一种用于提高肉牛生长性能的复合微生态制剂及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于复合微生态制剂领域，具体涉及一种用于提高肉牛生长性能的复合微生态制剂及其制备和应用。


背景技术：

2.随着研究的不断深入，研究人员发现微生态制剂对肉牛的健康具有重要意义。具体地，微生态制剂通常包括多种有益菌，而有益菌的胞壁肽聚糖和脂磷壁酸能够刺激肉牛的免疫系统，使巨噬细胞活力增强，从而刺激b细胞产生抗体，提高动物抗病力。进一步地，益生菌还能够通过与病原菌竞争附着于肠上皮细胞，从而有效保护肉牛的肠壁，同时增大细胞间隙，刺激巨噬细胞产生免疫球蛋白a(iga)和免疫球蛋白m(igm)，从而增强肉牛免疫力。特别地，乳酸菌及其胞外代谢产物能够刺激巨噬细胞活性增强，促使其产生抗炎因子，从而提高对病菌的防御能力。
3.中国专利cn201810154588.4公开了“一种用于肉牛日粮中添加的中草药复合微生态饲料添加剂”，所述中草药复合微生态饲料添加剂包括中草药3份、酶制剂1份、益生菌组合物3份、菊粉2份和大豆异黄酮1份，用于改善肉牛的饲料消化率、提高生长性能。
4.再如，中国专利cn202010823853.0公开了“一种提高肉犊牛生产效益的复合微生态制剂及应用”，所述复合微生态制剂包括一株分离得到的可降解反刍动物粗饲料中纤维素和木质素活性强的副地衣芽胞杆菌和另一株分离得到的可降解纤维素、淀粉、蛋白质活性强的解淀粉芽胞杆菌，所述复合微生态制剂可作为畜禽饲用微生态添加剂。
5.上述现有技术均至少存在以下问题：
6.1.上述现有技术以芽孢杆菌和/或中草药制剂为主体，然而芽孢杆菌不含有或含有较少的黏附基因，无法在胃肠道内长期停留，通常在停止饲喂复合益生菌后2～3天内，粪便内益生菌含量明显降低，甚至消失，因此，上述复合益生菌难以持续发挥功效，需长期持续补充；
7.2.现有技术所公开的方案大部分仅限定于属水平，然而，同属的菌株，甚至同种的菌株其益生活性以及益生能力也存在着巨大的差异，因此，菌种及菌株之间存在较大差异。具体地，在乳酸杆菌属水平中，目前饲料添加剂中被允许使用的乳酸杆菌仅包括：嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌和植物乳杆菌，其它乳杆菌尚未进入使用目录，因此，只标明“乳杆菌”不符合国家标准。进一步地，在种水平中，同种益生菌的不同菌株之间也存在较大差异，这是由于不同菌株含有或表达不同的功能基因，可发挥不同的益生功效。
8.另外，牛链球菌等产酸菌的代谢产物为d型乳酸(右旋乳酸)，由于哺乳动物缺乏特异的代谢d型乳酸的酶而导致其积累，从而易引起牛瘤胃酸中毒。由于乳酸菌也为产酸菌的一类，因此，在实际应用当中，大部分养殖人员认为乳酸菌易引起肉牛瘤胃酸中毒，在实践中养殖人员会减少甚至避免使用乳酸菌。


技术实现要素：

9.为解决现有技术存在的问题，本技术人经过锐意研究，结合肉牛瘤胃及肠道内菌群多样性特点，将多种特定的乳酸菌及其代谢产物复配制成复合微生态制剂，所述复合微生态制剂添加于肉牛饲料中，可随饲料定植于肉牛的胃肠道内，并持续调节肉牛胃肠道菌群环境，增加肉牛胃肠道内有益菌含量，提高肉牛对饲料的消化利用率，提高肉牛生长性能。
10.本技术的目的是通过以下技术方案实现的：
11.一种提高肉牛生长性能的复合微生态制剂，所述复合微生态制剂包括植物乳杆菌sci-01 菌剂、植物乳杆菌sci-02菌剂和乳酸片球菌pa-19菌剂，其中，所述植物乳杆菌sci-01菌剂由植物乳杆菌sci-01发酵而得，所述植物乳杆菌sci-02菌剂由植物乳杆菌sci-02发酵而得，所述乳酸片球菌pa-19菌剂由乳酸片球菌pa-19发酵而得，即，所述复合微生态制剂包括植物乳杆菌sci-01、植物乳杆菌sci-02、乳酸片球菌pa-19及上述各乳酸菌的发酵代谢产物。
