用于治疗代谢障碍的苯并咪唑化合物的制作方法

monophosphate-dependentsignaltransductioncascadeinchinesehamsterovarycellsexpressingthehumanmt1melatoninreceptor.endocrinology.139(7):3064-71；karamitria等人(2019).melatoninintype2diabetesmellitusandobesity.natrevendocrinol.15(2):105-125）。尽管这些发现表明调节mt1/mt2受体的药物可能对肥胖症、糖尿病和肝脏代谢疾病的治疗具有积极影响，但从未开发出靶向外周组织中的特定褪黑素受体（mt1或mt2）的药物。5.发明概述本发明广义地涉及用于治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的式i的苯并咪唑化合物：[化1]式i或其药学上可接受的盐、晶体、水合物、前药、代谢物或溶剂化物。[0006]在本发明的苯并咪唑衍生化合物的含义内也包括其药学上可接受的盐、晶体、水合物和溶剂化物，只要它们显著提供该化合物的活性。在本发明的苯并咪唑衍生化合物的含义内也包括其前药和代谢物，以及具有微小改性（例如包含取代基）的游离碱分子，它们如本领域技术人员所知，得到等效化合物并且没有显著改变该分子对治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的药效团。[0007]本发明的另一个方面是式i的化合物的药学上可接受的酸加成盐，如无机加成盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐，和式i的化合物的药学上可接受的有机加成盐，如乙酸盐、丙酸盐、己酸盐、庚酸盐、乙醇酸盐、丙酮酸盐、乳酸盐、丙二酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、甲磺酸盐、醋硬脂酸盐（acistrate）、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、昔萘酸盐（xinafoate）、苯甲酸盐、对甲苯磺酸盐、肉桂酸盐、对氯苯磺酸盐、2-萘磺酸盐、对甲苯磺酸盐、樟脑磺酸盐、三甲基乙酸盐、叔丁基乙酸盐、十二烷基硫酸盐、葡糖酸盐、戊二酸盐、羟萘甲酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、粘康酸盐、扁桃酸盐、2-羟基乙磺酸盐和金属钠、钾、锂、钙、镁、铋、溴的碱性加成盐；以及与有机碱伯胺、仲胺或叔胺的药学上可接受的盐；和与氨基酸精氨酸、赖氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺（hydrobamine）、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺（glycosamine）、可可碱（teobromine）、嘌呤、吗啉的盐。[0008]本发明还涉及一种用于治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的药物组合物，其包含式i的化合物和药学上可接受的赋形剂。[0009]通常通过考虑给药途径的类型、赋形剂与活性成分的物理和化学相容性、制备药物形式的方式和对其效力的影响来进行用于制备药物组合物的赋形剂的选择。这些赋形剂是本领域已知的并描述在文献中（例如：handbookofpharmaceuticalmanufacturingformulationsꢀ–ꢀvol.1a6ꢀ–ꢀ2004ꢀ–ꢀsarfarazk.niaziꢀ–ꢀcrcpressandremington'spharmaceuticalsciences,mackpublishing），被这方面的专业技术人员广泛使用。[0010]对于治疗用途和给药，本发明的苯并咪唑化合物可使用常规技术和适当的赋形剂配制在适合口服、肠胃外、鼻腔、直肠、经粘膜和经皮给药的组合物中。[0011]对包含本发明的苯并咪唑化合物的剂型没有具体限制。例如，作为口服给药的固体，适当的剂型可以是片剂、丸剂、糖衣丸（dragées）、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、小丸剂（pellets）、冻干产物和类似形式。