用于治疗剂的细胞内递送的支链尾端脂质化合物和组合物的制作方法

用于治疗剂的细胞内递送的支链尾端脂质化合物和组合物
1.相关申请
2.本技术要求2019年9月19日提交的美国临时申请第62/902,927号的优先权和权益，所述临时申请的全部内容通过引用并入本文。
技术领域
3.本公开提供了新颖化合物、包含此类化合物的组合物和涉及脂质纳米粒子组合物以向哺乳动物细胞或器官递送一种或多种治疗剂和/或预防剂和/或在哺乳动物细胞或器官中产生多肽的方法。除了新颖脂质以外，本公开的脂质纳米粒子组合物还可包括特定分率的一种或多种阳离子和/或可离子化氨基脂质、包括多不饱和脂质在内的磷脂、peg脂质、结构脂质和/或治疗剂和/或预防剂。
4.发明背景
5.有效地靶向递送例如小分子药物、蛋白质和核酸的生物活性物质代表了一项持续的医学挑战。特别是，由于此类物质的相对不稳定性和低细胞渗透性，使得核酸至细胞的递送变得困难。因此，需要开发促进例如核酸的治疗剂和/或预防剂递送至细胞的方法和组合物。
6.已证明含脂质的纳米粒子组合物、脂质体和脂质体复合物有效地作为例如小分子药物、蛋白质和核酸的生物活性物质的转运媒介物进入细胞和/或细胞内隔室中。此类组合物通常包括一种或多种“阳离子”和/或氨基(可离子化)脂质、包括多不饱和脂质在内的磷脂、结构脂质(例如固醇)和/或含有聚乙二醇的脂质(peg脂质)。阳离子和/或可离子化脂质包括例如可容易地质子化的含胺脂质。尽管多种此类含脂质的纳米粒子组合物已得到证实，但仍缺乏安全性、功效和特异性的改进。


技术实现要素：

7.本公开提供了新颖化合物和组合物以及涉及所述化合物和组合物的方法。
8.在一些方面，本公开涉及一种式(1-1)化合物：
9.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
10.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
11.r'
支链
是：并且r'
环状
是：并且
12.r'b是：
13.其中表示连接点；
14.其中r
aγ
和r
bγ
各自独立地是c
2-12
烷基或c
2-12
烯基；
15.r2和r3各自独立地选自由c
1-14
烷基和c
2-14
烯基组成的组；
16.r4是-(ch2)2oh；
17.每个r'独立地是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
18.ya是c
3-6
碳环；
19.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；并且
20.s是2或3。
21.在一些方面，本公开涉及一种式(2-1)化合物：
22.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
23.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
24.r'
支链
是：并且r'
环状
是：并且
25.r'b是：
26.其中表示连接点；
27.其中r
aγ
和r
bγ
各自独立地是c
2-12
烷基或c
2-12
烯基；
28.r2和r3各自独立地选自由c
1-14
烷基和c
2-14
烯基组成的组；
29.r4是其中表示连接点；r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
30.每个r'独立地是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
31.ya是c
3-6
碳环；
32.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；并且
33.s是2或3。
34.在一些方面，本公开涉及一种式(a)化合物：
35.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
36.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
37.r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
38.其中r
aα
是h，并且r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组，其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
中的至少一者选自由c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
39.r2和r3各自是c
1-14
烷基；
40.r4选自由-(ch2)2oh、-(ch2)3oh、-(ch2)4oh、-(ch2)5oh和组成的组，
41.其中表示连接点；
42.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
43.每个r5独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
44.每个r6独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
45.r7是h；
46.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
47.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
48.ya是c
3-6
碳环；
49.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
50.l选自由1、2、3、4和5组成的组；
51.s是2或3；并且
52.m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
53.在一些方面，本公开涉及一种式(b)化合物：
54.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
55.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
56.r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
57.其中r
aα
和r
aβ
各自是h，并且r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组，其中r
aγ
和r
aδ
中的至少一者选自由c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
58.r
bα
、r
bβ
、r
bγ
和r
bδ
各自独立地选自由h、c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组，其中r
bα
、r
bβ
、rbγ
和r
bδ
中的至少一者选自由c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组；
59.r4选自由-(ch2)2oh、-(ch2)3oh、-(ch2)4oh、-(ch2)5oh和组成的组，
60.其中表示连接点；
61.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
62.每个r5独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
63.每个r6独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
64.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
65.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
66.ya是c
3-6
碳环；
67.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
68.l选自由1、2、3、4和5组成的组；
69.s是2或3；并且
70.m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
71.在一些方面，本公开涉及一种式(a-a)化合物：
72.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
73.其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组，其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
中的至少一者选自由c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
74.r4选自由-(ch2)2oh、-(ch2)3oh、-(ch2)4oh和-(ch2)5oh组成的组；
75.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；并且
76.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
77.在一些方面，本公开涉及一种式(a-b)化合物：
78.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
79.其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组，其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
中的至少一者选自由c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
80.r4选自由-(ch2)2oh、-(ch2)3oh、-(ch2)4oh和-(ch2)5oh组成的组；并且
81.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
具体实施方式
82.本公开涉及新颖脂质和包括新颖脂质的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)。本公开还提供了向哺乳动物细胞递送治疗剂和/或预防剂，具体来说向哺乳动物器官递送治疗剂和/或预防剂，在哺乳动物细胞中产生目标多肽，与包含其他脂质的lnp相比改进在哺乳动物细胞中产生的蛋白质的水平，以及治疗有需要的哺乳动物的疾病或病症的方法。例如，一种在细胞中产生目标多肽的方法涉及使包含mrna的纳米粒子与哺乳动物细胞接触，由此所述mrna可被翻译以产生目标多肽。一种向哺乳动物细胞或器官递送治疗剂和/或预防剂的方法可涉及将包括所述治疗剂和/或预防剂的纳米粒子组合物施用至受试者，其中所述施用涉及使所述细胞或器官与所述组合物接触，由此将所述治疗剂和/或预防剂递送至所述细胞或器官。此类递送方法可为体外或体内的。
83.本公开提供了包括中央胺部分和至少一个生物可降解基团的脂质。本文所述的脂质可有利地用于脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)以将治疗剂和/或预防剂递送至哺乳动物细胞或器官。例如，本文所述的脂质几乎不具有或不具有免疫原性。例如，与参考脂质(例如mc3、kc2或dlindma)相比，式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的脂质化合物具有较低的免疫原性。例如，与包含参考脂质(例如mc3、kc2或dlindma)和相同治疗剂或预防剂的相应制剂相比，包含本文所公开的脂质和治疗剂或预防剂的制剂具有增加的治疗指数。
84.在一些方面，本公开涉及一种式(a-1)化合物：
85.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
86.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
87.r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
88.其中r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
89.r2和r3各自是c
1-14
烷基；
90.r4是-(ch2)2oh或
91.其中表示连接点；
92.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
93.r5和r6各自是h；
94.r7是h；
95.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
96.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
97.ya是c
3-6
碳环；
98.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
99.l选自由1、2、3、4和5组成的组；
100.s是2或3；并且
101.m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
102.在一些方面，本公开涉及一种式(a-2)化合物：
103.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
104.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
105.r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
106.其中r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
107.r2和r3各自是c
1-14
烷基；
108.r4是-(ch2)2oh或
109.其中表示连接点；
110.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
111.r5和r6各自是h；
112.r7是h；
113.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
114.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
115.ya是c
3-6
碳环；
116.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
117.l选自由1、2、3、4和5组成的组；
118.s是2或3；并且
119.m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
120.在一些方面，本公开涉及一种式(a-3)化合物：
121.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
122.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
123.r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
124.其中r
aα
、r
aγ
和r
aβ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
125.r2和r3各自是c
1-14
烷基；
126.r4是-(ch2)2oh或
127.其中表示连接点；
128.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
129.r5和r6各自是h；
130.r7是h；
131.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
132.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
133.ya是c
3-6
碳环；
134.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
135.l选自由1、2、3、4和5组成的组；
136.s是2或3；并且
137.m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
138.在一些实施方案中，本公开的化合物具有以下结构之一：
139.140.在一些方面，本公开涉及一种式(b-1)化合物：
141.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
142.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
143.r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
144.其中r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
145.r
bα
、r
bγ
和r
bδ
各自独立地选自由h、c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组；并且r
bβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
146.r4是
147.其中表示连接点；
148.其中r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
149.r5和r6各自是h；
150.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
151.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
152.ya是c
3-6
碳环；
153.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
154.l选自由1、2、3、4和5组成的组；
155.s是2或3；并且
156.m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
157.在一些方面，本公开涉及一种式(b-2)化合物：
158.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
159.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
160.r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
161.其中r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
162.r
bα
、r
bβ
和r
bδ
各自独立地选自由h、c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组；并且r
bγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
163.r4是-(ch2)2oh或
164.其中表示连接点；
165.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
166.r5和r6各自是h；
167.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
168.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
169.ya是c
3-6
碳环；
170.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
171.l选自由1、2、3、4和5组成的组；
172.s是2或3；并且
173.m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
174.在一些方面，本公开涉及一种式(b-3)化合物：
175.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
176.其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
177.r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
178.其中r
aα
、r
aβ
和r
aγ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
179.r
bα
、r
bβ
和r
bγ
各自独立地选自由h、c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组；并且r
bδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
180.r4是-(ch2)2oh或
181.其中表示连接点；
182.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
183.r5和r6各自是h；
184.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
185.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
186.ya是c
3-6
碳环；
187.r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
188.l选自由1、2、3、4和5组成的组；
189.s是2或3；并且
190.m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
191.在一些方面，本公开涉及一种式(a-a1)化合物：
192.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
193.其中r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
194.r4是-(ch2)2oh或
195.其中表示连接点；
196.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
197.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；并且
198.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
199.在一些方面，本公开涉及一种式(a-a2)化合物：
200.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
201.其中r
aβ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
202.r4是-(ch2)2oh或
203.其中表示连接点；
204.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
205.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；并且
206.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
207.在一些方面，本公开涉及一种式(a-a3)化合物：
208.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
209.其中r
aβ
和r
aγ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
210.r4是-(ch2)2oh或
211.其中表示连接点；
212.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
213.m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；并且
214.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
215.在一些方面，本公开涉及一种式(a-b1)化合物：
216.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
217.其中r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
218.r4是-(ch2)2oh或
219.其中表示连接点；
220.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；并且
221.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
222.在一些方面，本公开涉及一种式(a-b2)化合物：
223.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
224.其中r
aβ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
225.r4是-(ch2)2oh或
226.其中表示连接点；r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；并且
227.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
228.在一些方面，本公开涉及一种式(a-b3)化合物：
229.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
230.其中r
aβ
和r
aγ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
231.r4是-(ch2)2oh或
232.其中表示连接点；
233.r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；并且
234.r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
235.在一些方面，本公开涉及一种式(a-c)化合物：
236.或其n-氧化物，或其盐或异构体，
237.其中r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
238.r4是-(ch2)2oh或其中表示连接点；并且r'是c
1-12
烷基。
239.在一些方面，本公开涉及一种式(b-c)化合物：
240.或其n-氧化物，或其盐或异构体，其中r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
241.r
bγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；并且
242.r4是-(ch2)2oh或其中表示连接点；并且r'是c
1-12
烷基。
243.在一些方面，本公开涉及一种式(i-a)化合物：
244.其中r2和r3各自独立地选自由c
1-14
烷基和c
2-14
烯基组成的组；并且r
aγ
和r
bγ
各自独立地是c
2-6
烷基。
245.式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)和(b-c)中任一者的化合物在适用时包括以下特征中的一者或多者。
246.在一些实施方案中，r4是并且n2是2。在一些实施方案中，r4是并且n2是3。在一些实施方案中，r4是并且n2是4。
247.在一些实施方案中，r
10
是-nh2。在一些实施方案中，r
10
是-nh(c
1-6
烷基)。在一些实施方案中，r
10
是-n(c
1-6
烷基)2。在一些实施方案中，r
10
是-nh(ch3)。在一些实施方案中，r
10
是-n(ch3)2。
248.在一些实施方案中，r4是-(ch2)2oh、-(ch2)3oh或-(ch2)4oh并且m和m'各自是-c(o)o-。在一些实施方案中，r4是-(ch2)2oh并且m和m'各自是-c(o)o-。在一些实施方案中，r4是-(ch2)3oh并且m和m'各自是-c(o)o-。在一些实施方案中，r4是-(ch2)4oh并且m和m'各自是-c(o)o-。
249.在一些实施方案中，r4是
250.在一些实施方案中，r4是并且m和m'各自是-c(o)o-。在一些实施方案中，r4是并且m和m'各自是-oc(o)-。在一些实施方案中，r4是并且m是-oc(o)-并且m'是-c(o)o-。在一些实施方案中，r4是是-c(o)o-并且m'是-oc(o)-。
251.在一些实施方案中，l是1、2、3或4。在一些实施方案中，l是5。在一些实施方案中，m是5、6、7、8或9。在一些实施方案中，m是5。在一些实施方案中，m是7。
252.在一些实施方案中，l是5并且m是5。在一些实施方案中，l是5并且m是7。在一些实施方案中，l是5并且m是5、6、7、8或9。在一些实施方案中，m是5并且l是1、2、3或4。在一些实施方案中，m是7并且l是1、2、3或4。
253.在一些实施方案中，r5、r6和r7各自是h，并且m是5、6、7、8或9。在一些实施方案中，r5、r6和r7各自是h，并且m是5。在一些实施方案中，r5、r6和r7各自是h，并且m是7。
254.在一些实施方案中，r2和r3各自独立地是c
1-14
烷基或c
2-14
烯基。在一些实施方案中，r2和r3各自独立地是c
3-14
烷基或c
3-14
烯基。在一些实施方案中，r2和r3独立地是c
5-14
烷基或c
5-14
烯基。
255.在一些实施方案中，r2和r3各自独立地是c
1-14
烷基。在一些实施方案中，r2和r3各自独立地是c
3-14
烷基。在一些实施方案中，r2和r3各自独立地是c
7-9
烷基。
256.在一些实施方案中，r2和r3各自是c7烷基。在一些实施方案中，r2和r3各自是c8烷基。在一些实施方案中，r2和r3各自是c9烷基。
257.在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自是h，并且r
aβ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自是h，并且r
aγ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aβ
和r
aγ
各自是h，并且r
aδ
是c
2-c6烷基。
258.在一些实施方案中，r
bα
、r
bγ
和r
bδ
各自是h，并且r
bβ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r
bα
、r
bβ
和r
bδ
各自是h，并且r
bγ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r
bα
、r
bβ
和r
bγ
各自是h，并且r
bδ
是c
2-c6烷基。
259.在一些实施方案中，r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自是h，r
aβ
是c
2-c6烷基，r
bα
、r
bγ
和r
bδ
各自是h，并且r
bβ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自是h，r
aβ
是c
2-c6烷基，r
