化合物及其用途的制作方法

化合物及其用途
1.背景本发明涉及可用于调节brg1或brm相关因子(baf)复合物的化合物。特别地，本发明涉及可用于治疗与baf复合物功能相关的病症的化合物。
2.染色质调控对于基因表达至关重要，并且atp依赖性染色质重塑是发生这种基因表达的机制。人转化/蔗糖非发酵性(swi/snf)染色质重塑复合物(也称为baf复合物)具有两种swi2样atp酶，称为brg1 (brahma相关基因1)和brm (brahma)。转录激活因子brg1 (也称为atp依赖性染色质重塑剂smarca4)由19号染色体上的smarca4基因编码。brg1在一些癌症肿瘤中过表达，并且是癌细胞增殖所需的。brm (也称为可能的全局转录激活因子snf2l2和/或atp依赖性染色质重塑剂smarca2)由9号染色体上的smarca2基因编码，并且已被证明对以brg1功能突变丧失为特征的细胞中的肿瘤细胞生长至关重要。brg和/或brm的失活导致细胞中的下游效应，包括细胞周期停滞和肿瘤抑制。


技术实现要素：

3.本发明的特征是可用于调节baf复合物的化合物。在一些实施方案中，所述化合物可用于治疗与baf复合物的改变相关的病症，例如与brg1和brm蛋白中的一者或两者的改变相关的病症。单独或与其它药物活性剂组合的本发明化合物可用于治疗此类病症。
4.一方面，本发明的特征在于具有式i的结构的化合物：其中l是连接基；b是降解部分；以及a具有式ii的结构：其中x1是n或ch，x2和x3独立地是n、ch或c(ch3)；r1是h、任选取代的c
1-c6酰基、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的c
2-c9杂环基或-so2r6；r2和r5各自独立地是h或任选取代的c
1-c6烷基；r3是h、任选取代的c
1-c6烷基、或a与连接基之间的键；r4是h、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；
r6是任选取代的c
1-c6烷基或-nr7r8；r7和r8各自独立地是任选取代的c
1-c6烷基；het是5元或6元亚杂芳基；g1是任选取代的c
6-c
10
亚芳基、任选取代的c
2-c9亚杂环基或任选取代的c
2-c9亚杂芳基；g2是不存在，-o-，任选取代的c
1-c6亚烷基，任选取代的c
1-c6亚烯基，任选取代的c
1-c6亚杂烷基，任选取代的c
2-c9杂环基c
1-c6亚烷基，或任选取代的c
2-c9杂芳基c
1-c6亚烷基；g3是不存在，任选取代的c
6-c
10
亚芳基，任选取代的c
6-c
10
亚环烷基，任选取代的c
2-c9亚杂环基，或任选取代的c
2-c9亚杂芳基；以及a1是h或a和连接基之间的键，条件是式ii在a和连接基之间包含一个且仅一个键，或其药学上可接受的盐。
5.在一些实施方案中，r3是h或任选取代的c
1-c6烷基，a1是a和连接基之间的键。在一些实施方案中，r3是a和连接基之间的键，a1是h。
6.在一些实施方案中，r2是氢。
7.在一些实施方案中，r5是氢。在其它实施方案中，r5是任选取代的c
1-c6烷基，例如甲基。
8.在一些实施方案中，x1、x2和x3是ch。一些实施方案中，x1是n且x2和x3是ch。在一些实施方案中，x3是n且x1和x2是ch。在一些实施方案中，x2是n且x1和x3是ch。在一些实施方案中，x1是ch且x2和x3是c (ch3)。在一些实施方案中，x1和x3是ch且x2是c (ch3)。
9.在一些实施方案中，r3是氢。在一些实施方案中，r3是任选取代的c
1-c6烷基，例如r3是甲基。
10.在进一步的实施方案中，r4是氢。在其它实施方案中，r4是任选取代的c
1-c6烷基，例如甲基、叔丁基、异丙基、异丁基或叔戊基。在进一步的实施方案中，r4是任选取代的c
1-c6杂烷基，例如杂烷基，例如。
11.在一个实施方案中，het是。在其它实施方案中，het是。在进一步的实施方案中，het是。
12.在一些实施方案中，g2不存在。在一些实施方案中，g2是任选取代的c
1-c6亚烷基，例如g2是。在进一步的实施方案中，g2是任选取代的c
1-c6亚杂烷基、任选取代的c
2-c9亚杂环基或任选取代的c
2-c9杂环基c
1-c6亚烷基，例如
。在特别的实施方案中，g2是任选取代的c
1-c6亚烯基，例如。
13.在一些实施方案中，g1是任选取代的c
6-c
10
亚芳基，例如亚芳基，例如亚芳基，例如。
14.在其它实施方案中，g1是任选取代的c
2-c9亚杂芳基，例如亚杂芳基，例如亚杂芳基，例如。
15.在进一步的实施方案中， g1是任选取代的c
2-c9亚杂环基，例如亚杂环基，例如亚杂环基，例如亚杂环基，例如。
16.在一些实施方案中，g3不存在。
17.在进一步的实施方案中， g3是任选取代的c
6-c
10
亚芳基，例如亚芳基，例如。
18.在进一步的实施方案中，g3是任选取代的c
2-c9亚杂环基，例如亚杂环基，例如
。在一些实施方案中，g3是，其中r
9a
、r
9b
、r
9c
和r
9d
独立地是a1、h、卤素、羟基、任选取代的c
1-6
烷基或任选取代的c
1-6
杂烷基；且r
9e
和r
9f
各自独立地是h或a1。在其它实施方案中，g
3 是，其中x4是o或cr
10ir10j
；且r
10a
、r
10b
、r
10c
、r
10d
、r
10e
、r
10f
、r
10g
、r
10h
、r
10i
和r
10j
各自独立地是h、卤素、氰基、氨基、羟基、烯丙基、杂烯丙基、任选取代的c
1-6
烷基、任选取代的c
1-6
杂烷基，或两个与它们连接的碳组合以形成c=o。
19.在其它实施方案中，g3是任选取代的c
2-c9亚杂芳基，例如亚杂芳基，例如
。
20.在进一步的实施方案中， g3是任选取代的c
6-c
10
亚环烷基，例如亚环烷基，例如亚环烷基，例如。
21.在一些实施方案中，a1、g1、g2和g3组合以形成任选取代的c
6-c
10
芳基，例如芳基，例如。
22.在其它实施方案中，a1、g1、g2和g3组合以形成任选取代的c
2-c9杂芳基，例如杂芳基，例如。
23.在进一步的实施方案中， a1、g1、g2和g3组合以形成任选取代的c
2-c9杂环基，例如
。
24.在某些实施方案中，r1是氢。在其它实施方案中，r1是任选取代的c
1-c6酰基，例如乙酰基。在进一步的实施方案中， r1是任选取代的c
1-c6烷基，例如甲基、叔丁基、异丙基或。在其它实施方案中，r1是任选取代的c
1-c6杂烷基，例如。在一些实施方案中，r1是任选取代的c
2-c9杂环基，例如。
25.在进一步的实施方案中，r1是
–
so2r6。在一些实施方案中，r6是任选取代的c
1-c6烷基，例如甲基、异丙基或。在一些实施方案中，r1是。
26.在一些实施方案中，降解部分是泛素连接酶结合部分。
27.在一些实施方案中，泛素连接酶结合部分包括cereblon配体、iap (细胞凋亡抑制剂)配体、小鼠双微体2同源物(mdm2)或von hippel-lindau (vhl)配体，或其衍生物或类似物。
28.在一些实施方案中，降解部分是泛素连接酶结合部分。
29.在一些实施方案中，泛素连接酶结合部分包括cereblon配体、iap (细胞凋亡抑制剂)配体、小鼠双微体2同源物(mdm2)或von hippel-lindau (vhl)配体，或其衍生物或类似
物。
30.在一些实施方案中，降解部分包括式y的结构：其中a2是降解部分和连接基之间的键；v1是0、1、2、3、4或5；u1是1、2或3；t1是键或；t2是r
5a
是h、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；r
j1 各自独立地是卤素、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；且j是不存在、任选取代的c
3-c
10 亚碳环基、任选取代的c
6-c
10
亚芳基、任选取代的c
2-c9亚杂环基或任选取代的c
2-c9亚杂芳基或其药学上可接受的盐。
31.在一些实施方案中，t1是键。在一些实施方案中，t1是。
32.在一些实施方案中，t2是。在一些实施方案中，t2是是。在一些实施方案中，t
2 是。
33.在一些实施方案中，式y的结构具有式y1的结构：
或其药学上可接受的盐。
34.在一些实施方案中，式y的结构具有式y2的结构：或其药学上可接受的盐。
35.在一些实施方案中，式y的结构具有式z的结构：或其药学上可接受的盐。
36.在一些实施方案中，u1是1。在一些实施方案中，u1是2。在一些实施方案中，u1是3。
37.在一些实施方案中，式z的结构具有式aa的结构：或其药学上可接受的盐。
38.在一些实施方案中，式z的结构具有式ab的结构：或其药学上可接受的盐。
39.在一些实施方案中，式z的结构具有式ac的结构：或其药学上可接受的盐。
40.在一些实施方案中，v1是0、1、2或3。在一些实施方案中，v1是0。在一些实施方案中，v1是1。在一些实施方案中，v1是2。在一些实施方案中，v1是3。
41.在一些实施方案中，式aa的结构具有式aa1的结构：或其药学上可接受的盐。
42.在一些实施方案中，式ab的结构具有式ab1的结构：或其药学上可接受的盐。
43.在一些实施方案中，式ac的结构具有式ac1的结构：或其药学上可接受的盐。
44.在一些实施方案中，j不存在。在一些实施方案中，j是任选取代的c
3-c
10
亚碳环基或任选取代的c
6-c
10
亚芳基。在一些实施方案中，j是任选取代的c
2-c9亚杂环基或任选取代的c
2-c9亚杂芳基。
45.在一些实施方案中，j是任选取代的亚杂环基。在一些实施方案中，j是任选取代的c
6-c
10
亚芳基。
46.在一些实施方案中，式aa的结构具有式aa2的结构：或其药学上可接受的盐。
47.在一些实施方案中，式aa的结构具有式aa3的结构：或其药学上可接受的盐。
48.在一些实施方案中，式aa的结构具有式aa4的结构：或其药学上可接受的盐。
49.在一些实施方案中，r
a5
是h或任选取代的c
1-c6烷基。在一些实施方案中，r
a5
是h或甲基。在一些实施方案中，r
a5
是h。在一些实施方案中，r
a5
是甲基。
50.在一些实施方案中，式aa的结构具有式a的结构：其中y1是r
a5
是h、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；r
a6
是h或任选取代的c
1-c6烷基；且r
a7
是h或任选经取代的c
1-c6烷基；或r
a6
和r
a7
与各自结合的碳原子一起组合形成任选取代的c
3-c6碳环基或任选取代的c
2-c5杂环基；或r
a6
和r
a7
与各自结合的碳原子一起组合形成任选取代的c
3-c6碳环基或任选取代的c
2-c5杂环基；r
a8
是h、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
各自独立地是h、a2、卤素、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c9杂环基、任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
2-c9杂芳基、任选取代的c
2-c6烯基、任选取代的c
2-c6杂烯基、任选取代的-o-c
3-c6碳环基、羟基、巯基或任选取代的氨基；或r
a1
和r
a2
、r
a2
和r
a3
、和/或r
a3
和r
a4
与各自连接的碳原子一起组合以形成；并且是任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c9杂芳基或c
2-c9杂环基，其中任一个任选被a2取代，其中r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
之一是a2，或被a2取代，或其药学上可接受的盐。
51.在一些实施方案中，r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
各自独立地是h、a2、卤素、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c
9 杂环基、任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
2-c
9 杂芳基、任选取代的c
2-c6烯基、任选取代的c
2-c6杂烯基、羟基、巯基或任选取代的氨基；或r
a1
和r
a2
、r
a2
和r
a3
、和/或r
a3
和r
a4
与各自连接的碳原子一起组
合以形成；并且是任选取代的c
6-c
10 芳基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c9杂芳基或c
2-c9杂环基，其中任一个任选被a2取代，其中r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
之一是a2，或被a2取代，或其药学上可接受的盐。
52.在一些实施方案中，r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
各自是h、a2、卤素、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的-o-c
3-c6碳环基、羟基、任选取代的氨基；或r
a1
和r
a2
、r
a2
和r
a3
、或r
a3
和r
a4
与各自连接的碳原子一起组合以形成；并且是任选取代的c
2-c9杂环基，其任选被a2取代，其中r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
之一是a2，或被a2取代。
53.在一些实施方案中，r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
各自独立地是h, a2, f,
ꢀꢀ
或r
a1
和r
a2
、r
a2
和r
a3
、或r
a3
和r
a4
与各自连接的碳原子一起组合以形成；并且是任选取代的c
2-c9杂环基，其任选被a2取代，其中r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
之一是a2，或被a2取代。
54.在一些实施方案中，r
a1
是a2。在一些实施方案中，r
a2
是a2。在一些实施方案中，r
a3
是a2。在一些实施方案中，r
a4
是a2。在一些实施方案中，r
a5
是a2。
55.在一些实施方案中，r
a5
是h或任选取代的c
1-c6烷基。
56.在一些实施方案中，r
a5
是h或。在一些实施方案中，r
a5
是h。在一些实施方案中，r
a5
是。
57.在一些实施方案中，y1是。在一些实施方案中，y
1 是。在一些实施方案中，y1是。
58.在一些实施方案中，r
a6
和r
a7
各自独立地是h, f,
ꢀꢀ
；或r
a6
和r
a7
与各自连接的碳原子一起组合以形成。
59.在一些实施方案中，y
1 是。
60.在一些实施方案中，式a的结构具有式a1的结构：或其药学上可接受的盐。
61.在一些实施方案中，式a的结构具有式a2的结构：或其药学上可接受的盐。
62.在一些实施方案中，式a的结构具有式a3的结构：或其药学上可接受的盐。
63.在一些实施方案中，式a的结构具有式a4的结构：或其药学上可接受的盐。
64.在一些实施方案中，式a的结构具有式a5的结构：
或其药学上可接受的盐。
65.在一些实施方案中，式a的结构具有式a6的结构：或其药学上可接受的盐。
66.在一些实施方案中，式a的结构具有式a7的结构：或其药学上可接受的盐。
67.在一些实施方案中，式a的结构具有式a8的结构：或其药学上可接受的盐。
68.在一些实施方案中，式a的结构具有式a9的结构：或其药学上可接受的盐。
69.在一些实施方案中，式a的结构具有式a10的结构：
或其药学上可接受的盐。
70.在一些实施方案中，其中式a的结构是在一些实施方案中，其中式a的结构是在一些实施方案中，其中式a的结构是在一些实施方案中，其中式a的结构是，或其衍生物或类似物。
71.在一些实施方案中，式a的结构是在一些实施方案中，式a的结构是。
72.在一些实施方案中，式a的结构是在一些实施方案中，式a的结构是, 或其衍生物或类似物。
73.在一些实施方案中，是，其中r
a9 是h、a2、任选取代的c
1-c
6 烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基。
74.在一些实施方案中，式a的结构是
ꢀꢀꢀ
。
75.在一些实施方案中，r
a9
是h、a2或任选取代的c
1-c6烷基。在一些实施方案中，r
a9
是h、a2或甲基。在一些实施方案中，r
9a
是h。在一些实施方案中，r
9a
是甲基。在一些实施方案中，r
a9
是a2。
76.在一些实施方案中，式a的结构是
。
77.在一些实施方案中，式aa的结构具有式b的结构：其中r
a5
是h、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
各自独立地是h、a2、卤素、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c9杂环基、任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
2-c9杂芳基、任选取代的c
2-c6烯基、任选取代的c
2-c6杂烯基、任选取代的-o-c
3-c6碳环基、羟基、巯基或任选取代的氨基；或r
a1
和r
a2
、r
a2
和r
a3
、和/或r
a3
和r
a4
与各自连接的碳原子一起组合以形成；并且是任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c9杂芳基或c
2-c9杂环基，其中任一个任选被a2取代，其中r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
之一是a2，或被a2取代，或其药学上可接受的盐。
78.在一些实施方案中，r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
各自是h、a2、卤素、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的-o-c
3-c6碳环基、羟基、任选取代的氨基；或r
a1
和r
a2
、r
a2
和r
a3
、或r
a3
和r
a4
与各自连接的碳原子一起组合以形成；并且是任选取代的c
2-c9杂环基，其任选被a2取代，其中r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
之一是a2，或被a2取代。
79.在一些实施方案中，r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
各自独立地是h, a2, f,
ꢀꢀ
；或r
a1
和r
a2
、r
a2
和r
a3
、或r
a3
和r
a4
与各自连接的碳原子一起组合以形成；并且是任选取代的c
2-c9杂环基，其任选被a2取代，其中r
a1
、r
a2
、r
a3
和r
a4
之一是a2，或被a2取代。
80.在一些实施方案中，r
a1
是a2。在一些实施方案中，r
a2
是a2。在一些实施方案中，r
a3
是a2。在一些实施方案中，r
a4
是a2。在一些实施方案中，r
a5
是a2。
81.在一些实施方案中，r
a5
是h或任选取代的c
1-c6烷基。
82.在一些实施方案中，r
a5 是h或。在一些实施方案中，r
a5
是h。在一些实施方案中，r
a5
是。
83.在一些实施方案中，式b的结构具有式b1的结构：或其药学上可接受的盐。
84.在一些实施方案中，式b的结构具有式b2的结构：或其药学上可接受的盐。
85.在一些实施方案中，式b的结构具有式b3的结构：或其药学上可接受的盐。
86.在一些实施方案中，式b的结构具有式b4的结构：或其药学上可接受的盐。
87.在一些实施方案中，式b的结构是
。在一些实施方案中，式b的结构是。在一些实施方案中，式b的结构是。
88.在一些实施方案中，泛素连接酶结合部分包括von hippel-lindau配体。
89.在一些实施方案中，von hippel-lindau配体具有以下结构：,或其衍生物或类似物。
90.在一些实施方案中，降解部分包括式c的结构：其中r
b1
和r
b9
独立地是h、a2、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；r
b2
是h、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；r
b3
是a2、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
1-c6烷基c
3-c
10
碳环基或任选取代的c
1-c6烷基c
6-c
10
芳基；r
b4
是h、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
1-c6烷基c
3-c
10
碳环基或任选取代的c
1-c6烷基c
6-c
10
芳基；r
b5
是h、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；v2是0、1、2、3或4；r
b6 各自独立地是卤素、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c9杂环基、任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
2-c9杂芳基、任选取代的c
2-c6烯基、任选取代的c
2-c6杂烯基、羟基、巯基或任选取代的氨基；且r
b7
和r
b8
各自独立地是h、卤素、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
6-c
10
芳基，
其中r
b1
、r
b3
、r
b6
和r
b9
之一是a2，或其药学上可接受的盐。
91.在一些实施方案中，式c的结构是在一些实施方案中，式c的结构是，或其衍生物或类似物。在一些实施方案中，式c的结构是。在一些实施方案中，式c的结构是。在一些实施方案中，式c的结构是。在一些实施方案中，式c的结构是。
92.在一些实施方案中，降解物部分是国际专利公开wo2019/195201中描述的降解物部分，其降解物部分通过引用并入本文。
93.在一些实施方案中，降解物部分包括式d的结构：其中a2是b和连接基之间的键；r
c1
、r
c2
和r
c7
各自独立地是h、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；r
c3
是任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
6-c
10
芳基、 任选取代的c
1-c6烷基c
3-c
10
碳环基或任选取代的c
1-c6烷基c
6-c
10
芳基；r
c5
是任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
1-c6烷基c
3-c
10
碳环基或任选取代的c
1-c6烷基c
6-c
10
芳基；v3是0、1、2、3或4；rc8
各自独立地是卤素、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c9杂环基、任选取代的c
6-c
10
芳基、任选取代的c
2-c9杂芳基、任选取代的c
2-c6烯基、任选取代的c
2-c6杂烯基、羟基、巯基或任选取代的氨基；v4是0、1、2、3或4；且r
c9
各自独立地是卤素、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c
9 杂环基、任选取代的c
6-c
10 芳基、任选取代的c
2-c
9 杂芳基、任选取代的c
2-c
6 烯基、任选取代的c
2-c
6 杂烯基、羟基、巯基或任选取代的氨基，或其药学上可接受的盐。
94.在一些实施方案中，式d的结构是 ，或其衍生物或类似物。
95.在一些实施方案中，降解物部分包括式e的结构：其中a2是b和连接基之间的键；r
c10
和r
c11
各自独立地是h、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
6-c
10 芳基、任选取代的c
1-c6烷基c
3-c
10
碳环基或任选取代的c
1-c6烷基c
6-c
10
芳基；v5是0、1、2、3或4；r
c12
各自独立地是卤素、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c
9 杂环基、任选取代的c
6-c
10 芳基、任选取代的c
2-c
9 杂芳基、任选取代的c
2-c
6 烯基、任选取代的c
2-c
6 杂烯基、羟基、巯基或任选取代的氨基v6是0、1、2、3或4；且r
21
各自独立地是卤素、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基、任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c
2-c
9 杂环基、任选取代的c
6-c
10 芳基、任选取代的c
2-c
9 杂芳
基、任选取代的c
2-c
6 烯基、任选取代的c
2-c
6 杂烯基、羟基、巯基或任选取代的氨基，或其药学上可接受的盐。
96.在一些实施方案中，式e的结构是，或其衍生物或类似物。
97.在一些实施方案中，降解部分包括式fa的结构：其中是 ，或被a2取代和被一个或多个独立地选自h、r
ff1
和氧代的基团取代的双环部分；是单键或双键；u2是0、1、2或3；a2是降解物和连接基之间的键；y
fa
是cr
fbrfc
、c
═
o、c
═
s、c
═
ch2、so2、s(o)、p(o)o烷基、p(o)nh烷基、p(o)n(烷基)2、p(o)烷基、p(o)oh, p(o)nh2；y
fb
是nh、nr
ff1
、ch2、chr
ff1
、c(r
ff1
)2、o或s；y
fc
是cr
fdrfe
、c
═
o、c
═
s、c
═
ch2、so2、s(o)、p(o)o烷基、p(o)nh烷基、p(o)n(烷基)2、p(o)烷基、p(o)oh、p(o)nh2;r
fb
、r
fc
、r
fd
和r
fe
各自独立地是h、烷基、脂族基团、杂脂族基团、芳基、杂芳基、碳环基、羟基、烷氧基、氨基、—nh烷基、或—n烷基2；或r
fb
和r
fc
与各自连接的碳原子一起组合以形成3-、4-、5-或6-元螺亚碳环基，或包含1或2个选自n和o的杂原子的4-、5-或6-元螺亚杂环基；或r
fd
和r
fe
与各自连接的碳原子一起组合以形成3-、4-、5-或6-元螺亚碳环基，或
包含1或2个选自n和o的杂原子的4-、5-或6-元螺亚杂环基；或r
fd
和r
fb
与各自连接的碳原子一起组合以形成1, 2, 3或4碳桥环；y
fd
和y
ff
各自独立地是ch2, chr
ff2
, c(r
ff2
)2, c(o), n, nh, nr
ff3
, o, s或s(o)；y
fe 是键或连接至y
fd
和y
ff
的二价基团，其包含形成3至8-元环的1至5个相连碳原子，其中1、2或3个碳原子可以被氮、氧或硫原子替代 ；其中环原子之一被a2取代并且其它环原子被一个或多个独立地选自h和r
ff1
的基团取代；且其中y
fe
的相连原子可以通过单键或双键连接；r
ff1
各自独立地是h、烷基、烯基、炔基、脂族基团、杂脂族基团、碳环基、卤素、羟基、氨基、氰基、烷氧基、芳基、杂芳基、杂环基、烷基氨基、烷基羟基或卤代烷基；r
ff2
各自独立地是烷基、烯基、炔基、卤素、羟基、烷氧基、叠氮基、氨基、—c(o)h、—c(o)oh、—c(o)(脂族基团，包括烷基)、—c(o)o(脂族基团，包括烷基)、—nh(脂族基团，包括烷基)、—n(脂族基团，包括烷基)(脂族基团，包括烷基)、—nhso2烷基、—n(烷基)so2烷基、—nhso2芳基、—n(烷基)so2芳基、—nhso2烯基、—n(烷基)so2烯基、—nhso2炔基、—n(烷基)so2炔基、脂族基团、杂脂族基团、芳基、杂芳基、杂环基、碳环基、氰基、硝基、亚硝基、—sh—s烷基或卤代烷基；且r
ff3
是烷基、烯基、炔基、—c(o)h, —c(o)oh, —c(o)烷基或—c(o)o烷基，其中如果y
fd
或y
ff
被a2取代，则y
fe
是键，或其药学上可接受的盐。
98.在一些实施方案中，式fa的化合物具有式fa1的结构：或其药学上可接受的盐。
99.在一些实施方案中，降解部分包括式fb的结构：其中
是，或被a2取代和被一个或多个独立地选自h、r
ff1
和氧代的基团取代的双环部分；a2是降解物和连接基之间的键；y
fa
是cr
fbrfc
、c
═
o、c
═
s、c
═
ch2、so2、s(o)、p(o)o烷基、p(o)nh烷基、p(o)n(烷基)2、p(o)烷基、p(o)oh, p(o)nh2；y
fb
和y
fg
各自独立地是nh、nr
ff1
、ch2、chr
ff1
、c(r
ff1
)2、o或s；y
fc
是cr
fdrfe
、c
═
o、c
═
s、c
═
ch2、so2、s(o)、p(o)o烷基、p(o)nh烷基、p(o)n(烷基)2、p(o)烷基、p(o)oh, p(o)nh2；r
fb
、r
fc
、r
fd
、r
fe
、r
ff
和r
fg
各自独立地是h、烷基、脂族基团、杂脂族基团、芳基、杂芳基、碳环基、羟基、烷氧基、氨基、—nh烷基或—n烷基2；或r
fb
和r
fc
与各自连接的碳原子一起组合以形成3-、4-、5-或6-元螺亚碳环基，或包含1或2个选自n和o的杂原子的4-、5-或6-元螺亚杂环基；或r
fd
和r
fe
与各自连接的碳原子一起组合以形成3-、4-、5-或6-元螺亚碳环基，或包含1或2个选自n和o的杂原子的4-、5-或6-元螺亚杂环基；或r
ff
和r
fg
与各自连接的碳原子一起组合以形成3-、4-、5-或6-元螺亚碳环基，或包含1或2个选自n和o的杂原子的4-、5-或6-元螺亚杂环基；或r
fd
和r
fb
与各自连接的碳原子一起组合以形成1, 2, 3或4碳桥环；或r
fd
和r
ff
与各自连接的碳原子一起组合以形成1, 2, 3或4碳桥环；或r
fd
和r
fg
与各自连接的碳原子一起组合以形成1, 2, 3或4碳桥环；y
fd
和y
ff
各自独立地是ch2、chr
ff2
、c(r
ff2
)2、c(o)、n、nh、nr
ff3
、o、s或s(o)；y
fe
是键或连接至y
fd
和y
ff
的二价基团，其包含形成3至8-元环的1至5个相连碳原子其中1、2或3个碳原子可以被氮、氧或硫原子替代；其中环原子之一被a2取代并且其它环原子被一个或多个独立地选自h和r
ff1
的基团取代；且其中y
fe
的相连原子可以通过单键或双键连接；r
ff1
各自独立地是h、烷基、烯基、炔基、脂族基团、杂脂族基团、碳环基、卤素、羟基、氨基、氰基、烷氧基、芳基、杂芳基、杂环基、烷基氨基、烷基羟基或卤代烷基；r
ff2
各自独立地是烷基、烯基、炔基、卤素、羟基、烷氧基、叠氮基、氨基、—c(o)h, —c(o)oh, —c(o)(脂族基团，包括烷基)、—c(o)o(脂族基团，包括烷基)、—nh(脂族基团，包括烷基)、—n(脂族基团，包括烷基)(脂族基团，包括烷基)、—nhso2烷基、—n(烷基)so2烷基、—nhso2芳基、—n(烷基)so2芳基、—nhso2烯基、—n(烷基)so2烯基、—nhso2炔基、—n(烷基)so2炔基、脂族基团、杂脂族基团、芳基、杂芳基、杂环基、碳环基、氰基、硝基、亚硝基、—sh—s烷基或卤代烷基；且rff3
是烷基、烯基、炔基、—c(o)h、—c(o)oh、—c(o)烷基或—c(o)o烷基，其中如果y
fd
和y
ff
被a2取代，则y
fe
是键，或其药学上可接受的盐。
100.在一些实施方案中，式fb的化合物具有式fb1的结构：或其药学上可接受的盐。
101.在一些实施方案中，降解部分包括式f1的结构：其中a2是降解物和连接基之间的键；且r
f1
是不存在或o，或其药学上可接受的盐。
102.在一些实施方案中，r
f1
不存在。在一些实施方案中，r
f1
是o。
103.在一些实施方案中，式f1的结构是在一些实施方案中，式f1的结构是。
104.在一些实施方案中，降解部分包括式f2的结构：其中a2是降解物和连接基之间的键；且y2是ch2或nh，或其药学上可接受的盐。
105.在一些实施方案中，y2是nh。在一些实施方案中，y2是ch2。
106.在一些实施方案中，式f2的结构是。
107.在一些实施方案中，降解部分包括式g的结构：
其中a2是降解物和连接基之间的键；且y3是ch2或nh，或其药学上可接受的盐。
108.在一些实施方案中，y3是nh。在一些实施方案中，y3是ch2。
109.在一些实施方案中，式g的结构是。
110.降解部分还可包括例如wo2017/197036、wo2019/204354、wo2019/236483、wo2020/010177和wo2020/010227中发现的结构，其各自通过引用以其整体并入本文。
111.在一些实施方案中，连接基具有式iii的结构：其中a1是a和连接基之间的键；a2是连接基和b之间的键；b1、b2、b3和b4各自独立地是任选取代的c
1-c
2 烷基、任选取代的c
1-c
2 杂烷基、o、s、s(o)2或nrn；rn各自独立地是h、任选取代的c1–
4 烷基、任选取代的c2–
4 烯基、任选取代的c2–
4 炔基、任选取代的c2–
6 杂环基、任选取代的c6–
12 芳基或任选取代的c1–7杂烷基；c1和c2各自独立地是羰基、硫代羰基、磺酰基或磷酰基；f、g、h、i、j和k各自独立地是0或1；且d是任选取代的c1–
12 烷基、任选取代的c2–
12 烯基、任选取代的c2–
12
炔基、任选取代的c
2-c
12
聚乙二醇或任选取代的c1–
12 杂烷基、或连接a
1-(b1)
f-(c1)
g-(b2)
h-和-(b3)
i-(c2)
j-(b4)k–
a2的化学键。
112.在一些实施方案中，b1、b2、b3和b4各自独立地是任选取代的c
1-c
4 烷基、任选取代的c
1-c
4 杂烷基或nrn。
113.在一些实施方案中，rn各自独立地是h或任选取代的c
1-c4烷基。
114.在一些实施方案中，rn各自独立地是h或甲基。
115.在一些实施方案中，b1和b4各自独立地是各自独立地是。
116.在一些实施方案中，b1是。
117.在一些实施方案中，c1和c2各自独立地是。
118.在一些实施方案中，c1是。
119.在一些实施方案中，b2是nrn。在一些实施方案中，b2是任选取代的c
1-c4烷基。
120.在一些实施方案中，f是0。在一些实施方案中，f是1。在一些实施方案中，g是1。在一些实施方案中，h是0。在一些实施方案中，h是1。在一些实施方案中，i是0。在一些实施方案中，j是0。在一些实施方案中，k是0。
121.在一些实施方案中，d是任选取代的c1–
12 烷基、任选取代的c
2-c
12
聚乙二醇或任选取代的c1–
12
杂烷基。在一些实施方案中，d是连接a
1-(b1)
f-(c1)
g-(b2)
h-和-(b3)
i-(c2)
j-(b4)k–
a2的化学键。
122.在一些实施方案中，连接基具有以下结构：在一些实施方案中，连接基具有以下结构：在一些实施方案中，连接基具有以下结构：其中x1是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14；x2是0、1、2、3、4、5或6；x3是1或2；x4是1
或2；w 是是；r
x1
和r
x2
各自独立地是h、卤素、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基或任选取代的c
3-c6碳环基，或 r
x1
和r
x2
与各自连接的碳原子一起组合以形成任选取代的c
3-c6碳环基或任选取代的c
2-c5杂环基；且r
y1
、r
y2
、r
y3
和r
y4
各自独立地是 h、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基或任选取代的c
3-c6碳环基。
123.在一些实施方案中，w是。在一些实施方案中，w是。在一些实施方案中，w是。
124.在一些实施方案中，r
x1
和r
x2 各自独立地是h、卤素、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基或任选取代的c
3-c6碳环基。
125.在一些实施方案中，r
x1
和r
x2
各自独立地是h或任选取代的c
1-c6烷基。
126.在一些实施方案中，r
x1
和r
x2
各自独立地是h或甲基。
127.在一些实施方案中，r
x1
和r
x2
与各自连接的碳原子一起组合以形成任选取代的c
3-c6碳环基或任选取代的c
2-c5杂环基。
128.在一些实施方案中，r
x1
和r
x2
与各自连接的碳原子一起组合以形成任选取代的c
3-c6碳环基。
129.在一些实施方案中，r
x1
和r
x2
与各自连接的碳原子一起组合以形成环丙基。
130.在一些实施方案中，r
y1
、r
y2
、r
y3
和r
y4
各自独立地是h或任选取代的c
1-c6烷基。
131.在一些实施方案中，r
y1
、r
y2
、r
y3
和r
y4
各自独立地是h或甲基。
132.在一些实施方案中，连接基具有以下结构：
。
133.在一些实施方案中，连接基具有式iv的结构：其中a1是连接基和a之间的键；a2是b和连接基之间的键；m1、m2、n1、n2、o1、o2、p1和p2各自独立地是0或1；e1和e2各自独立地是o、s、nrn、任选取代的c1–
10 烷基、任选取代的c2–
10 烯基、任选取代的c2–
10
炔基、任选取代的c
2-c
10
聚乙二醇或任选取代的c1–
10
杂烷基；e3各自独立地是任选取代的c1–
10 烷基、任选取代的c1–
10 杂烷基、o、s或nrn；rn各自独立地是h、任选取代的c1–
4 烷基、任选取代的c2–
4 烯基、任选取代的c2–4炔基、任选取代的c2–
6 杂环基、任选取代的c6–
12 芳基或任选取代的c1–7杂烷基；c3和c4各自独立地是羰基、硫代羰基、磺酰基或磷酰基；f1、f2和f3各自独立地是任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c2–
10 杂环基、任选取代的c
6-c
10 芳基或任选取代的c
2-c9杂芳基。
134.在一些实施方案中，连接基具有式iva的结构：
。
135.在一些实施方案中，连接基具有式ivb的结构：。
136.在一些实施方案中，连接基具有式ivc的结构：。
137.在一些实施方案中，连接基具有式ivd的结构：。
138.在一些实施方案中，连接基具有式ive的结构：。
139.在一些实施方案中，连接基具有式ivf的结构：，其中a1是连接基和a之间的键；a2是b和连接基之间的键；m1、m2、n1、o1、o2、p1和p2各自独立地是0或1；e1和e2各自独立地是o、s、nrn、任选取代的c1–
10 烷基、任选取代的c2–
10 烯基、任选取代的c2–
10
炔基、任选取代的c
2-c
10
聚乙二醇或任选取代的c1–
10
杂烷基；e3独立地是任选取代的c1–
2 烷基、任选取代的c1–
2 杂烷基、o、s或nrn；rn各自独立地是h、任选取代的c1–
4 烷基、任选取代的c2–
4 烯基、任选取代的c2–4炔基、任选取代的c2–
6 杂环基、任选取代的c6–
12 芳基或任选取代的c1–7杂烷基；c3和c4各自独立地是羰基、硫代羰基、磺酰基或磷酰基；f1、f2和f3各自独立地是任选取代的c
3-c
10
碳环基、任选取代的c2–
10 杂环基、任选取代的c
6-c
10 芳基或任选取代的c
2-c9杂芳基。
140.在一些实施方案中， rn各自独立地是h或任选取代的c1–
4 烷基。
141.在一些实施方案中， rn各自独立地是h或甲基。
142.在一些实施方案中， e1和e2各自独立地是nrn、任选取代的c1–
10 烷基、任选取代的c
2-c
10
聚乙二醇或任选取代的c1–
10
杂烷基。
143.在一些实施方案中， e1和e2各自独立地是任选取代的c1–
10
烷基或任选取代的c1–
10
杂烷基。
144.在一些实施方案中，e1是
，其中z1是0、1或2；z2是0、1、2、3、4、5或6；r
z1
和r
z2
各自独立地是h、卤素、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基或任选取代的c
3-c6碳环基，或r
x1
和r
x2
与各自连接的碳原子一起组合以形成任选取代的c
3-c6碳环基或任选取代的c
2-c5杂环基；且ra和rb各自独立地是h、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基或任选取代的c
3-c6碳环基。
145.在一些实施方案中，z1是0。在一些实施方案中，z1是1。
146.在一些实施方案中， r
z1
和r
z2
各自独立地是h、卤素、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基或任选取代的c
3-c6碳环基。
147.在一些实施方案中， r
z1
和r
z2
各自独立地是h或任选取代的c
1-c6烷基。
148.在一些实施方案中， r
z1
和r
z2
各自独立地是h或甲基。
149.在一些实施方案中，r
z1
和r
z2
与各自连接的碳原子一起组合以形成任选取代的c
3-c6碳环基或任选取代的c
2-c5杂环基。
150.在一些实施方案中，r
z1
和r
z2
与各自连接的碳原子一起组合以形成任选取代的c
3-c6碳环基。
151.在一些实施方案中，r
z1
和r
z2
与各自连接的碳原子一起组合以形成环丙基。
152.在一些实施方案中， ra和rb各自独立地是h或任选取代的c
1-c6烷基。
153.在一些实施方案中， ra和rb各自独立地是h或甲基。
154.在一些实施方案中，e2是是是是，其中z3是0、1、2、3、4、5或6；z4是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12；z5是0、1、2、3或4；z6是1、2、3或4；r
z3
和r
z4
各自独立地是h、卤素、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基或任选取代的c
3-c6碳环基，或r
x1
和r
x2
与各自连接的碳原子一起组合以形成任选取代的c
3-c6碳环基或任选取代的c
2-c5杂环基；且rc是h、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基或任选取代的c
3-c6碳环基。
155.在一些实施方案中，z3是0、1、2或3。
156.在一些实施方案中，z4是0、1、2、3、4、5或6.在一些实施方案中，z5是0、1或2。
157.在一些实施方案中，z6是1或2。
158.在一些实施方案中， r
z3
和r
z4
各自独立地是h、卤素、任选取代的c
1-c
6 烷基、任选取代的c
1-c
6 杂烷基或任选取代的c
3-c6碳环基。
159.在一些实施方案中， r
z3
和r
z4
各自独立地是h或任选取代的c
1-c6烷基。
160.在一些实施方案中， r
z3
和r
z4
各自独立地是h或甲基。
161.在一些实施方案中，r
z3
和r
z4
与各自连接的碳原子一起组合以形成任选取代的c
3-c6碳环基或任选取代的c
2-c5杂环基。
162.在一些实施方案中，r
z3
和r
z4
与各自连接的碳原子一起组合以形成任选取代的c
3-c6碳环基。
163.在一些实施方案中，r
z3
和r
z4
与各自连接的碳原子一起组合以形成环丙基。
164.在一些实施方案中，rc是h或任选取代的c
1-c6烷基。
165.在一些实施方案中，rc是h或甲基。
166.在一些实施方案中，e3是任选取代的c1–
2 烷基、任选取代的c1–2杂烷基。在一些实施方案中，e3是o、s或nrn。
167.在一些实施方案中，e3是任选取代的c1–2烷基。
168.在一些实施方案中，e3是。
169.在一些实施方案中， f1、f2或f3各自独立地是任选取代的c
3-c
10
碳环基。在一些实施方案中，c
3-c
10
碳环基是单环。在一些实施方案中， c
3-c
10
碳环基是多环。在一些实施方案中， c
3-c
10
碳环基是双环。在一些实施方案中，c
3-c
10
碳环基是桥接的。在一些实施方案中，c
3-c
10
碳环基是稠合的。在一些实施方案中， c
3-c
10
碳环基是螺环。
170.在一些实施方案中，c
3-c
10
碳环基是碳环基是。在一些实施方案中，c
3-c
10
碳环基是。
171.在一些实施方案中，f1、f2或f3各自独立地是任选取代的c
2-c6杂环基。在一些实施方案中，c2–
c9杂环基是单环。在一些实施方案中， c2–
c9杂环基是多环。在一些实施方案中，c2–
c9杂环基是双环。在一些实施方案中， c2–
c9杂环基是桥接的。在一些实施方案中，c2–
c9杂环基是稠合的。在一些实施方案中，c2–
c9杂环基是螺环。
172.在一些实施方案中，c
2-c6杂环基是杂环基是。在一些实施方案中，c
2-c6杂环基是。
173.在一些实施方案中，f1、f2或f3各自独立地是任选取代的c
6-c
10
芳基。在一些实施方案中，f1、f2或f3各自独立地是任选取代的c
2-c9杂芳基。
174.在一些实施方案中，c3和c4各自独立地是。
175.在一些实施方案中，c3是。
176.在一些实施方案中，连接基具有以下结构：
。
177.在一些实施方案中，该化合物是表1中化合物1-169的任一种，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，该化合物是表1中化合物170-297的任一种，或其药学上可接受的盐。
178.在一个方面中，该化合物是表1中化合物1-297的任一种，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，该化合物是表1中化合物1-169的任一种，或其药学上可接受的盐。
179.在一个方面，本发明的特征在于一种药物组合物，其包含任何前述化合物和药学上可接受的赋形剂。
180.在另一个方面，本发明的特征在于降低细胞中baf复合物的活性的方法，该方法包括使细胞与有效量的任何前述化合物或其药物组合物接触。
181.在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
182.在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的baf复合物相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
183.在一些实施方案中，所述baf复合物相关病症是癌症。
184.在另一方面，本发明的特征是一种抑制brm的方法，所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
185.在另一方面，本发明的特征是一种抑制brg1的方法，所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
186.在另一方面，本发明的特征是一种抑制brm和brg1的方法，所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
187.在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的brg1功能丧失性突变相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
188.在一些实施方案中，所述brg1功能丧失性突变相关病症是癌症。在其它实施方案中，所述受试者被确定为患有brg1功能丧失性病症，例如被确定为患有brg1功能丧失性癌症(例如，所述癌症已被确定为包括具有brg1功能丧失的癌细胞)。
189.在另一方面，本发明的特征是一种诱导细胞的细胞凋亡的方法，所述方法包括使
所述细胞与有效量的前述化合物中的任一种（例如brm/brg1 双重抑制剂化合物或 brm 选择性化合物）或其药物组合物接触。
190.在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
191.在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
192.在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌、食道胃癌、胰腺癌、肝胆管癌、软组织肉瘤、卵巢癌、头颈癌、肾细胞癌、骨癌、非霍奇金淋巴瘤、小细胞肺癌、前列腺癌、胚胎肿瘤、生殖细胞瘤、宫颈癌、甲状腺癌、唾液腺癌、胃肠神经内分泌肿瘤、子宫肉瘤、胃肠道间质瘤、cns癌症、胸腺肿瘤、肾上腺皮质癌、阑尾癌、小肠癌或阴茎癌。
193.在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌或阴茎癌。
194.在任何前述方法的一些实施方案中，癌症是耐药性癌症或未能对先前疗法(例如，维罗菲尼、达卡巴嗪、ctla4抑制剂、pd1抑制剂、干扰素疗法、braf抑制剂、mek抑制剂、放射疗法、替莫唑胺、伊立替康、car-t疗法、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、他莫昔芬、卡培他滨、多西他赛、铂剂如卡铂、紫杉烷类如紫杉醇和多西他赛、alk抑制剂、met抑制剂、培美曲塞、蛋白结合紫杉醇、多柔比星、吉西他滨、贝伐单抗、艾日布林、来那替尼、parp抑制剂、布拉斯坦、mtor抑制剂、托泊替康、吉西他滨、vegfr2抑制剂、叶酸受体拮抗剂、福司单抗、福司布雷布林或pd-l1抑制剂)作出应答。
195.在任何上述方法的一些实施方案中，癌症具有或已经确定具有一个或多个brg1突变。在任何上述方法的一些实施方案中，一个或多个brg1突变是纯合的。在任何上述方法的一些实施方案中，一个或多个brg1突变在蛋白质的atp酶催化结构域中。在任何上述方法的一些实施方案中，一个或多个brg1突变是brg1的c-末端缺失。在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症不具有或已确定不具有表皮生长因子受体(egfr)突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症不具有或已确定不具有间变性淋巴瘤激酶(alk)驱动突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症具有或已经确定具有kras突变。
196.在另一方面，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的baf相关病症(例如，癌症或病毒感染)的方法。所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药学上可接受的盐或任何前述药物组合物接触。在一些实施方案中，所述病症是病毒感染。在一些实施方案中，所述病毒感染是被以下病毒感染：逆转录病毒科如慢病毒(例如，人免疫缺陷病毒(hiv)和δ-逆转录病毒属(例如，人t细胞白血病病毒i (htlv-i)、人t细胞白血病病毒ii (htlv-ii))、嗜肝dna病毒科(例如，乙型肝炎病毒(hbv))、黄病毒科(例如，丙型肝炎病毒(hcv))、腺病毒科(例如，人腺病毒)、疱疹病毒科(例如，人巨细胞病毒(hcmv)、爱泼斯坦-巴尔病毒、单纯疱疹病毒1 (hsv-1)、单纯疱疹病毒2 (hsv-2)、人疱疹病毒6 (hhv-6)、疱疹病毒k*、cmv、水痘-带状疱疹病毒)、乳头瘤病毒科(例如，人乳头瘤病毒(hpv、hpv e1))、细小病毒科(例如，细小病毒b19)、多瘤病毒科(例如，jc病毒和bk病毒)、副粘病毒科(例如，麻疹病毒)、披膜病毒科(例如，风疹病毒)。在一些实施方案中，所述疾病症是科芬-西里斯(coffin siris)、神经纤维瘤病(例如，nf-1、nf-2或神经鞘瘤病)或多发性脑膜瘤。
197.在另一方面，本公开提供了一种用于治疗有需要的受试者的病毒感染的方法。所
述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药学上可接受的盐或任何前述药物组合物。在一些实施方案中，所述病毒感染是被以下病毒感染：逆转录病毒科如慢病毒(例如，人免疫缺陷病毒(hiv)和δ-逆转录病毒属(例如，人t细胞白血病病毒i (htlv-i)、人t细胞白血病病毒ii (htlv-ii))、嗜肝dna病毒科(例如，乙型肝炎病毒(hbv))、黄病毒科(例如，丙型肝炎病毒(hcv))、腺病毒科(例如，人腺病毒)、疱疹病毒科(例如，人巨细胞病毒(hcmv)、爱泼斯坦-巴尔病毒、单纯疱疹病毒1 (hsv-1)、单纯疱疹病毒2 (hsv-2)、人疱疹病毒6 (hhv-6)、疱疹病毒k*、cmv、水痘-带状疱疹病毒)、乳头瘤病毒科(例如，人乳头瘤病毒(hpv、hpv e1))、细小病毒科(例如，细小病毒b19)、多瘤病毒科(例如，jc病毒和bk病毒)、副粘病毒科(例如，麻疹病毒)或披膜病毒科(例如，风疹病毒)。
198.在任何上述方面的一些实施方案中，所述化合物是brm选择性化合物。在一些实施方案中，该brm选择性化合物对brm的水平和/或活性的抑制是该化合物对brg1的水平和/或活性的抑制的至少10倍，和/或该化合物与brm的结合是该化合物与brg1的结合的至少10倍。例如，在一些实施方案中，brm选择性化合物的ic
50
或ip
50
比对brg1的ic
50
或ip
50
低至少10倍。在任何上述方面的一些实施方案中，所述化合物是brm/brg1双重抑制剂化合物。在一些实施方案中，brm/brg1双重抑制剂化合物对brm和brg1具有相似的活性(例如，化合物对brm和brg1的活性在10倍以内(例如，小于5倍，小于2倍) 。在一些实施方案中，brm/brg1双重抑制剂化合物对brm的活性更大。在一些实施方案中，brm/brg1双重抑制剂化合物对brg1的活性更大。例如，在一些实施方案中，brm/brg1双重抑制剂化合物对brm的ic
50
或ip
50
在对brg1的ic
50
或ip
50
的10倍以内。
199.在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
200.在另一方面，本发明的特征是一种减少有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的肿瘤生长的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
201.在另一方面，本发明的特征是一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的转移进展的方法，所述方法包括施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
202.在另一方面，本发明的特征是一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的转移定殖（例如转移定殖到肝和/或大脑）的方法，所述方法包括施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
203.在另一方面，本发明的特征是一种降低黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症细胞中的brg1和/或brm的水平和/或活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。
204.在任何上述方面的一些实施方案中，黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液细胞在受试者体内。
205.在任何上述方面的一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使brg1的水平和/或活性降低至少5%(例如，6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物
的有效量使brg1的水平和/或活性降低至少50%(例如，55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)。在一些实施方案中，所述化合物的有效量使brg1的水平和/或活性降低至少90%(例如，91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%)。