作为口服给药的液体，适当的剂型可以是溶液剂、分散剂、混悬剂、乳剂、油剂、糖浆剂等。液体剂型可用于注射，如静脉内、肌内、皮下和皮内。[0012]剂型的其它实例包括脂质体和纳米粒子，或本领域技术人员已知的任何其它给药方面。所述剂型可提供本发明的苯并咪唑化合物的即时、受控或延迟释放。[0013]在另一些实施方案中，本发明涉及式i的化合物在制备用于治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的药物组合物中的用途。[0014]本发明的另一个方面是如上所述的剂型，其含有例如0.01至5000毫克本发明的苯并咪唑化合物，并且在治疗期间可以每天一次或多次给药。[0015]在一个特定实施方案中，本发明的组合物可包含，除苯并咪唑化合物外，至少另一种用于治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的有效成分（activeprinciple），例如选自二甲双胍、胰岛素及其衍生物、磺酰脲类、sglt-2抑制剂、dpp4抑制剂、glp-1激动剂、美格列奈类（meglitinides）、噻唑烷二酮类、α-葡糖苷酶抑制剂、fxr激动剂、ppar激动剂、ask1抑制剂、ccr2和ccr5拮抗剂、半胱天冬酶抑制剂、胰岛素增敏剂和胆酸-花生酸缀合物。[0016]在另一个方面，本发明涉及治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的方法，其包括式i的苯并咪唑化合物：[化2]式i或其药学上可接受的盐、晶体、水合物、溶剂化物、前药或代谢物。[0017]附图简述[图1]a至d显示式i的化合物对hfd喂养的雄性sd大鼠的体重(bw)和食物摄入(fi)的影响。将式i的苯并咪唑化合物、式ii的对比化合物和达格列净给予喂食hfd的动物。将媒介物给予喂食正常食物或hfd的动物。数据显示为每组n=9-10只动物（bw和bw增加）或n=5个笼子（fi和平均每日fi）的调节后的平均值ꢀ‑ꢀsem。通过ancova分析数据，以第1天的bw（a和c）或基线期间的平均fi（b和d）作为协变量，不包括食物媒介物组。通过单独williams检验（化合物i或ii）或多重t检验（达格列净）将治疗组与hfd媒介物进行比较，如果p《0.05，则认为统计显著。对于分别用达格列净、10mg/kg化合物ii、30mg/kg化合物ii、10mg/kg化合物i和30mg/kg化合物i治疗的hfd组，统计显著性表示为“a”、“b”、“c”、“d”和“e”。#(p=0.051)和&(p=0.098)是指在与hfd媒介物的比较中趋向于显著。[0018][图2]a至c显示式i的化合物对hfd喂养的雄性sd大鼠的血浆葡萄糖(a)、胰岛素(b)和homa-ir(c)的影响。将化合物i、化合物ii、达格列净给予喂食hfd的动物。将媒介物给予喂食正常食物或hfd的动物。在第51天评估参数。数据显示为调节后的平均值ꢀ±ꢀsem(n=9-10)。使用一般线性模型（血糖和homa-ir）或对数转换数据（胰岛素）的稳健回归（胰岛素）进行统计分析，以治疗作为因素和以出血顺序（bleedingorders）和第1天的bw（除了与食物媒介物组的比较外）作为协变量。通过单独williams检验（化合物ii和i）或多重t检验（达格列净）将治疗组与hfd媒介物进行比较，并通过**p《0.01和***p《0.001表示统计显著差异。通过多重t检验（hfd媒介物和达格列净组）或dunnett's检验（化合物i和化合物ii）进行与食物媒介物的比较并通过†ꢀ(p《0.05)和††ꢀ(p《0.01)表示统计显著差异。[0019][图3]a至h显示式i的化合物对hfd喂养的雄性sd大鼠的肝脏甘油三酯(a-b)、糖原(c-d)和组织病理学(e-h)的影响。在用10和30mg/kg的化合物i、5mg/kg的达格列净或媒介物对接受hfd的动物进行慢性口服治疗后评估参数。也将媒介物给予接受正常食物的动物。使用cobasc111临床分析仪trigl04657594190量化肝脏甘油三酯。使用商业试剂盒（thermobiovision，glycogenassaykit，k646-100）进行肝脏样本中的糖原量化。数据显示为平均值ꢀ±ꢀsem(a-d)或包括平均值ꢀ±ꢀsem(e-h)，n=9-10的原始数据。