12.在本技术中，所述植物乳杆菌sci-01选自内蒙古、甘肃、四川、新疆、青海、西藏等地区自然发酵食品中分离得到的130株植物乳杆菌，经过筛选得到的耐酸性较强菌株，已于2015年12月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称cgmcc)，保藏号cgmcc no.11930，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路 1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，分类命名为植物乳杆菌 (lactobacillus plantarum)。
13.所述植物乳杆菌sci-01具有较强的耐酸特性(耐受ph3.0)以及良好的生长性，并且，所述植物乳杆菌sci-01能够很好的定殖于动物胃肠道，可有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、志贺氏菌、单胞李斯特氏菌的生长和繁殖。
14.在本技术中，所述植物乳杆菌sci-02选自内蒙古、甘肃、四川、新疆、青海、西藏等地区自然发酵食品中分离得到的130株植物乳杆菌，经过筛选得到的耐酸性较强菌株，已于2015年12月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称cgmcc)，保藏号cgmcc no.11931，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路 1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，分类命名为植物乳杆菌 (lactobacillus plantarum)。
15.所述植物乳杆菌sci-02具有较强的耐酸特性(耐受ph3.0)以及良好的生长性，并且，所述植物乳杆菌sci-02产酸速度快，可有效抑制真菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、单胞李斯特氏菌的生长和繁殖。
16.在本技术中，所述乳酸片球菌pa-19于2016年分离自布里亚特共和国顿金斯克区的奶酪，已于2020年05月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称 cgmcc)，保藏号为cgmcc no.19881，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3 号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，分类命名为乳酸片球菌(pediococcusacidilactici)。
17.所述乳酸片球菌pa-19具有较强的耐酸、耐高温性能，该菌株在模拟肠液(ph8.0)、胃液(ph2.5)中具有较高存活率，适合中高温发酵。并且，该菌株可通过核糖体合成机制产生乳酸片球菌素等具有抑菌特性的小分子多肽，乳酸片球菌素可使病原微生物的细胞膜上形成特异空洞，可导致病原微生物内部无机磷酸盐离子、钾离子及氨基酸的流失，最终导致病原微生物丧失细胞质子驱动势，无法合成atp，从而死亡。进一步地，所述乳酸片球菌pa
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19在ph＝2～9范围内都表现出抑菌效果，尤其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、藤黄微球菌等常见病原微生物的抑制作用明显。
