并环类己酮糖激酶抑制剂及其用途的制作方法

1.本发明涉及医药技术领域，具体涉及嘧啶衍生物类己酮糖激酶抑制剂化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，含有所述化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体的药物组合物及制剂，制备所述化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体的方法，以及所述化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体在制备治疗和/或预防由khk介导的疾病及相关疾病的药物中的用途。


背景技术：

2.nafld/nash是代谢综合征的肝脏表现。饮食以及生活方式的改变导致西方国家和许多亚洲国家肥胖和代谢综合征的流行，从而导致nafld的发病率显著增加，已成为颇受关注的公共健康问题之一。非酒精性脂肪肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,nash)是单纯性脂肪肝进一步发展的结果，其病理表现为脂质沉积、炎性细胞浸润、肝组织坏死和纤维化病变，进一步病变为更严重的肝硬化和肝细胞癌(hcc)。nafld不仅会影响患者的肝胆系统，还与胰岛素抵抗、血脂紊乱、动脉粥样硬化、脂肪栓塞、血液系统疾病等密切相关(friedman sl等，nat med,2018,24:908-22)。因为代谢综合症的所有组分均与肝脏脂肪含量有关，所以存在代谢综合征的患者应该评估nafld风险。2型糖尿病患者伴随胰岛素抵抗、肥胖、血脂异常、肝脏酶学异常，有2型糖尿病风险的人群nafld的流行亦较高。
3.由于饮料和加工食品中糖添加(通常是蔗糖和高果糖玉米糖浆)不断增加，导致现代人饮食中果糖的含量增加。高果糖摄入已被证明会引起许多不良代谢作用，它在肥胖和代谢综合征的发展中具有一定的作用，如体重增加，高脂血症，高血压和胰岛素抵抗((a)elliott ss,keim nl,stern js,teff k,havel pj.fructose,weight gain,and the insulin resistance syn-drome.(b)bray ga.soft drink consumption and obesity:it is all about fructose.current opinion in lipidology.2010；21(1):51
–
7.(c)the american journal of clinical nutrition.2002；76(5):911
–
22.and cardiovascular disease.the american journal of clinical nutrition.2007；86(4):899
–
906.)。果糖促进了nafld的发生、发展，加剧了nafld的发展和恶化(侍洪斌等，果糖与非酒精性脂肪肝的关联性研究，medical recapitulate 2017 23(9),1685-1689)。同时，高果糖摄入会增加nash和进展期肝纤维化的风险(《2016年欧洲肝病学会、欧洲糖尿病学会和欧洲肥胖学会临床实践指南:非酒精性脂肪性肝病》)。不同于葡萄糖，果糖的代谢不受负反馈调控。果糖相对于其他碳水化合物优先代谢，其代谢产生各种反应和信号代谢物，促进代谢疾病进展。在没有khk的情况下，果糖消耗引起的体重增加和胰岛素抵抗被阻断(george marek,1varinderpal pannu,1prashanth shanmugham,1brianna pancione,1dominic mascia,1sean crosson,1takuji ishimoto,2and yuri y.sautin1；adiponectin resistance and proinflammatory changes in the visceral adipose tissue induced by fructose consumption via ketohexokinase-dependent pathway；diabetes 2015；64:508
–
518)。降低糖/hfcs(高果糖玉米糖浆)的摄入量和/或阻断尿酸的产生，有助于减少nafld及其肝硬
化和慢性肝病的下游并发症(thomas jensen等，fructose and sugar:a major mediator of nonalcoholic fatty liver disease,j hepatol.2018may；68(5):1063
–
1075.)。同时，人类基因诱变导致基本的果糖糖尿症，是一种罕见的无害的异常，其特征在于在摄入含果糖的食物后尿液中出现果糖。t2d、肥胖及nafld/nash及诸如心血管疾病及脑卒中等相关代谢类疾病的高患病率已导致对预防性保健及治疗性干预两者的需求增大。
4.己酮糖激酶(又称果糖激酶)为果糖代谢的基本酶。肝脏中khk酶在atp(三磷酸腺苷)的协助下磷酸化果糖c1位，产生果糖-1-磷酸(f1p)，进入正常代谢路径；同时atp下游产生尿酸。两个替代性mrna剪切体表达的人源性己酮糖激酶(hkhk)编码两个不同区域异构体酶khk-a和khk-c。khk-c具有更低的km值，更高的kcat，高于405倍的催化效率，说明khk-c对果糖磷酸化的亲和力和能力明显比khk-a高。虽然khk-a表达广泛，khk-c分布于肝脏、肾脏、肠，但是khk-c是体内果糖的主要代谢位点。
5.在人体内，葡萄糖通过多元醇通路经过中间体山梨糖醇转化为果糖，产生内源性果糖(mingule a等，endogenous fructose production and metabolism in the liver contributes to the development of metabolic syndrome,nat commun.2013；4:2434.)，并且此通路的活性随高血糖症增加。研究表明敲除khk小鼠被保护免受葡萄糖诱导的体重增加、胰岛素抗性及脂肪变性，表明在高血糖病况下，内源性产生的果糖可促成胰岛素抗性及脂肪变性(lanaspa,m.a等人，nature comm.4,2434,2013)。果糖是唯一在其代谢过程中产生尿酸的常见碳水化合物，同时果糖还会刺激氨基酸前体合成尿酸。因此，推测抑制khk对其中涉及内源性或摄入果糖中的任一或两者的改变的许多疾病有益处。