通过对数转换数据的一般线性模型（仅甘油三酯）进行肝脏甘油三酯(a-b)和糖原(c-d)的统计分析，以治疗和队列（cohort）作为因素和以终止顺序（terminationorder）和第1天的bw作为协变量。通过单独williams检验（化合物i）或多重t检验（达格列净）将治疗组与hfd媒介物进行比较，并通过*(p《0.05)、**(p《0.01)和***(p《0.001)表示统计显著差异。通过多重t检验（hfd媒介物和达格列净组）或dunnett's检验（化合物i）进行与食物媒介物的比较并通过†ꢀ(p《0.05)、††ꢀ(p《0.01)和†††ꢀ(p《0.001)表示统计显著差异。通过精确wilcoxon秩和检验进行肝组织病理学数据(e-h)的分析。通过与hfd媒介物比较的*(p《0.05)和在与食物媒介物比较时通过†ꢀ(p《0.05)、††ꢀ(p《0.01)和†††ꢀ(p《0.001)表示统计差异。[0020]发明描述研究调查发现特定的式i的苯并咪唑衍生物，其也被称为n-[2-(5-氯-2,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-乙基]-乙酰胺：[化3]式i或其药学上可接受的盐、晶体、水合物、前药、代谢物或溶剂化物。[0021]1hnmr(400mhzcdcl3)δ1.91(s,3h),3.52ꢀ‑ꢀ3.57(m,2h),3.91(s,3h),4.10ꢀ‑ꢀ4.14(m,5h),5.62(brs,1h),6.80(s,1h),7.52(s,1h)。13cnmr(125mhz,cdcl3)δppm23.16；39.00；41.16；56.94；57.21；93.02；116.73；119.08；133.20；133.68；150.85；157.61；170.81。ms(esi)m/zc13h16cln3o3计算值:297.0880；实测值[m h] 298.0977。[0022]这种化合物被发明为充当i)对mt1受体的效力高于对mt2受体的效力的褪黑素激动剂（表1），并且ii)表现出比中枢暴露高的外周暴露，即低的脑-血浆比（表2），因此优先作用于外周组织。根据本发明的式i的苯并咪唑衍生物是强效的、外周优先的褪黑素受体激动剂，对mt1受体具有中等选择性，调节体重增加和胰岛素抵抗、肝脏甘油三酯水平和组织学确定的脂肪变性。因此，根据本发明的式i的苯并咪唑衍生物为肥胖症、糖尿病和nafld/nash的治疗增加显著价值。[0023]因此，本发明涉及用于治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的式i的苯并咪唑化合物[化4]式i或其药学上可接受的盐、晶体、水合物、前药、代谢物或溶剂化物。[0024]在本发明的苯并咪唑衍生化合物的含义内也包括其药学上可接受的盐、晶体、水合物和溶剂化物，只要它们显著提供该化合物的活性。在本发明的苯并咪唑衍生化合物的含义内也包括其前药和代谢物，以及具有微小改性（例如包含取代基）的游离碱分子，它们如本领域技术人员所知，得到等效化合物并且没有显著改变该分子对治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的药效团。[0025]不排除任何其它替代物，本发明的苯并咪唑化合物的适当的盐是其药学上可接受的酸加成盐，如无机加成盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐，和药学上可接受的有机加成盐，如乙酸盐、丙酸盐、己酸盐、庚酸盐、乙醇酸盐、丙酮酸盐、乳酸盐、丙二酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、甲磺酸盐、醋硬脂酸盐（acistrate）、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、昔萘酸盐（xinafoate）、苯甲酸盐、对甲苯磺酸盐、肉桂酸盐、对氯苯磺酸盐、2-萘磺酸盐、对甲苯磺酸盐、樟脑磺酸盐、三甲基乙酸盐、叔丁基乙酸盐、十二烷基硫酸盐、葡糖酸盐、戊二酸盐、羟萘甲酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、粘康酸盐、扁桃酸盐、2-羟基乙磺酸盐和金属钠、钾、锂、钙、镁、铋、溴的碱性加成盐；以及与有机碱伯胺、仲胺或叔胺的药学上可接受的盐；和与氨基酸精氨酸、赖氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺（hydrobamine）、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺（glycosamine）、可可碱（teobromine）、嘌呤、吗啉的盐。