遗传修饰真菌和与其相关方法和用途与流程

技术特征：
1.一种生产乳酸和/或乳酸酯的方法，所述方法包括提供被遗传修饰以便过度表达编码乳酸脱氢酶的基因和编码α-半乳糖苷酶的基因的真菌，在包含有包含低聚半乳糖的碳源物的培养基中培养所述真菌以便获得乳酸和/或乳酸酯，其中所述碳源物包含大豆糖蜜。2.如权利要求1或2所述的方法，其还包括从所述培养基中回收所得乳酸和/或乳酸酯。3.如前述权利要求中任一项所述的方法，其还包括分离和/或纯化乳酸和/或乳酸酯。4.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述乳酸是光学纯乳酸异构体，任选地l-乳酸异构体。5.如前述权利要求中任一项所述的方法，其还包括从所获得的乳酸中制备聚乳酸。6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述碳源物包含占所述碳源物中的总碳水化合物的至少约10重量％、20重量％、30重量％、40重量％、50重量％、60重量％、70重量％、80重量％、或90％重量的低聚半乳糖。7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述低聚半乳糖选自由以下组成的组：蜜二糖、甘露三糖、甘露四糖、蜜三糖、水苏糖、毛蕊花糖、ajucose、半乳糖肌醇、双半乳糖基肌醇、半乳糖松醇a、半乳糖松醇b、鹰嘴豆糖醇、荞麦醇b1、荞麦醇b2和其任何组合。8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述碳源物包含葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、淀粉、纤维素和/或其任何组合。9.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述碳源物包括来自豆类、大豆、蚕豆、豌豆、鹰嘴豆、玉米、甘蔗、甜菜、木质纤维素或其任何组合的碳源物；所述碳源物包含甘蔗糖蜜、甜菜糖蜜和/或柑橘糖蜜；且/或所述培养基或碳源物包含5-100重量％大豆糖蜜。10.一种用于从包含大豆糖蜜的碳源物中生产乳酸和/或乳酸酯的遗传修饰真菌，其中所述真菌被遗传修饰以便过度表达编码乳酸脱氢酶的基因和编码α-半乳糖苷酶的基因。11.如前述权利要求中任一项所述的方法或遗传修饰真菌，其中所述α-半乳糖苷酶是异源α-半乳糖苷酶。12.如权利要求11所述的方法或遗传修饰真菌，其中所述异源α-半乳糖苷酶是例如选自以下属类的酵母或丝状真菌的α-半乳糖苷酶：曲霉(aspergillus)、赤霉菌(gibberella)、小克银汉霉(cunninghamella)、镰刀菌(fusarium)、球囊霉(glomus)、腐质霉(humicola)、被孢霉(mortierella)、毛霉菌(mucor)、青霉菌(penicillium)、腐霉(pythium)、根毛霉(rhizomucor)、根霉(rhizopus)、木霉(trichoderma)和酵母属(saccharomyces)，尤其由以下组成的组：玉米赤霉(gibberella zeae)、中间赤霉(gibberella intermdia)、串珠状赤霉(gibberella moniliformis)、藤仓赤霉(gibberella fujikuroi)、尼加迈赤霉(gibberella nygamai)、赤霉菌属f75、镰刀菌属2f75、尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)、芒果镰刀菌(fusarium mangiferae)、层生镰刀菌(fusarium proliferatum)、轮状镰刀菌(fusarium verticilloides)、构巢曲霉(aspergillus nidulans)、米曲霉(aspergillus oryzae)、土曲霉(aspergillus terreus)、黑曲霉(aspergillus niger)、费氏曲霉(aspergillus fischeri)、米黑根霉(rhizopus miehei)、米黑根毛霉菌(rhizomucor miehei)、米根霉(rhizopus oryzae)、里氏木霉(trichoderma reesei)、哈茨木霉(trichoderma harzianum)、长枝木霉