6.肝果糖激酶缺乏症是果糖尿症的基础。与这种良性条件相反，醛缩酶b(果糖经khk代谢途径中的下一种酶)的缺乏导致f1p在果糖摄入中的累积，并且可能导致细胞atp的致死性消耗(遗传性果糖不耐受)。在果糖代谢路径中，紧接着khk步骤下游负责分解f1p的酶为醛缩酶(aldob)，该酶的缺失导致遗传性果糖不耐受症(hfi)。在20000人中约有1人患病的罕见病症，该突变导致f1p积累、atp损耗后尿酸形成增加，其组合造成低血糖症、高尿酸血症及乳酸性酸中毒，以及其他代谢紊乱。hfi阻断了果糖的下游代谢而导致急性症状，诸如呕吐、严重低血糖症、腹泻及腹痛，进而导致长期生长缺陷、肝及肾受损及潜在地死亡(ali m等人，j.med.genet.1998年5月：35(5)；353-365)。患者在诊断之前通常经历一年生存，且唯一治疗方式为避免饮食中的果糖。而体内葡萄糖经过多元醇通路转化为内源性果糖并在体内代谢，对这种治疗方式也是一种挑战。大部分食品中果糖的存在对饮食提出了挑战。除了物理症状，许多患者由于其不同寻常的饮食需面对情感及社会的孤立，同时需要严格遵守饮食限制(hfi-info discussion board,http；//hfiinfo.proboards.com.2015年12月14日访问)。此外，含有果糖、山梨糖醇或转化糖的输注还会危及患者生命。此病症有高度未满足的临床需求。


技术实现要素：

7.本发明的目的在于提供一种并环类己酮糖激酶抑制剂及其应用。具体技术方案如下：
8.本发明首先提供了通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体：
[0009][0010]
其中，
[0011]
x、y分别独立地选自n或cr1，其中r1选自氰基或c
1-6
烷基；
[0012]
环a选自任选被一个或多个q2取代的4-8元环烷基、4-8元杂环基、苯基或5-8元杂芳基；
[0013]
每一r2分别独立地选自氢、羟基、羟基c
1-6
烷基或c
1-6
烷基；
[0014]
r3选自任选被一个或多个q3取代的-(l1)
m-6-12元芳基或-(l1)
m-5-12元杂芳基；
[0015]
每一q2、q3分别独立地选自氘，卤素，硝基，氰基，-(l)
m-or6，-(l)
m-nr6r7，-(l)
m-c(o)or6，-(l)
m-conr6r7，-(l)
m-conhso2r6，-(l)
m-so2nhcor6，-(l)
m-sr6，-(l)
m-oc(o)r6，-(l)
m-oc(o)or6，-(l)
m-oc(o)nr6r7，-(l)
m-nr6c(o)r7，-(l)
m-nr6c(o)or7，-(l)
m-os(o)r6，-(l)
m-os(o)or6，-(l)
m-os(o)nr6r7，-(l)
m-s(o)nr6r7，-(l)
m-nr6s(o)r7，-(l)
m-os(o)2r6，-(l)
m-s(o)2nr6r7，-(l)
m-nr6s(o)2r7，-(l)
m-p(o)r6r7，-(l)
m-sor6，-(l)
m-so2r6，-(l)
m-sonr6r7，-(l)
m-c(o)nr6r7，卤代c
1-6
烷基，卤代c
1-6
烷氧基，任选被一个或多个取代基q1取代的-(l1)
m-c
1-6
烷基、-(l1)
m-3-10元环烷基、-(l1)
m-3-10元杂环基、-(l1)
m-6-10元芳基和-(l1)
m-5-10元杂芳基，每一q1分别独立地选自羧基、羟基、氰基、硝基、氨基、c
1-6
烷基、羟基c
1-6
烷基、羧基c
1-6
烷基、氨基c
1-6
烷基、c
1-6
烷基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基、-co-c
1-6
亚烷基-nh2、-co-c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷基或卤代c
1-6
烷氧基；
[0016]
每一l分别独立地选自-co-、c
1-6
亚烷基或卤代c
1-6
亚烷基；
[0017]
每一l1分别独立地选自-co-、-o-、-s-、-so-、-nr
6-或-cr4r
5-；
[0018]
每一r4、r5、r6、r7分别独立地选自氢、羟基、羧基、氰基、硝基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基、卤代c
1-6
烷基、羟基c
1-6
烷基、氨基c
1-6
烷基、羧基c
1-6
烷基或卤代c
1-6
烷氧基；
[0019]
每一m、n分别独立地为0-6的整数。
[0020]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
[0021]
x、y分别独立地选自n或cr1，其中r1选自氰基；
[0022]
环a选自任选被1-4个q2取代的5-6元环烷基、5-6元杂环基或5-6元杂芳基；
[0023]
每一r2分别独立地选自氢或c
1-6
烷基；
[0024]
r3选自任选被1-6个q3取代的苯基或5-6元杂芳基；
[0025]
每一q2、q3分别独立地选自氘，卤素，羧基，羟基，-(l)
m-p(o)r6r7，-(l)
m-sor6，-(l)
m-so2r6，-(l)
m-sonr6r7，-(l)
m-c(o)nr6r7，-(l)
m-nr6c(o)r7，-(l)
m-nr6s(o)2r7，-(l)
m-s(o)2nr6r7，c
1-6
烷基，c
1-6
烷氧基，c
1-6
烷基氨基，二(c
1-6
烷基)氨基，卤代c
1-6
烷基，卤代c
1-6
烷
氧基，羟基c
1-6
烷基，氨基c
1-6
烷基，羧基c
1-6
烷基，任选被1-6个取代基q1取代的-(l1)
m-c
1-6
烷基、-(l1)
m-3-8元环烷基或-(l1)
m-3-8元杂环基，每一q1分别独立地选自羧基、羟基、氰基、硝基、氨基、c
1-6
烷基、羟基c
1-6
烷基、羧基c
1-6
烷基、c
1-6
烷基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基、-co-c
1-6
亚烷基-nh2、-co-c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷氧基；
[0026]
每一l分别独立地选自-co-或c
1-6
亚烷基；
[0027]
每一l1分别独立地选自-co-、-o-、-nr
6-或-cr4r
5-；
[0028]
每一r4、r5、r6、r7分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基、卤代c
1-6
烷基、羟基c
1-6
烷基、氨基c
1-6
烷基、羧基c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷氧基；
[0029]
每一m、n分别独立地为0-5的整数。
[0030]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
[0031]
x、y分别独立地选自n；
[0032]
环a选自任选被1-4个q2取代的5-6元环烷基；优选为任选被1-4个q2取代的基团其中q为0-4的整数，优选为1；
[0033]
每一r2分别独立地选自c
1-4
烷基；
[0034]
r3选自任选被1-4个q3取代的5-6元杂芳基，例如任选被1-4个q3取代的5-6元含氮杂芳基；
[0035]
每一q2、q3分别独立地选自氘，卤素，羧基，羟基，c
1-4
烷基，c
1-4
烷氧基，c
1-4
烷基氨基，二(c
1-4
烷基)氨基，卤代c
1-4
烷基，卤代c
1-4
烷氧基，羟基c
1-4
烷基，氨基c
1-4
烷基，羧基c
1-4
烷基，c
1-4
烷基氨酰基，c
1-4
烷基酰氨基，c