206.在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使brg1的水平和/或活性降低至少5%(例如6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)保持至少12小时(例如，14小时、16小时、18小时、20小时、22小时、24小时、30小时、36小时、48小时、72小时或更长时间)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使brg1的水平和/或活性降低至少5%(例如，6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)保持至少4天(例如，5天、6天、7天、14天、28天或更长时间)。
207.在任何上述方面的一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使brm的水平和/或活性降低至少5%(例如，6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使brm的水平和/或活性降低至少50%(例如，55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)。在一些实施方案中，所述化合物的有效量使brm的水平和/或活性降低至少90%(例如，91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%)。
208.在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使brm的水平和/或活性降低至少5%(例如6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)保持至少12小时(例如，14小时、16小时、18小时、20小时、22小时、24小时、30小时、36小时、48小时、72小时或更长时间)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使brm的水平和/或活性降低至少5%(例如，6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)保持至少4天(例如，5天、6天、7天、14天、28天或更长时间)。
209.在一些实施方案中，所述受试者患有癌症。在一些实施方案中，所述癌症表达brg1和/或brm蛋白，和/或所述细胞或受试者已被鉴定为表达brg1和/或brm。在一些实施方案中，所述癌症表达brg1蛋白，和/或所述细胞或受试者已被鉴定为表达brg1。在一些实施方案中，所述癌症表达brm蛋白，和/或所述细胞或受试者已被鉴定为表达brm。在一些实施方案中，所述癌症是黑素瘤(例如，葡萄膜黑素瘤、粘膜黑素瘤或皮肤黑素瘤)。在一些实施方案中，所述癌症是前列腺癌。在一些实施方案中，所述癌症是血液学癌症，例如多发性骨髓瘤、大细胞淋巴瘤、急性t细胞白血病、急性骨髓性白血病、骨髓异常增生综合征、免疫球蛋白aλ骨髓瘤、弥漫性混合型组织细胞和淋巴细胞淋巴瘤、b细胞淋巴瘤、急性淋巴母细胞白血病(例如，t细胞急性淋巴母细胞白血病或b细胞急性淋巴母细胞白血病)、弥漫性大细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。在一些实施方案中，所述癌症是乳腺癌(例如，er阳性乳腺癌、er阴性乳腺癌、三阳性乳腺癌或三阴性乳腺癌)。在一些实施方案中，所述癌症是骨癌(例如，尤文氏肉瘤)。在一些实施方案中，所述癌症是肾细胞癌(例如，小眼转录因子(mitf)家族易位性肾细胞癌(trcc))。在一些实施方案中，所述癌症是转移性癌症(例如，癌症已扩散至肝脏)。转移性癌症可包括表现出迁移细胞的迁移和/或侵袭的细胞和/或包括表现出内皮募集和/或血管生成的细胞。在其它实施方案中，癌症是细胞迁移癌症。在其它实施方案中，细胞迁移癌症是非转移性细胞迁移癌症。转移性癌症可以是经由接种腹膜、胸膜、心包或蛛网
(pkc)抑制剂(例如，索曲妥林或ide196)具有抗性或没有反应。
217.化学术语本文所采用的术语仅仅出于描述特定实施方案的目的，并且不意图是限制性的。
218.对于任何以下化学定义，原子符号后的数字表示存在于特定化学部分中的所述元素的原子总数。应理解，根据需要，可存在其它原子，如h原子或如本文所述的取代基，以满足原子的化合价。例如，未取代的c2烷基具有式
–
ch2ch3。当与本文所定义的基团一起使用时，提及碳原子数包括乙缩醛和缩酮基团中的二价碳，但不包括酰基、酯、碳酸酯或氨基甲酸酯基团中的羰基碳。提及杂芳基中的氧、氮或硫原子的数目仅包括形成杂环的一部分的那些原子。
219.如本文所用的术语“酰基”表示通过如本文所定义的羰基连接至母体分子基团的h或烷基，并且由甲酰基(即，羧基醛基团)、乙酰基、三氟乙酰基、丙酰基和丁酰基举例说明。示例性未取代的酰基包括1至6个、1至11个或1至21个碳。
220.如本文所用的术语“烷基”是指具有1至20个碳原子(例如，1至16个碳原子、1至10个碳原子、1至6个碳原子或1-3个碳原子)的支链或直链单价饱和脂族烃基。“亚烷基”是二价烷基。
221.如本文单独或与其它基团组合使用的术语“烯基”是指具有碳-碳双键且具有2至20个碳原子(例如，2至16个碳原子、2至10个碳原子、2至6个碳原子或2个碳原子)的直链或支链烃残基。“亚烯基”是二价烯基。
222.如本文单独或与其它基团组合使用的术语“炔基”是指具有碳-碳三键且具有2至20个碳原子(例如，2至16个碳原子、2至10个碳原子、2至6个碳原子或2个碳原子)的直链或支链烃残基。“亚炔基”是二价炔基。
223.如本文所用，术语“氨基”表示
–
n(r
n1
)2，其中每个r
n1
独立地是h、oh、no2、n(r
n2
)2、so2or
n2
、so2r
n2
、sor
n2
、n-保护基团、烷基、烷氧基、芳基、芳基烷基、环烷基、酰基(例如，乙酰基、三氟乙酰基或本文所述的其它酰基)，其中这些列举的r
n1
基团中的每一个可任选地被取代；或两个r
n1
组合形成亚烷基或亚杂烷基，并且其中每个r
n2
独立地是h、烷基或芳基。本发明的氨基可以是未取代的氨基(即，
–
nh2)或取代的氨基(即，
–
n(r
n1
)2)。
224.如本文所用，术语“芳基”是指具有至少一个芳环的6至12个碳原子的芳族单或多碳环基团。此类基团的实例包括但不限于苯基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、1,2-二氢萘基、茚满基和1h-茚基。“亚芳基”是二价芳基。
225.如本文所用，术语“芳基烷基”表示被芳基取代的烷基。示例性未取代的芳基烷基是7至30个碳(例如，7至16个或7至20个碳，如c
1-c6烷基c
6-c
10
芳基、c
1-c
10
烷基c
6-c
10
芳基或c
1-c
20
烷基c
6-c
10
芳基)，如苄基和苯乙基。在一些实施方案中，烷基和芳基各自均可进一步被如本文针对相应基团所定义的1、2、3或4个取代基取代。
226.如本文所用，术语“叠氮基”表示
–
n3基团。
227.如本文所用，术语“桥联多环烷基”是指具有1至3个桥的5至20个碳的桥联多环基团。
228.如本文所用，术语“氰基”表示-cn基团。
229.如本文所用，术语“碳环基”是指其中环由碳原子形成的非芳族c
3-c
12
单环、双环或三环结构。碳环基结构包括环烷基和不饱和碳环基基团。
230.如本文所用，术语“环烷基”是指具有3至10个、优选3至6个碳原子的饱和、非芳族且单价的单或多碳环基团。此术语进一步有诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、降冰片基和金刚烷基举例说明。“亚环烷基”是二价环烷基。
231.如本文所用，术语“卤代基”是指氟(氟代)、氯(氯代)、溴(溴代)或碘(碘代)基团。
232.如本文所用，术语“杂烷基”是指其中一个或多个组成碳原子已被氮、氧或硫取代的如本文所定义的烷基。在一些实施方案中，杂烷基可进一步被如本文针对烷基所描述的1、2、3或4个取代基取代。杂烷基的实例是“烷氧基”，如本文所用，烷氧基是指烷基-o-(例如，甲氧基和乙氧基)。亚杂烷基是二价杂烷基。如本文所用，术语“杂烯基”是指其中一个或多个组成碳原子已被氮、氧或硫取代的如本文所定义的烯基。在一些实施方案中，杂烯基可进一步被如本文针对烯基所描述的1、2、3或4个取代基取代。杂烯基的实例是“烯氧基”，如本文所用，烯氧基是指烯基-o-。杂亚烯基是二价杂烯基。如本文所用，术语“杂炔基”是指其中一个或多个组成碳原子已被氮、氧或硫取代的如本文所定义的炔基。在一些实施方案中，杂炔基可进一步被如本文针对炔基所描述的1、2、3或4个取代基取代。杂炔基的实例是“炔氧基”，如本文所用，炔氧基是指炔基-o-。杂亚炔基是二价杂炔基。
233.如本文所用，术语“杂烯丙基”代表结构，其中x是o或nr，其中r是h或任选取代的烷基。
234.如本文所用，术语“杂芳基”是指具有至少一个芳环的5至12个原子的芳族单或多环基团，所述芳环含有1、2或3个选自氮氧和硫的环原子，其中剩余的环原子是碳。杂芳基的一个或两个环碳原子可被羰基取代。杂芳基的实例是吡啶基、吡唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、咪唑基、噁唑基和噻唑基。“杂亚芳基”是二价杂芳基。
235.如本文所用，术语“杂芳基烷基”表示被杂芳基取代的烷基。示例性未取代的杂芳基烷基是7至30个碳(例如，7至16个碳或7至20个碳，如c
1-c6烷基c
2-c9杂芳基、c
1-c
10
烷基c
2-c9杂芳基或c
1-c
20
烷基c
2-c9杂芳基)。在一些实施方案中，烷基和杂芳基各自均可进一步被如本文针对相应基团所定义的1、2、3或4个取代基取代。
236.如本文所用，术语“杂环基”是指具有至少一个环的具有3至12个原子的单或多环基团，所述环含有1、2、3或4个选自n、o或s的环原子，并且没有包含任何n、o或s原子的芳环。杂环基的实例包括但不限于吗啉基、硫代吗啉基、呋喃基、哌嗪基、哌啶基、吡喃基、吡咯烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基和1,3-二噁烷基。“亚杂环基”是二价杂环基。
237.如本文所用，术语“杂环基烷基”表示被杂环基取代的烷基。示例性未取代的杂环基烷基是7至30个碳(例如，7至16个或7至20个碳，如c
1-c6烷基c
2-c9杂环基、c
1-c
10
烷基c
2-c9杂环基或c
1-c
20
烷基c
2-c9杂环基)。在一些实施方案中，烷基和杂环基各自均可进一步被如本文针对相应基团所定义的1、2、3或4个取代基取代。
238.如本文所用，术语“羟烷基”表示被-oh基团取代的烷基。
239.如本文所用，术语“羟基”表示-oh基团。
240.如本文所用，术语“n-保护基团”表示在合成过程中意图保护氨基免于发生不希望的反应的那些基团。常用的n-保护基团在greene,
ꢀ“
protective groups in organic synthesis,
”ꢀ
第3版(john wiley & sons, new york, 1999)中公开。n-保护基团包括但不限于酰基、芳酰基或氨基甲酰基，如甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、2-氯
乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻苯二甲酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、α-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基和手性助剂，如受保护的或未受保护的d、l或d、l-氨基酸，如丙氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸；含磺酰基的基团，如苯磺酰基和对甲苯磺酰基；氨基甲酸酯形成基团，如苄氧基羰基、对氯苄氧基羰基、对甲氧基苄氧基羰基、对硝基苄氧基羰基、2-硝基苄氧基羰基、对溴苄氧基羰基、3,4-二甲氧基苄氧基羰基、3,5-二甲氧基苄氧基羰基、2,4-20二甲氧基苄氧基羰基、4-甲氧基苄氧基羰基、2-硝基-4,5-二甲氧基苄氧基羰基、3,4,5-三甲氧基苄氧基羰基、1-(对联苯基甲酰基)-1-甲基乙氧基羰基、α,α-二甲基-3,5-二甲氧基苄氧基羰基、二苯甲基氧基羰基、叔丁氧基羰基、二异丙基甲氧基羰基、异丙氧基羰基、乙氧基羰基、甲氧基羰基、烯丙氧基羰基、2,2,2,-三氯乙氧基羰基、苯氧基羰基、4-硝基苯氧基羰基、芴基-9-甲氧基羰基、环戊氧基羰基、金刚烷基氧基羰基、环己基氧基羰基和苯硫基羰基；芳基烷基，如苄基、三苯基甲基和苄氧基甲基；以及甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基。优选的n-保护基团是alloc、甲酰基、乙酰基、苯甲酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、丙氨酰基、苯磺酰基、苄基、叔丁氧基羰基(boc)和苄氧基羰基(cbz)。
241.如本文所用，术语“硝基”表示
–
no2基团。
242.如本文所用，术语“氧代”表示=o基团。
243.如本文所用，术语“巯基”表示-sh基团。
244.烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基(例如，环烷基)、芳基、杂芳基和杂环基可被取代或未被取代。除非另有说明，否则当被取代时，通常将存在1至4个取代基。取代基包括，例如：烷基(例如，未取代的和取代的，其中取代基包括本文所述的任何基团，例如芳基、卤代基、羟基)、芳基(例如，取代的和未取代的苯基)、碳环基(例如，取代的和未取代的环烷基)、卤代基(例如，氟)、羟基、杂烷基(例如，取代的和未取代的甲氧基、乙氧基或硫代烷氧基)、杂芳基、杂环基、氨基(例如，nh2或单或二烷基氨基)、叠氮基、氰基、硝基、氧代或巯基。芳基、碳环基(例如，环烷基)、杂芳基和杂环基也可被烷基(未取代的和取代的，如芳基烷基(例如，取代的和未取代的苄基))取代。
245.本发明的化合物可具有一个或多个不对称碳原子，并且可以光学纯的对映异构体、对映异构体的混合物例如像外消旋体、光学纯的非对映异构体、非对映异构体的混合物、非对映异构外消旋体或非对映异构外消旋体的混合物形式存在。光学活性形式可例如通过拆分外消旋体、通过不对称合成或不对称色谱法(使用手性吸附剂或洗脱剂的色谱法)获得。即，某些公开的化合物可以各种立体异构体形式存在。立体异构体是仅在其空间排列上不同的化合物。对映异构体是成对的立体异构体，它们的镜像不可重叠，最常见的原因是它们含有不对称取代的碳原子，所述碳原子充当手性中心。“对映异构体”是指为彼此的镜像并且不可重叠的一对分子中的一者。非对映异构体是与镜像无关的立体异构体，最常见的原因是它们含有两个或更多个不对称取代的碳原子，并且表示一个或多个手性碳原子周围的取代基构型。化合物的对映异构体可例如通过使用一种或多种熟知的技术和方法，例如像手性色谱法和基于其的分离方法，从外消旋体分离对映异构体来制备。本领域技术人员可容易地确定从外消旋混合物中分离本文所述的化合物的对映异构体的适当技术和/或方法。“外消旋体”或“外消旋混合物”是指含有两种对映异构体的化合物，其中此类混合物未表现出光学活性；即，它们不会旋转偏振光的平面。“几何异构体”是指在与碳-碳双键、环烷基环或桥联双环系统有关的取代基原子的取向方面不同的异构体。碳-碳双键每一侧的
原子(除h外)可呈e(取代基在碳-碳双键的酯相对侧)或z(取代基在同一侧)构型。“r”、“s”、“s*”、“r*”、“e”、“z”、“顺式”和“反式”表示相对于核心分子的构型。所公开的化合物中的某些可以阻转异构体形式存在。阻转异构体是由于围绕单键的旋转受阻而产生的立体异构体，其中旋转的空间应变屏障足够高以允许构象异构体的分离。本发明的化合物可通过异构体特异性合成而制备为单独的异构体或由异构体混合物拆分。常规拆分技术包括使用光学活性酸形成异构体对的每种异构体的游离碱的盐(随后进行分步结晶和游离碱的再生)、使用光学活性胺形成异构体对的每种异构体的酸形式的盐(随后进行分步结晶和游离酸的再生)、使用光学纯酸、胺或醇形成异构体对的每种异构体的酯或酰胺(随后进行色谱分离和除去手性助剂)，或使用各种众所周知的色谱方法解析起始材料或最终产物的异构体混合物。当通过结构命名或描绘所公开化合物的立体化学时，所述命名或描绘的立体异构体相对于其它立体异构体是至少60重量%、70重量%、80重量%、90重量%、99重量%或99.9重量%。当通过结构命名或描绘单一对映异构体时，所描绘或命名的对映异构体是至少60重量%、70重量%、80重量%、90重量%、99重量%或99.9重量%光学纯的。当通过结构命名或描绘单一非对映异构体时，所描绘或命名的非对映异构体是至少60重量%、70重量%、80重量%、90重量%、99重量%或99.9%重量纯的。光学纯度百分比是对映体的重量相对于对映体的重量加上其光学异构体的重量的比率。按重量计的非对映异构体纯度是一种非对映异构体的重量相对于所有非对映异构体的重量的比率。当通过结构命名或描绘所公开化合物的立体化学时，所述命名或描绘的立体异构体相对于其它立体异构体是按摩尔分数计至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%纯的。当通过结构命名或描绘单一对映异构体时，所描绘或命名的对映异构体是按摩尔分数计至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%纯的。当通过结构命名或描绘单一非对映异构体时，所描绘或命名的非对映异构体是按摩尔分数计至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%纯的。按摩尔分数计的纯度百分比是对映体的摩尔数相对于对映体的摩尔数加上其光学异构体的摩尔数的比率。类似地，按摩尔分数计的纯度百分比是非对映异构体的摩尔数相对于非对映异构体的摩尔数加上其异构体的摩尔数的比率。当通过结构命名或描绘所公开的化合物而未指示立体化学并且所述化合物具有至少一个手性中心时，应理解所述名称或结构涵盖所述化合物的不含相应光学异构体的任一对映异构体、所述化合物的外消旋体混合物或相对于其相应的光学异构体富含一种对映异构体的混合物。当所公开的化合物通过结构命名或描绘而未指示立体化学并且具有两个或更多个手性中心时，应理解，所述名称或结构涵盖不含其它非对映异构体的非对映异构体、不含其它非对映异构体对的许多非对映异构体、非对映异构体的混合物、非对映异构体对的混合物、其中一种非对映异构体相对于其它一种或多种非对映异构体富集的非对映异构体的混合物或其中一种或多种非对映异构体相对于其它非对映异构体富集的非对映异构体的混合物。本发明包括所有这些形式。
246.本公开的化合物还包括中间体或终化合物中存在的原子的所有同位素。“同位素”是指具有相同原子序数但不同质量数的原子，这是由原子核中不同的中子数量导致的。例如，氢的同位素包括氚和氘。
247.除非另有说明，否则本文描述的结构也意味着包括差异仅在于存在一个或多个同位素富集的原子的化合物。可以掺入本发明化合物的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，诸如2h、3h、
11
c、
13
c、
14
c、
13
n、
15
n、
15
o、
17
o、
18
o、
32
p、
33
p、
35
s、
18
f、
36
cl、
123
i和
125
i。同位素标记的化合物(例如，用3h和
14
c标记的那些)可用于化合物或底物组织分布测定。氚化(即，3h)和碳-14(即，
14
c)同位素由于其易于制备和可检测性而有用。另外，用更重的同位素诸如氘(即，2h)取代可以提供因更高的代谢稳定性(例如，延长的体内半衰期或降低的剂量要求)而导致的某些治疗有利方面。在一些实施方案中，一个或多个氢原子被2h或3h取代，或者一个或多个碳原子被富含
13
c或
14
c的碳取代。正电子发射同位素诸如
15
o、
13
n、
11
c和
18
f可用于正电子发射断层摄影术(pet)研究，以检查底物受体的占用率。同位素标记化合物的制备是本领域技术人员已知的。例如，同位素标记的化合物通常可以通过遵循类似于本文所述的针对本发明化合物所公开的程序，通过用同位素标记的试剂代取代非同位素标记的试剂来制备。
248.除非另外定义，否则本文所用的所有技术和科学术语均具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。本文描述了用于在本公开中使用的方法和材料；也可使用本领域中已知的其它合适的方法和材料。所述材料、方法以及实施例仅是说明性的并且不意图是限制性的。本文提及的所有公布、专利申请、专利、序列、数据库条目和其它参考文献均以引用的方式整体并入。在冲突的情况下，以包括定义在内的本说明书为准。
249.定义在本技术中，除非上下文另有明确说明，否则(i)术语“一个/种”可被理解为是指“至少一个/种”；(ii)术语“或”可被理解为是指“和/或”；并且(iii)术语“包含(comprising)”和“包括(including)”可被理解为涵盖逐项列出的组分或步骤，无论是它们本身呈现还是与一直或多种其它组分或步骤一起呈现。
250.如本文所用，术语“约”和“大约”是指在所描述的值以上或以下10%以内的值。例如，术语“约5 nm”表示4.5至5.5 nm的范围。
251.如本文所用，术语“施用”是指将组合物(例如，化合物或包含如本文所述的化合物的制剂)施用至受试者或系统。可通过任何适当的途径向动物受试者(例如，人)施用。例如，在一些实施方案中，施用可以是支气管(包括通过支气管滴注)、经颊、肠内、真皮内、动脉内、皮内、胃内、髓内、肌内、鼻内、腹膜内、鞘内、肿瘤内、静脉内、心室内、粘膜、鼻、口服、直肠、皮下、舌下、局部、气管(包括通过气管内滴注)、经皮、阴道和玻璃体。
252.如本文所用，术语“baf复合物”是指人细胞中的brg1或hrbm相关因子复合物。
253.如本文所用，术语“baf复合物相关病症”是指由baf复合物的水平和/或活性引起或影响的病症。
254.如本文所用，术语“brg1功能丧失性突变”是指brg1中导致蛋白质活性降低的突变(例如，brg1活性降低至少1%，例如brg1活性降低2%、5%、10%、25%、50%或100%)。示例性brg1功能丧失性突变包括但不限于纯合的brg1突变和brg1的c端处的缺失。
255.如本文所用，术语“brg1功能丧失性病症”是指表现出brg1活性降低(例如，brg1活性降低至少1%，例如brg1活性降低2%、5%、10%、25%、50%或100%)。
256.术语“癌症”是指由恶性赘生性细胞的增殖所引起的疾患，如肿瘤、赘生物、癌、肉瘤、白血病和淋巴瘤。
257.如本文所用，“组合疗法”或“组合施用”是指将两种(或多种)不同的剂或治疗作为针对特定疾病或疾患的限定治疗方案的一部分施用至受试者。治疗方案定义了每种剂的剂量和施用周期，以使单独剂对受试者的作用重叠。在一些实施方案中，两种或更多种剂的递
送是同时或并行的，并且所述剂可共同配制。在一些实施方案中，两种或更多种剂不是共同配制的，并且作为处方方案的一部分以顺序方式施用。在一些实施方案中，两种或更多种剂或治疗的组合施用使得与病症相关的症状或其它参数的减少大于在单独递送的一种剂或治疗或在不存在所述剂的情况下观察到的减少。两种治疗的作用可部分累加、完全累加或大于累加(例如，协同作用)。顺序或实质上同时施用每种治疗剂可通过包括但不限于经口途径、静脉内途径、肌肉内途径以及通过粘膜组织直接吸收的任何适当的途径来实现。可通过相同途径或通过不同途径施用治疗剂。例如，可通过静脉内注射施用组合的第一治疗剂，同时可口服施用组合的第二治疗剂。
258.如本文所用，“cmpd”是指化合物。
[0259]“确定蛋白质或rna的水平”是指通过本领域已知的方法直接或间接地检测蛋白质或rna。“直接确定”是指执行过程(例如，对样品进行测定或测试，或如本文所定义的术语“分析样品”)以获得物理实体或值。“间接确定”是指从一方或来源(例如，直接获取物理实体或值的第三方实验室)接收所述物理实体或值。测量蛋白质水平的方法通常包括但不限于蛋白质印迹、免疫印迹、酶联免疫吸附测定(elisa)、放射免疫测定(ria)、免疫沉淀、免疫荧光、表面等离子体共振、化学发光、荧光极化、磷光、免疫组织化学分析、基质辅助激光解吸/电离飞行时间(maldi-tof)质谱法、液相色谱(lc)-质谱法、微细胞术、显微、荧光活化细胞分选(facs)和流式细胞术，以及基于蛋白质性质的测定，包括但不限于酶活性或与其它蛋白质配偶体的相互作用。测量rna水平的方法是本领域已知的，包括但不限于定量聚合酶链反应(qpcr)和rna印迹分析。
[0260]“降低baf复合物的活性”是指降低与baf复合物有关的活性的水平或相关的下游效应。降低baf复合物的活性的非限制性实例是sox2活化。baf复合物的活性水平可使用本领域已知的任何方法来测量，例如，kadoch等人cell, 2013, 153, 71-85中描述的方法，所述文献的方法以引用的方式并入本文。
[0261]
如本文所用，术语“降解物”是指包含降解部分的小分子化合物，其中该化合物与蛋白质(例如brg1和/或brm)以导致蛋白质降解的方式相互作用，例如化合物的结合导致例如细胞或受试者中蛋白质水平降低至少5%。
[0262]
如本文所用，术语“降解部分”是指其结合导致蛋白质如brg1和/或brm降解的部分。在一个实例中，所述部分结合代谢蛋白质的蛋白酶或泛素连接酶，例如brg1和/或brm。
[0263]“调节baf复合物的活性”意指改变与baf复合物(例如gbaf)相关的活性水平，或相关的下游效应。baf复合物的活性水平可以使用本领域已知的任何方法测量，例如kadoch等人，cell 153:71-85 (2013)中描述的方法，其方法通过引用并入本文。
[0264]“降低brg1和/或brm的活性”是指降低与brg1和/或brm相关的活性水平，或降低相关的下游效应。抑制brg1和/或brm活性的非限制性实例是降低细胞中baf复合物的水平。brg1和/或brm的活性水平可使用本领域已知的任何方法测量。在一些实施方案中，降低brg1和/或brm活性的试剂是小分子brg1和/或brm降解物。
[0265]“降低brg1和/或brm的水平”是指降低细胞或受试者中brg1和/或brm的水平。brg1和/或brm的水平可使用本领域已知的任何方法测量。
[0266]“水平”是指与参考相比，蛋白质或编码蛋白质的mrna的水平。该参考可以是如本文所定义的任何有用的参考。蛋白质的水平“降低”或“水平增加”是指与参考相比，蛋白质
水平降低或增加(例如降低或增加约5%、约10%、约15%、约20%、约25%、约30%、约35%、约40%、约45%、约50%、约55%、约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约95%、约100%、约150%、约200%、约300%、约400%、约500%或更多；与参考相比，降低或增加超过约10%、约15%、约20%、约50%、约75%、约100%或约200%；降低或增加小于约0.01倍、约0.02倍、约0.1倍、约0.3倍、约0.5倍、约0.8倍或更少；或增加超过约1.2倍、约1.4倍、约1.5倍、约1.8倍、约2.0倍、约3.0倍、约3.5倍、约4.5倍、约5.0倍、约10倍、约15倍、约20倍、约30倍、约40倍、约50倍、约100倍、约1000倍或更多)。蛋白质的水平可以质量/体积(例如，g/dl、mg/ml、μg/ml、ng/ml)或相对于样品中总蛋白质或mran的百分比表示。
[0267]
如本文所用，术语“抑制brm和/或brg1”是指阻断或降低蛋白质的atp酶催化结合结构域或布罗莫结构域的水平或活性。brm和/或brg1抑制可使用本领域已知的方法来确定，例如，brm atp酶测定、nano dsf测定或brm荧光素酶细胞测定。
[0268]
如本文所用，术语“药物组合物”表示含有与药学上可接受的赋形剂一起配制并适合施用于哺乳动物例如人的本文所述化合物的组合物。通常，作为用于治疗哺乳动物疾病的治疗方案的一部分，在政府监管机构的批准下制造或销售药物组合物。可将药物组合物配制例如用于以单位剂型(例如片剂、胶囊、囊片、软胶囊或糖浆剂)口服施用；用于局部施用(例如，呈乳膏、凝胶、洗剂或软膏形式)；用于静脉内施用(例如，呈无微粒栓的无菌溶液形式并在适合静脉内使用的溶剂系统中)；或以任何其它药学上可接受的制剂。
[0269]
如本文所用的“药学上可接受的赋形剂”是指除了本文描述的化合物以外的任何成分(例如，能够悬浮或溶解活性化合物的媒介物)并且在患者中具有大致上无毒和非炎症性的特性。赋形剂可包括例如：抗粘剂、抗氧化剂、粘合剂、包衣、压缩助剂、崩解剂、染料(颜料)、软化剂、乳化剂、填充剂(稀释剂)、成膜剂或包衣、调味剂、香料、助流剂(流动增强剂)、润滑剂、防腐剂、印刷油墨、吸附剂、悬浮剂或分散剂、甜味剂以及水合作用的水。
[0270]
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指化合物的任何药学上可接受的盐，例如式i或ii的任何化合物。本文所述任何化合物的药学上可接受的盐可包括在合理医学判断范围内适合用于与人和动物的组织接触而没有过度的毒性、激性、过敏性反应并且与合理的利益/风险比相称的那些盐。药学上可接受的盐是本领域众所周知的。例如，药学上可接受的盐描述于：berge等人, j. pharmaceutical sciences 66:1-19, 1977和pharmaceutical salts: properties, selection, and use, (p.h. stahl和c.g. wermuth编辑), wiley-vch, 2008中。盐可在本文所述化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或通过使游离碱基团与合适的有机酸反应而单独地制备。
[0271]
本发明的化合物可具有可电离的基团，以便能够制备为药学上可接受的盐。这些盐可以是涉及无机或有机酸的酸加成盐，或者在酸性形式的本发明化合物的情况下，所述盐可由由无机或有机碱制备。通常，将化合物制备为药学上可接受的盐或用作制备为药学上可接受的酸或碱的加成产物的药学上可接受的盐。合适的药学上可接受的酸和碱以及用于制备适当的盐的方法是本领域众所周知的。盐可由药学上可接受的无毒酸和碱，包括无机和有机酸和碱制备。
[0272]“参考”是指用于比较蛋白质或rna水平的任何有用的参考。参考可以是用于比较目的的任何样品、标准品、标准曲线或水平。参考可以是正常参考样品或参考标准或水平。“参考样品”可以是例如对照，例如预先确定的阴性对照值，如“正常对照”或取自同一受试
者的先前样品；来自正常健康受试者的样品，如正常细胞或正常组织；来自未患疾病的受试者的样品(例如，细胞或组织)；来自被诊断患有疾病、但尚未用本发明化合物治疗的受试者的样品；来自已通过本发明化合物治疗的受试者的样品；或已知正常浓度下的纯化蛋白或rna(例如，本文所述的任一种)的样品。“参考标准或水平”是指源自参考样品的值或数字。“正常对照值”是指示非疾病状态的预先确定的值，例如，在健康对照受试者中预期的值。通常，正常对照值被表示为范围(“介于x与y之间”)、高阈值(“不高于x”)或低阈值(“不低于x”)。对于特定生物标记物，具有在正常对照值内的测量值的受试者通常被称为对于所述生物标记物“在正常限值内”。正常参考标准或水平可以是从未患疾病或病症(例如，癌症)的正常受试者；已经用本发明化合物治疗的受试者得到的值或数字。在优选的实施方案中，参考样品、标准或水平通过以下标准中的至少一者与样品受试者样品匹配：年龄、体重、性别、疾病阶段和总体健康。在正常参考范围内的纯化的蛋白质或rna(例如，本文所述的任一种)的水平的标准曲线也可用作参考。
[0273]
如本文所用，术语“受试者”是指可例如出于实验、诊断、预防和/或治疗目的向其施用根据本发明的组合物的任何生物体。典型的受试者包括任何动物(例如，哺乳动物，如小鼠、大鼠、兔、非人灵长类动物和人)。受试者可寻求或需要治疗、要求治疗、正在接受治疗、将接受治疗、或者是针对特定疾病或疾患在受过训练的专业人员护理下的人或动物。
[0274]
如本文所用，术语“治疗(treat)”、“治疗(treated)”或“治疗(treating)”是指治疗性治疗或目的是减缓(减轻)不需要的生理状疾患、病症或疾病或获得有益或所需的临床结果的任何措施。有益或所需的临床结果包括但不限于症状的减轻；疾患、病症或疾病的程度减小；疾患、病症或疾病的状态稳定(即，没有恶化)；疾患、病症或疾病进展的发作延迟或减缓；疾患、病症或疾病状态的改善或缓解(无论是部分还是全部)；至少一个可测量的物理参数的改善，不一定是患者可辨别的；或疾患、病症或疾病的增强或改善。治疗包括在没有过度水平的副作用的情况下引发临床上显著的应答。治疗还包括与不接受治疗情况下的预期存活期相比存活期延长。本发明化合物还可用于例如在处于发展病症的风险增加的受试者中“预防性地”治疗或“预防”所述病症。
[0275]
如本文所用，术语“变体”和“衍生物”可互换使用，并且是指本文所述的化合物、肽、蛋白质或其它物质的天然存在的、合成的和半合成的类似物。本文所述的化合物、肽、蛋白质或其它物质的变体或衍生物可保留或改善原始材料的生物活性。
[0276]
本发明的一个或多个实施方案的细节在以下说明中给出。本发明的其它特征、目的和优点将是从说明书和权利要求书清楚的。
[0277]
发明详述本公开的特征在于可用于降低brg1和/或brm的水平和/或活性的化合物。这些化合物可用于调节baf复合物的活性，例如用于治疗baf相关病症，例如癌症。本文所述的示例性化合物包括具有根据式i的结构的化合物：其中l是连接基；b是降解部分；以及
a具有式ii的结构：其中x1是n或ch，x2和x3独立地是n、ch或c(ch3)；r1是h、任选取代的c
1-c6酰基、任选取代的c
1-c6烷基、任选取代的c
1-c6杂烷基、任选取代的c
2-c9杂环基或-so2r6；r2和r5各自独立地是h或任选取代的c
1-c6烷基；r3是h、任选取代的c
1-c6烷基、或a与连接基之间的键；r4是h、任选取代的c
1-c6烷基或任选取代的c
1-c6杂烷基；r6是任选取代的c
1-c6烷基或-nr7r8；r7和r8各自独立地是任选取代的c
1-c6烷基；het是5元或6元亚杂芳基；g1是任选取代的c
6-c
10
亚芳基、任选取代的c
2-c9亚杂环基或任选取代的c
2-c9亚杂芳基；g2是不存在，-o-，任选取代的c
1-c6亚烷基，任选取代的c
1-c6亚烯基，任选取代的c
1-c6亚杂烷基，任选取代的c
2-c9杂环基c
1-c6亚烷基，或任选取代的c
2-c9杂芳基c
1-c6亚烷基；g3是不存在，任选取代的c
6-c
10
亚芳基，任选取代的c
6-c
10
亚环烷基，任选取代的c
2-c9亚杂环基，或任选取代的c
2-c9亚杂芳基；以及a1是h或a和连接基之间的键，条件是式ii在a和连接基之间包含一个且仅一个键，或其药学上可接受的盐。
[0278]
在一些实施方案中，r3是h或任选取代的c
1-c6烷基，a1是a和连接基之间的键。在一些实施方案中，r3是a和连接基之间的键，a1是h。
[0279]
在一些实施方案中，该化合物是表1中化合物1-297的任一种，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，该化合物是表1中化合物1-169的任一种，或其药学上可接受的盐。
[0280]
本文描述了其它实施方案以及用于合成生产这些化合物的示例性方法。
[0281]
药物用途本文描述的化合物可用于本发明的方法，并且尽管不受理论的束缚，但据信发挥其调节baf复合物的水平、状态和/或活性的能力，即通过降低哺乳动物的细胞内的brg1和/或brm蛋白质的水平和/或活性。baf复合物相关病症包括但不限于brg1和/或brm功能丧失性突变相关的病症。
[0282]
本发明的一个方面涉及治疗有需要的受试者的与brg1和/或brm功能丧失性突变
相关的病症的方法，所述病症如癌症(例如，非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌或阴茎癌)。在一些实施方案中，以有效产生以下中的一者或多者(例如，两者或更多者、三者或更多者、四者或更多者)的量和时间施用化合物：(a)减小肿瘤大小，(b)降低肿瘤生长的速率，(c)肿瘤细胞死亡增加，(d)肿瘤进展减少，(e)转移数量减少，(f)转移率降低，(g)肿瘤复发减少，(h)受试者存活期增加，和(i)受试者的无进展存活期增加。
[0283]
治疗癌症可使得肿瘤的大小或体积减小。例如，在治疗之后，相对于治疗前的大小，肿瘤大小减小5%或更大(例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更大)。肿瘤大小可通过任何可重复的测量手段来测量。例如，可将肿瘤的大小测量为肿瘤的直径。
[0284]
治疗癌症可进一步使得肿瘤数量减少。例如，在治疗之后，相对于治疗前的数量，肿瘤数量减少5%或更多(例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多)。可通过任何可重复的测量手段来测量肿瘤的数量，例如，可通过对肉眼或在指定放大倍数(例如，2x、3x、4x、5x、10x或50x)下可见的肿瘤进行计数来测量肿瘤的数量。
[0285]
治疗癌症可使得远离原生肿瘤位点的其它组织或器官的转移性结节的数量减少。例如，在治疗后，相对于治疗前的数量，转移性结节的数量减少5%或更多(例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多)。转移性结节的数量可通过任何可重复的测量手段进行测量。例如，可通过对肉眼或在指定的放大倍数(例如，2x、10x或50x)下可见的转移性结节进行计数来测量转移性结节的数量。
[0286]
与未治疗的受试者群体相比，治疗癌症可使得根据本发明治疗的受试者群体的平均存活时间增加。例如，平均存活时间增加超过30天(超过60天、90天或120天)。群体的平均存活时间的增加可通过任何可重复的手段来测量。群体的平均存活时间的增加可例如通过在开始用本发明的化合物治疗之后计算群体的平均存活长度来测量。群体的平均存活时间的增加也可例如通过在用本发明的药学上可接受的盐治疗第一轮完成后计算群体的平均存活长度来测量。
[0287]
与未治疗的群体相比，治疗癌症还可使得接受治疗的受试者群体的死亡率降低。例如，死亡率降低超过2%(例如，超过5%、10%或25%)。可通过任何可重复的手段来测量接受治疗的受试者群体的死亡率的降低，例如，通过在开始用本发明的药学上可接受的盐治疗后计算每单位时间内群体的疾病相关死亡的平均数量来测量。群体的死亡率的降低也可例如通过在用本发明的药学上可接受的盐治疗第一轮完成后计算每单位时间内群体的疾病相关死亡的平均数量来测量。
[0288]
可通过本发明治疗的示例性癌症包括但不限于，非小细胞肺癌、小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌、食道胃癌、胰腺癌、肝胆癌、软组织肉瘤、卵巢癌、头颈癌、肾细胞癌、骨癌、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、胚胎肿瘤、生殖细胞瘤、宫颈癌、甲状腺癌、唾液腺癌、胃肠神经内分泌肿瘤、子宫肉瘤、胃肠道间质瘤、cns癌症、胸腺肿瘤、肾上腺皮质癌、阑尾癌、小肠癌和阴茎癌。
[0289]
组合制剂及其用途本发明的化合物可与一种或多种治疗剂组合。特别地，所述治疗剂可以是治疗或预防性地治疗本文所述的任何癌症的治疗剂。
[0290]
组合疗法
本发明的化合物可单独或与另外的治疗剂(例如，治疗癌症或与癌症相关的症状的其它剂)组合或与其它类型的治疗组合使用以治疗癌症。在组合治疗中，一种或多种治疗性化合物的剂量可从单独施用时的标准剂量减少。例如，剂量可根据药物组合和排列经验性地确定，或者可通过等效线图解分析推导(例如，black等人, neurology 65:s3-s6, 2005)。在这种情况下，在组合时化合物的剂量应提供治疗作用。
[0291]
在一些实施方案中，第二治疗剂是化学治疗剂(例如，可用于治疗癌症的细胞毒性剂或其它化合物)。这些包括烷化剂、抗代谢药、叶酸类似物、嘧啶类似物、嘌呤类似物和相关的抑制剂、长春花生物碱、表鬼臼毒素、抗生素、l-天冬酰胺酶、拓扑异构酶抑制剂、干扰素、铂配位络合物、蒽二酮取代的尿素、甲基肼衍生物、肾上腺皮质抑制剂、肾上腺皮质类固醇、孕激素、雌激素、抗雌激素、雄激素、抗雄激素以及促性腺激素释放激素类似物。还包括5-氟尿嘧啶(5-fu)、亚叶酸(lv)、伊立替康、奥沙利铂、卡培他滨、紫杉醇和多西他赛。化学治疗剂的非限制性实例包括烷化剂，如噻替派和环磷酰胺；烷基磺酸酯，如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮杂环丙烷，如苯佐多巴(benzodopa)、卡波醌、米特多巴和尤利多巴；乙烯亚胺和甲基蜜胺，包括六甲蜜胺、三亚乙基蜜胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基蜜胺；多聚乙酰(尤其是布拉他辛和布拉他辛酮)；喜树碱(包括合成类似物托泊替康)；苔藓抑素；海绵他汀；cc-1065 (包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；念珠藻素(特别是念珠藻素1和念珠藻素8)；尾海兔素；倍癌霉素(包括合成类似物、kw-2189和cb1-tm1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；水鬼蕉碱；匍枝珊瑚醇；海绵抑素(spongistatin)；氮芥，如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、氮芥、氮芥氧化物盐酸盐、美法仑、新恩比兴、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲磷胺和尿嘧啶氮芥；亚硝基脲，如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀；抗生素，如烯二炔抗生素(例如，卡奇霉素，尤其卡奇霉素γii和卡奇霉素ωii (参见例如，agnew, chem. intl. ed engl. 33:183-186 (1994))；达内霉素，包括达内霉素a；二膦酸盐，如氯膦酸盐；埃斯培拉霉素；以及新制癌菌素生色团和相关色蛋白烯二炔抗生素生色团)、阿克拉霉素、放线菌素、安曲霉素、重氮丝氨酸、博莱霉素、放线菌素c、卡柔比星、洋红霉素、嗜癌菌素、色霉素、更生霉素、道诺霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代基-l-正亮氨酸、adriamycin
®
(阿霉素，包括吗啉代-阿霉素、氰基吗啉代-阿霉素、2-吡咯啉并-阿霉素和去氧阿霉素)、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素(如丝裂霉素c)、霉酚酸、诺拉霉素、橄榄霉素、培洛霉素、泊非霉素、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑菌素、链佐星、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢药，如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-fu)；叶酸类似物，如二甲叶酸、氨甲蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双去氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素，如卡普睾酮、屈他雄酮丙酸酯、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺素药，如氨鲁米特、米托坦、曲洛斯坦；叶酸补充剂，如亚叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；倍曲布西；比生群；依达曲沙；德福法明；秋水仙胺；地吖醌；依氟鸟氨酸；依利醋铵；埃博霉素；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明；美登木素生物碱，如美登素和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；二胺硝吖啶(nitraerine)；喷司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；psk
®
多糖复合物(jhs natural products, eugene, oreg.)；雷佐生；根霉
素(rhizoxin)；西佐喃；锗螺胺；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2',2"-三氯三乙胺；单端孢霉烯族毒素(特别是t-2毒素、疣孢菌素a、杆孢菌素a和蛇形菌素)；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；加西托星(gacytosine)；阿糖胞苷(“ara-c”)；环磷酰胺；噻替派；紫杉烷类，如taxol
®
紫杉醇 (bristol-myers squibb oncology, princeton, n.j.)，abraxane
®
，无克列莫佛的白蛋白工程化紫杉醇纳米颗粒制剂 (american pharmaceutical partners, schaumberg, ill.)和taxotere
®
多西他赛(rhone-poulenc rorer, antony, france)；苯丁酸氮芥；gemzar
®
吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；氨甲蝶呤；铂配位络合物，如顺铂、奥沙利铂和卡铂；长春花碱；铂；依托泊苷(vp-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；navelbine
®
长春瑞滨；诺安托；替尼泊苷；依达曲沙；道诺霉素；氨蝶呤；希罗达；伊班膦酸盐；伊立替康(例如，cpt-11)；拓扑异构酶抑制剂rfs 2000；二氟甲基鸟氨酸(dmfo)；类视黄醇，如视黄酸；卡培他滨；以及上述任一者的药学上可接受的盐、酸或衍生物。可在混合物中使用两种或更多种化学治疗剂，以与本文所述的第一治疗剂组合施用。组合化学疗法的合适的给药方案是本领域已知的，并且描述于例如saltz等人(1999) proc asco 18:233a和douillard等人(2000) lancet 355:1041-7中。
[0292]
在一些实施方案中，第二治疗剂是治疗剂，其是用于癌症治疗的生物制剂，如细胞因子(例如，干扰素或白介素(例如，il-2))。在一些实施方案中，生物制剂是抗血管生成剂，如抗vegf剂，例如贝伐珠单抗(avastin
®
)。在一些实施方案中，生物制剂是基于免疫球蛋白的生物制剂，例如单克隆抗体(例如，人源化抗体、完全人抗体、fc融合蛋白或其功能片段)，所述单克隆抗体激动靶标以刺激抗癌应答或拮抗对癌症而言重要的抗原。此类剂包括利妥昔单抗；达克珠单抗；巴利昔单抗；帕利珠单抗；英夫利昔单抗；曲妥珠单抗；吉妥珠单抗奥佐米星；阿仑单抗；替伊莫单抗；阿达木单抗；奥马珠单抗；托西莫单抗-i-131；依法利珠单抗；西妥昔单抗；贝伐珠单抗；那他珠单抗；托珠单抗；帕尼单抗；兰尼单抗；依库珠单抗；培化赛妥珠单抗；戈利木单抗；康纳单抗；优特克单抗；奥法木单抗；地诺单抗；莫维珠单抗；雷西巴单抗；贝利木单抗；伊匹单抗；本妥西单抗维多汀；帕妥珠单抗；阿多-曲妥珠单抗恩他新；以及奥比妥珠单抗。还包括抗体-药物缀合物。
[0293]
第二剂可以是非药物治疗的治疗剂。例如，第二治疗剂是放射疗法、冷冻疗法、热疗和/或肿瘤组织的手术切除。
[0294]
第二剂可以是检查点抑制剂。在一个实施方案中，检查点的抑制剂是抑制性抗体(例如，单特异性抗体，如单克隆抗体)。所述抗体可以是例如人源化或完全人源的。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是融合蛋白，例如fc-受体融合蛋白。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是与检查点蛋白相互作用的剂，例如抗体。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是与检查点蛋白的配体相互作用的剂，如抗体。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是ctla-4的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂) (例如，抗ctla4抗体，如伊匹单抗或曲美木单抗)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是pd-1的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂) (例如，纳武单抗；派姆单抗；匹地利珠单抗)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是pdl1的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂) (例如，阿特珠单抗； 杜瓦鲁单抗； 阿维鲁单抗；bms 936559)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是pdl2的抑制剂(例如，抑制性抗体或fc融合体或小分子抑制剂) (例如，pdl2/ig融合蛋白，如amp 224)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是b7-h3 (例如，依诺珠单抗)、b7-h4、btla、hvem、tim3、
gal9、lag3、vista、kir、2b4、cd160、cgen-15049、chk1、chk2、a2ar、b-7家族配体或其组合的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)。
[0295]
在本文所述的任何组合实施方案中，第一治疗剂和第二治疗剂以任一顺序同时或顺序施用。第一治疗剂可在第二治疗剂之前或之后立即、至多1小时、至多2小时、至多3小时、至多4小时、至多5小时、至多6小时、至多7小时、至多8小时、至多到9小时、至多10小时、至多11小时、至多12小时、至多13小时、14小时、至多16小时、至多17小时、至多18小时、至多19小时、至多20小时、至多21小时、至多22小时、至多23小时、至多24小时或至多1至7、1至14、1至21或1至30天施用。
[0296]
药物组合物优选地，将本发明的化合物配制成药物组合物，以适于体内施用的生物相容性形式向哺乳动物、优选向人施用。因此，在一方面，本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含与合适的稀释剂、载体或赋形剂混合的本发明的化合物。
[0297]
本发明的化合物可以游离碱的形式、以盐、溶剂合物的形式以及以前药形式使用。所有形式均在本发明的范围内。如本领域技术人员所理解的，根据本发明的方法，所描述的化合物或其盐、溶剂合物或前药可根据所选择的施用途径以多种形式施用至患者。本发明的化合物可例如通过口服、胃肠外、经颊、舌下、经鼻、直肠、贴剂、泵或透皮施用来施用，并且相应地配制药物组合物。胃肠外施用包括静脉内、腹膜内、皮下、肌内、经上皮、经鼻、肺内、鞘内、直肠和局部施用方式。胃肠外施用可通过在选定的时间段内连续输注来进行。
[0298]
本发明的化合物可例如与惰性稀释剂或与可吸收的可食用载体一起口服施用，或者其可被包封在硬壳或软壳明胶胶囊中，或者其可被压制成片剂，或者其可直接与饮食的食物一起并入。对于口服治疗性施用，本发明的化合物可与赋形剂混合并以可摄入片剂、口含片剂、锭剂、胶囊、酏剂、混悬剂、糖浆和糯米纸囊剂的形式使用。本发明的化合物也可胃肠外施用。本发明化合物的溶液可在合适地与诸如羟丙基纤维素的表面活性剂混合的水中制备。还可在甘油、液体聚乙二醇、dmso及其有或无醇的混合物中以及在油中制备分散液。在正常储存和使用条件下，这些制剂可含有防腐剂以防止微生物生长。用于选择和制备合适制剂的常规程序和成分描述于例如remington’s pharmaceutical sciences (2003, 第20版)和1999年出版的the united states pharmacopeia: the national formulary (usp 24 nf19)中。适于可注射用途的药物形式包括无菌水溶液或分散液和用于临时制备无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。在所有情况下，所述形式都必须是无菌的，并且必须是流体性的达到可经由注射器容易注射的程度。经鼻施用的组合物可方便地配制成气雾剂、滴剂、凝胶剂和粉末。气雾剂制剂通常包括活性物质在生理上可接受的水性或非水性溶剂中的溶液或精细悬浮液，并且通常以无菌形式以单剂量或多剂量形式存在于密封容器中，所述容器可采取药筒或重新装填的形式用于雾化装置。或者，密封的容器可以是一体的分配装置，如单剂量鼻吸入器或配备有意图在使用后丢弃的计量阀的气雾剂分配器。当剂型包括气雾剂分配器时，它将含有推进剂，所述推进剂可以是压缩气体(如压缩空气)或有机推进剂(如氟氯烃)。气雾剂剂型也可采用泵雾化器的形式。适用于经颊或舌下施用的组合物包括片剂、锭剂和软锭剂，其中活性成分与载体如糖、阿拉伯胶、或黄芪胶、明胶和甘油一起配制。用于直肠施用的组合物方便地呈含有常规栓剂基质如可可脂的栓剂形式。本文所述的化合物可肿瘤内施用，例如以肿瘤内注射的形式。肿瘤内注射是直接注射到肿瘤脉
m h ] = 505。
[0303]
步骤2：5-([2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基]氨基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-1)的制备在室温下，向b(1.18g，0.002mmol，1.00当量)在dcm(6.00ml)中的搅拌混合物中加入tfa(2.00ml)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在减压下浓缩所得混合物。这提供了作为黄色固体的 i-1 (1.08 g, 89%)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 8.38 (d, 1h, 甲酸), 7.57 (d, 1h), 7.24 (s, 1h), 7.02 (d, 1h), 6.91 (dd, 1h), 5.04 (dd, 1h), 3.58 (tt, 8h), 3.37 (q, 2h), 2.95
ꢀ–ꢀ
2.81 (m, 3h), 2.63
ꢀ–ꢀ
2.51 (m, 2h), 2.00 (ddq, 1h).lcms (esi) m/z: [m h]
= 405.17。
[0304]
4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氧基]丁酸(i-11) 的制备步骤1: 4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氧基]丁酸叔丁酯 (b)的制备
向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-羟基异吲哚-1,3-二酮(a，2.00g，7.293 mmol，1.00当量)和4-溴丁酸叔丁酯(1.95g，8.752 mmol，1.2当量)在dmf (10.00 ml)中的溶液中加入ki (0.12g，0.729 mmol，0.1当量)和khco
3 (1.10g，10.940 mmol，1.5当量)，将所得溶液在60℃搅拌5小时。将混合物用etoac (50 ml)稀释，并用水(50 ml
×
3)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。将粗产物通过快速c18色谱法纯化，用0-32% acn水溶液梯度洗脱得到作为灰白色固体的b (1.5g，49.39%)。lcms (esi) m/z [ m h ] = 417。
[0305]
步骤2：4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氧基]丁酸(i-11)的制备向b(450mg，1.081mmol，1当量)在dcm(5ml)中的搅拌溶液中加入tfa(1ml)。将所得溶液在 25℃搅拌 2 小时，然后浓缩。得到 360 mg (92.46%)的作为白色固体的 i-11。1h nmr (400 mhz, 甲醇-d4) δ 7.79 (t, j = 8.4, 7.4 hz, 1h), 7.47 (d, j = 7.8 hz, 2h), 5.12 (dd, j = 12.6, 5.5 hz, 1h), 4.30 (t, j = 6.2 hz, 2h), 2.95
ꢀ–ꢀ
2.66 (m,3h),2.60(t,j=7.3hz,2h),2.25
–
2.18(m,3h).lcms (esi)m/z:[m h]