bα
、r
bβ
和r
bδ
各自是h，并且r
bγ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自是h，r
aβ
是c
2-c6烷基，r
bα
、r
bβ
和r
bγ
各自是h，并且r
bδ
是c
2-c6烷基。
260.在一些实施方案中，r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自是h，r
aγ
是c
2-c6烷基，r
bα
、r
bγ
和r
bδ
各自是h，并且r
bβ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自是h，r
aγ
是c
2-c6烷基，r
bα
、r
bβ
和r
bδ
各自是h，并且r
bγ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自是h，r
aγ
是c
2-c6烷基，r
bα
、r
bβ
和r
bγ
各自是h，并且r
bδ
是c
2-c6烷基。
261.在一些实施方案中，r
aα
、r
aβ
和r
aγ
各自是h，r
aδ
是c
2-c6烷基，r
bα
、r
bγ
和r
bδ
各自是h，并且r
bβ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r
aα
、r
aβ
和r
aγ
各自是h，r
aδ
是c
2-c6烷基，r
bα
、r
bβ
和r
bδ
各自是h，并且r
bγ
是c
2-c6烷基。在一些实施方案中，r
aα
、r
aβ
和r
aγ
各自是h，r
aδ
是c
2-c6烷基，r
bα
、r
bβ
和r
bγ
各自是h，并且r
bδ
是c
2-c6烷基。
262.在一些实施方案中，r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。在一些实施方案中，r'是c2烷基。在一些实施方案中，r'是c3或c4烷基。在一些实施方案中，r'是c3烷基。在一些实施方案中，r'是c4烷基。在一些实施方案中，r'是c5烷基。
263.在一些实施方案中，r'是c4烷基或c4烯基。在一些实施方案中，r'是c5烷基或c5烯基。在一些实施方案中，r'是c6烷基或c6烯基。在一些实施方案中，r'是c7烷基或c7烯基。在一些实施方案中，r'是c8烷基或c8烯基。在一些实施方案中，r'是c9烷基或c9烯基。在一些实施方案中，r'是c
10
烷基或c
10
烯基。在一些实施方案中，r'是c
11
烷基或c
11
烯基。
264.在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自是h，r
aβ
是c
2-c6烷基并且r'是c
3-c5烷基。在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自是h，r
aβ
是c
2-c6烷基并且r'是c3烷基。在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自是h，r
aβ
是c
2-c6烷基并且r'是c4烷基。
265.在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自是h，r
aγ
是c
2-c6烷基，并且r'是c
3-c5烷基。在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自是h，r
aγ
是c
2-c6烷基，并且r'是c3烷基。在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自是h，r
bγ
是c
2-c6烷基，并且r'是c4烷基。
266.在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aβ
和r
aγ
各自是h，r
aδ
是c
2-c6烷基并且r'是c
3-c5烷基。在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aβ
和r
aγ
各自是h，r
aδ
是c
2-c6烷基并且r'是c3烷基。在一些实施方案中，r'a是r'
支链
，r
aα
、r
aβ
和r
aγ
各自是h，r
aδ
是c
2-c6烷基并且r'是c4烷基。
267.在一些实施方案中，r*”a
是c2烷基或c3烷基。
268.在一些实施方案中，s是2。在一些实施方案中，s是3。
269.在一些实施方案中，s是2并且r*”a
是c2烷基或c3烷基。
270.在一些实施方案中，yar*”a
是在一些实施方案中，yar*”a
是
271.在一些实施方案中，s是2，yar*”a
是并且r*”a
是c2烷基或c3烷基。在一些实施方案中，s是2，yar*”a
是并且r*”a
是c2烷基或c3烷基。
272.在一些实施方案中，本文所述的式中任一者的化合物均适用于制备用于肌肉内施用的纳米粒子组合物。
273.在一些实施方案中，式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物选自表1的化合物以及其n-氧化物、盐或异构体。
274.表1.氨基脂质。
275.276.277.[0278][0279]
根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的脂质的中央胺部分可在生理ph下质子化。因此，脂质可在生理ph下具有正电荷或部分正电荷。此类脂质可称为阳离子或可离子化(氨基)脂质。脂质也可为两性离子的，即同时具有正
电荷和负电荷的中性分子。
[0280]
定义
[0281]
如本文所用，术语“烷基”或“烷基基团”意指包括一个或多个碳原子(例如，一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个、十三个、十四个、十五个、十六个、十七个、十八个、十九个、二十个或更多个碳原子)的直链或支链饱和烃，其任选被取代。注记“c
1-14
烷基”意指任选被取代的包括1-14个碳原子的直链或支链饱和烃。除非另外指定，否则本文所述的烷基基团是指未被取代和被取代的烷基基团。
[0282]
如本文所用，术语“烯基”或“烯基基团”意指包括两个或更多个碳原子(例如，两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个、十三个、十四个、十五个、十六个、十七个、十八个、十九个、二十个或更多个碳原子)和至少一个双键的直链或支链烃，其任选被取代。注记“c
2-14
烯基”意指任选被取代的包括2-14个碳原子和至少一个碳碳双键的直链或支链烃。烯基基团可包括一个、两个、三个、四个或更多个碳碳双键。例如，c
18
烯基可包括一个或多个双键。包括两个双键的c
18
烯基基团可为亚油烯基。除非另外指定，否则本文所述的烯基基团是指未被取代和被取代的烯基基团。
[0283]
如本文所用，术语“炔基”或“炔基基团”意指包括两个或更多个碳原子(例如，两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个、十三个、十四个、十五个、十六个、十七个、十八个、十九个、二十个或更多个碳原子)和至少一个碳碳三键的直链或支链烃，其任选被取代。注记“c
2-14
炔基”意指任选被取代的包括2-14个碳原子和至少一个碳碳三键的直链或支链烃。炔基基团可包括一个、两个、三个、四个或更多个碳碳三键。例如，c
18
炔基可包括一个或多个碳碳三键。除非另外指定，否则本文所述的炔基基团是指未被取代和被取代的炔基基团。
[0284]
如本文所用，术语“碳环”或“碳环基团”意指任选被取代的包括一个或多个碳原子环的单环或多环体系。环可为三元、四元、五元、六元、七元、八元、九元、十元、十一元、十二元、十三元、十四元、十五元、十六元、十七元、十八元、十九元或二十元环。注记“c
3-6
碳环”意指包括具有3-6个碳原子的单环的碳环。碳环可包括一个或多个碳碳双键或三键并且可为非芳族的或芳族的(例如，环烷基或芳基基团)。碳环的实例包括环丙基、环戊基、环己基、苯基、萘基和1,2-二氢萘基基团。如本文所用，术语“环烷基”意指非芳族碳环并且可包括或可不包括任何双键或三键。除非另外指定，否则本文所述的碳环是指未被取代和被取代的碳环基团，即任选被取代的碳环。在一些实施方案中，碳环是c
3-8
环烷基。在一些实施方案中，碳环是c
3-6
环烷基。在一些实施方案中，碳环是c
6-10
芳基。
[0285]“芳基”包括具有芳香性的基团，包括具有至少一个芳环并且在环结构中不含任何杂原子的“共轭”或多环体系。实例包括苯基、苄基、1,2,3,4-四氢萘基等。在一些实施方案中，“芳基”是具有芳香性的c
6-10
碳环(例如，“芳基”是c
6-10
芳基)。
[0286]
如本文所用，术语“杂环”或“杂环基团”意指任选被取代的包括一个或多个环的单环或多环体系，其中至少一个环包括至少一个杂原子。杂原子可为例如氮、氧或硫原子。环可为三元、四元、五元、六元、七元、八元、九元、十元、十一元、十二元、十三元或十四元环。杂环可包括一个或多个双键或三键并且可为非芳族的或芳族的(例如，杂环烷基或杂芳基基团)。杂环的实例包括咪唑基、咪唑烷基、噁唑基、噁唑烷基、噻唑基、噻唑烷基、吡唑烷基、吡唑基、异噁唑烷基、异噁唑基、异噻唑烷基、异噻唑基、吗啉基、吡咯基、吡咯烷基、呋喃基、四
氢呋喃基、噻吩基、吡啶基、哌啶基、喹啉基和异喹啉基基团。如本文所用，术语“杂环烷基”意指非芳族杂环并且可包括或可不包括任何双键或三键。除非另外指定，否则本文所述的杂环是指未被取代和被取代的杂环基团，即任选被取代的杂环。在一些实施方案中，杂环是4至12元杂环烷基。在一些实施方案中，杂环是5元或6元杂芳基。
[0287]“杂芳基”基团是如上文所定义的芳基基团，除了在环结构中具有一个至四个杂原子，并且还可称为“芳基杂环”或“杂芳族化合物”。如本文所用，术语“杂芳基”旨在包括稳定的5元、6元或7元单环或者7元、8元、9元、10元、11元或12元双环芳族杂环，所述杂环由碳原子和独立地选自由氮、氧、硫和硼组成的组的一个或多个杂原子，例如1个或1-2个或1-3个或1-4个或1-5个或1-6个杂原子或例如1、2、3、4、5或6个杂原子组成。氮原子可被取代或未被取代(即n或nr，其中r是h或如所定义的其他取代基)。氮和硫杂原子可任选被氧化(即n
→
o和s(o)
p
，其中p＝1或2)。应注意，芳族杂环中的s和o原子的总数为不超过1。
[0288]
杂芳基基团的实例包括吡咯、呋喃、噻吩、噻唑、异噻唑、咪唑、三唑、四唑、吡唑、噁唑、异噁唑、吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶等。
[0289]
此外，术语“芳基”和“杂芳基”包括多环芳基和杂芳基基团，例如三环、双环，例如萘、苯并噁唑、苯并二噁唑、苯并噻唑、苯并咪唑、苯并噻吩、喹啉、异喹啉、萘啶(naphthrydine)、吲哚、苯并呋喃、嘌呤、苯并呋喃、脱氮嘌呤、吲嗪。
[0290]
如本文所用，“生物可降解基团”是可促进哺乳动物实体中脂质的更快速代谢的基团。生物可降解基团可选自由但不限于-c(o)o-、-oc(o)-、-c(o)n(r')-、-n(r')c(o)-、-c(o)-、-c(s)-、-c(s)s-、-sc(s)-、-ch(oh)-、-p(o)(or')o-、-s(o)
2-、芳基基团和杂芳基基团组成的组。如本文所用，“芳基基团”是任选被取代的包括一个或多个芳环的碳环基团。芳基基团的实例包括苯基和萘基基团。如本文所用，“杂芳基基团”是任选被取代的包括一个或多个芳环的杂环基团。杂芳基基团的实例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基和噻唑基。芳基和杂芳基基团均可任选被取代。例如，m和m'可选自由任选被取代的苯基、噁唑和噻唑组成的非限制性组。在本文中的各式中，m和m'可独立地选自上文生物可降解基团的列表。除非另外指定，否则本文所述的芳基或杂芳基基团是指未被取代和被取代的基团，即任选被取代的芳基或杂芳基基团。
[0291]
除非另外指定，否则烷基、烯基和环基(例如，碳环基和杂环基)基团可任选被取代。任选的取代基可选自由但不限于卤素原子(例如，氯离子、溴离子、氟离子或碘离子基团)、羧酸(例如-c(o)oh)、醇(例如羟基、-oh)、酯(例如-c(o)or或-oc(o)r)、醛(例如-c(o)h)、羰基(例如-c(o)r，或者由c＝o表示)、酰基卤(例如-c(o)x，其中x是选自溴离子、氟离子、氯离子和碘离子的卤离子)、碳酸酯(例如-oc(o)or)、烷氧基(例如-or)、缩醛(例如-c(or)2r
””
，其中每个or是可相同或不同的烷氧基并且r
””
是烷基或烯基基团)、磷酸酯(例如p(o)
43-)、硫醇(例如-sh)、亚砜(例如-s(o)r)、亚磺酸(例如-s(o)oh)、磺酸(例如-s(o)2oh)、硫醛(例如-c(s)h)、硫酸酯(例如s(o)
42-)、磺酰基(例如-s(o)
2-)、酰胺(例如-c(o)nr2或-n(r)c(o)r)、叠氮基(例如-n3)、硝基(例如-no2)、氰基(例如-cn)、异氰基(例如-nc)、酰氧基(例如-oc(o)r)、氨基(例如-nr2、-nrh或-nh2)、氨甲酰基(例如-oc(o)nr2、-oc(o)nrh或-oc(o)nh2)、磺酰胺(例如-s(o)2nr2、-s(o)2nrh、-s(o)2nh2、-n(r)s(o)2r、-n(h)s(o)2r、-n(r)s(o)2h或-n(h)s(o)2h)、烷基基团、烯基基团和环基(例如，碳环基或杂环基)基团组成的组。在前述任一者中，r是如本文所定义的烷基或烯基基团。在一些实施方案中，所述取代基
基团自身可进一步被例如一个、两个、三个、四个、五个或六个如本文所定义的取代基取代。例如，c
1-6
烷基基团可进一步被一个、两个、三个、四个、五个或六个如本文所述的取代基取代。
[0292]
含氮的本公开化合物可通过用氧化剂(例如3-氯过氧基苯甲酸(mcpba)和/或过氧化氢)处理而转化为n-氧化物以提供其他本公开化合物。因此，当价态和结构允许时，所有所显示和要求保护的含氮化合物均被视为包括如所示的化合物和其n-氧化物衍生物(其可被指定为n
→
o或n
-o-)。此外，在其他情况下，本公开化合物中的氮可转化为n-羟基或n-烷氧基化合物。例如，n-羟基化合物可通过利用例如m-cpba的氧化剂氧化母体胺来制备。当价态和结构允许时，所有所显示和要求保护的含氮化合物也被视为涵盖如所示的化合物和其n-羟基(即n-oh)和n-烷氧基(即n-or，其中r是被取代或未被取代的c
1-c6烷基、c
1-c6烯基、c
1-c6炔基、3-14元碳环或3-14元杂环)衍生物。
[0293]
约、大约：如本文所用，如应用于一个或多个目标值的术语“大约”和“约”是指类似于所陈述的参考值的值。在某些实施方案中，除非另外指定或在其他方面从本文显而易知(除了此数字将超过可能值的100％的情况)，否则术语“大约”或“约”是指值的范围，所述范围属于所陈述的参考值在任一方向(大于或小于)的25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或更低以内。例如，当在纳米粒子组合物的脂质组分中的给定化合物的量的背景中使用时，“约”可意指所陈述的值的 /-10％。例如，包括具有约40％的给定化合物的脂质组分的纳米粒子组合物可包括30-50％的所述化合物。
[0294]
如本文所用，术语“化合物”意在包括所描绘的结构的所有异构体和同位素。“同位素”是指具有相同原子序数但由于原子核中不同数目的中子而具有不同质量数的原子。例如，氢的同位素包括氚和氘。此外，本公开的化合物、盐或复合物可通过常规方法与溶剂或水分子组合制备以形成溶剂化物和水合物。
[0295]
如本文所用，术语“接触”意指在两个或更多个实体之间建立物理连接。例如，使哺乳动物细胞与纳米粒子组合物接触意指使所述哺乳动物细胞与纳米粒子共享物理连接。体内和离体使细胞与外部实体接触的方法是生物学领域中众所周知的。例如，使纳米粒子组合物和安置于哺乳动物内的哺乳动物细胞接触可通过变化的施用途径(例如，静脉内、肌肉内、皮内和皮下)进行并且可涉及变化量的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)。此外，超过一种哺乳动物细胞可由纳米粒子组合物接触。
[0296]
如本文所用，术语“递送”意指向目的地提供实体。例如，向受试者递送治疗剂和/或预防剂可涉及向所述受试者施用包括所述治疗剂和/或预防剂的纳米粒子组合物(例如，通过静脉内、肌肉内、皮内或皮下途径)。向哺乳动物或哺乳动物细胞施用纳米粒子组合物可涉及使一种或多种细胞与所述纳米粒子组合物接触。
[0297]
如本文所用，术语“增强的递送”意指与对照纳米粒子向目标靶组织递送治疗剂和/或预防剂的水平(例如mc3、kc2或dlindma)相比，由纳米粒子向目标靶组织(例如，哺乳动物肝脏)递送更多(例如，至少1.5倍多、至少2倍多、至少3倍多、至少4倍多、至少5倍多、至少6倍多、至少7倍多、至少8倍多、至少9倍多、至少10倍多)治疗剂和/或预防剂。纳米粒子向特定组织递送的水平可通过比较组织中产生的蛋白质的量与所述组织的重量，比较组织中治疗剂和/或预防剂的量与所述组织的重量，比较组织中产生的蛋白质的量与所述组织中
总蛋白质的量，或比较组织中治疗剂和/或预防剂的量与所述组织中总治疗剂和/或预防剂的量来测量。应理解，纳米粒子向靶组织的增强的递送无需在所治疗的受试者中测定，其可在例如动物模型(例如大鼠模型)的替代物中测定。在某些实施方案中，无论施用途径如何，包括根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物的纳米粒子组合物具有基本上相同的递送增强水平。例如，当本文所公开的某些化合物用于静脉内或肌肉内递送治疗剂和/或预防剂时，其展现相似的递送增强。在其他实施方案中，当本文所公开的某些化合物用于经肌肉内递送治疗剂和/或预防剂时，其展现高于静脉内的递送增强水平。
[0298]
如本文所用，术语“特异性递送(specific delivery)”、“特异性地递送(specifically deliver)”或“特异性地递送(specifically delivering)”意指与脱靶组织(例如，哺乳动物脾脏)相比，由纳米粒子向目标靶组织(例如，哺乳动物肝脏)递送更多(例如，至少1.5倍多、至少2倍多、至少3倍多、至少4倍多、至少5倍多、至少6倍多、至少7倍多、至少8倍多、至少9倍多、至少10倍多)治疗剂和/或预防剂。纳米粒子向特定组织递送的水平可通过比较组织中产生的蛋白质的量与所述组织的重量，比较组织中治疗剂和/或预防剂的量与所述组织的重量，比较组织中产生的蛋白质的量与所述组织中总蛋白质的量，或比较组织中治疗剂和/或预防剂的量与所述组织中总治疗剂和/或预防剂的量来测量。例如，关于肾血管靶向，如果在治疗剂和/或预防剂的全身性施用之后与递送至肝脏或脾脏的量相比，每1g组织1.5倍、2倍、3倍、5倍、10倍、15倍或20倍多的治疗剂和/或预防剂递送至肾脏，则如与肝脏和脾脏相比，治疗剂和/或预防剂特异性地提供至哺乳动物肾脏。应理解，纳米粒子特异性地递送至靶组织的能力无需在所治疗的受试者中测定，其可在例如动物模型(例如大鼠模型)的替代物中测定。
[0299]
如本文所用，“囊封效率”是指相对于用于制备纳米粒子组合物的治疗剂和/或预防剂的初始总量，变成纳米粒子组合物的一部分的治疗剂和/或预防剂的量。例如，如果在最初提供至纳米粒子组合物的总计100mg治疗剂和/或预防剂中有97mg治疗剂和/或预防剂被囊封于所述组合物中，则囊封效率可给出为97％。如本文所用，“囊封”可指完全、实质性或部分封闭、限制、围绕或包装。
[0300]
如本文所用，“囊封”、“囊封的”、“负载的”和“缔合的”可指完全、实质性或部分封闭、限制、围绕或包装。如本文所用，“囊封”或“缔合”可指限制纳米粒子内的个别核酸分子和/或在个别核酸分子与纳米粒子之间建立生理化学联系的过程。如本文所用，“空纳米粒子”可指基本上不含治疗剂或预防剂的纳米粒子。如本文所用，“空纳米粒子”或“空脂质纳米粒子”可指基本上不含核酸的纳米粒子。如本文所用，“空纳米粒子”或“空脂质纳米粒子”可指基本上不含核苷酸或多肽的纳米粒子。如本文所用，“空纳米粒子”或“空脂质纳米粒子”可指基本上仅由脂质组分组成的纳米粒子。如本文所用，“负载纳米粒子”或“负载脂质纳米粒子”(也称为“完全纳米粒子”或“完全脂质纳米粒子”)可指包含空纳米粒子的组分和治疗剂或预防剂的纳米粒子。如本文所用，“负载纳米粒子”或“负载脂质纳米粒子”(也称为“完全纳米粒子”或“完全脂质纳米粒子”)可指包含空纳米粒子的组分和核苷酸或多肽的纳米粒子。如本文所用，“负载纳米粒子”或“负载脂质纳米粒子”(也称为“完全纳米粒子”或“完全脂质纳米粒子”)可指包含空纳米粒子的组分和核酸的纳米粒子。
[0301]
如本文所用，核酸序列的“表达”是指mrna翻译成多肽或蛋白质和/或多肽或蛋白质的翻译后修饰。
[0302]
如本文所用，术语“体外”是指事件发生于人工环境中，例如试管或反应容器中、细胞培养物中、培养皿中等，而非发生于生物体(例如动物、植物或微生物)内。
[0303]
如本文所用，术语“体内”是指事件发生于生物体(例如动物、植物或微生物或其细胞或组织)内。
[0304]
如本文所用，术语“离体”是指事件发生于生物体(例如动物、植物或微生物或其细胞或组织)外部。离体事件可发生于从天然(例如体内)环境最低程度地改变的环境中。
[0305]
如本文所用，术语“异构体”意指化合物的任何几何异构体、互变异构体、两性离子、立体异构体、对映异构体或非对映异构体。化合物可包括一个或多个手性中心和/或双键并且可因此作为立体异构体，例如双键异构体(即，几何e/z异构体)或非对映异构体(例如，对映异构体(即，( )或(-))或顺式/反式异构体)存在。本公开涵盖本文所述的化合物的任何和所有异构体，包括立体异构体纯形式(例如，几何异构体纯、对映异构体纯或非对映异构体纯)以及对映异构体和立体异构体混合物(例如外消旋物)。化合物的对映异构体和立体异构体混合物以及将其拆分成其组分对映异构体或立体异构体的方式是众所周知的。
[0306]“互变异构体”是平衡存在并易于从一种异构体形式转化成另一种异构体形式的两种或更多种结构异构体之一。这种转化导致氢原子的形式迁移，伴随相邻的共轭双键的转换。互变异构体作为溶液中的互变异构体集合的混合物存在。在其中可能发生互变异构的溶液中，将达到互变异构体的化学平衡。互变异构体的精确比率取决于若干因素，包括温度、溶剂和ph。可通过互变异构相互转化的互变异构体的概念被称为互变异构现象。
[0307]
在可能存在的若干类型的互变异构现象中，通常观察到两种。在酮-烯醇互变异构现象中，发生电子和氢原子的同时位移。由于糖链分子中的醛基(-cho)与同一分子中的一个羟基(-oh)反应使其呈如由葡萄糖展现的环状(环形)形式，发生环链互变异构现象。
[0308]
常见互变异构体对是：酮-烯醇、酰胺-腈、内酰胺-内酰亚胺、杂环中(例如，例如鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶的核碱基中)的酰胺-亚氨酸互变异构现象、亚胺-烯胺和烯胺-烯胺。二取代胍中的互变异构现象的实例示于下文。
[0309][0310]
应理解，本公开化合物可描绘为不同的互变异构体。还应理解，当化合物具有互变异构体形式时，所有互变异构体形式均旨在包括于本公开的范围内，并且所述化合物的命名不排除任何互变异构体形式。
[0311]
如本文所用，“脂质组分”是包括一种或多种脂质的纳米粒子组合物的所述组分。例如，脂质组分可包括一种或多种阳离子/可离子化、peg化、结构或其他脂质，例如磷脂。
[0312]
如本文所用，“接头”是连接两个部分的部分，例如帽物质的两个核苷之间的连接。接头可包括一个或多个基团，包括但不限于磷酸酯基(例如，磷酸酯、硼代磷酸酯、硫代磷酸酯、硒代磷酸酯和膦酸酯)、烷基基团、酰胺化物或甘油。例如，帽类似物的两个核苷可在其5'位置处由三磷酸酯基团或由包括两个磷酸酯部分和一个硼代磷酸酯部分的链连接。
[0313]
如本文所用，“施用方法”可包括静脉内、肌肉内、皮内、皮下或向受试者递送组合物的其他方法。可选择一种施用方法以靶向递送(例如，特异性地递送)至身体的特定区域或系统。
[0314]
如本文所用，“被修饰的”意指非天然的。例如，rna可为被修饰的rna。也就是说，rna可包括一个或多个非天然存在的核碱基、核苷、核苷酸或接头。“被修饰的”物质也可在本文中称为“改变的”物质。物质可以在化学上、在结构上或在功能上被修饰或改变。例如，被修饰的核碱基物质可包括一种或多种非天然存在的取代。
[0315]
如本文所用，“n:p比率”是例如在包括脂质组分和rna的纳米粒子组合物中的脂质中的可离子化(在生理ph范围中)氮原子与rna中的磷酸酯基的摩尔比率。
[0316]
如本文所用，“纳米粒子组合物”是包含一种或多种脂质的组合物。纳米粒子组合物的大小通常在微米或更小数量级，并且可包括脂质双层。纳米粒子组合物涵盖脂质纳米粒子(lnp)、脂质体(例如脂质囊泡)和脂质体复合物。例如，纳米粒子组合物可为含有具有500nm或更小的直径的脂质双层的脂质体。
[0317]
如本文所用，“天然存在的”意指无人工辅助而存在于自然界中。
[0318]
如本文所用，“患者”是指可寻求或需要治疗、要求治疗、正在接受治疗、将接受治疗的受试者，或处于针对特定疾病或疾患受过训练的专业人员的护理下的受试者。
[0319]
如本文所用，“peg脂质”或“peg化脂质”是指包含聚乙二醇组分的脂质。
[0320]
短语“药学上可接受”在本文中用于指在合理医学判断的范围内适合与人类和动物组织接触使用而无过量毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的效益/风险比率相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
[0321]
如本文所用，短语“药学上可接受的赋形剂”是指除本文所述的化合物以外(例如，能够悬浮、复合或溶解所述活性化合物的媒介物)并且具有在患者中基本上无毒且非炎性的特性的任何成分。赋形剂可包括例如：抗粘剂、抗氧化剂、粘合剂、包衣、压缩助剂、崩解剂、染料(色料)、软化剂、乳化剂、填充剂(稀释剂)、成膜剂或包衣、调味剂、芳香剂、助流剂(流动增强剂)、润滑剂、防腐剂、印刷油墨、吸附剂、悬浮或分散剂、甜味剂和水合水。示例性赋形剂包括但不限于：丁基化羟基甲苯(bht)、碳酸钙、磷酸钙(二碱式)、硬脂酸钙、交联羧甲纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、交联聚维酮、半胱氨酸、乙基纤维素、明胶、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁、麦芽糖醇、甘露糖醇、甲硫氨酸、甲基纤维素、对羟基苯甲酸甲酯、微晶纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮、预胶凝淀粉、对羟基苯甲酸丙酯、棕榈酸视黄酯、虫胶、二氧化硅、羧基甲基纤维素钠、柠檬酸钠、乙醇酸淀粉钠、山梨糖醇、淀粉(玉米)、硬脂酸、蔗糖、滑石、二氧化钛、维生素a、维生素e(α-生育酚)、维生素c、木糖醇和本文所公开的其他物质。
[0322]
在本说明书中，所述化合物的结构式在一些情况下为方便起见表示特定异构体，但本公开包括所有异构体，例如几何异构体、基于不对称碳的光学异构体、立体异构体、互变异构体等，应理解并非所有异构体均可具有相同活性水平。此外，关于由所述式表示的化合物，可存在晶体多态性。应注意，任何晶形、晶形混合物或其酸酐或水合物均包括于本公开的范围中。
[0323]
术语“晶体多晶型物”、“多晶型物”或“晶形”意指晶体结构，其中化合物(或其盐或溶剂化物)可以不同的晶体堆积排列结晶，所有所述晶体堆积排列均具有相同元素组成。不
同晶形通常具有不同的x射线衍射图案、红外光谱、熔点、密度硬度、晶体形状、光学和电学特性、稳定性和溶解度。重结晶溶剂、结晶速率、储存温度和其他因素可使一种晶形占优势。所述化合物的晶体多晶型物可通过在不同条件下结晶来制备。
[0324]
组合物还可包括一种或多种化合物的盐。盐可为药学上可接受的盐。如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开化合物的衍生物，其中母体化合物通过将现有酸或碱部分转化为其盐形式(例如，通过使游离碱基与合适有机酸反应)而发生改变。药学上可接受的盐的实例包括但不限于例如胺的碱性残基的无机或有机酸盐；例如羧酸的酸性残基的碱金属或有机盐；等。代表性酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟碱酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁等；以及无毒铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。本公开的药学上可接受的盐包括例如由无毒无机或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐。本公开的药学上可接受的盐可通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。一般来说，此类盐可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的量的适当碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；通常，非水性介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是优选的。
[0325]
如本文所用，“磷脂”是包括磷酸酯部分和一个或多个碳链(例如不饱和脂肪酸链)的脂质。磷脂可包括一个或多个多重(例如，双或三)键(例如，一个或多个不饱和度)。特定磷脂可促进与膜的融合。例如，阳离子磷脂可与膜(例如，细胞或细胞内膜)的一种或多种带负电荷的磷脂相互作用。磷脂与膜的融合可允许含脂质的组合物的一种或多种要素传递通过膜，从而允许例如将所述一种或多种要素递送至细胞。
[0326]
如本文所用，“多分散性指数”或“pdi”是描述系统的粒度分布的均质性的比率。例如小于0.3的小值指示狭窄粒度分布。
[0327]
如本文所用，术语“多肽”或“目标多肽”是指典型地通过肽键接合的氨基酸残基的聚合物，其可天然地(例如，经分离或经纯化)或以合成方式产生。术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用以指任何长度的氨基酸的聚合物。所述聚合物可包含被修饰的氨基酸。所述术语也涵盖已天然地或通过干预被修饰的氨基酸聚合物；例如二硫键形成、糖基化、脂质化、乙酰化、磷酸化或任何其他操纵或修饰，例如与标记组分缀合。所述定义内还包括例如含有氨基酸(包括例如非天然氨基酸，例如高半胱氨酸、鸟氨酸、对乙酰基苯基丙氨酸、d-氨基酸和肌氨酸)的一种或多种类似物以及本领域中已知的其他修饰的多肽。如本文所用，所述术语是指任何大小、结构或功能的蛋白质、多肽和肽。多肽包括经编码的多核苷酸产物、天然存在的多肽、合成多肽、前述各物的同源物、直系同源物、旁系同源物、片段和其他等同物、变体和类似物。多肽可为单体或可为多分子复合物，例如二聚体、三聚体或四聚体。其还可包含单链或多链多肽。最常见的二硫键发现于多链多肽中。术语多肽也可适用
于氨基酸聚合物，其中一个或多个氨基酸残基是相应的天然存在的氨基酸的人工化学类似物。在一些实施方案中，“肽”可为小于或等于50个氨基酸长，例如约5、10、15、20、25、30、35、40、45或50个氨基酸长。
[0328]
如本文所用，“rna”是指可天然或非天然存在的核糖核酸。例如，rna可包括被修饰和/或非天然存在的组分，例如一种或多种核碱基、核苷、核苷酸或接头。rna可包括帽结构、链终止核苷、茎环、polya序列和/或多聚腺苷酸化信号。rna可具有编码目标多肽的核苷酸序列。
[0329]
如本文所用，“dna”是指可天然或非天然存在的脱氧核糖核酸。例如，dna可为合成分子，例如体外产生的合成dna分子。在一些实施方案中，dna分子是重组分子。如本文所用，“重组dna分子”是指并非作为天然产物存在，而是使用分子生物学技术产生的dna分子。