[0026]本发明还涉及一种用于治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的药物组合物，其包含式i的化合物和药学上可接受的赋形剂。[0027]通常通过考虑给药途径的类型、赋形剂与活性成分的物理和化学相容性、制备药物形式的方式和对其效力的影响来进行用于制备药物组合物的赋形剂的选择。这些赋形剂是本领域已知的并描述在文献中（例如：handbookofpharmaceuticalmanufacturingformulationsꢀ–ꢀvol.1a6ꢀ–ꢀ2004ꢀ–ꢀsarfarazk.niaziꢀ–ꢀcrcpressandremington'spharmaceuticalsciences,mackpublishing），被这方面的专业技术人员广泛使用。[0028]药用赋形剂通常基于它们在药物组合物和/或其制备技术中发挥的功能进行分类或细分类。它们可被称为稀释剂、粘合剂、分解或防结块剂、润滑剂、悬浮剂、增稠剂、溶剂、表面活性剂、滑爽剂、防结块剂或流动剂、包衣剂、塑化剂、甜味剂、等渗剂、着色剂、保存剂、抗氧化剂、ph控制或改性剂、用于掩盖风味、改善溶解度、促进制剂稳定性和调节生物利用度的络合剂，以及螯合剂、芳香剂和调味剂。[0029]稀释剂是包含在固体剂型，如片剂、胶囊剂、丸剂、小丸剂（pellets）、粉剂和颗粒剂中以增加剂型的体积或重量的药用赋形剂。它们也可出于相同目的用于液体和半固体药物形式。适用于制备本发明的药物组合物的稀释剂的实例包括但不限于：碳酸钙、磷酸钙、硫酸钙、微晶纤维素、粉状纤维素、糊精、右旋糖、果糖、高岭土、无水和/或一水合乳糖、麦芽糖、山梨糖醇、各种淀粉（玉米、小麦、马铃薯、木薯）、预糊化淀粉、蔗糖和糖。[0030]粘合剂是包含在制剂中以确保在掺合（或制粒）阶段粉末更容易（使用水作为制粒流体，或水-醇混合物或其它溶剂）团聚成颗粒的药用赋形剂。粘合剂也可用于不需要流体的干混工艺。适用于制备本发明的药物组合物的粘合剂的实例包括但不限于：阿拉伯树胶、藻酸、甲基丙烯酸铵共聚物、卡波姆共聚物或均聚物或互聚物、淀粉（玉米、小麦、马铃薯、木薯）、微晶纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、糊精、麦芽糊精、麦芽糖、蔗糖、明胶、葡萄糖、瓜尔胶和聚维酮。[0031]分解或防结块剂是在与生物流体接触时可加速制剂分解或溶出的药用赋形剂。适用于制备本发明的药物组合物的分解或防结块剂的实例包括但不限于：藻酸、淀粉、藻酸钠、交联羧甲基纤维素钠（sodiumcroscaramelose）、乙醇酸钠、羧甲基纤维素钠、微晶纤维素和交联聚维酮。[0032]润滑剂是减少制剂中的粒子之间的摩擦并且也减轻粒子与用于制备它们的设备的壁之间的摩擦的赋形剂。适用于制备本发明的药物组合物的润滑剂的实例包括但不限于：硬脂酸钙、硬脂酸镁、硬脂酸锌、矿物油、聚乙二醇、十二烷基硫酸钠、硬脂富马酸钠、淀粉、硬脂酸、滑石和i型氢化植物油。[0033]悬浮剂和增稠剂是在制剂中用于确保分散体系（例如混悬剂和乳剂）的稳定性以降低粒子沉降速度或减轻液体制剂的流动性的赋形剂。用于制备本发明的药物组合物的合适悬浮剂和增稠剂的实例包括但不限于：阿拉伯树胶、琼脂、藻酸、单硬脂酸铝、膨润土、卡波姆、共聚物卡波姆、均聚物卡波姆、互聚物卡波姆、羧甲基纤维素钙或钠、角叉菜胶、微晶纤维素、糊精、瓜尔胶、结冷胶、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、甲基纤维素、硅酸铝镁、果胶、聚环氧乙烷、聚乙烯醇、聚维酮、藻酸丙二醇酯、藻酸钠、二氧化硅、胶体二氧化硅、淀粉（玉米、小麦、马铃薯、木薯）、黄蓍胶和黄原胶。[0034]溶剂是在制备液体、半固体和固体组合物时用于溶解其它物质的赋形剂，其用于固体组合物以确保更容易掺合和/或提供具有活性药物成分或一些其它赋形剂的均匀浓度的掺合物。适用于制备本发明的药物组合物的溶剂的实例包括但不限于：水、乙醇、异丙醇、植物油（玉米、棉花、芝麻、大豆）、矿物油、甘油、山梨糖醇和油酸。