=361.10。
[0306]
3-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)丙酸(i-17)的制备步骤1: 3-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)丙酸叔丁酯(b)的制备
向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮 (a, 1.00 g, 3.620 mmol, 1.00当量)在nmp (10.00 ml)中的溶液中加入3-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]丙酸叔丁酯(929.10 mg, 3.982 mmol, 1.10当量)。将所得混合物在90℃搅拌过夜。使混合物冷却至室温，然后用etoac(30ml)稀释。将该溶液用水(10ml x 5)洗涤，然后用盐水(20ml)洗涤。将所得混合物在减压下浓缩，通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用石油醚/etoac(5:1至1:1)洗脱，得到作为黄色固体的b(1.14g，64.33％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 490。
[0307]
步骤2: 3-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)丙酸 (i-17)的制备在室温下，向b(1.14g，2.329mmol，1.00当量)在dcm(10.00ml)中的搅拌溶液中滴加tfa(0.52ml，4.551mmol，3.00当量)。将所得混合物在室温下搅拌2小时，然后在真空下浓缩。将残余物在下列条件下通过反相快速色谱法纯化：柱，c18球形柱； 流动相，acn 水溶液，0%至100%梯度，经50 分钟； 70毫升/分钟； 检测器，uv 254 nm，以提供作为黄色固体的 i-17 (896 mg, 70.28%)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.15 (s, 1h), 11.09 (s, 1h), 7.63
ꢀ–ꢀ
7.55 (m, 1h), 7.15 (d, 1h), 7.05 (d, 1h), 6.61 (t, 1h), 5.06 (dd, 1h), 3.65
ꢀ–ꢀ
3.44 (m, 8h), 2.87 (d, 1h), 2.59 (d, 2h), 2.43 (t, 2h), 2.04 (m, 1h);lcms (esi) m/z: [m h]
= 434.15。
[0308]
2-[(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙酰胺基)甲基]环丙烷-1-甲酸(i-23)的制备步骤1: 2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙酸叔丁酯(b) 的制备
在室温下，向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮 (a, 5.50 g, 20.056 mmol, 1.00 当量)和2-溴乙酸叔丁酯(3.91 g, 20.056 mmol, 1.00当量)在dmf (15.00 ml)中的搅拌溶液中滴加k2co3 (8.32 g, 60.168 mmol, 3当量)。将所得混合物用3
×
200ml etoac洗涤。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶；流动相，acn 水溶液，10% 至 50% 梯度，经10 分钟； 检测器，uv 254 nm。产生作为灰白色固体的b (3.2 g, 45.19%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 389。
[0309]
步骤2:[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙酸(i-100)的制备将b (3.20 g, 8.239 mmol, 1.00当量)和无水hcl在1,4-二氧杂环己烷中的溶液(15.00 ml, 493.678 mmol, 59.92当量)在室温下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩。得到作为黄色固体的i-100 (1.12 g)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 289。
[0310]
步骤3: 2-[(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙酰胺基) 甲基]环丙烷-1-甲酸甲酯(c)的制备在室温下，经2小时向i-100 (670.00 mg，2.016 mmol，1.00当量)和2-(氨基甲基)环丙烷-1-甲酸甲酯(260.44 mg，2.016 mmol，1.00当量)在dmf (15.00 ml)中的搅拌溶液中滴加hatu (1150.07 mg，3.025 mmol，1.50当量)，然后滴加diea (781.84 mg，6.049 mmol，3.00当量)。将所得混合物在减压下浓缩，并将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶；流动相，acn水溶液，10%至50%梯度，经10分钟；检测器，uv 254 nm。得到作为黄色油的c (778.6 mg，78.37%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 444。
[0311]
步骤4: 2-[(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基] 乙酰胺基)甲基]环丙烷-1-甲酸(i-23)的制备
将c (763.90 mg，1.00当量)在1，4-二氧杂环己烷(5.00 ml)中的混合物和无水hcl在1，4-二氧杂环己烷中的混合物(4m，5.00 ml)在室温下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩，并将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶；流动相，acn水溶液，10%至50%梯度，经10分钟；检测器，uv 254 nm。得到作为黄色固体的化合物i-23 (338.2 mg)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.17 (s, 1h), 11.12 (s, 1h), 8.33 (t, 1h), 7.88 (d, 1h), 7.46 (d, 1h), 7.39 (dd, 1h), 5.13 (dd, 1h), 4.74 (s, 2h), 2.96
ꢀ–ꢀ
2.83 (m, 1h), 2.65
ꢀ–ꢀ
2.52 (m, 1h), 2.08 (s, 4h), 1.66 (td, 1h), 1.48 (h, 1h), 1.02 (td, 1h), 0.85 (dt, 1h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 430.05。
[0312]
2-[(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氧基]乙酰胺基)甲基]环丙烷-1-甲酸(i-24)的制备以与制备中间体 i-23 中所述类似的方式制备作为白色固体的i-24 (423 mg, 35.74%)。1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 12.16 (s, 1h), 11.12 (s, 1h), 8.10 (s, 1h), 7.82 (t, 1h), 7.51 (d, 1h), 7.41 (d, 1h), 5.17
ꢀ–ꢀ
5.07 (m, 1h), 4.80 (s, 2h), 2.60 (d, 2h), 2.08 (s, 3h), 1.70
ꢀ–ꢀ
1.60 (m, 1h), 1.47 (d, 1h), 1.03 (d, 1h), 0.84 (d, 1h); lcms (esi) m/z: [m h]
= 430.12。
[0313]
n-[2-[(2-氨基乙基)(甲基)氨基]乙基]-2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙酰胺(i-25)的制备步骤1: n-(2-[[2-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙酰胺基)乙基](甲基)氨基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(a)的制备
在25℃下经2小时向i-100 (963.50 mg，2.900 mmol，1.00当量)和n-[2-[ (2-氨基乙基) (甲基)氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(945.24 mg，4.350 mmol，1.50当量)在dcm中的搅拌溶液中加入hatu (1.65g，4.350 mmol，1.50当量)，然后滴加diea (1.12g，8.699 mmol，3.00当量)。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/ etoac (1:1)洗脱，得到作为黄色固体的a (898.6 mg，58.30%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 532。
[0314]
步骤2: n-[2-[(2-氨基乙基)(甲基)氨基]乙基]-2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙酰胺甲酸盐(i-25)的制备向b (309.00 mg，0.581 mmol，1.00当量)在dcm (4.00 ml，62.920 mmol，108.24当量) 中的搅拌混合物中加入tfa (1.00 ml，13.463 mmol，23.16当量)。在氮气气氛下，将该溶液在室温下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩，然后在以下条件下通过反相快速色谱法纯化：柱，c18硅胶；流动相，acn水溶液，10%至50%梯度，经35分钟；检测器，uv 254 nm。得到作为浅黄色固体的i-25 (268 mg，93.71%)。1h nmr (300 mhz, 甲醇-d4) δ 7.88 (d, 1h), 7.53 (d, 1h), 7.46 (dd, 1h), 5.14 (dd, 1h), 4.82 (s, 2h), 3.75 (t, 2h), 3.60 (d, 2h), 3.46 (q, 4h), 3.03 (s, 3h), 2.90-2.64 (m, 3h), 2.22
ꢀ–ꢀ
2.07 (m, 1h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 432.20。
[0315]
n-[2-[(2-氨基乙基)(甲基)氨基]乙基]-2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氧基]乙酰胺(i-26)的制备以与制备 i-25 中所述类似的方式制备作为黄色固体的 i-26 (200 mg, 41.07%)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 11.13 (s, 1h), 11.02 (s, 1h), 8.50
ꢀ–ꢀ
8.42 (m, 4h), 7.85
ꢀ–ꢀ
7.77 (m, 1h), 7.49 (dd, 2h), 5.12 (dd, 1h), 4.90 (s, 2h), 3.65
ꢀ–ꢀ
3.43 (m, 7h), 2.90 (m, 1h), 2.84 (s, 3h), 2.65
ꢀ–ꢀ
2.51 (m, 2h), 2.04 (dtt, 1h), 1.33
ꢀ–ꢀ
1.19 (m, 2h);lcms (esi) m/z: [m h]
= 432.18。
[0316]
4-[[3-(4-氨基丁磺酰基)丙基]氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐 (i-27)的制备步骤1: n-(4-羟基丁基)氨基甲酸叔丁酯(b)的制备将二碳酸二叔丁酯(52.89g，242.321 mmol，1.5当量)加入4-氨基丁-1-醇(a，14.40g，161.547 mmol，1.00当量)在thf (160.00 ml)中的搅拌溶液中，并将混合物在室温下搅拌1小时。将溶液浓缩至干，并将油状残余物通过快速柱色谱法(40-60% etoac-己烷)纯化，得到无色油，其静置时固化成白色固体(b，30.58g，100.02%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 190。
[0317]
步骤2: n-[4-[(4-甲基苯磺酰基)氧基]丁基]氨基甲酸叔丁酯(c)的制备在0℃下向b (30.58g，161.581 mmol，1.00当量)在dcm (400.00 ml) 中的搅拌溶液中加入dmap (2.96g，24.237 mmol，0.15当量)、tea (40.88g，403.952 mmol，2.5当量)和对甲苯磺酰氯(46.21g，242.371 mmol，1.5当量)。将所得混合物在0℃下搅拌2小时，然后升至室温并再搅拌5小时，将混合物浓缩并将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/ thf (1:1)洗脱得到作为浅黄色油的c (45.6g，82.17%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 344。
[0318]
步骤3: n-[4-(乙酰基硫基)丁基]氨基甲酸叔丁酯 (d)的制备向c (45.60g，132.77 mmol，1.00当量)在acn (300.00 ml)中的搅拌溶液中加入schiff试剂(15.16g，199.161 mmol，1.5当量)和k2co
3 (55.05g，398.323 mmol，3当量)。将
所得混合物在室温下搅拌12小时，用1m hcl处理，然后萃取到dcm中并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/ thf (1:1)洗脱，得到作为浅黄色油的d (28.7g，87.39%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 248。
[0319]
步骤4：n-[3-([4-[(叔丁氧基羰基)氨基]丁基]硫基)丙基]氨基甲酸苄酯(e)的制备向d (3.60g，14.554 mmol，1.00当量)在meoh (90.00 ml)中的溶液中加入n-(3-溴丙基)氨基甲酸苄酯(4.36g，16.010 mmol，1.1当量)和naome (3.15g，58.217 mmol，4当量)。将所得溶液在室温下搅拌3小时，在室温下将反应物用水淬灭，将所得混合物用etoac (3
×
100ml)萃取。将合并的有机层用盐水 (3
×
100ml) 洗涤，用无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶；流动相，nh4hco3水溶液，0%-100%梯度，经30分钟；检测器，uv 254 nm。得到作为浅黄色油的e (4.122g，71.42%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 397。
[0320]
步骤5: n-(3-[4-[(叔丁氧基羰基)氨基]丁磺酰基]丙基)氨基甲酸苄酯(f)的制备向e (4.13g，10.415 mmol，1.00当量)在meoh (60.00 ml)中的溶液中加入oxone
®ꢀ
(3.50g，20.840 mmol，2当量)。将所得溶液在室温下搅拌12小时。随后进行水处理和dcm萃取，将浓缩的残余物在以下条件下通过反相快速色谱法纯化：柱，c18硅胶；流动相，nh4hco3水溶液，0%-100%梯度，经30分钟；检测器，uv 254 nm。得到作为白色固体的f (2g，44.81%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 429。
[0321]
步骤6: n-[4-(3-氨基丙磺酰基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(g)的制备向f (1.95g，4.550 mmol，1.00当量)在乙醇(30.00 ml)中的溶液中加入甲酸铵(573.85 mg，9.101 mmol，2当量)和碳载的pd (oh)
2 (6.962 mmol，1.53当量)。将所得悬浮液在60℃下在1 atm氢气下搅拌12h。过滤所得混合物，将滤饼用meoh (3
×
30 ml)洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到作为黑色固体的g (1.12g，粗产物)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 295。
[0322]
步骤7: n-[4-(3-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基]丙磺酰基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(h)的制备
向 g (1.12 g, 3.804 mmol, 1.00当量) 在 nmp (30.00 ml) 中的溶液中加入2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(1.05 g, 3.804 mmol，1当量）和 diea（1.48 g，11.413 mmol，3当量）。将所得溶液在氮气气氛下在90℃搅拌3小时。将所得混合物用水(30ml)稀释并用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3x 30ml)洗涤并用无水na2so
4 干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩，将残余物通过反相快速色谱法在下列条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为黄色固体的h (970mg, 46.31%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 551。
[0323]
步骤8: 4-[[3-(4-氨基丁磺酰基)丙基]氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-27)的制备向 h (970.00 mg, 1.762 mmol, 1.00当量) 在1,4-二氧杂环己烷 (5 ml) 中的溶液中加入在 1,4-二氧杂环己烷中的无水 hcl (164.559 mmol, 93.41 当量)。将所得溶液在室温下搅拌3小时。浓缩后，将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 220 nm。这产生作为黄色固体的i-27 (712 mg, 89.17%)；1h nmr (300 mhz, 甲醇-d4) δ 8.55
ꢀ–ꢀ
8.48 (m, 1h, 甲酸), 7.59 (ddd, 1h), 7.12 (ddd, 2h), 5.08 (dd, 1h), 3.56 (t, 2h), 3.33
ꢀ–ꢀ
3.14 (m, 4h), 3.04
ꢀ–ꢀ
2.93 (m, 2h), 2.96
ꢀ–ꢀ
2.63 (m, 3h), 2.24
ꢀ–ꢀ
2.06 (m, 3h), 2.00
ꢀ–ꢀ
1.75 (m, 4h).; lcms (esi) m/z: [m h]
= 451.16。
[0324]
4-[[2-(2-氨基乙磺酰基)乙基]氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 三氟乙酸盐(i-28)的制备
步骤d1: n-(2-[[2-(1,3-二氧代异吲哚-2-基)乙基]硫基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(b)的制备在氮气气氛下在70℃下向 n-(2-巯基乙基)氨基甲酸叔丁酯 (a, 5.00 g, 28.207 mmol, 1.00当量) 和 n-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺 (7.17 g, 0.028 mmol, 1.00当量) 在 acn ( 10.00 ml)中的搅拌混合物中加入 k2co
3 (11.70 g, 0.085 mmol, 3.00当量)。5小时后，将所得混合物用etoac(3
×
500ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3 x 300 ml)洗涤并用无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩，并通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/etoac（5:1至1:1）洗脱，得到作为白色固体的b（8.20g，82.96%）。lcms (esi) m/z: [m h]
= 351。
[0325]
步骤2: n-[2-[2-(1,3-二氧代异吲哚-2-基)乙磺酰基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(c)的制备在氮气气氛下，在室温下向b (8.20g，23.400 mmol，1.00当量)在dcm (100 ml)中的搅拌混合物中加入m-cpba (12.11g，70.199 mmol，3.00当量)。在室温下用饱和na2s2o3水溶液(100 ml)淬灭反应。向混合物中加入饱和nahco3水溶液 (100 ml)，然后用etoac (3
×
400 ml)萃取，在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/ etoac (5:1至1:1)洗脱，得到作为白色固体的c (8.40g，87.30%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 383。
[0326]
步骤3: n-[2-(2-氨基乙磺酰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(d)的制备在80℃下，向c (3.40g，8.891 mmol，1.00当量)在etoh (100 ml)中的搅拌混合物中加入水合肼(0.89g，17.781 mmol，2.00当量)。在氮气气氛下，将所得混合物在80℃下搅
拌1小时。过滤悬浮液，将滤饼用etoh (100 ml)洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到作为白色固体的d (粗产物，1.88g，77.94%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 253。
[0327]
步骤4: n-[2-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 氨基]乙磺酰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(e)的制备在90℃和氮气气氛下，向d (1.88g，7.451 mmol，1.00当量)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(2.26g，8.196 mmol，1.10当量)在nmp (25.00 ml)中的混合物中滴加diea (2.89g，22.352 mmol，3.00当量)。将所得混合物搅拌12小时，然后用etoac (3
×
300 ml)萃取。将合并的有机层用盐水 (3
×
100 ml) 洗涤，经无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/ etoac (1:1)洗脱，得到作为黄色固体的e (1.58g，40.03%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 509。
[0328]
步骤5: 4-[[2-(2-氨基乙磺酰基)乙基]氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮; 三氟乙酸盐(i-28)的制备在氮气气氛下，在 25℃下向 e (1.54 g, 3.028 mmol, 1.00当量) 在 dcm (20 ml) 中的搅拌混合物中滴加三氟乙醛 (5.0 ml)。1小时后，将所得混合物在真空下浓缩。产生 作为黄色固体的i-28 (1.68 g, 122.25%)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 11.11 (s, 1h), 7.95 (s, 4h), 7.65 (dd, 1h), 7.18 (d, 1h), 7.12 (d, 1h), 6.84 (t, 1h), 5.07 (dd, 1h), 3.80 (q, 2h), 3.63 (m, 3h), 3.51 (t, 7h), 3.29 (dt, 4h), 2.89 (ddd, 1h), 2.70 (s, 1h), 2.65
ꢀ–ꢀ
2.52 (m, 2h), 2.18 (t, 1h), 2.03 (ddd, 1h), 1.96
ꢀ–ꢀ
1.84 (m, 1h).lcms (esi) m/z: [m h]
= 409.11。
[0329]
4-(2-[2-[(2-氨基乙基)(甲基)氨基]乙氧基]乙氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-29)的制备
17.51%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 254。
[0332]
步骤4: n-甲基-n-(2-[2-[(4-甲基苯磺酰基)氧基]乙氧基]乙基)氨基甲酸苄酯(e)的制备在0℃下，向d (2.14 g, 8.449 mmol, 1.00当量) 在dcm (30.00 ml) 中的搅拌溶液中加入 dmap (0.15 g, 1.267 mmol, 0.15当量)、tea (2.14 g, 21.121 mmol, 2.5当量) 和 对甲苯磺酰氯 (2.42 g, 12.673 mmol, 1.5当量)。将所得混合物在0℃下搅拌2小时，然后在室温下再搅拌5小时。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/thf (1:1)洗脱，得到作为无色油的e(3.51g，粗产物)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 408。
[0333]
步骤5: n-[2-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氧基]乙氧基)乙基]-n-甲基氨基甲酸苄酯(f)的制备向e (3.51 g, 8.614 mmol, 1.00当量)在dmf (30.00 ml)中的溶液中加入2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-羟基异吲哚-1,3-二酮 (2.36 g, 8.614 mmol, 1当量)和na2co
3 (1.37 g, 12.921 mmol, 1.5当量)。将所得混合物在80℃搅拌12小时，然后浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，ch3cn 水溶液，0% 至 100% 梯度，经30 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为浅黄色固体的f (1.527g, 34.79%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 510。
[0334]
步骤6: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-[2-[2-(甲基氨基)乙氧基]乙氧基]异吲哚-1,3-二酮 (g)的制备向 f (1.52 g, 2.997 mmol, 1.00当量) 在etoh (30.00 ml) 中的溶液中加入甲酸铵 (377.95 mg, 5.994 mmol, 2当量) 和 pd(oh)2/c (5.425 mmol, 1.81当量)。将所得悬浮液在1个氢气大气压下在60℃下搅拌12小时，然后过滤。将滤饼用meoh(3x 30ml)洗涤，将滤液在减压下浓缩。这产生作为浅黄色固体的g (1.062g, 94.83%)；lcms (esi) m/z [m h]
= 376。
[0335]
步骤7: n-(2-[[2-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氧基]乙氧基)乙基](甲基)氨基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(h)的制备
向g (1.06g，2.824 mmol，1.00当量)在dmf (10.00 ml)中的溶液中加入n-(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(539.41 mg，3.389 mmol，1.2当量)和nabh(oac)
3 (1.80g，8.471 mmol，3当量)。将所得溶液在室温下搅拌2小时，随后用水处理，用dcm萃取，并在减压下浓缩，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用dcm/meoh (10:1)洗脱，得到作为浅黄色固体的h (386mg，26.36%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 519。
[0336]
步骤8: 4-(2-[2-[(2-氨基乙基)(甲基)氨基]乙氧基]乙氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-29)的制备向 h (511.00 mg, 0.985 mmol, 1.00当量) 在 dcm (5.00 ml) 中的溶液中加入 tfa (5.00 ml, 67.315 mmol, 68.31当量)。将所得溶液在室温下搅拌3小时。将溶液浓缩，将残余物在下列条件下通过反相快速色谱法纯化：柱，c18硅胶； 流动相，ch3cn 水溶液，0% 至 100% 梯度，经 45 分钟； 检测器，uv 220 nm。这产生作为棕色油的i-29 (307 mg, 73.86%)；1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.70-10.30 (m, 1h), 8.18 (s, 1h,甲酸), 7.83 (dd, 1h), 7.51 (dd, 2h), 5.09 (dd, 1h), 4.41
ꢀ–ꢀ
4.32 (m, 2h), 3.84
ꢀ–ꢀ
3.75 (m, 2h), 3.63 (d, 2h), 2.99
ꢀ–ꢀ
2.80 (m, 3h), 2.65-2.58 (m, 5h), 2.24 (s, 3h), 2.08 (s, 1h), 1.98-2.06 (m, 1h); lcms (esi) m/z: [m h]
= 419。
[0337]
4-(氮杂环丁-3-基甲氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-30)的制备
步骤1: 3-[[(4-甲基苯磺酰基)氧基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(b)的制备在0℃下，向 3-(羟甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (a, 1.87 g, 9.987 mmol, 1.00当量) 在 dcm (50.00 ml) 中的搅拌溶液中加入 dmap (0.18 g, 1.498 mmol, 0.15当量)、tea (2.53 g, 24.968 mmol, 2.50当量) 和对甲苯磺酰氯 (2.86 g, 14.981 mmol, 1.50当量)。将所得混合物在0℃下搅拌2小时，然后在室温下再搅拌5小时。水处理和浓缩后，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/thf（1:1）洗脱，得到作为无色油的b（2.65 g，77.72%）；lcms (esi) m/z: [m h]
= 342。
[0338]
步骤2: 3-([[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氧基]甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(d)的制备向 c (2.30 g, 8.387 mmol, 1.00当量) 在 dmf (15.00 ml) 中的溶液中加入 3-[[(4-甲基苯磺酰基)氧基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (b , 2.86 g, 8.387 mmol, 1当量) 和 na2co
3 (1.33 g, 12.581 mmol, 1.5当量)。将所得混合物在1个氢气大气压下在80℃下搅拌5小时。在室温下用水淬灭反应，并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3 x 100 ml)洗涤并经无水na2so
4 干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生作为浅黄色固体的d (3.37g, 90.61%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 444。
[0339]
步骤3: 4-(氮杂环丁-3-基甲氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-30)的制备
向 d (2.39 g, 5.389 mmol, 1.00当量) 在dcm (10.00 ml) 中的溶液中加入 tfa (10.00 ml, 134.630 mmol, 42.34当量)。将所得溶液在室温下搅拌3小时，在减压下浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 220 nm。这产生作为浅黄色固体的i-30 (1.712 g, 87.72%)；1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.80-10.25 (m, 1h), 9.65-8.35 (m, 1h), 7.87 (dd, 1h), 7.54 (dd, 2h), 5.11 (dd, 1h), 4.39 (d, 2h), 4.09 (dd, 2h), 3.96 (dd, 2h), 3.37
ꢀ–ꢀ
3.24 (m, 1h), 2.99-2.81 (m, 1h), 2.66-2.61 (m, 1h), 2.61
ꢀ–ꢀ
2.53 (m, 1h), 2.11-1.98 (m, 1h); lcms (esi) m/z: [m h]
= 344.12。
[0340]
5-(氮杂环丁-3-基甲氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-31)的制备以与制备 i-30 中所述类似的方式制备作为白色固体的 i-31 (906.2 mg, 81.38%)。1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 8.40 (s, 0.4h, 甲酸), 7.88 (d, 1h), 7.52 (d, 1h), 7.42 (dd, 1h), 5.13 (dd, 1h), 4.35 (d, 2h), 4.08 (t, 2h), 3.85 (t, 2h), 3.22 (d, 1h), 3.00-2.80 (m, 1h), 2.67-2.61 (m, 1h), 2.60-2.54 (m, 1h), 2.14
ꢀ–ꢀ
1.99 (m, 1h).; lcms (esi) m/z: [m h] = 344.12。
[0341]
4-[2-(氮杂环丁-3-基)乙氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-32)的制备步骤1: 3-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(b)的制备
在氮气下，在schlenk烧瓶中加入3-氧代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(a，2.50g，14.603 mmol，1.00当量)和2-(三苯基-λ5-亚膦基)乙酸乙酯(5.60g，16.063 mmol，1.10当量)。加入无水甲苯(100 ml)，将混合物加热回流2小时，冷却至室温后，将所得混合物浓缩，用硅胶柱(环己烷：etoac，5:1)纯化。得到作为无色油的b (3g，85.14%)。lcms (esi) m/z [m h]
= 304。
[0342]
步骤2: 3-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(c)的制备在室温和 1 个氢气大气压下，向 b (3.0 g, 9.8 mmol, 1.0当量) 在 etoh (50 ml) 中的搅拌溶液中加入 10% pd/c (500 mg)。将反应物在室温下搅拌12小时，然后过滤除去催化剂。将滤液在真空下浓缩，得到作为黄色油的c(2.6g，76.16％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 216。
[0343]
步骤3: 3-(2-羟乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(d)的制备在氮气气氛下，在 0℃下，向 c (1.30 g, 5.343 mmol, 1.00当量) 在 thf (15.00 ml) 中的搅拌溶液中分批加入 lialh4 (202.79 mg, 5.343 mmol, 1.00当量)。通过在0℃下加入etoac淬灭反应。将所得混合物过滤，将滤饼用etoac洗涤。将滤液在减压下浓缩，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，得到作为无色油的d(1g，92.99%)，lcms (esi) m/z: [m h]
= 202。
[0344]
步骤4: 3-[2-[(4-甲基苯磺酰基)氧基]乙基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(e)的制备在室温下将 d (950.00 mg, 4.720 mmol, 1.00当量) 添加到对甲苯磺酰氯 (1079.81 mg, 5.664 mmol, 1.20当量) 在无水 dcm (15 ml) 中的溶液中，然后滴加 tea ( 573.15 毫克，5.664 mmol，1.20 当量）。将混合物在室温下搅拌2小时，然后浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(梯度洗脱1:15至1:5 etoac/己烷)纯化，得到作为无色油的e(1.5 g, 90.99%)，lcms (esi) m/z: [m h]
= 356。
[0345]
步骤5: 3-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氧基]乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(f)的制备
将e (800.00 mg, 2.251 mmol, 1.00当量), 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-羟基异吲哚-1,3-二酮 (617.21 mg, 2.251 mmol, 1.00当量)和na2co
3 (357.82 mg, 3.376 mmol, 1.50当量)在dmf (3 ml)中的溶液在80℃下搅拌2小时。将所得混合物用etoac萃取，将合并的有机层用盐水洗涤并经无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用etoac洗脱，得到作为无色油的f(500mg，80.12％)， lcms (esi) m/z: [m h]
= 458。
[0346]
步骤6: 4-[2-(氮杂环丁-3-基)乙氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-32)的制备在室温下向f (542.00 mg, 1.185 mmol, 1.00当量) 在 dcm (10 ml) 中的搅拌溶液中滴加 tfa (5 ml)。搅拌2小时后，将所得混合物在减压下浓缩，将残余物通过硅胶快速柱色谱法纯化，得到作为黄色固体的i-32(503mg，95.2％)。1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.11 (s, 1h), 8.58 (d, 2h), 7.84 (dd, 1h), 7.49 (dd, 2h), 5.09 (dd, 1h), 4.24 (t, 2h), 4.10
ꢀ–ꢀ
3.84 (m, 5h), 3.11
ꢀ–ꢀ
2.80 (m, 2h), 2.66-2.53 (m, 1h), 2.16-1.98 (m, 3h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 358.13。
[0347]
5-(氮杂环丁-3-基氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基) 异吲哚-1,3-二酮 (i-33)的制备步骤1: 3-[(4-甲基苯磺酰基)氧基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(b)的制备在0℃下，向3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(a, 2.50 g, 14.433 mmol, 1.00
当量) 和对甲苯磺酰氯(4.13 g, 21.650 mmol, 1.50当量)在dcm中的搅拌溶液中分批加入dmap (264.49 mg, 2.165 mmol, 0.15当量)和tea (4.38 g, 43.300 mmol, 3.00当量)。将所得混合物在减压下浓缩，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/etoac(1:1)洗脱，得到作为棕色油的b(4.4g，93.11％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 328。
[0348]
步骤2: 3-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(c)的制备向 b (4.40 g, 13.439 mmol, 1.00当量) 和 ki (0.22 g, 1.344 mmol, 0.10当量) 在 dmf 中的搅拌溶液中分批加入 khco
3 (4.04 g, 40.318 mmol, 3.00当量)。在100℃下搅拌8小时后，将所得混合物用etoac(3
×
150ml)萃取，将有机萃取物在减压下浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，10% 至 50% 梯度，经10 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为灰白色固体的c (1.73 g, 29.98%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 430。
[0349]
步骤3: 5-(氮杂环丁-3-基氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-33)的制备将 c (1.53 g, 3.563 mmol, 1.00当量) 和 tfa (5.00 ml, 67.315 mmol, 18.89当量) 在 dcm 中的溶液在室温下搅拌 2 h。将所得混合物在减压下浓缩，将残余物通过反相快速色谱法在下列条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，10% 至 50% 梯度，经10 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为白色固体的 i-33 (1.08 g, 96.43%)。1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.11 (s, 1h), 8.25 (s, 甲酸, 1h), 7.88 (d, 1h), 7.32 (d, 2h), 5.30 (p, 1h), 5.13 (dd, 1h), 4.31 (dd, 2h), 3.89 (dd, 2h), 2.99-2.80 (m, 1h), 2.68
ꢀ–ꢀ
2.52 (m, 2h), 2.13-1.97 (m, 1h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 330.05。
[0350]
5-[2-(4-氨基哌啶-1-基)乙氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-34)的制备
步骤1: 5-(2-溴乙氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (b)的制备在0℃下，向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮 (a, 1.37 g, 4.996 mmol, 1.00当量)在thf (35 ml)中的溶液中加入2-溴乙醇(0.94 g, 7.494 mmol, 1.5当量)、pph
3 (1.97 g, 7.494 mmol, 1.5当量)和diad (1.52 g, 7.494 mmol, 1.5当量)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。在水处理和dcm萃取之后，通过反相快速色谱法在以下条件下纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为黑色固体的b (1.52g, 79.82%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 381, 383。
[0351]
步骤2: n-[1-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯(c)的制备向 b (1.52 g, 3.988 mmol, 1.00当量) 在acn (35.00 ml) 中的溶液中加入 n-(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯 (0.80 g, 3.988 mmol, 1.00当量)、ki (0.66 g，3.988 mmol，1.00当量）和 k2co3（1.65 g，11.963 mmol，3.00当量）。将所得混合物在70℃下搅拌2小时。在水处理和dcm萃取之后，通过反相快速色谱法在以下条件下纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经30 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为无色固体的c (1.402 g, 70.24%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 501。
[0352]
步骤3: 5-[2-(4-氨基哌啶-1-基)乙氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-34)的制备
向 c (1.66 g, 3.316 mmol, 1.00当量) 在 dcm (10.00 ml) 中的溶液中加入 tfa (10.00 ml, 134.630 mmol, 40.60当量)。将所得溶液在室温下搅拌3小时。浓缩后，在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 220 nm。这产生作为白色固体的i-34 (840 mg, 62.52%)；1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.13 (s, 1h), 8.52-8.26 (m, 2h), 8.16 (s, 1h, 甲酸), 7.88 (d, 1h), 7.51 (d, 1h), 7.40 (dd, 1h), 5.14 (dd, 1h), 4.49 (t, 2h), 3.47 (d, 2h), 3.37-2.28 (m, 2h), 3.29-3.19 (m, 1h), 3.03
ꢀ–ꢀ
2.70 (m, 3h), 2.67-2.62 (m, 1h), 2.61-2.55 (m, 1h), 2.14-1.98 (m, 3h), 1.88-1.68 (m, 2h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 401.17。
[0353]
5-[7-氮杂螺[3.5]壬-2-基氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-35)的制备步骤1: 2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(b)的制备向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮 (a, 1.37 g, 4.99 mmol, 1.00当量)和2-羟基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(1.81 g, 7.494 mmol, 1.5当量)在thf (30.00 ml)中的溶液中加入pph
3 (1.97 g, 7.494 mmol, 1.5当量)。在0℃下经10分钟向该混合物中滴加diad (1.52 g, 7.494 mmol, 1.5当量)。将反应物在室温下再搅拌5小时。将所得混合物在减压下浓缩，将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为白色固体的b (1.964g, 79.01%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 498。
[0354]
步骤2: 5-[7-氮杂螺[3.5]壬-2-基氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-35)的制备
向 b (1.96 g, 3.939 mmol, 1.00当量) 在 dcm (10.00 ml, 157.300 mmol, 39.93当量) 中的溶液中加入 tfa (10.00 ml, 134.630 mmol, 34.18当量)。将所得混合物在室温下搅拌5小时，然后浓缩和在以下条件下通过反相快速色谱法纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为浅灰色固体的i-35 (1.6318 g, 93.13%)：1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 8.39 (s, 甲酸, 1h), 7.84 (d, 1h), 7.35
ꢀ–ꢀ
7.24 (m, 2h), 5.12 (dd, 1h), 5.00 (p, 1h), 3.00
ꢀ–ꢀ
2.81 (m, 5h), 2.67
ꢀ–ꢀ
2.43 (m, 2h), 2.51-2.43 (m, 3h), 2.16-1.95 (m, 1h), 1.95
ꢀ–ꢀ
1.82 (m, 2h), 1.65-1.78 (m, 4h); lcms (esi) m/z: [m h]
= 398.16。
[0355]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[2-(哌嗪-1-基)乙氧基]异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-36)的制备步骤1: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(丙-2-烯-1-基氧基)异吲哚-1,3-二酮 (b)的制备向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮 (a, 5.48 g, 19.983 mmol, 1.00当量)和烯丙基溴(3.63 g, 29.975 mmol, 1.5当量)在dmf (50.00 ml)中的溶液中加入ki (331.72 mg, 1.998 mmol, 0.1当量)和khco
3 (3.00 g, 29.975 mmol, 1.5当量) 。将所得混合物在65℃下搅拌12小时，然后用水(100ml)稀释。将所得混合物用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3 x 60 ml)洗涤并经无水na2so
4 干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩，通过硅胶柱色谱法纯化，用己烷/etoac(1:1)洗脱，得到作为黄绿色固体的b(6.7g，粗产物)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 315。
[0356]
步骤2: 2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙醛 (c)的制备
向b (3.14 g, 9.991 mmol, 1.00当量)在1,4-二氧杂环己烷(30.00 ml)中的溶液中加入naio
4 (10.68 g, 49.953 mmol, 5.00当量)、水(3.00 ml)和2,6-二甲基吡啶(3.21 g, 29.972 mmol, 3当量)。在室温下向上述混合物中加入二水合k2oso
4 (0.37 g, 0.999 mmol, 0.1当量)。在室温下向上述混合物中加入 k2oso4.dihydrate (0.37 g, 0.999 mmol, 0.1当量)。将所得混合物在室温下再搅拌2小时，然后用水淬灭。将所得混合物用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3 x 100 ml)洗涤并经无水na2so
4 干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生作为浅棕色固体的c (1.83 g, 57.92%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 317。
[0357]
步骤3: 4-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(d)的制备在室温下，向c (628.00 mg, 1.986 mmol, 1.00当量)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(369.84 mg, 1.986 mmol, 1当量)在dmf (10.00 ml)中的溶液中加入nabh(oac)
3 (1262.52 mg, 5.957 mmol, 3当量) 。将所得混合物在室温下搅拌3小时，然后用水淬灭，萃取到dcm中并浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为灰白色固体的d (812 mg, 84.05%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 487。
[0358]
步骤4: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[2-(哌嗪-1-基)乙氧基]异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-36)的制备向4-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(d, 2.10 g, 4.316 mmol, 1.00当量)在dcm (10.00 ml, 157.300 mmol, 36.44当量)中的溶液中加入tfa (10.00 ml, 134.630 mmol, 31.19当量)。将所得混合物在室温下搅拌3小时，然后在减压下浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为白色固体的i-36 (1.43g,74.24%)；1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.07 (s, 1h), 8.34 (s, 1h), 7.84 (d, 1h), 7.47 (d, 1h), 7.37 (dd, 1h), 5.12 (dd, 1h), 4.30 (t, 2h), 2.99-2.86 (m, 5h), 2.77 (t, 2h), 2.67-2.55 (m, 5h), 2.13-1.96 (m, 1h).; lcms (esi) m/z: [m h]
= 387.16。
[0359]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[3-(哌嗪-1-基)丙氧基]异吲哚-1,3-二酮甲酸盐
(i-37)的制备步骤1: 5-(3-溴丙氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (b)的制备向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮 (a, 1.37 g, 4.996 mmol, 1.00当量)和3-溴丙醇(1.04 g, 7.494 mmol, 1.5当量)在thf (20.00 ml)中的溶液中加入pph
3 (1.97 g, 7.494 mmol, 1.5当量)。在 0℃下经10 分钟向其中滴加 diad (1.52 g, 7.494 mmol, 1.5当量)。将所得混合物在室温下再搅拌5小时。在水处理和dcm萃取之后，将有机层在减压下浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱发纯化残余物：柱，c18硅胶；流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45分钟；检测器，uv 254 nm。这产生作为无色固体的b (1.85g,93.70%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 395, 397。
[0360]
步骤2: 4-(3-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]丙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(c)的制备向b (1.85 g, 4.681 mmol, 1.00当量)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.05 g, 5.617 mmol, 1.2当量)在dmf (30.00 ml)中的溶液中加入diea (3.02 g, 23.405 mmol, 5当量)和ki (77.71 mg, 0.468 mmol, 0.1当量)。将所得混合物在60℃下搅拌5小时。在处理和萃取之后，通过反相快速色谱发在以下条件下纯化残余物：柱，c18硅胶；流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为灰白色固体的c (975 mg, 41.61%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 501。
[0361]
步骤3: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[3-(哌嗪-1-基)丙氧基]异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-37)的制备
向 c (975.00 mg, 1.948 mmol, 1.00当量) 在 dcm (5.00 ml, 78.650 mmol, 40.38当量) 中的溶液中加入 tfa (5.00 ml, 67.315 mmol, 34.56当量)。将所得混合物在室温下搅拌5小时。浓缩后，将残余物通过反相快速色谱发在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为白色固体的i-37 (667mg,74.17%)；1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.12 (s, 1h), 8.29 (d, 甲酸, 1h), 7.84 (d, 1h), 7.44 (d, 1h), 7.36 (dd, 1h), 5.12 (dd, 1h), 4.23 (t, 2h), 3.17
ꢀ–ꢀ
2.85 (m, 5h), 2.67
ꢀ–ꢀ
2.58 (m, 2h), 2.53-2.57 (m, 4h), 2.50
ꢀ–ꢀ
2.29 (m, 3h), 2.15-2.05 (m, 1h), 2.01-1.82 (m, 2h); lcms (esi) m/z: [m h]
= 401.17。
[0362]
5-[4-(4-氨基哌啶-1-基)丁氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (i-38)的制备步骤1: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(戊-4-烯-1-基氧基)异吲哚-1,3-二酮 (b)的制备向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮 (a, 500.00 mg, 1.823 mmol, 1.00当量)和khco
3 (273.81 mg, 2.735 mmol, 1.50当量)在dmf (10.00 ml)中的搅拌溶液中分批加入5-溴-1-戊烯(326.07 mg, 2.188 mmol, 1.20当量)和ki (30.27 mg, 0.182 mmol, 0.10当量)。将所得混合物在氮气气氛下在65℃下搅拌过夜。使混合物冷却至室温，将所得混合物用etoac(2
×
20ml)萃取。将合并的有机层用水(3
×
10ml)洗涤并经无水na2so
4 干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩，将残余物通过制备型tlc(石油醚/etoac 1:1)纯化，得到作为白色固体的b(400mg，64.08％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 343。
[0363]
步骤2: 4-[[2-(2, 6-二氧代哌啶-3-基)-1, 3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]丁醛(c)的制备
二酮甲酸盐(i-40)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-39)的制备步骤1: 4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(b)的制备向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮 (a, 5.40 g, 19.549 mmol, 1.00当量)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.64 g, 19.549 mmol, 1当量)在dmf (35.00 ml)中的溶液中加入diea (7.58 g, 58.648 mmol, 3当量)。将所得混合物在90℃下搅拌5小时。通过在室温下加入水(50ml)来淬灭反应。将所得混合物用etoac(3
×
50ml)萃取，将合并的有机层用盐水(3
×
100ml)洗涤并经无水na2so
4 干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生作为浅黄色固体的 b (7.32 g, 84.62%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 443。
[0367]
步骤2: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-39)的制备向b (900.00 mg, 2.034 mmol, 1.00当量)在dcm中的溶液中加入tfa (5.00 ml, 67.315 mmol, 33.09当量)。将所得混合物在室温下搅拌3小时，然后在真空下浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为黄色固体的i-39 (786.8mg, 99.41%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 343。
[0368]
步骤3: 3-([4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基]甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(c)的制备向i-39 (1.10 g, 3.213 mmol, 1.00当量)和3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁
酯(595.13 mg, 3.213 mmol, 1当量)在dmf (10.00 ml)中的溶液中加入nabh(oac)
3 (2.04 g, 9.639 mmol, 3当量)。将所得混合物在室温下搅拌3小时。在水处理、dcm萃取和浓缩后，通过反相快速色谱法在以下条件下纯化残余物：柱，c18硅胶；流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟；检测器，uv 254 nm。这产生作为浅黄色固体的c (991 mg, 60.29%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 512。
[0369]
步骤4: 5-[4-(氮杂环丁-3-基甲基)哌嗪-1-基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮甲酸盐(i-40)的制备向c (991.00 mg, 1.937 mmol, 1.00当量)在dcm (10.00 ml, 157.300 mmol, 81.20当量)中的溶液中加入tfa (10.00 ml, 134.630 mmol, 69.50当量)。将所得混合物在室温下搅拌3小时，然后在减压下浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为黄色固体的i-40 (702 mg, 85.29%)；1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.07 (s, 1h), 8.25 (s,甲酸, 1h), 7.69 (d, 1h), 7.34 (d, 1h), 7.26 (dd, 1h), 5.08 (dd, 1h), 4.00 (t, 2h), 3.66 (dd, 2h), 3.43 (t, 4h), 3.11-2.96 (m, 1h), 2.95
ꢀ–ꢀ
2.79 (m, 1h), 2.65
ꢀ–ꢀ
2.51 (m, 4h), 2.50-2.44 (m, 4h), 2.09-1.96(m, 1h).; lcms (esi) m/z: [m h]
= 412.19。
[0370]
3-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基]丙酸(i-41)的制备步骤1: 3-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基]丙酸叔丁酯(b)的制备
向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)异吲哚-1,3-二酮 (a, 5.0 g, 14.6 mmol, 1.0当量)和3-溴丙酸叔丁酯(3.6 g 17.2 mmol, 1.2当量)在dmf (50 ml)中的溶液中滴加diea (2.8 g, 21.7 mmol, 1.5当量)，并将混合物在70℃下搅拌6小时。将反应混合物浓缩，将残余物通过反相快速色谱法在下列条件下纯化：柱，c18球形柱； 流动相，acn 水溶液，10% 至 70% 梯度，经50 分钟； 检测器，uv 254 nm。得到作为黄色固体的3-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基]丙酸叔丁酯(b)。lcms (esi) m/z [m h]
= 471。
[0371]
步骤2: 3-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基] 哌嗪-1-基]丙酸(i-41)的制备将b(2.1g，4.5mmol)在dcm(20ml)和tfa(5ml)中的溶液在室温下搅拌2小时。将混合物在减压下浓缩，将残余物通过反相快速色谱法在下列条件下纯化：柱，c18球形柱； 流动相，meoh 水溶液，10% 至 30% 梯度，经50 分钟； 检测器uv 254 nm ，以得到作为黄色固体的3-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基] 哌嗪-1-基]丙酸(i-41) (0.78 g, 42.2%)。1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 12.03 (br, 1h), 11.10 (s, 1h), 7.68 (d, j = 8.5 hz, 1h), 7.35 (d, j = 1.7 hz, 1h), 7.27 (dd, j = 8.6, 2.0 hz, 1h), 5.08 (dd, j = 12.8, 5.4 hz, 1h), 3.49
–
3.40 (m, 4h), 2.96
–
2.80 (m, 1h), 2.67
–
2.52 (m, 8h), 2.44 (t, j = 6.9 hz, 2h), 2.07
–
1.97 (m, 1h). lcms (esi) m/z [m h]
= 415.10。
[0372]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮 三氟乙酸盐(i-42)的制备
步骤1: 4-((4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(b)的制备在室温下将2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)异吲哚-1,3-二酮 (a, 1.5 g, 4.4 mmol, 1.0当量)和4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.93 g, 4.4 mmol, 1.0当量)在dmf (20 ml)中的溶液搅拌30分钟。然后加入nabh(oac)
3 (3.7 g, 17.5 mmol, 4.0当量)并将所得混合物在50℃下搅拌3.5小时。将混合物冷却至室温，倒入水(100ml)中，用etoac(50ml
×
3)萃取。将合并的有机层浓缩并在以下条件下通过制备型hplc纯化残余物：c18球形柱，20-35um，330g； 流动相，a相：水（0.16% nh4hco3），b：acn（梯度b% 0%-70%，运行时间40分钟）； 流速：80 ml/min； 检测器，254 nm 的紫外检测。从纯化中获得作为黄色固体的b (1.2 g, 50.8%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 540。
[0373]
步骤2: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-42)的制备在室温下将4-([4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基]甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(b, 1.2 g, 2.2 mmol, 1.0当量)在dcm (8 ml)和tfa (2.0 ml)中的溶液搅拌2小时。浓缩混合物并在以下条件下通过制备型hplc纯化残余物：c18球形柱，20-35um，330g； 流动相，a相：水（0.16% nh4hco3），b：acn（梯度b% 0%-60%，运行时间45分钟）； 流速：80 ml/min； 检测器，254 nm 的紫外检测。得到作为黄色固体的化合物i-42 (0.60 g, 61.3%)。1h nmr (300 mhz, dmso-d6): δ 10.42 (br, 1h), 9.12 (br, 1h), 7.73
–
7.60 (m,1h), 7.35 (s, 1h), 7.26 (d, j = 8.7 hz, 1h), 5.07 (dd, j = 12.7, 5.3 hz, 1h), 4.66 (br,1h), 3.12
–
3.33 (m, 5h), 2.93
–
2.75 (m, 5h), 2.19 (d, j = 5.6 hz, 3h), 2.07
–
1.98 (m, 2h), 1.85 (d, j = 11.7 hz, 5h), 1.26 (d, j = 11.9 hz, 3h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 440.35。
[0374]
5-((2-氨基乙基)氨基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-43)的制备
步骤1: 5-氟异苯并呋喃-1,3-二酮 (b)的制备向 4-氟代苯-1,2-二甲酸 (a, 41.4 g, 0.22 mol, 1.00当量) 的溶液中加入乙酸酐 (200 ml)。将反应物在 120℃下搅拌 2 小时，然后冷却至室温并在减压下浓缩，得到作为白色固体的5-氟-2-苯并呋喃-1,3-二酮 (b, 37.2 g, 定量)。
[0375]
步骤2: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异二氢吲哚-1,3-二酮 (c)的制备在氮气气氛下向5-氟-2-苯并呋喃-1,3-二酮 (b, 37.2 g, 0.22 mol, 1.0当量)和3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(55.4 g, 0.34 mol, 1.5当量)在乙酸(300 ml)中的搅拌溶液中加入naoac (55.2 g, 0.67 mol, 3.0当量)。将所得混合物在120℃下搅拌3小时，然后冷却至室温。过滤悬浮液，将滤饼用水(3 x 150 ml)洗涤，得到作为灰色固体的2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮 (c, 53.1 g, 87.4%)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 277。
[0376]
步骤3: (2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(d)的制备向n-(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.9 g, 18.1 mmol, 1.0当量) 和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮 (c, 5.0 g, 18.1 mmol, 1.0当量)在dmf (50 ml)中的溶液中加入diea (4.7 g, 36.2 mmol, 2.00当量)。将混合物在 80℃下搅拌 2 小时，然后冷却至室温并倒入水 (500 ml) 中。将所得混合物用etoac(500ml x 3)萃取。将合
并的有机层浓缩并在以下条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18球形柱； 流动相，acn 水溶液，0% 至 100% 梯度，经50 分钟； 70ml/min 检测器，uv 254 nm，以得到作为黄色固体的所需产物n-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基] 氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(d, 1.5 g, 19.5%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 417。
[0377]
步骤4: 5-((2-氨基乙基)氨基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-43)的制备在0℃下，向n-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氨基]乙基) 氨基甲酸叔丁酯(d, 1.5 g, 3.6 mmol, 1.0当量)在dcm (20 ml中的搅拌溶液中滴加tfa (4 ml)。将所得混合物升温至室温并搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，将粗产物通过制备型hplc纯化，得到作为黄色固体的5-[(2-氨基乙基)氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-43, 0.97 g, 63.1%)。1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.09 (s, 1h), 7.88 (br, 3h), 7.63 (d, j = 8.3 hz, 1h), 7.22 (br, 1h), 7.04 (d, j = 1.9 hz, 1h), 6.92 (dd, j = 8.4, 2.1 hz, 1h), 5.06 (dd, j = 12.8, 5.3 hz, 1h), 3.52
–
3.39 (m, 2h), 3.08
–
2.81 (m, 3h), 2.65
–
2.53 (m, 2h), 2.06
–
1.96 (m, 1h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 317.00。
[0378]
5-(2-氨基乙氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-44)的制备步骤1: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异二氢吲哚-1,3-二酮 (b)的制备向5-羟基-2-苯并呋喃-1,3-二酮 (a, 2.0 g, 12.2 mmol, 1.0当量) 和3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(3.0 g, 18.3 mmol, 1.5当量)在hoac (40 ml)中的搅拌溶液中加
入naoac (3.0 g, 36.6 mmol, 3.0当量)。将反应混合物在氮气气氛下在120℃下搅拌，然后在减压下浓缩至干。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/etoac(4:1)洗脱，得到作为白色固体的b(2.9g，86.7％)。lcms (esi) m/z [m h]
= 275。
[0379]
步骤2: (2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(c)的制备在氮气气氛下向b (1.0 g, 3.6 mmol, 1.0当量)和1,2,3-噁噻唑烷-3-甲酸叔丁酯2,2-二氧化物(0.98 g, 4.4 mmol, 1.2当量)在dmf (10 ml)中的搅拌溶液中加入diea (0.94 g, 7.3 mmol, 2.0当量)。在 80℃下搅拌 2 小时后，加入水 (100 ml)，然后用 etoac (3 x 100 ml) 萃取。将合并的有机层用水(3
×
100ml)洗涤并经无水na2so
4 干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩至干，将残余物经反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18球形柱； 流动相，acn 水溶液，0% 至 100% 梯度，经 50 分钟； 70ml/min 检测器，uv 254 nm，得到作为黄色油的c (1.7 g, 94.4%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 418。
[0380]
步骤3: 5-(2-氨基乙氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐(i-44)的制备向c (1.4 g, 3.4 mmol, 1.0当量) 在 dcm (20 ml) 中的搅拌溶液中滴加 tfa (5 ml)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物在减压下浓缩，将残余物通过硅胶快速柱色谱法纯化，得到作为黄色固体的i-44(750mg，51.2％)。1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.15 (s, 1h), 8.04 (br, 3h), 7.91 (d, j = 8.3 hz, 1h), 7.50 (d, j = 2.2 hz, 1h), 7.41 (dd, j = 8.3, 2.3 hz, 1h), 5.14 (dd, j = 12.9, 5.3 hz, 1h), 4.38 (t, j = 4.9 hz, 2h), 3.35
–
3.23 (m, 2h), 2.98
–
2.81 (m, 1h), 2.66
–
2.54 (m, 2h), 2.11
–
2.01 (m, 1h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 418.10。
[0381]
3-(4-((2-氨基乙基)氨基)-1-氧代异二氢吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮 (i-45)的制备步骤1:(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)乙基)氨
基甲酸叔丁酯(b)的制备将来那度胺(a，442.00 mg，1.705 mmol，1.00当量)、n-(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(229.00 mg，1.439 mmol，0.84当量)和acoh (100.00 mg，1.665 mmol，0.98当量)悬浮于meoh (20.00 ml)中。将混合物在室温下搅拌2小时，随后加入nabh3cn (145.00 mg，2.307 mmol，1.35当量)。再过1小时后，用饱和nahco3水溶液淬灭反应，用dcm (3
×
40 ml)萃取。将合并的有机层用盐水(1
×
100 ml)洗涤，并经无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用dcm：meoh (10:1)洗脱得到作为黄色固体的b (100 mg，14.58%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 403。
[0382]
步骤2:3-(4-((2-氨基乙基)氨基)-1-氧代异二氢吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮 (i-45)的制备将b (100.00 mg, 0.248 mmol, 1.00当量) 溶解在 dcm (5.00 ml) 中。添加 tfa (1.00 ml, 13.463 mmol, 54.18当量)并将所得溶液在室温下搅拌0.5小时。在减压下浓缩得到作为粗产物的i-45，其不经进一步纯化用于下一步。lcms (esi) m/z: [m h]
= 303。
[0383]
3-(6-((2-氨基乙基)氨基)-1-氧代异二氢吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮 (i-46)的制备步骤1:2-(溴甲基)-5-硝基苯甲酸甲酯(b)的制备
1.620 mmol, 1.20当量)。将反应物再搅拌2小时，然后用5% na2hco3 水溶液淬灭。将所得混合物用dcm(40ml x 3)萃取，将合并的有机层经na2so4 干燥并浓缩，得到作为白色固体的e(450mg，82.83％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 403。
[0387]
步骤5:3-(6-((2-氨基乙基)氨基)-1-氧代异二氢吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮 (i-46)的制备将e（50.00 mg，0.124 mmol，1.00当量）和 tfa（0.50 ml，6.732 mmol，54.18当量）溶解在 dcm（2.00 ml，31.460 mmol，253.22当量）中。将溶液在室温搅拌0.5小时，然后浓缩，得到作为黄色油的i-46(50mg，粗产物)，其无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m h]
= 303。
[0388]
3-(5-((2-氨基乙基)氨基)-1-氧代异二氢吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮 (i-47)的制备步骤1:2-(溴甲基)-4-硝基苯甲酸甲酯(b)的制备将 2-甲基-4-硝基苯甲酸甲酯 (a, 2.00 g, 1当量)、nbs (2.40 g) 和 bpo (88.00 mg) 溶解在 ccl
4 (40.00 ml) 中。将溶液加热至回流并搅拌过夜。将所得混合物用50ml盐水洗涤，经na2so
4 干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚:etoac (5:1)洗脱，得到作为无色油的b(2.2 g, 78.33%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 275。
[0389]
步骤2:3-(5-硝基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮 (c)的制备
将b (508.50 mg, 1.855 mmol, 1.00当量)、3-氨基哌啶-2,6-二酮 (370.70 mg, 2.893 mmol, 1.56当量)和diea (755.00 mg, 5.842 mmol, 3.15当量)悬浮在acn (10.00 ml)中。将混合物在 80℃下搅拌 2 小时，然后冷却并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用dcm:acn (3:1)洗脱，得到作为灰色固体的c (230 mg, 42.86%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 290。
[0390]
步骤3:3-(5-氨基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮 (d)的制备将c (190.00 mg, 0.657 mmol, 1.00当量)和10% pd/c (44 mg)悬浮在dmf (5.00 ml)中。将混合物在室温和1个氢气大气压下搅拌过夜。将反应混合物通过硅藻土过滤并浓缩，得到作为黄色固体的d(170mg，99.82％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 260。
[0391]
步骤4:(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(e)的制备将d (250.00 mg, 0.964 mmol, 1.00当量)、n-(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(153.50 mg, 0.964 mmol, 1.00当量)和acoh (0.10 ml, 1.745 mmol, 1.81当量)悬浮在meoh (10.00 ml)中。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后加入nabh3cn(60.60mg，0.964mmol，1.00当量)。将混合物再搅拌2小时，然后用饱和nahco
3 (20 ml)稀释。将水层用dcm(3
×
40ml)萃取，将合并的有机层经na2so
4 干燥，过滤，浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/etoac(1:1)洗脱，得到作为浅黄色固体的e(100mg，25.77％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 403。
[0392]
步骤5:3-(5-((2-氨基乙基)氨基)-1-氧代异二氢吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮 (i-47)的制备将e (100.00 mg, 0.248 mmol, 1.00当量) 溶解在 dcm (5.00 ml) 中。添加 tfa (1.00 ml, 13.463 mmol, 54.18当量)并将所得溶液在室温下搅拌0.5小时。将混合物浓缩，得到作为黄色油的i-47(100mg，粗产物)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 303。
[0393]
3-(6-((6-氨基己基)氨基)-1-氧代异二氢吲哚-2-基) 哌啶-2,6-二酮 (i-48和
3-(5-((6-氨基己基) 氨基)-1-氧代异二氢吲哚-2-基) 哌啶-2,6-二酮 (i-49)的制备在室温下，向5-[(6-氨基己基)氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (a, 200.00 mg, 0.537 mmol, 1.00当量)在hoac (10.00 ml)中的搅拌溶液中分批加入zn粉(351.26 mg, 5.370 mmol, 10.00当量)。将所得混合物在60℃下搅拌30分钟。过滤所得混合物，将滤饼用etoac(4
×
10ml)洗涤。在减压下浓缩滤液并通过制备型hplc纯化残余物，得到作为白色固体的i-48(19mg，9.87％)和作为白色固体的i-49(23mg，11.95％)。各自lcms (esi) m/z: [m h]
= 359。
[0394]
7-[[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]庚酸(i-50)的制备在0℃下，向辛二酸(2.02 g, 11.596 mmol, 4.99当量)在dcm (25.00 ml)和thf (25.00 ml)中的搅拌溶液中加入a (1.00 g, 2.323 mmol, 1.00当量)、tea (822.55 mg, 8.129 mmol, 3.50当量)、hoat (347.73 mg, 2.555 mmol, 1.10当量)和edci (489.75 mg, 2.555 mmol, 1.10当量)。将所得溶液在0℃下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩，将残余物通过反相快速色谱法纯化，得到作为白色固体的i-50(900mg，66.04％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 587。
[0395]
6-[[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]-氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]螺[3.3]庚烷-2-甲酸(i-51)的制备
以与i-50的制备中所述类似的方式制备i-51。lcms (esi) m/z: [m h]
= 597。
[0396]
3-(2-(3-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-氧代丙氧基)乙氧基)丙酸(i-52)的制备步骤1: 中间体20 3-(2-(3-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-氧代丙氧基)乙氧基)丙酸乙酯(b)的制备向a (500 mg, 1.07 mmol, hcl)、3-[2-(3-乙氧基-3-氧代丙氧基)乙氧基]丙酸(250.79 mg, 1.07 mmol, 250.79
ꢀµ
l)和diea (691.84 mg, 5.35 mmol, 932.40
ꢀµ
l)在dcm (5 ml)中的溶液中加入edci (246.29 mg, 1.28 mmol)和hobt (173.60 mg, 1.28 mmol)。将混合物在20℃下搅拌16小时，然后在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法(0.1％甲酸水溶液/acn)纯化，然后冷冻干燥，得到作为黄色油的b(500mg，70.00％)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 647.6。
[0397]
步骤2: 中间体13 3-(2-(3-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-氧代丙氧基)乙氧基)丙酸(i-52)的制备
向b (500 mg, 0.7 mmol)在etoh (5 ml)中的溶液中加入naoh (77.30 mg, 1.93 mmol)在水(1 ml)中的溶液。将混合物在20℃下搅拌1小时，然后用水(30ml)稀释并用1n hcl调节至ph 6。将混合物用etoac(30ml
×
3)萃取，将合并的有机层经na2so
4 干燥并浓缩，得到作为棕色固体的i-52(470mg，95.02％)，其无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m na]

