一种载虾青素靶向脂质纳泡、制备方法、药物组合物及其应用与流程

本发明属于纳米药物递送领域，具体涉及一种载虾青素靶向脂质纳泡、制备方法、药物组合物及其应用。

背景技术：

1、动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤、血栓形成及血管炎性疾病等心血管疾病，其共同病理基础在于血管内皮功能障碍、氧化应激及慢性炎症反应。目前临床常用药物如他汀类虽有一定疗效，但存在患者依从性差、长期使用副作用明显、对斑块稳定性和血管修复作用有限等问题。

2、虾青素作为一种天然类胡萝卜素，具有极强的自由基清除能力与显著的抗炎、抗氧化及细胞保护作用，在预防和治疗动脉粥样硬化等血管疾病方面展现出良好前景。然而，虾青素在实际应用中仍面临以下关键瓶颈：第一，其脂溶性强、水溶性差，导致口服生物利用度极低；第二，化学稳定性差，易受光、热及氧化环境降解；第三，缺乏主动靶向能力，难以在病变部位有效富集，从而限制其治疗效果。

3、为改善虾青素的递送效率，现有技术中已尝试采用脂质体、聚合物纳米粒等载体系统来递送药物。然而，这些系统多存在以下不足：1是多为实心结构，载药量有限，且药物释放不可控；2是依赖被动靶向（如epr效应），靶向效率低，易被单核吞噬系统清除；3是缺乏针对血管炎症标志物的主动识别能力，难以实现病变区域的精准蓄积。

4、脂质纳泡作为一种具有气体内核的纳米载体，在超声刺激下可实现药物的定点释放，并具有良好的生物相容性和载药潜力，近年来已成为药物递送研究的热点。现有的脂质纳泡技术中，针对虾青素这类脂溶性活性成分的稳定包载与主动靶向递送的一体化体系尚未形成成熟且可规模化的制备工艺。

5、因此，开发一种既能提高虾青素稳定性与生物利用度，又具备主动靶向能力，并能实现可控释放的脂质纳泡具有重要的意义。

技术实现思路

1、本发明旨在解决现有技术中虾青素生物利用度低、稳定性差、缺乏高效靶向递送的问题，尤其针对动脉粥样硬化等血管炎性疾病中靶点表达异质性高、单一靶向覆盖不足的难点，提供一种结构稳定、载药效率高、具备单靶向或双靶向识别能力的载虾青素脂质纳泡体系。

2、为实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：

3、第一方面，本发明提供一种载虾青素的靶向脂质纳泡。

4、所述纳泡包括由成膜材料形成的脂质壳层、包封于脂质壳层内的气体内核和负载于脂质壳层中的药物活性成分虾青素，以及连接于所述脂质壳层外表面的靶向分子；所述靶向分子为能够特异性识别病变血管内皮标志物的抗体。

5、进一步，所述抗体为抗细胞粘附分子抗体，包括抗细胞间黏附分子-1（抗icam-1）的抗体和/或抗血管细胞黏附分子-1（抗vcam-1）的抗体。

6、进一步，所述成膜材料包括脂质材料和功能化磷脂材料。

7、进一步，所述脂质材料选自二棕榈酰磷脂酰胆碱（dppc）、二硬脂酰磷脂酰胆碱（dspc）、氢化大豆磷脂酰胆碱（hspc）中的任一种；所述功能化磷脂材料选自末端为甲氧基、羧基、氨基、马来酰亚胺基或生物素的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇（dspe-peg）衍生物中的任一种。

8、在一些实施例中，所述优选的脂质材料为dppc，优选的功能化磷脂材料为dspe-peg2000-biotin。

9、进一步，所述气体内核包含全氟化碳气体，该气体内核用于定点释放纳泡中的药物活性成分。

10、进一步，所述全氟化碳气体为全氟甲烷、全氟乙烷、全氟丁烷、全氟环丁烷、全氟异丁烷、全氟戊烷、全氟新戊烷中的任一种。

11、在一些实施例中，优选的全氟化碳气体为全氟丙烷。

12、进一步，所述虾青素为全反式构型。

13、进一步，所述脂质纳泡为表面光滑，形状呈球形或近似球形的中空结构。

14、进一步，所述纳泡的直径为：200nm~999nm。

15、进一步，本发明提供一种载虾青素的单靶向脂质纳泡，所述纳泡包括由脂质材料形成的脂质壳层、包封于所述脂质壳层内的气体内核、负载于所述脂质壳层中的药物活性成分虾青素，以及连接于所述脂质壳层外表面的一种抗细胞粘附分子抗体；所述抗体为抗icam-1的抗体或抗vcam-1的抗体。