[0035]表面活性剂也称为表面张力调节剂，是具有多种功能的赋形剂，其用作乳化剂、保湿剂和/或增溶剂。适用于制备本发明的药物组合物的表面活性剂的实例包括但不限于：苯扎氯铵、苄索氯铵、氯化十六烷基吡啶鎓、壬基酚聚氧乙烯(9)醚、辛基酚聚氧乙烯(9)醚、聚乙二醇50硬脂酸酯、聚乙二醇10油醚、聚乙二醇20鲸蜡硬脂醚、聚草酸35蓖麻油（polyoxalate35ricinoil）、氢化聚草酸40蓖麻油（hydrogenatedpolyoxalate40ricinoil）、聚乙二醇40硬脂酸酯、聚乙二醇十二烷基醚、聚乙二醇十八烷基醚、聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯80、鲸蜡硬脂基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、山梨糖醇酐单月桂酸酯、山梨糖醇酐单油酸酯、山梨糖醇酐单棕榈酸酯、山梨糖醇酐倍半油酸酯、山梨糖醇酐三油酸酯、鲸蜡醇、油醇、泊洛沙姆、丙二醇单硬脂酸酯、卡波姆共聚物或互聚物、胆固醇、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二乙二醇硬脂酸酯、多库酯钠、乙二醇硬脂酸酯、甘油二硬脂酸酯、甘油单亚油酸酯、甘油单油酸酯、甘油单硬脂酸酯、羊毛脂醇、卵磷脂、甘油单酯和甘油二酯、硬脂酸钠、硬脂酸和乳化蜡。[0036]流动剂、防结块剂或滑爽剂是在制剂中用于在粉末流动和加工过程中促进流动和减少固体传导漏斗中的结块的赋形剂。适用于制备本发明的药物组合物的流动剂、防结块剂或滑爽剂的实例包括但不限于：硅酸钙、硅酸镁、胶体二氧化硅和滑石。[0037]包衣剂是可用于各种功能的赋形剂，包括掩盖令人不快的味道或气味、控制药物释放速度、增强外观、更容易吞咽和控制药物在消化道中的释放（例如肠溶包衣）。适用于制备本发明的药物组合物的包衣剂的实例包括但不限于：甲基丙烯酸铵共聚物、羧甲基纤维素钠、乙酸邻苯二甲酸纤维素、乙酸纤维素、共聚维酮、乙基纤维素及其水分散体、明胶、药用清漆、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、麦芽糊精、甲基丙烯酸共聚物及其分散体、甲基纤维素、聚乙二醇、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、虫胶、改性预糊化淀粉、蔗糖、二氧化钛、巴西棕榈蜡和微晶蜡。[0038]塑化剂是添加到其它试剂中以赋予它们更大的塑性和回弹性（弹性）的赋形剂。它们是提供聚合物体系所需的物理性质的重要组分。适用于制备本发明的药物组合物的塑化剂的实例包括但不限于：乙酰柠檬酸三丁酯、乙酰柠檬酸三乙酯、蓖麻油（ricinoil）、二乙酰化甘油单酯、癸二酸二丁酯、山梨糖醇、糊精、邻苯二甲酸二乙酯、甘油、聚乙二醇、聚乙二醇单甲醚、丙二醇、苯甲酸苄酯、三乙酸甘油酯、柠檬酸三丁酯、柠檬酸三乙酯和氯丁醇。[0039]对于肠胃外给药，通常使用等渗溶液，即渗透压与它们接触的组织相似的溶液，以避免溶血、减轻给药时的疼痛和不适。经常用于确保本发明的药物组合物的等渗性的等渗剂的实例包括但不限于：右旋糖、甘油、甘露醇、氯化钠和氯化钾。[0040]甜味剂是用于掩盖令人不快的味道和使口服制剂变甜的试剂。适用于制备本发明的药物组合物的甜味剂的实例包括但不限于：乙酰磺胺酸钾、阿斯巴甜、乙酰舒泛-阿司帕坦盐（acesulfameaspartamesalt）、葡萄糖结合剂（dextrates）、右旋糖、果糖、半乳糖、麦芽糖醇、麦芽糖、甘露糖醇、糖精、糖精钙、糖精钠、山梨糖醇、三氯蔗糖、蔗糖、糖和塔格糖。[0041]本发明所涉及的组合物的范围还包括包含在剂型中的药物着色剂，以赋予每种药物独特的外观，确保在具有类似物理性质的制剂中容易区分特定制剂。适用于本发明的组合物的药物着色剂的实例包括：红色氧化铁、黄色氧化铁、氧化铁混合物、焦糖、二氧化钛、fd&c着色剂和d&c着色剂。[0042]根据给药途径和本发明所涉及的化合物固有的物理和化学性质，可向用这些化合物制备的药物组合物中添加能够稳定、保存、防止和/或避免其成分的过早降解的物质。这些另外的赋形剂可充当抗氧化剂、防腐剂、ph调节剂或改性剂。