18.在本技术中，基于所述复合微生态制剂的总重量，所述复合微生态制剂中所述植物乳杆菌sci-01、所述植物乳杆菌sci-02与所述乳酸片球菌pa-19的总活菌数≥2.0
×
109cfu/g，所述总活菌数为各乳酸菌活菌数量之和。
19.进一步地，所述植物乳杆菌sci-01菌剂、所述植物乳杆菌sci-02菌剂与乳酸片球菌 pa-19菌剂的重量比为所述植物乳杆菌sci-01菌剂的重量:所述植物乳杆菌sci-02菌剂的重量:乳酸片球菌pa-19菌剂的重量＝(1-3):(1-3):(1-3)。
20.优选地，所述植物乳杆菌sci-01制剂、所述植物乳杆菌sci-02制剂与所述乳酸片球菌 pa-19制剂的重量比为1:1:2。
21.本技术还提供一种制备上述提高肉牛生长性能的复合微生态制剂的方法，所述方法包括如下步骤：
22.步骤1，制备植物乳杆菌sci-01菌剂、植物乳杆菌sci-02菌剂和乳酸片球菌pa-19菌剂；
23.步骤2，将步骤1制得的所述植物乳杆菌sci-01菌剂、所述植物乳杆菌sci-02菌剂和所述乳酸片球菌pa-19菌剂复配混合。
24.在本技术中，步骤1具体包括：
25.步骤1-1，分别取一环活化后的植物乳杆菌sci-01、植物乳杆菌sci-02、乳酸片球菌 pa-19的斜面菌体，分别接种至mrs培养基中培养，得到相应的一级种子液；
26.步骤1-2，将步骤1-1得到的一级种子液分别转接入另一组mrs培养基进行二次活化，得二级种子液；
27.步骤1-3，将步骤1-2获得的二级种子液分别接入到对应的发酵罐培养基中培养，分别得到植物乳杆菌sci-01最终发酵液、植物乳杆菌sci-02最终发酵液和乳酸片球菌pa-19最终发酵液；
28.步骤1-4，将步骤1-3获得的最终发酵液分别离心收集各菌株对应的菌体；
29.步骤1-5，向步骤1-4获得的菌体中分别添加保护剂溶液，混匀获得菌悬液；
30.步骤1-6，将步骤1-5获得的菌悬液冷冻干燥，分别得到植物乳杆菌sci-01菌剂、植物乳杆菌sci-02菌剂和乳酸片球菌pa-19菌剂。
31.可选地，在所述植物乳杆菌sci-01的最终发酵液中，所述植物乳杆菌sci-01的活菌数达10
10
cfu/ml以上，在所述植物乳杆菌sci-02的最终发酵液中，所述植物乳杆菌sci-02的活菌数达10
10
cfu/ml以上，在所述乳酸片球菌pa-19的最终发酵液中，所述乳酸片球菌pa
‑ꢀ
19的活菌数达到10
10
cfu/ml以上。
32.可选地，基于所述保护剂溶液的总体积，所述保护剂溶液包括如下配比的组分：脱脂乳粉30～35g/l，脱盐乳清粉15～20g/l，工业海藻糖15～20g/l，维生素c 3～4g/l，卵磷脂 0.05～0.08g/l，余量为蒸馏水。
33.在本技术中，步骤2具体包括：
34.将步骤1获得的所述植物乳杆菌sci-01菌剂、植物乳杆菌sci-02菌剂与乳酸片球菌 pa-19菌剂按照预设比例进行混合，并加入稀释载体进行复配。
35.可选地，所述稀释载体为脱脂乳粉。
36.在本技术一种可实现的方式中，所述制备上述提高肉牛生长性能的复合微生态制剂的方法包括：
37.分别取一环活化后的植物乳杆菌sci-01的斜面菌体、植物乳杆菌sci-02的斜面菌体和乳酸片球菌pa-19的斜面菌体，接种至相应的mrs培养基中，在温度为33～37℃，转速为 50～100rpm条件下培养18～24h，分别得到各菌株对应的一级种子液；
38.将培养所得的一级种子液分别按接种量的3％～10％(v/v)，各自转接入另一mrs培养基进行二次活化，活化时间为18～24h，得二级种子液；
