一种用于防治2型糖尿病的灵芝多糖部位与三萜部位药物组合物及其应用的制作方法

本发明属于中药，涉及一种具有降糖功能的组合药物，具体涉及一种用于防治2型糖尿病的灵芝多糖部位与三萜部位药物组合物及其应用。

背景技术：

1、糖尿病（diabetes mellitus，dm）是由多种遗传和环境因素等原因引起的以血浆葡萄糖升高为主要特征的一组内分泌、代谢性综合征。该疾病主要分为1型、2型和妊娠糖尿病三种类型。病因主要归结为遗传因素和环境因素的共同作用，由于胰岛素分泌不足或胰岛素作用缺陷导致糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱，引起多饮、多尿、多食、体重减轻，严重者可出现酮症酸中毒、高渗性非酮症性糖尿病昏迷和各种感染等急性并发症，以及肾病、视网膜病变、动脉粥样硬化、糖尿病神经病变等慢性并发症。

2、灵芝为多孔菌科真菌赤芝ganoderma lucidum（leyss.ex fr.）karst.或紫芝ganoderma sinense zhao，xu et zhang的干燥子实体。从灵芝的生长周期大致可以分为三个阶段：孢子体、菌丝体、子实体。灵芝宜“心、肝、脾、肺、肾五脏之气”，具有益心气、扶正固本、延年益寿的功效，且“六芝皆无毒”的特性。在民间，灵芝更是被视为“不死草”“仙药”。因此，灵芝在传统中医药领域的应用源远流长，已有2000余年的药用历史。现代研究表明，从灵芝中分离出的各种化合物已超过200种，主要的活性成分有多糖、三萜、甾醇、蛋白质、腺苷等。其中灵芝多糖是灵芝最关键的有效成分之一，在免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖、调血脂等方面具有较好的药理作用。

3、灵芝多糖是一类活性较强、功能丰富的天然多糖类高分子化合物，由多个单糖分子缩合而成，也可能有一些蛋白或肽类结合在糖链上。灵芝多糖结构复杂、种类繁多，主要由α-葡聚糖和β-葡聚糖组成，其中大多数为β-葡聚糖。构成灵芝多糖的单糖及其衍生物多达十几种，最常见的有葡萄糖、果糖、甘露糖、阿拉伯糖等。液体培养的发酵液和固体培养的培养基中有灵芝菌丝分泌的胞外多糖。胞内多糖胞外多糖都是有效多糖。灵芝多糖的药理活性与糖苷键、多糖分子立体结构以及分子量大小有关，这是灵芝多糖区别于淀粉、纤维素等其他多糖之处。研究表明，灵芝多糖具有降血糖、抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、降血脂等药理学作用。

4、灵芝三萜是从灵芝分离得到的毛甾烷型三萜类化合物，大部分灵芝三萜属于四环三萜，相对分子量一般在400～600，多为极性分子，不易挥发。根据结构和官能团的不同，灵芝三萜又分为灵芝酸、灵芝孢子酸、灵芝酸内酯、灵芝酸甲酯、灵芝酮、灵芝醛。灵芝菌丝体中的这些化合物大多数为三萜酸，在c-26位上存在一个羧基，且c-24、c-25位上存在一个双键结构。仅个别化合物在c-26位上为羟基取代，属于三萜醇类物质。灵芝三萜作为灵芝中另外一类重要的活性成分，发挥抗糖尿病作用。研究表明灵芝酸a能够明显地抑制醛糖还原酶的活性，而醛糖还原酶可将葡萄糖转化为山梨糖醇，山梨糖醇的积累可引发糖尿病并发症。灵芝酸能够通过抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶，进而调节肠道菌群、炎症反应改善链脲佐菌素诱导的2型糖尿病。另有研究结果表明灵芝醇b也具有抑制α-葡萄糖苷酶活性，且作用高于抑制餐后血糖水平的α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖。

5、根据《中国2型糖尿病防治指南（2020年版）》，当前在临床治疗糖尿病过程中使用到的药物主要分为口服降糖药以及胰岛素。高血糖的药物治疗多基于纠正导致人类血糖升高的两个主要病理生理改变，即胰岛素抵抗和胰岛素分泌受损。根据作用效果的不同，口服降糖药可分为主要以促进胰岛素分泌为主要作用的药物和通过其他机制降低血糖的药物，前者主要包括磺脲类、格列奈类、二肽基肽酶ⅳ抑制剂，通过其他机制降低血糖的药物主要包括双胍类、噻唑烷二酮类、α-糖苷酶抑制剂和钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂。

6、糖尿病的医学营养治疗和运动治疗是控制t2dm高血糖的基本措施。在饮食和运动不能使血糖控制达标时，应及时采用包括口服药治疗在内的药物治疗。t2dm是一种进展性疾病。在t2dm的自然病程中，胰岛β细胞功能随着病程的延长而逐渐下降，胰岛素抵抗的程度变化不大。因此，随着t2dm病程的进展，对外源性的血糖控制手段的依赖逐渐增大。临床上常需要口服降糖药及口服药物和注射降糖药（胰岛素、胰高糖素样肽-1受体激动剂）间的联合治疗。目前在临床应用上，许多治疗糖尿病的单体药服用后存在许多不良反应和毒副作用，也会因为相关的代谢原因导致肝肾功能不全的人无法使用一些药物。比如临床一线用药二甲双胍就无法适用于肝肾功能不全的病人，长期服用二甲双胍会导致维生素b12水平下降。磺脲类药物以及格列奈类等药物有低血糖的风险。此外，各类单体药物针对的靶点较为单一，经常在t2dm后期需要多种药物联合治疗。不同药物联合使用还会进一步加重肝，肾等器官代谢功能的负担，并且存在潜在的毒副作用与不良反应。因此，亟需开发天然药物来源且毒副作用小的药物。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种用于防治2型糖尿病的灵芝多糖部位与三萜部位药物药物组合物及其应用。针对临床上用于治疗t2dm药物存在不同程度毒副作用或不良反应，后期需要合并用药等劣势，本发明将灵芝多糖与三萜两个部位进行组合，利用灵芝多糖长于降血糖和抗炎，灵芝三萜长于抑制α-葡萄糖苷酶，从而用于降低血糖、减轻炎症发挥多成分协同增效治疗t2dm的整合作用。

