经由环加成的双侧官能化抗体的制作方法

技术特征：
1.一种具有结构(1)的抗体-有效载荷缀合物：其中：-ab是抗体；-a、b、c和d各自独立地为0或1；-e是0至10范围内的整数；-l1、l2和l3是接头；-d是有效载荷；-bm是分支部分；-su是单糖；-g是单糖部分；-glcnac是n-乙酰葡糖胺部分；-fuc是岩藻糖部分；-z是连接基团。2.根据权利要求1所述的抗体-有效载荷缀合物，其中z可通过环加成或亲核反应获得，优选其中所述环加成是[4 2]环加成或1,3-偶极环加成，并且所述亲核反应是迈克尔加成或亲核取代。3.根据权利要求1或2所述的抗体-有效载荷缀合物，其中z包含三唑、环己烯、环己二烯、异噁唑啉、异噁唑烷、吡唑啉、哌嗪、硫醚、酰胺或酰亚胺基团。4.根据前述权利要求中任一项所述的抗体-有效载荷缀合物，其中l1、l2和l3中的每一个，如果存在的话，是至少2个，优选5至100个选自c、n、o、s和p的原子的链。5.根据前述权利要求中任一项所述的抗体-有效载荷缀合物，其中a和b是1，优选地其中l1和l2相同，更优选地其中su、z、g和e的每次出现也相同。6.根据前述权利要求中任一项所述的抗体-有效载荷缀合物，其中分支部分bm选自碳原子、氮原子、磷原子、(杂)芳环、(杂)环或多环部分。7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗体-有效载荷缀合物,其中l3是
–
(l4)
n
–
(l5)
o
–
(l6)
p
–
(l7)
q
–
，其中l4、l5、l6和l7是一起形成接头l3的接头；n、o、p和q各自为0或1，优选其中：(a)接头l4由
–
(w)
k1
–
(a)
d1
–
(b)
e1
–
(a)
f1
–
(b)
g1
–
c(o)
–
表示，其中：-d1＝0或1；-e1＝1-10范围内的整数；-f1＝0或1；
‑
g1＝0-10范围内的整数；-k1＝0或1，条件是如果k1＝1，则d1＝0；-a是根据结构(23)的磺酰胺基其中a1＝0或1，并且r
13
选自氢、c
1-c
24
烷基、c
3-c
24
环烷基、c
2-c
24
(杂)芳基、c
3-c
24
烷基(杂)芳基和c
3-c
24
(杂)芳基烷基，所述c
1-c
24
烷基、c
3-c
24
环烷基、c
2-c
24
(杂)芳基、c
3-c
24
烷基(杂)芳基和c
3-c
24
(杂)芳基烷基被一个或多个选自o、s和nr
14
的杂原子任选地取代和任选地中断，其中r
14
独立地选自氢和c
1-c4烷基，或r
13
是连接到n的d，可能经由间隔基部分；-b是
–
ch2–
ch2–
o
–
或
–
o
–
ch2–
ch2–
部分，或(b)
e1
是
–
(ch2–
ch2–
o)
e3
–
ch2–
ch2–
部分，其中e3以与e1相同的方式定义；-w是
–
oc(o)
–
、
–
c(o)o
–
、
–
c(o)nh
–
、
–
nhc(o)
–
、
–
oc(o)nh
–
、
–
nhc(o)o
–
、
–
c(o)(ch2)
m
c(o)
–
、
–
c(o)(ch2)
m
c(o)nh
–
或
–
(4-ph)ch2nhc(o)(ch2)
m
c(o)nh
–
，其中m是0至10范围内的整数；和/或(b)接头l5是肽间隔基，优选二肽，其中l5由通用结构(27)表示：其中，r
17
＝ch3或ch2ch2ch2nhc(o)nh2；和/或(c)接头l6是可自降解间隔基，优选根据结构(25)的对氨基苄氧基羰基(pabc)衍生物；其中r3是h、r4或c(o)r4，其中r4是c
1-c
24
(杂)烷基、c
3-c
10
(杂)环烷基、c
2-c
10
(杂)芳基、c
3-c
10
烷基(杂)芳基和c
3-c
10
(杂)芳基烷基，这些基团被选自o、s和nr5的一个或多个杂原子任选地取代和任选地中断，其中r5独立地选自氢和c
1-c4烷基，优选地其中r3是h或c(o)r4，其中r4＝4-甲基哌嗪或吗啉，最优选其中r3是h；和/或(d)接头l7是根据结构
–
n
–
(c
x-亚烷基)
–
c(o)
–
的氨基链烷酸间隔基，其中x是1-10范围内的整数；或接头l7是根据结构
–
n
–
(ch2–
ch2–
o)
e6
–
(ch2)
e7
–
(c(o)
–
的乙二醇间隔基，其中e6是1-10范
