猪SAMD5基因在抗猪圆环病毒2型感染中的应用

本发明属于分子生物学，尤其涉及猪

samd5基因在抗猪圆环病毒2型感染中的应用。

背景技术：

1、猪圆环病毒2型（porcine circovirus type 2, pcv2）属圆环病毒科圆环病毒属，是已知感染哺乳动物的最小病毒之一，其基因组为长约1.77 kb的单股环状dna。pcv2是引发断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎肾病综合征、猪呼吸道疾病综合征等多种猪圆环病毒相关疾病的主要病原体。该病毒于20世纪90年代首次被确认为pcvad的病原，目前已呈全球性分布流行。pcv2不仅直接引起组织器官的炎症损伤，更主要感染宿主免疫细胞，造成免疫抑制，并常与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪肺炎支原体等其他病原混合感染，使病情加重。pcv2基因组虽小，但其复制高度依赖与宿主细胞内多种因子的相互作用。近年来，已鉴定出多个参与pcv2感染与复制的关键宿主因子，如四次跨膜蛋白cd81作为病毒入侵的功能性受体、核转运受体ipo4通过与衣壳蛋白结合促进病毒复制，以及视黄醇结合蛋白rbp4通过选择性自噬降解病毒蛋白而限制病毒复制等。因此，从宿主遗传根源出发，挖掘和鉴定调控pcv2复制的关键宿主因子，不仅有助于阐明病毒的致病机制，更能为开发宿主导向的抗病毒策略和筛选抗病育种靶点提供重要理论基础。

2、samd5（sterile alpha motif domain containing 5）属于含有无菌α基序（sam）结构域的蛋白家族。sam结构域是一段长约70个氨基酸的保守蛋白相互作用基序，广泛存在于信号转导和转录调控蛋白中。samd5蛋白在其n端含有一个sam结构域，该结构域可介导与eph受体酪氨酸激酶家族（如epha5、epha6、ephb1等）的sam结构域之间的相互作用。尽管已有研究报道samd5在多种肿瘤中异常表达，但其具体的生物学功能尚不明确，在病毒感染相关领域的功能迄今亦未见任何报道。

技术实现思路

1、发明目的：本发明的目的是提供一种猪

samd5基因在抗猪圆环病毒2型感染中的应用，包括抑制或消除猪

samd5基因表达的试剂用于制备抗猪圆环病毒2型感染药物，以及抑制或消除猪

samd5基因表达用于抗猪圆环病毒2型分子育种两个方向。

2、技术方案：本发明所述的抑制或消除猪

samd5基因表达的试剂在制备抗猪圆环病毒2型感染药物中的应用。

3、优选的，所述试剂选自sirna、shrna、反义核酸、crispr/cas基因编辑系统、crispri系统、锌指核酸酶系统、talen系统的任一种。

4、优选的，所述应用为制备预防和/或治疗猪圆环病毒2型感染所致疾病的药物中的应用；进一步优选的，猪圆环病毒2型感染所致疾病包括但不限于断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾病综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍。

5、优选的，所述药物为抑制猪圆环病毒2型感染病程中病毒复制的药物。

6、优选的，所述药物以抑制或消除猪

samd5基因表达的试剂作为活性成分，任选地含有药学上可接受的辅料。

7、优选的，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、糖浆剂、散剂、微丸、注射液、粉针剂、输液剂、混悬液、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、喷雾剂、滴眼液、滴耳液、滴鼻液、贴剂、洗剂、栓剂、敷料、雾化溶液、涂膜剂、植入剂、微乳剂、脂质体、纳米粒、口腔速溶膜剂、海绵剂、胶丸剂。

8、本发明所述的抑制或消除猪

samd5基因表达在抗猪圆环病毒2型分子育种中的应用。

9、优选的，所述应用为敲除猪

samd5基因进行抗猪圆环病毒2型分子育种。

10、优选的，所述敲除为基于crispr/cas基因编辑系统进行敲除；进一步优选的，所述基于crispr/cas基因编辑系统进行敲除的靶序列如seq id no：1所示。

11、本发明所述的抑制或消除猪

samd5基因表达在抗猪圆环病毒2型细胞系构建中的应用。

12、优选的，所述应用为敲除猪

samd5基因进行抗猪圆环病毒2型细胞系构建。

13、优选的，所述敲除为基于crispr/cas基因编辑系统进行敲除；进一步优选的，所述基于crispr/cas基因编辑系统进行敲除的靶序列如seq id no：1所示。

14、本发明所述的抑制猪圆环病毒2型复制的方法，步骤为：利用能够抑制或消除宿主细胞或个体猪

samd5基因表达的试剂处理宿主细胞或个体。

15、优选的，所述猪

samd5基因包括：ncbi gene数据库gene id: 100522528对应的编码序列，或与该编码序列具有至少80%序列同一性且具有相同功能的核苷酸序列。

16、有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下显著优点：本发明首次发现并验证了猪

samd5基因与猪圆环病毒2型感染存在关联，敲除猪

samd5基因可以有效抑制猪圆环病毒2型的复制，填补了

samd5在病毒感染领域的功能空白，为培育抗猪圆环病毒2型的基因编辑猪提供了全新的分子靶标。

1.一种抑制或消除猪samd5基因表达的试剂在制备抗猪圆环病毒2型感染药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂选自sirna、shrna、反义核酸、crispr/cas基因编辑系统、crispri系统、锌指核酸酶系统、talen系统的任一种。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为抑制猪圆环病毒2型感染病程中病毒复制的药物。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物以抑制或消除猪samd5基因表达的试剂作为活性成分，任选地含有药学上可接受的辅料。

5.一种抑制或消除猪samd5基因表达在抗猪圆环病毒2型分子育种中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述应用为敲除猪samd5基因进行抗猪圆环病毒2型分子育种。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述敲除为基于crispr/cas基因编辑系统进行敲除。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述基于crispr/cas基因编辑系统进行敲除的靶序列如seq id no：1所示。

9.一种抑制或消除猪samd5基因表达在抗猪圆环病毒2型细胞系构建中的应用。

10.根据权利要求1或6或9所述的应用，其特征在于，所述猪samd5基因包括：ncbi gene数据库gene id: 100522528对应的编码序列，或与该编码序列具有至少80%序列同一性且具有相同功能的核苷酸序列。