= 641.2。
etoac/石油醚，得到作为灰白色固体的b(1.4592 g, 87.27%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 720。
[0399]
步骤2: (2s,4r)-1-[(2s)-2-(2-[2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙酰胺基)-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (i-70)的制备向 b (1.45 g, 2.014 mmol, 1当量) 在 dcm (15 ml) 中的溶液中滴加 tfa (3 ml)。在室温下搅拌 2 小时后，将混合物在减压下浓缩并通过硅胶快速柱色谱法纯化残余物，得到作为灰白色固体的i-70 (1.05 g, 84.11%)。1h nmr (400 mhz, 甲醇-d4) δ 8.90 (s, 1h), 7.51
ꢀ–ꢀ
7.42 (m, 4h), 4.72 (s, 1h), 4.63
ꢀ–ꢀ
4.49 (m, 3h), 4.46
ꢀ–ꢀ
4.35 (m, 1h), 4.16
ꢀ–ꢀ
4.03 (m, 2h), 3.94
ꢀ–ꢀ
3.79 (m, 2h), 3.77
ꢀ–ꢀ
3.62 (m, 8h), 3.59 (t, j = 5.2 hz, 2h), 2.99
ꢀ–ꢀ
2.87 (m, 2h), 2.50 (s, 3h), 2.30
ꢀ–ꢀ
2.21 (m, 1h), 2.19
ꢀ–ꢀ
2.06 (m, 1h), 1.13
ꢀ–ꢀ
0.98 (m, 9h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 620.30。
[0400]
(s)-13-((2s,4r)-4-羟基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)-14,14-二甲基-11-氧代-3,6,9-三氧杂-12-氮杂十五烷-1-酸 (i-75)的制备
步骤1: 2-[2-[2-(2-苄氧基-2-氧代-乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙酸(b)的制备在0℃下，向2-[2-[2-(羧基甲氧基)乙氧基]乙氧基]乙酸(a, 3 g, 13.50 mmol)和tea (3.51 g, 34.71 mmol, 4.83 ml)在丙酮(20 ml)中的混合物中滴加溴甲苯 (2.42 g, 14.18 mmol, 1.68 ml)。将混合物在20℃下搅拌16小时，在此期间形成厚沉淀物。过滤出固体并用丙酮(10ml)洗涤。浓缩滤液，将残余物溶于水(300ml)中。将混合物用etoac(50ml x 3)洗涤，将水层用hcl(2m)处理至最终ph 3-5。将混合物用etoac(50ml x 3)萃取，将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经na2so
4 干燥，在真空下浓缩，得到作为黄色油的b(1.4g，4.48mmol，33.20％收率) ，气未经进一步纯化直接使用。1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ = 7.31-7.26 (m, 5h), 5.12 (s, 2h), 4.12 (s, 2h), 4.08 (s, 2h), 3.69-3.61 (m, 8h) ppm。
[0401]
步骤2: (s)-13-((2s,4r)-4-羟基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)-14,14-二甲基-11-氧代-3,6,9-三氧杂-12-氮杂十五烷-1-酸苄酯(c)的制备向b (836.17 mg, 2.68 mmol)在dcm (10 ml)中的溶液中加入hatu (1.32 g, 3.48 mmol)和diea (900.50 mg, 6.97 mmol, 1.21 ml)。然后加入(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨
基-3,3-二甲基-丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (1 g, 2.14 mmol, hcl)。将混合物在30℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩，得到黄色固体。将残余物通过反相快速(0.1％甲酸水溶液/acn)纯化并将级分冻干，得到作为黄色油的c(1.2g，1.66mmol，71.28％收率)。
[0402]
lcms (esi) m/z: [m h]
= 725.4. 1
h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ = 8.69 (s, 1h), 7.42-7.32 (m, 11h), 4.77-4.75 (m, 1h), 4.63-4.47 (m, 3h), 4.37-4.32 (m, 1h), 4.24-4.17 (m, 3h), 4.13 (d, j = 11.6 hz, 1h), 4.09-3.94 (m, 2h), 3.77-3.68 (m, 9h), 3.63-3.59 (m, 1h), 2.64-2.56 (m, 1h), 2.54 (s, 3h), 2.19-2.08 (m, 1h), 1.00-0.92 (m, 9h) ppm。
[0403]
步骤3: (s)-13-((2s,4r)-4-羟基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)-14,14-二甲基-11-氧代-3,6,9-三氧杂-12-氮杂十五烷-1-酸(i-75)的制备向 c (1.1 g, 1.52 mmol) 在 meoh (20 ml) 中的混合物中加入 10% pd/c (500 mg)。将混合物用氢气吹扫，然后加压至 15 psi 并在 25℃下搅拌 12 小时，然后在 40℃下搅拌 8 小时。过滤混合物，将滤液在真空下浓缩。将残余物通过反相快速(氨水/水条件)纯化，得到作为白色固体的i-75(560mg，882.25μm，58.14％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 635.2. 1
h nmr (400 mhz, 甲醇-d4) δ = 8.94-8.86 (m, 1h), 7.50-7.43 (m, 4h), 4.62-4.50 (m, 3h), 4.43-4.34 (m, 1h), 4.12 (s, 2h), 4.08 (d, j = 5.2 hz, 2h), 3.93-3.86 (m, 1h), 3.85-3.79 (m, 1h), 3.76-3.70 (m, 8h), 2.51-2.49 (m, 3h), 2.29-2.21 (m, 1h), 2.16-2.07 (m, 1h), 1.06 (s, 9h) ppm。
[0404]
2-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-甲酸(i-78)的制备步骤1: (2s,4r)-1-[(2s)-2-(2-氯乙酰胺基)-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (b)的制备在0℃下，向(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (a, 500.00 mg, 1.161 mmol, 1.00当量)和diea (450.25 mg, 3.484 mmol, 3.00当量)在dcm (10.00 ml, 0.118 mmol, 0.10当量)中的溶液中滴加氯乙酰氯 (137.71 mg, 1.219 mmol, 1.05当量)。将溶液在室温下搅拌4小时，然后在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用dcm/meoh (10:1)洗
脱，得到作为黄色油的b(450mg，76.43%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 507。
[0405]
步骤2: 2-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-甲酸甲酯(c)的制备向2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-甲酸甲酯(24.00 mg, 0.155 mmol, 1.00当量)和k2co
3 (64.12 mg, 0.464 mmol, 3.00当量)在dmf (3.00 ml)中的悬浮液中加入b (78.41 mg, 0.155 mmol, 1当量)。将悬浮液在室温下搅拌16小时。在水处理、用dcm萃取和浓缩之后，将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，5% 至 100% 梯度，经 15 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为黄色油的c(30mg，31.00％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 626。
[0406]
步骤3: 2-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-甲酸 (i-78)的制备向c (60.00 mg, 0.096 mmol, 1.00当量)在thf (3.00 ml)和水(1.00 ml)中的溶液中加入lioh (5.74 mg, 0.240 mmol, 3.00当量)。将溶液在室温下搅拌3小时并用乙酸将混合物酸化至ph 5。在以下条件下通过反相快速色谱法直接纯化混合物：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，10% 至 100% 梯度，经 15 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为白色固体的i-78 (42mg, 71.61%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 612。
[0407]
[6-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基]乙酸(i-79)的制备
步骤1: 6-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(b)的制备将a (200.00 mg, 0.394 mmol, 1.00当量)、k2co
3 (136.28 mg, 0.986 mmol, 2.50当量二)和2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(156.41 mg, 0.789 mmol，2.00当量）添加到 dmf（5.00 ml）中。使混合物在室温下反应24小时。将所得混合物用etoac(30ml)稀释，用水(20ml)和盐水(20ml)洗涤，并经na2so
4 干燥。除去有机溶剂后，通过制备型tlc(5％meoh/etoac)纯化残余物，得到作为白色固体的b(90mg，34.11％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 669。
[0408]
步骤2: (2s,4r)-1-[(2s)-2-(2-[2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基]乙酰胺基)-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (c)
将b (60.00 mg, 0.090 mmol, 1.00当量) 溶解在 dcm (5.00 ml) 中，然后加入 tfa (1.00 ml, 13.463 mmol, 150.08当量)。使混合物反应1小时。除去溶剂后，粗产物c无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m h]
= 569。
[0409]
步骤3: 2-[6-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基]乙酸叔丁酯(d)的制备向c (41.00 mg, 0.072 mmol, 1.00当量)和k2co
3 (29.89 mg, 0.216 mmol, 3.00当量)在dmf (1.50 ml)中的悬浮液中滴加dmf (0.1 ml)中的2-氯乙酸叔丁酯(10.86 mg, 0.072 mmol, 1.00当量)。将混合物在室温下搅拌4.5小时。然后将反应混合物用30 ml水稀释，然后用dcm/meoh (10/1, v/v, 20 ml x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(40ml)洗涤并用硫酸钠干燥。过滤后，将滤液在真空下浓缩，得到粗产物d(45mg，91.41％)，其无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m h]
= 683。
[0410]
步骤4: [6-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基]乙酸(i-79)的制备
将 d (25.00 mg, 0.037 mmol, 1.00当量) 溶解在 dcm (5.00 ml) 中，然后加入 tfa (1.25 ml, 10.963 mmol, 459.68当量)。将混合物在室温下搅拌4小时。除去溶剂后，粗产物i-79(23mg，100.24％)无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m h]
= 627。
[0411]
1-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)哌啶-4-甲酸 (i-80)的制备步骤1: 1-(2-乙氧基-2-氧代乙基)哌啶-4-甲酸叔丁酯 (b)的制备向乙醛酸乙酯(500.00 mg, 4.898 mmol, 1.00当量)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(a, 1088.86 mg, 5.877 mmol, 1.20当量)在etoh (10 ml)中的溶液中加入acoh (29.41mg, 0.49mmol, 0.1当量)，并将所得溶液在室温下搅拌1小时。然后加入 nabh3cn (461.67 mg, 7.347 mmol, 1.50当量)，并将所得溶液在室温下搅拌过夜。然后通过添加10ml水淬灭反应。将所得溶液用3
×
30ml etoac萃取，将合并的有机萃取物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速柱色谱法，使用etoac/石油醚(1:3) 纯化。这产生作为黄色油的200 mg (15.05%) b。1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 4.07 (q, j = 7.1 hz, 2h), 3.19 (s, 2h), 2.77 (d, j= 11.7 hz, 2h), 2.27
ꢀ–ꢀ
2.07 (m, 3h), 1.74 (dd, j = 13.1, 3.7 hz, 2h), 1.60
ꢀ–
1.44(m,1h),1.40(s,9h),1.19(t,j=7.1hz,3h).lcms (esi)m/z:[m h]