适用于制备本发明所涉及的药物组合物的具有这些性质的所用赋形剂的实例包括但不限于：抗坏血酸、山梨酸、焦亚硫酸钠、α-生育酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、亚硫酸钠、丁基羟基甲苯（bht）、丁基羟基茴香醚（bha）、酚、苄醇、苯扎氯铵、苄索氯铵、氯化十六烷基吡啶鎓、苯甲酸、苯甲酸钠、丙酸钠、硼酸和ph控制剂，后者包括有机和无机酸、碱和缓冲剂并常用于药物组合物。[0043]包含本发明所涉及的化合物的药物组合物还可含有以下物质或用以下物质制备：(a)用于掩盖味道、改善溶解度、促进制剂稳定性和/或调节生物利用度的络合剂，和(b)用于矫正或掩盖令人不快的气味和味道，或提供宜人的气味和味道的芳香剂和调味剂。市场上有若干物质和制剂可用于此类应用，它们的使用仅限于批准的试剂，或已正式认证的试剂，其与组合物中的成分相容。对于治疗用途和给药，本发明的苯并咪唑化合物可使用常规技术和适当的赋形剂配制在适合口服、肠胃外、鼻腔、直肠、经粘膜和经皮给药的组合物中。[0044]对包含本发明的苯并咪唑化合物的剂型没有具体限制。例如，作为口服给药的固体，适当的剂型可以是片剂、丸剂、糖衣丸（dragées）、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、小丸剂（pellets）、冻干产物和类似形式。作为口服给药的液体，适当的剂型可以是溶液剂、分散剂、混悬剂、乳剂、油剂、糖浆剂等。液体剂型可用于注射，如静脉内、肌内、皮下和皮内。[0045]剂型的其它实例包含脂质体和纳米粒子，或本领域技术人员已知的任何其它给药方面。该剂型可提供本发明的苯并咪唑化合物的即时、受控或延迟释放。[0046]本发明的另一个方面是如上所述的剂型，其含有例如0.01至5000毫克本发明的苯并咪唑化合物，并且在治疗期间可以每天一次或多次给药。[0047]在一个特定实施方案中，本发明的组合物可包含，除苯并咪唑化合物外，至少另一种用于治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的有效成分（activeprinciple），例如选自二甲双胍、胰岛素及其衍生物、磺酰脲类、sglt-2抑制剂、dpp4抑制剂、glp-1激动剂、美格列奈类（meglitinides）、噻唑烷二酮类、α-葡糖苷酶抑制剂、fxr激动剂、ppar激动剂、ask1抑制剂、ccr2和ccr5拮抗剂、半胱天冬酶抑制剂、胰岛素增敏剂和胆酸-花生酸缀合物。[0048]在另一些实施方案中，本发明涉及式i的化合物i)在制备药物组合物中或ii)在治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎中的用途。[0049]在另一方面，本发明涉及治疗肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的方法，其包括式i的苯并咪唑化合物：[化5]5h),3.24(q,j=4.80hz,2h),3.92(s,3h),3.99(t,j=6.8hz,2h),4.57(q,j=6.8hz,2h),5.58(brs,1h),6.71(s,1h),7.52(s,1h)。13cnmr(125mhz,cdcl3)δppm14.74；23.28；28.73；36.91；39.70；57.11；66.48；93.25；116.79；119.10；132.35；134.10；150.67；157.06；170.22。ms(esi)m/zc15h20cln3o3计算值:325.1193；实测值[m h] 326.1292。[0052]在hfd模型中，在开始治疗前，动物最初用hfd喂养4周以诱导显著体重(bw)增加。用hfd喂养的动物然后用10和30mg/kg的式i的化合物、10和30mg/kg的式ii的化合物或5mg/kg的达格列净每天一次口服治疗9周。还包括两个媒介物治疗的对照组，喂食正常食物（食物媒介物）或hfd（hfd媒介物）。[0053]在研究过程中评估bw和食物摄入(fi)，结果显示在[图1]中。来自hfd媒介物的动物的bw从第1天的起始平均值459.9g稳步增长到第57天的612.4g。有趣的是，与hfd媒介物动物相比，用式i的化合物（10和30mg/kgp.o.）治疗在第13至32天显著减少体重（bw）（p《0.05），达格列净（5mg/kgp.o.）在第2至48、50至54和56天显著减少体重（bw）（p《0.05）（图1a）。与hfd媒介物相比，对于用10和30mg/kgp.o.的化合物i（p=0.098）和5mg/kgp.o.