DAXX和/或SETDB2在抗肺纤维化中的应用

本发明属于生物医药，具体涉及daxx和/或setdb2在抗肺纤维化中的应用。

背景技术：

1、肺纤维化是一种以成纤维细胞增殖、细胞外基质过度沉积及肺泡结构破坏为特征的进行性间质性肺病。目前临床一线药物（如吡非尼酮和尼达尼布）虽能延缓肺功能下降，但无法逆转纤维化进程，且常伴随胃肠道反应或肝毒性等副作用。

2、近年研究发现，铁死亡作为一种铁依赖性的脂质过氧化驱动的程序性细胞死亡形式，在肺纤维化病理进程中扮演着重要角色。活化的肺成纤维细胞表现出独特的铁代谢特征，其线粒体形态异常且对铁死亡具有抵抗性；而持续的脂质过氧化应激不仅直接损伤肺泡上皮细胞，还会营造促纤维化的微环境。抑制铁死亡（如使用铁死亡抑制剂fer-1）已被多项研究证实能有效减轻博来霉素诱导的肺纤维化模型中的胶原沉积。

3、daxx（death domain-associated protein，也称dap6、bing2、eap1）最初于1997年被鉴定为与fas死亡结构域相互作用的蛋白，能够激活jnk和细胞凋亡途径。daxx作为转录共抑制因子，通过其sims特异性识别并结合sumo化的转录因子（如ets1、gr、smad4等），从而抑制这些转录因子的活性。这一过程受到pml核小体的动态调控：在pml核小体中，daxx被隔离而失活；当daxx从pml核小体释放并转位至核质时，其转录抑制作用得以发挥。daxx基因突变常见于胰腺神经内分泌肿瘤，与atrx突变共同导致端粒选择性延长（alt）表型。

4、setdb2（set domain bifurcated 2，也称clld8、c13orf4、kmt1f）是setdb家族成员之一。setdb2具有独特的非典型甲基-cpg结合结构域（mbd），与经典mbd不同，setdb2的mbd已失去甲基化dna结合能力，进化为蛋白质-蛋白质相互作用表面。该mbd结构域包含保守的mbd核心和独特的n端延伸区，能够识别并结合c11orf46等蛋白的富半胱氨酸结构域。setdb2通过在组蛋白h3第9位赖氨酸上添加三个甲基（h3k9me3），形成异染色质的表观遗传标志，从而抑制基因转录。这一功能与基因沉默、转座子抑制及基因组稳定性维持密切相关。setdb2在多种生物学过程中可能发挥重要作用，但目前研究仍处于起步阶段。

5、目前尚未有现有技术研究daxx和setdb2在肺纤维化病理进程中的角色。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供daxx和/或setdb2在抗肺纤维化中的应用。

2、为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

3、daxx和/或setdb2在制备抗肺纤维化的药物中的应用。

4、daxx通过以sumo化依赖性方式结合并激活setdb2，setdb2催化tp53启动子区域h3k9me3修饰，抑制tp53转录，进而抑制肺上皮细胞铁死亡，减轻肺纤维化。

5、根据本发明的实施例，还可以对本发明作进一步的优化，以下为优化后形成的技术方案：

6、在其中一个优选的实施例中，在药物中，daxx和/或setdb2过表达。

7、在其中一个优选的实施例中，在药物中，daxx和setdb2共过表达。

8、基于同一发明构思，本发明还要求保护过表达daxx试剂和/或过表达setdb2试剂在制备抗肺纤维化的药物中的应用。

9、在其中一个优选的实施例中，过表达daxx试剂包括daxx过表达载体；过表达setdb2试剂包括setdb2过表达载体。

10、在其中一个优选的实施例中，daxx过表达载体为病毒载体或非病毒载体。

11、在其中一个优选的实施例中，setdb2过表达载体为病毒载体或非病毒载体。

12、在其中一个优选的实施例中，所述病毒载体选自腺相关病毒、慢病毒、腺病毒或逆转录病毒；优先为腺相关病毒。

13、在其中一个优选的实施例中，所述腺相关病毒为aav6、aav9或aav-dj血清型。

14、在其中一个优选的实施例中，过表达daxx试剂为携带daxx编码基因的腺相关病毒。

15、在其中一个优选的实施例中，过表达setdb2试剂为携带setdb2编码基因的腺相关病毒。

16、基于同一发明构思，本发明还要求保护一种药物组合物，包含过表达daxx试剂和/或过表达setdb2试剂以及药学上可接受的辅料。

17、基于同一发明构思，本发明还要求保护一种基因递送工具，包含携带daxx编码基因和/或setdb2编码基因的腺相关病毒。

18、在其中一个优选的实施例中，腺相关病毒以spc启动子驱动。

19、基于同一发明构思，本发明还要求保护过表达daxx试剂和/或过表达setdb2试剂在制备抑制铁死亡的药物中的应用。

20、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

21、1、本发明首次揭示了daxx/setdb2作为铁死亡负调控因子的新机制：本发明首次发现setdb2在肺纤维化中低表达，且daxx以sumo化依赖性方式激活setdb2，填补了setdb2在肺纤维化及铁死亡调控领域的研究空白。

22、2、本发明经过大量的实验发现，daxx与setdb2共过表达具有协同增效作用：本发明通过体内外实验证实，daxx与setdb2的共过表达在抑制肺上皮细胞铁死亡、减轻胶原沉积、降低纤维化标志物（α-sma、col1a1、fapα）表达方面，显著优于二者单独过表达，呈现出协同效应（additive effect）。

23、3、本发明提供了特异性靶向肺泡上皮细胞的基因递送工具：本发明采用spc启动子驱动的aav-6载体，实现了daxx和setdb2在肺泡上皮细胞中的特异性过表达，避免了全身性给药的副作用，具有较高的临床转化潜力。

1.daxx和/或setdb2在制备抗肺纤维化的药物中的应用。

2.过表达daxx试剂和/或过表达setdb2试剂在制备抗肺纤维化的药物中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，过表达daxx试剂包括daxx过表达载体；过表达setdb2试剂包括setdb2过表达载体。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，daxx过表达载体为病毒载体或非病毒载体；setdb2过表达载体为病毒载体或非病毒载体。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述病毒载体选自腺相关病毒、慢病毒、腺病毒或逆转录病毒；优先为腺相关病毒。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述腺相关病毒为aav6、aav9或aav-dj血清型。

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，过表达daxx试剂为携带daxx编码基因的腺相关病毒；过表达setdb2试剂为携带setdb2编码基因的腺相关病毒。

8.一种药物组合物，其特征在于，包含过表达daxx试剂和/或过表达setdb2试剂以及药学上可接受的辅料。

9.一种基因递送工具，其特征在于，包含携带daxx编码基因和/或setdb2编码基因的腺相关病毒。

10.过表达daxx试剂和/或过表达setdb2试剂在制备抑制铁死亡的药物中的应用。