1-4
烷基磺酰氨基，c
1-4
烷基氨基磺酰基，任选被1-4个取代基q1取代的-(l1)
m-c
1-4
烷基、-(l1)
m-3-6元环烷基或-(l1)
m-3-6元杂环基，每一q1分别独立地选自羧基、羟基、氰基、硝基、氨基、c
1-4
烷基、羟基c
1-4
烷基、羧基c
1-4
烷基、c
1-4
烷基氨基、二(c
1-4
烷基)氨基、-co-c
1-4
亚烷基-nh2、-co-c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤代c
1-4
烷基和卤代c
1-4
烷氧基；
[0036]
每一l1分别独立地选自-co-或-cr4r
5-；
[0037]
每一r4、r5分别独立地选自氢、c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
烷基氨基、二(c
1-4
烷基)氨基、卤代c
1-4
烷基、羟基c
1-4
烷基、氨基c
1-4
烷基、羧基c
1-4
烷基和卤代c
1-4
烷氧基；
[0038]
每一m、n分别独立地为0-3的整数。
[0039]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
[0040]
环a选自任选被1-3个q2取代的5-6元环烷基；
[0041]
每一r2分别独立地选自甲基或乙基，例如选自r-甲基、s-甲基，优选2(r)-甲基或2(s)-甲基；
[0042]
r3选自任选被1-3个q3取代的呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或哒嗪基；
ch2c(o)-哌啶基、哌嗪基、-ch2c(o)-哌嗪基，每一q1分别独立地选自羧基、羟基、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、羟基甲基、羟基乙基、羧基甲基、羧基乙基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、-co-ch
2-nh2、-coch3、甲氧基、乙氧基、三氟甲基和三氟甲氧基。
[0058]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，每一q2分别独立地选自卤素，优选氟或氯。
[0059]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
[0060]
环a选自任选被1-2个q2取代的5元环烷基；
[0061]
每一q2分别独立地选自卤素，优选氟或氯。
[0062]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
[0063]
r3选自任选被1-2个q3取代的5元杂芳基；
[0064]
每一q3分别独立地选自c
1-4
烷基，c
1-4
烷氧基，羟基c
1-4
烷基，氨基c
1-4
烷基，羧基c
1-4
烷基，被1-3个羟基取代的c
1-4
烷基，任选被1-3个取代基q1取代的氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、-ch2c(o)-哌啶基、哌嗪基、-ch2c(o)-哌嗪基，每一q1分别独立地选自羧基、羟基、c
1-4
烷基、羟基c
1-4
烷基、羧基c
1-4
烷基、c
1-4
烷基氨基、二(c
1-4
烷基)氨基、-co-c
1-4
亚烷基-nh2、-co-c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤代c
1-4
烷基和卤代c
1-4
烷氧基。
[0065]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
[0066]
r3选自任选被1-2个q3取代的呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、吡唑基；
[0067]
每一q3分别独立地选自甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，羟基甲基，羟基乙基，羟基丙基，羟基丁基，氨基甲基，羧基甲基，羧基乙基，-ch
2-ch(oh)-ch2oh，任选被1-3个取代基q1取代的氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、-ch2c(o)-哌啶基、哌嗪基、-ch2c(o)-哌嗪基，每一q1分别独立地选自羧基、羟基、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、羟基甲基、羟基乙基、羧基甲基、羧基乙基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、-co-ch
2-nh2、-coch3、甲氧基、乙氧基、三氟甲基和三氟甲氧基。
[0068]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
[0069]
r3选自任选被1-2个q3取代的吡咯基、咪唑基、吡唑基；
[0070]
每一q3分别独立地选自甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，羟基甲基，羟基乙基，羟基丙基，羟基丁基，氨基甲基，羧基甲基，羧基乙基，-ch
2-ch(oh)-ch2oh，任选被1-3个取代基q1取代的氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、-ch2c(o)-哌啶基、哌嗪基、-ch2c(o)-哌嗪基，每一q1分别独立地选自羧基、羟基、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、羟基甲基、羟基乙基、羧基甲基、羧基乙基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、-co-ch
2-nh2、-coch3、甲氧基、乙氧基、三氟甲基和三氟甲氧基。
[0071]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
[0072]
r3选自任选被1-2个q3取代的下述基团：
[0073][0074]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其具有通式(ii)所示的结构：
[0075][0076]
其中，x、y、q1、q2、q3、r1、r2、r4、r5、r6、r7、l、l1、m、n的定义如上述任一方案所述，p、s、t各自独立地选自0-4的整数。
[0077]
在某些实施方案，前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其具有通式(iii)所示的结构：
[0078][0079]
其中，q3、q1、r4、r5、r6、r7、l、l1、m的定义如上述任一方案所述，s选自0-4的整数。
[0080]
本发明所述的任一实施方式中的任一取代基的选择可以相互组合，其组合后的技术方案仍包含在本发明的保护范围之内。
