RAGE信号通路抑制剂在制备静脉桥衰败防治/治疗药物方向的应用

本申请属于生物医药，具体涉及rage信号通路抑制剂在制备静脉桥衰败防治/治疗药物方向的应用。

背景技术：

1、冠状动脉旁路移植术（cabg）是复杂冠状动脉粥样硬化性心脏病的重要外科治疗方式，大隐静脉仍是常用桥血管。静脉移植物进入动脉循环后，由低压、低剪切力环境转变为高压、高剪切力环境，可发生内皮损伤、炎症细胞募集、外膜成纤维细胞活化、细胞外基质沉积、血管壁重构和内膜增生，最终导致桥血管狭窄、闭塞及远期失效。

2、环吡酮（ciclopirox，cpx），化合名称为6-环己基-1-羟基-4-甲基-2(1h)-吡啶酮，作为羟吡啶酮类的一员，拥有广谱的抗真菌活性，对皮肤癣菌、酵母菌（如念珠菌）、霉菌以及马拉色菌等均有强大的杀灭作用，并且不易产生耐药性。近年来有研究表明，环吡酮具有抑制特发性肺纤维化（ipf）的药物活性。此外，环吡酮作为一种铁螯合剂，环吡酮能抑制多种与肿瘤生长相关的信号通路（如wnt/β-catenin、mtor），并已在kras突变型胰腺导管腺癌的治疗中发挥药用价值。目前还未有报道关于环吡酮应用于移植物衰败的治疗中的报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种环吡酮的新用途，即环吡酮或环吡酮的前体药物在制备预防和/或治疗冠状动脉旁路移植术后静脉桥衰败的药物中的应用。

2、本发明提供了环吡酮或环吡酮的前体药物在制备预防和/或治疗冠状动脉旁路移植术后静脉桥衰败的药物中的应用。

3、优选的，所述状动脉旁路移植术后静脉桥衰败包括以下至少一项适应症：纤维化性重构、内膜增生、管腔狭窄、血流下降、闭塞和远期通畅率下降。

4、优选的，所述纤维化性重构包括细胞外基质沉积和/外膜或血管壁纤维化性重构。

5、优选的，所述外膜或血管壁纤维化性重构包括静脉桥外膜来源成纤维细胞增殖和rage相关pdgfra+或sfrp2hi外膜成纤维细胞活化。

6、优选的，所述药物具有减少pdgfra+α-sma+或pdgfra+rage+细胞和/或抑制rage表达水平的药效。

7、优选的，所述静脉桥包括大隐静脉桥。

8、优选的，所述环吡酮的前体药物包括磷酸环吡酮。

9、本发明提供了一种冠状动脉旁路移植术后静脉桥衰败治疗用药物的筛选方法，包括以下步骤：

10、将待筛选的化合物与人rage晶体结构进行分子对接，经初步筛选，得到候选药物；

11、用所述候选药物处理受炎症刺激的人血管外膜成纤维细胞（hvaf），以所述候选药物对细胞增殖或细胞活性的抑制强度和候选药物与rage靶点的结合强度中至少一项作为评价指标，选择对细胞增殖或细胞活性抑制强度或与rage靶点的结合强度高的候选药物用于静脉桥衰败的治疗。