=272。
[0412]
步骤2: 1-[2-氧代-2-(钠氧基)乙基]哌啶-4-甲酸叔丁酯(c)的制备
向 b (200.00 mg, 0.737 mmol, 1.00当量) 在 etoh (5.00 ml) 和水 (1.00 ml) 中的溶液中加入氢氧化钠 (32.43 mg, 0.811 mmol, 1.1当量)。将所得溶液在 60℃下过夜。将所得混合物在真空下浓缩，得到180mg(92.06％) 作为黄色固体的粗制c。lcms (esi) m/z: [m h]
= 244。
[0413]
步骤3: 1-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(d)的制备向c (54.25 mg, 0.223 mmol, 1.20当量)、(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (80.00 mg, 0.186 mmol, 1.00当量)和dipea (72.04 mg, 0.557 mmol, 3.00当量)在dmf (3.00 ml)中的溶液中加入hatu (105.97 mg, 0.279 mmol, 1.50当量)。将所得溶液在室温下搅拌过夜。将混合物浓缩，将残余物在c18柱上用acn:水(7:3)纯化。这得到40 mg (32.82%)作为黄色油的d。lcms (esi) m/z: [m h]
= 656。
[0414]
步骤4: 1-([[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]甲基)哌啶-4-甲酸(i-80)的制备向 d (40.00 mg, 0.061 mmol, 1.00当量) 在dcm (3 ml) 中的溶液中加入 tfa (0.30 ml, 4.039 mmol, 66.22当量)。将混合物在室温下搅拌过夜，然后在真空下浓缩。这得到 120 mg作为黄色油的粗制 i-80。lcms (esi) m/z: [m h]
= 600。
[0415]
4-(5-烷基戊-1-炔-1-基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐 (i-81)的制备
步骤1: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基三氟甲磺酸酯 (b)的制备向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-羟基异吲哚-1,3-二酮 (a, 2.00 g, 7.293 mmol, 1.00当量)在dcm (21.00 ml)中的搅拌溶液中加入tea (2.28 ml, 16.403 mmol, 2.25当量)和吡啶(2.28 ml, 28.326 mmol, 3.88当量)。将反应物冷却至0℃，然后滴加三氟甲磺酸酐（3.09 g，10.940 mmol，1.50当量）。将混合物升温至室温并搅拌2小时。将所得混合物用水(100 ml)稀释并用dcm (3 x 200 ml)萃取。将合并的有机层用无水na2so
4 干燥并在减压下浓缩。将残余物用dcm(50ml)稀释并在室温下搅拌0.5小时。过滤所得混合物，将滤饼用dcm(10ml)洗涤，得到作为灰白色固体的b(1.92g，58.32％)。lcms(esi)m/z[m h]

= 407。
[0416]
步骤2: n-[5-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]戊-4-炔-1-基]氨基甲酸叔丁酯(c)的制备向b (1.60 g, 3.938 mmol, 1.00当量)和n-(戊-4-炔-1-基)氨基甲酸叔丁酯(2.02 g, 11.027 mmol, 2.80当量)在thf (40 ml)中的搅拌溶液中加入cui (75.00 mg, 0.394 mmol, 0.10当量)、diea (6.86 ml, 53.074 mmol, 10.00当量)和pd(pph3)2cl
2 (276.41 mg, 0.394 mmol, 0.10当量)。将所得混合物在70℃下搅拌1小时。将反应物过滤，将滤饼用etoac(3
×
10ml)洗涤。在减压下浓缩滤液并将残余物吸收在水(200ml)中并用etoac(2
×
150ml)萃取。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，用无水na2so
4 干燥，在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/etoac(2:1)洗脱，得到作为灰白色固体的c(1.12g，64.72％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 440。
[0417]
步骤3: 4-(5-氨基戊-1-炔-1-基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸盐 (i-81)的制备在室温下向 c (1.10 g, 2.503 mmol, 1当量) 在二氯甲烷 (6 ml) 中的搅拌溶液中加入 tfa (3.00 ml)。将所得混合物在室温下搅拌1小时，然后在减压下浓缩。将残余物通过硅胶快速柱色谱法纯化，得到作为白色固体的i-81(890mg，91.2％)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 11.15 (s, 1h), 7.97
ꢀ–ꢀ
7.73 (m, 6h), 5.14 (dd, 1h), 3.09
ꢀ–ꢀ
2.97 (m, 2h), 2.96
ꢀ–ꢀ
2.84 (m, 1h), 2.67 (t, 3h), 2.62
ꢀ–ꢀ
2.54 (m, 1h), 2.12
ꢀ–ꢀ
2.02 (m, 1h), 1.82
ꢀ–ꢀ
1.94 (m, 2h).lcms (esi) m/z: [m h]
= 340.12。
[0418]
5-[2-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]乙氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (i-82)的制备步骤1: 5-(2-溴乙氧基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (b)的制备将2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮 (a, 300 mg, 1.09 mmol, 1.00当量)、khco
3 (164 mg, 1.64 mmol, 1.50当量)和烯丙基溴(198 mg, 1.64 mmol, 1.50当量)溶解在dmf (15.00 ml)中。然后将ki (18 mg, 0.11 mmol, 0.10当量)添加到混合物中。将反应戊在 60℃下搅拌 18 小时。冷却至室温后，加入20ml水，然后用etoac(3
×
20ml)萃取。将合并的有机层用水(20ml)和盐水(20ml)洗涤并用硫酸钠干燥。除去溶剂后，通过硅胶快速柱色谱法纯化残余物，用石油醚中的etoac(50％，v/v)洗脱，得到作为灰白色固体的b(200mg，47.9％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 315。
[0419]
步骤2: 2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙醛(c)
的制备向t-buoh (5.00 ml) / 水 (5.00 ml) / thf (1.00 ml)的混合物加入b (250 mg, 0.80 mmol, 1.00当量)、nmo (99 mg, 0.80 mmol, 1.5当量)和二水合k2oso
4 (15 mg, 0.04 mmol, 0.050当量)。将所得悬浮液在室温下搅拌24小时，然后保持澄清溶液。用饱和na2s2o
3 (20 ml)淬灭反应并用etoac (3 x 20 ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤并用硫酸钠干燥。除去溶剂后，将残余物与naio
4 (255.20 mg，1.19 mmol，1.50当量)一起溶解在水(5.00 ml)/丙酮(5.00 ml)混合物中。将反应物在室温下搅拌2小时，然后在真空下除去溶剂。将残余物悬浮在20ml etoac中。过滤后，将剩余液体在真空下浓缩，将残余物通过制备型tlc(etoac/石油醚＝1:1，v/v)纯化，得到作为灰白色固体的c(120mg，47.7％)。lcms (esi) m/z: [m-h]-= 315。
[0420]
步骤3: n-[[1-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]-乙基)哌啶-4-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(d)的制备向c (120 mg, 0.379 mmol, 1.00当量)和n-(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(81 mg, 0.38 mmol, 1.0当量)在dmf (10.00 ml)中的溶液中一次性加入stab (120 mg, 0.569 mmol, 1.50当量)。将反应物在室温下搅拌过夜。浓缩后，将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn 中的水，10% 至 50% 梯度，经 10 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为白色固体的d(130mg，66.7％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 515。
[0421]
步骤4: 5-[2-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]乙氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (i-82)的制备将d (130.00 mg, 1.00当量) 悬浮在 dcm (10.00 ml) 中，并添加 tfa (1.00 ml)。将澄清溶液在室温下搅拌2小时。然后在减压下除去溶剂，残余物i-82无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m h]
= 415。
[0422]
1-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙基)哌啶-4-甲酸(i-83)的制备
mmol, 1.00当量)在dmf (35.00 ml)中的溶液中加入nabh(oac)
3 (3.68 g, 17.359 mmol, 3.00当量)。将所得混合物在室温下搅拌3小时。在水处理、dcm萃取和在减压下浓缩之后，将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经 45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为灰白色固体的d(1.16g，41.29％)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 401。
[0425]
步骤4: 1-(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙基)哌啶-4-甲酸(i-83)的制备向 d (1.16 g, 2.389 mmol, 1.00 当量)在dcm (10.00 ml) 中的溶液中加入 tfa (10.00 ml, 134.630 mmol, 34.18 当量)。将反应物在室温下搅拌5小时，然后在减压下浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn / 0.1% 甲酸水溶液，0% 至 100% 梯度，经 45 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为白色固体的 i-83 (845mg,73.42%) ；1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 11.11 (s, 1h), 8.15 (d, 1h), 7.84 (d, 1h), 7.47 (d, 1h), 7.37 (dd, 1h), 5.12 (dd, 1h), 4.31 (t, 2h), 3.02
ꢀ–ꢀ
2.85 (m, 3h), 2.79 (t, 2h), 2.66-2.60 (m, 1h), 2.59-2.54 (m, 1h), 2.29-2.12 (m, 3h), 2.15-1.99 (m, 1h), 1.87-1.75 (m, 2h), 1.66
ꢀ–ꢀ
1.47 (m, 2h); lcms (esi) m/z: [m h]
= 430.15。
[0426]
4,5-二甲基-1-(甲磺酰基)-n-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1h-吡咯-3-甲酰胺 (i-84)的制备步骤1: 4,5-二甲基-1h-吡咯-3-甲酸(b)的制备向4,5-二甲基-1h-吡咯-3-甲酸甲酯(a, 500 mg, 3.26 mmol)在meoh (4 ml)中的溶液中加入氢氧化钠(261.12 mg, 6.53 mmol)在水(1 ml)中的溶液。将混合物在25℃下搅拌36小时。加入2m盐酸(10ml)和水(10ml)，将反应混合物用etoac(50ml
×
2)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经na2so
4 干燥并在减压下浓缩，得到作为黄色固体的b(400mg，粗产物)，其无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m h]
= 140.1。
[0427]
步骤2: 4,5-二甲基-1h-吡咯-3-甲酸叔丁酯(c)的制备
向b (400 mg, 2.87 mmol)在甲苯(10 ml)中的溶液中加入1,1-二叔丁氧基-n,n-二甲基-甲胺(2.92 g, 14.37 mmol, 3.45 ml)。将混合物在80℃下搅拌2小时。加入水(20ml)，将反应混合物用etoac(50ml
×
2)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经na2so
4 干燥，并在减压下浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法（isco；12 g sepaflash silica flash column，洗脱液为 0-80% etoac/石油醚梯度 35 ml/min）纯化并在真空下浓缩得到作为红色油的 c（200 mg，983.32 μm，34.21 ％收率）。lcms (esi) m/z: [m h]
= 196.2。
[0428]
步骤3: 4,5-二甲基-1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酸叔丁酯(d)的制备在0℃和氮气下向c(120mg，0.62mmol)在thf(3ml)中的溶液中加入khmds(1m，1.84ml)。0.5小时后，加入甲磺酰氯(140.80mg，1.23mmol，95.14μl)。将混合物在25℃下搅拌2小时。加入水(20ml)，将反应混合物用etoac(50ml
×
2)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经na2so
4 干燥，并在减压下浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法（isco；x g sepaflash silica flash column，洗脱液为0-50% etoac/石油醚梯度 60 ml/min）纯化，得到作为红色固体的 d（80 mg，263.40
ꢀµ
m，42.86% 收率） 。lcms (esi) m/z: [m h-56]

= 218.1。
[0429]
步骤4: 4,5-二甲基-1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酸(i-84)的制备向 d (80 mg, 0.29 mmol)在1,4-二氧杂环己烷 (2 ml)中的溶液中加入 4 m 盐酸在1,4-二氧杂环己烷 (2 ml) 中的溶液。将混合物在25℃下搅拌12小时，然后在减压下浓缩，得到作为紫色固体的i-84（50mg，粗产物）。lcms (esi) m/z= [m h]
= 218.2。
[0430]
5-[4-(4-氨基哌啶-1-基)丁氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (i-85)的制备
步骤1: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(戊-4-烯-1-基氧基)异吲哚-1,3-二酮 (b)的制备在室温下在氮气气氛下，向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮 (a, 500.00 mg, 1.823 mmol, 1.00当量)和khco
3 (273.81 mg, 2.735 mmol, 1.50当量)在dmf(10.00 ml)中的搅拌溶液中分批加入5-溴-1-戊烯(326.07 mg, 2.188 mmol, 1.20当量) 和ki (30.27 mg, 0.182 mmol, 0.10当量)。将所得混合物在氮气气氛下在65℃下搅拌过夜，然后冷却并用etoac(2
×
20ml)萃取。将合并的有机层用水(3
×
10ml)洗涤，用无水na2so
4 干燥，在减压下浓缩。将残余物通过制备型tlc(石油醚/etoac 1:1)纯化，得到作为白色固体的 b(400mg，64.08％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 343。
[0431]
步骤2: 4-[[2-(2, 6-二氧代哌啶-3-基)-1, 3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]丁醛(c)的制备向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(戊-4-烯-1-基氧基)异吲哚-1,3-二酮 (b, 300.00 mg, 0.876 mmol, 1.00当量)在thf (1.00 ml) / 水(5.00 ml) / t-buoh (5.00 ml)中的搅拌溶液中分批加入nmo (153.98 mg, 1.314 mmol, 1.50当量)和二水合k2oso4(32.29 mg, 0.088 mmol, 0.10当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌过夜。然后将反应物在减压下浓缩。然后加入 naio
4 (374.86 mg, 1.753 mmol, 2.00当量)、水 (0.50 ml) 和丙酮 (5.00 ml)，并将所得混合物在室温下再搅拌 2 小时。在硫代硫酸钠水溶液处理和用dcm萃取后，将溶液在减压下浓缩，得到作为灰白色固体的c(300mg，99.43％)。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步。lcms (esi) m/z: [m h]
= 345。
[0432]
步骤3: n-[1-(4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]丁基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯(d)的制备
向4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]丁醛(c, 270.00 mg, 0.784 mmol, 1.00当量)在dmf (5.00 ml)中的溶液中分批加入stab (249.29 mg, 1.176 mmol, 1.50当量)和n-(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(157.05 mg, 0.784 mmol, 1.00当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后用etoac(2
×
20ml)萃取。将合并的有机层用水(3
×
10ml)洗涤，用无水na2so
4 干燥，在减压下浓缩。通过制备型tlc(dcm/meoh 10:1)纯化残余物，得到作为灰白色固体的d(130mg，31.36％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 529。
[0433]
步骤4: 5-[4-(4-氨基哌啶-1-基)丁氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (i-85)的制备在室温下将n-[1-(4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]丁基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯(d, 120.00 mg, 0.227 mmol, 1.00当量)和tfa (1.00 ml)在dcm (4.00 ml)中的溶液搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩。这产生作为灰白色固体的i-85 (130 mg, 93.55%) 。lcms (esi) m/z: [m h]
= 429。
[0434]
2-[(4-溴-2-吡啶)-甲基-氨基]乙酸叔丁酯(i-86)的制备向4-溴-2-氟-吡啶(a, 28 g, 159.10 mmol)和2-(甲基氨基)乙酸叔丁酯(34.68 g, 190.92 mmol, hcl)在dmso (200 ml)中的溶液中加入diea (41.13 g, 318.21 mmol, 55.43 ml)。将混合物在120℃下搅拌12小时。将反应物用水(2l)稀释并用etoac(500ml x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(500ml x 2)洗涤，经na2so
4 干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速柱色谱法(硅胶，石油醚/etoac 10:1至5:1)纯化，得到作为白色固体的i-86(35g，104.59mmol，65.74％)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 301.0. 1
h nmr (400 mhz, cdcl3) δ = 7.86 (d, j = 5.2 hz, 1h), 6.66-6.65(m, 1h), 6.62 (d, j = 1.2 hz, 1h), 4.12 (s, 2h), 3.00 (s, 3h), 1.35 (s, 9h) ppm。
[0435]
2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-4-[2-氧代-2-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]乙氧基]异二氢吲哚-1,3-二酮 (i-87)的制备
7.85-7.84 (m, 1h), 7.78 (s, 1h), 7.53-7.51 (m, 1h), 7.42-7.38 (m, 1h), 7.32-7.30 (m, 1h), 6.78-6.77 (m, 1h), 4.14 (d, j = 6.0 hz,2h), 3.57 (s, 3h). lcms (esi) m/z: [m h]

= 484.8。
[0441]
步骤5: 1-(甲磺酰基)-n-(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1h-吡咯-3-甲酰胺 (i-90)的制备向i-92 (1.5 g, 3.10 mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,3,2-二氧杂硼戊环(1.18 g, 4.65 mmol)在1,4-二氧杂环己烷 (15 ml)中的溶液中加入pd(dppf)cl
2 (227.07 mg, 0.310 mmol)和koac (913.69 mg, 9.31 mmol)。将混合物在80℃下搅拌2小时，然后倒入水(100ml)中并用etoac(100ml
×
3)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经na2so
4 干燥并在减压下浓缩。将残余物悬浮在1:1石油醚/etoac (20 ml)中，过滤，并在真空下浓缩滤液，得到作为棕色固体的i-90 (6.5 g, 12.00 mmol, 96.71%收率)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ= 12.45 (s, 1h), 8.67 (t, j = 6.0 hz, 1h), 8.29 (s, 1h), 8.01 (br d, j = 7.6 hz, 1h), 7.84 (s,1h), 7.65 (s, 1h), 7.62 (d, j = 7.2 hz, 1h), 7.44 (t, j = 7.6 hz, 1h), 7.31 (t, j = 2.8 hz, 1h), 6.78 (d, j = 1.6 hz, 1h), 4.14 (d, j= 6.0 hz, 2h), 3.57 (s, 3h), 1.31 (s, 12h). lcms (esi) m/z: [m h]

= 531.2。
[0442]
1-(4-(3-(2-(2-(1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基) 噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)环丙烷甲酸叔丁酯(i-91)的制备步骤1: 2-(4-溴吡啶-2-基)乙酸叔丁酯(b)的制备
在-78℃下，向4-溴-2-甲基-吡啶(a, 10 g, 36.9 mmol)在thf (150 ml)中的溶液中滴加lda (2 m，在thf中, 100 ml, 200 mmol)。添加后，将混合物在-78℃下搅拌1小时。然后在-78℃下滴加在thf中的boc2o (14.0 g, 64.2 mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌过夜，然后用水(300ml)淬灭并用etoac(200ml
×
3)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml x 3)洗涤，经na2so
4 干燥，在减压下浓缩，得到作为黑色粗制油的b(17.2g)。lcms (esi) m/z [m h]
= 272。
[0443]
步骤2: 1-(4-溴吡啶-2-基)环丙烷甲酸叔丁酯(c)的制备在0℃下向b（5.0 g，18.45 mmol）在dmf（50 ml）中的溶液中加入nah（1.5 g，37.5 mmol，60%，在矿物油中）。将混合物在该温度下搅拌1小时，然后在0℃下滴加1,2-二溴乙烷（6.8g，37.5mmol）。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。通过加入水(200ml)淬灭反应混合物，随后用etoac(100ml
×
3)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml x 3)洗涤，经na2so
4 干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/etoac(2:1)洗脱，得到作为黄色油的c(3.7g，12.4mmol，67.5％收率)。lcms (esi) m/z [m h]
= 298。
[0444]
步骤3: 1-(4-(3-(2-(2-(1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基) 噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)环丙烷甲酸叔丁酯(d)将c (618.4 mg, 2.07 mmol)、i-90 (1.0 g, 1.88 mmol)、k3po
4 (800.4 mg, 3.77 mmol)和二叔丁基(环戊基)膦二氯化钯(24.57 mg, 0.03 mmol) 在1,4-二氧杂环己烷 (20 ml) / 水(2 ml)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次。将反应混合物在80℃下搅拌12小时，然后用水(20ml)淬灭，随后用etoac(100ml
×
3)萃取。将合并的有机层用饱和nacl水溶液(100ml x 3)洗涤，经na2so
4 干燥，在减压下浓缩。将残余物通过反相色谱法(acn/0.1%甲酸)纯化并冻干以得到作为黄色固体的d(830 mg, 1.33 mmol, 70.81%)。lcms (esi) m/z [m h]
= 622。
[0445]
步骤4: 1-(4-(3-(2-(2-(1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)环丙烷甲酸(i-91)的制备
将d(830mg，1.33mmol)和tfa(2ml)在dcm(10ml)中的混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物浓缩，残余物无需进一步纯化即使用(i-91，1.2g)，为黄色固体。lcms (esi) m/z [m h]
= 566。
[0446]
化合物11-n-[2-[[4-[3-[2-[1-[2-[2-[2-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙基氨基甲酰基]环丙基]-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲磺酰基吡咯-3-甲酰胺的制备将1-[4-[3-[2-[[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]环丙烷甲酸(i-91, 60 mg, 106.08
ꢀµ
m)、hatu (121.00 mg, 318.23
ꢀµ
m)和diea (68.55 mg, 530.39
ꢀµ
m, 92.38
ꢀµ
l)在dmf (1 ml)中的溶液在30℃下搅拌1小时。向该混合物中加入4-[2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基氨基]-2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)异二氢吲哚-1,3-二酮 (i-9, 55.00 mg, 0.11 mmol)，然后在 30℃下搅拌 12 小时。将混合物与水(3ml)一起研磨并过滤。将滤饼通过反相 hplc 纯化（柱：phenomenex synergi c18 150x30mmx4
µ
m；流动相：[0.225% 甲酸水溶液-acn]；30%-60%），得到作为黄色固体的化合物 11（21.27 mg，21.10
ꢀµ
m，19.89%， 收率，98.991%)。1h nmr (400mhz, 氯仿-d) δ = 9.36 (d, j = 1.6 hz, 1h), 8.59 (d, j = 5.2 hz, 1h), 8.13 (s, 1h), 7.80-7.75 (m, 2h), 7.61 (s, 2h), 7.58-7.54 (m, 1h), 7.50 (d, j = 8.0hz, 1h), 7.43-7.35 (m, 2h), 7.19 (s, 1h), 7.13 (m, 1h), 7.08 (d, j = 7.2 hz, 1h), 6.85 (m, 1h), 6.76 (d, j = 8.8 hz, 1h), 6.70 (m, 1h), 6.38 (m, 1h), 4.99-4.95 (m, 1h), 4.39 (m, 2h), 3.61-3.46 (m, 10h), 3.33-3.28 (m, 2h), 3.25-3.25 (m, 1h), 3.23 (s, 2h), 2.89-2.73 (m, 3h), 2.15-2.10 (m, 1h), 1.75-1.70 (m, 2h), 1.35-1.30 (m, 1h), 1.25 (m, 1h) ppm。
[0447]
n-(2-((4-(3'-(氨基甲基)-[1,1'-联苯基]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺 (i-93)的制备步骤1: 3-溴苄基氨基甲酸叔丁酯(b)的制备向(3-溴苯基)甲胺(a, 3.7 g, 19.89 mmol) 在thf (20 ml)中的溶液中加入
nahco
3 (3.34 g, 39.77 mmol, 1.55 ml)和boc2o (4.77 g, 21.88 mmol, 5.03 ml)。将混合物在30℃下搅拌16小时，过滤，浓缩，得到作为白色固体的b(5.6g，16.67mmol，83.85％)，其无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z [m h-56]
= 231.9。
[0448]
步骤2: 3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苄基氨基甲酸叔丁酯(c)的制备向 b (5.6 g, 16.67 mmol) 双(频哪醇)二硼烷 (5.08 g, 20.01 mmol) 在 1,4-二氧杂环己烷 (60 ml) 中的溶液中加入环戊基(二苯基)膦二氯化钯 (ii)、dcm 加合物 (1.36 g , 1.67 mmol) 和 koac (4.91 g, 50.02 mmol)。将混合物在80℃下搅拌2小时，然后倒入水(100ml)中。将该混合物用etoac(100ml x 3)萃取，将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经na2so
4 干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(sio
2 ，石油醚/etoac 1:0-10:1纯化) 得到作为白色固体的 c (5.5 g, 16.51 mmol, 98.98%)。1h nmr (400mhz, dmso-d6) δ 7.58 (s, 1h), 7.53 (d, j = 6.8 hz, 1h), 7.35-7.32 (m, 3h), 4.13 (d, j = 6.0 hz, 2h), 1.39 (s, 9h), 1.29 (s, 12h)。
[0449]
步骤3: ((3'-(2-(2-(1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)-[1,1'-联苯基]-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(d)的制备向n-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酰胺 (i-92, 500 mg, 1.03 mmol)和c (413.64 mg, 1.24 mmol)在1,4-二氧杂环己烷(5 ml) / 水(0.5 ml)中的溶液中加入pd(dppf)cl
2 (75.69 mg, 103.44 μmol)和k2co
3 (428.89 mg, 3.10 mmol)。将混合物在80℃下搅拌2小时，然后浓缩，将残余物通过反相快速hplc（0.1%甲酸水溶液/acn）纯化并冻干以得到作为黄色固体的d（600mg）。lcms (esi) m/z [m h]
= 610.2。
[0450]
步骤4: n-(2-((4-(3'-(氨基甲基)-[1,1'-联苯基]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺 (i-93)的制备将 d (400 mg, 656.04 μmol) 和 4m hcl 在 1,4-二氧杂环己烷 (5 ml) 中的
混合物在 30℃下搅拌 2 小时。将反应混合物浓缩并将残余物与mtbe (2 ml)一起研磨，过滤得到黄色固体，并通过两次制备型hplc纯化两次（柱：phenomenex synergi c18 150x25x10 μm；流动相：[水（0.05%hcl）-acn]；b%：18%-38%，10 min) ，然后（柱：shim-pack c18 150x25x10 μm；流动相：[0.225% 甲酸水溶液/acn]；b%：10%-40%，10 min) 得到作为白色固体的i-93 (68.49 mg, 134.40 μmol, 56.45%)。lcms (esi) m/z [m h]
= 510.2.1h nmr (400mhz, dmso-d6) δ 8.69-8.67 (m, 1h), 8.33 (s, 1h), 8.20 (s, 1h), 7.90 (d, j = 8.0 hz, 1h), 7.85-7.83 (m, 1h), 7.75 (s, 2h), 7.64-7.60 (m, 2h), 7.55-7.52 (m, 1h), 7.49-7.45 (m, 1h), 7.40-7.38 (m, 1h), 7.32-7.30 (m, 1h), 6.78 (dd, j = 1.6, 3.2 hz, 1h), 4.15 (d, j = 5.6 hz, 2h), 3.92 (s, 2h), 3.57 (s, 3h)。
[0451]
化合物1
ꢀ–ꢀ
n-(2-((4-(3'-((s)-14-((2s,4r)-4-羟基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)-15,15-二甲基-3,12-二氧代-6,9-二氧杂-2,13-二氮杂十六烷基)-[1,1'-联苯基]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺的制备向n-[2-[[4-[3-[3-(氨基甲基)苯基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酰胺( i-93, 50 mg, 0.098 mmol)和3-[2-[3-[[1-[(2s,4r)-4-羟基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲酰基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]丙酸(i-52, 66.78 mg, 0.107 mmol)在dcm (2 ml)中的溶液中加入edci (22.57 mg, 117.74
ꢀµ
m)、hobt (15.91 mg, 0.117 mmol)和diea (12.68 mg, 0.098 mmol, 17.09
ꢀµ
l)。将混合物在30℃下搅拌2小时，然后浓缩。将残余物通过制备型 hplc 纯化（柱：phenomenex synergi c18 150 x 25 x 10
ꢀµ
m；流动相：[0.225% 甲酸水溶液/acn]；b%：33%-63%，10 min），得到作为白色固体的化合物 1 (44.16 mg, 40.54% 收率)。lcms (esi) m/z: [m na]
= 1132.3. 1
h nmr (400 mhz, 甲醇-d4) δ= 8.84 (s, 1h), 8.18-8.12 (m, 1h), 7.89-7.81 (m, 2h), 7.60 (s, 1h), 7.55 (br d, j = 6.6 hz, 2h), 7.49-7.34 (m, 7h), 7.32-7.25 (m, 2h), 6.80 (dd, j = 1.6, 3.4 hz, 1h), 4.63 (s, 1h), 4.59-4.44 (m, 6h), 4.35-4.25 (m, 3h), 3.91-3.84 (m, 1h), 3.80-3.70 (m, 3h), 3.62-3.49 (m, 4h), 3.48-3.39 (m, 2h), 3.37 (s, 3h), 2.50-2.48 (m, 2h), 2.46-2.42 (m, 3h), 2.41-2.29 (m, 2h), 2.24-2.14 (m, 1h), 2.10-2.01 (m, 1h), 1.05-0.93 (m, 9h) ppm。
[0452]
2-(甲基(4-(3-(2-(2-(1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)氨基)乙酸(i-94)的制备
dmso-d6) δ = 12.40 (s, 1h), 11.08 (s, 1h), 8.69-8.66 (m, 1h), 8.20-8.13 (m, 2h), 7.97 (d, j=8.0 hz, 1h), 7.87-7.84 (m, 2h), 7.78 (s, 1h), 7.67 (d, j= 8.0 hz, 1h), 7.59-7.53 (m, 2h), 7.32-7.31 (m, 1h), 7.11 (d, j= 8.8 hz, 1h), 7.03 (d, j= 6.8 hz, 1h), 6.92 (d, j= 5.2 hz, 1h), 6.86 (s, 1h), 6.78-6.77 (m, 1h), 6.60-6.57 (m, 1h), 5.07-5.02 (m, 1h), 4.21-4.14 (m, 4h), 3.60-3.58 (m, 5h), 3.51-3.50 (m, 4h), 3.45-3.40 (m, 4h), 3.25-3.22 (m, 2h), 3.12 (s, 3h), 2.88-2.86 (m, 1h), 2.59 (s, 2h), 2.06-1.98 (m, 1h) ppm。
[0454]
化合物123-n-[2-[[4-[3-[2-[[2-[4-[1-[2-[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氧基乙酰基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]-甲基-氨基]-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4,5-二甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酰胺步骤1: 4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]噻唑-2-胺(b)的制备向 4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (a, 20 g, 78.39 mmol) 和双(频哪醇)二硼烷 (29.86 g, 117.59 mmol) 在 1,4-二氧杂环己烷 (200 ml) 中的溶液中加入 pd(dppf)cl2 (5.74 g, 7.84 mmol) 和 koac (23.08 g, 235.17 mmol)。将混合物在70℃下搅拌2
(s, 9h) ppm。
[0457]
步骤4: 2-[[4-[3-[2-[(2-氨基乙酰基)氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]-甲基-氨基]乙酸叔丁酯(e)的制备将 d (5.1 g, 7.55 mmol) 和二甲胺在 thf (2.0 m, 120 ml) 中的混合物在 25℃下 搅拌 1 h。将反应混合物浓缩，并将残余物与石油醚(50ml)一起研磨，得到作为白色固体的e(3.2g，7.06mmol，93.49％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 454.2. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 8.22 (s, 1h), 8.15 (d, j = 5.2 hz, 1h), 7.98 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.79 (s, 1h), 7.69 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.57-7.54 (m, 1h), 6.96 (d, j = 5.2 hz, 1h), 6.91 (s, 1h), 5.64-5.54 (m, 2h), 4.30 (s, 2h), 3.44 (s, 2h), 3.14 (s, 3h), 1.38 (s, 9h) ppm。
[0458]
步骤5: 2-[[4-[3-[2-[[2-[(4,5-二甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]-甲基-氨基]乙酸叔丁酯(f)将4,5-二甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酸 (e, 263.44 mg, 1.21 mmol)、hatu (628.75 mg,1.65 mmol) 和 diea (427.43 mg, 3.31 mmol, 576.05
ꢀµ
l) 在 dmf (10 ml) 中的混合物在 30℃下搅拌 0.5 h。然后加入i-84(500mg，1.10mmol)并将混合物再搅拌2小时。将反应混合物倒入水(100ml)中，过滤，并通过柱色谱法(sio2，石油醚/etoac 5:1至1:1)纯化，得到作为白色固体的f(430mg，收率54.91％，纯度91.9％) 。lcms (esi) m/z: [m h]