[0081]
本发明的一些实施方式中，前述通式(i)所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体的结构见表1：
[0082]
表1
[0083]
[0084]
[0085][0086]
本发明所述的“药学上可接受的盐”是指可药用的酸和碱的加成盐。
[0087]
本发明所述的“酯”是指药学上可接受的酯，尤其指如下酯，其在活体内水解且包括容易在人体内分解留下母体化合物(通式(i)所述的化合物)或其盐的酯。本发明的一些实施方式中，其中药学上可接受的酯，包括：衍生自药学上可接受的脂族羧酸及磷酸。
[0088]
本发明通式(i)所示的化合物的“立体异构体”是指当式(i)所示的化合物存在不对称碳原子时，会产生对映异构体；当化合物存在碳碳双键或环状结构时，会产生顺反异构体；当化合物存在酮或肟时，会产生互变异构体，本发明的一些实施方式中，立体异构体包括但不限于：对映异构体、非对映异构体、消旋异构体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物。
[0089]
本发明还提供了一种药物组合物，其含有前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，及一种或多种第二治疗活性剂，任选地，所述药物组合物还包含一种或多种药用载体和/或稀释剂。
[0090]
本发明还提供了一种药物制剂，其含有前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，及一种或多种药用载体和/或稀释剂；所述药物制剂为临床上或药学上可接受的任一剂型。
[0091]
在本发明的一些实施方式中，上述药物制剂可以以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要这种治疗的患者或受试者。用于口服给药时，所述药物组合物可制成口服制剂，例如可以制成常规的口服固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，上述药物制剂也可制成注射剂，包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配置注射剂时，可以不加入附加剂，也可以根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，所述药物组合物可制成栓剂等。用于经肺给药时，所述药物组合物可制成吸入剂或喷雾剂等。
[0092]
本发明的药物组合物或药物制剂中可用的药用载体和/或稀释剂可以是药物制剂领域中任何常规的载体和/或稀释剂，特定载体和/或稀释剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，药用载体和/或稀释剂可以包括药学领域常规的溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂、和抗氧化剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。
[0093]
本发明还提供了前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体、前述的药物制剂或前述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防khk介导的疾病及相关疾病的药物中的用途；所述khk介导的疾病及相关疾病选自内分泌失调病、泌尿类疾病、代谢类疾病、非酒精性脂肪肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝炎、肝脏衰竭、遗传性果糖不耐受症、非酒精性脂肪肝病、肝胆类疾病、纤维化疾病、心脑血管类疾病、免疫炎症类疾病、中枢神经类疾病、胃肠道类疾病、过度增殖性疾病诸如癌症等。
[0094]
本发明还提供了前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体、前述的药物制剂或前述的药物组合物在治疗/或预防khk介导的疾病及相关疾病中的应用；所述khk介导的疾病及相关疾病选自内分泌失调病、泌尿类疾病、代谢类疾病、非酒精性脂肪肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝炎、肝脏衰竭、遗传性果糖不耐受症、非酒精性脂肪肝病、肝胆类疾病、纤维化疾病、心脑血管类疾病、免疫炎症类疾病、中枢神经类疾病、胃肠道类疾病、过度增殖性疾病诸如癌症等。
[0095]
本发明还提供了一种治疗疾病的方法，该方法包括向有需要的患者给药治疗有效量的前述通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体、前述的药物制剂或前述的药物组合物，其中，所述疾病为khk介导的疾病及相关疾病；所述khk介导的疾病及相关疾病选自内分泌失调病、泌尿类疾病、代谢类疾病、非酒精性脂肪肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝炎、肝脏衰竭、遗传性果糖不耐受症、非酒精性脂肪肝病、肝胆类疾病、纤维化疾病、心脑血管类疾病、免疫炎症类疾病、中枢神经类疾病、胃肠道类疾病、过度增殖性疾病诸如癌症等。
[0096]
在本技术的说明书和权利要求书中，化合物都是依据化学结构式而命名，如果表示同一化合物时化合物的命名和化学结构式不符，以化学结构式为准。
[0097]
在本技术中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员通常理解的含义，然而为了更好地理解本发明，下面提供了部分术语的定义。当本技术所提供的术语的定义和解释与本领域技术人员所通常理解的含义不符的时候，以本技术所提供的术语的定义和解释为准。
[0098]
本发明所述的“卤素”是指氟、氯、溴和碘，优选氟和氯。
[0099]
本发明所述的“卤代”是指取代基中的任一氢可被一个或多个相同或不同的卤素取代。“卤素”如前文所定义。
[0100]
本发明所述的“c
1-6
烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，包括例如“c
1-5
烷基”、“c
1-4
烷基”、“c
1-3
烷基”、“c
1-2
烷基”、“c
2-6
烷基”、“c
2-5
烷基”、“c
2-4
烷基”、“c
2-3
烷基”、“c
3-6
烷基”、“c
3-5
烷基”、“c
3-4
烷基”、“c
4-6
烷基”、“c
4-5
烷基”、“c
5-6
烷基”等，具体实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。本发明所述的“c
1-4
烷基”指c
1-6
烷基中的含有1-4个碳原子的具体实例。
[0101]
本发明所述的“c
1-6
亚烷基”指上述所述c
1-6
烷基去除一个氢原子形成的基团，包括例如“c
1-5
亚烷基”、“c
1-4
亚烷基”、“c
1-3
亚烷基”、“c
1-2