围内的整数且e7是1-3范围内的整数。8.根据前述权利要求中任一项所述的抗体-有效载荷缀合物，其中d细胞毒素，其选自pbd二聚体、吲哚并苯二氮卓二聚体(ign)、烯二炔、pnu159,682、多米卡星二聚体、鹅膏蕈碱和阿里他汀类，优选pbd二聚体、吲哚并苯二氮卓二聚体(ign)、烯二炔或pnu159,682。9.一种制备具有假定有效载荷抗体比为1的抗体-有效载荷缀合物的方法，其包括以下步骤：(a)使具有包含至少两个反应基团q的结构(2)的化合物与具有结构(3)的抗体反应，所述抗体用两个反应基团f对称地官能化：述抗体用两个反应基团f对称地官能化：其中：-ab是抗体；-a、b、c和d分别为0或1；-e是0至10范围内的整数；-l1、l2和l3是接头；-v是反应基团q'或有效载荷d；-bm是分支部分；-su是单糖；-g是单糖部分；-glcnac是n-乙酰葡糖胺部分；-fuc是岩藻糖部分；-q和f是能够进行缀合反应的反应基团，其中它们连接在连接基团z中；来获得根据结构(1)的官能化抗体：其中z是通过q与f的反应得到的连接基团；其中如果v是有效载荷d，根据结构(1)的官能化抗体是抗体-有效载荷缀合物；或者如果v是反应基团q'，根据结构(1)的官能化抗体根据步骤(b)进一步反应；
(b)如果v＝q'，使反应基团q'与含有反应基团f'的有效载荷反应以获得抗体-有效载荷缀合物，其中v是有效载荷d。10.根据权利要求9所述的方法，其中所述反应是环加成或亲核反应，优选地其中所述环加成是[4 2]环加成或1,3-偶极环加成，并且所述亲核反应是迈克尔加成或亲核取代。11.根据权利要求9或10所述的方法，其中q包含末端炔烃或环辛炔部分，优选双环壬炔(bcn)、氮杂二苯并环辛炔(dibac/dbco)、二苯并环辛炔(dibo)或磺酰化二苯并环辛炔(s-dibo)，更优选bcn或dibac/dbco，最优选bcn。12.根据权利要求9或10所述的方法，其中q包含马来酰亚胺部分、卤代乙酰胺部分、丙二烯酰胺部分、亚磷酰胺部分、氰基乙炔基部分、乙烯基砜、乙烯基吡啶部分或甲基磺酰基苯基噁二唑部分，最优选马来酰亚胺部分。13.根据权利要求9或10所述的方法，其中q包含结构(q41)-(q48)中的一种且f是硫醇基团：其中：-x7是cl、br、i、phs、mes；-r
24
是h或c
1-12
烷基，优选h或c
1-6
烷基；-其中(q45)和(q47)的苯环可以是杂芳环。14.根据权利要求9至13中任一项所述的方法，其中在步骤(a)中获得根据结构(1)的官能化抗体，其中d是有效载荷，并且不进行步骤(b)。15.根据权利要求9至13中任一项所述的方法，其中在步骤(a)中获得根据结构(1)的官能化抗体，其中d是反应基团q，并且进行步骤(b)。16.一种具有结构(2)的化合物：
其中：-a、b和c各自单独地为0或1；-l1、l2和l3是接头；-d是有效载荷；-bm是分支部分；-q包含环辛炔部分。17.根据权利要求16所述的化合物，其中q是双环壬炔(bcn)、氮杂二苯并环辛炔(dibac/dbco)、二苯并环辛炔(dibo)或磺酰化二苯并环辛炔(s-dibo)，更优选bcn或dibac/dbco，最优选bcn。18.根据权利要求16所述的化合物，其中q包含马来酰亚胺部分、卤代乙酰胺部分、丙二烯酰胺部分、亚磷酰胺部分、氰基乙炔基部分、乙烯基砜、乙烯基吡啶部分或甲基磺酰基苯基噁二唑部分，最优选马来酰亚胺部分。19.根据权利要求16至18中任一项所述的化合物，其中d是细胞毒素。20.根据权利要求16至19中任一项所述的化合物，其中l1和l2都存在且相同。21.根据权利要求16至20中任一项所述的化合物，其中a＝b＝c＝1。22.药物组合物，其包含根据权利要求1至8中任一项所述的抗体-有效载荷缀合物和药学上可接受的载体。23.根据权利要求1至8中任一项所述的抗体-有效载荷缀合物，其用于治疗有需要的受试者。24.根据权利要求1至8中任一项所述的抗体-有效载荷缀合物，其用于治疗癌症。25.根据权利要求23或24所述的用于所述用途的抗体-有效载荷缀合物，其中e＝0且所述缀合物不结合至fcγ受体cd16。

技术总结
本发明提供有效载荷与抗体比为1的抗体－有效载荷缀合物。抗体-有效载荷缀合物根据结构(1)：式(1)，其中：-a、b、c和d各自独立地为0或1；-e是0至10范围内的整数；-L1、L2和L3是接头；-D是有效载荷；-BM是分支部分；-Su是单糖；-G是单糖部分；-GlcNAc是N-乙酰葡糖胺部分；-Fuc是岩藻糖部分；-Z是连接基团。本发明还提供制备根据本发明的抗体-有效载荷缀合物的方法，该制备方法中的中间体化合物和根据本发明的抗体-有效载荷缀合物的医学用途。荷缀合物的医学用途。


技术研发人员：F
受保护的技术使用者：西纳福克斯股份有限公司
技术研发日：2021.01.13
技术公布日：2022/10/25