[0330]
如本文所用，“单一单位剂量”是以一个剂量/同时/单一途径/单一接触点(即，单一施用事件)施用的任何治疗剂的剂量。
[0331]
如本文所用，“分次剂量”是将单一单位剂量或总每日剂量分成两个或更多个剂量。
[0332]
如本文所用，“总每日剂量”是以24小时时期给出或开具处方的量。其可作为单一单位剂量施用。
[0333]
如本文所用，在脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)背景中的“大小”或“平均大小”是指纳米粒子组合物的平均直径。
[0334]
如本文所用，术语“受试者”或“患者”是指可例如出于实验、诊断、预防和/或治疗目的施用根据本公开的组合物的任何生物体。典型的受试者包括动物(例如哺乳动物，例如小鼠、大鼠、兔、非人类灵长类动物和人类)和/或植物。
[0335]
如本文所用，“靶向细胞”是指任何一种或多种目标细胞。所述细胞可发现于生物体的体外、体内、原位或者组织或器官中。生物体可为动物，优选哺乳动物，更优选人类并且最优选患者。
[0336]
如本文所用，“靶组织”是指任何一种或多种目标组织类型，其中治疗剂和/或预防剂的递送将导致所需的生物和/或药理效应。目标靶组织的实例包括特定组织、器官和系统或其组。在特定应用中，靶组织可为肾脏、肺、脾脏、在血管中(例如，冠状动脉内或股动脉内)的血管内皮或肿瘤组织(例如，经由肿瘤内注射)。“脱靶组织”是指任何一种或多种组织类型，其中编码蛋白的表达不会导致所需的生物和/或药理效应。在特定应用中，脱靶组织可包括肝脏和脾脏。
[0337]
术语“治疗剂”或“预防剂”是指当施用至受试者时具有治疗、诊断和/或预防效应和/或引起所需的生物和/或药理效应的任何剂。治疗剂也称为“活性剂(active)”或“活性剂(active agent)”。所述剂包括但不限于细胞毒素、放射性离子、化学治疗剂、小分子药物、蛋白质和核酸。
[0338]
如本文所用，术语“治疗有效量”意指待递送的剂(例如，核酸、药物、组合物、治疗剂、诊断剂、预防剂等)的量，所述量当施用至患有或易经受感染、疾病、病症和/或疾患的受试者时足以治疗所述感染、疾病、病症和/或疾患，改进其症状，诊断、预防所述感染、疾病、病症和/或疾患，和/或延迟其发作。
[0339]
如本文所用，“转染”是指将物质(例如rna)引入细胞中。转染可例如体外、离体或
9,12-二烯-1-基氧基]丙-1-胺(辛基-clindma(2r))和(2s)-2-({8-[(3β)-胆固-5-烯-3-基氧基]辛基}氧基)-n,n-二甲基-3-[(9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基]丙-1-胺(辛基-clindma(2s))。除了这些脂质以外，阳离子脂质也可为包括环胺基团的脂质。
[0348]
结构脂质
[0349]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可包括一种或多种结构脂质。结构脂质可选自由但不限于胆固醇、粪固醇、植固醇、麦角固醇、菜油固醇、豆固醇、菜子固醇、西红柿碱、西红柿苷、熊果酸、α-生育酚和它们的混合物组成的组。在一些实施方案中，结构脂质是胆固醇。在一些实施方案中，结构脂质包括胆固醇和皮质类固醇(例如泼尼松龙(prednisolone)、地塞米松(dexamethasone)、泼尼松(prednisone)和氢化可的松(hydrocortisone))或它们的组合。在一些实施方案中，结构脂质是：
[0350][0351]
磷脂
[0352]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可包括一种或多种磷脂，例如一种或多种(多)不饱和脂质。磷脂可组装成一个或多个脂质双层。一般来说，磷脂可包括一个磷脂部分和一个或多个脂肪酸部分。例如，磷脂可为根据式(iv)的脂质：
[0353][0354]
其中r
p
表示磷脂部分并且ra和rb表示具有或不具有不饱和度的脂肪酸部分，所述脂肪酸部分可为相同或不同的。磷脂部分可选自由磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酸、2-溶血磷脂酰胆碱和鞘磷脂组成的非限制性组。脂肪酸部分可选自由月桂酸、肉豆蔻酸、肉豆蔻油酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚麻油酸、α-次亚麻油酸、芥子酸、植烷酸、花生酸、花生油酸、二十碳五烯酸、山嵛酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸组成的非限制性组。还预期非天然物质，包括具有包括支链、氧化、环化和炔烃在内的修饰和取代的天然物质。例如，磷脂可被一种或多种炔烃(例如，其中一个或多个双键被三键代替的烯基基团)官能化或与所述一种或多种炔烃交联。在适当反应条件下，炔烃基团可在暴露于叠氮化物时经历铜催化的环加成。此类反应可用于官能化脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的脂质双层以促进膜渗透或细胞识别，或者可用于使脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)缀合于可用组分，例如靶向或成像部分(例如染料)。
[0355]
可用于所述组合物和方法的磷脂可选自由以下组成的非限制性组：1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dspc)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dope)、1,2-二亚
油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dlpc)、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-磷酸胆碱(dmpc)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dopc)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dppc)、1,2-二(十一烷酰基)-sn-甘油-磷酸胆碱(dupc)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(popc)、1,2-二-o-十八烯基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(18:0diether pc)、1-油酰基-2-胆固醇基半琥珀酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(ochemspc)、1-十六烷基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(c16 lyso pc)、1,2-二亚麻酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二花生四烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二(二十二碳六烯酰基)-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二植烷酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(me 16.0pe)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二亚麻酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二花生四烯酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二(二十二碳六烯酰基)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)钠盐(dopg)、二棕榈酰基磷脂酰甘油(dppg)、棕榈酰基油酰基磷脂酰乙醇胺(pope)、二硬脂酰基-磷脂酰-乙醇胺(dspe)、二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(dppe)、二肉豆蔻酰基磷酸乙醇胺(dmpe)、1-硬脂酰基-2-油酰基-磷脂酰乙醇胺(sope)、1-硬脂酰基-2-油酰基-磷脂酰胆碱(sopc)、鞘磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酸、棕榈酰基油酰基磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰乙醇胺(lpe)和它们的混合物。在一些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)包括dspc。在某些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)包括dope。在一些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)包括dspc和dope两者。
[0356]
peg脂质
[0357]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可包括一种或多种peg脂质或经peg修饰的脂质。此类物质可替代地称为peg化脂质。peg脂质是经聚乙二醇修饰的脂质。peg脂质可选自由经peg修饰的磷脂酰乙醇胺、经peg修饰的磷脂酸、经peg修饰的神经酰胺(peg-cer)、经peg修饰的二烷基胺、经peg修饰的二酰基甘油(peg-deg)、经peg修饰的二烷基甘油和它们的混合物组成的非限制性组。例如，peg脂质可为peg-c-domg、peg-dmg、peg-dlpe、peg-dmpe、peg-dppc或peg-dspe脂质。
[0358]
在某些实施方案中，peg脂质选自由经peg修饰的磷脂酰乙醇胺、经peg修饰的磷脂酸、经peg修饰的神经酰胺、经peg修饰的二烷基胺、经peg修饰的二酰基甘油和经peg修饰的二烷基甘油组成的组。
[0359]
在某些实施方案中，peg脂质选自由1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油甲氧基聚乙二醇(peg-dmg)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-[氨基(聚乙二醇)](peg-dspe)、peg-二硬脂基甘油(peg-dsg)、peg-二棕榈油烯基、peg-二油烯基、peg-二硬脂基、peg-二酰基甘酰胺(peg-dag)、peg-二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(peg-dppe)或peg-1,2-二肉豆蔻基氧基丙基-3-胺(peg-c-dma)组成的组。例如，在一些实施方案中，peg脂质是peg-dmg。
[0360]
在某些实施方案中，peg脂质是式(pl-i)化合物：
[0361][0362]
或其盐，其中：
[0363]r3pl1
是-or
opl1
；
[0364]ropl1
是氢、任选被取代的烷基或氧保护基团；
[0365]rpl1
是1与100之间的整数(包括端点)；
[0366]
l1是任选被取代的c
1-10
亚烷基，其中所述任选被取代的c
1-10
亚烷基的至少一个亚甲基独立地被任选被取代的亚碳环基、任选被取代的亚杂环基、任选被取代的亚芳基、任选被取代的亚杂芳基、o、n(r
npl1
)、s、c(o)、c(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)、c(o)o、oc(o)、oc(o)o、oc(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)o或nr
npl1
c(o)n(r
npl1
)代替；
[0367]
d是通过点击化学获得的部分或在生理条件下可裂解的部分；
[0368]mpl1
是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；
[0369]
a具有下式：
[0370]
l2的每种情况独立地是键或任选被取代的c
1-6
亚烷基，其中所述任选被取代的c
1-6
亚烷基的一个亚甲基单元任选地被o、n(r
npl1
)、s、c(o)、c(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)、c(o)o、oc(o)、oc(o)o、-oc(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)o或nr
npl1
c(o)n(r
npl1
)代替；
[0371]r2sl
的每种情况独立地是任选被取代的c
1-30
烷基、任选被取代的c
1-30
烯基或任选被取代的c
1-30
炔基；任选地其中r
2sl
的一个或多个亚甲基单元独立地被任选被取代的亚碳环基、任选被取代的亚杂环基、任选被取代的亚芳基、任选被取代的亚杂芳基、n(r
npl1
)、o、s、c(o)、c(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)、-nr
npl1
c(o)n(r
npl1
)、c(o)o、oc(o)、oc(o)o、oc(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)o、c(o)s、-sc(o)、c(＝nr
npl1
)、c(＝nr
npl1
)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(＝nr
npl1
)、-nr
npl1
c(＝nr
npl1
)n(r
npl1
)、c(s)、c(s)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(s)、nr
npl1
c(s)n(r
npl1
)、s(o)、os(o)、s(o)o、os(o)o、os(o)2、s(o)2o、os(o)2o、n(r
npl1
)s(o)、s(o)n(r
npl1
)、-n(r
npl1
)s(o)n(r
npl1
)、os(o)n(r
npl1
)、n(r
npl1
)s(o)o、s(o)2、n(r
npl1
)s(o)2、-s(o)2n(r
npl1
)、n(r
npl1
)s(o)2n(r
npl1
)、os(o)2n(r
npl1
)或n(r
npl1
)s(o)2o代替；
[0372]rnpl1
的每种情况独立地是氢、任选被取代的烷基或氮保护基团；
[0373]
环b是任选被取代的碳环基、任选被取代的杂环基、任选被取代的芳基或任选被取代的杂芳基；并且
[0374]
p
sl
是1或2。
[0375]
在某些实施方案中，peg脂质是式(pl-i-oh)化合物：或其盐。
[0376]
在某些实施方案中，peg脂质是式(pl-ii-oh)化合物：
[0377]
或其盐或异构体，其中：
[0378]r3peg
是-oro；
[0379]ro
是氢、c
1-6
烷基或氧保护基团；
[0380]rpeg
是1与100之间的整数；
[0381]r5peg
是c
10-40
烷基、c
10-40
烯基或c
10-40
炔基；并且任选地r
5peg
的一个或多个亚甲基基
团独立地被c
3-10
亚碳环基、4至10元亚杂环基、c
6-10
亚芳基、4至10元亚杂芳基、-n(r
npeg
)-、-o-、-s-、-c(o)-、-c(o)n(r
npeg
)-、-nr
npeg
c(o)-、-nr
npeg
c(o)n(r
npeg
)-、-c(o)o-、-oc(o)-、-oc(o)o-、-oc(o)n(r
npeg
)-、-nr
npeg
c(o)o-、-c(o)s-、-sc(o)-、-c(＝nr
npeg
)-、-c(＝nr
npeg
)n(r
npeg
)-、-nr
npeg
c(＝nr
npeg
)-、-nr
npeg
c(＝nr
npeg
)n(r
npeg
)-、-c(s)-、-c(s)n(r
npeg
)-、-nr
npeg
c(s)-、-nr
npeg
c(s)n(r
npeg
)-、-s(o)-、-os(o)-、-s(o)o-、-os(o)o-、-os(o)
2-、-s(o)2o-、-os(o)2o-、-n(r
npeg
)s(o)-、-s(o)n(r
npeg
)-、-n(r
npeg
)s(o)n(r
npeg
)-、-os(o)n(r
npeg
)-、-n(r
npeg
)s(o)o-、-s(o)
2-、-n(r
npeg
)s(o)
2-、-s(o)2n(r
npeg
)-、-n(r
npeg
)s(o)2n(r
npeg
)-、-os(o)2n(r
npeg
)-或-n(r
npeg
)s(o)2o-代替；并且
[0382]rnpeg
的每种情况独立地是氢、c
1-6
烷基或氮保护基团。
[0383]
在某些实施方案中，在式(pl-ii-oh)的peg脂质中，r是40与50之间的整数。例如，r选自由40、41、42、43、44、45、46、47、48、49和50组成的组。例如，r是45。
[0384]
在某些实施方案中，在式(pl-ii-oh)的peg脂质中，r5是c
17
烷基。
[0385]
在某些实施方案中，peg脂质是式(pl-ii)化合物：其中r
peg
是1与100之间的整数。
[0386]
在某些实施方案中，peg脂质是式(peg-1)化合物：
[0387]
在某些实施方案中，peg脂质是式(pl-iii)化合物：
[0388]
或其盐或异构体，其中s
pl1
是1与100之间的整数。
[0389]
在某些实施方案中，peg脂质是下式的化合物：
[0390]
在某些实施方案中，式(pl-i)、(pl-i-oh)、(pl-ii)、(pl-ii-oh)、(pl-iii)、peg
2k-dmg或peg-1之一的脂质并入纳米粒子制剂中可改进脂质纳米粒子制剂的药物动力学和/或生物分布。例如，式(pl-ii-oh)、(pl-iia-oh)、(pl-ii)或peg-1之一的脂质并入纳米粒子制剂中可降低加速的血液清除(abc)效应。
[0391]
佐剂
[0392]
在一些实施方案中，包括本文所述的一种或多种脂质的脂质纳米粒子(例如空lnp
或负载lnp)还可包括一种或多种佐剂，例如吡喃葡萄糖基脂质佐剂(gla)、cpg寡脱氧核苷酸(例如a或b类)、poly(i:c)、氢氧化铝和pam3csk4。
[0393]
治疗剂
[0394]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可包括一种或多种治疗剂和/或预防剂。本公开提供了向哺乳动物细胞或器官递送治疗剂和/或预防剂、在哺乳动物细胞中产生目标多肽以及治疗有需要的哺乳动物的疾病或病症的方法，所述方法包括向哺乳动物施用包括治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和/或使哺乳动物细胞与包括治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)接触。
[0395]
治疗剂和/或预防剂包括生物学活性物质并且替代地称为“活性剂”。治疗剂和/或预防剂可为一旦递送至细胞或器官就在所述细胞、器官或其他身体组织或系统中引起所需变化的物质。此类物质可用于治疗一种或多种疾病、病症或疾患。在一些实施方案中，治疗剂和/或预防剂是可用于治疗特定疾病、病症或疾患的小分子药物。
[0396]
在一些实施方案中，治疗剂和/或预防剂是疫苗、引起免疫反应的化合物(例如，编码蛋白质或多肽或肽的多核苷酸或核酸分子或者蛋白质或多肽或肽)和/或另一治疗剂和/或预防剂。疫苗包括能够提供针对与传染病相关的一种或多种疾患的免疫性的化合物和制剂并且可包括编码传染病源性抗原和/或表位的mrna。疫苗还包括指导针对癌细胞的免疫反应的化合物和制剂并且可包括编码肿瘤细胞源性抗原、表位和/或新表位的mrna。在一些实施方案中，疫苗和/或能够引起免疫反应的化合物经由本公开组合物经肌肉内施用。
[0397]
在其他实施方案中，治疗剂和/或预防剂是蛋白质，例如增加或代替天然存在的目标蛋白质所需的蛋白质。此类蛋白质或多肽可为天然存在的，或者可使用本领域中已知的方法进行修饰，例如以延长半衰期。示例性蛋白质是细胞内、跨膜或分泌性的。
[0398]
多核苷酸和核酸
[0399]
在一些实施方案中，治疗剂是增强(即，增加、刺激、上调)蛋白质表达的剂。可用于增强蛋白质表达的治疗剂类型的非限制性实例包括rna、mrna、dsrna、crispr/cas9技术、ssdna和dna(例如表达载体)。上调蛋白质表达的剂可上调天然存在或非天然存在的蛋白质(例如已被修饰以改进半衰期的嵌合蛋白，或包含所需氨基酸变化的蛋白质)的表达。示例性蛋白质包括细胞内、跨膜或分泌性蛋白质、肽或多肽。
[0400]
在一些实施方案中，治疗剂是dna治疗剂。dna分子可为双链dna、单链dna(ssdna)或作为部分双链dna的分子(即，具有双链部分和单链部分)。在一些情况下，dna分子是三链的或是部分三链的(即，具有三链部分和双链部分)。dna分子可为环状dna分子或线性dna分子。
[0401]
dna治疗剂可为能够将基因转移至细胞中，例如编码转录物并且可表达转录物的dna分子。在其他实施方案中，dna分子是合成分子，例如体外产生的合成dna分子。在一些实施方案中，dna分子是重组分子。非限制性示例性dna治疗剂包括质粒表达载体和病毒表达载体。
[0402]
本文所述的dna治疗剂(例如dna载体)可包括多种不同特征。本文所述的dna治疗剂(例如dna载体)可包括非编码dna序列。例如，dna序列可包括针对基因的至少一种调控元件，例如启动子、增强子、终止元件、多聚腺苷酸化信号元件、剪接信号元件等。在一些实施方案中，非编码dna序列是内含子。在一些实施方案中，非编码dna序列是转座子。在一些实
施方案中，本文所述的dna序列可具有可操作性连接至转录活性基因的非编码dna序列。在其他实施方案中，本文所述的dna序列可具有未连接至基因的非编码dna序列，即所述非编码dna不调控所述dna序列上的基因。
[0403]
在一些实施方案中，在本公开的负载lnp中，所述一种或多种治疗剂和/或预防剂是核酸。在一些实施方案中，所述一种或多种治疗剂和/或预防剂选自由核糖核酸(rna)和脱氧核糖核酸(dna)组成的组。
[0404]
例如，在一些实施方案中，当所述治疗剂和/或预防剂是dna时，所述dna选自由双链dna、单链dna(ssdna)、部分双链dna、三链dna和部分三链dna组成的组。在一些实施方案中，所述dna选自由环状dna、线性dna和它们的混合物组成的组。
[0405]
在一些实施方案中，在本公开的负载lnp中，所述一种或多种治疗剂和/或预防剂选自由质粒表达载体、病毒表达载体和它们的混合物组成的组。
[0406]
例如，在一些实施方案中，当所述治疗剂和/或预防剂是rna时，所述rna选自由单链rna、双链rna(dsrna)、部分双链rna和它们的混合物组成的组。在一些实施方案中，所述rna选自由环状rna、线性rna和它们的混合物组成的组。
[0407]
例如，在一些实施方案中，当所述治疗剂和/或预防剂是rna时，所述rna选自由短干扰rna(sirna)、不对称干扰rna(airna)、rna干扰(rnai)分子、微小rna(mirna)、antagomir、反义rna、核酶、dicer-底物rna(dsrna)、小发夹rna(shrna)、信使rna(mrna)、锁核酸(lna)和crispr/cas9技术和它们的混合物组成的组。
[0408]
例如，在一些实施方案中，当所述治疗剂和/或预防剂是rna时，所述rna选自由小干扰rna(sirna)、不对称干扰rna(airna)、微小rna(mirna)、dicer-底物rna(dsrna)、小发夹rna(shrna)、信使rna(mrna)和它们的混合物组成的组。
[0409]
在一些实施方案中，所述一种或多种治疗剂和/或预防剂是mrna。在一些实施方案中，所述一种或多种治疗剂和/或预防剂是被修饰的mrna(mmrna)。
[0410]
在一些实施方案中，所述一种或多种治疗剂和/或预防剂是并入微小rna结合位点(mir结合位点)的mrna。此外，在一些实施方案中，mrna包括茎环、链终止核苷、polya序列、多聚腺苷酸化信号和/或5'帽结构中的一者或多者。
[0411]
mrna可为天然或非天然存在的mrna。mrna可包括一个或多个如下文所述的被修饰的核碱基、核苷或核苷酸，在所述情况下其可被称为“被修饰的mrna”或“mmrna”。如本文所述，“核苷”被定义为含有与有机碱(例如，嘌呤或嘧啶)或其衍生物(本文中也称为“核碱基”)组合的糖分子(例如，戊糖或核糖)或其衍生物的化合物。如本文所述，“核苷酸”被定义为包括磷酸酯基的核苷。
[0412]
mrna可包括5'非翻译区(5'-utr)、3'非翻译区(3'-utr)和/或编码区(例如开放阅读框)。mrna可包括任何合适数目的碱基对，包括数十个(例如，10、20、30、40、50、60、70、80、90或100个)、数百个(例如，200、300、400、500、600、700、800或900个)或数千个(例如，1000、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10,000个)碱基对。任何数目(例如，全部、一些或无)的核碱基、核苷或核苷酸均可为规范物质的类似物，被取代、被修饰或以其他方式非天然存在。在某些实施方案中，特定核碱基类型的全部可被修饰。在一些实施方案中，全部尿嘧啶或尿苷均被修饰。当全部核碱基、核苷或核苷酸被修饰(例如，全部尿嘧啶或尿苷)时，所述mrna可被称为“完全被修饰”，例如针对尿嘧啶或尿苷。
[0413]
在一些实施方案中，如本文所述的mrna可包括5'帽结构、链终止核苷酸、任选地kozak序列(也称为kozak共有序列)、茎环、polya序列和/或多聚腺苷酸化信号。
[0414]
5'帽结构或帽物质是包括通过接头接合的两个核苷部分的化合物并且可选自天然存在的帽、非天然存在的帽或帽类似物或抗-反向帽类似物(arca)。帽物质可包括一个或多个被修饰核苷和/或接头部分。例如，天然mrna帽可包括鸟嘌呤核苷酸和在7位置处甲基化的鸟嘌呤(g)核苷酸，由所述核苷酸的5'位置处的三磷酸酯键接合，例如m7g(5')ppp(5')g，通常书写为m7gpppg。帽物质还可为抗-反向帽类似物。可能的帽物质的非限制性列表包括m7gpppg、m7gpppm7g、m73'dgpppg、m27,o3'gpppg、m27,o3'gppppg、m27,o2'gppppg、m7gpppm7g、m73'dgpppg、m27,o3'gpppg、m27,o3'gppppg和m27,o2'gppppg。
[0415]
mrna可替代地或另外包括链终止核苷。例如，链终止核苷可包括在其糖基的2'和/或3'位置处脱氧的那些核苷。此类物质可包括3'脱氧腺苷(蛹虫草菌素(cordycepin))、3'脱氧尿苷、3'脱氧胞嘧啶、3'脱氧鸟苷、3'脱氧胸腺嘧啶和2',3'二脱氧核苷(例如2',3'二脱氧腺苷、2',3'二脱氧尿苷、2',3'二脱氧胞嘧啶、2',3'二脱氧鸟苷和2',3'二脱氧胸腺嘧啶)。在一些实施方案中，将链终止核苷酸并入mrna中例如3'-末端处可实现mrna的稳定化。
[0416]
mrna可替代地或另外包括茎环，例如组蛋白茎环。茎环可包括2、3、4、5、6、7、8个或更多个核苷酸碱基对。例如，茎环可包括4、5、6、7或8个核苷酸碱基对。茎环可位于mrna的任何区域中。例如，茎环可位于非翻译区(5'非翻译区或3'非翻译区)、编码区或polya序列或尾端中、之前或之后。在一些实施方案中，茎环可影响mrna的一种或多种功能，例如翻译起始、翻译效率和/或转录终止。
[0417]
mrna可替代地或另外包括polya序列和/或多聚腺苷酸化信号。polya序列可完全地或主要包含腺嘌呤核苷酸或其类似物或衍生物。poly a序列还可包含稳定化核苷酸或类似物。例如，poly a序列可包括脱氧胸苷作为稳定化核苷酸或类似物，例如反向(或反向键)脱氧胸苷(dt)。关于使用反向dt和其他稳定化poly a序列修饰的细节可见于例如wo2017/049275a2中，所述文件的内容通过引用并入本文。polya序列可为与mrna的3'非翻译区相邻定位的尾端。在一些实施方案中，polya序列可影响mrna的核输出、翻译和/或稳定性。
[0418]
mrna可替代地或另外包括微小rna结合位点。微小rna结合位点(或mir结合位点)可用于调控多种组织或细胞类型中的mrna表达。在示例性实施方案中，mir结合位点被工程改造至mrna的3'utr序列中以调控(例如，增强)mrna在表达同源mir的细胞或组织中的降解。此种调控可用于调控或控制mrna的“脱靶”表达，即在体内非所需细胞或组织中的表达。关于使用mir结合位点的细节可见于例如wo 2017/062513 a2中，所述文件的内容通过引用并入本文。
[0419]
在一些实施方案中，mrna是包含第一编码区和第二编码区的双顺反子mrna，所述编码区具有包含允许第一编码区与第二编码区之间的内部翻译起始的内部核糖体进入位点(ires)序列的介入序列，或具有编码自裂解肽(例如2a肽)的介入序列。ires序列和2a肽典型地用于增强来自同一载体的多种蛋白质的表达。多种ires序列是已知的并且在本领域中可获得并且可加以使用，包括例如脑心肌炎病毒ires。
[0420]
在一些实施方案中，本公开的mrna包含一个或多个被修饰的核碱基、核苷或核苷酸(称为“被修饰的mrna”或“mmrna”)。在一些实施方案中，被修饰的mrna可具有适用特性，包括如与参考未修饰mrna相比，增强的稳定性、细胞内保留、增强的翻译和/或缺乏其中引
入所述mrna的细胞的先天免疫反应的实质诱导。因此，被修饰mrna的使用可增强蛋白质产生效率、核酸的细胞内保留，以及具有降低的免疫原性。
[0421]
在一些实施方案中，mrna包括一个或多个(例如，1、2、3或4个)不同的被修饰的核碱基、核苷或核苷酸。在一些实施方案中，mrna包括一个或多个(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100个或更多个)不同的被修饰的核碱基、核苷或核苷酸。在一些实施方案中，相对于相应的未修饰mrna，被修饰mrna可在其中引入所述mrna的细胞中具有降低的降解。
[0422]