= 653.2. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.38 (s, 1h), 8.48-8.47 (m, 1h), 8.22(s, 1h), 8.16 (d, j = 5.2 hz, 1h), 7.98 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.80 (s, 2h), 7.70 (d, j = 8.0 hz, 1h), 7.59-7.57 (m, 1h), 6.96-6.94 (m, 1h), 6.91 (s, 1h), 4.30 (s, 2h), 4.11 (d, j = 5.6 hz, 2h), 3.48 (s, 3h), 3.14 (s, 3h), 2.32 (s, 3h), 2.12 (s, 3h), 1.39 (s, 9h) ppm。
[0459]
步骤6: 中间体12 2-[[4-[3-[2-[[2-[(4,5-二甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]-甲基-氨基]乙酸(i-95)的制备
将 f (430 mg, 0.66 mmol) 在 hcl (6 m, 20 ml) 中的混合物在 30℃下搅拌 15 h。将反应物过滤，将滤饼与石油醚/etoac(10:1)一起研磨，得到作为灰色固体的i-95(260mg，57.35％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 597.2. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.44 (br s, 1h), 8.54-8.51(m, 1h), 8.34 (s, 1h), 8.16 (d, j = 6.4 hz, 1h), 8.11 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.88-7.87(m, 2h), 7.81 (s, 1h), 7.67-7.63 (m, 1h), 7.51 (s, 1h), 7.39 (d, j = 6.4 hz, 1h), 4.70 (s, 2h), 4.11 (d, j = 5.6 hz, 2h), 3.49 (s, 3h), 2.32 (s, 3h), 2.12 (s, 3h) ppm。
[0460]
步骤7: n-[2-[[4-[3-[2-[[2-[4-[1-[2-[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氧基乙酰基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]-甲基-氨基]-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4,5-二甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酰胺 (化合物123)的制备向 i-95 (50 mg, 0.079 mmol)、i-87 (49.99 mg, 0.083 mmol) 和 diea (43.32 mg, 0.335 mmol, 58.38
ꢀµ
l) 在 dmf (1 ml) 中的混合物中加入 edci (20.88 mg, 0.11 mmol)和hobt (14.72 mg, 0.11 mmol)并将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物加入水(8ml)中，通过过滤收集沉淀物。将固体通过制备型 hplc（柱：waters xbridge 150 x 25mm x 5μm；流动相：[10mm nh4hco3水溶液/acn]；b%：27%-60%，11min）纯化，得到作为橙色固体的化合物123（10.42mg，8.91μm , 11.28% 收率) 。lcms (esi) m/z: [m h]
= 1061.5. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.51-12.30 (m, 1h), 11.12 (s, 1h), 8.50 (m, 1h), 8.21 (s, 1h), 8.12 (d, j = 5.3 hz, 1h), 7.97 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.82-7.74 (m, 3h), 7.67 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.58-7.52 (m, 1h), 7.45 (d, j = 7.1 hz, 1h), 7.31 (d, j = 8.6 hz, 1h), 6.89 (d, j = 5.3 hz, 1h), 6.82 (s, 1h), 5.28-5.01 (m, 3h), 4.61-4.44 (m, 2h), 4.40-4.28 (m, 2h), 4.13-4.05 (m, 2h), 3.99-3.89 (m, 1h), 3.86-3.76 (m, 1h), 3.48 (s, 3h), 3.09 (s, 3h), 3.03-2.93 (m, 2h), 2.92-2.83 (m, 1h), 2.64-2.54 (m, 3h), 2.46-2.44 (m, 1h), 2.31 (s, 3h), 2.11 (s, 3h), 2.08-1.97 (m, 1h), 1.79-1.61 (m, 4h), 1.40-1.12 (m, 4h), 1.08-0.89 (m, 2h) ppm。
[0461]
化合物91-n-[2-[[4-[3-[2-[[2-[5-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氨基]戊基氨基]-2-氧代-乙基]-甲基-氨基]-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-异丙基磺酰基-4,5-二甲基-吡咯-3-甲酰胺
12.44 (br s, 1h), 8.55 (d, j = 5.6 hz, 1h), 8.33 (s, 1h), 8.15 (d, j = 6.8 hz, 1h), 8.09 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.89-7.86 (m, 2h), 7.77 (s, 1h), 7.65 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.49 (s, 1h), 7.38 (d, j = 6.4 hz, 1h), 4.68 (s, 2h), 4.10 (sd, j = 5.2 hz, 2h), 3.77-3.71(m, 1h), 3.32 (s, 3h), 2.29 (s, 3h), 2.11 (s, 3h), 1.23 (s, 3h), 1.22 (s, 3h) ppm。
[0463]
步骤3: n-[2-[[4-[3-[2-[[2-[5-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氨基]戊基氨基]-2-氧代-乙基]-甲基-氨基]-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-异丙基磺酰基-4,5-二甲基-吡咯-3-甲酰胺 (化合物91)的制备向c (25 mg, 0.040 mmol)、4-(5-氨基戊基氨基)-2-(2,6-二氧代-3-哌啶)异二氢吲哚-1,3-二酮 (i-10, 18.90 mg, 0.041 mmol)和diea (25.86 mg, 0.220 mmol, 34.85
ꢀµ
l)在dmf (0.5 ml)中的溶液中加入hobt (6.49 mg, 0.048 mmol)和edci (9.21 mg, 0.048 mmol)，并在 30℃搅拌 2 h。将反应混合物浓缩，将残余物通过反相快速色谱法(水/acn)纯化，得到作为黄色固体的化合物91(16.77mg，41.44％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 965.7. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.81-12.02 (m, 1h), 11.08-11.07 (m, 1h), 8.52-8.49 (m, 1h), 8.22-8.20 (m, 1h), 8.14 (d, j = 5.2 hz, 1h), 7.96 (d, j = 8.0 hz, 1h), 7.86-7.81 (m, 1h), 7.78-7.76 (m, 2h), 7.67 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.59-7.52 (m, 2h), 7.06-6.99 (m, 2h), 6.92-6.89 (m, 1h), 6.84 (s, 1h), 6.48-6.45 (m, 1h), 5.10-4.98 (m, 1h), 4.18 (s, 2h), 4.09 (d, j = 6.0 hz, 2h), 3.77-3.71 (m, 1h), 3.23-3.18 (m, 2h), 3.14-3.12 (m, 3h), 3.10-3.05(m, 2h), 2.59-2.54 (m, 2h), 2.29 (s, 3h), 2.11 (s, 3h), 2.04-1.98 (m, 1h), 1.56-1.49 (m, 2h), 1.46-1.40 (m, 3h), 1.33-1.26 (m, 2h), 1.23 (d, j = 6.8 hz, 6h) ppm。
(s, 3h), 1.76 (d, j = 6.8 hz, 3h) ppm。
[0465]
步骤2: 5-甲基-1h-吡咯-3-甲酸叔丁酯(c)的制备在 40 ℃下向丙-2-烯酸叔丁酯 (18.99 g, 148.14 mmol, 21.50 ml) 和 b (31 g, 148.14 mmol) 在 thf (400 ml) 中的溶液中缓慢加入 nah (7.11 g, 177.77 mmol, 60% ，在矿物油中）。将反应混合物加热至70℃并搅拌1小时。将反应混合物倒入饱和nh4cl水溶液(500 ml)中并用etoac(300 ml x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(300ml)洗涤，用无水na2so
4 干燥，在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/etoac 1:0-10:1)纯化，得到作为黄色油的c(5.1 g, 20.09 mmol, 13.56%收率, 71.40%纯度)。lcms (esi) m/z: [m-56 h]

= 126.1. 1
h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ = 8.08 (s, 1h), 7.23-7.21 (m, 1h), 6.26 (s, 1h), 2.25 (s, 3h), 1.54 (s, 9h) ppm。
[0466]
s步骤3: 5-甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酸叔丁酯(d)的制备在0℃下向c (4.6 g, 25.38 mmol)在thf (80 ml)中的混合物中缓慢加入nahmds (1 m, 50.76 ml)。将反应混合物搅拌30分钟，然后在0℃下滴加甲磺酰氯(4.36g，38.07mmol，2.95ml)。将反应混合物在15℃下再搅拌16h，然后缓慢倒入饱和nh4cl水溶液(150 ml)中并用etoac (100 ml x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(60ml)洗涤，用无水na2so4干燥，在减压下浓缩。通过反相柱色谱法(0.1％氨水)纯化残余物，得到作为白色固体的d(3.1g，47.10％)。1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ = 7.63 (d, j = 2.0 hz, 1h), 6.40-6.39 (m, 1h), 3.19 (s, 3h), 2.44 (d, j = 0.8 hz, 3h), 1.54 (s, 9h) ppm。
[0467]
步骤4: 5-甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酸(e)的制备将 d (3.1 g, 11.95 mmol) 在 hcl/1,4-二氧杂环己烷 (4 m, 50 ml) 中的混合物在 15℃下搅拌 48 h。将反应混合物在减压下浓缩，并将残余物与mtbe(15ml)和石油醚(15ml)在15℃下研磨10分钟。将混合物过滤以得到作为黄色固体的e(2.35g，96.74％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 204.1. 1
h nmr (400 mhz, 甲醇-d4) δ = 7.69 (d, j = 1.6 hz, 1h), 6.41 (s, 1h), 3.35 (s, 3h), 2.44 (d, j = 0.8 hz, 3h) ppm。
[0468]
步骤5: 2-[甲基-[4-[3-[2-[[2-[(5-甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-羰基)氨基]乙酰
基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]氨基]乙酸叔丁酯(f)的制备在30℃下，向e (224.02 mg, 1.10 mmol)在dcm (5 ml)中的混合物中加入diea (427.43 mg, 3.31 mmol, 576.05
ꢀµ
l)、hatu (628.75 mg, 1.65 mmol) 和2-[[4-[3-[2-[(2-氨基乙酰基)氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]-甲基-氨基]乙酸叔丁酯(500 mg, 1.10 mmol) 。将反应混合物搅拌16小时，然后用水(10ml x 3)洗涤。在减压下浓缩有机层并将残余物与etoac(10ml)一起研磨以得到作为黄色固体的f(550mg，76.58％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 639.3. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.40 (s, 1h), 8.62-8.58 (m, 1h), 8.26 (s, 1h), 8.15 (d, j = 6.0 hz, 1h), 8.03 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.81 (s, 1h), 7.77 (d, j = 7.2 hz, 1h), 7.74 (d, j = 2.0 hz, 1h), 7.63-7.59 (m, 1h), 7.16 (s, 2h), 6.48 (s, 1h), 4.45 (s, 2h), 4.12 (d, j = 6.0 hz, 2h), 3.53 (s, 3h), 3.21 (s, 3h), 2.41 (s, 3h), 1.40 (s, 9h) ppm。
[0469]
步骤6: 2-[甲基-[4-[3-[2-[[2-[(5-甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]氨基]乙酸(i-102)将 f (510 mg, 798.43
ꢀµ
m) 在 hcl (12 m, 5 ml) 中的混合物在 25℃下搅拌 20 分钟。将反应混合物过滤以得到作为黄色固体的i-102 (340 mg, 68.78%)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 583.0. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.42 (s, 1h), 8.63-8.60 (m, 1h), 8.31 (s, 1h), 8.14 (d, j = 6.4 hz, 1h), 8.08 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.89-7.82 (m, 2h), 7.74 (d, j = 2.0 hz, 1h), 7.67-7.62 (m, 1h), 7.44 (s, 1h), 7.33 (d, j = 5.6 hz, 1h), 6.48 (s, 1h), 4.61 (s, 2h), 4.12 (d, j = 5.6 hz, 2h), 3.53 (s, 3h), 3.29 (s, 3h), 2.41 (s, 3h) ppm。
[0470]
化合物122-n-(2-((4-(3-(2-((2-((2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-甲基-1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺的制备
向2-[甲基-[4-[3-[2-[[2-[(5-甲基-1-甲磺酰基-吡咯-3-羰基)氨基] 乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]氨基]乙酸(i-102, 40 mg, 0.064 mmol)和4-[2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基氨基]-2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)异二氢吲哚-1,3-二酮 (i-9, 26.13 mg, 0.064 mmol)在dmf (1 ml)中的混合物中加入diea (41.75 mg, 0.32 mmol, 56.27
ꢀµ
l)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入edci (18.58 mg, 0.096 mmol)和hobt (13.10 mg, 0.096 mmol)。再搅拌16小时后，将混合物倒入水(10ml)中并用etoac(10ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20ml)洗涤，经na2so
4 干燥并浓缩。将残余物通过制备型 hplc (柱：waters xbridge 150 x 25 mm x 5
ꢀµ
m；流动相：[水 (10mm nh4hco3)-acn]；b%：26%-56%，10min) 纯化得到作为黄色固体的化合物 122 (9.9 mg, 14.48%)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 969.5. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.44-12.36 (m, 1 h), 11.11 (d, j= 4.4 hz, 1 h), 8.63-8.60 (m, 1 h), 8.19 (s, 1 h), 8.13 (d, j= 5.2 hz, 1 h), 7.96 (d, j= 8.0 hz, 1 h), 7.90-7.87 (m, 1 h), 7.78 (s, 1 h), 7.74 (d, j= 2.0 hz, 1 h), 7.67 (d, j= 7.6 hz, 1 h), 7.58-7.52 (m, 2 h), 7.11 (d, j= 8.8 hz, 1 h), 7.03 (d, j= 7.2 hz, 1 h), 6.92-6.90 (m, 1 h), 6.85 (s, 1 h), 6.60-6.57 (m, 1 h), 6.48 (s, 1 h), 5.06-5.02 (m, 1 h), 4.20 (s, 2 h), 4.11 (d, j= 5.6 hz, 2 h), 3.58-3.56 (m, 2 h), 3.53 (s, 3 h), 3.50-3.48 (m, 4 h), 3.45-3.38 (m, 4 h), 3.23-3.19 (m, 2 h), 3.16 (d, j= 5.2 hz, 1 h), 3.11 (s, 3 h), 2.90-2.81 (m, 1 h), 2.58 (d, j= 2.4 hz, 1 h), 2.40 (s, 3 h), 2.07-1.96 (m, 1 h) ppm。
[0471]
n-[2-[[4-[3-[2-(2-氨基乙氧基)-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酰胺 (i-96)的制备步骤1: n-[2-[(4-溴-2-吡啶)氧基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(b)的制备在 0℃下向 4-溴吡啶-2-醇 (a, 0.5 g 2.87 mmol) 在thf (5 ml) 中的溶液中加入 pph
3 (1.13 g, 4.31 mmol) 和 n-(2-羟乙基)氨基甲酸叔丁酯 ( 555.87 mg, 3.45 mmol, 534.49
ꢀµ
l) 。滴加diad (871.62 mg, 4.31 mmol, 838.10
ꢀµ
l)并将混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭并用dcm(20ml)萃取。将合并的有机层用水(10ml)洗涤，用na2so
4 干燥，在减压下浓缩。通过柱色谱法(sio
2 ，石油醚/etoac 3:1)纯化残余物，得到作为白色固体的b(0.6g，1.89mmol，65.83％)。lcms (esi) m/z: [
81
brm h]
= 318.9。1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ = 1.46 (s, 9h), 3.54-3.52 (m, 2h), 4.38-4.36 (m, 2h), 4.95 (s, 1h), 6.96 (d, j=1.6 hz, 1h), 7.06-7.04 (m, 1h), 7.97 (d, j= 5.6 hz, 1h) ppm。
[0472]
步骤2: n-[2-[[4-[3-[2-[[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]氧基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(c)的制备将1-甲磺酰基-n-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺 (i-90, 530 mg, 1.0 mmol)、b (380.31 mg, 1.20 mmol)、k3po
4 (636.30 mg, 3.00 mmol)和pd(dppf)cl
2 (73.11 mg, 0.1 mmol)在1,4-二氧杂环己烷 (6 ml) / 水 (2 ml)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次。将混合物在80℃下搅拌2小时，然后在减压下浓缩。通过柱色谱法(sio
2 ，石油醚/etoac 1:1)纯化残余物，得到作为黄色固体的c(0.4g，62.48％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 641.2.1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 1.39 (s, 9h), 3.58 (s, 3h), 4.16-4.14 (m, 2h), 4.33-4.31 (m, 2h), 6.79-6.77 (m, 1h), 7.01 (s, 1h), 7.16 (s, 1h), 7.34-7.30 (m, 1h), 7.38-7.36 (m, 1h), 7.59-7.57 (m, 1h),7.75-7.73 (m, 1h), 7.85 (s, 2h), 8.01 (d, j= 7.6 hz, 1h), 8.25 (d, j= 5.2 hz, 1h), 8.30 (s, 1h), 8.70-8.68 (m, 1h),12.44 (s, 1h) ppm。
[0473]
步骤3:n-[2-[[4-[3-[2-(2-氨基乙氧基)-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酰胺 (i-96)的制备向 c (300 mg, 0.4618 mmol) 在 dcm (0.5 ml) 中的溶液中加入 hcl/1,4-二氧杂环己烷(4 m, 2.34 ml)。将混合物在20℃下搅拌2小时，然后在减压下浓缩。将残余物悬浮在mtbe(10ml)中，过滤，并与tbme(3ml)一起研磨，得到作为黄色固体的粗制i-96(0.25g，92.53％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 541.1. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.44 (s, 1h), 8.71 (s, 1h), 8.33-8.26 (m, 2h), 8.03 (d, j= 7.8 hz, 3h), 7.85 (d, j= 6.0 hz, 2h), 7.73 (d, j= 8.4 hz, 1h), 7.64-7.57 (m, 1h), 7.45 (d, j= 5.2 hz, 1h), 7.35-7.30 (m, 1h), 7.19 (s, 1h), 6.78 (s, 1h), 4.57-4.47 (m, 2h), 4.16-4.14 (m, 2h), 3.58 (s, 3h), 3.29-3.25 (m, 2h) ppm。
[0474]
化合物36-n-[2-[[4-[3-[2-[2-[4-[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氧基丁酰基氨基]乙氧基]-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酰胺的制备
向n-[2-[[4-[3-[2-(2-氨基乙氧基)-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酰胺 (i-96, 30 mg, 0.052 mmol)、4-[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氧基丁酸(i-11, 22.48 mg, 0.06 mmol)、edci (19.93 mg, 0.103 mmol)和hobt (14.05 mg, 0.103 mmol)在dmf (1 ml)中的溶液中加入diea (33.59 mg, 0.259 mmol, 45.28
ꢀµ
l)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，将滤液直接通过制备型hplc纯化（柱：phenomenex synergi c18 150 x 25 x 10μm；流动相：[0.225%甲酸水溶液/acn：38%-68%，9min），得到作为白色固体的化合物 36 (14.03 mg, 28.94% 收率)。
[0475]
lcms (esi) m/z: [m h]

= 883.2. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 8.76-8.74 (m, 1h), 8.32-8.22 (m, 2h), 8.16-8.14 (m, 1h), 8.00 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.89-7.69 (m, 4h), 7.60-7.30 (m, 5h), 7.14 (s, 1h), 6.79-6.78 (m, 1h), 5.09-5.06 (m, 1h), 4.40-4.13 (m, 6h), 3.59 (s, 3h), 3.51-3.47 (m, 2h), 2.94-2.81 (m, 1h), 2.62-2.53 (m, 2h), 2.34-2.32 (m, 2h), 2.06-1.94 (m, 3h) ppm。
[0476]
1-甲磺酰基-n-[2-氧代-2-[[4-[3-(2-哌嗪-1-基-4-吡啶)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(i-97)的制备步骤1: 4-(4-溴-2-吡啶)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(b)的制备向4-溴-2-氟-吡啶 (a, 2 g, 11.36 mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯4.23 g, 22.73 mmol) 在dmso (20 ml) 中的溶液中加入dipea (7.34 g, 56.82 mmol, 9.90 ml)。将混合
物在120℃下搅拌16小时，然后倒入水(50ml)中并用etoac(50ml x3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(100ml)洗涤，经na2so4干燥并浓缩，得到作为棕色固体的b(3.5g，85.86％)，其无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [
81
brm h]

= 343.9. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 7.99 (d, j = 5.2 hz, 1h), 7.06 (s, 1h), 6.85-6.83 (m, 1h), 3.54-3.48 (m, 4h), 3.41-3.39 (m, 4h), 1.42 (s, 9h) ppm。
[0477]
步骤2: 4-[4-[3-[2-[[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-2-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(c)的制备在氮气气氛下向1-甲磺酰基-n-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺 (i-90, 800 mg, 1.51 mmol)和b (774.24 mg, 2.26 mmol) 在1,4-二氧杂环己烷 (8 ml) / 水 (0.8 ml)中的溶液中加入pd(dppf)cl
2 (110.36 mg, 0.150 mmol)和k3po
4 (960.44 mg, 4.52 mmol)。将混合物在 100℃下搅拌 4 小时，然后用水 (15 ml) 稀释，并用 etoac (20 ml x 3) 萃取。将合并的有机萃取物用盐水 (20 ml x 2) 洗涤，用无水 na2so4干燥，在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(sio
2 ，石油醚/etoac 5:1至1:2)纯化，得到作为黄色固体的c(650mg，57.96％，89.533％纯度)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 666.1。
[0478]
步骤3: 1-甲磺酰基-n-[2-氧代-2-[[4-[3-(2-哌嗪-1-基-4-吡啶)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(i-97)的制备将 c (400 mg, 0.660 mmol) 在 4 m hcl/1,4-二氧杂环己烷 (4 ml) 中的溶液在 20℃下搅拌 1 h。将反应混合物在减压下浓缩并将残余物与mtbe(5ml)一起搅拌5分钟。过滤固体并与mtbe (3 ml x 3)一起研磨，得到作为棕色固体的i-97 (120 mg, 23.92%, 72.112%纯度)，其无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m h]

= 566.1. 1
h nmr (400 mhz, 甲醇-d4) δ = 8.36 (s, 1h), 8.15-8.09 (m, 2h), 7.86-7.82 (m, 2h), 7.71 (s, 1h), 7.65 (s, 1h), 7.63-7.59 (m, 1h), 7.51 (d, j = 6.4 hz, 1h), 7.29-7.28 (m, 1h), 6.83-6.82 (m, 1h), 4.28 (s, 2h), 4.14-4.11 (m, 4h), 3.55-3.51 (m, 4h), 3.39 (s, 3h) ppm。
[0479]
化合物31-n-[2-[[4-[3-[2-[4-[3-[2-[2-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氨基]乙氧基]乙氧基]丙酰基]哌嗪-1-基]-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲磺酰基-吡咯-3-甲酰胺的制备
在10℃下向3-[2-[2-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氨基]乙氧基]乙氧基]丙酸(i-17, 17.99 mg, 0.041 mmol)在dmf (0.4 ml)中的溶液中加入edci (11.94 mg, 0.062 mmol)和hobt (8.42 mg, 0.062 mmol)。加入1-甲磺酰基-n-[2-氧代-2-[[4-[3-(2-哌嗪-1-基-4-吡啶)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺 (i-97, 25 mg, 0.041 mmol) 和dipea (16.10 mg, 0.124 mmol, 21.70
ꢀµ
l)并将混合物在25℃下搅拌2.5小时。直接通过制备型 hplc 纯化反应物（柱：waters xbridge 150 x 25mm x 5μm；流动相：[10 mm nh4hco
3 水溶液/acn] 26%-56%，10 min），得到作为黄色固体的化合物 31（15.33 mg，37.64%）。lcms (esi) m/z: [m h]

= 981.3. 1
h nmr (400mhz, dmso-d6) δ = 12.44-12.31 (m, 1h), 11.12-11.05 (m, 1h), 8.66-8.64 (m, 1h), 8.21-8.20 (m, 2h), 7.98-7.76 (m, 1h), 7.85-7.84 (m, 1h), 7.79 (s, 1h), 7.70-7.68 (m, 1h), 7.57-7.53 (m, 2h), 7.32-7.30 (m, 1h), 7.12-7.10 (m, 2h), 7.02-6.99 (m, 2h), 6.78-6.76 (m, 1h), 6.60-6.57 (m, 1h), 5.06-5.02 (m, 1h), 4.14-4.13 (d, j = 6.0 hz, 2h), 3.67-3.52 (m, 19h), 3.46-3.42 (m, 3h), 2.90-2.82 (m, 2h), 2.62-2.59 (m, 4h), 2.05-1.98 (m, 2h) ppm。
[0480]
2-甲基-2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]丙酸(i-98)的制备步骤1: 2-(3-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸叔丁酯(b)的制备在-60℃下，向 2-(3-溴吡唑-1-基)乙酸叔丁酯 (a, 550 mg, 2.11 mmol) 在 thf (5 ml) 中的溶液中加入 lda (2 m ，在 thf 中, 2.63 ml)。将混合物搅拌30分钟，然后加入mei(747.43mg，5.27mmol，327.82μl)在thf(0.5ml)中的溶液。使反应混合物升温至25℃并搅拌1小时，然后用饱和nh4cl水溶液(5 ml)淬灭并用etoac (5 ml x 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(5ml x 3)洗涤并在减压下浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法（isco
®
；24g sepaflash
®
silica flash column，洗脱液0-50% etoac/石油醚梯度，35 ml/min）纯化，得到作为无色油的b（350mg，55.16%）。lcms(esi)m/z:[
79
br m-56 h]

=233.1. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6)δ=7.91 (d, j = 2.4 hz, 1h), 6.42 (d, j = 2.4 hz, 1h), 1.71 (s, 6h), 1.34 (s, 9h) ppm。
[0481]
步骤2: 2-甲基-2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨
基]噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]丙酸叔丁酯(c)的制备将1-甲磺酰基-n-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺 (i-90, 580 mg, 1.09 mmol)、b (350 mg, 1.16 mmol)、二叔丁基(环戊基)膦二氯化钯(ii) (142.53 mg, 0.21 mmol)和k3po
4 (696.32 mg, 3.28 mmol)在1,4-二氧杂环己烷 (5 ml) / 水(1 ml)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次。将混合物在80℃下搅拌2小时，然后用水(10ml)稀释并用etoac(10ml
×
3)萃取。将合并的有机层用盐水(10ml)洗涤。在减压下浓缩有机相并将残余物与etoac(20ml)和石油醚(5ml)一起研磨10分钟并过滤。在减压下干燥滤饼，得到作为白色固体的c(500mg，68.66％)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 613.5. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.43 (br s, 1h), 8.70-8.68 (m, 1h), 8.33 (s, 1h), 7.95 (d, j = 2.4 hz, 1h), 7.87-7.80 (m, 2h), 7.75 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.69 (s, 1h), 7.47-7.45 (m, 1h), 7.33-7.31 (m, 1h), 6.83-6.75 (m, 2h), 4.16 (d, j = 5.6 hz, 2h), 3.58 (s, 3h), 1.79 (s, 6h), 1.35 (s, 9h) ppm。
[0482]
步骤3: 2-甲基-2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]丙酸(i-98)的制备在25℃下向c (500 mg, 0.816 mmol)在dcm (10 ml)中的溶液中加入tfa (3.85 g, 33.77 mmol, 2.5 ml)。将混合物在25℃下搅拌16小时，然后在减压下浓缩。将残余物与etoac(20ml)一起研磨并过滤，得到作为白色固体的i-98(460mg，99.05％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 557.3. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.48 (s, 1h), 8.71-8.69 (m, 1h), 8.36 (s, 1h), 7.97 (d, j = 2.4 hz, 1h), 7.88-7.79 (m, 2h), 7.75-7.73 (m, 1h), 7.70 (s, 1h), 7.47-7.45 (m, 1h), 7.33-7.31 (m, 1h), 6.79 (d, j = 2.4 hz, 2h), 4.16-4.14 (m, 2h), 3.58 (s, 3h), 1.81 (s, 6h) ppm。
[0483]
化合物6-n-(2-((4-(3-(1-(1-((2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-1h-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲磺酰基)-1h-吡咯-3-甲酰胺的制备
将2-甲基-2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基] 噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]丙酸 (i-98, 40 mg, 0.059 mmol)、hatu (41 mg, 0.107 mmol)和dipea (27.88 mg, 0.215 mmol, 37.57
ꢀµ
l)在dmf (0.8 ml)中的混合物在30℃下搅拌10分钟。之后加入4-[2-[2-(2-氨基乙氧基) 乙氧基]乙基氨基]-2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)异二氢吲哚-1,3-二酮 (i-9, 24 mg, 0.046 mmol) 并将所得混合物在氮气气氛下在30℃下搅拌12小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭并用etoac(5ml x3)萃取。将有机相用无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液/acn)纯化，得到作为黄色固体的化合物6(13.84mg，22.62％)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 943.3. 1
h nmr (400 mhz, cdcl3) δ= 11.07-10.96 (m, 1h), 9.27 (d, j = 4.4 hz, 1h), 8.30 (s, 1h), 7.76-7.73 (m, 2h), 7.71-7.65 (m, 2h), 7.43-7.31 (m, 3h), 7.17 (s, 1h), 7.07-7.05 (m, 1h), 7.02 (d, j = 6.8 hz, 1h), 6.82 (m, 1h), 6.73-6.65 (m, 3h), 6.30-6.28 (m, 1h), 4.97-4.96 (m, 1h), 4.36 (d, j = 5.6 hz, 2h), 3.45-3.31 (m, 10h), 3.22-3.14 (m, 5h), 2.91-2.71 (m, 3h), 2.09 (d, j = 7.2 hz, 1h), 1.91 (s, 6h) ppm。
[0484]
化合物143-n-{4-[1-(11-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基]氨基}十一酰基)哌啶-3-基]-1,3-噻唑-2-基}-2-[(1-甲磺酰基-1h-吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺)的制备
步骤1:n-(4-溴-1,3-噻唑-2-基)-2-[(1-甲磺酰基-1h-吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺(b)的制备将2-氨基-n-(4-溴-1,3-噻唑-2-基)乙酰胺三氟乙酸盐 (a, 1g, 2.99 mmol)、1-甲磺酰基-1h-吡咯-3-甲酸(620 mg, 3.28 mmol)、1-[(二甲基氨基)(二甲基iminiumyl)甲基]-3-氧代-1h,2h,3h-3λ
5-[1,2,3]三唑并[5,4-b]吡啶-3-基ium-2-ide、六氟-λ
5-phosphanuide (2.27 g, 5.98 mmol)和双(丙-2-基)胺(1.50 g, 14.9 mmol)溶解在dmf (5 ml )中并在室温下搅拌1小时。加入水并用etoac(20ml)萃取混合物。分离有机层并在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(硅胶，0
‑‑
20% meoh/dcm)纯化，得到作为白色固体的b(960 mg，79%收率)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 407。
[0485]
步骤2:5-(2-{2-[(1-甲磺酰基-1h-吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基}-1,3-噻唑-4-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(c)的制备在氮气气氛下向5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(151 mg, 0.49 mmol)、b (100 mg, 0.245 mmol), 钯（ii）双（2-（二叔丁基膦基）环戊-2,4-二烯-1-基）二氯化铁(15.9 mg, 0.245 mmol)和磷酸三钾 (156 mg, 0.735 mmol)的混合物中加入1,4-二氧杂环己烷 (0.8 ml)和水(0.2 ml )。将混合物在75℃下微波1小时，然后倒入水(40ml)中并搅拌5分钟。将水相用etoac(30ml x 3)萃取，用盐水(10ml)洗涤，在真空下浓缩。粗产物c无需进一步纯化即可使用。lcms(esi)m/z:[m h]

= 510。
[0486]
步骤3:3-(2-{2-[(1-甲磺酰基-1h-吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基}-1,3-噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(d)的制备
在氮气下向 c (700 mg, 1.37 mmol) 在 meoh (200 ml) 中的溶液中加入 10% 钯/c (500 mg)。将该气体换成1个大气压的氢气并将反应物在室温下搅拌18小时。将混合物通过硅藻土过滤并浓缩。通过柱色谱法(硅胶12g，0-20％meoh/dcm)纯化残余物，得到作为黄色油的d(700mg，99％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 512。
[0487]
步骤4:2-[(1-甲磺酰基-1h-吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-[4-(哌啶-3-基)-1,3-噻唑-2-基]乙酰胺(e)的制备将d (900 mg, 1.75 mmol)加入到在meoh (15 ml, 0.416 mmol)中的3m hcl中并在室温下搅拌1.5小时。将混合物浓缩得到作为黄色油的粗e，其无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m h]
= 412。
[0488]
步骤5: n-{4-[1-(11-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基]氨基}十一酰基)哌啶-3-基]-1,3-噻唑-2-基}-2-[(1-甲磺酰基-1h-吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺(化合物143)的制备将e (8 mg, 0.19 mmol)、11-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基]氨基}十一烷酸 (i-20, 9.74 mg, 0.21 mmol)、双(丙-2-基)胺(5.87 mg, 0.58 mmol)和1-[(二甲基氨基)(二甲基iminiumyl)甲基]-3-氧代-1h,2h,3h-3λ
5-[1,2,3]三唑并[5,4-b]吡啶-3-基ium-2-ide; 六氟-λ
5-phosphanuide (14.7 mg, 0.39 mmol)在dmf (1 ml )中的混合物在室温下搅拌1小时。将混合物通过mdap纯化，得到作为黄色固体的化合物143(6.00mg，36％)。lcms (esi) m/z: [m h] = 851.5. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.20 (d, j = 6.2 hz, 1h), 11.01 (s, 1h), 8.60 (t, j = 5.8 hz, 1h), 7.81 (t, j = 2.0 hz, 1h), 7.53 (d, j = 8.3 hz, 1h), 7.31
ꢀ–ꢀ
7.25 (m, 1h), 7.05 (s, 1h), 6.92 (s, 1h), 6.88
ꢀ–ꢀ
6.78 (m, 2h), 6.74 (dd, j = 3.3, 1.7 hz, 1h), 5.00 (dd, j = 12.9, 5.4 hz, 1h), 4.57 (d, j = 7.9 hz, 1h), 4.32 (d, j = 13.1 hz, 1h), 4.06 (d, j = 5.7 hz, 2h), 4.00 (d, j = 13.9 hz, 1h), 3.81 (d, j = 13.9 hz, 1h), 3.54 (s, 3h), 3.15 (s, 1h), 3.13 (s, 2h), 3.06
ꢀ–ꢀ
2.51 (m, 5h), 2.28 (t, j = 7.4 hz, 2h), 2.06
ꢀ–ꢀ
1.89 (m, 2h), 1.76
ꢀ–ꢀ
1.18 (m, 16h)。
[0489]
2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]乙酸(i-99)的制备步骤1: 2-(3-溴吡唑-1-基)乙酸叔丁酯(b)的制备
8.76-8.69 (m, 1h), 8.51-8.40 (m, 1h), 7.93-7.85 (m, 3h), 7.82-7.78 (m, 1h), 7.77-7.76 (m, 1h), 7.55-7.49 (m, 1h), 7.38 (m, 1h), 6.92-6.73 (m, 1h), 5.08 (s, 2h), 4.29-4.16 (m, 2h), 3.64 (s, 4h), 3.27-3.19 (m, 1h) ppm。
[0492]
化合物2-n-[2-[[4-[3-[1-[2-[5-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基]氨基]戊基氨基]-2-氧代-乙基]吡唑-3-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲磺酰基吡咯-3-甲酰胺的制备向4-(5-氨基戊基氨基)-2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)异二氢吲哚-1,3-二酮 (i-10, 50 mg, 0.139 mmol)和2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]乙酸(i-99, 88.49 mg, 0.167 mmol)在dmf (1 ml)中的溶液中加入edci (40.12 mg, 0.209 mmol)、hobt (28.28 mg, 0.209 mmol)和diea (90.16 mg, 0.697 mmol, 121.50
ꢀµ
l)。将反应物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物加入水(10ml)中。将混合物过滤并浓缩，得到黄色固体，将其通过制备型 hplc 纯化（柱：shim-pack c18 150 x 25 x 10
ꢀµ
m；流动相：[0.225% 甲酸水溶液/acn]；b%：33%-63 %, 10min) 得到作为黄色固体的化合物 2 (42.31 mg, 40.18%)。lcms (esi) m/z: [m h]