2、本发明的目的可以通过如下技术方案实现：

3、第一方面，本发明请求保护一种用于防治糖尿病的药物组合物，该组合物包含灵芝多糖部位和灵芝三萜部位；其中，所述灵芝多糖部位与灵芝三萜部位的质量比为（0.5~2）:1；优选为（1~2）:1。

4、本发明的具体实施方式中，灵芝多糖部位与灵芝三萜部位的质量比具体可以为1:2、1:1、2:1。最优选为1:1和2:1。

5、进一步，所述灵芝多糖部位通过以下方法制备：采用水提醇沉法从灵芝菌丝体中提取粗多糖，并使用sevag法去除蛋白质纯化。

6、本发明的具体实施方式中，取灵芝菌丝体干燥品，粉碎，沸水提取1-3h，重复提取2-4次，合并提取液，减压浓缩，向浓缩提取液中加无水乙醇静置后，收集沉淀冷冻干燥后得到灵芝菌丝体粗多糖，采用sevag法去除多糖中蛋白质，得到纯化的灵芝多糖部位。更具体的，加灵芝菌丝体药材体积8-15倍的水，沸水提取,1-3 h，重复提取2-4次，合并提取液，减压浓缩。浓缩提取液中加入3-5倍体积无水乙醇，搅拌均匀后4℃放置过夜。次日离心（3,000rpm，15 min）并收集沉淀。冷冻干燥后得到灵芝菌丝体粗多糖。

7、进一步，所述灵芝三萜部位通过以下方法制备：采用80%-95%乙醇进行热回流提取从灵芝菌丝体中获得。

8、本发明的具体实施方式中，取灵芝菌丝体干燥品，粉碎，并按照1:10-20（g/ml）的料液比加入80%-95%乙醇，热回流提取0.5-2h，重复提取2-4次。合并提取液，离心取上清并浓缩后，冷冻干燥后即得灵芝三萜部位。

9、进一步，所述药物组合物与药学上可接受的辅料共同制备成药物制剂；所述药物制剂选自软膏剂、搽剂、贴剂、洗剂、溶液剂、散剂、喷雾剂、糖浆剂、栓剂、片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂、纳米包裹、脂质体或胃肠溶缓控释制剂。

10、第二方面，本发明请求保护上述的组合物在制备用于治疗2型糖尿病的药物中的应用。

11、第三方面，本发明请求保护上述的组合物在制备用于降低血糖的药物中的应用。

12、第四方面，本发明请求保护上述的组合物在制备用于降低糖尿病患者炎症反应的药物中的应用。

13、第五方面，本发明请求保护上述的组合物在制备用于抑制α-葡萄糖苷酶的药物中的应用。

14、第六方面，本发明请求保护一种药物，它包含前述的组合物作为活性成分，以及药学上可接受的辅料。

15、中药具有多成分、多途径、多靶点的特点。灵芝多糖与灵芝三萜作为目前研究较多的治疗糖尿病的主要有效成分，其调节的通路与靶点各不相同，两种成分联合使用，符合中药多成分、多靶点协同增效的优点。灵芝多糖主要通过改善胰岛素抵抗、抗炎、抗氧化、调节肠道菌群等途径来改善糖尿病症状，灵芝三萜类成分则对于调节糖代谢的关键酶效果较好，如灵芝三萜对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶等具有良好抑制效果。灵芝多糖与灵芝三萜联用可针对不同靶点发挥降血糖、减轻炎症、抑制α-糖苷酶，协同治疗t2dm，构建一种用于治疗t2dm联合用药的新型治疗方案。

16、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

17、（1）本发明各成分均来自《神农本草经》中属于上品且具有扶正固本作用的天然药物，两种部位配伍联合使用，通过降血糖、抗炎、抑制α-葡萄糖苷酶多途径协同治疗糖尿病的作用。

18、（2）本发明各组合物均由天然药物来源的中药活性部位组成，毒副作用小，成分较为清楚，机理相对明确，在疗效上与阳性对照药接近，且质量可控。

19、（3）本发明两个部位及组合物均无明显毒性，小鼠实验与细胞试验均表现出降低血糖，减轻炎症的治疗效果。

20、（4）体外抑制α-葡萄糖苷酶实验结果表明本发明中灵芝三萜部位能够很好的抑制α-葡萄糖苷酶作用。

21、（5）本发明中各部位可以降低t2dm小鼠的血糖，灵芝多糖部位还可以降低t2dm小鼠血清中炎症因子的水平，具有显著的治疗t2dm效果。

22、（6）本发明中的组合物可以显著回调胰岛素抵抗模型hepg-2细胞的糖消耗降低。