在一些实施方案中，被修饰的核碱基是被修饰的尿嘧啶。具有被修饰的尿嘧啶的示例性核碱基和核苷包括假尿苷(ψ)、吡啶-4-酮核糖核苷、5-氮杂-尿苷、6-氮杂-尿苷、2-硫代-5-氮杂-尿苷、2-硫代-尿苷(s2u)、4-硫代-尿苷(s4u)、4-硫代-假尿苷、2-硫代-假尿苷、5-羟基-尿苷(ho5u)、5-氨基烯丙基-尿苷、5-卤基-尿苷(例如，5-碘-尿苷或5-溴-尿苷)、3-甲基-尿苷(m3u)、5-甲氧基-尿苷(mo5u)、尿苷5-氧乙酸(cmo5u)、尿苷5-氧乙酸甲酯(mcmo5u)、5-羧基甲基-尿苷(cm5u)、1-羧基甲基-假尿苷、5-羧基羟基甲基-尿苷(chm5u)、5-羧基羟基甲基-尿苷甲酯(mchm5u)、5-甲氧基羰基甲基-尿苷(mcm5u)、5-甲氧基羰基甲基-2-硫代-尿苷(mcm5s2u)、5-氨基甲基-2-硫代-尿苷(nm5s2u)、5-甲基氨基甲基-尿苷(mnm5u)、5-甲基氨基甲基-2-硫代-尿苷(mnm5s2u)、5-甲基氨基甲基-2-硒代-尿苷(mnm5se2u)、5-氨甲酰基甲基-尿苷(ncm5u)、5-羧基甲基氨基甲基-尿苷(cmnm5u)、5-羧基甲基氨基甲基-2-硫代-尿苷(cmnm5s2u)、5-丙炔基-尿苷、1-丙炔基-假尿苷、5-牛磺酰甲基-尿苷(τm5u)、1-牛磺酰甲基-假尿苷、5-牛磺酰甲基-2-硫代-尿苷(τm5s2u)、1-牛磺酰甲基-4-硫代-假尿苷、5-甲基-尿苷(m5u，即具有核碱基脱氧胸腺嘧啶)、1-甲基-假尿苷(m1ψ)、5-甲基-2-硫代-尿苷(m5s2u)、1-甲基-4-硫代-假尿苷(m1s4ψ)、4-硫代-1-甲基-假尿苷、3-甲基-假尿苷(m3ψ)、2-硫代-1-甲基-假尿苷、1-甲基-1-脱氮-假尿苷、2-硫代-1-甲基-1-脱氮-假尿苷、二氢尿苷(d)、二氢假尿苷、5,6-二氢尿苷、5-甲基-二氢尿苷(m5d)、2-硫代-二氢尿苷、2-硫代-二氢假尿苷、2-甲氧基-尿苷、2-甲氧基-4-硫代-尿苷、4-甲氧基-假尿苷、4-甲氧基-2-硫代-假尿苷、n1-甲基-假尿苷、3-(3-氨基-3-羧基丙基)尿苷(acp3u)、1-甲基-3-(3-氨基-3-羧基丙基)假尿苷(acp3ψ)、5-(异戊烯基氨基甲基)尿苷(inm5u)、5-(异戊烯基氨基甲基)-2-硫代-尿苷(inm5s2u)、α-硫代-尿苷、2'-o-甲基-尿苷(um)、5,2'-o-二甲基-尿苷(m5um)、2'-o-甲基-假尿苷(ψm)、2-硫代-2'-o-甲基-尿苷(s2um)、5-甲氧基羰基甲基-2'-o-甲基-尿苷(mcm5um)、5-氨甲酰基甲基-2'-o-甲基-尿苷(ncm5um)、5-羧基甲基氨基甲基-2'-o-甲基-尿苷(cmnm5um)、3,2'-o-二甲基-尿苷(m3um)和5-(异戊烯基氨基甲基)-2'-o-甲基-尿苷(inm5um)、1-硫代-尿苷、脱氧胸苷、2'-f-阿拉伯糖-尿苷、2'-f-尿苷、2'-oh-阿拉伯糖-尿苷、5-(2-甲氧羰基乙烯基)尿苷和5-[3-(1-e-丙烯基氨基)]尿苷。
[0423]
在一些实施方案中，被修饰的核碱基是被修饰的胞嘧啶。具有被修饰的胞嘧啶的示例性核碱基和核苷包括5-氮杂-胞苷、6-氮杂-胞苷、假异胞苷、3-甲基-胞苷(m3c)、n4-乙酰基-胞苷(ac4c)、5-甲酰基-胞苷(f5c)、n4-甲基-胞苷(m4c)、5-甲基-胞苷(m5c)、5-卤基-胞苷(例如5-碘-胞苷)、5-羟基甲基-胞苷(hm5c)、1-甲基-假异胞苷、吡咯并-胞苷、吡咯并-假异胞苷、2-硫代-胞苷(s2c)、2-硫代-5-甲基-胞苷、4-硫代-假异胞苷、4-硫代-1-甲基-假异胞苷、4-硫代-1-甲基-1-脱氮-假异胞苷、1-甲基-1-脱氮-假异胞苷、泽布拉林
(zebularine)、5-氮杂-泽布拉林、5-甲基-泽布拉林、5-氮杂-2-硫代-泽布拉林、2-硫代-泽布拉林、2-甲氧基-胞苷、2-甲氧基-5-甲基-胞苷、4-甲氧基-假异胞苷、4-甲氧基-1-甲基-假异胞苷、立西啶(lysidine，k2c)、α-硫代-胞苷、2'-o-甲基-胞苷(cm)、5,2'-o-二甲基-胞苷(m5cm)、n4-乙酰基-2'-o-甲基-胞苷(ac4cm)、n4,2'-o-二甲基-胞苷(m4cm)、5-甲酰基-2'-o-甲基-胞苷(f5cm)、n4,n4,2'-o-三甲基-胞苷(m42cm)、1-硫代-胞苷、2'-f-阿拉伯糖-胞苷、2'-f-胞苷和2'-oh-阿拉伯糖-胞苷。
[0424]
在一些实施方案中，被修饰的核碱基是被修饰的腺嘌呤。具有被修饰的腺嘌呤的示例性核碱基和核苷包括a-硫代-腺苷、2-氨基-嘌呤、2,6-二氨基嘌呤、2-氨基-6-卤基-嘌呤(例如2-氨基-6-氯-嘌呤)、6-卤基-嘌呤(例如6-氯-嘌呤)、2-氨基-6-甲基-嘌呤、8-叠氮基-腺苷、7-脱氮-腺嘌呤、7-脱氮-8-氮杂-腺嘌呤、7-脱氮-2-氨基-嘌呤、7-脱氮-8-氮杂-2-氨基-嘌呤、7-脱氮-2,6-二氨基嘌呤、7-脱氮-8-氮杂-2,6-二氨基嘌呤、1-甲基-腺苷(m1a)、2-甲基-腺嘌呤(m2a)、n6-甲基-腺苷(m6a)、2-甲基硫代-n6-甲基-腺苷(ms2m6a)、n6-异戊烯基-腺苷(i6a)、2-甲基硫代-n6-异戊烯基-腺苷(ms2i6a)、n6-(顺-羟基异戊烯基)腺苷(io6a)、2-甲基硫代-n6-(顺-羟基异戊烯基)腺苷(ms2io6a)、n6-甘氨酰基氨甲酰基-腺苷(g6a)、n6-苏氨酰基氨甲酰基-腺苷(t6a)、n6-甲基-n6-苏氨酰基氨甲酰基-腺苷(m6t6a)、2-甲基硫代-n6-苏氨酰基氨甲酰基-腺苷(ms2g6a)、n6,n6-二甲基-腺苷(m62a)、n6-羟基正缬氨酰基氨甲酰基-腺苷(hn6a)、2-甲基硫代-n6-羟基正缬氨酰基氨甲酰基-腺苷(ms2hn6a)、n6-乙酰基-腺苷(ac6a)、7-甲基-腺嘌呤、2-甲基硫代-腺嘌呤、2-甲氧基-腺嘌呤、α-硫代-腺苷、2'-o-甲基-腺苷(am)、n6,2'-o-二甲基-腺苷(m6am)、n6,n6,2'-o-三甲基-腺苷(m62am)、1,2'-o-二甲基-腺苷(m1am)、2'-o-核糖基腺苷(磷酸酯)(ar(p))、2-氨基-n6-甲基-嘌呤、1-硫代-腺苷、8-叠氮基-腺苷、2'-f-阿拉伯糖-腺苷、2'-f-腺苷、2'-oh-阿拉伯糖-腺苷和n6-(19-氨基-五氧杂十九烷基)-腺苷。
[0425]
在一些实施方案中，被修饰的核碱基是被修饰的鸟嘌呤。具有被修饰的鸟嘌呤的示例性核碱基和核苷包括a-硫代-鸟苷、肌苷(i)、1-甲基-肌苷(m1i)、怀俄苷(img)、甲基怀俄苷(mimg)、4-去甲基-怀俄苷(img-14)、异怀俄苷(img2)、怀丁苷(yw)、过氧怀丁苷(o2yw)、羟基怀丁苷(ohyw)、修饰不足的羟基怀丁苷(ohyw*)、7-脱氮-鸟苷、辫苷(q)、环氧辫苷(oq)、半乳糖基-辫苷(galq)、甘露糖基-辫苷(manq)、7-氰基-7-脱氮-鸟苷(preq0)、7-氨基甲基-7-脱氮-鸟苷(preq1)、古嘌苷(g )、7-脱氮-8-氮杂-鸟苷、6-硫代-鸟苷、6-硫代-7-脱氮-鸟苷、6-硫代-7-脱氮-8-氮杂-鸟苷、7-甲基-鸟苷(m7g)、6-硫代-7-甲基-鸟苷、7-甲基-肌苷、6-甲氧基-鸟苷、1-甲基-鸟苷(m1g)、n2-甲基-鸟苷(m2g)、n2,n2-二甲基-鸟苷(m22g)、n2,7-二甲基-鸟苷(m2,7g)、n2,n2,7-二甲基-鸟苷(m2,2,7g)、8-氧代-鸟苷、7-甲基-8-氧代-鸟苷、1-甲基-6-硫代-鸟苷、n2-甲基-6-硫代-鸟苷、n2,n2-二甲基-6-硫代-鸟苷、α-硫代-鸟苷、2'-o-甲基-鸟苷(gm)、n2-甲基-2'-o-甲基-鸟苷(m2gm)、n2,n2-二甲基-2'-o-甲基-鸟苷(m22gm)、1-甲基-2'-o-甲基-鸟苷(m1gm)、n2,7-二甲基-2'-o-甲基-鸟苷(m2,7gm)、2'-o-甲基-肌苷(im)、1,2'-o-二甲基-肌苷(m1im)、2'-o-核糖基鸟苷(磷酸酯)(gr(p))、1-硫代-鸟苷、o6-甲基-鸟苷、2'-f-阿拉伯糖-鸟苷和2'-f-鸟苷。
[0426]
在一些实施方案中，本公开的mrna包括一种或多种前述被修饰的核碱基的组合(例如，2、3或4种前述被修饰的核碱基的组合)。
[0427]
在一些实施方案中，被修饰的核碱基是假尿苷(ψ)、n1-甲基假尿苷(m1ψ)、2-硫代
尿苷、4'-硫代尿苷、5-甲基胞嘧啶、2-硫代-1-甲基-1-脱氮-假尿苷、2-硫代-1-甲基-假尿苷、2-硫代-5-氮杂-尿苷、2-硫代-二氢假尿苷、2-硫代-二氢尿苷、2-硫代-假尿苷、4-甲氧基-2-硫代-假尿苷、4-甲氧基-假尿苷、4-硫代-1-甲基-假尿苷、4-硫代-假尿苷、5-氮杂-尿苷、二氢假尿苷、5-甲氧基尿苷或2'-o-甲基尿苷。在一些实施方案中，本公开的mrna包括一种或多种前述被修饰的核碱基的组合(例如，2、3或4种前述被修饰的核碱基的组合)。在一些实施方案中，被修饰的核碱基是n1-甲基假尿苷(m1ψ)并且本公开的mrna是完全地被n1-甲基假尿苷(m1ψ)修饰。在一些实施方案中，n1-甲基假尿苷(m1ψ)表示mrna中的75-100％尿嘧啶。在一些实施方案中，n1-甲基假尿苷(m1ψ)表示mrna中的100％尿嘧啶。
[0428]
在一些实施方案中，被修饰的核碱基是被修饰的胞嘧啶。具有被修饰的胞嘧啶的示例性核碱基和核苷包括n4-乙酰基-胞苷(ac4c)、5-甲基-胞苷(m5c)、5-卤基-胞苷(例如5-碘-胞苷)、5-羟基甲基-胞苷(hm5c)、1-甲基-假异胞苷、2-硫代-胞苷(s2c)、2-硫代-5-甲基-胞苷。在一些实施方案中，本公开的mrna包括一种或多种前述被修饰的核碱基的组合(例如，2、3或4种前述被修饰的核碱基的组合)。
[0429]
在一些实施方案中，被修饰的核碱基是被修饰的腺嘌呤。具有被修饰的腺嘌呤的示例性核碱基和核苷包括7-脱氮-腺嘌呤、1-甲基-腺苷(m1a)、2-甲基-腺嘌呤(m2a)、n6-甲基-腺苷(m6a)。在一些实施方案中，本公开的mrna包括一种或多种前述被修饰的核碱基的组合(例如，2、3或4种前述被修饰的核碱基的组合)。
[0430]
在一些实施方案中，被修饰的核碱基是被修饰的鸟嘌呤。具有被修饰的鸟嘌呤的示例性核碱基和核苷包括肌苷(i)、1-甲基-肌苷(m1i)、怀俄苷(img)、甲基怀俄苷(mimg)、7-脱氮-鸟苷、7-氰基-7-脱氮-鸟苷(preq0)、7-氨基甲基-7-脱氮-鸟苷(preq1)、7-甲基-鸟苷(m7g)、1-甲基-鸟苷(m1g)、8-氧代-鸟苷、7-甲基-8-氧代-鸟苷。在一些实施方案中，本公开的mrna包括一种或多种前述被修饰的核碱基的组合(例如，2、3或4种前述被修饰的核碱基的组合)。
[0431]
在一些实施方案中，被修饰的核碱基是1-甲基-假尿苷(m1ψ)、5-甲氧基-尿苷(mo5u)、5-甲基-胞苷(m5c)、假尿苷(ψ)、α-硫代-鸟苷或α-硫代-腺苷。在一些实施方案中，本公开的mrna包括一种或多种前述被修饰的核碱基的组合(例如，2、3或4种前述被修饰的核碱基的组合)。
[0432]
在一些实施方案中，mrna包含假尿苷(ψ)。在一些实施方案中，mrna包含假尿苷(ψ)和5-甲基-胞苷(m5c)。在一些实施方案中，mrna包含1-甲基-假尿苷(m1ψ)。在一些实施方案中，mrna包含1-甲基-假尿苷(m1ψ)和5-甲基-胞苷(m5c)。在一些实施方案中，mrna包含2-硫代尿苷(s2u)。在一些实施方案中，mrna包含2-硫代尿苷和5-甲基-胞苷(m5c)。在一些实施方案中，mrna包含5-甲氧基-尿苷(mo5u)。在一些实施方案中，mrna包含5-甲氧基-尿苷(mo5u)和5-甲基-胞苷(m5c)。在一些实施方案中，mrna包含2'-o-甲基尿苷。在一些实施方案中，mrna包含2'-o-甲基尿苷和5-甲基-胞苷(m5c)。在一些实施方案中，mrna包含n6-甲基-腺苷(m6a)。在一些实施方案中，mrna包含n6-甲基-腺苷(m6a)和5-甲基-胞苷(m5c)。
[0433]
在某些实施方案中，本公开的mrna是针对特定修饰均一地被修饰(即，完全被修饰、通过整个序列修饰)。例如，mrna可均一地被n1-甲基假尿苷(m1ψ)或5-甲基-胞苷(m5c)修饰，意指mrna序列中的所有尿苷或所有胞嘧啶核苷均被n1-甲基假尿苷(m1ψ)或5-甲基-胞苷(m5c)代替。类似地，本公开的mrna可通过用被修饰残基(例如上文所陈述的那些)代替
而针对存在于所述序列中的任何类型的核苷残基均一地被修饰。
[0434]
在一些实施方案中，本公开的mrna可在编码区(例如，编码多肽的开发阅读框)中被修饰。在其他实施方案中，mrna可在除编码区之外的区中被修饰。例如，在一些实施方案中，提供5'-utr和/或3'-utr，其中任一者或两者可独立地含有一种或多种不同的核苷修饰。在此类实施方案中，核苷修饰还可存在于编码区中。
[0435]
本公开的mmrna可包括针对糖、核碱基和/或核苷间键的修饰的组合。这些组合可包括本文所述的任何一种或多种修饰。
[0436]
在列出单一修饰的情况下，所列出的核苷或核苷酸表示100％的所述a、u、g或c核苷酸或核苷已被修饰。在列出百分率的情况下，这些表示所存在的a、u、g或c三磷酸酯的总量中所述百分率的所述特定a、u、g或c核碱基三磷酸酯。例如，组合：25％5-氨基烯丙基-ctp 75％ctp/25％5-甲氧基-utp 75％utp是指多核苷酸，其中25％的胞嘧啶三磷酸酯是5-氨基烯丙基-ctp，而75％的胞嘧啶是ctp；而25％的尿嘧啶是5-甲氧基utp，而75％的尿嘧啶是utp。在未列出被修饰utp的情况下，则天然存在的atp、utp、gtp和/或ctp用于所述多核苷酸中发现的那些核苷酸的100％位点中。在此实例中，所有gtp和atp均保持未被修饰。
[0437]
本公开的mrna或其区域可经密码子优化。密码子优化方法是本领域中已知的并且可用于多种目的：匹配宿主生物体中的密码子频率以确保适当折叠，使gc含量产生偏好以增加mrna稳定性或降低二级结构，使可削弱基因建构或表达的串联重复序列密码子或碱基连串降至最低，定制转录和翻译控制区，插入或去除蛋白质转运序列，去除/添加编码蛋白中的翻译后修饰位点(例如糖基化位点)，添加、去除或改组蛋白结构域，插入或删除限制位点，修饰核糖体结合位点和mrna降解位点，调节翻译速率以允许蛋白质的多个结构域适当地折叠，或降低或消除多核苷酸内的问题二级结构。密码子优化工具、算法和服务是本领域中已知的；非限制性实例包括来自geneart(life technologies)、dna2.0(menlo park,ca)的服务和/或专属方法。在一些实施方案中，mrna序列使用优化算法进行优化，例如以优化哺乳动物细胞中的表达或增强mrna稳定性。
[0438]
在某些实施方案中，本公开包括与任何本文所述的多核苷酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的多核苷酸。
[0439]
本公开的mrna可通过本领域中可获得的方式，包括但不限于体外转录(ivt)和合成方法产生。可使用酶促(ivt)、固相、液相、组合合成方法、小区合成和接合方法。在一些实施方案中，mrna使用ivt酶促合成方法制得。因此，本公开还包括可用于体外转录本文所述的mrna的多核苷酸，例如dna、构建体和载体。
[0440]
非天然修饰的核碱基可在合成期间或合成后引入多核苷酸(例如，mrna)中。在某些实施方案中，修饰可在核苷间键、嘌呤或嘧啶碱基或糖上。在特定实施方案中，修饰可引入在多核苷酸链的末端处或所述多核苷酸链中的任何其他位置；使用化学合成或使用聚合酶。
[0441]
酶促或化学接合方法可用于使多核苷酸或其区域与不同的功能部分(例如靶向或递送剂、荧光标记、液体、纳米粒子等)缀合。用于降低蛋白质表达的治疗剂
[0442]
在一些实施方案中，治疗剂是降低(即，减少、抑制、下调)蛋白质表达的治疗剂。可用于降低蛋白质表达的治疗剂的类型的非限制性实例包括并入微小rna结合位点(mir结合位点)的mrna、微小rna(mirna)、antagomir、小(短)干扰rna(sirna)(包括短聚物
(shortmer)和dicer-底物rna)、rna干扰(rnai)分子、反义rna、核酶、小发夹rna(shrna)、锁核酸(lna)和crispr/cas9技术。
[0443]
肽/多肽治疗剂
[0444]
在一些实施方案中，治疗剂是肽治疗剂。在一些实施方案中，治疗剂是多肽治疗剂。
[0445]
在一些实施方案中，所述肽或多肽是天然来源的，例如从天然来源分离。在其他实施方案中，所述肽或多肽是合成分子，例如体外产生的合成肽或多肽。在一些实施方案中，所述肽或多肽是重组分子。在一些实施方案中，所述肽或多肽是嵌合分子。在一些实施方案中，所述肽或多肽是融合分子。在一些实施方案中，所述组合物的肽或多肽治疗剂是天然存在的肽或多肽。在一些实施方案中，所述组合物的肽或多肽治疗剂是天然存在的肽或多肽的修饰形式(例如，与其野生型、天然存在的肽或多肽对应物相比，含有少于3个、少于5个、少于10个、少于15个、少于20个或少于25个氨基酸取代、缺失或添加)。
[0446]
在一些实施方案中，在本公开的负载lnp中，所述一种或多种治疗剂和/或预防剂是多核苷酸或多肽。
[0447]
其他组分
[0448]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可包括一种或多种除前述部分中所述的那些以外的组分。例如，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可包括一种或多种小疏水性分子，例如维生素(例如，维生素a或维生素e)或固醇。
[0449]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)还可包括一种或多种渗透性增强剂分子、碳水化合物、聚合物、表面改变剂或其他组分。碳水化合物可包括单糖(例如葡萄糖)和多糖(例如糖原和其衍生物和类似物)。
[0450]
聚合物可包括于纳米粒子组合物中和/或用于囊封或部分地囊封纳米粒子组合物。聚合物可为生物可降解的和/或生物相容性的。聚合物可选自但不限于聚胺、聚醚、聚酰胺、聚酯、聚氨基甲酸酯(polycarbamate)、聚脲、聚碳酸酯、聚苯乙烯、聚酰亚胺、聚砜、聚氨酯(polyurethane)、聚乙炔、聚乙烯、聚乙烯亚胺、聚异氰酸酯、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯腈和聚丙烯酸酯。例如，聚合物可包括聚(己内酯)(pcl)、乙烯乙酸乙烯酯聚合物(eva)、聚(乳酸)(pla)、聚(l-乳酸)(plla)、聚(乙醇酸)(pga)、聚(乳酸-共-乙醇酸)(plga)、聚(l-乳酸-共-乙醇酸)(pllga)、聚(d,l-丙交酯)(pdla)、聚(l-丙交酯)(plla)、聚(d,l-丙交酯-共-己内酯)、聚(d,l-丙交酯-共-己内酯-共-乙交酯)、聚(d,l-丙交酯-共-peo-共-d,l-丙交酯)、聚(d,l-丙交酯-共-ppo-共-d,l-丙交酯)、聚氰基丙烯酸烷酯、聚氨酯、聚-l-赖氨酸(pll)、甲基丙烯酸羟基丙酯(hpma)、聚乙二醇、聚-l-谷氨酸、聚(羟基酸)、聚酸酐、聚原酸酯、聚(酯酰胺)、聚酰胺、聚(酯醚)、聚碳酸酯、聚亚烷基(例如聚乙烯和聚丙烯)、聚亚烷基二醇(例如聚(乙二醇)(peg))、聚氧化烯(peo)、聚对苯二甲酸亚烷基酯(例如聚(对苯二甲酸乙二酯))、聚乙烯醇(pva)、聚乙烯醚、聚乙烯酯(例如聚(乙酸乙烯酯))、聚卤化乙烯(例如聚(氯乙烯)(pvc))、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、聚硅氧烷、聚苯乙烯(ps)、聚氨酯、衍生化纤维素(例如烷基纤维素、羟基烷基纤维素、纤维素醚、纤维素酯、硝基纤维素、羟基丙基纤维素、羧基甲基纤维素)、丙烯酸聚合物(例如聚((甲基)丙烯酸甲酯)(pmma)、聚((甲基)丙烯酸乙酯)、聚((甲基)丙烯酸丁酯)、聚((甲基)丙烯酸异丁酯)、聚((甲基)丙烯酸己酯)、聚((甲基)丙烯酸异癸酯)、聚((甲基)丙烯酸月桂酯)、聚((甲基)丙烯酸苯酯)、聚
(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸异丙酯)、聚(丙烯酸异丁酯)、聚(丙烯酸十八烷酯)和其共聚物和混合物)、聚二噁烷酮和其共聚物、聚羟基烷酸酯、聚富马酸丙二醇酯、聚甲醛、泊洛沙姆、聚氧胺、聚(原酸)酯、聚(丁酸)、聚(戊酸)、聚(丙交酯-共-己内酯)、三亚甲基碳酸酯(trimethylene carbonate)、聚(n-丙烯酰基吗啉)(pacm)、聚(2-甲基-2-噁唑啉)(pmox)、聚(2-乙基-2-噁唑啉)(peoz)和聚甘油。
[0451]
表面改变剂可包括但不限于阴离子蛋白(例如牛血清白蛋白)、表面活性剂(例如阳离子表面活性剂，例如二甲基二(十八烷基)-溴化铵)、糖或糖衍生物(例如环糊精)、核酸、聚合物(例如肝素、聚乙二醇和泊洛沙姆)、粘液溶解剂(例如乙酰基半胱氨酸、艾蒿、菠罗蛋白酶、木瓜蛋白酶、大青属(clerodendrum)、溴己新(bromhexine)、羧甲司坦(carbocisteine)、依普拉酮(eprazinone)、美司钠(mesna)、胺溴索(ambroxol)、索布瑞醇(sobrerol)、多米奥醇(domiodol)、来托司坦(letosteine)、司替罗宁(stepronin)、硫普罗宁(tiopronin)、凝溶胶蛋白、胸腺素β4、阿法链道酶(dornase alfa)、奈替克新(neltenexine)和厄多司坦(erdosteine))和dna酶(例如rhdnase)。表面改变剂可安置于纳米粒子内和/或脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的表面上(例如，通过涂布、吸附、共价连接或其他方法)。
[0452]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)还可包含一种或多种官能化脂质。例如，脂质可经炔烃基团官能化，所述炔烃基团当在适当反应条件下暴露于叠氮化物时可经历环加成反应。特别是，脂质双层可以这种方式经可用于促进膜渗透、细胞识别或成像的一种或多种基团官能化。脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的表面还可与一种或多种适用抗体缀合。可用于靶向细胞递送、成像和膜渗透的官能团和缀合物是本领域中众所周知的。
[0453]
除了这些组分以外，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)还可包括可用于药物组合物的任何物质。例如，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可包括一种或多种药学上可接受的赋形剂或附属成分，例如但不限于一种或多种溶剂、分散介质、稀释剂、分散助剂、悬浮助剂、造粒助剂、崩解剂、填充剂、助流剂、液体媒介物、粘合剂、表面活性剂、等渗剂、增稠或乳化剂、缓冲剂、润滑剂、油、防腐剂和其他物质。还可包括例如蜡、黄油、着色剂、涂布剂、调味剂和芳香剂的赋形剂。
[0454]
稀释剂的实例可包括但不限于碳酸钙、碳酸钠、磷酸钙、磷酸二钙、硫酸钙、磷酸氢钙、磷酸钠、乳糖、蔗糖、纤维素、微晶纤维素、高岭土、甘露糖醇、山梨糖醇、肌醇、氯化钠、干淀粉、玉米淀粉、糖粉和/或它们的组合。造粒剂和分散剂可选自由马铃薯淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉、乙醇酸淀粉钠、粘土、海藻酸、瓜尔胶、柑橘渣、琼脂、膨润土、纤维素和木制品、天然海绵、阳离子交换树脂、碳酸钙、硅酸盐、碳酸钠、交联聚(乙烯-吡咯烷酮)(交联聚维酮)、羧基甲基淀粉钠(乙醇酸淀粉钠)、羧基甲基纤维素、交联羧基甲基纤维素钠(交联羧甲纤维素)、甲基纤维素、预胶凝淀粉(淀粉1500)、微晶淀粉、水不溶性淀粉、羧基甲基纤维素钙、硅酸镁铝月桂基硫酸钠、季铵化合物和/或它们的组合组成的非限制性列表。
[0455]
表面活性剂和/或乳化剂可包括但不限于天然乳化剂(例如，阿拉伯胶、琼脂、海藻酸、海藻酸钠、黄蓍胶、chondrux、胆固醇、黄原胶、果胶、明胶、蛋黄、酪蛋白、羊毛脂、胆固醇、蜡和卵磷脂)、胶质粘土(例如，膨润土[硅酸铝]和[硅酸镁铝])、长链氨基酸衍生物、高分子量醇(例如，硬脂醇、鲸蜡醇、油醇、三乙酸甘油酯单硬脂酸酯、乙二醇二硬脂酸酯、甘油单硬脂酸酯和丙二醇单硬脂酸酯、聚乙烯醇)、卡波姆(例如，羧基聚甲烯、聚丙
烯酸、丙烯酸聚合物和羧基乙烯基聚合物)、角叉菜胶、纤维素衍生物(例如，羧基甲基纤维素钠、粉状纤维素、羟基甲基纤维素、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、甲基纤维素)、脱水山梨糖醇脂肪酸酯(例如，聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯聚氧乙烯脱水山梨糖醇聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯脱水山梨糖醇单棕榈酸酯脱水山梨糖醇单硬脂酸酯脱水山梨糖醇三硬脂酸酯甘油单油酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯)、聚氧乙烯酯(例如，聚氧乙烯单硬脂酸酯聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚乙氧基化蓖麻油、聚氧亚甲基硬脂酸酯和)、蔗糖脂肪酸酯、聚乙二醇脂肪酸酯(例如)、聚氧乙烯醚(例如，聚氧乙烯月桂基醚)、聚(乙烯-吡咯烷酮)、二乙二醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、油酸钠、油酸钾、油酸乙酯、油酸、月桂酸乙酯、月桂基硫酸钠、68、188、西曲溴铵、西吡氯铵、苯扎氯铵、多库酯钠和/或它们的组合。
[0456]
粘合剂可为淀粉(例如，玉米淀粉和淀粉糊)；明胶；糖(例如，蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糊精、糖蜜、乳糖、乳糖醇、甘露糖醇)；天然和合成胶(例如，阿拉伯胶、海藻酸钠、爱尔兰苔提取物、潘瓦尔胶(panwar gum)、茄替胶、伊莎珀尔果壳的粘液、羧基甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟基乙基纤维素、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、微晶纤维素、乙酸纤维素、聚(乙烯-吡咯烷酮)、硅酸镁铝和落叶松阿拉伯半乳聚糖)；海藻酸盐；聚氧化乙烯；聚乙二醇；无机钙盐；硅酸；聚甲基丙烯酸酯；蜡；水；醇；和它们的组合，或任何其他合适的粘合剂。
[0457]
防腐剂的实例可包括但不限于抗氧化剂、螯合剂、抗微生物防腐剂、抗真菌防腐剂、醇防腐剂、酸性防腐剂和/或其他防腐剂。抗氧化剂的实例包括但不限于α生育酚、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基茴香醚、丁基化羟基甲苯、一硫代甘油、偏亚硫酸氢钾、丙酸、没食子酸丙酯、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠和/或亚硫酸钠。螯合剂的实例包括乙二胺四乙酸(edta)、柠檬酸单水合物、依地酸二钠、依地酸二钾、依地酸、富马酸、苹果酸、磷酸、依地酸钠、酒石酸和/或依地酸三钠。抗微生物防腐剂的实例包括但不限于苯扎氯铵、苄索氯铵、苄醇、布罗波尔(bronopol)、溴棕三甲铵、西吡氯铵、洛赫西定(chlorhexidine)、氯丁醇、氯甲酚、氯二甲苯酚、甲酚、乙醇、甘油、海克替啶(hexetidine)、咪脲、苯酚、苯氧乙醇、苯基乙醇、硝酸苯汞、丙二醇和/或硫柳汞。抗真菌防腐剂的实例包括但不限于对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯甲酸钾、山梨酸钾、苯甲酸钠、丙酸钠和/或山梨酸。醇防腐剂的实例包括但不限于乙醇、聚乙二醇、苄醇、苯酚、酚类化合物、双酚、氯丁醇、羟基苯甲酸酯和/或苯基乙醇。酸性防腐剂的实例包括但不限于维生素a、维生素c、维生素e、β-胡萝卜素、柠檬酸、乙酸、去氢抗坏血酸、抗坏血酸、山梨酸和/或植酸。其他防腐剂包括但不限于生育酚、乙酸生育酚、甲磺酸去铁胺、溴棕三甲铵、丁基化羟基茴香醚(bha)、丁基化羟基甲苯(bht)、乙二胺、月桂基硫酸钠(sls)、月桂基醚硫酸钠(sles)、亚硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠、亚硫酸钾、偏亚硫酸氢钾、glydant对羟基苯甲酸甲酯、115、neolone
tm
、kathon
tm
和/或
[0458]
缓冲剂的实例包括但不限于柠檬酸盐缓冲溶液、乙酸盐缓冲溶液、磷酸盐缓冲溶液、氯化铵、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、葡乳醛酸钙、葡庚糖酸钙、葡萄糖酸钙、d-葡萄糖酸、甘油磷酸钙、乳酸钙、乳糖酸钙、丙酸、乙酰丙酸钙、戊酸、磷酸氢钙、磷酸、磷酸三钙、磷酸氢氧化钙、乙酸钾、氯化钾、葡萄糖酸钾、钾混合物、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸钾混合物、乙酸钠、碳酸氢钠、氯化钠、柠檬酸钠、乳酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钠混合物、缓血酸胺、氨基-磺酸盐缓冲液(例如hepes)、氢氧化镁、氢氧化铝、海藻酸、无热原质水、等渗盐水、林格氏溶液、乙醇和/或它们的组合。润滑剂可选自由硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸、二氧化硅、滑石、麦芽、甘油山嵛酸酯、氢化植物油、聚乙二醇、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠、亮氨酸、月桂基硫酸镁、月桂基硫酸钠和它们的组合组成的非限制性组。
[0459]
油的实例包括但不限于扁桃仁、杏仁、鳄梨、巴西棕榈、佛手柑、黑加仑籽、琉璃苣、刺桧、甘菊、芥花、香菜、巴西棕榈、蓖麻、肉桂、可可脂、椰子、鱼肝、咖啡、玉米、棉籽、鸸鹋、桉树、月见草、鱼、亚麻仁、香草醇、葫芦、葡萄籽、榛子、海索草、肉豆蔻酸异丙酯、荷荷巴、夏威夷核果、熏衣草花、熏衣草、柠檬、山苍子、澳洲坚果、锦葵、芒果核、池花籽、貂、肉豆蔻、橄榄、橙、橙鲷、棕榈、棕榈仁、桃仁、花生、罂粟籽、南瓜籽、油菜籽、米糠、迷迭香、红花、白檀、山茶花、欧洲薄荷、沙棘、芝麻、乳木果油、硅酮、大豆、向日葵、茶树、蓟、椿花、香根草、胡桃和小麦胚芽油以及硬脂酸丁酯、辛酸三酸甘油酯、癸酸三酸甘油酯、环甲基硅酮、癸二酸二乙酯、二甲硅油360、西甲硅油、肉豆蔻酸异丙酯、矿物油、辛基十二醇、油醇、硅酮油和/或它们的组合。
[0460]
制剂
[0461]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可包括脂质组分和一种或多种额外组分，例如治疗剂和/或预防剂。脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可经设计用于一种或多种特定应用或靶标。脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的要素可基于特定应用或靶标，和/或基于一种或多种要素的功效、毒性、费用、易用性、可用性或其他特征进行选择。类似地，纳米粒子组合物的特定制剂可根据例如特定要素组合的功效和毒性进行选择用于特定应用或靶标。
[0462]
纳米粒子组合物的脂质组分可包括例如根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的脂质、磷脂(例如不饱和脂质，例如dope或dspc)、peg脂质和结构脂质。脂质组分的要素可以特定分率提供。
[0463]
在一些实施方案中，纳米粒子组合物的脂质组分包括根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的脂质、磷脂、peg脂质和结构脂质。在某些实施方案中，纳米粒子组合物的脂质组分包括约30mol％至约60mol％的式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、约0mol％至约30mol％磷脂、约18.5mol％至约48.5mol％结构脂质和约0mol％至约10mol％peg脂质，条件是总mol％不超过100％。在一些实施方案中，纳米粒子组合物的脂质组分包括约35mol％至约55mol％的式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的
化合物、约5mol％至约25mol％磷脂、约30mol％至约40mol％结构脂质和约0mol％至约10mol％peg脂质。在一个特定实施方案中，脂质组分包括约50mol％所述化合物、约10mol％磷脂、约38.5mol％结构脂质和约1.5mol％peg脂质。在另一个特定实施方案中，脂质组分包括约40mol％所述化合物、约20mol％磷脂、约38.5mol％结构脂质和约1.5mol％peg脂质。在一些实施方案中，磷脂可为dope或dspc。在其他实施方案中，peg脂质可为peg-1或peg
2k-dmg和/或结构脂质可为胆固醇。
[0464]