亚烷基”、“c
2-6
亚烷基”、“c
2-5
亚烷基”、“c
2-4
亚烷基”、“c
2-3
亚烷基”、“c
3-6
亚烷基”、“c
3-5
亚烷基”、“c
3-4
亚烷基”、“c
4-6
亚烷基”、“c
4-5
亚烷基”、“c
5-6
亚烷基”等，具体实例包括但不限于：亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基等。本发明所述的“c
1-4
亚烷基”指c
1-6
亚烷基中的含有1-4个碳原子的具体实例。
[0102]
本文所述的“c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基、c
1-6
烷基氨酰基，c
1-6
烷基酰氨基，c
1-6
烷基磺酰氨基”是指以c
1-6
烷基-o-、c
1-6
烷基-nh-、(c
1-6
烷基)
2-n-、c
1-6
烷基-nh-c(o)-、c
1-6
烷基-c(o)-nh-、c
1-6
烷基-s(o)
2-nh-方式形成的基团，其中“c
1-6
烷基”的定义如前文所述。
[0103]
本文所述的“c
1-4
烷氧基、c
1-4
烷基氨基、二(c
1-4
烷基)氨基、c
1-4
烷基氨酰基，c
1-4
烷基酰氨基，c
1-4
烷基磺酰氨基”是指以c
1-4
烷基-o-、c
1-4
烷基-nh-、(c
1-4
烷基)
2-n-、c
1-4
烷基-nh-c(o)-、c
1-4
烷基-c(o)-nh-、c
1-4
烷基-s(o)
2-nh-方式形成的基团，其中“c
1-4
烷基”的定义如前文所述。
[0104]
本文所述的“卤代c
1-6
烷基、羟基c
1-6
烷基、氨基c
1-6
烷基、羧基c
1-6
烷基、卤代c
1-6
亚烷基、卤代c
1-6
烷氧基”是指一至多个(例如1-4个、1-3个、1-2个)卤素原子、羟基、氨基、羧基分别取代c
1-6
烷基、c
1-6
亚烷基、c
1-6
烷氧基中的氢原子所形成的基团。
[0105]
本文所述的“卤代c
1-4
烷基、羟基c
1-4
烷基、氨基c
1-4
烷基、羧基c
1-4
烷基、卤代c
1-4
亚烷基、卤代c
1-4
烷氧基”是指一至多个(例如1-4个、1-3个、1-2个)卤素原子、羟基、氨基分别取代c
1-4
烷基、c
1-4
亚烷基、c
1-4
烷氧基中的氢原子所形成的基团。
[0106]
本发明所述的“3-10元环烷基”是指含有3-10个碳原子的饱和或部分饱和的且不具有芳香性的环状烷基，包括“单环烷基”和“稠环烷基”。
[0107]
本发明所述的“单环烷基”是指饱和或部分饱和的且不具有芳香性的单环环状烷基，包括“3-8元饱和环烷基”和“3-8元部分饱和环烷基”；优选“3-4元环烷基”、“3-5元环烷基”、“3-6元环烷基”、“3-7元环烷基”、“4-5元环烷基”、“4-6元环烷基”、“4-7元环烷基”、“4-8元环烷基”、“5-6元环烷基”、“5-7元环烷基”、“5-8元环烷基”、“6-7元环烷基”、“6-8元环烷基”、“7-8元环烷基”、“3-6元饱和环烷基”、“4-7元饱和环烷基”、“4-8元饱和环烷基”、“5-8元饱和环烷基”、“5-7元饱和环烷基”、“5-6元饱和环烷基”、“3-6元部分饱和环烷基”、“4-7元部分饱和环烷基”、“4-8元部分饱和环烷基”、“5-8元部分饱和环烷基”、“5-7元部分饱和环烷基”、“5-6元部分饱和环烷基”等。所述的“3-8元饱和环烷基”的具体实例包括但不限于：环丙烷基(环丙基)、环丁烷基(环丁基)、环戊烷基(环戊基)、环己烷基(环己基)、环庚烷基(环庚基)、环辛烷基(环辛基)等；所述的“3-8元部分饱和环烷基”的具体实例包括但不限于环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己-1,3-二烯、环己-1,4-二烯、环庚烯基、环庚-1,3-二烯基、环庚-1,4-二烯基、环庚-1,3,5-三烯基，环辛烯基、环辛-1,3-二烯基、环辛-1,4-二烯基、环辛-1,5-二烯基、环辛-1,3,5-三烯基、环辛四烯基等。
[0108]
本发明所述的“稠环烷基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的碳原子所形成的饱和或部分饱和的、非芳香性环状基团，所述的稠环中的一个环可以为芳香性环，但稠环整体不具备芳香性；其稠和方式可以为：5-6元环烷基并5-6元环烷基、苯并5-6元环烷基、苯并5-6元饱和环烷基等。其实例包括但不限于：二环[3.1.0]己烷基、二环[4.1.0]庚烷基、二环[2.2.0]己烷基、二环[3.2.0]庚烷基、二环[4.2.0]辛烷基、八氢并环戊二烯基、八氢-1h-茚基、十氢化萘基、十四氢菲基、双环[3.1.0]己-2-烯基、双环[4.1.0]庚-3-烯基、双环[3.2.0]庚-3-烯基、双环[4.2.0]辛-3-烯基、1,2,3,3a-四氢并环戊二烯基、2,3,3a,4,7,7a-六氢-1h-茚基、1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氢化萘基、1,2,4a,5,6,8a-六氢
化萘基、1,2,3,4,5,6,7,8,9,10-十氢菲基、苯并环戊基、苯并环己基、苯并环己烯基、苯并环戊烯基等。
[0109]
本发明所述的“3-10元杂环基”是指至少含有一个杂原子(例如，含有1个、2个、3个、4个或5个)的且环原子数为3-10个的饱和或部分饱和的且不具有芳香性的单环或稠环环状基团，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。本发明所述的“3-10元杂环基”包括“3-10元饱和杂环基”和“3-10元部分饱和杂环基”。优选地，本发明所述的“3-10元杂环基”含有1-3个杂原子；优选地，本发明所述的“3-10元杂环基”含有1-2个杂原子，且所述的杂原子选自氮原子和/或氧原子；优选地，本发明所述的“3-10元杂环基”含有1-2个氮原子。所述“3-10元杂环基”优选“3-9元杂环基”、“3-8元杂环基”、“4-8元杂环基”、“3-6元杂环基”、“3-6元饱和杂环基”、“3-6元含氮杂环基”、“3-6元饱和含氮杂环基”、“5-6元杂环基”、“5-6元饱和杂环基”等。“3-10元杂环基”的具体实例包括但不仅限于：吡咯烷基并环丙基、环戊基并氮杂环丙基、吡咯烷基并环丁基、吡咯烷基并吡咯烷基、吡咯烷基并哌啶基、吡咯烷基并哌嗪基、吡咯烷基并吗啉基、哌啶基并吗啉基、苯并吡咯烷基、苯并环戊基、苯并环己基、苯并四氢呋喃基、苯并吡咯烷基、苯并咪唑烷基、苯并噁唑烷基、苯并噻唑烷基、苯并异噁唑烷基、苯并异噻唑烷基、苯并哌啶基、苯并吗啉基、苯并哌嗪基、苯并四氢吡喃基、吡啶并环戊基、吡啶并环己基、吡啶并四氢呋喃基、吡啶并吡咯烷基、吡啶并咪唑烷基、吡啶并噁唑烷基、吡啶并噻唑烷基、吡啶并异噁唑烷基、吡啶并异噻唑烷基、吡啶并哌啶基、吡啶并吗啉基、吡啶并哌嗪基、吡啶并四氢吡喃基、嘧啶并环戊基、嘧啶并环己基、嘧啶并四氢呋喃基、嘧啶并吡咯烷基、嘧啶并咪唑烷基、嘧啶并噁唑烷基、嘧啶并噻唑烷基、嘧啶并异噁唑烷基、嘧啶并异噻唑烷基、嘧啶并哌啶基、嘧啶并吗啉基、嘧啶并哌嗪基、嘧啶并四氢吡喃基；四氢咪唑并[4,5-c]吡啶基、3,4-二氢喹唑啉基、1,2-二氢喹喔啉基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、2h-色原烯基、2h-色原烯-2-酮基、4h-色烯基、4h-色烯-4-酮基、4h-1,3-苯并噁嗪基、4,6-二氢-1h-呋喃并[3,4-d]咪唑基、3a,4,6,6a-四氢-1h-呋喃并[3,4-d]咪唑基、4,6-二氢-1h-噻吩并[3,4-d]咪唑基、4,6-二氢-1h-吡咯并[3,4-d]咪唑基、八氢-苯并[d]咪唑基、十氢喹啉基、六氢噻吩并咪唑基、六氢呋喃并咪唑基、4,5,6,7-四氢-1h-苯并[d]咪唑基、八氢环戊烯并[c]吡咯基、4h-1,3-苯并噁嗪基等。
