一种四乙酰基-L-菊苣酸的A晶型和B晶型及其制备方法

一种四乙酰基-l-菊苣酸的a晶型和b晶型及其制备方法
技术领域
1.本发明涉及医药化工领域，尤其涉及一种四乙酰基-l-菊苣酸的a晶型和b晶型及其制备方法。


背景技术：

2.四乙酰基-l-菊苣酸，化学名为：四乙酰基-(2r,3r)-2,3-双[[(e)-3-(3,4-二羟基苯基)丙-2-烯酰]氧]丁二酸，菊苣酸是菊苣和紫锥菊中极为重要的免疫活性成分之一。近年来的药理研究表明，有研究表明菊苣酸具有调节免疫力、抗炎，抗真菌，抗病毒、抗自由基以及抗氧化、促胰岛素分泌作用。在应用上，纯度为2%~6%菊苣酸被广泛用在海洋渔业养殖上，用于提高鱼类免疫力免疫力，代替抗生素，高纯度的菊苣酸在海洋渔业养殖方面有着其独有的优势和巨大的市场潜力。
[0003]
但目前菊苣酸主要获取方法仍然是天然产物提取，合成法制取菊苣酸在路线、收率或者中间体纯化方面仍难以让人满意。
[0004]
现有专利、文献公开了多种菊苣酸合成方法，如1958年，m.l.scarpati和g.oriente公布的方法、cn109678706a、cn102887826b中报道的方法为不修饰酒石酸，采用直接合成法，产率低，反应操作复杂，中间体不稳定且重复性低，不利于工业化生产。
[0005]
专利文献wo03029183a中报道了以苄基为羧酸保护基的合成路线，但因为菊苣酸结构中具有α-β不饱和双键，在氢解脱除苄基保护过程中，会生成双键被还原的副产物，无法纯化，氢解所用催化剂醋酸钯，价格昂贵，且容易造成终产物重金属残留，无法应用于工业生产。
[0006]
peter.j.king 等报道了一种用二苯甲基保护l-酒石酸的合成方法，但该方法步骤较多，导致总收率下降，而且需用到二苯基重氮甲烷为原料对酒石酸的羧基进行保护，二苯基重氮甲烷稳定性差，合成过程中容易发生爆炸等危险，不利于工业生产。
[0007]
he zhao和terrence r.burke jr.在2014年公布了一种以叔丁基为羧基保护基的菊苣酸合成路线如下：
后续通过取代四乙酰基-l-菊苣酸上的乙酰基制备l-菊苣酸，其路线简单，反应操作简单，可重复性高，成本低，工业化可行性高。但是传统的四乙酰基-l-菊苣酸不易溶解，稳定性差，降低了后续制备l-菊苣酸的可操作性。


技术实现要素：

[0008]
为了解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种四乙酰基-l-菊苣酸的a晶型和b晶型，新晶型的四乙酰基-l-菊苣酸，在制备菊苣酸的过程中具有易于溶解、反应条件温和、稳定性良好的优点，增加了工业的可操作性、降低了能耗及生产成本。
[0009]
为实现上述效果，本发明公开了一种四乙酰基-l-菊苣酸的a晶型，所述四乙酰基-l-菊苣酸如式（ⅰ）所示，式（ⅰ）；其粉末x 射线衍射图中，a晶型至少在下述衍射角2θ：5.8
±
0.2
°
，9.4
±
0.2
°
，11.3
±
0.2
°
，12.6
±
0.2
°
，13.1
±
0.2
°
，14.2
±
0.2
°
，15.7
±
0.2
°
，16.6
±
0.2
°
，18.3
±
0.2
°
，21.0
±
0.2
°
，24.4
±
0.2
°
，26.5
±
0.2
°
，28.7
±
0.2
°
有明显的吸收峰。
[0010]
进一步的，四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的tg-dsc图谱在200-209℃出现明显的吸收峰，具体地，所得图谱在在204.2
±
2℃出现明显的吸收峰具体的上述一种四乙酰基-l-菊苣酸的a晶型的制备方法为：将四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯粗品溶于二氯甲烷/三氟乙酸混合溶液中，室温搅拌，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全后，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，在液体烷烃或液体烷烃和乙酸乙酯的混合溶剂中重结晶获得纯品。
[0011]
进一步的，所述液体烷烃为正戊烷，正己烷，正庚烷，环戊烷，环己烷或环庚烷中的一种或几种。
[0012]
进一步的，所述液体烷烃和乙酸乙酯的混合溶剂中液体烷烃和乙酸乙酯的质量比为（0.5-2）：1。
[0013]
同时本发明还公开了一种四乙酰基-l-菊苣酸的b晶型，所述四乙酰基-l-菊苣酸如式（ⅰ）所示，式（ⅰ）；其粉末x 射线衍射图中，b晶型至少在下述衍射角2θ：8.4
±
0.2
°
，9.5
±
0.2
°
，12.7
±
0.2
°
，14.0
±
0.2
°
，17.9
±
0.2
°
，20.4
±
0.2
°
，12.7
±
