一种生物核酸检测用多段式溶剂反应管及其检测方法与流程

1.本发明涉及核酸检测装置技术领域，特别是涉及一种生物核酸检测用多段式溶剂反应管及其检测方法。


背景技术：

2.目前的核酸检测流程一般是前端工作人员采样，样品冷冻保存并冷链运输至后端检测处，后端专业操作人员进行检测。检测时存在开盖、移液、提取、扩增等操作步骤，这些步骤对环境要求高，为了避免扩增的pcr产物污染环境，造成假阳性的检测结果，往往需要在特定的隔离实验室内进行检测。现有的核酸后端检测步骤繁琐，且需要在特定的隔离实验室内进行检测，样品处理效率低，耗费时间久，容易出现检测误差。


技术实现要素：

3.本发明的目的在于提供一种生物核酸检测用多段式溶剂反应管，以解决上述背景技术中提出的问题。
4.本发明是通过以下技术方案实现的：一种生物核酸检测用多段式溶剂反应管，包括反应管本体，所述反应管本体包括：采样管，用于收集拭子头的样品，所述采样管的两端均设置有盖帽，其中，开口端设置的单向盖帽可拆卸，末端设置的盖帽为双向式盖帽；稀释管，用于稀释样本溶液，所述稀释管的顶部安装有顶环，所述稀释管的底部设置有穿过稀释管底面并延伸至加热管内的针体，针体中部设置有通孔，通孔的孔径为0.25mm；加热管，用于pcr扩增，所述加热管由内管一和内管二构成，所述内管一的管径小于所述内管二的管径，内管一内灌装有冻干微球和研磨球钢珠，内管二设置有2.5ml稀释液；推送管，所述推送管的底部设置有压环，所述压环上布设有滤膜，所述推送管内还设置有安装在所述压环上的试纸夹，试纸条安装于试纸夹上；所述采样管的底端、所述稀释管的两端、所述加热管的两端、内管一与内管二的连接面均设置有对应的溶液封口膜；所述采样管、所述稀释管、所述加热管和所述推送管为顺次连接。
5.优选的，稀释管顶部的外壁面设置有螺纹，稀释管底部的内壁面设置有螺纹，内管一的外壁面设置有螺纹组件，所述稀释管与所述采样管、所述稀释管与所述加热管均为螺纹连接。
6.作为本发明的进一步方案，所述内管二的壁面设置有凹槽，所述推送管的内壁面布设有筋条，筋条与凹槽一一对应并卡接。
7.作为本发明的进一步方案，所述顶环的上表面均匀布设有倒刺凸块，所述倒刺凸块设置于所述稀释管顶端的溶液封口膜的下方。
8.优选的，所述采样管底部的外周套设有硅胶垫片，所述硅胶垫片用于密封、防止连接的管体松动。
9.优选的，所述加热管的外周套设有用于密封的环形硅胶圈，所述环形硅胶圈分别位于内管一与稀释管的连接处、加热管与推进管的连接处。
10.本发明还提供了一种上述生物核酸检测用多段式溶剂反应管的检测方法，具体步骤如下：采样后的拭子头于采样管内挤压，与采样管内的生物试剂进行第一阶段的生物反应，掰断棉签棍并盖好盖帽，旋拧盖帽密封采样管，得到充分溶解的生物样品；采样管与稀释管组装后，沿螺纹顺时针旋拧稀释管，利用顶环顺次切割位于稀释管顶端、采样管底端的溶液封层膜，使得采样管与稀释管贯通，上下颠倒混匀，使得第一阶段的生物样品与稀释管内的生物试剂进行第二阶段生物反应，得到第二阶段的生物样品；逆时针旋拧稀释管至上限位置，稀释管内第二阶段的生物样品经针孔定量流入加热管内，通过内管一的固体制剂混匀，离心，42℃加热15min，进行第三阶段生物pcr反应，得到第三阶段的生物样品；加热结束后，顺时针旋拧稀释管至下限位置，针体旋转划破内管一与内管二连接面的溶液封口膜，上下颠倒混匀，使得第三阶段生物样本与内管二内的生物试剂进行第四阶段生物反应，最终得到第四阶段的生物样品；将反应管本体倒置，利用压环推动试纸夹，试纸夹顶破加热管末端的溶液封口膜，使得试纸夹上设置的试纸浸入第四阶段所得生物样品内，显色5min后，通过试纸显色情况得出检测结果。
11.作为本发明的进一步方案，所述内管二内设置有弹性限位块，用于避免试纸浸没过度。
12.优选的，试纸的浸没深度为3~4mm。
13.与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供的生物核酸检测用多段式溶剂反应管能够在普通环境下进行全程密闭操作，通过溶液封口膜实现隔断，提取、稀释、扩增、检测步骤均无暴露环节。本发明操作简单，采用先上后下的操作步骤，刺破溶液封口膜实现各管体对接，检测时能够精确取样，检测灵活性强，样品处理效率高，检测结果可靠。
附图说明
14.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
15.图1为本发明的整体装配示意图；图2为本发明的正向剖视图；图3为本发明的内部结构示意图；图4为本发明顶环的结构示意图；图5为本发明加热管的结构示意图；