39.将培养所得二级种子液分别按照接种量的3％～10％(v/v)，各自接入到对应的发酵罐培养基中，在温度为33～37℃，转速为50～100rpm，通风量为0.3～1l/min，发酵全程发酵液ph 值保持在5.6～6.2条件下培养8～12小时，分别得到植物乳杆菌sci-01、植物乳杆菌sci
‑ꢀ
02、乳酸片球菌pa-19最终发酵液，其中，基于所述发酵罐培养基的总体积，所述发酵罐培养基包括如下配比的组分：蔗糖50～80g/l，酵母粉20～40g/l，大豆蛋白胨8～20g/l， mgso4·
7h2o 1.5～2.0g/l，mnso4·
5h2o 0.08～0.12g/l，吐温-80 0.8～1.0g/l，余量为水，体系ph＝7.0；
40.将所得各最终发酵液分别在5000～12000rpm，5～15min条件下离心收集相应菌体；
41.向经离心后的植物乳杆菌sci-01的菌体、植物乳杆菌sci-02的菌体以及乳酸片球菌 pa-19的菌体中分别添加保护剂溶液，混匀后分别获得各菌株对应的菌悬液，其中，菌体与保护剂溶液重量比为菌体的重量:保护剂溶液的重量＝1:(5～10)的比例；
42.将所得的过程中菌悬液经冷冻干燥，分别得到植物乳杆菌sci-01菌剂、植物乳杆菌 sci-02菌剂、乳酸片球菌pa-19菌剂；
43.将所述植物乳杆菌sci-01菌剂、植物乳杆菌sci-02菌剂和所述乳酸片球菌pa-19菌剂按预设比例混合，并加入脱脂乳粉进行复配，基于所述复合微生态制剂的总重量，在所述复合微生态制剂中，所述植物乳杆菌sci-01的活菌数为2
×
109cfu/g，所述植物乳杆菌sci
‑ꢀ
02的活菌数为4
×
109cfu/g，所述乳酸片球菌pa-19的活菌数为1
×
10
10
cfu/g。
44.在本技术中，所述方法还可以包括：
45.将步骤2制得的复合微生态制剂经粉末包装机充氮气填充分装，可选地，分装规格为 1kg/袋。
46.本技术还提供前述复合微生态制剂用于制备提高肉牛生长性能添加剂的用途。
47.可选地，所述复合微生态制剂添加于每头肉牛的基础日粮中。
48.进一步地，所述复合微生态制剂的添加量为80g/头/天。
49.与现有技术相比，本技术提供的复合微生态制剂针对肉牛瘤胃环境及肠道菌群多样性特点，由众多乳酸菌中特异性筛选到多株乳酸菌株，进而将植物乳杆菌sci-01、所述植物乳杆菌sci-02与乳酸片球菌pa-19及其发酵产物按照特定配比进行复合，获得全乳酸菌组分的复合微生态制剂，该复合微生态制剂特别适用于各个生长阶段的肉牛，包括犊牛和成年牛，从而弥补现有微生态制剂对犊牛生长性能无显著影响的缺失。
50.本技术所述复合微生态制剂可添加于肉牛饲料中，随牛饲料进入肉牛体内，并定植于肉牛体的胃肠道，从而有效地调节肉牛胃肠道菌群环境，增加有益菌含量，提高肉牛对饲料的消化利用率，提高肉牛生长性能。
51.特别地，相比于芽孢杆菌属，本技术提供的复合微生态制剂具有肠壁粘附能力，能够与机体肠上皮细胞通过生物化学作用产生特异性粘连，从而与肠粘膜细胞紧密结合，即在肠粘膜表面定植占位，并持续发挥益生功效，对于瘤胃发育尚不完全的犊牛也能够明显提高肉牛的生长性能。
52.进一步地，乳酸菌虽作为益生菌的重要组成部分，但并不是所有乳酸菌均为益生菌，如使用较为广泛的屎肠球菌、粪肠球菌为条件致病菌，含有较多的致病基因，易引起尿路感染等疾病，且极易形成耐药性，进一步形成“超级细菌”，由于其致病条件尚不明确，对于部分受试显示有益作用，对于另一部分受试则显示致病作用。而本技术提供的复合微生态制剂所选用的三株乳酸菌则均为具有特异益生作用的益生菌，并且，该三株菌及代谢产物在复配后可协同增益，对各生长阶段的肉牛均能明显提高生长性能。
53.不受限于任何理论的束缚，本技术人认为，本技术提供的复合微生态制剂中各组分协同作用，促进肉牛生长，提高肉牛的生长性能，具体地：