0.2
°
，22.3
±
0.2
°
，12.7
±
0.2
°
，24.7
±
0.2
°
有明显的吸收峰。
[0014]
进一步的，四乙酰基-l-菊苣酸晶型b的tg-dsc图谱在181-195℃出现明显的吸收峰，具体地，所得图谱在在190.5
±
2℃出现明显的吸收峰。
[0015]
具体的上述一种四乙酰基-l-菊苣酸的b晶型的制备方法为：将四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯粗品溶于二氯甲烷/三氟乙酸混合溶液中，室温搅拌，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全后，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，在醇类或醇类和水的混合溶剂中重结晶获得纯品。
[0016]
进一步的，所述醇类为甲醇，乙醇，丙醇，异丙醇中的一种或几种。
[0017]
进一步的，所述醇类和水的混合溶剂中醇类和水的质量比为（0.5-2）：1。
[0018]
本发明的有益成果本发明提供的四乙酰基-l-菊苣酸的晶型a，在制备菊苣酸的过程中具有易于溶解、反应条件温和、稳定性良好的优点，增加了工业的可操作性、降低了能耗及生产成本。由于晶型a、b的稳定性良好，有利于生产过程中杂质的去除和中间体的保存，极大地改善了现有菊苣酸合成路线采用柱层析纯化中间体的各项缺点。在制备方面，容易制备、纯化，操作更加方便简单，更适合工业化大生产。
附图说明
[0019]
图1实施例1所得化合物ⅰ晶型a的x-射线粉末衍射图谱。
[0020]
图2实施例2所得化合物ⅰ晶型b的x-射线粉末衍射图谱。
[0021]
图3实施例1所得化合物ⅰ晶型a的tg-dsc图谱。
[0022]
图4实施例2所得化合物ⅰ晶型b的tg-dsc图谱。
具体实施方式
[0023]
结合附图和具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所限定的范围。
[0024]
本发明实施例中所使用的试剂和采用的方法都本领域的常规试剂和常规的操作方法。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，温度以摄氏度(℃)表示，操作在室温环境下进行，所示室温是指 10—30℃，优选 20—25℃，所述收率为重量百分比，所述“降温析晶”是指在室温及搅拌条件下自然冷却至室温或10—30℃进行析晶的过程，除特殊说明外，所述的百分比均为重量百分比；所述的tlc监测反应完成以检测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯这一反应物消失为准。
[0025]
本发明检测所用的仪器（1）x-射线粉末衍射仪仪器型号：olympus x-射线粉末衍射分析仪测试方法：将研细后的样品(100mg)填在玻璃板凹槽里，用载玻片将其平面与玻璃面挂齐平后，将样品置于olympus x-射线粉末衍射分析仪，使用40kv、40ma的铜x-射线源，扫描范围为3～45(2θ)，扣描速度4θ／分钟，扫描时间 6 分钟。扫描误差通常为
±
0.2度(2θ)。
[0026]
（2）旋光仪仪器型号：instrument自动旋光仪测试方法：将0.5g样品溶于50ml溶剂中，将待测液加入旋光管中，将旋光管置于旋光仪中，温度25℃，测量3次，取平均示数。
[0027]
（3）同步热分析tg-dsc仪器型号：梅特勒同步热分析仪测试方法：将样品（20mg）填充至坩埚中，将样品置于梅特勒同步热分析仪中，设置终止温度600℃，升温速度10k/min，测试时间1h。
[0028]
制备例1：四乙酰基-l-菊苣酸的制备本制备例参照文献doi: 10.1021/acs.joc.9b00827获得：（1）先将l-酒石酸二叔丁酯、咖啡酰氯溶于吡啶中，室温过夜，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯粗品，柱层析纯化。（2）将四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯溶于三氟乙酸/二氯甲烷（1：3）混合溶液中，室温搅拌至tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全后，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品。（3）将四乙酰基-l-菊苣酸粗品加入水/乙醇混合液中重结晶，得到四乙酰基-l-菊苣酸。
[0029]
此方法得到的晶型为无定形粉末，固体不稳定，常温下易吸潮，水解游离出酒石酸，本发明所制备晶型a，状态稳定，同时易于保存、纯化，制备过程也无需柱层析纯化。
[0030]