的达格列净（p=0.051）治疗的动物，还观察到从第1天至第57天的bw增加的减少趋势（图1c）。与此相比，用式ii的化合物（10和30mg/kg）治疗对每日bw增加没有显著影响。化合物i和化合物ii与hfd媒介物组相比不影响每日食物摄入，对后者观察到的孤立变化除外（图1b和1d）。相反，与hfd媒介物相比，达格列净显著增加从第8至56天的每日fi（p《0.05）和平均每日fi（p《0.001）。[0054]使用homeostaticmodelassessmentforinsulinresistance（homa-ir）方法评估胰岛素抵抗和葡萄糖耐受不良的程度（vandijkth等人(2013).anovelapproachtomonitorglucosemetabolismusingstableisotopicallylabelledglucoseinlongitudinalstudiesinmice.labanim.47(2):79-88）。基于第51天在禁食4小时后的血浆胰岛素和葡萄糖浓度计算homa-ir。与食物媒介物组相比，hfd媒介物动物具有显著增加的血浆葡萄糖（ 17.6%，p《0.01）、胰岛素（ 56.4%，p《0.05）和homa-ir（ 79.3%，p《0.01）（[图2]）。如预期，与hfd媒介物相比，达格列净显著降低血浆葡萄糖（-21.6%，p《0.001）、血浆胰岛素（-56.7%，p《0.001）和血浆homa-ir（-66.7%，p《0.001）。显著的是，式i的化合物在10mg/kgp.o.剂量下也显著降低血浆葡萄糖（-16.4%，p《0.01）。在最高剂量（30mg/kgp.o.）下，与hfd媒介物相比，根据本发明的化合物i显著降低血浆葡萄糖（-17%，p《0.01）和homa-ir（-36%，p《0.01）（图2a和2c）。与此相比，对比化合物（化合物ii）与hfd媒介物相比没有改变血浆葡萄糖、胰岛素或homa-ir。[0055]在研究终止后（第65/66天）评估对身体组成和对所选组织（棕色脂肪垫、附睾脂肪垫、肝脏或腓肠肌）重量的影响。以两种方式分析组织的重量：i)使用第1天的bw作为协变量以校正研究开始时的bw差异，或ii)使用终末bw（第65/66天）作为协变量以校正由体重减轻引起的变化（表3）。当针对终末bw校正数据时，与hfd媒介物相比，达格列净导致肝脏重量显著增加（ 10.8%，p《0.01）。相反，在通过初始bw校正的分析中，对于式i的苯并咪唑衍生物治疗的两个动物组都观察到肝脏重量减少的趋势（p=0.12）。除了这些变化，在与hfd媒介物组的比较中没有观察到对所选组织的重量的显著影响，无论如何校正。使用foodscantm近红外分析仪分析确定身体组成，该分析评估水、蛋白质和脂肪含量以及最终胴体重量（表4）。在与hfd媒介物对照比较评估的任何参数中都没有看出根据本发明的式i的苯并咪唑衍生物或对比化合物ii的影响。达格列净与hfd媒介物相比显著减少最终胴体重量（p《0.05），但身体组成没有改变。[0056]由于只有根据本发明的式i的苯并咪唑衍生物而非对比苯并咪唑化合物ii影响hfd模型中的bw增加、肝脏重量、血浆葡萄糖水平和homa-ir，与达格列净和对照组比较评估化合物i在动物肝脏中的具体效果。与食物媒介物对照相比，hfd媒介物动物表现出显著增加的肝脏甘油三酯含量和浓度（分别为 473%和 409%）（图3a和3b）。有趣的是，与hfd媒介物相比，用式i的化合物（10和30mg/kgp.o.）治疗显著降低肝脏甘油三酯含量（分别为-41.3%和-55.1%，p《0.05）且30mg/kgp.o.的化合物i将肝脏甘油三酯浓度显著降低51.6%（p《0.01）。与此相比，与hfd媒介物对照相比，达格列净治疗没有显著降低肝脏甘油三酯含量，也没有显著降低肝脏甘油三酯浓度。食物媒介物和hfd媒介物动物中的肝糖原含量和浓度类似（图3c和3d）。与hfd媒介物相比，式i的化合物（10和30mg/kgp.o.）显著（p《0.05）降低肝糖原含量（分别降低36.6%和36.6%）和浓度（分别降低42.8%和40.8%）。与hfd媒介物对照相比，没有观察到达格列净对肝糖原含量或浓度的影响。[0057]还通过组织病理学分析评估肝脏的nafld（图3e-h）。