54.本技术提供的复合微生态制剂中所选用的乳酸菌能够在肉牛体内将其所采食的结构复杂、分子量较大的蛋白质降解为利于胃肠消化吸收的小分子肽和游离氨基酸，从而增强肉牛蛋白质合成能力。
55.并且，该复合微生态制剂的体内代谢产物包括多种维生素(如b族维生素、烟酸、泛酸等)，所产生的维生素能够促进肉牛健康生长。
56.进一步地，所述复合微生态制剂能够促进微量元素如钙、铁、锌等的吸收，进一步有助于肉牛的生长。
57.同时，所述复合微生态制剂中的各乳酸菌及其代谢产物能够激活肉牛体内的巨噬细胞、 b淋巴细胞和nk细胞，从而增加il-1、il-2、il-6、il-5、tnf-α等细胞因子的产生量，提高机体免疫能力。
58.进一步的，所述复合微生态制剂中各乳酸菌的代谢产物主要为l型乳酸(左旋乳酸)，所述l型乳酸可提高肉牛瘤胃乳酸利用菌(如：新月形单胞菌、埃氏巨型球菌以及向碱性韦荣氏球菌)的含量，从而提高瘤胃ph值，降低瘤胃酸中毒现象，并且，所述乳酸利用菌可分解乳酸并产生淀粉降解酶、蛋白质降解酶等多种物质。
59.更进一步地，所述复合微生态制剂中代谢产生的乳酸具有较好的生物相容性，能够直接被哺乳动物机体吸收并参与代谢，不会在牛瘤胃中大量停留，进一步避免瘤胃酸中毒现象。
60.综上可见，本技术提供的复合微生态制剂依托三株具有特有基因的菌株产生的有益代谢产物，产量高、活性好，具有优异的先进性和实用性。
61.特别地，所述植物乳杆菌sci-02具有较快的产酸速率，可迅速降低肠道内ph值，抑制真菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等致病菌的生长和繁殖；所述植物乳杆菌sci-01具有较强的肠道定植特性，可长时间的发挥益生功效，并抑制致病菌生长；所述乳酸片球菌 pa-19具有较强的酸碱耐受性，可在ph＝2-9之间发挥抑菌功效，提升胃肠道有益菌含量。
附图说明
62.图1示出小公牛增重量；
63.图2示出小公牛平均日增重；
64.图3示出大公牛增重量；
65.图4示出大公牛平均日增重。
66.图5示出肉牛平均日增重。
67.图6示出肉牛平均日增重。
具体实施方式
68.这里将详细地对示例性实施例进行说明，其示例表示在附图中。下面的描述涉及附图时，除非另有表示，不同附图中的相同数字表示相同或相似的要素。以下示例性实施例中所描述的实施方式并不代表与本发明相一致的所有实施方式。相反，它们仅是与如所附权利要求书中所详述的、本发明的一些方面相一致方法的例子。
69.实施例
70.实施例1植物乳杆菌sci-01菌剂、植物乳杆菌sci-02菌剂以及乳酸片球菌pa-19菌剂的制备
71.以下以制备植物乳杆菌sci-01菌剂为例说明植物乳杆菌sci-01菌剂、植物乳杆菌sci
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02菌剂以及乳酸片球菌pa-19菌剂的制备方法，在本技术中，三种菌剂的制备方法相同，区别仅在于各工艺步骤的具体参数可根据各菌株的特性而灵活调整，但是，调整幅度本技术说明书限定的范围为限。
72.具体制备方法为：
73.取一环活化后的植物乳杆菌sci-01的斜面菌体，接种至mrs培养基中，在温度为 33～37℃，转速为50～100rpm条件下培养18～24h，得到植物乳杆菌sci-01一级种子液；
74.将所述植物乳杆菌sci-01一级种子液转接入另一mrs培养基进行二次活化得植物乳杆菌sci-01二级种子液，基于所述mrs培养基的体积，所述植物乳杆菌sci-01一级种子液的接种量3％～10％(v/v)，二次活化时间为18～24h；