制备例2：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备（1）先将l-酒石酸二叔丁酯、咖啡酰氯分别溶于甲苯中，将咖啡酰氯/甲苯溶液升温至90℃，向l-酒石酸二叔丁酯/甲苯溶液中加入三乙胺，并将其滴加至酰氯中，30min内滴加完毕，tlc监测l-酒石酸二叔丁酯反应完成后，向反应液中加入碳酸氢钠溶液搅拌，取上层有机相，水洗、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯粗品。（2）将四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯粗品溶于三氟乙酸/二氯甲烷（1：3）混合溶液中，室温搅拌至tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全后，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品。（3）将四乙酰基-l-菊苣酸粗品加入，正己烷/乙酸乙酯溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸晶型a，[a]=-69.12
°
（meoh，c=1g/100ml,λ=589.3nm，25℃）, (500mhz，dmso-d6)δ2.29(12h,d,j=5hz),6.52(1h,s),6.56(1h,s),7.31(2h,d,j=8hz), 7.56(1h,s),7.60(1h,s),7.63(2h,dd,j=10hz),7.67(2h,d,j=5hz),12.19(2h,s), hrms: m/z 641.11(m-h)-。
[0031]
制备例3：四乙酰基-l-菊苣酸晶型b的制备（1）先将l-酒石酸二叔丁酯、咖啡酰氯分别溶于甲苯中，将咖啡酰氯/甲苯溶液升温至90℃，向l-酒石酸二叔丁酯/甲苯溶液中加入三乙胺，并将其滴加至酰氯中，30min内滴加完毕，tlc监测l-酒石酸二叔丁酯反应完成后，向反应液中加入碳酸氢钠溶液搅拌，取上层有机相，水洗、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯粗品。（2）将四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯粗品溶于三氟乙酸/二氯甲烷（1：3）混合溶液中，室温搅拌至tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全后，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品,水/乙醇溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸晶型b。
[0032]
实施例1：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将制备例2制得四乙酰基-l-菊苣酸粗品30g溶于三氟乙酸/二氯甲烷（1：2）混合溶液中，室温搅拌12h，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，正戊烷/乙酸乙酯溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸22.3g。
[0033]
实施例2：四乙酰基-l-菊苣酸晶型b的制备将制备例2制得四乙酰基-l-菊苣酸粗品30g溶于三氟乙酸/二氯甲烷（1：1）混合溶液中，室温搅拌10h，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，水/乙醇溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸21.4g。
[0034]
实施例3：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将制备例2制得四乙酰基-l-菊苣酸粗品30g溶于三氟乙酸中，室温搅拌18h，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，正戊烷/乙酸乙酯溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸22.9g。
[0035]
实施例4：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将制备例2制得四乙酰基-l-菊苣酸粗品30g溶于三氟乙酸中，室温搅拌12h，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，正己烷/乙酸乙酯溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸22.6g。