[0110]
本发明所述的“6-10元芳基”是指含有6-10个环碳原子的具有芳香性的环状基团，包括“6-8元单环芳基”和“8-10元稠环芳基”。
[0111]
本发明所述的“6-8元单环芳基”是指含有6-8个环碳原子的单环芳基，其实例包括但不限于：苯基、环辛四烯基等；优选苯基。
[0112]
本发明所述的“8-10元稠环芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-10个环碳原子的、不饱和的、具有芳香性的环状基团，优选“9-10元稠环芳基”，具体实例如萘基等。
[0113]
本发明所述的“5-10元杂芳基”是指含有5-10个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的环状基团，例如可以是5-10元含氮杂芳基、5-10元含氧杂芳基、5-10元含硫杂芳基等。包括“5-8元单杂芳基”和“8-10元稠杂芳基”。
[0114]
本发明所述的“5-8元单杂芳基”是指含有5-8个环原子(其中至少一个环原子为杂
原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的单环环状基团。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。“5-8元单杂芳基”包括例如“5-7元单杂芳基”、“5-6元单杂芳基”、“5-6元含氮单杂芳基”、“5元含氮单杂芳基”等。“5-8元单环杂芳基”的具体实例包括但不仅限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基、氮杂环庚三烯基、1,3-二氮杂环庚三烯基、氮杂环辛四烯基等。所述“5-6元杂芳基”是指5-8元杂芳基中含有5-6个环原子的具体实例。
[0115]
本发明所述的“8-10元稠杂芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-10个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的、不饱和的具有芳香性的环状结构。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。包括“9-10元稠杂芳基”，“8-9元稠杂芳基”等，其稠和方式可以为苯并5-6元杂芳基、5-6元杂芳基并5-6元杂芳基等；具体实例包括但不限于：吡咯并吡咯、吡咯并呋喃、吡唑并吡咯、吡唑并噻吩、呋喃并噻吩、吡唑并噁唑、苯并呋喃基、苯并异呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、喹啉基、2-喹啉酮基、4-喹啉酮基、1-异喹啉酮基、异喹啉基、吖啶基、菲啶基、苯并哒嗪基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、嘌呤基、萘啶基等。
[0116]
本发明所述的“任选被
…
取代”包括“被取代”和“未被取代”两种情形。
[0117]
本发明所述的“治疗有效量”是指当给药到患者时至少能够减轻患者病症的症状的前述化合物、药物制剂、药物组合物的量。包含“治疗有效量”的实际量会根据多种情况而变化，多种情况包括但不限于所治疗的特定病症、病症的严重程度、患者的体格和健康状况以及给药途径。熟练的医疗从业者可容易地使用医疗领域中已知的方法确定合适的量。
[0118]
发明的有益效果
[0119]
(1)本发明化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体具有优异的khk抑制活性，能够治疗和/或预防khk介导的疾病及相关疾病；
[0120]
(2)本发明化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体具有良好的药代动力学性质，作用更持久，生物利用度高；
[0121]
(3)本发明化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体具有良好的安全性；
[0122]
(4)本发明化合物制备工艺简单，药品纯度高，质量稳定，易于进行大规模工业生产。
[0123]
以下通过实验进一步阐述本发明实施例提供的化合物的有益效果，但不应将此理解为本发明实施例提供的化合物仅具有下列有益效果。
[0124]
实验例1本发明化合物的体外khk激酶抑制活性实验
[0125]
供试品：本发明表1所示化合物，其化学名称和制备方法参见制备实施例。
[0126]
对照药：pf-06835919，参考文献(us15/381,295)中的方法制备。
[0127]
实验试剂：
[0128][0129]
实验耗材：
[0130][0131]
实验仪器：
[0132][0133]
实验方法：
[0134]
1、化合物稀释
[0135]
1)使用dmso配制本发明化合物及阳性对照药至10mm，作为试验储备液。
[0136]
2)将本发明化合物及阳性对照药储备液10倍稀释至1mm，然后，3倍梯度稀释本发明化合物至11个浓度，最高浓度为1mm。
[0137]
3)使用echo550分别转移0.1μl稀释后的本发明化合物及阳性对照药至384孔板，每个浓度设定2个复孔，1000rpm离心1min。
[0138]
2、酶反应实验
[0139]
1)加入5μl khk-c激酶工作液至384孔板，1000rpm离心1min，然后，室温25℃孵育15min。
[0140]
2)加入5μl底物工作液至384孔板，启动激酶反应，1000rpm离心1min，室温25℃孵育60min。
[0141]
3)khk-c激酶反应终浓度为1nm khk-c，100μm atp，200μm d-fructose，hepes 50mm，mgcl
2 10mm，brij35 0.01％，dmso终浓度为1％。
[0142]
4)测试化合物及阳性对照药终浓度为10000nm、3333.33nm、1111.11nm、370.37nm、123.457nm、41.15nm、13.71nm、4.572nm、1.524nm、0.508nm、0.169nm。
[0143]
3、反应终止及检测
[0144]
1)加入10μl adp glo试剂，1000rpm离心1min，室温25℃孵育40min。
[0145]
2)加入20μl激酶检测试剂，1000rpm离心1min，室温25℃孵育40min.