(trichoderma longibrachiatum)和酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)。13.如前述权利要求中任一项所述的方法或遗传修饰真菌，其中所述乳酸脱氢酶是异源乳酸脱氢酶。14.如权利要求13所述的方法或遗传修饰真菌，其中所述异源乳酸脱氢酶来自生物体、微生物、真菌、单细胞原生动物寄生虫、或细菌，任选地来自牛属(bos)、克鲁维斯酵母(kluyveromyces)、根霉(rhizopus)、疟原虫(plasmodium)、乳杆菌(lactobacillus)、片球菌(pediococcus)或芽孢杆菌(bacillus)。15.如前述权利要求中任一项所述的方法或遗传修饰真菌，其中所述修饰真菌包含编码乳酸脱氢酶的基因和/或编码α-半乳糖苷酶的基因的一或多个拷贝。16.如前述权利要求中任一项所述的方法或遗传修饰真菌，其中所述编码乳酸脱氢酶的基因选自由以下组成的组：ldh1、ldh2、ldh3、ldh4、ldh5、ldh6a、ldh6b、ldha、ldhb、ldhc和ldhl，且/或所述编码α-半乳糖苷酶的基因选自由以下组成的组：agl1、agl2、agl3、agla、aglb、aglc、agld、mel1、mel2、mel5、和mel6。17.如前述权利要求中任一项所述的方法或真菌，其中所述真菌进一步遗传修饰来降低乙醇生产。18.如权利要求17所述的方法或真菌，其中所述真菌被遗传修饰以便通过修饰或缺失与乙醇生产相关的基因的至少一部分或通过灭活与乙醇生产相关的基因来降低乙醇生产，并且任选地与乙醇生产相关的基因选自由以下组成的组：pdc1、pdc5、pdc6、adh1、adh2、adh3、adh4、和adh5、和其任何组合。19.如前述权利要求中任一项所述的方法或真菌，其中所述真菌还包含选自由以下组成的组的一种或多种基因的遗传修饰：cyb2、gpd1、gpd2、gpp1、gpp2和其任何组合。20.如前述权利要求中任一项所述的方法或真菌，其中所述真菌是酵母或丝状真菌。21.如前述权利要求中任一项所述的方法或真菌，其中所述真菌是选自以下属类的酵母或丝状真菌：曲霉、酵母属、克鲁维斯酵母、毕赤酵母(pichia)、汉逊酵母(hansenula)、假丝酵母(candida)、丝孢酵母属(trichosporon)、根霉、圆孢菌(torulaspora)、伊萨酵母(issatchenkia)和舍弗氏菌(scheffersomyces)，例如尤其来自由以下组成的组：酿酒酵母、葡萄汁酵母(s.uvarum)、耐热克鲁维斯酵母(kluyveromyces thermotolerans)、乳酸克鲁维斯酵母(k.lactis)、马克斯克鲁维斯酵母(k.marxianus)、多形汉逊酵母(hansenula polymorpha)、树干舍弗氏菌(scheffersomyces stipitis)、米根霉、比勒陀利亚圆孢菌(torulaspora pretoriensis)、东方伊萨酵母(issatchenkia orientalis)、发酵毕赤酵母(pichia fermentans)、盔状毕赤酵母(p.galeiformis)、沙漠毕赤酵母(p.deserticola)、膜醭毕赤酵母(p.membranifaciens)、杰丁毕赤酵母(p.jadinii)、库德毕赤酵母(p.kudriavzevii)、异常毕赤酵母(p.anomala)、乙醇假丝酵母(candida ethanolica)、索诺拉假丝酵母(c.sonorensis)和蜜生假丝酵母(c.apicola)。22.如前述权利要求中任一项所述的方法或真菌，其中所述真菌在登录号vtt c-191026或vtt c-201040下寄存于vtt保藏。23.如权利要求10-22中任一项所述的制备遗传修饰真菌的方法，其中所述方法包括提供真菌和遗传修饰所述真菌来过度表达编码乳酸脱氢酶的基因和编码α-半乳糖苷酶的基
因。24.一种如权利要求10-22中任一项所述的真菌用于从包含大豆糖蜜的碳源物中生产乳酸和/或乳酸酯或用于生产聚合物，任选地聚酯或聚乳酸的用途。25.一种生产选自由聚合物、聚酯和聚乳酸组成的组的一种或多种产物的方法，所述方法包括在含有低聚半乳糖的培养基中培养如权利要求10-22中任一项所述的遗传修饰真菌以便从包含大豆糖蜜的碳源物中生产乳酸，回收所得乳酸和使用回收的乳酸来生产聚合物、聚酯和/或聚乳酸。

技术总结
本发明涉及工业生物技术、可再生原始材料和微生物生产生物体的领域。具体地说，本发明涉及生产乳酸或乳酸酯或一种或多种选自由聚合物、聚酯和聚乳酸组成的组的产物的方法。本发明还涉及包含增加的特定酶活性的遗传修饰真菌、制备所述遗传修饰真菌的方法、和所述真菌用于生产乳酸、乳酸酯或聚合物的用途。乳酸酯或聚合物的用途。


技术研发人员：西莫
受保护的技术使用者：FF-未来公司
技术研发日：2020.08.28
技术公布日：2022/7/9