图6为本发明推送管的结构示意图。
具体实施方式
16.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
17.实施例1：如图1-6所示，本实施例提供了一种生物核酸检测用多段式溶剂反应管，包括反应管本体，反应管本体包括：采样管1，采样管1内设置有400μl用于收集拭子头11样品的裂解液，采样管的两端均设置有盖帽12，其中，开口端设置的单向盖帽可拆卸，末端设置的盖帽为双向式盖帽；稀释管2，稀释管2内设置有用于3.6ml用于稀释样品溶液的稀释液，稀释管2的顶部安装有顶环21，稀释管2的底部设置有穿过稀释管2底面并延伸至加热管3内的针体22，针体22中部设置有通孔，通孔的孔径为0.25mm；加热管3，用于pcr扩增，加热管由内管一31和内管二32构成，内管一31的管径小于内管二32的管径，内管一31内灌装有冻干微球和研磨球钢珠，内管二32设置有2.5ml稀释液；推送管4，推送管4的底部设置有压环41，压环41上布设有滤膜42，推送管4内还设置有安装在压环41上的试纸夹43，试纸条安装于试纸夹43上；采样管1的底端、稀释管2的两端、加热管3的两端、内管一31与内管二32的连接面均设置有对应的溶液封口膜5；采样管1、稀释管2、加热管3和推送管4为顺次连接，其中，稀释管2与采样管1、稀释管2与加热管3均为螺纹连接，内管一31的外壁面设置有螺纹组件33，稀释管2顶部的外壁面设置有与采样管相适配的螺纹、稀释管2底部的内壁面设置有与螺纹组件33相适配的螺纹；加热管3和推送管4为卡接，内管二32的壁面设置有凹槽34，推送管4的内壁面布设有筋条44，筋条44与凹槽34一一对应并卡接。
18.本发明还提供了一种使用上述生物核酸检测用多段式溶剂反应管的检测方法，具体步骤如下：采样后的拭子头11于采样管1内挤压至少两次，拭子头11与采样管1内的裂解液进行第一阶段的生物反应，掰断棉签棍并盖好盖帽12，旋拧盖帽12密封采样管1，得到充分溶解的生物样品；采样管1与稀释管2组装后，沿螺纹顺时针旋拧稀释管2，利用顶环21顺次切割位于稀释管2顶端、采样管1底端的溶液封层膜5，使得采样管1与稀释管2贯通，上下颠倒混匀，使得第一阶段的生物样品与稀释管2内的稀释液以1：10的比例稀释，得到第二阶段的生物样品；逆时针旋拧稀释管2至上限位置，稀释管2内第二阶段的生物样品经针体22形成的通孔定量流入加热管3内，通过内管一31的固体制剂混匀，离心，42℃加热15min，进行第三
阶段生物pcr反应，由于针孔孔径为0.25mm，能够定量获取第三阶段的50μl生物样品；加热结束后，顺时针旋拧稀释管2至下限位置，针体22旋转划破内管一31与内管二32连接面的溶液封口膜5，上下颠倒混匀，使得第三阶段生物样本与内管二32内的稀释液以1：50的比例稀释，最终得到第四阶段的生物样品；将反应管本体倒置，利用压环41推动试纸夹43顶破加热管3末端的溶液封口膜5，使得试纸夹43上设置的试纸浸入第四阶段所得生物样品内，显色5min后，通过试纸显色情况得出检测结果。
19.内管二32内设置有弹性限位块35，用于避免试纸浸没过度，试纸浸没的适宜深度为3~4mm。
20.实施例2：如图1-6所示，本实施例提供了一种生物核酸检测用多段式溶剂反应管，本实施例与实施例1的不同之处在于，顶环21由多个同心环连接而成，位于顶环21内圈的同心环的上表面均匀布设有倒刺凸块23，倒刺凸块23设置于稀释管2顶端的溶液封口膜5下方，倒刺凸块23用于提高溶液封层膜5的顶破效率，使得采样管1与稀释管2贯通，其余均与实施例1相同。
21.实施例3：如图1-6所示，本实施例提供了一种生物核酸检测用多段式溶剂反应管，本实施例与实施例2的不同之处在于，采样管1底部的外周套设有硅胶垫片13，硅胶垫片13用于密封、防止连接的管体松动；加热管3的外周套设有用于密封的环形硅胶圈36，内管一31与稀释管2连接处设置的环形硅胶圈36设置有两层，且其外径为8mm，加热管3与推进管4连接处设置的环形硅胶圈36外径为15mm，其余步骤均与实施例2一致。
22.本发明提供的生物核酸检测用多段式溶剂反应管能够在普通环境下进行全程密闭操作，通过溶液封口膜实现隔断，提取、稀释、扩增、检测步骤均无暴露环节。本发明操作简单，采用先上后下的操作步骤，刺破溶液封口膜实现各管体对接，检测时能够精确取样，检测灵活性强，样品处理效率高，检测结果可靠。
23.以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。