在一些实施方案中，空脂质纳米粒子(空lnp)包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质。
[0465]
在一些实施方案中，负载脂质纳米粒子(负载lnp)包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质、peg脂质和一种或多种治疗剂和/或预防剂。
[0466]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约40％至约60％的量的式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物。
[0467]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约0％至约20％的量的磷脂。例如，在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约0％至约20％的量的dspc。
[0468]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约30％至约50％的量的结构脂质。例如，在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约30％至约50％的量的胆固醇。
[0469]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约0％至约5％的量的peg脂质。例如，在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约0％至约5％的量的peg-1或peg
2k-dmg。
[0470]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约40mol％至约60mol％的式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、约0mol％至约20mol％磷脂、约30mol％至约50mol％结构脂质和约0mol％至约5mol％peg脂质。
[0471]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约40mol％至约60mol％的式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、约0mol％至约20mol％dspc、约30mol％至约50mol％胆固醇和约0mol％至约5mol％peg
2k-dmg。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约40mol％至约60mol％的表1化合物、约0mol％至约20mol％dspc、约30mol％至约50mol％胆固醇和约0mol％至约5mol％peg
2k-dmg。
[0472]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约40mol％至约60mol％的式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、约0mol％至约20mol％dspc、约30mol％至约50mol％胆固醇和约0mol％至约5mol％peg-1。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含约40mol％至约60mol％的表1化合物、约0mol％至约20mol％dspc、约30mol％至约50mol％胆固醇和约0mol％至约5mol％peg-1。
[0473]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、
(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc并且所述结构脂质是胆固醇。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含表1化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc并且所述结构脂质是胆固醇。
[0474]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述结构脂质是胆固醇并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含表1化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述结构脂质是胆固醇并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[0475]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述结构脂质是胆固醇并且所述peg脂质是peg-1。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含表1化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述结构脂质是胆固醇并且所述peg脂质是peg-1。
[0476]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含表1化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[0477]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc并且所述peg脂质是peg-1。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含表1化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc并且所述peg脂质是peg-1。
[0478]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含表1化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[0479]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含式(a-c)化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含表1化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[0480]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg-1。
[0481]
在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含式(a-c)化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg-1。在一些实施方案中，空lnp或负载lnp包含表1化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg-1。
[0482]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可经设计用于一种或多种特定应用或靶标。例如，纳米粒子组合物可经设计以向哺乳动物的身体中的特定细胞、组织、器官或系统或其组递送治疗剂和/或预防剂，例如rna。脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的生理化学特性可发生改变以便增加针对特定身体靶标的选择性。例如，粒度可基于不同器官的开窗大小加以调节。包括于纳米粒子组合物中的治疗剂和/或预防剂也可基于一个或多个所需递送靶标进行选择。例如，治疗剂和/或预防剂可针对特定适应症、疾患、疾病或病症和/或针对向特定细胞、组织、器官或系统或其组的递送(例如，局部化或特异性递送)进行选择。在某些实施方案中，纳米粒子组合物可包括编码目标多肽的mrna，其能够在细胞内翻译以产生所述目标多肽。这种组合物可经设计以特异性地递送至特定器官。在一些实施方案中，组合物可经设计以特异性地递送至哺乳动物肝脏。
[0483]
纳米粒子组合物中的治疗剂和/或预防剂的量可取决于所述纳米粒子组合物的大小、组成、所需靶标和/或应用或其他特性，以及取决于所述治疗剂和/或预防剂的特性。例如，可用于纳米粒子组合物中的rna的量可取决于所述rna的大小、序列和其他特征。纳米粒子组合物中的治疗剂和/或预防剂和其他要素(例如脂质)的相对量也可变化。在一些实施方案中，纳米粒子组合物中的液体组分与治疗剂和/或预防剂的wt/wt比率可为约5:1至约60:1，例如5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1、20:1、25:1、30:1、35:1、40:1、45:1、50:1和60:1。例如，液体组分与治疗剂和/或预防剂的wt/wt比率可为约10:1至约40:1。在某些实施方案中，所述wt/wt比率为约20:1。
[0484]
纳米粒子组合物中的治疗剂和/或预防剂的量可例如使用吸收光谱法(例如，紫外-可见光谱)进行测量。
[0485]
在一些实施方案中，纳米粒子组合物包括一种或多种rna，并且所述一种或多种rna、脂质和其量可经选择以提供特定n:p比率。组合物的n:p比率是指一种或多种脂质中的氮原子与rna中的磷酸酯基的数目的摩尔比率。一般来说，较低n:p比率是优选的。所述一种或多种rna、脂质和其量可经选择以提供约2:1至约30:1，例如2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、12:1、14:1、16:1、18:1、20:1、22:1、24:1、26:1、28:1或30:1的n:p比率。在某些实施方案中，n:p比率可为约2:1至约8:1。在其他实施方案中，n:p比率为约5:1至约8:1。例如，n:p比率可为约5.0:1、约5.5:1、约5.67:1、约6.0:1、约6.5:1或约7.0:1。例如，n:p比率可为约5.67:1。
[0486]
物理特性
[0487]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的特征可取决于其组分。例如，包括胆固醇作为结构脂质的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可具有与包括不同结构脂质的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)不同的特征。类似地，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的特征可取决于其组分的绝对或相对量。例如，包括较高摩尔分率的磷脂的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可具有与包括较低摩尔分率的磷脂的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)不同的特征。特征还可根据纳米粒子组合物的制备方法和条件而变化。
[0488]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可通过多种方法表征。例如，可使用显微术(例如，透射电子显微术或扫描电子显微术)来检查纳米粒子组合物的形态和大小分布。可使用动态光散射或电位测定法(例如电位滴定)来测量ζ电位。还可使用动态光散射来测定粒度。还可使用例如zetasizer nano zs(malvern instruments ltd,malvern,worcestershire,uk)的仪器来测量纳米粒子组合物的多种特征，例如粒度、多分散性指数和ζ电位。
[0489]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的平均大小可在数十nm与数百nm之间，例如通过动态光散射(dls)所测量。例如，平均大小可为约40nm至约150nm，例如约40nm、45nm、50nm、55nm、60nm、65nm、70nm、75nm、80nm、85nm、90nm、95nm、100nm、105nm、110nm、115nm、120nm、125nm、130nm、135nm、140nm、145nm或150nm。在一些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的平均大小可为约50nm至约100nm、约50nm至约90nm、约50nm至约80nm、约50nm至约70nm、约50nm至约60nm、约60nm至约100nm、约60nm至约90nm、约60nm至约80nm、约60nm至约70nm、约70nm至约150nm、约70nm至约130nm、约70nm至约100nm、约70nm至约90nm、约70nm至约80nm、约80nm至约150nm、约80nm至约130nm、约80nm至约100nm、约80nm至约90nm、约90nm至约150nm、约90nm至约130nm、或约90nm至约100nm。在某些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的平均大小可为约70nm至约130nm或约70nm至约100nm。在一个特定实施方案中，平均大小可为约80nm。在其他实施方案中，平均大小可为约100nm。在其他实施方案中，平均大小可为约120nm。
[0490]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可为相对均质的。多分散性指数可用于指示纳米粒子组合物的均质性，例如脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的粒度分布。小(例如小于0.3)多分散性指数通常指示狭窄粒度分布。脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可具有约0至约0.25，例如0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10、0.11、0.12、0.13、0.14、0.15、0.16、0.17、0.18、0.19、0.20、0.21、0.22、0.23、0.24或0.25的多分散性指数。在一些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的多分散性指数可为约0.10至约0.20。
[0491]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的ζ电位可用于指示组合物的动电位。例如，ζ电位可描述纳米粒子组合物的表面电荷。具有相对低电荷(正或负)的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)通常是所需的，因为更高电荷物质可与身体中的细胞、组织和其他要素非所需地相互作用。在一些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的ζ电位可为约-10mv至约 20mv、约-10mv至约 15mv、约-10mv至约 10mv、约-10mv至约 5mv、约-10mv至约0mv、约-10mv至约-5mv、约-5mv至约 20mv、约-5mv至约 15mv、约-5mv至约 10mv、约-5mv至约 5mv、约-5mv至约0mv、约0mv至约 20mv、约0mv至约 15mv、约0mv至约 10mv、约0mv至约 5mv、约 5mv至约 20mv、约 5mv至约 15mv、或约 5mv至约 10mv。
[0492]
治疗剂和/或预防剂的囊封效率描述了相对于所提供的初始量，在制备之后经脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)囊封或以其他方式与脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)缔合的治疗剂和/或预防剂的量。高囊封效率是合乎需要的(例如，接近于100％)。囊封效率可例如通过比较在用一种或多种有机溶剂或洗涤剂破碎脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)之前和之后含有脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的溶液中的治疗剂和/或预防剂的量来测量。可使用荧光来测量溶液中的游离治疗剂和/或预防剂(例如rna)的量。关
于本文所述的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)，治疗剂和/或预防剂的囊封效率可为至少50％，例如50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％。在一些实施方案中，囊封效率可为至少80％。在某些实施方案中，囊封效率可为至少90％。在一些实施方案中，治疗剂和/或预防剂的囊封效率在80％与100％之间。
[0493]
药物组合物
[0494]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可完整地或部分地被配制为药物组合物。药物组合物可包括一种或多种脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)。在一个实施方案中，药物组合物包含脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的群体。例如，药物组合物可包括一种或多种脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)，其包括一种或多种不同的治疗剂和/或预防剂。药物组合物还可包括一种或多种药学上可接受的赋形剂或附属成分，例如本文所述的那些。关于药物组合物和药剂的配制和制造的一般准则可例如在remington的the science and practice of pharmacy,第21版,a.r.gennaro；lippincott,williams&wilkins,baltimore,md,2006中获得。常规赋形剂和附属成分可用于任何药物组合物，除非任何常规赋形剂或附属成分可与纳米粒子组合物的一种或多种组分不相容。如果赋形剂或附属成分与脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的组分的组合可导致任何非所需生物效应或在其他方面导致有害效应，则所述赋形剂或附属成分可与所述组分不相容。
[0495]
在一些实施方案中，一种或多种赋形剂或附属成分可构成包括纳米粒子组合物的药物组合物的总质量或体积的超过50％。例如，所述一种或多种赋形剂或附属成分可构成药物组合物的50％、60％、70％、80％、90％或更多。在一些实施方案中，药学上可接受的赋形剂是至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％纯。在一些实施方案中，赋形剂获得批准用于人类和用于兽医用途。在一些实施方案中，赋形剂获得美国食品和药物管理局批准。在一些实施方案中，赋形剂是药物级。在一些实施方案中，赋形剂满足美国药典(usp)、欧洲药典(ep)、英国药典和/或国际药典的标准。
[0496]
根据本公开的药物组合物中的一种或多种脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)、一种或多种药学上可接受的赋形剂和/或任何额外成分的相对量将根据所治疗的受试者的身份、体型和/或状况并且进一步根据组合物的施用途径而变化。举例来说，药物组合物可包含0.1％与100％(wt/wt)之间的一种或多种脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)。
[0497]
在某些实施方案中，本公开的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和/或药物组合物被冷藏或冷冻用于储存和/或装运(例如，储存在4℃或更低温度，例如约-150℃与约0℃之间或约-80℃与约-20℃之间的温度(例如，约-5℃、-10℃、-15℃、-20℃、-25℃、-30℃、-40℃、-50℃、-60℃、-70℃、-80℃、-90℃、-130℃或-150℃)。例如，包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)和(b-c)中任一者的化合物的药物组合物是在例如约-20℃、-30℃、-40℃、-50℃、-60℃、-70℃或-80℃下被冷藏用于储存和/或装运的溶液。在某些实施方案中，本公开还涉及一种通过将脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和/或包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)和(b-c)中任一者的化合物的药物组合物储存在4℃或更低温度，例如约-150℃与约0℃之间或
约-80℃与约-20℃之间的温度，例如约-5℃、-10℃、-15℃、-20℃、-25℃、-30℃、-40℃、-50℃、-60℃、-70℃、-80℃、-90℃、-130℃或-150℃下来增加脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和/或药物组合物的稳定性的方法。例如，本文所公开的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和/或药物组合物例如在4℃或更低(例如，约4℃与-20℃之间)的温度下稳定持续约至少1周、至少2周、至少3周、至少4周、至少5周、至少6周、至少1个月、至少2个月、至少4个月、至少6个月、至少8个月、至少10个月、至少12个月、至少14个月、至少16个月、至少18个月、至少20个月、至少22个月或至少24个月。在一些实施方案中，所述制剂在约4℃下稳定化持续至少4周。在某些实施方案中，本公开的药物组合物包含本文所公开的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和选自tris、乙酸盐(例如乙酸钠)、柠檬酸盐(例如柠檬酸钠)、盐水、pbs和蔗糖中的一者或多者的药学上可接受的载剂。在某些实施方案中，本公开的药物组合物具有约7与8之间(例如，6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9或8.0，或7.5与8之间或7与7.8之间)的ph值。例如，本公开的药物组合物包含本文所公开的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)、tris、盐水和蔗糖，并且具有约7.5-8的ph，其适用于在例如约-20℃下储存和/或装运。例如，本公开的药物组合物包含本文所公开的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和pbs并且具有约7-7.8的ph，其适用于在例如约4℃或4℃以下储存和/或装运。在本公开背景中的“稳定性”、“稳定化”和“稳定的”是指本文所公开的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和/或药物组合物在给定制造、制备、运输、储存和/或使用中条件下，例如当施加例如剪切力、冷冻/解冻应力等应力时，抵抗化学或物理变化(例如，降解、粒度变化、聚集、囊封变化等)。
[0498]
在一些实施方案中，本公开的药物组合物包含空lnp或负载lnp、冷冻保护剂、缓冲液或它们的组合。
[0499]
在一些实施方案中，冷冻保护剂包含一种或多种冷冻保护剂，并且所述一种或多种冷冻保护剂中的每一者独立地是多元醇(例如二醇或三醇，例如丙二醇(即，1,2-丙二醇)、1,3-丙二醇、甘油、( /-)-2-甲基-2,4-戊二醇、1,6-己二醇、1,2-丁二醇、2,3-丁二醇、乙二醇或二乙二醇)、非洗涤剂磺基甜菜碱(例如ndsb-201(3-(1-吡啶基)-1-丙磺酸酯)、渗压剂(例如l-脯氨酸或三甲胺n-氧化物二水合物)、聚合物(例如聚乙二醇200(peg 200)、peg 400、peg 600、peg 1000、peg
2k-dmg、peg 3350、peg 4000、peg 8000、peg 10000、peg 20000、聚乙二醇单甲醚550(mpeg 550)、mpeg 600、mpeg 2000、mpeg 3350、mpeg 4000、mpeg 5000、聚乙烯吡咯烷酮(例如聚乙烯吡咯烷酮k 15)、季戊四醇丙氧基化物或聚丙二醇p 400)、有机溶剂(例如二甲亚砜(dmso)或乙醇)、糖(例如d-( )-蔗糖、d-山梨糖醇、海藻糖、d-( )-麦芽糖单水合物、内消旋-赤藓糖醇、木糖醇、肌醇、d-( )-蜜三糖五水合物、d-( )-海藻糖二水合物或d-( )-葡萄糖单水合物)或盐(例如，乙酸锂、氯化锂、甲酸锂、硝酸锂、硫酸锂、乙酸镁、乙酸钠、氯化钠、甲酸钠、丙二酸钠、硝酸钠、硫酸钠或其任何水合物)或其任何组合。在一些实施方案中，冷冻保护剂包含蔗糖。在一些实施方案中，冷冻保护剂和/或赋形剂是蔗糖。在一些实施方案中，冷冻保护剂包含乙酸钠。在一些实施方案中，冷冻保护剂和/或赋形剂是乙酸钠。在一些实施方案中，冷冻保护剂包含蔗糖和乙酸钠。
[0500]
在一些实施方案中，其中缓冲液选自由乙酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、tris缓冲液和它们的组合组成的组。
[0501]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和/或包括一种或多种脂质纳米粒子(例如
空lnp或负载lnp)的药物组合物可施用至任何患者或受试者，包括可受益于通过向一种或多种特定细胞、组织、器官或系统或其组递送治疗剂和/或预防剂而提供的治疗效应的那些患者或受试者。尽管本文所提供的对于脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和包括脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的药物组合物的描述原则上涉及适合施用至人类的组合物，熟练技术人员应理解此类组合物通常适合施用至任何其他哺乳动物。应充分了解，可对适合施用至人类的组合物进行修饰以使所述组合物适合施用至多种动物，并且普通熟练兽医药理学家仅需常规(如果存在)实验即可设计和/或执行此类修饰。预期施用所述组合物的受试者包括但不限于人类、其他灵长类动物和其他哺乳动物，包括商业上相关的哺乳动物，例如牛、猪、马、绵羊、猫、狗、小鼠和/或大鼠。主题脂质纳米粒子也可用于体外和离体用途。
[0502]
包括一种或多种脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的药物组合物可通过药理学领域中已知或今后开发的任何方法来制备。一般来说，此类制备方法包括使活性成分与赋形剂和/或一种或多种其他辅助成分缔合，并且然后有需要或必要时，将产物分成、成形和/或包装成所需单一剂量或多剂量单元。
[0503]
根据本公开的药物组合物可大批、作为单一单位剂量和/或作为多个单一单位剂量进行制备、包装和/或销售。如本文所用，“单位剂量”是包含预定量的活性成分的药物组合物(例如，纳米粒子组合物)的个别量。活性成分的量通常等于将施用至受试者的活性成分的剂量，和/或这种剂量的适宜分率，例如这种剂量的一半或三分之一。
[0504]
药物组合物可以适用于多种施用途径和方法的多种形式制备。例如，药物组合物可以液体剂型(例如，乳液、微乳液、纳米乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂)、可注射形式、固体剂型(例如，胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒)、用于表面和/或透皮施用的剂型(例如，软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、散剂、溶液、喷雾剂、吸入剂和贴剂)、悬浮液、散剂和其他形式制备。
[0505]
用于口服和肠胃外施用的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳液、微乳液、纳米乳液、溶液、悬浮液、糖浆和/或酏剂。除了活性成分以外，液体剂型还可包含本领域中通常使用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇以及脱水山梨糖醇的脂肪酸酯和它们的混合物。除了惰性稀释剂以外，口服组合物还可包括额外的治疗剂和/或预防剂、额外剂(例如润湿剂、乳化和悬浮剂、甜味剂、调味剂和/或芳香剂)。在关于肠胃外施用的某些实施方案中，组合物与例如醇、油、改性油、二醇、聚山梨醇酯、环糊精、聚合物和/或它们的组合物的增溶剂混合。
[0506]
可注射制剂(例如无菌可注射水性或油性悬浮液)可根据已知技术使用合适的分散剂、润湿剂和/或悬浮剂进行配制。无菌可注射制剂可为无毒肠胃外可接受的稀释剂和/或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液和/或乳液，例如1,3-丁二醇中的溶液。可使用的可接受的媒介物和溶剂包括水、林格氏溶液(u.s.p.)和等渗氯化钠溶液。无菌、不挥发性油惯常地用作溶剂或悬浮介质。出于此目的，可使用任何温和的不挥发性油，包括合成单酸甘油酯或二酸甘油酯。例如油酸的脂肪酸可用于可注射剂的制备。
[0507]
可注射制剂可例如通过经由细菌截留过滤器过滤，和/或通过并入呈可在使用之前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌。
[0508]
为了延长活性成分的作用，通常可需要减慢从皮下或肌肉内注射吸收所述活性成
分。这可通过使用具有弱水溶性的结晶或无定形材料的液体悬浮液实现。药物的吸收速率则取决于其溶解速率，而其溶解速率又可取决于晶体大小和结晶形式。或者，肠胃外施用的药物形式的延迟吸收通过使所述药物溶解或悬浮于油媒介物中来实现。可注射储槽形式是通过在例如聚丙交酯-聚乙交酯的生物可降解聚合物中形成所述药物的微囊封基质而制得。取决于药物与聚合物的比率和所用的特定聚合物的性质，可控制药物释放的速率。其他生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。储槽可注射制剂是通过将所述药物截留于可与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备。
[0509]
用于直肠或阴道施用的组合物典型地为栓剂，其可通过将组合物与合适的非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡，其在环境温度下为固体，但在体温下为液体并且因此在直肠或阴道腔中熔融并释放活性成分。
[0510]
用于口服施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、膜剂、散剂和颗粒。在此类固体剂型中，活性成分与至少一种惰性、药学上可接受的赋形剂如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或填充剂或增量剂(例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸)、粘合剂(例如，羧基甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶)、保湿剂(例如甘油)、崩解剂(例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、特定硅酸盐和碳酸钠)、溶液延迟剂(例如石蜡)、吸收促进剂(例如季铵化合物)、润湿剂(例如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯)、吸收剂(例如高岭土和膨润土、硅酸盐)和润滑剂(例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠)和它们的混合物混合。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型可包含缓冲剂。