75.将植物乳杆菌sci-01二级种子液接入发酵罐培养基中培养8～12小时得到植物乳杆菌 sci-0 1最终发酵液，基于所发酵罐培养基的体积，所述植物乳杆菌sci-01二级种子液的接种量为3％～10％(v/v)，培养温度为33～37℃，转速为50～100rpm，通风量为0.3～1l/min，发酵全程调节发酵液的ph值保持于5.6～6.2，植物乳杆菌sci-01最终发酵液中植物乳杆菌 sci-01各活菌数达到10
10
cfu/ml以上，其中，基于所述发酵罐培养基的总体积，发酵罐培养基包括：蔗糖50～80g/l，酵母粉20～40g/l，大豆蛋白胨8～20g/l，mgso4·
7h2o 1.5～2.0g/l，mnso4·
5h2o 0.08～0.12g/l，吐温-80 0.8～1.0g/l，余量为水，体系ph＝7.0；
76.将所述植物乳杆菌sci-01二级种子液在5000～12000rpm下离心5～15min，收集植物乳杆菌sci-01菌体；
77.向经离心所得植物乳杆菌sci-01中按照各自菌体与保护剂溶液质量比1:(5～10)的比例添加保护剂溶液，混匀获得菌悬液，将菌悬液经冷冻干燥，得到植物乳杆菌sci-01菌剂。
78.在本实施例中，基于所述保护剂溶液的总体积，所述保护剂溶液包括如下配比的组分：脱脂乳粉30～35g/l，脱盐乳清粉15～20g/l，工业海藻糖15～20g/l，维生素c 3～4g/l，卵磷脂0.05～0.08g/l，余量为蒸馏水。
79.在本实施例中，所述植物乳杆菌sci-02菌剂以及乳酸片球菌pa-19菌剂的制备方法与所述植物乳杆菌sci-01菌剂的制备方法相同，优选地，各工艺流程的工艺参数也相同，区别仅在于所使用的菌株不同。
80.实施例2复合微生态制剂的制备
81.将实施例1制备的植物乳杆菌sci-01菌剂、植物乳杆菌sci-02菌剂与乳酸片球菌pa
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19菌剂按重量比为植物乳杆菌sci-01菌剂的重量:植物乳杆菌sci-02菌剂的重量:乳酸片球菌pa-19菌剂的重量＝1:1:2混合后，加入稀释载体脱脂乳粉进行复配，制得复合微生态制剂。
82.在本实例中，所述复合微生态制剂的规格有三种，基于所述复合微生态制剂的总重量，三种规格分别为，活菌总数为2
×
109cfu/g、4
×
109cfu/g和1
×
10
10
cfu/g，在本实例中，所述活菌总数为复合微生态制剂中植物乳杆菌sci-01、植物乳杆菌sci-02与乳酸片球菌pa-19活菌数量之和。
83.在本实例中，三种规格的复合微生态制剂分别经粉末包装机充氮气填充将复合微生态制剂进行分装，单包规格为1kg/袋。
84.实验例
85.实验例1复合微生态制剂对肉牛生长性能的影响
86.1.实验样本
87.本实验例选用西门塔尔杂交肉牛进行实验，其中，
88.小公牛选取300头，其中，小公牛实验组150头，小公牛对照组150头；
89.大公牛选取360头，其中，大公牛实验组180头，大公牛对照组180头。
90.小公牛实验组以及大公牛实验组均将实施例2制备的复合微生态制剂添加于上述肉牛的基础日粮中，小公牛实验组以及大公牛实验组的添加量均为80g/头/天，每日早晨喂食。
91.小公牛对照组与大公牛对照组与相应实验组的区别仅为不添加所述复合微生态制剂。
92.2.具体实验方法
93.肉牛增重量统计：在实验前、后抽取实验头数的10％进行称重。
94.3.实验结果
95.(1)小公牛增重量统计
96.小公牛增重结果如图1所示，如图1可知，实验进行30天的数据如下：
97.实验组小公牛的平均体重由实验前的367.43kg/头增长为403.50kg/头，平均增重36.07 kg/头，基于此，可算得实验组小公牛平均日增重1.2kg/d。
98.对照组小公牛的平均体重由实验前的274.50kg/头增长为300.75kg/头，平均增重26.25 kg/头，基于此，可算得对照组小公牛平均日增重0.86kg/d/头。