= 869.3. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ = 12.85-12.13 (m, 1h), 11.30-10.84 (m, 1h), 8.69-8.67 (m, 1h), 8.39 (s, 1h), 8.15-8.13 (m, 1h), 7.89-7.76 (m, 3h), 7.74-7.66 (m, 2h), 7.58-7.56 (m, 1h), 7.46-7.44 (m, 1h), 7.33-7.31 (m, 1h), 7.11-6.96 (m, 2h), 6.85-6.71 (m, 2h), 6.53-6.51 (m, 1h), 5.06-5.04 (m, 1h), 4.84 (s, 2h), 4.15 (d, j = 5.6 hz, 2h), 3.58 (s, 3h), 3.28 (d, j = 6.4 hz, 2h), 3.17-3.08 (m, 2h), 2.94-2.82 (m, 1h), 2.63-2.53 (m, 2h), 2.07-1.97 (m, 1h), 1.60-1.58 (m, 2h), 1.51-1.49 (m, 2h), 1.42-1.32 (m, 2h) ppm。
[0493]
化合物142-n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]-n-([4-[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)苯基]吡啶-2-基]甲基)辛二酰胺的制备
步骤1: n-[(4-溴吡啶-2-基)甲基]-n-(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯(b)的制备在0℃下在氩气气氛下，向(4-溴吡啶-2-基)甲醇(a, 100.00 mg, 0.532 mmol, 1.00当量)、n-(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯(173.33 mg, 0.798 mmol, 1.50当量)和pph
3 (195.29 mg, 0.745 mmol, 1.40当量)在甲苯(2.00 ml)中的搅拌溶液中滴加dead (138.94 mg, 0.798 mmol, 1.50当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜并将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用石油醚/etoac(3:1)洗脱，得到作为浅黄色固体的b(110mg，53.41％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 387。
[0494]
步骤2: n-(叔丁氧基羰基)-n-([4-[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基) 甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)苯基]吡啶-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯(c)将b (100.00 mg, 0.258 mmol, 2.74当量)、2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]-1,3-噻唑-2-基]乙酰胺(i-92, 50.00 mg, 0.094 mmol, 1.00当量)、koac (18.50 mg, 0.189 mmol, 2.00当量)和pd(dppf)cl
2 (6.90 mg, 0.009 mmol, 0.10当量)在1,4-二氧杂环己烷(1.00 ml)中的溶液在90℃下在氮气气氛下搅拌过夜。在水处理和dcm萃取后，将残余物通过制备型tlc(石油醚/etoac 1:2)纯化，得到作为黄色固体的c(39mg，58.20％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 711。
[0495]
步骤3: n-(4-[3-[2-(氨基甲基)吡啶-4-基]苯基]-1,3-噻唑-2-基)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺(d)的制备
将 c (39.00 mg, 0.055 mmol, 1.00当量) 和 tfa (0.30 ml) 在 dcm (0.90 ml) 中的溶液在室温下搅拌 2小时。将所得混合物在真空下浓缩，得到作为黄色固体的d(25mg，89.24％)，其无需进一步纯化即可使用。lcms (esi) m/z: [m h]
= 511。
[0496]
步骤4: n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]-n-([4-[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)苯基]吡啶-2-基]甲基)辛二酰胺 (化合物142)的制备将i-50 (20.00 mg, 0.039 mmol, 1.00当量)、7-[[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]庚酸(d, 22.98 mg, 0.039 mmol, 1.00当量)、hatu (29.79 mg, 0.078 mmol, 2.00当量)和diea (25.31 mg, 0.196 mmol, 5.00当量)在dmf (0.50 ml)中的溶液在室温下搅拌过夜。在水处理和dcm萃取之后，通过反相快速色谱法在以下条件下纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，0% 至 100% 梯度，经 30 分钟； 检测器，uv 254 nm，得到作为灰白色固体的化合物 142 (4.5mg，10.64%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 1079.20. 1
h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 12.48 (s, 1h), 8.99 (s, 1h), 8.71 (t, j = 5.8 hz, 1h), 8.59 (t, j = 7.0 hz, 2h), 8.44 (t, j = 6.0 hz, 1h), 8.26 (s, 1h), 8.01 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.90
ꢀ–ꢀ
7.78 (m, 2h), 7.67 (s, 1h), 7.64 (s, 1h), 7.63 (s, 1h), 7.62
ꢀ–ꢀ
7.56 (m, 2h), 7.47
ꢀ–ꢀ
7.35 (m, 4h), 7.32 (dd, j = 3.3, 2.3 hz, 1h), 6.78 (dd, j = 3.3, 1.6 hz, 1h), 5.15 (d, j = 3.5 hz, 1h), 4.54 (d, j = 9.3 hz, 1h), 4.44 (d, j = 6.6 hz, 4h), 4.40 (s, 1h), 4.35 (s, 1h), 4.23 (s, 1h), 4.15 (d, j = 5.8 hz, 2h), 3.66 (s, 2h), 3.58 (s, 3h), 2.44 (s, 3h), 2.22 (dt, j = 23.2, 6.7 hz, 3h), 2.10 (d, j = 8.4 hz, 1h), 1.98
ꢀ–ꢀ
1.91 (m, 1h), 1.90 (s, 1h), 1.55
ꢀ–ꢀ
1.36 (m, 4h), 1.24 (s, 4h), 0.93 (s, 9h)。
[0497]
化合物153-n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]-n'-([4-[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)苯基]吡啶-2-基]甲基)-n'-甲基辛二酰胺的制备
0.095 mmol, 1.00当量)。2小时后，将溶液用3
×
40ml etoac萃取，合并有机物，用碳酸钠水溶液和盐水洗涤，干燥并在真空下浓缩。将粗产物（20 mg）在以下条件下通过制备型 hplc 纯化（柱：xselect csh f-phenyl obd 柱，19 x 250, 5 μm；流动相 a：水（0.05% 甲酸），流动相 b：acn ；流速：25 ml/min；梯度：在 12 min 内从 35 b 到 55 b；254/220 nm) 得到作为白色固体的化合物 153 (7.2 mg, 6.86%)。lcms [m h]
= 1093.35. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.48 (s, 1h), 8.99 (s, 1h), 8.75
ꢀ–ꢀ
8.53 (m, 3h), 8.27 (d, j = 11.9 hz, 1h), 8.01 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.89
ꢀ–ꢀ
7.80 (m, 3h), 7.76
ꢀ–ꢀ
7.48 (m, 4h), 7.40 (q, j = 8.1 hz, 4h), 7.32 (t, j = 2.8 hz, 1h), 6.78 (dd, j = 3.3, 1.6 hz, 1h), 5.14 (s, 1h), 4.70 (d, j = 22.4 hz, 2h), 4.54 (dd, j = 9.5, 5.4 hz, 1h), 4.48
ꢀ–ꢀ
4.38 (m, 2h), 4.35 (s, 1h), 4.20 (dd, j = 32.9, 5.3 hz, 3h), 3.65 (s, 2h), 3.58 (s, 3h), 3.08 (s, 2h), 2.88 (s, 1h), 2.44 (s, 3h), 2.40 (td, j = 7.4, 4.0 hz, 2h), 2.23 (q, j = 10.7, 8.0 hz, 1h), 2.14
ꢀ–ꢀ
2.01 (m, 2h), 1.94
ꢀ–ꢀ
1.85 (m, 1h), 1.55
ꢀ–ꢀ
1.40 (m, 4h), 1.23 (d, j = 8.2 hz, 4h), 0.92 (s, 9h)。
[0503]
化合物164-(2s,4r)-4-羟基-1-[(2s)-2-([[3'-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1'-联苯基]-3-基]甲基]氨基)-3,3-二甲基丁酰基]-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺的制备步骤1: (2s,4r)-1-[(2s)-2-[[(3-溴苯基)甲基]氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (b)的制备在室温下向(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (a, 100.00 mg, 0.232 mmol, 1.00当量)和3-溴苯甲醛(42.98 mg, 0.232 mmol, 1.00当量)在dcm (3.00 ml)中的搅拌溶液中滴加acoh并搅拌1小时。加入nabh(aco)
3 (73.84 mg, 0.348 mmol, 1.5当量)并将反应物在室温下搅拌4小时。将反应混合物分配在dcm和水之间。将水层再次用dcm萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。通过制备型tlc(etoac/石油醚1:1)纯化残余物，得到b(80mg，57.45％). lcms (esi) m/z: [m h]
= 599。
[0504]
步骤2: (2s,4r)-4-羟基-1-[(2s)-2-([[3'-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1'-联苯基]-3-基]甲基]氨基)-3,3-二甲基丁酰基]-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (化合物164)的制备在50℃下向b (80.00 mg, 0.133 mmol, 1.00当量)在1,4-二氧杂环己烷 (4.00 ml) / 水(1.00 ml)中的溶液中分批加入2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-[4-[3-(4,4, 5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]-1,3-噻唑-2-基]乙酰胺(i-90, 132.70 mg, 0.250 mmol, 1.50当量)、na2co
3 (53.03 mg, 0.500 mmol, 3.00当量)和xphos pd g
3 (14.12 mg, 0.017 mmol, 0.10当量)。将反应物在n2气氛下搅拌5小时，将粗产物(60mg)通过制备型hplc纯化，得到作为白色固体的化合物164(14.0mg，8.92％)。lcms [m h]
= 923.30. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.43 (s, 1h), 9.30 (brs, 1h), 9.00 (s, 1h), 8.77
ꢀ–ꢀ
8.69 (m, 2h), 8.24
ꢀ–ꢀ
8.19 (m, 1h), 8.01 (s, 1h), 7.94 (d, j = 7.7 hz, 1h), 7.87
ꢀ–ꢀ
7.80 (m, 2h), 7.76 (s, 1h), 7.68 (d, j = 7.8 hz, 1h), 7.61
ꢀ–ꢀ
7.51 (m, 3h), 7.41 (s, 4h), 7.36
ꢀ–ꢀ
7.29 (m, 1h), 6.78 (dd, j = 3.3, 1.6 hz, 1h), 5.37 (brs, 1h), 4.61 (t, j = 8.0 hz, 1h), 4.51
ꢀ–ꢀ
4.41 (m, 1h), 4.37 (s, 1h), 4.29
ꢀ–ꢀ
4.22 (m, 2h), 4.15 (d, j = 5.6 hz, 2h), 4.05
ꢀ–ꢀ
3.98 (m,1h), 3.80
ꢀ–ꢀ
3.77 (m, 1h), 3.59
ꢀ–ꢀ
3.58 (m, 3h), 3.43
ꢀ–ꢀ
3.35 (m, 2h), 2.45 (s, 3h), 2.17
ꢀ–ꢀ
2.07 (m, 1h), 1.99
ꢀ–ꢀ
1.89 (m, 1h), 1.06 (s, 9h)。
[0505]
化合物165-n-[4-[3-(2-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基]吡啶-4-基)苯基]-1,3-噻唑-2-基]-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺三氟乙酸盐的制备
步骤1: 叔丁基5-[4-(4-溴吡啶-2-基)哌嗪-1-基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (a)的制备向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)异吲哚-1,3-二酮 (i-39, 100.00 mg, 0.292 mmol, 1.00当量)和diea (226.51 mg, 1.753 mmol, 6.00当量)在dmf (4.00 ml)中的溶液中加入4-溴-2-氟吡啶(51.41 mg, 0.292 mmol, 1当量)。将该溶液在80℃下搅拌过夜。在水处理和dcm萃取之后，通过反相快速色谱法在以下条件下纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，0% 至 100% 梯度，经 20 分钟； 检测器，uv 254 nm，提供作为黄色固体的 a (54 mg, 37.10%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 498.07。
[0506]
步骤2: n-[4-[3-(2-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基]吡啶-4-基)苯基]-1,3-噻唑-2-基]-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺三氟乙酸盐 (化合物165)的制备向2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]-1,3-噻唑-2-基]乙酰胺(i-90, 42.58 mg, 0.080 mmol, 1.00当量)、a (40.00 mg, 0.080 mmol, 1.00当量)和k3po
4 (34.08 mg, 0.161 mmol, 2.00当量) 在1,4-二氧杂环己烷 (3.00 ml) / 水(0.30 ml)中的悬浮液中加入pd(dtbpf)cl
2 (5.23 mg, 0.008 mmol, 0.10当量)。将悬浮液在 80℃下搅拌 5 小时。过滤所得混合物，将滤饼用etoac(3
×
30ml)洗涤。在减压下浓缩滤液。将粗产物（40 mg）通过制备型 hplc 在以下条件下纯化（色谱柱：xselect csh prep c18 obd 柱，5um，19x150mm；流动相 a：水（0.05% tfa），流动相 b：acn；流速 ：25 ml/min；梯度：10 min 内从 12 b 到 39 b；254/220 nm；rt 1:9.52 得到作为黄色固体的化合物165 (8.3 mg,10.72%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 822.10. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ: 12.46 (s, 1h), 11.10 (s, 1h), 8.71 (t, j = 5.9 hz, 1h), 8.32
ꢀ–ꢀ
8.19 (m, 2h), 8.03 (d, j = 7.8 hz, 1h), 7.89
ꢀ–ꢀ
7.70 (m, 4h), 7.61 (t, j = 7.8 hz, 1h), 7.42 (d, j = 2.2 hz, 1h), 7.36
ꢀ–ꢀ
7.29 (m, 3h), 7.15 (d, j = 5.8 hz, 1h), 6.78 (dd, j = 3.3, 1.7 hz, 1h), 5.09 (dd, j = 12.9, 5.4 hz, 1h), 4.15 (d, j = 5.7 hz, 2h), 3.93
ꢀ–ꢀ
3.82 (m, 4h), 3.70 (t, j = 5.2 hz, 4h), 3.58 (s, 3h), 2.90 (ddd, j = 17.3, 13.9, 5.5 hz, 1h), 2.71
ꢀ–ꢀ
2.55 (m, 2h), 2.04 (ddd, j = 12.2, 6.7, 2.7 hz, 1h). 19
f nmr (377 mhz, dmso-d6) δ:-74.11。
[0507]
化合物160-n1-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]-n3-[[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1-联苯基]-3-基]甲基]氮杂环丁烷-1,3-二甲酰胺的制备步骤1: 3-([[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1-联苯基]-3-基]甲基]氨基甲酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(a)的制备在室温下向1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-甲酸(23.69 mg, 0.118 mmol, 1.20当量)、hatu (44.77 mg, 0.118 mmol, 1.20当量)和diea (38.04 mg, 0.294 mmol, 3.00当量)在dmf (2.00 ml)中的搅拌溶液中分批加入n-[4-[3-(氨基甲基)-[1,1-联苯基]-3-基]-1,3-噻唑-2-基]-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺(i-93, 50.00 mg, 0.098 mmol, 1.00当量)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将混合物用水(5ml)稀释并用etoac(3
×
5ml)萃取。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到作为红棕色油的a(30mg，44.12％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 693。
[0508]
步骤2: n-[[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)[1,1-联苯基]-3-基]甲基]氮杂环丁烷-3-甲酰胺 (i-101)的制备在室温下向a(30.00mg)在dcm(0.80ml)中的搅拌溶液中滴加tfa(0.20ml)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩，得到作为无色油的i-101(30mg，
(0.50ml)中的溶液在氮气气氛下在室温下搅拌过夜。在减压下浓缩所得混合物。这产生作为灰白色固体的a(25mg，68.52％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 721。
[0512]
步骤2: 3-[3-([[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1-联苯基]-3-基]甲基]氨基甲酰基) 氮杂环丁-1-基]丙酸 (b)的制备将 a (25.00 mg, 0.035 mmol, 1.00当量) 和 tfa (0.20 ml) 在 dcm (0.60 ml) 中的溶液在室温下在氮气气氛下搅拌 2小时。将所得混合物在减压下浓缩，得到作为黄色油的b(20mg，86.75％)，其无需进一步纯化即可用于下一步。lcms (esi) m/z: [m h]
= 665。
[0513]
步骤3: (2s,4r)-4-羟基-1-[(2s)-2-[3-[3-([[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1-联苯基]-3-基]甲基]氨基甲酰基)氮杂环丁-1-基]丙酰胺基]-3,3-二甲基丁酰基]-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 甲酸盐 (化合物154)的制备将b (15.00 mg, 0.023 mmol, 1.00当量)、hatu (17.16 mg, 0.045 mmol, 2.00当量)、diea (11.67 mg, 0.090 mmol, 4.00当量)和(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (10.69 mg,0.025 mmol,1.10当量)在dmf(0.50 ml)中的溶液在室温下在氮气气氛下搅拌2小时。将粗产物直接通过制备型hplc纯化，得到作为灰白色固体的化合物154(4.6mg，18.15％)。lcms (esi) m/z: [m h]
=1077.25. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.46 (s, 1h), 8.98 (s, 1h), 8.71 (s, 1h), 8.58 (s, 1h), 8.51
ꢀ–ꢀ
8.23 (m, 2h), 8.18 (s, 2h), 7.91 (d, j = 7.6 hz, 1h), 7.85 (s, 1h), 7.77 (m, 2h), 7.62
ꢀ–ꢀ
7.49 (m, 4h), 7.50
ꢀ–ꢀ
7.34 (m, 5h), 7.32
–
7.26 (m, 2h), 6.79 (s, 1h), 4.51 (d, j = 9.0 hz, 1h), 4.46
ꢀ–ꢀ
4.27 (m, 5h), 4.29
ꢀ–ꢀ
4.20 (m, 1h), 4.15 (d, j = 5.6 hz, 2h), 3.61 (d, j = 26.1 hz, 4h), 3.16 (s, 2h), 2.44 (s, 3h), 2.34
ꢀ–ꢀ
1.74 (m, 4h), 1.23 (t, j = 6.9 hz, 1h), 0.94 (s, 9h)。
[0514]
化合物157-(2s,4r)-4-羟基-1-[(2s)-2-[2-[3-([[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基-吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1-联苯基]-3-基]甲基]氨基甲酰基) 氮杂环丁-1-基]乙酰胺基]-3,3-二甲基丁酰基]-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺的制备
将i-101 (50.00 mg, 0.084 mmol, 1.00当量)、(2s,4r)-1-[(2s)-2-(2-溴乙酰胺基)-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (根据i-78的方法, 93.05 mg, 0.169 mmol, 2.00当量)和k2co
3 (58.30 mg, 0.422 mmol, 5.00当量)在dmf (3.00 ml)中的溶液在室温下搅拌过夜。将所得混合物用etoac(3
×
20ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤并用无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将粗产物通过制备型hplc纯化，得到作为灰白色固体的化合物157(9.5mg，10.59％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 1063.45. 1
h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 8.89 (s, 1h), 8.11 (s, 1h), 7.94
ꢀ–ꢀ
7.76 (m, 2h), 7.66 (s, 1h), 7.54 (m, 4h), 7.47
ꢀ–ꢀ
7.33 (m, 5h), 7.33
ꢀ–ꢀ
7.18 (m, 2h), 6.77 (d, j = 2.6 hz, 1h), 4.52
ꢀ–ꢀ
4.28 (m, 6h), 4.22 (d, j = 16.0 hz, 1h), 4.13 (s, 2h), 3.75
ꢀ–ꢀ
3.39 (m, 9h), 3.39
ꢀ–ꢀ
3.20 (m, 3h), 2.40 (s, 3h), 2.07 (dd, j = 12.4, 7.6 hz, 1h), 1.90 (d, j = 8.8 hz, 1h), 0.88 (s, 9h)。
[0515]
化合物155-1-(2-[[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]乙基)-n-[[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1-联苯基]-3-基]甲基]哌啶-4-甲酰胺甲酸盐的制备步骤1: 4-([[3'-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻
唑-4-基)-[1,1'-联苯基]-3-基]甲基]氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(a)的制备向1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-甲酸(25.00 mg, 0.109 mmol, 1.00当量)和diea (42.28 mg, 0.327 mmol, 3当量)在dmf (1 ml)中的溶液中加入hatu (62.19 mg, 0.164 mmol, 1.50当量) , 将所得溶液在室温下搅拌 40 分钟。然后加入 i-93 (55.57 mg, 0.109 mmol, 1.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌过夜。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，0% 至 100% 梯度，经 15 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生了作为黄色固体的 70 mg (89.06%) a。lcms (esi) m/z: [m h]
= 721。
[0516]
步骤2: n-[[3'-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1'-联苯基]-3-基]甲基]哌啶-4-甲酰胺 (b)的制备向 a (95.00 mg, 0.132 mmol, 1.00当量) 在dcm (4.00 ml)中的溶液中加入 tfa (0.80 ml, 10.770 mmol, 81.73当量)。将所得溶液在室温下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。这产生作为黄色粗制固体的150mg b。lcms (esi) m/z: [m h]
= 621。
[0517]
步骤3: 3-[4-([[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1-联苯基]-3-基]甲基]氨基甲酰基)哌啶-1-基]丙酸叔丁酯(c)的制备向 b (77.00 mg, 0.124 mmol, 1.00当量) 和 diea (80.16 mg, 0.620 mmol, 5当量) 在 meoh (5.00 ml, 0.156 mmol, 1.26当量) 中的溶液中加入丙-2-烯酸叔丁酯 （23.85 毫克，0.186 毫摩尔，1.5 当量）。将所得溶液在室温下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩。在下列条件下通过反相快速色谱法纯化残余物：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，10% 至 100% 梯度，经 15 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为黄色固体的c(60mg，64.59％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 749。
[0518]
步骤4: 3-[4-([[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1-联苯基]-3-基]甲基]氨基甲酰基)哌啶-1-基]丙酸 (d)的制备
向 c (60.00 mg, 0.080 mmol, 1.00当量) 在 dcm (2.00 ml) 中的溶液中加入 tfa (0.40 ml, 5.385 mmol, 67.22当量)。将所得溶液在室温下搅拌4小时。将所得混合物在减压下浓缩，得到作为黄色粗制油的d(110mg，198.18％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 693。
[0519]
步骤5: 1-(2-[[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]乙基)-n-[[3-(2-[2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]乙酰胺基]-1,3-噻唑-4-基)-[1,1-联苯基]-3-基]甲基]哌啶-4-甲酰胺甲酸盐(化合物155)的制备在0℃下向d (50.00 mg, 0.072 mmol, 1.00当量)和diea (74.62 mg, 0.577 mmol, 8.00当量)在dmf (3.00 ml)中的溶液中加入edci (20.75 mg, 0.108 mmol, 1.50当量)。将所得溶液在0℃下搅拌30分钟。然后加入(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺 (31.07 mg, 0.072 mmol, 1.00当量)和hobt (14.63 mg, 0.108 mmol, 1.50当量)。将溶液在室温下搅拌16小时。将水层用etoac(3
×
30ml)萃取。将粗产物（60mg）在以下条件下通过制备型 hplc 纯化（柱：xselect csh prep c18 obd 柱，5um，19x150mm；流动相 a：水（0.05% 甲酸），流动相 b：acn；速率：25 ml/min；梯度：在 12 min 内从 8 b 到 40 b；254/220 nm) 得到作为白色固体的化合物 155 (22.8 mg, 26.83%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 1105.15. 1
h nmr (300 mhz, dmso-d
6 d2o) δ 8.95 (s, 1h), 8.18 (d, j = 13.1 hz, 2h), 7.94
ꢀ–ꢀ
7.81 (m, 2h), 7.75 (s, 1h), 7.56 (q, j = 7.2, 6.3 hz, 4h), 7.48
ꢀ–ꢀ
7.35 (m, 5h), 7.32 (t, j = 2.8 hz, 1h), 7.24 (d, j = 7.5 hz, 1h), 6.78 (dd, j = 3.3, 1.6 hz, 1h), 4.52 (s, 1h), 4.48
ꢀ–ꢀ
4.17 (m, 6h), 4.15 (s, 2h), 3.66 (d, j = 5.2 hz, 2h), 3.57 (s, 3h), 2.94 (s, 2h), 2.43 (s, 6h), 2.35
ꢀ–ꢀ
2.13 (m, 2h), 2.09
ꢀ–ꢀ
1.81 (m, 4h), 1.73 (d, j = 16.8 hz, 4h), 0.94 (s, 9h)。
[0520]
5-[3-(2-氨基乙氧基)氮杂环丁-1-基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮的制备
步骤1: 3-[2-(苄基氧基)-2-氧代乙氧基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(中间体2)的制备向3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(10.00 g, 57.733 mmol, 1.00当量)在dmf (150.00 ml)中的溶液中加入2-溴乙酸苄酯 (15.87 g, 69.279 mmol, 1.2当量)和nah (1.66 g, 69.279 mmol, 1.2当量)。将所得溶液在0℃下搅拌3小时。将所得混合物用水(200ml)稀释并用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3
×
70ml)洗涤，用无水na2so4干燥，在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用己烷/etoac (6:1)洗脱，得到作为浅黄色油的中间体2 (16g, 86.24%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 322。
[0521]
步骤2: [[1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁-3-基]氧基]乙酸(中间体3)的制备向中间体 2 (16.00 g, 49.786 mmol, 1.00当量) 在 meoh (60.00 ml) 中的搅拌溶液中加入 10% pd/c (8.00 g, 75.174 mmol, 1.51当量)。将所得混合物在氢气气氛下在室温下搅拌3小时。过滤所得混合物，将滤饼用meoh(3
×
100ml)洗涤，将滤液在减压下浓缩。这产生作为浅黄色固体的中间体 3 (12 g)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 232。
[0522]
步骤3: 3-(氨基甲酰基甲氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(中间体4)的制备向中间体 3 (12.00 g, 51.892 mmol, 1.00当量) 在 thf (100.00 ml) 中的加热溶液 (60℃) 中加入羰基二咪唑 (18.51 g, 114.163 mmol, 2.2当量)。然后将反应物在60℃下搅拌1小时。将所得溶液在室温下倒入nh4oh(100.00ml，2568.068mmol，49.49当量)中并再搅拌1小时。将内容物用水 (100 ml) 稀释，将所得混合物用乙酸乙酯 (3
ꢀ×ꢀ
100 ml) 萃取。合并有机层，用饱和氯化钠水溶液(100ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，
然后在真空下浓缩，得到作为白色固体的中间体4(11.23g，93.98％)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 231。
[0523]
步骤4: 3-(2-氨基乙氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(中间体5)的制备将中间体4 (8.23 g, 35.742 mmol, 1.00当量)在bh
3-thf (150.00 ml, 1567.354 mmol, 43.85当量)中的溶液在70℃下搅拌10分钟。通过加入氯化氢水溶液(2ml的1m溶液)淬灭溶液，用水(150ml)稀释，并用乙酸乙酯(3
×
150ml)萃取。将水层用饱和碳酸氢钠水溶液调节至ph 8，并用二氯甲烷(3
×
200ml)进一步萃取。合并有机层并在真空下浓缩，得到作为浅黄色油的中间体5 (10.23 g)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 217。
[0524]
步骤5: 3-(2-[[(苄基氧基)羰基]氨基]乙氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(中间体6)的制备向中间体 5 (10.23 g, 47.300 mmol, 1.00当量) 在 thf (50.00 ml) 中的溶液中加入氯甲酸苄酯 (8.07 g, 47.300 mmol, 1当量)、水 (50.00 ml) 和 k2co
3 (19.61 g, 141.899 mmol , 3.00 当量）。将所得溶液在室温下搅拌3小时，然后用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3
×
100ml)洗涤，用无水na2so
4 干燥，在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用己烷/etoac (5:1)洗脱，得到作为无色油的中间体6 (4.231 g, 25.53%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 351。
[0525]
步骤6: n-[2-(氮杂环丁-3-基氧基)乙基]甲酸苄酯(中间体7)的制备向中间体6（4.23 g，12.071 mmol，1.00当量）在dcm（10.00 ml，157.300 mmol，13.03当量）中的搅拌溶液中加入tfa（10.00 ml，134.630 mmol，11.15当量）。将所得混合物在室温下搅拌2小时，然后在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，nh4hco
3 水溶液，0% 至 100% 梯度，40 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为无色油的中间体7 (4.56 g)；lcms (esi) m/z [m h]
= 251。
[0526]
步骤7: n-[2-([1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氮杂环丁-3-基]氧基)乙基]氨基甲酸苄酯(中间体8)的制备向中间体7 (3.30 g, 11.947 mmol, 1.00当量)在dmf (45.00 ml)中的搅拌溶液中加入n-[2-(氮杂环丁-3-基氧基)乙基]氨基甲酸苄酯(2.99 g, 11.947 mmol, 1当量)和diea (4.63 g, 35.841 mmol, 3当量)，将所得混合物在90℃下搅拌2小时。将反应物在室温下用水淬灭，将所得混合物用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3
×
100ml)
洗涤，用无水na2so4干燥，在减压下浓缩。这产生作为浅黄色固体的中间体8 (3.41 g)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 507。
[0527]
步骤8: 5-[3-(2-氨基乙氧基)氮杂环丁-1-基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮的制备向中间体 8 (3.10 g, 6.120 mmol, 1.00当量) 在 acn (45.00 ml, 774.609 mmol, 126.56当量) 中的搅拌溶液中加入 10% pd/c (1.55 g, 14.565 mmol, 2.38当量)。将所得混合物在氢气气氛下在室温下搅拌2小时。过滤催化剂后，将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，0.1% fa 水溶液，45 分钟内从 0% 到 100% 梯度； 检测器，uv 254 nm。这产生作为浅黄色固体的标题产物(391.3 mg，17.17%)；1h nmr (300 mhz, dmso) δ 8.45
ꢀ–ꢀ
8.25 (d, 1h), 7.71
ꢀ–ꢀ
7.51 (m, 1h), 7.44
ꢀ–ꢀ
7.25 (m, 1h), 6.83 (d, 1h), 6.69 (dd, 1h), 5.12
ꢀ–ꢀ
4.99 (m, 1h), 4.61
ꢀ–ꢀ
4.50 (m, 1h), 4.27 (dd, 2h), 3.90 (dd, 2h), 3.61
ꢀ–ꢀ
3.43 (m, 2h), 2.98
ꢀ–ꢀ
2.69 (m, 3h), 2.66
ꢀ–ꢀ
2.51 (m, 1h), 2.10
ꢀ–ꢀ
1.95 (m, 1h); lcms (esi) m/z: [m h]
= 373.14。
[0528]
5-([2-[3-(2-氨基乙氧基)苯氧基]乙基]氨基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮的制备步骤1: n-[2-(3-羟基苯氧基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体2)的制备在40℃下向间苯二酚（10.00 g，90.817 mmol，1.00当量）和 n-（2-溴乙基）氨基甲酸叔丁酯（20.35 g，90.817 mmol，1.00当量）在 dmf（250.00 ml）中的搅拌溶液中分批加入 cs2co3（88.77 g , 272.450 mmol, 3.00当量)。将所得混合物搅拌 2 小时，用 3 x 300 ml etoac 洗涤固体。将所得混合物在减压下浓缩，将残余物通过反相快速色谱法在以下条件
基)异吲哚-1,3-二酮的制备步骤1: 2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙醇(中间体2)的制备经1小时将 ch2cl
2 (150 ml) 中的二氢吡喃 (32.4 ml, 1.00当量) 滴加到乙二醇 (30 ml, 1.5当量) 和 ppts (1.35 g, 0.15当量) 在 dcm (750 ml) 中的溶液中。将反应混合物搅拌过夜并在减压下除去溶剂后，将粗产物通过快速柱色谱法(al2o3，己烷/thf 3:1和1:1)纯化。除去溶剂并在高真空下干燥得到中间体2 (10.6 g, 18.83%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 147。
[0535]
步骤2: 2-[2-[(3-[[2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙氧基]甲基]苯基)甲氧基]乙氧基]氧杂环己烷 (中间体3)的制备向中间体2 (9.50 g, 64.986 mmol, 1.00当量)的无水thf (75.00 ml)中加入nah (2.34 g, 97.479 mmol, 1.50当量)。将反应混合物在70℃下搅拌。蒸发thf溶剂。将粗材料溶解在乙酸乙酯中，用水洗涤，然后用饱和氯化钠溶液洗涤，用na2so4干燥并蒸发。将残余物通过柱色谱法纯化，得到化合物中间体3（13.9g，54.22%）；lcms (esi) m/z: [m h]
= 395。
[0536]
步骤3: 2-([3-[(2-羟基乙氧基)甲基]苯基]甲氧基)乙醇(中间体4)的制备
在室温下向中间体3 (13.90 g, 35.234 mmol, 1.00当量)在meoh(15.00 ml)中的搅拌溶液中加入dcm(15.00 ml)和hcl(30.00 ml, 987.356 mmol, 28.02当量)。将内容物在室温下搅拌过夜。将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，fa 水溶液，0% 至 100% 梯度，45 分钟； 检测器，uv 220 nm。这产生作为无色油的中间体4 (5.2g, 65.22%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 227。
[0537]
步骤4:4-甲基苯磺酸 2-[[3-([2-[(4-甲基苯磺酰基)氧基]乙氧基]甲基)苯基]甲氧基]乙酯(中间体5)的制备在0℃下向中间体 4 (5.20 g, 22.981 mmol, 1.00当量) 在 dcm(80.00 ml) 中的搅拌溶液中加入 dmap(421.13 mg, 3.447 mmol, 0.15当量)、tea(9.30 g, 91.925 mmol, 4当量)和 对甲苯磺酰氯(13.14 g, 68.944 mmol, 3当量)。将所得混合物在0℃下搅拌2小时。将所得混合物在室温下再搅拌5小时。将残余物经硅胶柱色谱法纯化，用pe/thf(1:1)洗脱，得到作为浅黄色油的中间体5(10.25g，83.42％)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 535。
[0538]
步骤5: n-(叔丁氧基羰基)-n-(2-[[3-([2-[(4-甲基苯磺酰基)氧基]乙氧基]甲基)苯基]甲氧基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体6)的制备将中间体5 (10.25 g, 19.172 mmol, 1.00当量)溶解在dmf(80.00 ml)中，然后加入n-(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯(4.58 g, 21.089 mmol, 1.10当量)和k2co3(3.97 g, 28.758 mmol, 1.50当量)。将反应混合物在60℃下搅拌9小时。然后将反应混合物冷却至室温并倒入50ml etoac中。然后用 3 x 25 ml 1 n hcl 和 1 x 40 ml 盐水洗涤 etoac 层。将etoac层用mgso
4 干燥，过滤，通过旋转蒸发除去溶剂，得到浅棕色油。将粗产物通过硅胶快速色谱法纯化(40％ etoac/60％己烷)，得到化合物。这产生作为无色油的中间体6 (1.689g,15.20%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 580。
[0539]
步骤6: n-(叔丁氧基羰基)-n-[2-([3-[(2-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氧基]乙氧基)甲基]苯基]甲氧基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体7)的制备
向中间体6(800.00 mg, 1.380 mmol, 1.00当量)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮(798.51 mg, 2.912 mmol, 2.11当量)在dmf(20.00 ml)中的溶液中加入na2co3(438.79 mg, 4.140 mmol, 3.00当量) 。将所得混合物在80℃下搅拌5小时。将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，meoh 水溶液，0% 至 100% 梯度，45 分钟； 检测器，uv 220 nm。这产生作为无色固体的中间体7 (920mg,97.79%)；lcms (esi) m/z [m h]
= 682。
[0540]
步骤7: 5-[2-([3-[(2-氨基乙氧基)甲基]苯基]甲氧基)乙氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮的制备向中间体7 (920.00 mg)的dcm溶液中加入tfa (5.00 ml)。将所得混合物在室温下搅拌3小时。在减压下浓缩所得混合物。将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，0.1% fa水溶液/acn，0% 至 100% 梯度，30 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为浅黄色固体的标题化合物(510mg)；1h nmr (300 mhz, dmso) δ 8.40 (s, 1h), 7.85 (d, 1h), 7.48 (d, 1h), 7.42
ꢀ–ꢀ
7.24 (m, 5h), 5.13 (dd, 1h), 4.58 (s, 2h), 4.50 (s, 2h), 4.43
ꢀ–ꢀ
4.34 (m, 2h), 3.83 (t, 2h), 3.54 (t, 2h), 2.96-2.82 (m, 3h), 2.66
ꢀ–ꢀ
2.46 (m, 2h), 2.12-1.98 (m, 1h); lcms (esi) m/z: [m h]
= 482.18。
[0541]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(5-(哌嗪-1-基)戊-1-炔-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮三氟乙酸的制备
步骤1: 5-溴异苯并呋喃-1,3-二酮 (中间体2)的制备在室温下将乙酸酐 (25 ml) 加入 4-溴苯-1,2-二甲酸 (5.0 g, 20.4 mmol, 1.0当量) 中。将所得混合物在120℃下搅拌3小时。将所得混合物在真空下浓缩，得到作为灰白色固体的中间体2(4.6g，定量)，其无需进一步纯化直接用于下一步骤。
[0542]
步骤2: 5-溴-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(中间体3)的制备在室温下向中间体2 (4.6 g, 20.4 mmol, 1.0当量)、3-氨基哌啶-2,6-二酮和氯化氢(4.0 g, 24.5 mmol, 1.2当量)在乙酸(50 ml)中的搅拌溶液中加入naoac (5.0 g, 61.2 mmol, 3.0当量)。将所得混合物在120℃下搅拌3小时，然后冷却至室温。通过过滤收集沉淀的固体并用水(3
×
200ml)洗涤。将所得固体在真空下干燥，得到作为灰白色固体的中间体3(5.1g，74.2％)。[m h]
= 337/339。
[0543]
步骤3: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(5-羟基戊-1-炔-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮 (中间体4)的制备在室温下向中间体3 (5.0 g, 14.8 mmol, 1.0当量)、pd(pph3)2cl
2 (2.1 g, 3.0 mmol, 0.2当量)和碘化铜(i)(0.56 g, 3.0 mmol, 0.2当量)在四氢呋喃(40 ml)中的搅拌溶液中滴加diea (19.2 g, 148.3 mmol, 10.0当量)和戊-4-炔-1-醇 (3.7 g, 44.5 mmol, 3.0当量)。将所得混合物在50℃下搅拌4小时。过滤所得混合物，将滤饼用thf(3
×
50ml)洗涤。在减压下浓缩滤液并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac (1:1)洗脱，得到作为黄色固体的中间体4 (1.9 g, 37.6%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 341。
[0544]
步骤4: 5-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)戊-4-炔醛(中间体5)的制备
基]氨基甲酸叔丁酯(中间体2)的制备在室温下向5-溴-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (1.00 g, 2.966 mmol, 1.00当量) 和n-(戊-4-炔-1-基)氨基甲酸叔丁酯(1304.55 mg, 7.119 mmol, 2.40当量)在thf (12 ml) 中的搅拌溶液中加入cui (56.49 mg, 0.297 mmol, 0.10当量)、pd(pph3)2cl
2 (208.20 mg, 0.297 mmol, 0.10当量)和diea (3.83 g, 29.662 mmol, 10.00当量)。将所得混合物在氮气气氛下在70℃下搅拌2小时。在水处理后，将残余物通过硅胶柱色谱纯化，用pe/etoac (5:1)洗脱，得到作为红色固体的中间体2 (970 mg)。lcms (esi) m/z [m h]
=440。
[0548]
步骤2: 5-(5-氨基戊-1-炔-1-基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮的制备在室温下向中间体2 (970.00 mg, 2.207 mmol, 1.00当量)的二氯甲烷溶液中加入tfa (2.00 ml, 26.926 mmol, 12.20当量)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。在减压下浓缩所得混合物。将残余物经反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18球形柱； 流动相，a相：h2o（0.05% tfa），b：乙腈（梯度b% 0%~70%，运行时间50 min）； 检测器，uv 254 nm。得到作为白色固体的标题化合物(870mg，89.2％)。1h nmr (300 mhz, dmso) δ 11.15 (s, 1h), 7.97
ꢀ–ꢀ
7.84 (m, 3h), 7.78
ꢀ–ꢀ
7.84 (m, 2h), 5.17 (dd, 1h), 3.03
ꢀ–ꢀ
2.94 (m, 2h), 2.93
ꢀ–ꢀ
2.83 (m, 1h), 2.69
ꢀ–ꢀ
2.51 (m, 4h), 2.14
ꢀ–ꢀ
1.99 (m, 1h), 1.94
ꢀ–ꢀ
1.78 (m, 2h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 340.12。
[0549]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[3-(哌嗪-1-基甲基)氮杂环丁-1-基]异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸的制备
步骤1: 4-([1-[(苄基氧基)羰基]氮杂环丁-3-基]甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体2)的制备向3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯(2.0 g, 9.1 mmol, 1.0当量)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.9 g, 10.2 mmol, 1.1当量)在dmf (20 ml)中的搅拌溶液中分批加入nabh(oac)
3 (7.6 g, 35.8 mmol, 4.0当量)。将混合物在50℃下搅拌过夜，然后加入nh4cl水溶液(100ml)中，用ea(3x100ml)萃取，将合并的有机相在减压下浓缩至干。将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18球形柱； 流动相，乙腈水溶液，0% 至 80% 梯度，50 分钟； 检测器，uv 254 nm。得到作为无色油的中间体2 (2.8 g, 79.1%)。lcms (esi) m/z [m h]
=390。
[0550]
步骤2: 4-(氮杂环丁-3-基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体3)的制备将中间体2 (2.8 g, 7.2 mmol)和10% pd/c (0.28 g)在甲醇(30 ml)中的溶液在氢气气氛下在室温下搅拌2小时。过滤所得混合物，将滤饼用meoh洗涤。在减压下浓缩滤液。将粗产物(1.8g，定量)不经进一步纯化直接用于下一步骤。lcms (esi) m/z [m h]
=256。
[0551]
步骤3: 4-([1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氮杂环丁-3-基]甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体4)的合成制备向中间体3 (1.8 g, 7.2 mmol, 1.1当量)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮 (1.8 g, 6.6 mmol, 1.0当量)在二甲基甲酰胺(15 ml)中的搅拌溶液中加入diea (1.8 g, 14.4 mmol, 1.0当量) ，并将混合物在80℃下搅拌3小时。标准处理后，将粗材料通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18球形柱； 流动相，乙腈水溶液，0% 至 70% 梯度，50 分钟； 检测器，uv 254 nm。得到作为黄色固体的4-([1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氮杂环丁-3-基]甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.8 g, 48.9 %)。lcms (esi) m/z [m h]
=512。
[0552]
步骤4: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[3-(哌嗪-1-基甲基)氮杂环丁-1-基]异吲哚-1,3-二酮三氟乙酸的制备
向4-([1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氮杂环丁-3-基]甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.8 g, 3.5 mmol, 1.0当量)在dcm (15 ml)中的搅拌溶液中加入tfa (5 ml) 。在室温下搅拌2小时后，将混合物在减压下浓缩，得到作为黄色固体的标题化合物(1.8g，定量)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 11.09 (s, 1h), 8.94 (br, 2h), 7.67 (d, j = 8.3 hz, 1h), 6.80 (d, j = 1.6 hz, 1h), 6.66 (dd, j = 8.3, 1.9 hz, 1h), 5.06 (dd, j = 12.9, 5.3 hz, 1h), 4.23
–
4.11 (m, 2h), 3.80
–
3.74 (m, 2h), 3.38
–
2.80 (m, 12h), 2.63
–
2.52 (m, 2h), 2.05
–
1.98 (m, 1h). lcms (esi) m/z [m h]
= 412.15。
[0553]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[4-[4-(哌啶-4-基)丁基]哌嗪-1-基]异吲哚-1,3-二酮的制备步骤1: 4-(4-氧代丁基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体2)的制备在-78℃下在氮气气氛下，向草酰氯 (757.49 mg, 5.968 mmol, 1.2当量) 在dcm (7.5 ml) 中的溶液中滴加 dmso (408.01 mg, 5.222 mmol, 1.05当量) 在 dcm (8.00 ml) 中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌5分钟，然后加入4-(4-羟基丁基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.28 g, 4.973 mmol, 1.00当量)在dcm (6.5 ml)中的溶液。将所得混合物在-78℃下再搅拌15分钟，然后在-78℃下加入tea（2.52 g，24.867 mmol，5当量）。将所得混合物在-78℃下再搅拌10分钟，升温至室温，再搅拌2小时。将混合物用ch2cl
2 (3
×
20毫升)萃取。将合并的有机层用盐水(3 x 30 ml)洗涤，经无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生作为浅黄色油的中间体2 (1.427 g)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 256。
[0554]
步骤2: 4-(4-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基]丁基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体3)的制备
在室温下向中间体2 (1.60 g, 4.674 mmol, 1.00当量)和4-(4-氧代丁基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.43 g, 5.608 mmol, 1.2当量)在dmf (35.00 ml)中的溶液中加入nabh(oac)
3 (2.97 g, 14.021 mmol, 3当量)。将所得混合物搅拌5小时，然后在室温下用水淬灭。将所得混合物用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3
×
50ml)洗涤，用无水na2so4干燥，在减压下浓缩。这产生作为浅黄色固体的中间体3 (2.036 g,74.89%)；lcms (esi) m/z: [m h]
= 582。
[0555]
步骤3: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[4-[4-(哌啶-4-基)丁基]哌嗪-1-基]异吲哚-1,3-二酮的制备在室温下向中间体3 (2.03 g, 3.490 mmol, 1.00当量)在dcm (5.00 ml)中的溶液中加入tfa (5.00 ml, 67.315 mmol, 19.29当量)。将所得混合物在室温下搅拌5小时，然后在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，0.1% fa水溶液/acn，45 分钟内从 0% 到 100% 梯度； 检测器，uv 220 nm。这产生作为黄绿色固体的标题化合物(1.3 g，77.35%)；1h nmr (300 mhz, dmso) δ 11.08 (s, 1h), 9.10-9.32 (m, 1h), 8.17 (d, 1h), 7.69 (d, 1h), 7.34 (d, 1h), 7.26 (dd, 1h), 5.31-4.88 (m, 1h), 3.52-3.41 (m, 4h), 3.30-3.20(dt, 3h), 2.96-2.75 (m, 4h), 2.66