根据先前描述的方法将样品切片、染色和评分（kleinerde等人(2005).designandvalidationofahistologicalscoringsystemfornonalcoholicfattyliverdisease.hepatology.41(6):1313-21；nishidat等人(2013).spontaneousonsetofnonalcoholicsteatohepatitisandhepatocellularcarcinomainamousemodelofmetabolicsyndrome.labinvest.93(2):230-41）。分析的参数是：脂肪变性（0-3）、小叶炎症（0-3）和肝细胞气球样变性（0-2）。总“nafld活动度评分”（nas）的分数计算为所有参数的总和（0-8）。食物媒介物动物的肝脏没有脂肪变性、小叶炎症、肝细胞气球样变性的病理评分（零），也没有总nas评分。脂肪变性、小叶炎症和总nas的病理评分在hfd媒介物组中显著提高（p《0.05），而肝细胞气球样变性没有受到显著影响。显著地，根据本发明的式i的苯并咪唑衍生物（30mg/kgp.o.）与hfd组相比将脂肪变性显著（p《0.05）减少了-57%（图3f）。在用30mg/kg剂量的根据本发明的式i的苯并咪唑衍生物治疗的动物中，小叶炎症也减少，以使其不再显著不同于食物媒介物对照（图3g）。在该组与hfd媒介物动物之间也观察到总nas值趋向于显著（图3e，p=0.126）。相反，与hfd媒介物组相比，对达格列净治疗的大鼠没有观察到对评估参数的影响。[0058][表1]与褪黑素和式ii的化合物相比式i的苯并咪唑衍生物对mt1和mt2受体的体外药理学[0059]以激动剂模式进行细胞功能测定。ec50ꢀ–ꢀ半最大有效浓度。i.a.ꢀ–ꢀ内在活性。[0060][表2]式i的化合物和式ii的化合物在wistar和spraguedawley（sd）大鼠中的血浆和脑暴露和脑-血浆比[0061]每个时间点2-3只动物的平均数据。将化合物口服给药于wistar（100mg/kg）和spraguedawley（sd）大鼠（10和30mg/kg）并在所选时间点收集样品（血浆和脑）。ndꢀ–ꢀ由于脑浓度低于量化下限（5ng/g）而未测定。[0062][表3]式i的化合物和式ii的对比化合物对hfd喂养的雄性sd大鼠的组织的影响[0063]数据显示为平均值ꢀ±ꢀsem(n=9-10)。针对治疗组在第1天或第65/66天（研究终止）之间的bw差异调节平均值。由统计模型的残差计算sem。将式i的化合物、式ii的化合物、达格列净和媒介物给予喂食正常食物或hfd的动物，并在终止后评估参数。通过ancova分析数据，以治疗和队列作为因素和以第1天的bw或最终胴体重量作为协变量（分别用于针对第1天或第65/66天的bw的数据调节）。通过单独williams检验（化合物i和化合物ii）或多重t检验（达格列净）将治疗组与hfd媒介物进行比较并通过**(p《0.01)表示统计显著差异。#(p=0.12)是指在与hfd媒介物的比较中趋向于显著。[0064][表4]式i的苯并咪唑衍生物和式ii的对比化合物对hfd喂养的雄性sd大鼠的身体组成的影响组最终胴体重量(g)水(%)脂肪(%)蛋白质(%)hfd媒介物591.9±3.7††57.2±0.9†19.3±1.2††19.5±0.3††5mg/kg的达格列净564.5±9.4*†58.9±1.016.8±1.320.6±0.410mg/kg的化合物i561.7±13.056.1±1.2†20.5±1.5†19.7±0.430mg/kg的化合物i584.0±13.656.5±1.4†20.0±1.7†19.6±0.5†10mg/kg的化合物ii587.6±6.3†56.0±1.8†20.8±2.3††19.2±0.6††30mg/kg的化合物ii593.3±11.4††58.4±1.917.9±2.3†19.8±0.5[0065]数据显示为调节后的平均值ꢀ±ꢀsem(n=9-10)。由统计模型的残差计算sem。通过数据的稳健回归进行分析，以治疗作为因素和以第1天的bw作为协变量。通过单独williams检验（化合物i和化合物ii）或多重t检验（达格列净）将治疗组与hfd媒介物进行比较并通过*(p《0.05)表示统计显著差异。与食物媒介物的比较通过多重t检验（hfd媒介物和达格列净组）或dunnett's检验（化合物i和化合物ii）进行并通过†ꢀ(p《0.05)和††ꢀ(p《0.01)表示统计显著差异。当前第1页12当前第1页12