[0036]
实施例5：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备
将制备例2制得四乙酰基-l-菊苣酸粗品30g溶于三氟乙酸中，室温搅拌12h，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，正庚烷/乙酸乙酯溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸22.4g。
[0037]
实施例6：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将制备例2制得四乙酰基-l-菊苣酸粗品30g溶于三氟乙酸中，室温搅拌12h，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，环戊烷/乙酸乙酯溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸22.6g。
[0038]
实施例7：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将制备例2制得四乙酰基-l-菊苣酸粗品30g溶于三氟乙酸中，室温搅拌12h，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，环己烷/乙酸乙酯溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸22.7g。
[0039]
实施例8：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将制备例2制得四乙酰基-l-菊苣酸粗品30g溶于三氟乙酸中，室温搅拌12h，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，环庚烷/乙酸乙酯溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸22.5g。
[0040]
实施例9：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将制备例2制得四乙酰基-l-菊苣酸粗品30g溶于三氟乙酸中，室温搅拌12h，tlc监测四乙酰基-l-菊苣酸二叔丁酯反应完全，蒸除溶剂，得到四乙酰基-l-菊苣酸粗品，石油醚/乙酸乙酯溶液重结晶得到四乙酰基-l-菊苣酸22.4g。
[0041]
实施例10：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将实施例2中化合物ⅰ的粗品10g加入至乙醇20ml中，搅拌加热至溶解，降温析晶，抽滤，干燥，得到9.6g固体，收率96%，纯度99%，经测定，所得产品的x-射线衍射图谱与图1基本一致，tg-dsc图谱与图2基本一致。
[0042]
实施例11：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将实施例2中化合物ⅰ的粗品10g加入至乙腈20ml中，搅拌加热至溶解，降温析晶，抽滤，干燥，得到9.3g固体，收率93%，纯度99%，经测定，所得产品的x-射线衍射图谱与图1基本一致，tg-dsc图谱与图2基本一致。
[0043]
实施例12：四乙酰基-l-菊苣酸晶型a的制备将实施例2中化合物ⅰ的粗品10g加入至甲醇/水溶液20ml中，搅拌加热至溶解，降温析晶，抽滤，干燥，得到9.5g固体，收率95%，纯度99%，经测定，所得产品的x-射线衍射图谱与图1基本一致，tg-dsc图谱与图2基本一致。
[0044]
试验例1：晶型a的稳定性试验：本发明实施例1和实施例11制备的晶型a在55℃真空干燥条件下和40℃鼓风干燥条件下不同干燥时间后稳定性考察结果如表1所示；纯度检测用hplc法，检测方法为通用梯度检测。
[0045]
表1晶型a稳定性考察结果
由上表可以看出，本发明所述晶型a在在55℃真空干燥条件下和40℃鼓风干燥条件下均表现良好的晶型稳定性和化学稳定性。
[0046]
试验例2：晶型b的稳定性试验：本发明实施例2和实施例12制备的晶型b在55℃真空干燥条件下和40℃鼓风干燥条件下不同干燥时间后稳定性考察结果如表1所示；纯度检测用hplc法，检测方法为通用梯度检测。
[0047]
表2晶型b稳定性考察结果由上表可以看出，本发明所述晶型b在55℃真空干燥条件下和40℃鼓风干燥条件下均表现良好的晶型稳定性和化学稳定性。
[0048]
以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。