99.实验组小公牛的平均日增重与对照组小公牛的平均日增重的结果展示于图2，由图2可知，在实验30天后，实验组小公牛的平均增重量比对照组小公牛高9.82kg/头(p＝0.05)，平均日增重高0.33kg/d/头(p＝0.05)。
100.(2)大公牛增重量统计
101.大公牛增重结果如图3所示，如图3可知，实验进行30天的数据如下：
102.实验组大公牛的平均体重由实验前的559.75kg/头，实验后为583.5kg/头，增重量为 23.75kg/头，平均日增重0.79kg/d/头。
103.对照组实验前的平均体重为540.86kg/头，实验后为558.43kg/头，增重17.57kg/头，平均日增重0.59kg/d/头。
104.实验组大公牛的平均日增重与对照组大公牛的平均日增重的结果展示于图4，由图4可知，在实验30天后，实验组大公牛增重量比对照组高6.18kg/头，平均日增重高0.21kg/d/ 头。
105.上述实验例的结果表明，小公牛实验组以及大公牛实验组的肉牛日常生理状况无任何差异，表明实验组小公牛以及大公牛在表观上无副作用；在提高肉牛生长性能方面，实验组肉牛平均日增重显著高于对照组。
106.实验例2饲喂复合微生态制剂与单菌株植物乳杆菌对肉牛生产性能的影响
107.1.实验样本
108.本实验例选用西门塔尔杂交肉牛进行实验，共90头，其中，
109.实验组45头，对照组45头，每头体重约480kg。
110.2.具体实验方法
111.实验组饲喂本技术实施例2制备的复合微生态制剂，对照组饲喂本技术实施例1制得的单菌株植物乳杆菌sci-01菌剂，其中，实验组所使用复合微生态制剂的活菌数为2
×
10
9 cfu/g，对照组所使用的植物乳杆菌sci-01菌剂中活菌数为2.5
×
109cfu/g。
112.实验组与对照组两者添加量相同。
113.肉牛增重量统计：在实验过程中不同时间点抽取实验头数的30％进行称重统计。
114.3.实验结果
115.(1)肉牛增重量统计
116.肉牛增重结果如图5所示，实验进行30天的数据如下：
117.实验组肉牛的平均体重由实验前的483.65kg/头增长为511.55kg/头，平均增重27.90kg/ 头，基于此，可算得实验组肉牛平均日增重0.93kg/d。
118.对照组肉牛的平均体重由实验前的469.45kg/头增长为494.35kg/头，平均增重24.90kg/ 头，基于此，可算得对照组肉牛平均日增重0.83kg/d/头。
119.实验组肉牛的平均日增重与对照组肉牛的平均日增重的结果展示于图6，由图6可知，在实验30天后，实验组肉牛的平均增重量比对照组小公牛高3kg/头，平均日增重高 0.1kg/d/头。
120.不受任何理论束缚，本技术人认为，本技术提供的复合微生态制剂具有良好的耐酸性、人工胃液、人工消化液耐受性、胆盐耐受性、在肠道有凝集作用(自凝集和它凝集)及抑制常见肠道致病菌生长特性，能够在动物胃肠道中定植并繁殖，可改善机体内的微生态环境，补充有益菌含量，提升饲料的消化利用率，所述复合微生态制剂中各特定乳酸菌所产生的乳酸能够提升瘤胃内乳酸利用菌含量，降低酸中毒风险；降低肠道内ph值，抑制霉菌等致病菌生长。
121.进一步地，所述复合微生态制剂在扩培过程中产生的乳酸菌代谢产物含有苯乳酸、四羟基苯乳酸等广谱天然抗菌物质，可有效抑制甚至杀死肠道致病菌，从而提升有益菌含量，增强肉牛体抗力。
122.以上结合具体实施方式和范例性实例对本技术进行了详细说明，不过这些说明并不能理解为对本技术的限制。本领域技术人员理解，在不偏离本技术精神和范围的情况下，可以对本技术技术方案及其实施方式进行多种等价替换、修饰或改进，这些均落入本技术的范围内。本技术的保护范围以所附权利要求为准。