[0146]
3)反应结束后，在envision上读取荧光值lum。
[0147]
4、数据分析
[0148]
使用如下公式计算抑制率inhibition(％inh)：
[0149][0150]
其中，lum
hc
表示：high control(反应体系含有和化合物检测相同体积的dmso)的发光信号强度；
[0151]
lum
lc
表示：low control(阳性对照化合物1μm)的发光信号强度；
[0152]
lum
cpd
表示：表示供试品化合物的发光信号强度；
[0153]
采用graphpad prism 5.0软件进行曲线拟合，计算得出ic
50
。
[0154]
实验结果：
[0155]
表2本发明制备的化合物对khk-c抑制活性
[0156][0157]
实验结果：
[0158]
从上述实验结果可以看出，本发明制备的化合物，其能够有效抑制khk-c激酶活性，是有效的khk-c激酶抑制剂。
具体实施方式
[0159]
下面将结合具体实施例对本发明的技术方案进行描述，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0160]
下述实验中所用缩写代表的含义如下：
[0161]
pe：石油醚；ea：乙酸乙酯；thf：四氢呋喃；dcm：二氯甲烷。
[0162]
实施例1(s)-7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-4-(1h-吡唑-4-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶的制备(化合物1)
[0163]
(1)2-氯-7,7-二氟-4-(1h-吡唑-4-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶的制备
2-基)-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(500mg,1.4mmol)，pd(dppf)cl2(158mg,0.21mmol)和碳酸钾(416mg,3mmol)，氮气氛围下将混合物置于25℃下搅拌16h，减压浓缩，所得混合物经硅胶柱层析(ea/pe＝20％-50％)，得目标化合物(280mg,47％)。
[0175]
(2)(s)-3-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的制备
[0176][0177]
室温下，3-(4-(2-氯-7,7-二氟-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(280mg,0.68mmol)的乙腈(25ml)溶液中，加入碳酸铯(663mg,2mmol)和(s)-2-甲基氮杂环丁烷盐酸盐(147mg,1.4mmol)，将混合物置于80℃反应1小时。减压浓缩，所得混合物经硅胶柱层析(ea/pe＝0-45％)，得目标化合物(260mg,86％)。
[0178]
(3)(s)-4-(1-(氮杂环丁烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶的制备
[0179][0180]
室温下，(s)-3-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(260mg,0.58mmol)，溶于二氯甲烷(15ml)，后加入三氟乙酸(3ml)，将混合物置于10℃反应40分钟。体系加入饱和碳酸钠溶液调节ph＝8，用二氯甲烷(30ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得混合物经硅胶柱层析(dcm:meoh＝10：1)，得目标化合物(120mg,60％)。
[0181]
分子式:c
17h20
f2n6分子量:346.4lc-ms(m/e):347.17(m h

)
[0182]1h-nmr(400mhz,meod)δ:8.36(s,1h),8.20(s,1h),5.42-5.31(m,1h),4.68-4.51(m,1h),4.28-3.95(m,6h),3.10-3.02(m,2h),2.71-2.45(m,3h),2.10-2.01(m,1h),1.58(d,j＝4.0hz,3h).
[0183]
实施例3(s)-7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-4-(1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-6,7-二氢-5h-环戊基[d]嘧啶的制备(化合物3)
[0184][0185]
室温下，(s)-4-(1-(氮杂环丁烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶(30mg,0.087mmol)，溶于甲醇(6ml)，加入37％
甲醛水溶液(1ml)，冰乙酸(0.1ml)，将混合物置于20℃反应30分钟。加入三乙酰氧基硼氢化钠(300mg,1.4mmol)，20℃反应2小时。减压浓缩，所得混合物经硅胶柱层析(dcm:meoh＝10：1)，得目标化合物(12mg,39％)。
[0186]
分子式:c
18h22
f2n6分子量:360.4lc-ms(m/e):361.17(m h

)
[0187]1h-nmr(400mhz,meod)δ:8.36(s,1h),8.20(s,1h),5.42-5.31(m,1h),4.68-4.51(m,1h),4.28-3.95(m,6h),3.10-3.02(m,2h),2.71-2.45(m,6h),2.10-2.01(m,1h),1.58(d,j＝4.0hz,3h).