[0511]
类似类型的固体组合物可在使用例如乳糖(lactose/milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等的赋形剂的软和硬填充明胶胶囊中用作填充剂。片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒的固体剂型可用包衣和壳，例如肠溶包衣和药物配制领域中众所周知的其他包衣制备。其可任选地包含遮光剂并且可具有如下组成，所述组成使其任选地以延迟方式在肠道的特定部分中仅或优先地释放活性成分。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。类似类型的固体组合物可在使用例如乳糖以及高分子量聚乙二醇等的赋形剂的软和硬填充明胶胶囊中用作填充剂。
[0512]
用于组合物的表面和/或透皮施用的剂型可包括软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、散剂、溶液、喷雾剂、吸入剂和/或贴剂。一般来说，活性成分在无菌条件下与可需要的药学上可接受的赋形剂和/或任何所需防腐剂和/或缓冲液混合。另外，本公开预期透皮贴剂的使用，所述透皮贴剂通常具有向身体提供化合物的控制递送的附加优势。此类剂型可例如通过使所述化合物溶解和/或分散于适当介质中来制备。或者或另外，速率可通过提供速率控制膜和/或通过在聚合物基质和/或凝胶中分散所述化合物来控制。
[0513]
用于递送本文所述的皮内药物组合物的合适器件包括短针器件。皮内组合物可通过限制针进入皮肤中的有效穿透长度的器件来施用。经由液体射流注射器和/或经由刺穿角质层并产生到达真皮的射流的针向真皮递送液体组合物的射流注射器件是合适的。使用压缩气体来加速呈粉末形式的疫苗通过皮肤外层到达真皮的弹道粉末/粒子递送器件是合适的。或者或另外，常规注射器可用于皮内施用的经典曼托方法(mantoux method)中。
[0514]
适于表面施用的制剂包括但不限于液体和/或半液体制剂，例如搽剂、洗剂、水包油和/或油包水乳液(例如乳膏、软膏和/或糊剂和/或溶液和/或悬浮液)。可表面施用的制剂可例如包含约1％至约10％(wt/wt)活性成分，不过活性成分的浓度可高达所述活性成分
在溶剂中的溶解度极限。用于表面施用的制剂还可包含一种或多种本文所述的额外成分。
[0515]
药物组合物可以适用于经由口腔进行肺部施用的制剂形式进行制备、包装和/或销售。这种制剂可包括包含活性成分的干燥粒子。此类组合物便利地呈干粉形式以使用包含干粉储集器的器件(推进剂流可被引导至其中以分散粉末)和/或使用自推进溶剂/粉末分配容器(例如包含溶解和/或悬浮于密封容器中的低沸点推进剂中的活性成分的器件)进行施用。干粉组合物可包括固体细粉稀释剂，例如糖，并且便利地以单位剂型提供。
[0516]
低沸点推进剂通常包括在大气压力下具有低于65℉的沸点的液体推进剂。通常，推进剂可构成组合物的50％至99.9％(wt/wt)，并且活性成分可构成组合物的0.1％至20％(wt/wt)。推进剂还可包含额外成分，例如液体非离子和/或固体阴离子表面活性剂和/或固体稀释剂(其可具有与包含活性成分的粒子相同级别的粒度)。
[0517]
被配制用于肺部递送的药物组合物可提供呈溶液和/或悬浮液的小液滴形式的活性成分。此类制剂可作为任选地无菌并包含活性成分的水性和/或稀醇溶液和/或悬浮液进行制备、包装和/或销售，并且可便利地使用任何喷雾和/或雾化器件进行施用。此类制剂还可包含一种或多种额外成分，包括但不限于调味剂(例如糖精钠)、挥发油、缓冲剂、表面活性剂和/或防腐剂(例如羟基苯甲酸甲酯)。由这种施用途径提供的小液滴可具有在约1nm至约200nm范围内的平均直径。
[0518]
本文中描述为可用于肺部递送的制剂可用于鼻内递送药物组合物。适用于鼻内施用的另一种制剂是包含活性成分并具有约0.2μm至500μm的平均粒度的粗粉。这种制剂是以其中采取鼻吸的方式，即通过经由鼻道从保持紧密接近鼻子的粉末容器快速吸入来施用。
[0519]
适用于鼻施用的制剂可例如包含约低至0.1％(wt/wt)且高达100％(wt/wt)的活性成分，并且可包含一种或多种本文所述的额外成分。药物组合物可以适于经颊施用的制剂形式进行制备、包装和/或销售。此类制剂可例如呈使用常规方法制得的片剂和/或锭剂形式并且可包含例如0.1％至20％(wt/wt)活性成分，余量包含经口可溶解和/或可降解组合物并且任选地包含一种或多种本文所述的额外成分。或者，适于经颊施用的制剂可包括包含活性成分的粉末和/或气雾化和/或雾化溶液和/或悬浮液。当分散时，此类粉状、气雾化和/或气雾化制剂可具有在约0.1nm至约200nm范围内的平均粒子和/或小液滴大小，并且还可包含一种或多种本文所述的任何额外成分。
[0520]
药物组合物可以适于眼施用的制剂形式进行制备、包装和/或销售。此类制剂可例如呈包括例如活性成分于水性或油性液体赋形剂中的0.1/1.0％(wt/wt)溶液和/或悬浮液的滴眼剂形式。此类滴剂还可包含缓冲剂、盐和/或一种或多种其他本文所述的任何额外成分。可用的其他眼施用制剂包括包含呈微晶形式和/或呈脂质体制剂的活性成分的那些。滴耳剂和/或滴眼剂预期在本公开的范围内。
[0521]
mrna疗法
[0522]
作为药物模态的mrna具有递送分泌蛋白以及细胞内蛋白和跨膜蛋白的潜力。作为药物模态的mrna具有递送跨膜和细胞内蛋白(即，标准生物制剂由于其在以蛋白质形式递送时不能跨过细胞膜而无法接近的靶标)的潜力。实现基于mrna的疗法的一项主要挑战在于最佳递送媒介物的鉴定。由于其大尺寸、化学不稳定性和潜在免疫原性，mrna需要可提供免受核酸内切酶和核酸外切酶的保护，以及掩蔽货物躲开免疫标记的递送媒介物。就此而言，脂质纳米粒子(lnp)已被鉴定为主要选项。
[0523]
关于脂质纳米粒子递送系统的关键性能标准是使细胞摄取最大化并且使得mrna能从内体有效释放。在一个实施方案中，包含本文所公开的新颖脂质的主题lnp证明细胞摄取和内体释放中的至少一者的改进。同时，lnp必须提供稳定药物产品并能够安全地以治疗相关水平给药。lnp是典型地由氨基脂质、磷脂、胆固醇和peg-脂质组成的多组分系统。核酸货物的有效递送和粒子稳定性的方面需要每种组分。被认为驱动细胞摄取、内体脱离和耐受性的关键组分是氨基脂质。胆固醇和peg-脂质促进体内和货架期药物产品的稳定性，而磷脂提供lnp的额外融合性，因此帮助驱动内体脱离并且使得在细胞的细胞溶质中可获得核酸。
[0524]
过去二十年来，已关于寡核苷酸递送开发了若干氨基脂质系列，包括氨基脂质mc3(dlin-mc3-dma)。基于mc3的lnp已显示有效递送mrna。此类lnp在经静脉内递送时由阿朴脂蛋白e(apoe)快速地调理，其使得能由低密度脂蛋白受体(ldlr)进行细胞摄取。然而，仍然担心mc3的长组织半衰期可能促进阻碍其用于长期疗法的不利副作用。另外，大量文献证据表明，脂质纳米粒子的长期给药可产生若干种毒性副作用，包括补体活化相关性假过敏(carpa)和肝损伤。因此，为了释放用于人类的基于mrna和其他核酸、核苷酸或肽的疗法的潜力，需要一类具有增加的递送效率连同将使得能够在人类中进行长期给药的代谢和毒性型态的lnp。
[0525]
治疗多种疾病的能力需要以变化的剂量水平长期安全地给药的适应性。经由氨基脂质结构的系统性优化，本公开化合物被鉴定为平衡化学稳定性、归因于改进内体脱离的改进递送效率、快速体内代谢和纯净毒性型态的化合物。这些特征的组合提供可长期地给药而不激活免疫系统的药物候选物。初始啮齿动物筛选导致具有良好递送效率和药物动力学的主要脂质的鉴定。前导lnp在单一和重复给药之后进一步在非人类灵长类动物中针对递送效率剖绘型态。最后，在大鼠和非人类灵长类动物中的一个月重复剂量毒性研究中评价优化lnp。不希望受理论束缚，本公开的新颖可离子化脂质具有改进的细胞递送、改进的蛋白质表达和改进的生物可降解性特性，其可导致如与缺乏本公开脂质的lnp相比细胞中的mrna表达的超过2倍、5倍、10倍、15倍或20倍增加。在另一个实施方案中，包含本公开脂质的lnp可导致如与其他细胞类型相比特异性(例如，优先)递送至一种或多种特定细胞类型，由此导致如与缺乏本公开脂质的lnp相比特定细胞或组织中的mrna表达的超过2倍、5倍、10倍、15倍或20倍增加。这些技术改进允许在急性和慢性疾病中安全且有效地使用基于mrna的疗法。
[0526]
方法
[0527]
在一些方面，本公开提供了一种向细胞(例如哺乳动物细胞)递送治疗剂和/或预防剂的方法。此方法包括使所述细胞与本公开的负载lnp或药物组合物接触的步骤，由此将所述治疗剂和/或预防剂递送至所述细胞。在一些实施方案中，所述细胞是在受试者中并且所述接触包括向所述受试者施用所述细胞。在一些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质、peg脂质和一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤，由此将所述治疗剂和/或预防剂递送至所述细胞。
[0528]
在一些实施方案中，本公开提供了一种向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防
剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0529]
在一些实施方案中，本公开提供了一种向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0530]
在一些方面，本公开提供了一种向哺乳动物器官或组织(例如，肝脏、肾脏、脾脏或肺)递送(例如特异性地递送)治疗剂和/或预防剂的方法。此方法包括使所述细胞与本公开的负载lnp或药物组合物接触的步骤，由此将所述治疗剂和/或预防剂递送至靶器官或组织。在一些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质、peg脂质和一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤，由此将所述治疗剂和/或预防剂递送至靶器官或组织。
[0531]
在一些实施方案中，本公开提供了一种向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0532]
在一些实施方案中，本公开提供了一种向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防
剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0533]
在一些方面，本公开提供了一种用于向靶组织(例如，肝脏、脾脏或肺)增强递送治疗剂和/或预防剂(例如mrna)的方法。此方法包括使所述细胞与本公开的负载lnp或药物组合物接触的步骤，由此将所述治疗剂和/或预防剂递送至靶组织(例如，肝脏、肾脏、脾脏或肺)。在一些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质、peg脂质和一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤，由此将所述治疗剂和/或预防剂递送至靶组织(例如，肝脏、肾脏、脾脏或肺)。
[0534]
在一些实施方案中，本公开提供了一种用于向靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种用于向靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0535]
在一些实施方案中，本公开提供了一种用于向靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种用于向靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0536]
在一些方面，本公开提供了一种在细胞(例如哺乳动物细胞)中产生目标多肽的方法。此方法包括使所述细胞与本公开的负载lnp或药物组合物接触的步骤，其中所述负载lnp或药物组合物包含mrna，由此所述mrna能够在细胞中翻译以产生所述多肽。在一些实施方案中，所述细胞是在受试者中并且所述接触包括向所述受试者施用所述细胞。在一些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质、peg脂质和mrna的脂质纳米粒子的步骤，由此所述mrna能够在细胞中翻译以产生所述多肽。
[0537]
在一些实施方案中，本公开提供了一种在细胞中产生目标多肽的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、
(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及mrna的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种在细胞中产生目标多肽的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含表1化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及mrna的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种在细胞中产生目标多肽的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及mrna的脂质纳米粒子的步骤。
[0538]
在一些实施方案中，本公开提供了一种在细胞中产生目标多肽的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及mrna的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种在细胞中产生目标多肽的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及mrna的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种在细胞中产生目标多肽的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含表1化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及mrna的脂质纳米粒子的步骤。
[0539]
在一些方面，本公开提供了一种治疗有需要的哺乳动物(例如人类)的疾病或病症的方法。所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的本公开的负载lnp或药物组合物的步骤。在一些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质、peg脂质和一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤，由此将所述治疗剂和/或预防剂递送至所述细胞。在一些实施方案中，所述疾病或病症的特征在于功能障碍性或异常蛋白或多肽活性。例如，所述疾病或病症选自由罕见病、传染病、癌症和增生性疾病、遗传疾病、自身免疫疾病、糖尿病、神经退行性疾病、心血管和肾血管疾病以及代谢疾病组成的组。
[0540]
在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含表1化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0541]
在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如
rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含表1化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0542]
在另一方面，本公开提供了一种降低免疫原性的方法，所述方法包括将本公开的负载lnp或药物组合物引入细胞中，其中如与细胞中通过参考组合物诱导的细胞免疫反应的诱导相比，所述负载lnp或药物组合物降低所述细胞对所述负载lnp或药物组合物的细胞免疫反应的诱导。在一些实施方案中，所述细胞是在受试者中并且所述接触包括向所述受试者施用所述细胞。在一些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、磷脂、结构脂质、peg脂质和选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤，其中如与细胞中通过参考组合物诱导的细胞免疫反应的诱导相比，包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物的脂质纳米粒子降低所述细胞对包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物的脂质纳米粒子的细胞免疫反应的诱导。例如，所述细胞免疫反应是先天免疫反应、适应性免疫反应或两者。
[0543]
在一些实施方案中，本公开提供了一种降低受试者的免疫原性的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种降低受试者的免疫原性的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种降低受试者的免疫原性的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含表1化合物、dspc、胆固醇和peg
2k-dmg以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0544]
在一些实施方案中，本公开提供了一种降低受试者的免疫原性的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种降低受试者的免疫原性的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包
含式(a-c)化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。例如，在一些实施方案中，本公开提供了一种降低受试者的免疫原性的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含表1化合物、dspc、胆固醇和peg-1以及选自核苷酸、多肽和核酸(例如rna)的一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子的步骤。
[0545]
本公开还包括合成式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物的方法，和制备包括包含式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物的脂质组分的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的方法。
[0546]
在细胞中产生多肽的方法
[0547]
本公开提供了在哺乳动物细胞中产生目标多肽的方法。产生多肽的方法涉及使细胞与包括编码所述目标多肽的mrna的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)接触。在细胞与纳米粒子组合物接触时，所述mrna可在细胞中溶解并翻译以产生所述目标多肽。
[0548]
一般来说，使哺乳动物细胞与包括编码目标多肽的mrna的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)接触的步骤可在体内、离体、培养物中或体外进行。与细胞接触的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的量和/或其中mrna的量可取决于所接触的细胞或组织的类型、施用方式、脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和其中mrna的生理化学特征(例如，大小、电荷和化学组成)以及其他因素。一般来说，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的有效量将允许细胞中的有效多肽产生。关于效率的度量可包括多肽翻译(由多肽表达指示)、mrna降解的水平和免疫反应指示剂。
[0549]
使包括mrna的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)与细胞接触的步骤可涉及或引起转染。脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的脂质组分中包括的磷脂可例如通过与细胞或细胞内膜相互作用和/或融合而促进转染和/或增加转染效率。转染可允许细胞内的mrna翻译。
[0550]
在一些实施方案中，本文所述的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可在治疗上使用。例如，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)中包括的mrna可编码治疗性多肽(例如，在可翻译区中)并且在接触和/或进入(例如，转染)至细胞中时产生所述治疗性多肽。在其他实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)中包括的mrna可编码可改进或增加受试者的免疫性的多肽。例如，mrna可编码粒细胞-集落刺激因子或曲妥珠单抗(trastuzumab)。
[0551]
在某些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)中包括的mrna可编码重组多肽，所述重组多肽可补充可基本上不存在于与纳米粒子组合物接触的细胞中的一种或多种多肽。所述一种或多种基本上不存在的多肽可由于编码基因或其调控途径的基因突变而缺乏。或者，通过mrna翻译产生的重组多肽可拮抗存在于细胞中、细胞的表面上或从细胞分泌的内源蛋白的活性。拮抗性重组多肽可需要抗击由所述内源蛋白的活性引起的有害效应，例如改变的活性或通过突变引起的定位。在另一种替代方案中，通过mrna翻译产生的重组多肽可间接地或直接地拮抗存在于细胞中、细胞的表面上或从细胞分泌的生物部分的活
性。经拮抗的生物部分可包括但不限于脂质(例如胆固醇)、脂蛋白(例如低密度脂蛋白)、核酸、碳水化合物和小分子毒素。通过mrna翻译产生的重组多肽可经工程改造以定位于细胞内，例如特定隔室(例如细胞核)内，或者可经工程改造以从细胞分泌或易位至细胞的质膜。
[0552]
在一些实施方案中，使细胞与包括mrna的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)接触可降低细胞对外源核酸的先天免疫反应。细胞可与包括第一量的包括可翻译区的第一外源mrna的第一脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)接触并且可测定所述细胞对所述第一外源mrna的先天免疫反应的水平。随后，所述细胞可与包括第二量的所述第一外源mrna的第二组合物接触，所述第二量是与所述第一量相比较少量的所述第一外源mrna。或者，所述第二组合物可包括第一量的不同于所述第一外源mrna的第二外源mrna。使所述细胞与第一组合物和第二组合物接触的步骤可重复一次或多次。另外，可任选地测定细胞中的多肽产生(例如翻译)效率，并且所述细胞可重复地与第一组合物和/或第二组合物再接触，直至实现靶蛋白产生效率。
[0553]
向细胞和器官递送治疗剂的方法
[0554]
本公开提供了向哺乳动物细胞或器官递送治疗剂和/或预防剂的方法。向细胞递送治疗剂和/或预防剂涉及向受试者施用包括所述治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)，其中所述组合物的施用涉及使所述细胞与所述组合物接触。例如，蛋白质、细胞毒性剂、放射性离子、化学治疗剂或核酸(例如rna，例如mrna)可递送至细胞或器官。在治疗剂和/或预防剂是mrna的情况下，在细胞与所述纳米粒子组合物接触时，可翻译mrna可在细胞中翻译以产生目标多肽。然而，基本上不可翻译的mrna也可递送至细胞。基本上不可翻译的mrna可用作疫苗和/或可隔绝细胞的翻译组分以降低其他物质在细胞中的表达。
[0555]
在一些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可靶向特定类型或类别的细胞(例如，特定器官或其系统的细胞)。例如，包括目标治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可特异性地递送至哺乳动物肝脏、肾脏、脾脏或肺。特异性递送至特定类别的细胞、器官或其系统或组暗示相对于其他目的地，较高比例的包括治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子(例如负载lnp)递送至目标目的地(例如组织)。在一些实施方案中，包含mrna的负载lnp的特异性递送可导致如与另一目的地(例如脾脏)的细胞相比，靶向目的地(例如目标组织，例如肝脏)的细胞中的mrna表达的超过2倍、5倍、10倍、15倍或20倍增加。在一些实施方案中，目标组织选自由肝脏、肾脏、肺、脾脏和肿瘤组织(例如，经由肿瘤内注射)组成的组。
[0556]
在一些实施方案中，本公开的负载lnp(即，用本公开化合物配制的脂质纳米粒子)中包含的mrna的特异性递送可导致如与用另一种脂质(即，无式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的脂质中任一者)配制的lnp中包含的mrna的递送相比，mrna表达的超过2倍、5倍、10倍、15倍或20倍增加。
[0557]
作为靶向或特异性递送的另一个实例，编码细胞表面上的蛋白结合搭配物(例如，抗体或其功能片段、骨架蛋白或肽)或受体的mrna可包括于纳米粒子组合物中。mrna可另外或替代地用于指导脂质、碳水化合物或其他生物部分的合成和细胞外定位。或者，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的其他治疗剂和/或预防剂或要素(例如脂质或配体)可基于其
对特定受体(例如低密度脂蛋白受体)的亲和力加以选择，以致脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可更容易地与包括所述受体的靶细胞群体相互作用。例如，配体可包括但不限于特定结合对的成员、抗体、单克隆抗体、fv片段、单链fv(scfv)片段、fab'片段、f(ab')2片段、单结构域抗体、骆驼化抗体和其片段、人源化抗体和其片段以及其多价形式；包括单特异性或双特异性抗体的多价结合试剂，例如二硫化物稳定化fv片段、scfv串联、双功能抗体、三功能抗体或四功能抗体；以及适体、受体和融合蛋白。
[0558]
在一些实施方案中，配体可为表面结合抗体，其可允许细胞靶向特异性的调整。这是尤其有用的，因为高度特异性抗体可关于所需靶向位点针对目标表位产生。在一些实施方案中，多种抗体表达于细胞的表面上，并且每种抗体可对所需靶标具有不同特异性。此类方法可增加靶向相互作用的亲合力和特异性。
[0559]
配体可例如由生物领域的技术人员基于细胞的所需定位或功能进行选择。
[0560]
靶向细胞可包括但不限于肝细胞、上皮细胞、造血细胞、上皮细胞、内皮细胞、肺细胞、骨细胞、干细胞、间质细胞、神经细胞、心脏细胞、脂肪细胞、血管平滑肌细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、β细胞、垂体细胞、滑膜衬里细胞、卵巢细胞、睾丸细胞、纤维母细胞、b细胞、t细胞、网状细胞、白细胞、粒细胞和肿瘤细胞。
[0561]
在一些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可靶向肝细胞。例如阿朴脂蛋白e(apoe)的阿朴脂蛋白已显示与身体中的含中性或近中性脂质的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)缔合，并且已知与发现于肝细胞表面上的受体(例如低密度脂蛋白受体(ldlr))缔合。因此，施用至受试者的包括具有中性或近中性电荷的脂质组分的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可在受试者的身体中获得apoe并且可随后以靶向方式向包括ldlr的肝细胞递送治疗剂和/或预防剂(例如rna)。
[0562]
治疗疾病和病症的方法
[0563]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可用于治疗疾病、病症或疾患。特别是，此类组合物可用于治疗特征在于缺失或异常蛋白或多肽活性的疾病、病症或疾患。例如，包含编码缺失或异常多肽的mrna的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可施用或递送至细胞。mrna的后续翻译可产生所述多肽，由此降低或消除由于所述多肽不存在或由所述多肽引起的异常活性而引起的问题。因为翻译可快速地发生，所以所述方法和组合物可用于治疗急性疾病、病症或疾患，例如败血症、中风和心肌梗塞。脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)中包括的治疗剂和/或预防剂也可能够改变给定物质的转录速率，由此影响基因表达。
[0564]
可施用组合物的特征在于功能障碍性或异常蛋白或多肽活性的疾病、病症和/或疾患包括但不限于罕见病、传染病(作为疫苗和治疗剂两者)、癌症和增生性疾病、遗传疾病、自身免疫疾病、糖尿病、神经退行性疾病、心血管和肾血管疾病以及代谢疾病。多种疾病、病症和/或疾患的特征可在于缺失(或基本上削弱，以致适当蛋白功能未出现)蛋白活性。此类蛋白质可不存在，或者其可为基本上非功能性的。本公开提供了一种通过施用包括rna和脂质组分的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)来治疗受试者的此类疾病、病症和/或疾患的方法，所述脂质组分包括根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的脂质、磷脂(任选地不饱和)、peg脂质和结构脂质，其中所述rna可为编码拮抗或以其他方式克服存在于受试者细胞中的异常蛋白活性的多肽的mrna。
[0565]
本公开提供的方法涉及施用包括一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)和包括所述脂质纳米粒子的药物组合物。术语治疗剂和预防剂可在本文中关于本公开的特征和实施方案互换使用。其治疗组合物或成像、诊断或预防组合物可使用有效用于预防、治疗、诊断疾病、病症和/或疾患或使疾病、病症和/或疾患成像和/或任何其他目的的任何合理量和任何施用途径施用至受试者。施用至给定受试者的特定量可根据以下而变化：受试者的物种、年龄和一般状况；施用目的；特定组合物；施用模式；等。为便于施用和剂量的均一性，根据本公开的组合物可以剂量单位形式配制。然而，应了解，本公开组合物的总每日用量将由主治医师在合理医学判断的范围内确定。针对任何特定患者的特定治疗有效、预防有效或在其他方面适当的剂量水平(例如，用于成像)将取决于多种因素，包括所治疗的病症的严重程度和鉴定(如果存在)；所用的一种或多种治疗剂和/或预防剂；所用特定组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；施用时间、施用途径和所用的特定药物组合物的排泄速率；治疗持续时间；与所用的特定药物组合物组合或同时使用的药物；以及医学领域中众所周知的类似因素。
