞中的作用，尚无研究报道。

技术实现思路

1、基于以上问题，本申请提供了hippo信号通路抑制剂在制备角膜内皮修复药物中的应用。

2、为达到上述发明目的，本发明提供如下的技术方案：

3、本发明提供hippo信号通路抑制剂(包括其在药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、代谢产物)在制备角膜内皮修复药物中的应用。

4、可选的，所述hippo信号通路抑制剂包括mst1/2激酶抑制剂、lats1/2抑制剂、map4ks抑制剂中的至少一种。所述mst1/2激酶抑制剂包括但不限于xmu-mp-1；所述lats1/2激酶抑制剂包括但不限于lats-in-1；所述map4ks抑制剂包括但不限于dmx-5804。

5、本发明还提供yap基因过表达促进剂在制备角膜内皮修复药物中的应用。所述的yap基因过表达促进剂，包括前述hippo信号通路抑制剂。hippo信号通路抑制剂通过抑制yap磷酸化，促进yap入核，本发明发现yap基因过表达可以促进角膜内皮细胞周期进程，促进角膜内皮细胞增殖。

6、本发明还提供角膜内皮修复药物，其包括药理学有效浓度的包含上述hippo信号通路抑制剂或其在药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、代谢产物中的至少一种。

7、本发明中，所述药物的剂型为药剂学上可接受的任意一种剂型。

8、优选地，所述药物剂型为眼用制剂，包括滴眼剂、眼注射用剂、眼膏或眼用凝胶剂。

9、优选地，所述药物还含有药学上可接受的辅料，包括载体、稀释剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、着色剂、ph调节剂、抗氧剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合。

10、另一方面，本发明提供了上述药物在制备促进眼角膜内皮细胞损伤修复、生长、迁移、存活、细胞粘附、增殖和/或分化、细胞周期进程、角膜内皮功能再生、重建和/或成熟的药物或医疗器械中的应用。

11、另一方面，本发明提供了上述药物在制备角膜内皮细胞抗氧化损伤、抗炎、抗凋亡、逆转角膜内皮细胞-间质转化，维持角膜内皮细胞生存微环境稳态的药物或医疗器械中的应用。

12、另一方面，本发明提供了上述药物在制备缓解或治疗角膜内皮损伤、角膜内皮缺失、角膜内皮病变、角膜内皮功能紊乱、角膜内皮细胞功能失代偿的药物或医疗器械中的应用。

13、另一方面，本发明提供了上述药物在制备用于治疗或缓解角膜内皮功能失代偿引起的疼痛、视物模糊、角膜水肿等症状的药物或医疗器械中的应用。

14、另一方面，本发明提供了上述药物在制备角膜内皮植片、人工角膜内皮及人工全层角膜的药物或医疗器械中的应用。

15、另一方面，本发明提供了上述药物通过促进角膜内皮细胞中yap蛋白的入核，从而促进角膜内皮细胞的增殖和功能修复。

16、本发明中，上述药物适用于哺乳动物眼部，包括但不限于人、兔、小鼠、大鼠、豚鼠、猫、狗、牛、羊、猪、猴。

17、本发明还提供了一种促进角膜内皮修复的方法：抑制hippo信号通路和/或促进yap入核，从而促进角膜内皮细胞再生。

18、综上所述，本发明的有益效果在于：本发明提供了hippo信号通路抑制剂在制备角膜内皮修复药物中的应用，研究结果表明，hippo信号通路抑制剂通过抑制yap磷酸化，促进yap入核，从而促进角膜内皮细胞周期进程，促进角膜内皮细胞增殖，且在动物水平上显著改善角膜内皮损伤引起的角膜水肿和角膜浑浊，对角膜内皮细胞的损伤愈合和功能重建有明显促进作用。经动物及细胞实验证实hippo信号通路抑制剂可显著促进角膜内皮细胞再生，为角膜内皮失代偿相关疾病的治疗提供了新的靶点和方案，具有重要的临床应用前景和价值。

1.hippo信号通路抑制剂在制备角膜内皮修复药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述hippo信号通路抑制剂包括mst1/2激酶抑制剂、lats1/2抑制剂、map4ks抑制剂中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述mst1/2激酶抑制剂包括xmu-mp-1；所述lats1/2激酶抑制剂包括lats-in-1；所述map4ks抑制剂包括dmx-5804。

4.yap基因过表达促进剂在制备角膜内皮修复药物中的应用。

5.角膜内皮修复药物，其特征在于，包括药理学有效浓度的hippo信号通路抑制剂或其在药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、代谢产物中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的角膜内皮修复药物，其特征在于：所述药理学有效浓度为0.1nm-1mm。

7.根据权利要求5所述的角膜内皮修复药物，其特征在于：所述药物为药剂学上可接受的任意一种剂型，优选地为眼用制剂，包括滴眼剂、眼注射用剂、眼膏或眼用凝胶剂。

8.根据权利要求5所述的角膜内皮修复药物，其特征在于：所述药物还包括药学上可接受的辅料，包括载体、稀释剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、着色剂、ph调节剂、抗氧剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合。

9.根据权利要求5所述的角膜内皮修复药物在制备促进眼角膜内皮细胞损伤修复、生长、迁移、存活、细胞粘附、增殖和/或分化、细胞周期进程、角膜内皮功能再生、重建和/或成熟的药物或医疗器械中的应用。

10.根据权利要求5所述的角膜内皮修复药物在制备角膜内皮细胞抗氧化损伤、抗炎、抗凋亡、逆转角膜内皮细胞-间质转化，维持角膜内皮细胞生存微环境稳态的药物或医疗器械中的应用。

11.根据权利要求5所述的角膜内皮修复药物在制备缓解或治疗角膜内皮损伤、角膜内皮缺失、角膜内皮病变、角膜内皮功能紊乱、角膜内皮细胞功能失代偿的药物或医疗器械中的应用。

12.根据权利要求5所述的角膜内皮修复药物在制备用于治疗或缓解角膜内皮功能失代偿引起的疼痛、视物模糊、角膜水肿等症状的药物或医疗器械中的应用。

13.根据权利要求5所述的角膜内皮修复药物在制备角膜内皮植片、人工角膜内皮及人工全层角膜的药物或医疗器械中的应用。