[0188]
实施例4(s)-7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-4-(1-(哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶的制备(化合物4)
[0189]
(1)4-(4-(2-氯-7,7-二氟-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)哌啶-1-基甲酸叔丁酯的制备
[0190][0191]
室温下，于2,4-二氯-7,7-二氟-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶(500mg,2.2mmol)的1,4-二氧六环(20ml)溶液和水(2ml)中，加入4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1h-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g,2.9mmol)，四(三苯基膦)钯(127.1mg,0.11mmol)和碳酸钠(816.2mg,7.7mmol)，氮气氛围下将混合物置于80℃下搅拌16h，体系加入水淬灭，用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得混合物经硅胶柱层析(pe:ea＝3：2)，得目标化合物(430mg,44.5％)。
[0192]
(2)(s)-4-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
[0193][0194]
室温下，4-(4-(2-氯-7,7-二氟-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(530mg,1.2mmol)的乙腈(15ml)溶液中，加入碳酸铯(1.2g,3.7mmol)和(s)-2-甲基氮杂环丁烷盐酸盐(258.2mg,2.4mmol)，将混合物置于80℃反应1小时。体系加水淬灭，用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得混合物经硅胶柱层析(pe:ea＝2：1)，得目标化合物(450mg,79.1％)。
[0195]
(3)(s)-7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-4-(1-(哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶的制备
[0196][0197]
室温下，(s)-4-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(440mg,0.93mmol)，溶于二氯甲烷(20ml)，加入三氟乙酸(4ml)，将混合物置于10℃反应40分钟。体系加入饱和碳酸钠溶液调节ph至碱性，用二氯甲烷(30ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得混合物经硅胶柱层析(dcm:meoh＝10：1)，得目标化合物(200mg,57.6％)。
[0198]
分子式:c
19h24
f2n6分子量:374.44lc-ms(m/e):375.44(m h

)
[0199]1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.06(s,1h),8.01(s,1h),4.58-4.56(m,1h),4.31-4.30(m,1h),4.28-4.17(m,1h),4.16-4.06(m,1h),3.32-3.29(m,2h),3.03-2.99(m,2h),2.85-2.78(m,2h),2.65-2.58(m,2h),2.49-2.41(m,1h),2.24-2.21(m,2h),2.05-1.95(m,4h),1.58(d,j＝4.0hz,3h).
[0200]
实施例5(s)-2-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)-1-(哌嗪-1-基)乙-1-酮的制备(化合物5)
[0201]
(1)2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1h-吡唑-1-基)乙酸乙酯的制备
[0202][0203]
4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1h-吡唑(3.9g,90.2mmol)的mecn(50ml)中，加入k2co3(4.0g,30mmol)，溴乙酸乙酯(4.1g,24mmol)，15℃搅拌7h，用水淬灭反应，乙酸乙酯(100ml
×
2)萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，经柱层析(pe/ea＝0-30％)得产物3.4g，收率：60.7％。
[0204]
(2)2-(4-(2-氯-7,7-二氟-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)乙酸乙酯的制备
[0205][0206]
2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1h-吡唑-1-基)乙酸乙酯
(560mg,2.0mmol)的dioxane(25ml)溶液中加入水(5ml)，2,4-二氯-7,7-二氟-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶(580mg,2.6mmol)，pd(pph3)2cl2(140mg,0.2mmol),碳酸钠(640mg,6mmol)，加热至80℃搅拌2h。待反应液冷却至室温后，减压浓缩除去大部分有机溶剂，经柱层析(pe/ea＝0-40％)得产物660mg，收率：96.5％。
[0207]
(3)乙基(s)-2-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)乙酸酯的制备
[0208][0209]
室温下，于2-(4-(2-氯-7,7-二氟-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)乙酸乙酯(620mg,1.8mmol)的mecn(10ml)溶液中加入碳酸铯(1.8g,5.4mmol)，(s)-2-甲基氮杂环丁烷盐酸盐(388mg,3.6mmol)，所得混合物加热至65℃反应2小时，待反应液冷却至室温后减压浓缩，残留物过柱(pe/ea＝0-40％)得产物507mg，收率：74.2％。
[0210]
(4)(s)-2-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)乙酸的制备
[0211][0212]
25℃下，向乙基(s)-2-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)乙酸酯(460mg,1.2mmol)的thf/h2o/meoh(3ml/3ml/3ml)溶液中依次加入lioh-h2o(200mg,4.9mmol)，15℃搅拌1h。1m稀盐酸调节ph至6，二氯甲烷萃取(20ml
×
3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压，浓缩旋干得目标化合物360mg，收率：84.3％。
[0213]
(5)叔丁基(s)-4-(2-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)乙酰基哌嗪-1-甲酯的制备
[0214]
[0215]
室温下，于(s)-2-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)乙酸(320mg,0.92mmol)的dcm(15ml)溶液中加入n-叔丁氧羰基-哌嗪(205mg,1.1mmol)，三乙胺(185mg,1.8mmol)，滴加1-丙基磷酸酐(0.69ml,1.15mmol)，滴加完毕，所得混合物15℃反应1h，用水淬灭反应，二氯甲烷(10ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，得产物(410mg,86.5％)。
[0216]
(6)(s)-2-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)-1-(哌嗪-1-基)乙-1-酮的制备
[0217][0218]
叔丁基(s)-4-(2-(4-(7,7-二氟-2-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)-6,7-二氢-5h-环戊[d]嘧啶-4-基)-1h-吡唑-1-基)乙酰基哌嗪-1-甲酯(350mg,0.68mmol)溶于二氧六环(10ml)溶液中缓慢滴加4m盐酸二氧六环(0.34ml,1.35mmol)，滴加完毕自然升至25℃，搅拌1小时后，体系加水淬灭，用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析(pe:ea＝0-100％)纯化，得产物(60mg,21.2％)。分子式:c
20h25
f2n7o分子量:417.46lc-ms(m/e):418.21(m h )
[0219]
1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.14(s,1h),8.08(s,1h),5.32(s,2h)4.59-4.57(m,1h),4.19-4.15(m,1h),4.28-4.17(m,1h),4.14-4.06(m,1h),3.65-3.63(m,2h),3.57-3.54(m,2h),3.04-3.00(m,2h),2.90-2.87(m,4h),2.66-2.56(m,2h),2.49-2.45(m,1h),2.05-2.00(m,1h),1.58(d,j＝4.0hz,3h)。
[0220]
使用与实施例1-5相同或相似的方法制备了以下表格所示的化合物：
[0221]
[0222][0223]
以上对本发明所提供的khk抑制剂及其应用进行了详细介绍。本文中应用了具体实施例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其中心思想。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护。