[0566]
负载lnp可通过任何途径施用。在一些实施方案中，包括一种或多种本文所述的负载lnp的组合物(包括预防、诊断或成像组合物)通过多种途径中的一者或多者施用，包括口服、静脉内、肌肉内、动脉内、皮下、透皮或皮内、皮间、腹膜内、粘膜、鼻、肿瘤内、鼻内、通过吸入；作为口腔喷雾剂和/或散剂、鼻喷雾剂和/或气雾剂，和/或经由门静脉导管。在一些实施方案中，组合物可经静脉内、肌肉内、皮内、动脉内、肿瘤内、皮下或通过任何其他肠胃外施用途径或通过吸入施用。然而，考虑到药物递送科学的可能进展，本公开涵盖通过任何适当途径递送或施用本文所述的组合物。一般来说，最适当施用途径将取决于多种因素，包括包含一种或多种治疗剂和/或预防剂的负载lnp的性质(例如，其在例如血流和胃肠道的多种身体环境中的稳定性)、患者状况(例如，所述患者是否能够耐受特定施用途径)等。
[0567]
在某些实施方案中，根据本公开的组合物可以给定剂量中足以递送约0.0001mg/kg至约10mg/kg、约0.001mg/kg至约10mg/kg、约0.005mg/kg至约10mg/kg、约0.01mg/kg至约10mg/kg、约0.05mg/kg至约10mg/kg、约0.1mg/kg至约10mg/kg、约1mg/kg至约10mg/kg、约2mg/kg至约10mg/kg、约5mg/kg至约10mg/kg、约0.0001mg/kg至约5mg/kg、约0.001mg/kg至约5mg/kg、约0.005mg/kg至约5mg/kg、约0.01mg/kg至约5mg/kg、约0.05mg/kg至约5mg/kg、约0.1mg/kg至约5mg/kg、约1mg/kg至约5mg/kg、约2mg/kg至约5mg/kg、约0.0001mg/kg至约2.5mg/kg、约0.001mg/kg至约2.5mg/kg、约0.005mg/kg至约2.5mg/kg、约0.01mg/kg至约2.5mg/kg、约0.05mg/kg至约2.5mg/kg、约0.1mg/kg至约2.5mg/kg、约1mg/kg至约2.5mg/kg、约2mg/kg至约2.5mg/kg、约0.0001mg/kg至约1mg/kg、约0.001mg/kg至约1mg/kg、约0.005mg/kg至约1mg/kg、约0.01mg/kg至约1mg/kg、约0.05mg/kg至约1mg/kg、约0.1mg/kg至约1mg/kg、约0.0001mg/kg至约0.25mg/kg、约0.001mg/kg至约0.25mg/kg、约0.005mg/kg至约0.25mg/kg、约0.01mg/kg至约0.25mg/kg、约0.05mg/kg至约0.25mg/kg或约0.1mg/kg至约0.25mg/kg的治疗剂和/或预防剂(例如mrna)的剂量水平施用，其中1mg/kg(mpk)剂量提供1mg治疗剂和/或预防剂/1kg受试者体重。在一些实施方案中，可施用约0.001mg/kg至约10mg/kg的负载lnp的治疗剂和/或预防剂的剂量。在其他实施方案中，可施用约0.005mg/kg至约2.5mg/kg的治疗剂和/或预防剂的剂量。在某些实施方案中，可施用约0.1mg/kg至约1mg/kg的剂量。在其他实施方案中，可施用约0.05mg/kg至约0.25mg/kg的剂量。剂量可以相
同或不同量每天施用一次或多次，以获得所需水平的mrna表达和/或治疗、诊断、预防或成像作用。所需剂量可例如一天三次、一天二次、一天一次、每隔一天、每三天、每周、每两周、每三周或每四周递送。在某些实施方案中，所需剂量可使用多次施用(例如二次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次、十次、十一次、十二次、十三次、十四次或更多次施用)进行递送。在一些实施方案中，单一剂量可例如在手术程序之前或之后或在急性疾病、病症或疾患的情形中施用。
[0568]
包括一种或多种治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可与一种或多种其他治疗剂、预防剂、诊断剂或成像剂组合。“与......组合(in combination with)”不旨在暗示所述剂必须同时施用和/或被配制用于一起递送，尽管这些递送方法是在本公开的范围内。例如，可组合施用包括一种或多种不同的治疗剂和/或预防剂的一种或多种脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)。组合物可与一种或多种其他所需治疗剂或医学程序并行地、在一种或多种其他所需治疗剂或医学程序之前或之后施用。一般来说，每种剂将以针对所述剂确定的剂量和/或时程施用。在一些实施方案中，本公开涵盖其组合物或成像、诊断或预防组合物与改进其生物可用性、降低和/或调节其代谢、抑制其排泄和/或修饰其在身体内的分布的剂组合递送。
[0569]
应进一步理解，组合利用的治疗、预防、诊断或成像活性剂可在单一组合物中一起施用，或在不同组合物中分开地施用。一般来说，预期组合利用的剂是以不超过其个别地利用时水平的水平使用。在一些实施方案中，组合利用的水平可低于个别地利用的水平。
[0570]
用于组合方案中的疗法(治疗剂或程序)的特定组合将考虑到所需治疗剂和/或程序的可相容性以及待实现的所需治疗效应。还应理解，所用疗法可对同一病症实现所需效应(例如，可用于治疗癌症的组合物可与化学治疗剂并行地施用)，或者其可实现不同效应(例如，对例如输注相关反应的任何不良效应的控制)。
[0571]
脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可与剂组合使用以增加组合物的有效性和/或治疗窗。这种剂可为例如抗炎化合物、类固醇(例如皮质类固醇)、斯他汀、雌二醇、btk抑制剂、s1p1激动剂、糖皮质素受体调节剂(grm)或抗组胺。在一些实施方案中，脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可与地塞米松、氨甲蝶呤、对乙酰氨基酚、h1受体阻断剂或h2受体阻断剂组合使用。在一些实施方案中，一种治疗有需要的受试者或向受试者(例如哺乳动物)递送治疗剂和/或预防剂的方法可涉及在施用纳米粒子组合物之前用一种或多种剂预治疗所述受试者。例如，受试者可用适用量(例如，10mg、20mg、30mg、40mg、50mg、60mg、70mg、80mg、90mg、100mg或任何其他适用量)的地塞米松、氨甲蝶呤、对乙酰氨基酚、h1受体阻断剂或h2受体阻断剂预治疗。预治疗可在脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)的施用之前24小时或更短时间(例如，24小时、20小时、16小时、12小时、8小时、4小时、2小时、1小时、50分钟、40分钟、30分钟、20分钟或10分钟)发生并且可以例如增加的剂量发生一次、两次或更多次。
[0572]
本领域技术人员将认识到，或能够仅使用常规实验确定根据本文所述的公开内容的特定实施方案的许多等同物。本公开的范围不旨在局限于以上具体实施方式，而是如所附权利要求中所陈述。
[0573]
除非相反指示或在其他方面从本文显而易见，否则在权利要求中，例如“一个”、“一种”和“所述”的冠词可意指一个(种)或超过一个(种)。除非相反指示或在其他方面从本文显而易见，否则在一组的一个或多个成员之间包括“或”的权利要求或描述在所述组成员
中的一者、超过一者或全部存在于、用于给定产物或过程中或以其他方式与给定产物或过程相关时被视为满足条件的。本公开包括如下实施方案，其中确切地所述组的一个成员存在于、用于给定产物或过程中或以其他方式与给定产物或过程相关。本公开包括如下实施方案，其中组成员中的超过一者或全部存在于、用于给定产物或过程中或以其他方式与给定产物或过程相关。除非另外指定，否则如本文所用，表述“a、b或c中的一者或多者”、“一个或多个a、b或c”、“a、b和c中的一者或多者”、“一个或多个a、b和c”、“选自a、b和c”、“选自由a、b和c组成的组”等可互换使用并且均是指选自由a、b和/或c组成的组，即一个或多个a、一个或多个b、一个或多个c或其任何组合。
[0574]
还应注意，术语“包含”旨在是开放性的并且允许但不需要包括额外要素或步骤。当术语“包含”在本文中使用时，因此还涵盖并公开术语“基本上由......组成”和“由......组成”。在通篇描述中，在组合物被描述为具有、包括或包含特定组分的情况下，预期组合物也基本上由所陈述的组分组成，或由所陈述的组分组成。类似地，在方法或工艺被描述为具有、包括或包含特定工艺步骤的情况下，所述工艺也基本上由所陈述的工艺步骤组成，或由所陈述的工艺步骤组成。此外，应理解步骤的次序或关于执行某些动作的次序并不重要，只要本公开保持可操作即可。此外，两个或更多个步骤或动作可同时进行。
[0575]
在给出范围的情况下，包括端点。此外，还应理解除非另外指示或在其他方面从本文和本领域普通技术人员的理解显而易知，否则以范围表述的值可在本公开的不同实施方案中假设所陈述的范围内的任何特定值或子范围，除非本文另外清楚地指示，否则达到所述范围的下限的十分位。
[0576]
本公开的合成工艺可容许多种官能团，因此可使用多种被取代起始材料。所述工艺通常在总体过程结束或接近结束时提供所需的最终化合物，不过在某些情况下可能需要进一步将所述化合物转化为其药学上可接受的盐。
[0577]
本公开化合物可使用市售起始材料、文献中已知的化合物或由容易制备的中间体通过使用本领域技术人员已知或熟练技术人员鉴于本文教导将显而易知的标准合成方法和程序以多种方式制备。用于有机分子制备和官能团转化和操纵的标准合成方法和程序可获自相关科学文献或本领域中的标准教科书。尽管不限于任何一种或几种来源，但经典文本(例如smith,m.b.,march,j.,march's advanced organic chemistry:reactions,mechanisms,and structure,第5版,john wiley&sons:new york,2001；greene,t.w.,wuts,p.g.m.,protective groups in organic synthesis,第3版,john wiley&sons:new york,1999；r.larock,comprehensive organic transformations,vch publishers(1989)；l.fieser和m.fieser,fieser and fieser's reagents for organic synthesis,john wiley and sons(1994)；和l.paquette编,encyclopedia of reagents for organic synthesis,john wiley and sons(1995)，通过引用并入本文)是本领域技术人员已知的适用且公认的有机合成参考教科书。以下合成方法描述是经设计以说明(但不限制)用于本公开化合物的制备的一般程序。
[0578]
具有任何本文所述的式的本公开化合物均可根据以下方案1、2和3中说明的程序由市售起始材料或可使用文献程序制备的起始材料来制备。所述方案中的变量(例如，r1、r2和r3等如本文所定义)。本领域普通技术人员应注意，在本文所述的反应序列和合成方案期间，某些步骤的次序可变化，例如保护基团的引入和去除。
[0579]
本领域普通技术人员应认识到，某些基团可能需要经由使用保护基团来受到保护以免于经受反应条件。保护基团还可用于区分分子中的相似官能团。保护基团列表以及如何引入和去除这些基团可见于greene,t.w.,wuts,p.g.m.,protective groups in organic synthesis,第3版,john wiley&sons:new york,1999中。
[0580]
优选的保护基团包括但不限于：
[0581]
关于羟基部分：tbs、苄基、thp、ac。
[0582]
关于羧酸：苄基酯、甲酯、乙酯、烯丙酯。
[0583]
关于胺：fmoc、cbz、boc、dmb、ac、bn、tr、ts、三氟乙酰基、邻苯二甲酰亚胺、亚苄胺。
[0584]
关于二醇：ac(
×
2)tbs(
×
2)，或当合在一起时为丙酮化物。
[0585]
关于硫醇：ac。
[0586]
关于苯并咪唑：sem、苄基、pmb、dmb。
[0587]
关于醛：二烷基缩醛，例如二甲氧基缩醛或二乙基乙酰基。
[0588]
在本文所述的反应方案中，可产生多种立体异构体。当未指示特定立体异构体时，应理解意指可能由所述反应产生的所有可能的立体异构体。本领域普通技术人员应认识到，所述反应可经优化以优先地生成一种异构体，或者可设计新方案以产生单一异构体。如果产生混合物，则可使用例如制备型薄层色谱法、制备型hplc、制备型手性hplc或制备型sfc的技术来分离异构体。
[0589]
方案1
[0590][0591]
如以上方案1中所说明，8-溴辛酸与醇a1(例如十七烷-9-醇)反应以提供酯b1(例如8-溴辛酸十七烷-9-基酯)。步骤1可在有机溶剂(例如二氯甲烷)中在例如n-(3-二甲基氨基丙基)-n'-乙基碳化二亚胺盐酸盐、n,n-二异丙基乙胺和dmap存在下发生。步骤1可在室温下发生持续18h。然后，酯b1与2-氨基乙-1-醇反应以提供胺c1(例如8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯)。步骤2可在乙醇中在例如约60℃的温度下发生。然后，胺c1与溴烷基r
1-br(例如1-溴十四烷)反应以提供化合物d1(例如8-((2-羟基乙基)(十四烷基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯)。步骤3可在乙醇中在n,n-二异丙基乙胺存在下发生。
[0592]
方案2
[0593]
[0594][0595]
如以上方案2中所说明，酸a2(x3是1与7之间的整数；例如8-溴辛酸)与醇b2(例如壬-1-醇)反应以提供酯c2(例如壬基-8-溴辛酸酯)。步骤1可在有机溶剂(例如二氯甲烷)中在例如n-(3-二甲基氨基丙基)-n'-乙基碳化二亚胺盐酸盐、n,n-二异丙基乙胺和dmap存在下发生。醇e2(例如十七烷-9-醇)可经由步骤2获自醛d2(例如壬醛)与格氏试剂r
3-mgx(例如n-c8h
17
mgbr)的反应。接着，8-溴辛酸与醇e2(例如十七烷-9-醇)反应以提供酯f2(例如8-溴辛酸十七烷-9-基酯)。步骤3可在有机溶剂(例如二氯甲烷)中在例如n-(3-二甲基氨基丙基)-n'-乙基碳化二亚胺盐酸盐、n,n-二异丙基乙胺和dmap存在下发生。接着，酯f2与2-氨基乙-1-醇反应以提供胺g2(例如8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯)。步骤4可在乙醇中在i-pr2etn存在下发生。然后，胺g2与酯c2(例如壬基-8-溴辛酸酯)反应以提供化合物h2(例如8-((2-羟基乙基)(8-(壬氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯)。步骤5可在有机溶剂(例如cpme和mecn的混合物)中在碱(例如无机碱(例如k2co3)或非亲核有机碱(例如i-pr2etn))和催化剂(例如碘化物，例如ki或nai)存在下在例如升高的温度下(例如在约70-90℃，例如约80℃下)发生。
[0596]
方案3
[0597][0598]
如以上方案3中所说明，卤基烷醇(x3是1与12之间的整数，例如6-溴己-1-醇)与起始材料a3(x2是1与6之间的整数，例如4-(己氧基)-4-氧代丁酸)反应以提供卤化二酯b3(例如琥珀酸6-溴己基酯己酯)。化合物a3可通过醇(例如己-1-醇)与酸酐(例如琥珀酸酐、二氢-2h-吡喃-2,6(3h)-二酮、3-(叔丁氧基)-3-氧代丙酸、4-(叔丁氧基)-3-甲基-4-氧代丁酸或4-(叔丁氧基)-2-甲基-4-氧代丁酸)的反应获得。步骤1可在有机溶剂(例如二氯甲烷)中在例如n-(3-二甲基氨基丙基)-n'-乙基碳化二亚胺盐酸盐、n,n-二异丙基乙胺和dmap存在下发生。接着，卤化二酯b3与胺c3(x4是5与13之间的整数，x5是1与5之间的整数，例如8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯)反应以提供产物d3。步骤2可在有机溶剂(例如cpme和mecn的混合物)中在碱(例如无机碱(例如k2co3)和催化剂(例如碘化物如ki)和醚溶剂(例如环戊基甲醚)存在下在升高的温度(例如约90℃)下发生。
[0599]
本领域普通技术人员应认识到，在以上方案中，某些步骤的次序可互换。
[0600]
在某些方面，本公开还包括合成式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)和(b-c)中任一者的化合物和用于合成所述化合物的中间体的方法。
[0601]
在一些实施方案中，所述合成本公开化合物的方法包括使式(x2)化合物：与r
1-br反应以提供本公开化合物，其中每个变量如本文所定义。例如，m是5、6、7、8或9，优选地5、7或9。例如，r5、r6和r7中的每一者是h。例如，m是-c(o)o-或-oc(o)-。例如，r4是未被取代的c
1-3
烷基或-(ch2)nq，其中n是2、3或4并且q是oh、-nhc(s)n(r)2、-nhc(o)n(r)2、-n(r)c(o)r或-n(r)s(o)2r。例如，式(x2)化合物与r
1-br的反应在碱(例如无机碱(例如k2co3)或非亲核有机碱(例如i-pr2etn))存在下发生。例如，所述反应在无机碱(例如k2co3)和催化剂(例如碘化物如ki或nai)存在下发生。例如，所述反应在升高的温度(例如约50-100℃、70-90℃或约80℃)下发生。
[0602]
所述方法还可包括使式(x1)化合物：与r4nh2反应以提供式(x2)化合物，其中每个变量如本文所定义。
[0603]
在一些实施方案中，所述中间体包括具有式(x1)和(x2)中任一者的那些：其中每个变量如本文所定义。例如，所述中间体包括8-溴辛酸十七烷-9-基酯和8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯，和其形态形式(例如，结晶形式)。
[0604]
此外，应理解属于现有技术的本公开的任何特定实施方案均可明确地从权利要求的任何一项或多项排除。由于此类实施方案被认为是本领域普通技术人员所知的，因此可将其排除在外，即使在本文中未明确陈述所述排除。
[0605]
所有引用的来源(例如，参考文献、出版物、数据库、数据库入口和本文引用的技术)均通过引用并入本技术中，即使在引用中未明确陈述。在引用的来源与本技术的陈述有冲突的情况下，应以本技术中的陈述为准。
[0606]
实施例
[0607]
实施例1：合成表1化合物
[0608]
a.一般考虑
[0609]
除非另外注明，否则所有所用溶剂和试剂均在商业上获得并原样使用。1h nmr谱在cdcl3中在300k下使用bruker ultrashield 300mhz仪器加以记录。关于1h，化学位移被报告为相对于tms(0.00)的百万分率(ppm)。在isco combiflash rf lumen仪器上使用isco redisep rf gold flash cartridges(粒度：20-40微米)进行硅胶色谱法。在isco combiflash rf lumen仪器上使用redisep rf gold c18高效柱进行反相色谱法。所有最终化合物经由通过反相uplc-ms(保留时间，rt，以分钟计)分析经测定为超过85％纯，使用具有dad和elsd的waters acquity uplc仪器和zorbax快速解析高精度(rrhd)sb-c18 lc柱(2.1mm,50mm,1.8μm)，并且经5分钟梯度为具有0.1％tfa的65-100％乙腈/水，1.2ml/min。注射体积为5μl并且柱温为80℃。检测是基于使用waters sqd质谱仪(milford,ma,usa)和蒸发光散射检测器以正模式进行的电喷雾电离(esi)。
[0610]
lcms方法：
[0611]
仪器信息：hplc/ms-agilent 1100
[0612]
柱：agela technologies durashell c18 3.5μm，4.6
×
50mm
[0613]
流动相a：水/0.1％三氟乙酸
[0614]
流动相b：乙腈/0.1％三氟乙酸
[0615]
流动速率：1ml/min
[0616]
梯度：5分钟内70％b-100％b，保持100％b持续10分钟，分钟内100％b-70％b，然后停止。
[0617]
柱温：环境
[0618]
检测器：elsd
[0619]
下文所述的程序可用于合成表1化合物。
[0620]
以下缩写用于本文中：
[0621]
thf：四氢呋喃
[0622]
mecn：乙腈
[0623]
lah：氢化锂铝
[0624]
dcm：二氯甲烷
[0625]
dmap：4-二甲基氨基吡啶
[0626]
lda：二异丙基胺化锂
[0627]
rt：室温
[0628]
dme：1,2-二甲氧基乙烷
[0629]
n-buli：正丁基锂
[0630]
cpme：环戊基甲醚
[0631]
i-pr2etn：n,n-二异丙基乙胺
[0632]
化合物7、12和13的代表性合成
[0633][0634]
代表性程序a：格氏试剂rmgx 1,4-加成到(e)-壬-2-烯酸甲酯1
[0635]
a1.化合物2a：3-丁基壬酸甲酯
[0636][0637]
化学式:c
14h28
o2[0638]
分子量:228.4
[0639]
向烘干的100ml圆底烧瓶中加入溴化铜(i)(421.3mg，2.93mmol)和氯化锂(249mg，5.87mmol)，然后加入无水thf(15ml)并且将所述混合物搅拌10min，在此期间固体溶解。将所述烧瓶放入冰浴中并加入(e)-壬-2-烯酸甲酯1(5g，29.37mmol)，接着加入tmscl(4ml，32.31mmol)。将反应搅拌15min。缓慢地加入丁基溴化镁的thf溶液(17.6ml，35.2mmol，2.0m于thf中)并且将反应搅拌2h。反应用饱和nh4cl(10ml)淬灭并用二乙醚(100ml)萃取并且经无水硫酸钠干燥。在去除溶剂之后，粗物质通过快速色谱法(sio2:乙酸乙酯/己烷0-100％)纯化并获得无色油状产物2a(3g，45％)。1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 3.64(s,3h)；2.21(d,2h,j＝6.9hz)；1.85-1.81(m,1h)；1.23-1.20(m,16h)；0.86-0.84(m,6h)。
[0640]
a2.化合物2b：3-异丙基壬酸甲酯
[0641][0642]
化学式:c
13h26
o2[0643]
分子量:214.3
[0644]
与程序a1相同，但使用异丙基溴化镁。产量＝2.4g(38％)。1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 3.65(s,3h)；2.25(dd,1h,j＝15.1,6.1hz)；2.14(dd,1h,j＝15.1,7.1hz)；1.23-1.20(m,12h)；0.87-0.84(m,9h)。
[0645]
a3.化合物2c：3-丙基壬酸甲酯
[0646][0647]
化学式:c
13h26
o2[0648]
分子量:214.3
[0649]
与程序a1相同，但使用正丙基溴化镁。产量＝2.2g(35％)。1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 3.64(s,3h)；2.23(d,2h,j＝6.8hz)；1.85-1.84(m,1h)；1.23-1.20(m,14h)；0.87-0.84(m,6h)。
[0650]
代表性程序b：lah还原
[0651]
b1.化合物3a：3-丁基壬-1-醇
[0652][0653]
化学式：c
13h28o[0654]
分子量：200.4
[0655]
3-丁基壬酸甲酯2a(2.2g，9.63mmol)于thf(10ml)中的溶液在n2下滴加至lialh4(0.73g，19.27mmol)于thf(10ml)中的搅拌悬浮液中。所述混合物在回流下加热5h。将反应冷却至室温。在0℃冰-水浴下，依序加入0.7ml h2o、0.7ml 15％naoh、2.1ml h2o。过滤白色沉淀物，并浓缩滤液。粗产物通过快速色谱法(sio2：乙酸乙酯/己烷0-100％)纯化并获得无色油状产物3a(980mg，51％)。1h nmr(300mhz，cdcl3)：δppm 3.64(t，2h，j＝6.8hz)；1.52(q，2h，j＝7.1hz)；1.32-1.30(m，1h)；1.23-1.20(m，17h)；0.88-0.84(m，6h)。
[0656]
b2.化合物3b：3-异丙基壬-1-醇
[0657][0658]
化学式：c
12h26o[0659]
分子量：186.3
[0660]
与程序b1相同，但使用3-异丙基壬酸甲酯2b。产量＝1.7g(81％)。1h nmr(300mhz，cdcl3)：δppm 3.64(m，2h)；1.55(m，2h)；1.43-1.41(m，1h)；1.23-1.20(m，12h)；0.88-0.84(m，9h)。
[0661]
b3.化合物3c：3-丙基壬-1-醇
[0662][0663]
化学式：c
12h26o[0664]
分子量：186.3
[0665]
与程序b1相同，但使用3-丙基壬酸甲酯2c。产量＝1.28g(67％)。1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 3.64(t,2h,j＝6.6hz)；1.52(q,2h,j＝6.3hz)；1.23-1.20(m,16h)；0.88-0.84(m,6h)。
[0666]
关于8-溴辛酸4的酯化的代表性程序c
[0667]
c1.化合物5a：8-溴辛酸3-丁基壬酯
[0668][0669]
化学式:c
21h41
bro2[0670]
分子量:405.5
[0671]
在0℃下向3-丁基壬-1-醇3a(458mg，2.28mmol)、8-溴辛酸4(611.9mg，2.74mmol)和dmap(55.9mg，0.46mmol)于二氯甲烷(30ml)中的溶液中加入edci(657.3mg，3.43mmol)并且将反应混合物在室温下搅拌过夜。tlc显示反应完成。将反应混合物冷却至0℃并缓慢地加入1n盐酸(3ml)，然后所述混合物用二乙醚(100ml)萃取并分离各层。有机层用饱和碳酸氢钠(100ml)、水和盐水洗涤。分离有机层并浓缩。粗物质通过快速色谱法(sio2:己烷/二乙醚0-100％)纯化并获得无色油状产物5a(680mg.73％)。1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 4.07(t,2h,j＝6.8hz)；3.39(t,2h,j＝6.8hz)；2.28(t,2h,j＝7.6hz)；1.88-1.79(m,2h)；1.70-1.42(m,6h)；1.38-1.17(m,21h)；0.88-0.82(m,6h)。
[0672]
c2.化合物5b：8-溴辛酸3-异丙基壬酯
[0673][0674]
化学式:c
20h39
bro2[0675]
分子量:391.4
[0676]
与程序c1相同，但使用3-异丙基壬-1-醇3b。产量＝297mg(71％)。1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 4.05(dd,2h,j＝14.3,6.6hz)；3.39(t,2h,j＝6.8hz)；2.28(t,2h,j＝7.7hz)；1.86-1.81(m,2h)；1.70-1.42(m,6h)；1.38-1.17(m,16h)；0.84-0.82(m,9h)。
[0677]
c3.化合物5c：8-溴辛酸3-丙基壬酯
[0678][0679]
化学式:c
20h39
bro2[0680]
分子量:391.4
[0681]
与程序c1相同，但使用3-丙基壬-1-醇3c。产量＝430mg(68％)。1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 3.96(d,2h,j＝5.8hz)；3.38(t,2h,j＝5.5hz)；2.27(t,2h,j＝7.4hz)；1.88-1.79(m,2h)；1.70-1.42(m,6h)；1.38-1.17(m,19h)；0.88-0.82(m,6h)。
[0682]
代表性程序d：8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯6的n-烷基化
[0683]
d1.化合物7：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(2-羟基乙基)氨基)辛酸3-丁基壬酯(86-g-nbu)
[0684][0685]
化学式:c
48h95
no5[0686]
分子量:766.3
[0687]
在与冷凝器连接的500ml圆底烧瓶中，将8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯6(601mg，1.36mmol)、8-溴辛酸3-丁基壬酯5a(606mg，1.49mmol)、碳酸钾(676mg，4.9mmol)和碘化钾(248.4mg，1.49mmol)混合于环戊基甲醚(30ml)和乙腈(30ml)中，并且将反应混合物加热至85℃持续18h。ms显示完全转化，并且将所述混合物冷却至室温并用己烷稀释。所述混合物经硅藻土垫过滤。在用己烷洗涤后，浓缩滤液以得到棕色油状物，所述油状物通过快速色谱法(sio2:己烷/二乙醚0-100％)纯化以提供呈无色油状的7(588mg.56％)。hplc/elsd:rt＝7.07min。关于c
48h95
no5，ms(ci):m/z(mh

)766.7。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.85(五重峰,1h,j＝6.1hz)；4.07(t,2h,j＝6.9hz)；3.50(t,2h,j＝5.5hz)；2.98(bs,1h)；2.55(t,2h,j＝5.2hz)；2.41(t,4h,j＝7.4hz)；2.26(t,4h,j＝7.4hz)；1.65-1.48(m,19h)；1.26(br.m,48h)；0.88-0.84(m,12h)。
[0688]
d2.化合物12：8-((2-羟基乙基)(8-((3-异丙基壬基)氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(86-g-ipr)
[0689][0690]
化学式:c
47h93
no5[0691]
分子量:752.3
[0692]
与程序d1相同，但使用8-溴辛酸3-异丙基壬酯5b。产量＝258mg(50％)。hplc/elsd:rt＝6.98min。关于c
47h93
no5，ms(ci):m/z(mh

)752.6。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.85(五重峰,1h,j＝6.1hz)；4.07(m,2h)；3.50(t,2h,j＝5.2hz)；3.01(bs,1h)；2.55(t,2h,j＝5.2hz)；2.41(t,4h,j＝7.4hz)；2.26(dd,4h,j＝7.6,2.7hz)；1.65-1.48(m,14h)；1.26(br.m,48h)；0.88-0.84(m,15h)。
[0693]