ꢀ–ꢀ
2.55 (m, 1h), 2.39-2.29 (m, 2h), 2.09
ꢀ–ꢀ
1.96 (m, 1h), 1.79 (d, 3h), 1.62-1.41 (m, 4h), 1.36-1.17 (m, 8h); lcms (esi) m/z: [m h]
= 482.27。
[0556]
5-((3-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)丙基)氨基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮 二-三氟乙酸的制备步骤1: 7-(3-(((苄基氧基)羰基)氨基)丙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(中间体2)的制备
将n-(3-氧代丙基)氨基甲酸苄酯(7.7 g, 36.9 mmol, 1.0当量)和2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(8.4 g, 36.9 mmol, 1.0当量)在meoh (50 ml)中的溶液在室温下搅拌30分钟。然后加入nabh(oac)
3 (31.3 g, 147.7 mmol, 4当量) 并将所得混合物在室温下搅拌3小时。过滤混合物并浓缩滤液。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用dcm至dcm/meoh=50:1洗脱，得到作浅淡黄色油的中间体2(6.4g，41.5％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 418。
[0557]
步骤2: 7-(3-氨基丙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(中间体3)的制备在室温下在n2下向7-(3-[[(苄基氧基)羰基]氨基]丙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(3.8 g, 9.1 mmol, 1.0当量)在meoh (40 ml)中的溶液中加入10% pd/c (0.38 g, 3.5 mmol, 0.39当量)。将所得混合物在室温下在h2下搅拌1.5小时。将混合物过滤，浓缩，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用dcm至dcm/meoh=5:1洗脱，得到作为无色油的中间体3(1.0g，38.7％收率)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 284。
[0558]
步骤3: 7-(3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)丙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(中间体4)的制备在90℃下向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮 (0.97 g, 3.5 mmol, 1.0当量)和diea (0.92 g, 7.0 mmol, 2.0当量)在dmso (100 ml)中的混合物中滴加7-(3-氨基丙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.0 g, 3.5 mmol, 1.0当量)在dmso (20 ml) 中的溶液。添加后，将混合物在90℃下搅拌17小时。将混合物冷却至室温，通过制备型hplc在以下条件下纯化：c18球形柱，20-35um，80g； 流动相，a相：h2o（0.16% nh4hco3），b：乙腈（梯度b% 0%~55%，运行时间60分钟）； 流速：60毫升/分钟； 检测器，254 nm 的紫外检测。纯化得到作为黄色固体的中间体4 (0.37 g, 19.4%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 540。
[0559]
步骤4: 5-((3-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)丙基)氨基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮二-三氟乙酸的制备
在0℃下向7-(3-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氨基]丙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(0.37 g, 0.69 mmol, 1.0当量)在dcm (8 ml)中的溶液中滴加tfa (1 ml)在dcm (2 ml)中的溶液。添加后，将混合物升温至室温并搅拌20小时。将混合物浓缩以除去dcm，将残余物通过制备型hplc在以下条件下纯化：c18球形柱，20-35um，80g； 流动相，a相：h2o（0.1% tfa），b：乙腈（梯度b% 0%~30%，运行时间30分钟）； 流速：50毫升/分钟； 检测器，254 nm 的紫外检测。纯化得到作为黄色固体的标题化合物(0.3g，99.5％)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 11.08 (br, 1h), 9.76 (br, 1h), 8.93 (br, 2h), 7.60 (d, j = 8.3 hz, 1h), 7.21
–
7.32 (m, 1h), 6.99 (d, j = 1.7 hz, 1h), 6.89 (dd, j = 8.4, 2.0 hz, 1h), 5.04 (dd, j = 12.9, 5.3 hz, 1h), 3.84
–
3.72 (m, 5h), 3.31
–
3.25 (m, 3h), 3.15
–
3.00 (m, 2h), 2.95
ꢀ–ꢀ
2.82 (m, 3h), 2.63
–
2.55 (m, 2h), 2.17 (d, j = 13.8 hz, 2h), 2.04
ꢀ–ꢀ
1.77 (m, 5h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 440.20。
[0560]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[[5-(哌嗪-1-基)戊基]氧基]异吲哚-1,3-二酮的制备步骤1: 5-[4-(1,3-二氧戊环-2-基)丁氧基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (中间体2)的制备在60℃下向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚-1,3-二酮 (3.00 g, 10.940 mmol, 1.00当量)和2-(4-溴丁基)-1,3-二氧戊环(2.74 g, 13.128 mmol, 1.20当量)在dmf (25.00 ml)中的搅拌溶液中分批加入khco
3 (2.19 g, 21.879 mmol, 2.00当量)和ki (272.40 mg, 1.641 mmol, 0.15当量)。搅拌5小时并进行标准处理后，通过反相
3.15 (d, 2h), 2.99-2.81 (m, 1h), 2.67
ꢀ–ꢀ
2.52 (m, 1h), 2.13-1.98 (m, 1h), 1.88
ꢀ–ꢀ
1.71 (m, 4h), 1.56-1.40 (m, 2h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 429.15。
[0564]
5-(4-(2-氨基乙基)哌啶-1-基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮三氟乙酸的制备步骤1: (2-(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌啶-4-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体2)的制备在室温下向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮 (2.0 g, 7.2 mmol, 1.0当量)和n-[2-(哌啶-4-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.0 g, 8.7 mmol, 1.2当量)在dmf (20 ml) 中的溶液中加入diea (1.9 g, 14.5 mmol, 2当量)。添加后，将混合物在80℃下搅拌2.5小时。将混合物冷却至室温并倒入h2o(100ml)中。将所得混合物在室温下搅拌4小时，然后过滤。将滤饼用h2o (15 ml x 2)洗涤，与mtbe (30 ml)一起研磨，并将该滤饼干燥，得到作为黄色固体的中间体2 (3.2 g, 90.0%收率)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 485。
[0565]
步骤2: 5-(4-(2-氨基乙基)哌啶-1-基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮三氟乙酸的制备将n-(2-[1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌啶-4-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.1 g, 6.3 mmol, 1.0当量)在dcm (20 ml)和tfa (5 ml)中的混合物在50℃下搅拌2.5小时。将混合物冷却至室温并浓缩。将残余物通过制备型hplc在以下条件下纯化：c18球形柱，20-35um，330g； 流动相，a相：h2o（0.05% tfa），b：乙腈（梯度b% 0%~
50%，运行时间20 min）； 流速：80毫升/分钟； 检测器，254 nm 的紫外检测。纯化得到作为黄色固体的标题化合物(1.6g，64.7％)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 11.08 (s, 1h), 7.75 (br, 3h), 7.66 (d, j = 8.6 hz, 1h), 7.32 (d, j = 2.1 hz, 1h), 7.25 (dd, j = 8.7, 2.3 hz, 1h), 5.07 (dd, j = 12.9, 5.4 hz, 1h), 4.06 (d, j = 13.2 hz, 2h), 3.01
–
2.79 (m, 5h), 2.64
–
2.52 (m, 2h), 2.07
–
1.96 (m, 1h), 1.75 (d, j = 11.6 hz, 2h), 1.69
ꢀ–ꢀ
1.60 (m, 1h), 1.50 (q, j = 7.1 hz, 2h), 1.26
–
1.11 (m, 2h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 385.20。
[0566]
3-(6-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)-2,6-二氮杂螺[3.3] 庚-2-基)丙酸甲酸的制备步骤1: 6-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(中间体2)的制备在室温下向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮 (12.0 g, 43.5 mmol, 1.0当量) 和diea (16.8 g, 130.3 mmol, 3.0当量)在dmf (120 ml)中的搅拌溶液中加入2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(8.6 g, 43.4 mmol, 1.0当量)。将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将所得混合物冷却至该温度，浓缩，并通过反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18球形柱； 流动相，ch3cn 水溶液，10% 至 50% 梯度，50 分钟； 检测器，uv 254 nm，得到中间体2 (4.2 g, 21.3%)。lcms (esi) m/z [m h]
=455。
[0567]
步骤2: 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮 (中间体3)的制备
基)氨基甲酰基]戊基]氨基甲酸叔丁酯(中间体b)的制备在100ml的3颈圆底烧瓶中加入(2s)-6-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]己酸(a, 500.48 mg, 1.068 mmol, 1.50当量)、苯噻嗪胺（phenthiazamine） (125.50 mg, 0.712 mmol, 1.00当量)、dcm (20.00 ml)、2-乙氧基-1,2-二氢喹啉-1-甲酸乙酯(264.14 mg, 1.068 mmol, 1.50当量)。将所得溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液用3
×
10ml乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物浓缩后获得的残余物通过硅胶柱用乙酸乙酯/己烷(4:1)纯化。这产生作为黄绿色固体的400mg(89.62％)的中间体b。lcms (esi) m/z: [m h]
= 627。
[0570]
步骤2:n-[(5s)-5-氨基-5-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]戊基]氨基甲酸叔丁酯(中间体c)的制备在50 ml圆底烧瓶中加入中间体b (200.00 mg)、dmf (10.00 ml)和哌啶 (2.00 ml)。将所得溶液在室温下搅拌2小时，然后用3x30ml二氯甲烷萃取并浓缩合并的有机层。这产生作为固体的中间体c(60mg，46.48％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 405。
[0571]
步骤3: n-[(5s)-5-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-5-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]戊基]氨基甲酸叔丁酯(中间体d)的制备
在25 ml圆底烧瓶中加入1-甲磺酰基吡咯-3-甲酰胺 (33.50 mg, 0.178 mmol, 1.20当量)、dmf (5.00 ml)、diea (76.68 mg, 0.593 mmol, 4.00当量)、hatu (67.67 mg, 0.178 mmol, 1.20当量)和中间体c (60.00 mg, 0.148 mmol, 1.00当量) 。将所得溶液在室温下搅拌1小时，然后用3
×
10ml乙酸乙酯萃取。将粗产物(30mg)通过制备型hplc纯化，得到作为白色固体的3.5mg(4.02％)中间体d。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.43 (s, 1h), 8.40 (d, j = 7.2 hz, 1h), 8.01
ꢀ–ꢀ
7.95 (m, 1h), 7.95
ꢀ–ꢀ
7.86 (m, 2h), 7.63 (s, 1h), 7.44 (t, j = 7.7 hz, 2h), 7.38
ꢀ–ꢀ
7.21 (m, 2h), 6.88
ꢀ–ꢀ
6.73 (m, 2h), 4.60 (q, j = 7.2 hz, 1h), 3.57 (s, 3h), 2.92 (d, j = 6.4 hz, 2h), 1.78 (s, 2h), 1.42 (s, 3h), 1.35 (s, 9h), 1.24
ꢀ–ꢀ
1.12 (m, 1h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 576.20。
[0572]
步骤4:(2s)-6-氨基-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)己酰胺的制备在25 ml圆底烧瓶中加入n-[(5s)-5-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-5-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]戊基]氨基甲酸叔丁酯(50.00 mg, 0.087 mmol, 1.00当量)、dcm (3.00 ml, 15.730 mmol)和1,4-二氧杂环己烷中的无水hcl (3.00 ml, 32.912 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物浓缩，得到作为油的50mg(粗)标题化合物。lcms (esi) m/z: [m h]
= 476。
[0573]
化合物264-n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]-n-[(5s)-5-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-5-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]戊基]己二酰胺的制备
步骤1: n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]-n-[(5s)-5-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-5-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]戊基]己二酰胺 (化合物264)的制备向5-[[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]戊酸(10.00 mg, 0.018 mmol, 1.00当量)、hatu (6.81 mg, 0.018 mmol, 1.00当量)和diea (6.94 mg, 0.054 mmol, 3.00当量) 在dmf (1.00 ml)中的搅拌溶液中滴加(2s)-6-氨基-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)己酰胺(8.51 mg, 0.018 mmol, 1.00当量)。将所得混合物在室温下搅拌2小时，然后用etoac(3
×
3ml)萃取。将合并的有机层用水洗涤，用无水na2so4干燥，在减压下浓缩。将粗产物(10mg)通过制备型hplc纯化，得到作为白色固体的化合物264(5mg，27.49％)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.42 (s, 1h), 8.98 (s, 1h), 8.56 (t, j = 6.1 hz, 1h), 8.39 (d, j = 7.1 hz, 1h), 7.99
ꢀ–ꢀ
7.93 (m, 1h), 7.93
ꢀ–ꢀ
7.87 (m, 2h), 7.83 (d, j = 9.3 hz, 1h), 7.79
ꢀ–ꢀ
7.72 (m, 1h), 7.62 (s, 1h), 7.47
ꢀ–ꢀ
7.36 (m, 6h), 7.36
ꢀ–ꢀ
7.27 (m, 2h), 6.82
ꢀ–ꢀ
6.76 (m, 1h), 5.15
ꢀ–ꢀ
5.10 (m, 1h), 4.65
ꢀ–ꢀ
4.56 (m, 1h), 4.53 (d, j = 9.3 hz, 1h), 4.49
ꢀ–ꢀ
4.38 (m, 2h), 4.34 (s, 1h), 4.30
ꢀ–ꢀ
4.17 (m, 1h), 3.71
ꢀ–ꢀ
3.60 (m, 2h), 3.56 (s, 3h), 3.05
ꢀ–ꢀ
3.01 (m, 2h), 2.44 (s, 3h), 2.30
ꢀ–ꢀ
2.20 (m, 1h), 2.15
ꢀ–ꢀ
2.06 (m, 1h), 2.06
ꢀ–ꢀ
1.98 (m, 3h), 1.95
ꢀ–ꢀ
1.84 (m, 1h), 1.83
ꢀ–ꢀ
1.73 (m, 2h), 1.50
ꢀ–ꢀ
1.37 (m, 7h), 1.32
ꢀ–ꢀ
1.25 (m, 1h), 0.92 (s, 9h). lcms (esi) m/z: [m h]
=1016.20。
[0574]
化合物218-(2s,4r)-4-羟基-1-[(2s)-2-(8-[4-[(3s)-3-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-3-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]丙氧基]丁酰胺基]辛酰胺基)-3,3-二甲基丁酰基]-n-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲酰胺的制备步骤1:(2s)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-(丙-2-烯-1-基氧基)丁酸 (中间体b)的制备在0℃下向(2s)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-羟基丁酸(3.00 g, 13.684 mmol, 1.00当量)在dmf (2.00 ml)中的搅拌溶液中滴加nah (0.66 g, 0.027 mmol, 2.00当量)。在0℃下经1小时向上述混合物中滴加烯丙基溴(1.99g，0.016mmol，1.20当量)。将所得混合物在0℃下再搅拌2小时。在 0℃下用 40 ml 水淬灭反应。用 etoac (30 ml x 3) 洗涤水层，然后在 0℃下酸化至 ph ~ 3。然后用 etoac (30 ml x 3）萃取水级分。将合并的有机层用硫酸钠干燥。除去有机溶剂后，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用dcm/meoh/acoh
(20/1/0.2)洗脱，得到作为黄色油的中间体3(3.1g，87.37％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 260。
[0575]
步骤2: n-[(1s)-1-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]-3-(丙-2-烯-1-基氧基)丙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体c)的制备向中间体b (1103.48 mg, 4.256 mmol, 1.50当量)和2-乙氧基-1,2-二氢喹啉-1-甲酸乙酯(841.89 mg, 3.404 mmol, 1.20当量)在dcm (70.00 ml)中的搅拌溶液中加入苯噻嗪胺 (500.00 mg, 2.837 mmol, 1.00当量) 。将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后在减压下浓缩。将残余物溶解在etoac(50ml)中并用3
×
20ml水洗涤。将合并的有机层用无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac(1:1)洗脱，得到作为黄色油的中间体c(800mg，67.54％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 418。
[0576]
步骤3: (2s)-2-氨基-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)-4-(丙-2-烯-1-基氧基)丁酰胺(中间体d)的制备向中间体c (400.00 mg, 0.958 mmol, 1.00当量)在dcm (5.00 ml)中的搅拌溶液中加入tfa (1.00 ml)。将所得混合物在室温下搅拌2小时，然后在真空下浓缩，得到作为黄色油的中间体d(400mg，粗产物)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 318。
[0577]
步骤4: (2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)-4-(丙-2-烯-1-基氧基)丁酰胺 (中间体e)的制备在0℃下向1-(1-甲磺酰基吡咯-3-基)乙酮(141.55 mg, 0.756 mmol, 1.20当量)、hatu (287.50 mg, 0.756 mmol, 1.20当量)和diea (244.31 mg, 1.890 mmol, 3.00
当量)在dmf (10.00 ml)中的搅拌溶液中滴加中间体d (200.00 mg, 0.630 mmol, 1.00当量)。将所得混合物在室温下搅拌2小时，然后用etoac(3
×
5ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2
×
4ml)洗涤，用无水na2so4干燥，在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac (1:1)洗脱，得到作为黄色油的中间体e(100mg,35.73%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 489。
[0578]
步骤5: 4-[(3s)-3-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-3-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]丙氧基]丁-2-烯酸叔丁酯(中间体f)的制备向中间体e (110.00 mg, 0.225 mmol, 1.00当量)和丙-2-烯酸叔丁酯(288.57 mg, 2.251 mmol, 10.00当量)在dcm (30.00 ml)中的搅拌溶液中加入[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)亚咪唑啉-2-基]二氯[[2-(丙-2-基氧基)苯基]亚甲基] 钌(14.11 mg, 0.023 mmol, 0.10当量) 。将所得混合物在氮气气氛下在40℃下搅拌过夜，然后在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac (1:1)洗脱，得到中间体f (80 mg, 60.36%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 589。
[0579]
步骤6: 4-[(3s)-3-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-3-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]丙氧基]丁酸叔丁酯(中间体g)的制备向中间体f（80.00 mg，0.136 mmol，1.00当量）在meoh（6.00 ml）中的搅拌溶液中加入10% pd/c（43.39 mg，0.408 mmol，3.00当量）。将所得混合物在氢气气氛下在室温下搅拌2小时。将混合物过滤，在真空下浓缩，得到作为棕色油的中间体g(70mg，87.20％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 591。
[0580]
步骤7: 4-[(3s)-3-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-3-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]丙氧基]丁酸 (中间体h)的制备
(q, j = 6.6 hz, 2h), 2.44 (s, 3h), 2.28-2.18 (m, 1h), 2.13-1.95 (m, 6h), 1.94-1.85 (m, 1h), 1.72-1.63 (m, 2h), 1.52-1.38 (m, 2h), 1.38-1.28 (m, 2h), 1.26-1.12 (m, 7h), 0.93 (s, 9h). lcms [m h]
= 1088.15。
[0582]
4-[(2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]丁酸的制备
步骤1:(2s)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-(丙-2-烯-1-基氧基)丙酸(中间体3)的制备在0℃下向(2s)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-羟基丙酸 (3.0 g, 14.619 mmol, 1.00当量)在dmf (60.00 ml)中的溶液中加入nah (60%) (1.17 g, 29.238 mmol, 2.00当量) 。将悬浮液在0℃下搅拌1小时，然后加入烯丙基溴(1.86 g，15.350 mmol，1.05当量)。将溶液搅拌 2 小时，然后在 0℃下用 100 ml 水淬灭。将水层用 etoac (60 ml x 3) 洗涤，然后在 0℃下酸化至 ph ~ 3。将有机级分放在一边， 然后用etoac(60ml x 3)萃取水层。将合并的有机层用硫酸钠干燥并浓缩。将f残余物通过硅胶柱色法谱纯化，用dcm/meoh/hoac(20/1/0.2)洗脱，得到作为黄色油的中间体3(3.4g，94.82％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 246。
[0583]
步骤2:n-[(1s)-1-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]-2-(丙-2-烯-1-基氧基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体5)的制备
向苯噻嗪胺 (240.00 mg, 1.362 mmol, 1.00当量)和中间体3 (501.02 mg, 2.043 mmol, 1.50当量)在dcm (50.00 ml)中的溶液中加入2-乙氧基-1,2-二氢喹啉-1-甲酸乙酯(336.75 mg, 1.362 mmol, 1.00当量) 。将溶液在室温下搅拌16小时。将水层用ch2cl2(3 x 30 ml)萃取并且将这些合并的萃取物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac (5:1)洗脱，得到作为灰白色油的中间体5 (440 mg, 80.08%)。lcms (esi) m/z: [m h] = 404。
[0584]
步骤3:(2s)-2-氨基-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)-3-(丙-2-烯-1-基氧基)丙酰胺 (中间体6)的制备向中间体5 (440.00 mg, 1.090 mmol, 1.00当量)在dcm (2.00 ml)中的溶液中加入tfa (0.80 ml)。将溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩，得到作为黄色油的中间体6(330mg，99.75％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 304。
[0585]
步骤4:(2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)-3-(丙-2-烯-1-基氧基)丙酰胺 (中间体7)的制备向1-甲磺酰基吡咯-3-甲酸(205.79 mg, 1.088 mmol, 1当量)、中间体6 (330.00 mg, 1.088 mmol, 1.00当量)和diea (421.75 mg, 3.263 mmol, 3当量)在dmf (6.00 ml) 中的溶液中加入hatu (496.31 mg, 1.305 mmol, 1.2当量)。将溶液在25 ℃下搅拌16小时，然后浓缩，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac (5:1)洗脱，得到作为黄色油的中间体7 (370 mg, 71.68%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 475。
[0586]
步骤5:(2e)-4-[(2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]丁-2-烯酸叔丁酯(中间体9)的制备
向丙-2-烯酸叔丁酯（1080.36 mg，8.429 mmol，20.00当量）和中间体7（200.00 mg，0.421 mmol，1.00当量）在dcm（20.00 ml）中的溶液中加入hoveyda-grubbs催化剂（26.41 毫克，0.042 毫摩尔，0.10 当量）。将溶液在40℃下搅拌16小时。浓缩后，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac (1:1)洗脱，得到作为黄色固体的中间体9 (230 mg, 94.96%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 575。
[0587]
步骤6:4-[(2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]丁酸叔丁酯 (中间体10)的制备向中间体9 (230.00 mg, 0.400 mmol, 1.00当量) 在 meoh (5.00 ml) 中的溶液中加入 10% pd/c (110.00 mg)。将溶液在氢气气氛下在25℃下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩，得到作为黄色油的中间体10(200mg，86.65％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 577。
[0588]
步骤7:4-[(2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]丁酸的制备向中间体10 (218.00 mg, 0.378 mmol, 1.00当量)在dcm (2.00 ml)中的溶液中加入tfa (0.60 ml)。将该溶液在25℃下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩，得到作为黄色油的标题化合物(160mg，81.30％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 521。
[0589]
化合物229-n-(4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氨基]丁基)-4-[(2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]丁酰胺的制备
向中间体2 (15 mg, 1当量)、hatu (10.6 mg)和diea (0.04 ml)的混合物中加入5-[(4-氨基丁基)氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮 (10 mg, 1.00当量)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后通过制备型hplc直接纯化，得到作为黄色固体的化合物229(7.6mg，30.90％)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.50 (s, 1h), 11.05 (s, 1h), 8.50 (d, j = 7.0 hz, 1h), 7.98 (t, j = 2.1 hz, 1h), 7.94
ꢀ–ꢀ
7.86 (m, 2h), 7.74 (t, j = 5.6 hz, 1h), 7.63 (s, 1h), 7.55 (d, j = 8.4 hz, 1h), 7.43 (dd, j = 8.4, 7.0 hz, 2h), 7.36
ꢀ–ꢀ
7.31 (m, 1h), 7.30 (dd, j = 3.3, 2.1 hz, 1h), 7.09 (t, j = 5.6 hz, 1h), 6.93 (d, j = 2.1 hz, 1h), 6.86
ꢀ–ꢀ
6.81 (m, 1h), 6.80 (dd, j = 3.3, 2.1 hz, 1h), 5.03 (dd, j = 12.9, 5.4 hz, 1h), 4.90 (q, j = 6.6 hz, 1h), 3.80
ꢀ–ꢀ
3.68 (m, 2h), 3.56 (s, 3h), 3.51-3.42 (m, 2h), 3.17-3.11 (m, 2h), 3.10-3.03 (m, 2h), 2.93-2.84 (m, 1h), 2.64
ꢀ–ꢀ
2.52 (m, 2h), 2.09 (t, j = 7.4 hz, 2h), 2.02-1.95 (m, 1h), 1.76-1.68 (m, 2h), 1.58
ꢀ–ꢀ
1.39 (m, 4h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 847.40。
[0590]
4-[[(2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]甲基]苯甲酸叔丁酯的制备
步骤1:(2s)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-[[4-(叔丁氧基羰基)苯基]甲氧基]丙酸(中间体3)的制备向(2s)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-羟基丙酸 (1.00 g, 4.873 mmol, 1.00当量)在dmf (40.00 ml)中的溶液中加入nah (233.88 mg, 9.746 mmol, 2.00当量) 。将溶液在室温下搅拌1小时。然后加入4-(溴甲基)苯甲酸叔丁酯(1321.35 mg, 4.873 mmol, 1.00当量)并将溶液在室温下搅拌16小时。在 0 ℃下用 40 ml 水淬灭反应。用 etoac (30 ml x 3) 洗涤水层，然后在 0 ℃下酸化至 ph ~ 3。然后将水相萃取到 etoac (30 ml x 3）中。将合并的有机层用硫酸钠干燥。除去有机溶剂后，将残余物经反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，10 分钟内从 10% 到 100% 梯度； 检测器，uv 210 nm。这产生作为白色固体的中间体3 (1.2 g, 62.27%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 396。
[0591]
步骤2:4-[[(2s)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]甲基]苯甲酸叔丁酯(中间体5)的制备
向苯噻嗪胺 (445.67 mg, 2.529 mmol, 1.00当量)和中间体3 (1000.00 mg, 2.529 mmol, 1.00当量)在dcm (100.00 ml)中的溶液中加入2-乙氧基-1,2-二氢喹啉-1-甲酸乙酯(687.87 mg, 2.782 mmol, 1.10当量) 。将溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物在减压下浓缩，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac(5:1)洗脱，得到作为黄色油的中间体5(1200mg，85.71％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 554。
[0592]
步骤3:4-[[(2s)-2-氨基-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]甲基]苯甲酸叔丁酯(中间体6)的制备将中间体5 (240.00 mg, 0.433 mmol, 1.00当量)在hcl (1m，在ea中) (6.00 ml) 中的溶液在室温下搅拌5小时。通过过滤收集沉淀的固体并用etoac(3
×
3ml)洗涤。这产生作为白色固体的中间体6 (72mg, 36.62%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 454。
[0593]
步骤4: 4-[[(2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]甲基]苯甲酸叔丁酯的制备向1-甲磺酰基吡咯-3-甲酸(68.00 mg, 0.359 mmol, 1.00当量)、中间体6 (163.02 mg, 0.359 mmol, 1.00当量)和diea (139.36 mg, 1.078 mmol, 3.00当量)在dmf (2 ml) 中的溶液中加入hatu (136.66 mg, 0.359 mmol, 1.00当量) 。将溶液在室温下搅拌2小时。将所得混合物萃取至etoac(3 x 30ml)中，经无水mgso4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩，将残余物经反相快速色谱法在以下条件下纯化：柱，c18硅胶； 流动相，acn 水溶液，0% 至 100% 梯度，15 分钟； 检测器，uv 254 nm。这产生作为白色固体的标题化合物(9.9 mg，4.37%)。1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.52 (s, 1h), 8.54 (d, j = 7.2 hz, 1h), 8.01
ꢀ–ꢀ
7.95 (m, 1h), 7.94
ꢀ–ꢀ
7.87 (m, 2h), 7.84
ꢀ–ꢀ
7.77 (m, 2h), 7.65 (s, 1h), 7.48
ꢀ–ꢀ
7.38 (m, 4h), 7.37
ꢀ–ꢀ
7.26 (m, 2h), 6.85
ꢀ–ꢀ
6.76 (m, 1h), 4.99 (q, j = 6.4 hz, 1h), 4.65 (s, 2h), 3.83 (d, j = 6.4 hz, 2h), 3.57 (s, 3h), 1.50 (s, 9h). lcms (esi) m/z: [m h]
= 625.35。
[0594]
化合物171-(4-[[(2s)-2-[(1-叔丁基吡咯-3-基)甲酰胺基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]甲基]-n-[2-([1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氮杂环丁-3-基]氧基)乙基]苯甲酰胺的制备
基) 氨基甲酰基]乙氧基]甲基]苯甲酸(13.00 mg, 0.023 mmol, 1.00当量)和hatu (9.56 mg, 0.025 mmol, 1.10当量)在dmf (2.00 ml)中的搅拌溶液中滴加diea (8.86 mg, 0.069 mmol, 3.00当量)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[2-(哌嗪-1-基)乙氧基]异吲哚-1,3-二酮 (9.72 mg, 0.025 mmol, 1.10当量)。将粗产物通过制备型hplc纯化，得到作为白色固体的化合物191(3.4mg，14.93％)。
[0600]1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 12.55 (s, 1h), 11.11 (s, 1h), 8.55 (d, j = 7.2 hz, 1h), 8.13 (s, 1h), 8.00-7.96 (m, 1h), 7.94-7.88 (m, 2h), 7.83 (d, j = 8.3 hz, 1h), 7.65 (s, 1h), 7.48-7.46 (m, 1h), 7.46-7.40 (m, 2h), 7.40-7.26 (m, 7h), 6.82-6.77 (m, 1h), 5.16-5.07 (m, 1h), 5.03-4.95 (m, 1h), 4.61 (d, j = 1.8hz, 2h), 4.36-4.24 (m, 2h), 3.84 (d, j = 6.4 hz, 2h), 3.69
ꢀ–ꢀ
3.48 (m, 5h), 3.40-3.33 (m, 3h), 2.95-2.83 (m, 1h), 2.80-2.71 (m, 2h), 2.65-2.53 (m, 3h), 2.10-2.00 (m, 1h). lcms [m h]
= 937.0。
[0601]
(2s)-3-[[4-(氨基甲基)苯基]甲氧基]-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)丙酰胺的制备
步骤1: (2s)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-[(4-氰基苯基)甲氧基]丙酸 (中间体2)的制备在0℃下向(2s)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-羟基丙酸 (10.00 g, 48.731 mmol, 1.00当量)在dmf (50.00 ml)中的搅拌溶液中滴加nah (60%) (4.29 g, 107.208 mmol, 2.20当量)。将所得混合物在0℃下搅拌0.5小时，然后加入4-(溴甲基)苄腈(9.55g，48.731mmol，1.00当量)。将所得混合物在室温下再搅拌2小时，然后在0℃下用水淬灭。将所得混合物用etoac(3
×
15ml)萃取。将合并的有机层用无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，得到作为浅黄色油的中间体2 (12 g, 76.87%)。lcms (esi) m/z: [m h]
=321。
[0602]
步骤2: n-[(1s)-2-[(4-氰基苯基)甲氧基]-1-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基) 氨基甲酰基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体3)的制备在室温下向中间体2 (3.27 g, 10.213 mmol, 1.20当量) 和苯噻嗪胺 (1.50 g, 8.511 mmol, 1.00当量)在dcm (30.00 ml)中的搅拌溶液中加入2-乙氧基-1,2-二氢喹啉-1-甲酸乙酯(2.53 g, 10.213 mmol, 1.20当量)。将所得混合物搅拌过夜，然后在减压下浓缩。将粗产物通过反相快速纯化，得到作为白色固体的中间体3 (4 g, 98.20%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 479。
[0603]
步骤3: (2s)-2-氨基-3-[(4-氰基苯基)甲氧基]-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)丙酰胺 (中间体4)的制备将中间体3 (1.10 g, 2.299 mmol, 1.00当量)和tfa (3.00 ml)在dcm (15.00 ml)中的溶液在室温下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩，得到作为棕色油的中间体4(1.3g，粗产物)。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。lcms (esi) m/z: [m h]
= 379。
[0604]
步骤4: (2s)-3-[(4-氰基苯基)甲氧基]-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)丙酰胺 (中间体5)的制备将1-甲磺酰基吡咯-3-甲酸 (0.78 g, 4.122 mmol, 1.20当量)、diea (1.33 g, 10.305 mmol, 3.00当量) 和 hatu (1.57 g, 4.122 mmol, 1.20当量) 在 dmf (15.00 ml) 中的溶液在室温下搅拌30分钟。向上述混合物中加入中间体4 (1.30 g, 3.435 mmol, 1.00当量)并在室温下再继续搅拌2小时。通过反相快速纯化粗产物，得到作为白色固体的中间体5(1.4g，74.15％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 550。
[0605]
步骤5: (2s)-3-[[4-(氨基甲基)苯基]甲氧基]-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)丙酰胺的制备将rh.al2o3(1.95 g, 18.949 mmol, 20.83当量)和中间体5 (500.00 mg, 0.910 mmol, 1.00当量)在乙醇氨（ethanolic ammonia）(10.00 ml)中的悬浮液在50℃和20 atm氢气下搅拌过夜。过滤和浓缩后，将残余物通过反相快速色谱法纯化，得到作为灰白色固体的标题化合物(100mg，19.85％)。lcms (esi) m/z: [m h]
=554。
[0606]
化合物208-n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]-n'-[(4-[[(2s)-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-2-[(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)氨基甲酰基]乙氧基]甲
基]苯基)甲基]己二酰胺的制备在室温下在氮气气氛下向(2s)-3-[[4-(氨基甲基)苯基]甲氧基]-2-[(1-甲磺酰基吡咯-3-基)甲酰胺基]-n-(4-苯基-1,3-噻唑-2-基)丙酰胺 (13.00 mg, 0.023 mmol, 1.00当量)和5-[[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基]戊酸(13.12 mg, 0.023 mmol, 1.00当量)在dmf (1 ml)中的搅拌混合物中分批加入hatu (10.71 mg, 0.028 mmol, 1.20当量)和diea (0.20 ml, 1.148 mmol, 48.90当量)。将所得混合物在室温和氮气气氛下搅拌1小时，然后在减压下浓缩。将粗产物通过制备型hplc纯化，得到作为白色固体的化合物208(3.0mg，11.68％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 1094.55 1
h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 12.53 (s, 1h), 8.99 (s, 1h), 8.61
ꢀ–ꢀ
8.49 (m, 2h), 8.24 (t, j = 5.9 hz, 1h), 7.98 (t, j = 1.9 hz, 1h), 7.93
ꢀ–ꢀ
7.80 (m, 3h), 7.65 (s, 1h), 7.50
ꢀ–ꢀ
7.36 (m, 7h), 7.33
ꢀ–ꢀ
7.27 (m, 1h), 7.26
ꢀ–ꢀ
7.21 (m, 2h), 7.17 (d, j = 7.9 hz, 2h), 6.79 (dd, j = 3.3, 1.6 hz, 1h), 5.14 (d, j = 3.6 hz, 1h), 4.98 (t, j = 6.5 hz, 1h), 4.54 (s, 3h), 4.52
ꢀ–ꢀ
4.38 (m, 2h), 4.35 (s, 1h), 4.29
ꢀ–ꢀ
4.17 (m, 3h), 3.79 (d, j = 6.4 hz, 2h), 3.66 (s, 2h), 3.57 (s, 3h), 2.45 (s, 3h), 2.11 (s, 5h), 2.06
ꢀ–ꢀ
1.83 (m, 1h), 1.48 (s, 4h), 0.94 (s, 9h)。
[0607]
3-(2-氨基-1,3-噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸甲酯的制备步骤1: 3-(2-氨基-1,3-噻唑-4-基)-5,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(中间体2)的制备将4-溴-1,3-噻唑-2-胺(900.00 mg, 5.027 mmol, 1.00当量) 3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-5,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1554.34 mg, 5.027 mmol, 1.00当量)、k3po
4 (2134.04 mg, 10.054 mmol, 2.00当量)、pd(dtbpf)cl
2 (655.24 mg, 1.005 mmol, 0.20当量)和h2o (9.00 ml)在二氧杂环己烷(45.00 ml)中的溶液在80 ℃下在氮气气氛下搅拌过夜。将所得混合物用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac (1:1)洗脱，得到作为黄色固体的中间体2 (1.1 g, 77.77%)。lcms (esi) m/z: [m h]
=282。
[0608]
步骤2: 3-(2-氨基-1,3-噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体3)的制备
将中间体2（300.00 mg, 1.066 mmol, 1.00当量）和10% pd/c（120.00 mg, 1.128 mmol, 1.06当量）在meoh（15.00 ml）中的溶液在氢气气氛下在30℃下搅拌2天。过滤所得混合物，将滤饼用meoh洗涤。将滤液在减压下浓缩，将残余物通过反相快速色谱法纯化，得到作为浅黄色固体的中间体3(100mg，33.10％)。lcms (esi) m/z: [m h]
=284。
[0609]
步骤3: 4-(哌啶-3-基)-1,3-噻唑-2-胺(中间体4)的制备将中间体3 (100.00 mg, 0.353 mmol, 1.00当量)和tfa (0.50 ml)在dcm (2.00 ml)中的溶液在室温下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩以得到作为浅黄色油的中间体4 (60 mg, 92.78%)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 184。
[0610]
步骤4: 3-(2-氨基-1,3-噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸甲酯的制备在0℃下向中间体4（60.00 mg，0.327 mmol，1.00当量）和tea（198.77 mg，1.964 mmol，6.00当量）在dcm（4.00 ml）中的搅拌溶液中滴加在dcm(1.00ml)中的氯甲酸甲酯（27.84 mg，0.295 mmol，0.90当量）。将所得混合物在0℃下搅拌1小时，然后在减压下浓缩。将残余物通过制备型tlc(pe/etoac 1:2)纯化，得到作为浅黄色固体的标题化合物(55mg，69.62％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 242。
[0611]
3-[2-[(2s)-6-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[[(9h-芴-9-基甲氧基) 羰基]氨基]己酰胺基]-1,3-噻唑-4-基]哌啶-1-甲酸甲酯的制备将(2s)-6-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]-己酸(300.00 mg, 0.640 mmol, 1.00当量)、3-(2-氨基-1,3-噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸甲酯(154.50 mg, 0.640 mmol, 1.00当量)和2-乙氧基-2h-喹啉-1-甲酸乙酯(158.34 mg, 0.640 mmol, 1.00当量)在dcm (15.00 ml)中的溶液在室温下搅拌过夜。在减压下浓缩所得混合物。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用pe/etoac(1:1)洗脱，得到作为灰白色固体
的标题化合物(400mg，90.30％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 692。
[0612]
化合物184-3-[2-[(2s)-2-[(1-叔丁基吡咯-3-基)甲酰胺基]-6-(11-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基]十一酰胺基)己酰胺基]-1,3-噻唑-4-基]哌啶-1-甲酸甲酯的制备步骤1:3-[2-[(2s)-2-氨基-6-[(叔丁氧基羰基)氨基]己酰胺基]-1,3-噻唑-4-基]哌啶-1-甲酸甲酯(中间体2)的制备向3-[2-[(2s)-6-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]己酰胺基]-1,3-噻唑-4-基]哌啶-1-甲酸甲酯(100.00 mg, 0.145 mmol, 1.00当量)在dmf (2.00 ml)中的搅拌溶液中加入哌啶 (0.40 ml) 。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将反应物直接通过反相快速色谱法纯化，得到作为灰白色固体的中间体2(50mg，73.66％)。lcms (esi) m/z: [m h]
=470。
[0613]
步骤2: 3-[2-[(2s)-6-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[(1-叔丁基吡咯-3-基) 甲酰胺基]己酰胺基]-1,3-噻唑-4-基]哌啶-1-甲酸甲酯(中间体3)的制备向1-叔丁基吡咯-3-甲酸(17.80 mg, 0.106 mmol, 1.00当量)、hatu (48.58 mg, 0.128 mmol, 1.20当量)和diea (41.28 mg, 0.319 mmol, 3.00当量)在dmf (2.00 ml)中的搅拌溶液中加入中间体2 (50.00 mg, 0.106 mmol, 1.00当量) 。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将所得混合物用etoac(3
×
10ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2x 10ml)洗
涤，用无水na2so4干燥，并在减压下浓缩。将残余物通过制备型tlc(pe/etoac 1:2)纯化，得到作为灰白色固体的中间体3(60mg，91.07％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 619。
[0614]
步骤3: 3-[2-[(2s)-6-氨基-2-[(1-叔丁基吡咯-3-基)甲酰胺基]己酰胺基]-1,3-噻唑-4-基]哌啶-1-甲酸甲酯(中间体4)的制备在室温下向中间体3 (14.00 mg, 0.023 mmol, 1.00当量)在dcm (0.30 ml)中的搅拌溶液中加入tfa (0.10 ml)。将所得混合物在室温下搅拌1小时，然后在真空下浓缩，得到作为黄色油的中间体4(11.4mg，97.15％)。lcms (esi) m/z: [m h]
= 519。
[0615]
步骤4: 3-[2-[(2s)-2-[(1-叔丁基吡咯-3-基)甲酰胺基]-6-(11-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基]十一酰胺基)己酰胺基]-1,3-噻唑-4-基]哌啶-1-甲酸甲酯(化合物184)的制备在室温下向11-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基]十一烷酸 (10.00 mg, 0.022 mmol, 1.00当量)、hatu (9.97 mg, 0.026 mmol, 1.20当量)和diea (8.47 mg, 0.066 mmol, 3.00当量)在dmf (0.50 ml)中的搅拌溶液中加入中间体4 (11.34 mg, 0.022 mmol, 1.00当量)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将粗产物经制备型hplc纯化，得到作为黄绿色固体的化合物184(5.6mg，26.74％)。1h nmr (300 mhz, dmso-d6) δ 12.19 (s, 1h), 11.10 (s, 1h), 7.81 (d, j = 7.3 hz, 1h), 7.73 (t, j = 5.6 hz, 1h), 7.63
ꢀ–ꢀ
7.52 (m, 2h), 7.09 (d, j = 8.6 hz, 1h), 7.02 (d, j = 7.0 hz, 1h), 6.95 (t, j = 2.7 hz, 1h), 6.85 (s, 1h), 6.57
ꢀ–ꢀ
6.46 (m, 2h), 5.11
ꢀ–ꢀ
4.99 (m, 1h), 4.53 (q, j = 7.1 hz, 1h), 4.24
ꢀ–ꢀ
4.15 (m, 1h), 3.99
ꢀ–ꢀ
3.93 (m, 1h), 3.60 (s, 3h), 3.32
ꢀ–ꢀ
3.24 (m, 2h), 3.03 (d, j = 5.9 hz, 2h), 2.97
ꢀ–ꢀ
2.58 (m, 4h), 2.58
ꢀ–ꢀ
2.52 (m, 1h), 2.07
ꢀ–ꢀ
1.96 (m, 4h), 1.91
ꢀ–ꢀ
1.63 (m, 4h), 1.63
ꢀ–ꢀ
1.51 (m, 3h), 1.49 (s, 9h), 1.46
ꢀ–ꢀ
1.37 (m, 5h), 1.36
ꢀ–ꢀ
1.27 (m, 5h), 1.25
ꢀ–ꢀ
1.19 (m, 9h). lcms (esi) m/z: [m h]
=958.60。
[0616]
实施例2.本发明化合物对brm和brg1的降解本实施例证明本发明化合物在基于细胞的降解试验中降解hibit-brm或hibit-brg1融合蛋白的能力。
[0617]
步骤：产生了表达hibit-brm的稳定hela细胞系。在第0天，将5000个细胞接种在40
μl培养基中，进入384孔细胞培养板的每个孔中。在第1天，用120 nl dmso或120 nl经dmso3倍系列稀释的化合物(一式两份10个点，30μm作为最终最高剂量)处理细胞。随后将板在标准组织培养箱中培育24小时，并在室温下平衡15分钟。新鲜制备nano-glo hibit裂解检测系统(promega n3050)试剂，并向每个孔中加入20μl。在加入这种含lgbit的试剂后，hibit和lgbit蛋白结合形成发光nanobit荧光素酶。将板在室温下振荡10分钟，并使用envision读板仪(perkinelmer)读取生物发光。
[0618]
为了测量brg1降解，产生了表达hibit-brg1和lgbit的稳定hela细胞系。然后遵循与上述相同的方案。
[0619]
使用下式计算降解%：降解%= 100%-100%
×
(lum
样品-lum
lc
)/(lum
hc-lum
lc
)。dmso处理的细胞用作高对照(hc)，2μm的已知brm/brg1降解物标准处理的细胞用作低对照(lc)。将数据拟合为四个参数的非线性曲线拟合，以计算ic
50 (μm)值，如表19所示。
[0620]
结果：如下表25所示，本发明化合物降解brm和brg1。如表25中的结果所示，本公开的许多化合物表现出对于brm降解的＜1μm的ic
50
值，表明它们作为用于降低brm的水平和/或活性的化合物的用途和它们治疗brm相关病症的潜力。
[0621]
其它实施例本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请通过引用整体并入本文，其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请被具体地和单独地指示通过引用整体并入。当发现本技术中的术语在通过引用并入本文的文献中被不同地定义时，本文提供的定义将用作该术语的定义。
[0622]
虽然已经结合本发明的具体实施例描述了本发明，但是将对其进行描述应理解，本发明能够进一步改进，本技术意欲覆盖本发明的任何变化、用途或修改，其通常遵循本发明的原理，并包括在本发明所属领域的已知或常规实践范围内的本公开内容的偏离，并可应用于上文所述的基本特征，并遵循权利要求的范围。
[0623]
其它实施方案在权利要求中。