16、进一步，本发明还提供一种载虾青素的双靶向脂质纳泡，所述纳泡包括由脂质材料形成的脂质壳层、包封于所述脂质壳层内的气体内核、负载于所述脂质壳层中的药物活性成分虾青素，以及连接于所述脂质壳层外表面的两种不同的抗细胞粘附分子抗体；所述两种抗体分别为抗icam-1的抗体和抗vcam-1的抗体。

17、第二方面，本发明提供一种制备所述载虾青素靶向脂质纳泡的方法。

18、所述方法包括以下步骤：

19、s01、将成膜材料与虾青素溶解于有机溶剂中，旋转蒸发除去溶剂后得到负载虾青素的脂质薄膜，即为第一产物；

20、s02、向所述第一产物中加入pbs缓冲液与甘油混合液后于第一温度下加热第一时间，得到得到脂质纳米粒悬浮液，即为第二产物；

21、s03、将第二产物置于密闭容器中，抽真空后进行气体置换，随后机械震荡并离心纯化，得到虾青素脂质纳泡，即为第三产物；

22、s04、向所述第三产物中加入链霉素亲和溶液，于第二温度下孵育第二时间并离心，得到链霉素亲和素化纳泡，即为第四产物；

23、s05、将一种或两种抗细胞粘附分子抗体加入所述第四产物中，于第三温度下孵育第三时间并离心洗涤，得到载虾青素靶向脂质纳泡。

24、进一步，所述成膜材料包括脂质材料和功能化磷脂材料，所述脂质材料与功能化磷脂材料的加入质量比为5:1~6；所述成膜材料与虾青素的加入质量比为6~11：0.035~0.06。

25、在一些实施例中，所述优选的脂质材料与功能化磷脂材料的加入质量比为5：2；所述优选的成膜材料与虾青素加入的质量比为7:0.055。

26、进一步，所述第一温度包括37~50℃，第一时间包括20~50min。

27、在一些实施例中，所述优选的第一温度为 40 ℃，第一时间为 60min。

28、进一步，所述第二温度包括0~25℃，第二时间包括30~60min。

29、在一些实施例中，所述优选的第二温度为4℃，所述第二时间为30min。

30、进一步，所述第三温度包括0~25℃，第三时间包括 30~60min。

31、在一些实施例中，所述优选的第三温度为 4℃，第三时间为 30min。

32、第三方面，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含所述载虾青素靶向脂质纳泡，或通过上述方法制备得到的载虾青素靶向脂质纳泡。

33、进一步，所述药物组合物还包含一种或多种药学上可接受的辅料。

34、进一步，所述辅料包括生理盐水、葡萄糖或冻干保护剂。

35、进一步，所述药物组合物的剂型包括冻干粉剂、注射液、粉针剂或预充式注射剂。

36、第四方面，本发明提供所述载虾青素靶向脂质纳泡及药物组合物的应用。

37、进一步，所述应用包括本发明所述载虾青素靶向脂质纳泡、载虾青素靶向脂质纳泡的制备方法和包含载虾青素靶向脂质纳泡的药物组合物在预防和/或治疗动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤、血栓形成或血管炎性疾病中的应用。

38、有益效果

39、与现有技术相比，本发明至少具有如下有益效果：

40、本发明提供的载虾青素靶向脂质纳泡，通过脂质壳层包封虾青素，显著增强了虾青素的水溶性与稳定性，有效克服了虾青素口服生物利用度低、易受环境降解的缺陷。该纳泡表面修饰有一种或两种抗细胞粘附分子抗体，可特异性识别血管炎症标志物icam-1与vcam-1，实现对病变部位的主动靶向与高效富集，尤其双靶向设计能更好应对血管病变中靶点表达的异质性，提升靶向覆盖范围与结合效率。

41、该体系在功能性上表现出明显优势：实验证实靶向修饰能显著促进虾青素进入炎症细胞内，有效降低细胞内活性氧水平，抗氧化应激效果优于无靶向体系。同时，纳泡内部包封的全氟化碳气体使其具备超声响应特性，可在外部超声触发下实现药物的定点、可控释放，从而进一步提高治疗的精准性并减少全身副作用。

42、综上，本发明成功构建了一个集稳定载药、主动靶向、可控释放于一体的脂质纳泡递送体系。其制备工艺简便、重复性好，易于规模化生产，具有显著的转化潜力，为动脉粥样硬化等血管炎性疾病的防治提供了一种高效、精准且具临床应用前景的纳米药物解决方案。