一种从Raffaelealauricola中提取对苯二甲酸二丁酯的方法

技术特征：
1.一种从raffaelea lauricola中提取对苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将raffaelea lauricola活化后，取菌块接种到pdb培养基中，在160～180 r/min、20~28℃条件下连续培养5~10天，按15wt%~20wt%接种量转接到大米培养基中，继续在20～28℃条件下静置培养28～40天，得到菌丝体；2）将步骤1）得到的菌丝体在35~40℃下干燥后研磨成粉状，用1~2倍体积乙酸乙酯浸泡12~24小时，超声40~60分钟，收集萃取液，残渣中再加入菌丝体1~2倍体积的乙酸乙酯，超声40~60分钟，收集萃取液，重复以上步骤，共得到三份萃取液合并浓缩得到粗提物浸膏；3）将粗提物浸膏用氯仿或二氯甲烷溶解，然后用反相硅胶c
18
进行拌样，干法装柱，以甲醇：水体积比为1:9-9:1梯度洗脱，收集甲醇：水体积比为9:1部分洗脱液，旋蒸浓缩得组分a；4）用1倍体积的氯仿溶解组分a，过200-300 目硅胶柱，石油醚：乙酸乙酯体积比为30:1 开始梯度洗脱，收集石油醚：乙酸乙酯体积比为10:1 部分洗脱液，旋蒸浓缩得浸膏，再过200-300目硅胶柱，以石油醚：氯仿体积比为8:1开始梯度洗脱，收集石油醚:氯仿体积比为2:1部分洗脱液，旋转蒸发得到白色粉末状，即对苯二甲酸二丁酯。2.根据权利要求1所述的从raffaelea lauricola中提取对苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：步骤1）中菌块的大小为0.5
×
0.5 cm，接种量为4块。3.根据权利要求1所述的从raffaelea lauricola中提取对苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：步骤1）中大米培养基组成为：大米100 g，木屑10 g，加入纯水120 ml；经121℃高压灭菌20 min后使用。4.根据权利要求1所述的从raffaelea lauricola中提取对苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：步骤2）中超声的功率为400 w，频率为35 khz。5.根据权利要求1所述的从raffaelea lauricola中提取对苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：步骤3）中使用的反相硅胶c
18
粒径40-60 μm，孔径120
å
。6.根据权利要求1所述的一种从raffaelea lauricola中提取藿烷型三萜类化合物的方法，其特征在于：所述步骤3）中梯度洗脱比例为甲醇：水体积比为1:9, 2:8, 3:7, 4:6, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1。7.根据权利要求1所述的从raffaelea lauricola中提取对苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：步骤4）的梯度洗脱中石油醚：乙酸乙酯体积比依次为30:1, 20:1, 10:1, 8:1, 6:1, 3:1；石油醚：氯仿体积比依次为8:1, 6:1, 4:1, 2:1。

技术总结
本发明公开了一种从Raffaelea lauricola中提取对苯二甲酸二丁酯的方法，包括：活化菌株，初级培养，次级培养，菌体研磨，乙酸乙酯萃取，浓缩获得粗提物，将粗提物进行反相硅胶柱层析，以甲醇：水梯度洗脱，再通过多次200-300目硅胶柱层析纯化，收集洗脱液浓缩，得到目标产物。经1H NMR、


技术研发人员：邱君志 朱志强 谭震 王玲 蒲慧丽 陈宇熹 刘森 赖芃宇 杨晨杰 陈金慧
受保护的技术使用者：福建农林大学
技术研发日：2022.09.07
技术公布日：2022/12/5