12、优选的，所述初步筛选的内容包括以下至少一种：对接分数、mm-gbsa结合能、配体应变能、蛋白—配体相互作用指纹、admet特性和结构聚类；

13、所述初步筛选的选择标准为对接分数≤-7、mm-gbsa≤-25和配体应变能≤-10。

14、优选的，所述候选药物的浓度为10~30 μm；

15、人血管外膜成纤维细胞进行炎症刺激的方法采用炎症性蛋白复合物s100a8/a9按80~120 ng/ml的浓度处理人血管外膜成纤维细胞。

16、本发明环吡酮或环吡酮的前体药物在制备预防和/或治疗冠状动脉旁路移植术后静脉桥衰败的药物中的应用。本发明在人晚期静脉桥衰败组织（vgf）中发现sfrp2hi活化成纤维细胞扩增，其胶原纤维组织、ecm组织及tgf-β相关程序增强，且rage信号在该细胞状态中富集。髓系细胞重聚类进一步识别出具有促炎/m1程序的m1亚群；组织学显示spp1+细胞在vgf中增加，细胞通讯分析推断spp1信号主要由m1指向成纤维细胞和部分免疫细胞亚群，提示炎症型巨噬细胞可能参与维持成纤维细胞活化和基质重塑环境。基于rage靶点进行结构基础虚拟筛选和表型验证，筛选得到cpx。cpx能够直接结合rage并抑制其表达，进而抑制人血管外膜成纤维细胞增殖和活化。采用cpx的可注射前药cpx-pom进一步在小鼠静脉桥模型验证，结果表明cpx-pom减轻内膜增生及成纤维细胞相关重构。因此，本发明提出了cpx针对静脉桥衰败这一特定新医疗用途，并明确rage相关成纤维细胞在spp1富集炎症微环境中的病理特征，为cabg静脉桥衰败的治疗提供了新选择。

17、本发明还提供了一种冠状动脉旁路移植术后静脉桥衰败治疗用药物的筛选方法，将待筛选的化合物与人rage晶体结构进行分子对接，经初步筛选，得到候选药物；用所述候选药物处理受炎症刺激的人血管外膜成纤维细胞，以所述候选药物对细胞增殖或细胞活性的抑制强度和候选药物与rage靶点的结合强度中至少一项作为评价指标，选择对细胞增殖或细胞活性抑制强度或与rage靶点的结合强度高的候选药物用于静脉桥衰败的治疗。本发明以rage相关的成纤维细胞的增殖情况以及活化情况以及与rage结合情况评价化合物在静脉桥衰败中的治疗效果。本发明所述筛选方法得到cpx对hvaf增殖的抑制效果最佳，且抑制效果具有药物浓度依赖性。同时所述cpx还具有降低hvaf中rage和α-sma蛋白表达抑制活性，说明cpx能有效抑制hvaf的纤维化和hvaf的活化。此外，还开展了动物水平实验，以fps-zm1作为阳性对照药物，证明cpx不仅具有减轻模型小鼠静脉桥内膜增生和成纤维细胞活化的药效，而且降低pdgfra+α-sma+及pdgfra+rage+细胞比例，同时cpx给药后主要脏器未见明显组织学异常，具有良好的药物安全性。可见，本发明所述筛选方法准确可靠，为大批量候选化合物的筛选提供了标准化评价方法。

1.环吡酮或环吡酮的前体药物在制备预防和/或治疗冠状动脉旁路移植术后静脉桥衰败的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述状动脉旁路移植术后静脉桥衰败包括以下至少一项适应症：纤维化性重构、内膜增生、管腔狭窄、血流下降、闭塞和远期通畅率下降。

3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述纤维化性重构包括细胞外基质沉积、外膜或血管壁纤维化性重构。

4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述外膜或血管壁纤维化性重构包括静脉桥外膜来源成纤维细胞增殖和rage相关pdgfra+或sfrp2hi外膜成纤维细胞活化。

5.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述药物具有减少pdgfra+α-sma+或pdgfra+rage+细胞和/或抑制rage表达水平的药效。

6.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述静脉桥包括大隐静脉桥。

7.根据权利要求1~6中任意一项所述应用，其特征在于，所述环吡酮的前体药物包括磷酸环吡酮。

8.一种冠状动脉旁路移植术后静脉桥衰败治疗用药物的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

9.根据权利要求8所述筛选方法，其特征在于，所述初步筛选的内容包括以下至少一种：对接分数、mm-gbsa结合能、配体应变能、蛋白—配体相互作用指纹、admet特性和结构聚类；

10.根据权利要求8所述筛选方法，其特征在于，所述候选药物的浓度为10~30 μm；