d3.化合物13：8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-((3-丙基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(86-g-npr)
[0694][0695]
化学式:c
47h93
no5[0696]
分子量:752.3
[0697]
与程序d1相同，但使用8-溴辛酸3-丙基壬酯5c。产量＝510mg(68％)。hplc/elsd:rt＝7.01min。关于c
47h93
no5，ms(ci):m/z(mh )752.6。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.85(五重峰,1h,j＝6.3hz)；4.07(t,2h,j＝7.1hz)；3.50(t,2h,j＝5.5hz)；2.98(bs,1h)；2.55(t,2h,j＝5.2hz)；2.41(t,4h,j＝7.4hz)；2.26(t,4h,j＝7.4hz)；1.65-1.48(m,17h)；1.26(br.m,48h)；0.88-0.84(m,12h)。
[0698]
用于制备化合物8的合成方案
[0699][0700]
c4.化合物5d：8-溴辛酸2-丙基壬酯
[0701][0702]
化学式:c
2oh39
bro2[0703]
分子量；391.4
[0704]
与程序c1相同，但使用2-丙基壬-1-醇15a。产量＝1.67g(79％)。1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 3.96(d,2h,j＝5.8hz)；3.38(t,2h,j＝5.5hz)；2.27(t,2h,j＝7.4hz)；1.88-1.79(m,2h)；1.70-1.42(m,6h)；1.38-1.17(m,19h)；0.88-0.82(m,6h)。
[0705]
d4.化合物8：8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-((2-丙基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(86-b-npr)
[0706][0707]
化学式:c
47h93
no5[0708]
分子量：752.3
[0709]
与程序d1相同，但使用8-溴辛酸2-丙基壬酯5d。产量＝355mg(68％)。hplc/elsd:rt＝7.0min。关于c
47h93
no5，ms(ci):m/z(mh

)752.6。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.85(五重峰,1h,j＝6.3hz)；3.95(d,2h,j＝5.8hz)；3.50(t,2h,j＝5.5hz)；3.02(bs,1h)；2.55(t,2h,j＝5.5hz)；2.41(t,4h,j＝7.7hz)；2.26(dd,4h,j＝13.9,6.6hz)；1.65-1.48(m,17h)；1.26(br.m,48h)；0.88-0.84(m,12h)。
[0710]
合成中间体：
[0711]
中间体aa：3-丙基己-2-烯酸乙酯
[0712][0713]
化学式：c
11h20
o2[0714]
分子量:184.28
[0715]
将膦酸乙酸三乙酯(11.3ml，56.9mmol)经20分钟滴加至氢化钠(2.28g，56.9mmol)于thf(17ml)中的悬浮液中并将所述混合物在室温下搅拌，直至气体逸出停止(大约30min)。将反应混合物冷却至0℃并且分成多份加入4-庚酮(6.12ml，43.8mmol)。反应逐渐升温至室温并使其在回流下搅拌24h。将反应冷却至室温，然后用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭。水相用二乙醚萃取，并且有机萃取物用盐水洗涤，干燥(mgso4)，并浓缩。粗材料通过硅胶色谱法(0-20％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状并且呈区域异构体的混合物的3-丙基己-2-烯酸乙酯(8.07g，43.8mmol，100％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)呈区域异构体的混合物δ:ppm 5.63(s,1h)；5.38-5.25(m,0.74h)；4.19-4.07(m,3.40h)；3.02(s,0.81h)；2.96(s,0.59h)；2.57(ddd,2h,j＝6.0,6.0,3.0hz)；2.16-1.98(m,4.87h)；1.57-1.35(m,6.10h)；1.34-1.21(m,7.59h)；1.01-0.82(m,12.9h)。
[0716]
中间体ab：3-丙基己酸乙酯
[0717][0718]
化学式:c
11h22
o2[0719]
分子量:186.30
[0720]
向配备有搅拌棒的钢parr反应器中装入含3-丙基己-2-烯酸乙酯(8.07g，43.8mmol)的乙醇(44ml)。加入氢氧化钯/碳(922mg，6.57mmol)并密封所述容器，抽真空，用h2气体回填(3次)，并且将压力设定至200psi。反应在500rpm下，在200psi h2气体下，在室温下搅拌2h。然后将所述容器抽真空，用n2气体回填，并打开。粗反应混合物经由硅藻土垫过滤。所述硅藻土垫用etoh洗涤并浓缩粗物质以得到呈透明油状的3-丙基己酸乙酯(6.55g，35.2mmol，80％)。所述化合物未经进一步纯化即继续用于下一步骤。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.12(q,2h,j＝6.0hz)；2.22(d,2h,j＝9.0hz)；1.95-1.81(m,1h)；1.38-1.18(m,11h)；0.89(br.t,6h,j＝6.0hz)。
[0721]
中间体ac：3-丙基己-1-醇
[0722][0723]
化学式:c9h
20o[0724]
分子量；144.26
[0725]
在n2下在0℃下向氢化锂铝(1.60g，42.2mmol)于无水乙醚(42ml)中的混合物中滴加含3-丙基己酸乙酯(6.55g，35.2mmol)的无水乙醚(28ml)。将所述混合物在室温下搅拌2.5h，然后冷却至0℃。将水(1ml/g lialh4)滴加至所述溶液中，接着缓慢加入15％氢氧化钠(1ml/g lialh4)和水(3ml/g lialh4)。将所述溶液在室温下搅拌几分钟并经由硅藻土垫过滤。所述硅藻土垫用二乙醚洗涤并浓缩滤液。粗物质通过硅胶色谱法(0-40％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状的3-丙基己-1-醇(4.82g，33.4mmol，95％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 3.67(t,2h,j＝6.0hz)；1.57-1.39(m,3h)；1.37-1.18(m,9h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0726]
中间体ad：3-丁基庚-2-烯酸乙酯
[0727][0728]
化学式:c
13h24
o2[0729]
分子量:212.33
[0730]
将膦酸乙酸三乙酯(9.07ml，45.7mmol)经20分钟滴加至氢化钠(1.83g，45.7mmol)于thf(14ml)中的悬浮液中并且将所述混合物在室温下搅拌，直至气体逸出停止(大约30min)。将反应混合物冷却至0℃并且分成多份加入5-壬酮(6.05ml，35.2mmol)。反应逐渐升温至室温并使其在回流下搅拌24h。将反应冷却至室温，然后用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭。水相用二乙醚萃取，并且有机萃取物用盐水洗涤，干燥(mgso4)，并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-20％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状的3-丁基庚-2-烯酸乙酯(5.27g，24.8mmol，71％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.62(s,1h)；4.14(q,2h,j＝6.0hz)；2.59(t,2h,j＝6.0hz)；2.14(t,2h,j＝6.0hz)；1.50-1.23(m,11h)；0.99-0.82(m,6h)。
[0731]
中间体ae：3-丁基庚酸乙酯
[0732][0733]
化学式:c
13h26
o2[0734]
分子量:214.35
[0735]
向配备有搅拌棒的钢parr反应器中装入含3-丁基庚-2-烯酸乙酯(10.5g，49.5mmol)的乙醇(50ml)。加入氢氧化钯/碳(1.04g，7.42mmol)并密封所述容器，抽真空，用h2气体回填(3次)，并且将压力设定至200psi。反应在500rpm下，在200psi h2气体下，在室温下搅拌2h。然后将所述容器抽真空，用n2气体回填，并打开。粗反应混合物经由硅藻土垫过滤。所述硅藻土垫用etoh洗涤并浓缩粗物质以得到呈透明油状的3-丁基庚酸乙酯(9.69g，45.2mmol，91％)。所述化合物未经进一步纯化即继续用于下一步骤。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.12(q,2h,j＝9.0hz)；2.22(d,2h,j＝6.0hz)；1.90-1.76(m,1h)；1.38-1.19(m,15h)；0.88(br.t,6h,j＝6.0hz)。
[0736]
中间体af：3-丁基庚-1-醇
[0737][0738]
化学式：c
11h24o[0739]
分子量:172.31
[0740]
在n2下在0℃下向氢化锂铝(850mg，22.4mmol)于无水乙醚(23ml)中的混合物中滴加含3-丁基庚酸乙酯(4.00g，18.7mmol)的无水乙醚(15ml)。将所述混合物在室温下搅拌2.5h，然后冷却至0℃。水(1ml/g lialh4)滴加至所述溶液中，接着缓慢加入15％氢氧化钠(1ml/g lialh4)和水(3ml/g lialh4)。将所述溶液在室温下搅拌几分钟并经由硅藻土垫过滤。所述硅藻土垫用二乙醚洗涤并浓缩滤液。粗物质通过硅胶色谱法(0-40％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状的3-丁基庚-1-醇(3.19g，18.5mmol，99％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm3.66(t,2h,j＝6.0hz)；1.53(q,2h,j＝6.0hz)；1.46-1.36(m,1h)；1.35-1.21(m,12h)；1.18(br.s,1h)；0.89(br.t,6h,j＝6.0hz)。
[0741]
中间体ag：3-戊基辛-2-烯酸乙酯
[0742][0743]
化学式:c
15h28
o2[0744]
分子量:240.39
[0745]
将膦酸乙酸三乙酯(10.6ml，53.4mmol)经20分钟滴加至氢化钠(2.13g，53.4mmol)于thf(16ml)中的悬浮液中并且将所述混合物在室温下搅拌，直至气体逸出停止(大约30min)。将反应混合物冷却至0℃并且分成多份加入6-十一烷酮(8.42ml，41.1mmol)。反应逐渐升温至室温并使其在回流下搅拌60h。将反应冷却至室温，然后用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭。水相用二乙醚萃取，并且有机萃取物用盐水洗涤，干燥(mgso4)，并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-20％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状的3-戊基辛-2-烯酸乙酯(8.76g，36.5mmol，89％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.61(s,1h)；4.14(q,2h,j＝6.0hz)；2.58(ddd,2h,j＝9.0,9.0,6.0hz)；2.13(ddd,2h,j＝6.0,6.0,3.0hz)；1.52-1.38(m,3h)；1.38-1.23(m,12h)；0.93-0.86(m,6h)。
[0746]
中间体ah：3-戊基辛酸乙酯
[0747][0748]
化学式:c
15h30
o2[0749]
分子量:242.40
[0750]
向配备有搅拌棒的钢parr反应器中装入含3-戊基辛-2-烯酸乙酯(8.76g，36.5mmol)的乙醇(37ml)。加入氢氧化钯/碳(768mg，5.47mmol)并且密封所述容器，抽真空，用h2气体回填(3次)，并且将压力设定至200psi。反应在500rpm下，在200psi h2气体下，在室温下搅拌2h。然后将所述容器抽真空，用n2气体回填，并打开。粗反应混合物经由硅藻土垫过滤。所述硅藻土垫用etoh洗涤并浓缩粗物质以得到呈透明油状的3-戊基辛酸乙酯(8.45g，34.9mmol，96％)。所述化合物未经进一步纯化即继续用于下一步骤。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.12(q,2h,j＝6.0hz)；2.22(d,2h,j＝6.0hz)；1.92-1.77(br.m,1h)；1.37-1.19(m,19h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0751]
中间体ai：3-戊基辛-1-醇
[0752][0753]
化学式：c
13h28o[0754]
分子量:200.37
[0755]
在n2下在0℃下向氢化锂铝(1.59g，41.8mmol)于无水乙醚(42ml)中的混合物中滴加含3-戊基辛酸乙酯(8.45g，34.9mmol)的无水乙醚(28ml)。所述混合物在室温下搅拌2.5h，然后冷却至0℃。将水(1ml/g lialh4)滴加至所述溶液中，接着缓慢加入15％氢氧化钠(1ml/g lialh4)和水(3ml/g lialh4)。所述溶液在室温下搅拌几分钟并经由硅藻土垫过滤。所述硅藻土垫用二乙醚洗涤并浓缩滤液。粗物质通过硅胶色谱法(0-40％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状的3-戊基辛-1-醇(6.98g，34.9mmol，100％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm3.66(t,2h,j＝6.0hz)；1.53(q,2h,j＝6.0hz)；1.47-1.37(br.s,1h)；1.36-1.15(m,17h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0756]
中间体aj：3-戊基辛醛
[0757][0758]
化学式:c
13h26o[0759]
分子量:198.35
[0760]
在n2气氛下向氯铬酸吡啶鎓(9.02g，41.8mmol)和硅胶(9.02g，1g/g氯铬酸吡啶鎓)于二氯甲烷(90ml)中的搅拌悬浮液中加入3-戊基辛-1-醇(6.98g，34.9mmol)。将所述悬浮液在室温下搅拌1h。反应物然后经由硅藻土垫过滤，所述硅藻土垫用二氯甲烷洗涤，并浓缩滤液。粗物质通过硅胶色谱法(0-20％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状的3-戊基辛醛(4.66g，23.5mmol，67％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 9.76(t,1h,j＝3.0hz)；2.33(dd,2h,j＝6.0,3.0hz)；2.01-1.86(br.m,1h)；1.40-1.19(m,16h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0761]
中间体ak：6-烯丙基十一烷
[0762][0763]
化学式：c
14h28
[0764]
分子量：196.38
[0765]
在n2下向甲基三苯基溴化鏻(4.68g，13.1mmol)于无水乙醚(190ml)中的悬浮液中一次性加入叔丁醇钾(1.47g，13.1mmol)。将所述混合物在室温下搅拌15分钟，然后经15min滴加含3-戊基辛醛(2.00g，10.1mmol)的无水乙醚(26ml)。使所得混合物在室温下搅拌90min。反应混合物用冰水稀释，分离各层，并且用乙醚萃取有机层。将合并的有机物干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-10％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状的6-烯丙基十一烷(1.65g，8.38mmol，83％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.77(dddd,1h,j＝15.0,12.0,9.0,9.0hz)；5.03-4.94(m,2h)；2.02(ddd,2h,j＝9.0,6.0,6.0hz)；1.43-1.16(m,17h)；0.88(d,6h,j＝6.0hz)。
[0766]
中间体al：4-戊基壬-1-醇
[0767][0768]
化学式:c
14h30o[0769]
分子量:214.39
[0770]
在n2气氛下向硼氢化钠(131mg，3.46mmol)于无水二甘醇二甲醚(3.6ml)中的搅拌溶液中加入6-烯丙基十一烷(2.26g，11.5mmol)于无水二甘醇二甲醚(2.3ml)中的溶液。接着，在室温下经15min加入三氟化硼醚合物(569μl，4.61mmol)于1.2ml无水二甘醇二甲醚中的溶液。将所得混合物搅拌1小时，然后滴加水(1.2ml)。当气体逸出停止时，在室温下加入2.3ml 3m naoh，接着在40℃下滴加2.3ml 30％h2o2。在40℃下搅拌1小时后，将反应物倒入10ml水中。反应容器用额外水洗涤。合并的水溶液用乙醚萃取(2次)。合并的醚萃取物用水(
×
5)洗涤。将醚萃取物干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-40％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状的4-戊基壬-1-醇(1.88g，8.77mmol，76％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 3.62(t,2h,j＝6.0hz)；1.60-1.48(m,2h)；1.37-1.19(m,20h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0771]
中间体am：8-溴辛酸3-丙基己酯
[0772][0773]
化学式:c
17h33
bro2[0774]
分子量:349.35
[0775]
在0℃下向3-丙基己-1-醇(4.82g，33.4mmol)、8-溴辛酸(8.94g，40.1mmol)和dmap(816mg，6.68mmol)于二氯甲烷(58ml)中的溶液中加入edci(9.60g，50.1mmol)并且将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物冷却至0℃并且经20分钟缓慢地加入10％盐酸溶液(180ml)。分离各层，并且在真空中浓缩有机层以得到粗油状物。将所述油状物溶解在己烷(180ml)中并用乙腈(180ml)和5％碳酸氢钠(180ml)的混合物洗涤。分离己烷层，干燥(mgso4)，并过滤。在真空下去除溶剂以得到呈透明油状的8-溴辛酸3-丙基己酯(10.9g，31.2mmol，93％)。所述化合物未经进一步纯化即继续用于下一步骤。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.40(t,2h,j＝6.0hz)；2.28(t,2h,j＝6.0hz)；1.85(五重峰,2h,j＝6.0hz)；1.68-1.51(m,4h)；1.49-1.18(m,15h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0776]
中间体an：8-溴辛酸3-丁基庚酯
[0777][0778]
化学式:c
19h37
bro2[0779]
分子量：377.41
[0780]
在0℃下向3-丁基庚-1-醇(3.19g，18.5mmol)、8-溴辛酸(4.96g，22.2mmol)和dmap(453mg，3.71mmol)于二氯甲烷(32ml)中的溶液中加入edci(5.33g，27.8mmol)并且将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物冷却至0℃并且经20分钟缓慢地加入10％盐酸溶液(150ml)。分离各层，并且在真空中浓缩有机层以得到粗油状物。将所述油状物溶解在己烷(150ml)中并用乙腈(150ml)和5％碳酸氢钠(150ml)的混合物洗涤。分离己烷层，干燥(mgso4)，并过滤。在真空下去除溶剂以得到呈透明油状的8-溴辛酸3-丁基庚酯(6.90g，18.3mmol，99％)。所述化合物未经进一步纯化即继续用于下一步骤。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.40(t,2h,j＝6.0hz)；2.29(t,2h,j＝6.0hz)；1.85(五重峰,2h,j＝6.0hz)；1.69-1.52(m,4h)；1.49-1.20(m,19h)；0.89(br.t,6h,j＝6.0hz)。
[0781]
中间体ao：8-溴辛酸3-戊基辛酯
[0782][0783]
化学式：c
21h41
bro2[0784]
分子量:405.46
[0785]
在0℃下向3-戊基辛-1-醇(2.00g，9.98mmol)、8-溴辛酸(2.67g，12.0mmol)和dmap(244mg，2.00mmol)于二氯甲烷(18ml)中的溶液中加入edci(2.87g，15.0mmol)并且将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物冷却至0℃并且经20分钟缓慢地加入10％盐酸溶液(70ml)。分离各层，并且在真空中浓缩有机层以得到粗油状物。将所述油状物溶解在
己烷(70ml)中并用乙腈(70ml)和5％碳酸氢钠(70ml)的混合物洗涤。分离己烷层，干燥(mgso4)，并过滤。在真空下去除溶剂以得到呈透明油状的8-溴辛酸3-戊基辛酯(3.94g，9.72mmol，97％)。所述化合物未经进一步纯化即继续用于下一步骤。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.40(t,2h,j＝6.0hz)；3.29(t,2h,j＝6.0hz)；1.85(五重峰,2h,j＝6.0hz)；1.68-1.52(m,4h)；1.49-1.19(m,23h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0786]
中间体ap：4-戊基壬基-8-溴辛酸酯
[0787][0788]
化学式：c
22h43
bro2[0789]
分子量；419.49
[0790]
在0℃下向4-戊基壬-1-醇(1.88g，8.77mmol)、8-溴辛酸(2.35g，10.5mmol)和dmap(214mg，1.75mmol)于二氯甲烷(15ml)中的溶液中加入edci(2.52g，13.2mmol)并且将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物冷却至0℃并且经20分钟缓慢地加入10％盐酸溶液(60ml)。分离各层，并且在真空中浓缩有机层以得到粗油状物。将所述油状物溶解在己烷(60ml)中并用乙腈(60ml)和5％碳酸氢钠(60ml)的混合物洗涤。分离己烷层，干燥(mgso4)，并过滤。在真空下去除溶剂以得到呈透明油状的4-戊基壬基-8-溴辛酸酯(3.68g，8.77mmol，100％)。所述化合物未经进一步纯化即继续用于下一步骤。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.04(t,2h,j＝6.0hz)；3.40(t,2h,j＝6.0hz)；2.29(t,2h,j＝6.0hz)；1.85(五重峰,2h,j＝6.0hz)；1.70-1.52(m,4h)；1.50-1.18(m,25h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0791]
中间体aq：8-溴辛酸十五烷-8-基酯
[0792][0793]
化学式：c
23h45
bro2[0794]
分子量：433.52
[0795]
向8-溴辛酸(1.98g，8.87mmol)于二氯甲烷(30ml)中的溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(2.13g，11.1mmol)、4-(二甲基氨基)吡啶(0.217g，1.77mmol)和十五烷-8-醇(2.03g，8.87mmol)。使反应在室温下搅拌18小时。将反应混合物冷却至0℃并缓慢地加入10％盐酸溶液。分离有机层并在真空下蒸发。将残余物溶解在己烷中并用乙腈和饱和nahco3(水溶液)的1:1混合物洗涤。分离己烷层，经mgso4干燥，然后过滤并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法(0-10％乙酸乙酯/己烷)纯化以获得呈无色液体状的8-溴辛酸十五烷-8-基酯和8-氯辛酸十五烷-8-基酯的约13.2:1混合物(3.19g，83.1％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；3.55(t,0.14h)；3.42(t,1.86h)；2.31(t,2h)；1.88(p,2h)；1.72-1.59(m,2h)；1.59-1.42(m,6h)；1.42-1.18(m,24h)；0.90(t,
[0809]
分子量：349.35
[0810]
向8-溴辛酸(4.00g，17.9mmol)于二氯甲烷(60ml)中的溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(4.31g，22.5mmol)、4-(二甲基氨基)吡啶(0.438g，3.59mmol)和5-壬醇(2.59g，17.9mmol)。使反应在室温下搅拌18小时。将反应混合物冷却至0℃并缓慢地加入10％盐酸溶液。分离有机层并在真空下蒸发。将残余物溶解在己烷中并用乙腈和饱和nahco3(水溶液)的1:1混合物洗涤。分离己烷层，经mgso4干燥，然后过滤并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法(0-10％乙酸乙酯/己烷)纯化以获得呈无色液体状的8-溴辛酸壬-5-基酯和8-氯辛酸壬-5-基酯的约7:1混合物(5.23g，83.5％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.90(p,1h)；3.55(t,0.25h)；3.42(t,1.75h)；2.31(t,2h)；1.88(p,2h)；1.72-1.59(m,2h)；1.59-1.19(m,18h)；0.91(t,6h)。
[0811]
中间体au：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-丙基己酯
[0812][0813]
化学式:c
25h50
n2o4[0814]
分子量:442.69
[0815]
经20min过程向n-(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(23.9g，137mmol)于etoh(60ml)中的溶液中加入含8-溴辛酸3-丙基己酯(8.00g，22.3mmol)的etoh(55ml)。将反应加热至60℃并使其在此温度下搅拌16h。在冷却时，溶剂蒸发并且残余物用乙酸乙酯稀释并用饱和nahco3水溶液和盐水洗涤(5次)，直至在水层中未观察到白色沉淀物。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。残余物通过快速色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-丙基己酯(5.81g，13.1mmol，57％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.16(br.s,1h)；4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.19(br.q,2h,j＝6.0hz)；2.65(t,2h,j＝6.0hz)；2.56(t,2h,j＝6.0hz)；2.27(t,2h,j＝6.0hz)；1.70-1.51(m,6h)；1.50-1.39(m,3h)；1.43(s,9h)；1.36-1.17(m,15h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0816]
中间体av：8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸3-丙基己酯
[0817][0818]
化学式:c
19h39
no3[0819]
分子量:329.53
[0820]
向配备有搅拌棒的圆底烧瓶中加入8-溴辛酸3-丙基己酯(2.82g，8.06mmol)、乙醇胺(14.6ml，242mmol)和乙醇(6ml)。使所得混合物在40℃下搅拌16h。反应用二氯甲烷稀释，用水洗涤(2次)，并分离各层。干燥有机层(mgso4)，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸3-丙基己酯(876mg，2.66mmol，33％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.63(t,2h,j＝6.0hz)；2.77(t,2h,j＝6.0hz)；2.61(t,2h,j＝6.0hz)；2.28(t,2h,j＝6.0hz)；1.91(br.s,2h)；1.68-1.39(m,7h)；
1.38-1.18(m,14h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0821]
中间体aw：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[0822][0823]
化学式:c
29h58
n2o4[0824]
分子量；498.79
[0825]
经20min过程向n-(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(15.5g，88.8mmol)于etoh(38ml)中的溶液中加入含8-溴辛酸3-戊基辛酯(6.00g，14.8mmol)的etoh(36ml)。将反应加热至60℃并使其在此温度下搅拌16h。在冷却时，溶剂蒸发并且残余物用乙酸乙酯稀释并用饱和nahco3水溶液和盐水洗涤(5次)，直至在水层中未观察到白色沉淀物。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。残余物通过快速色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(4.23g，8.49mmol，57％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.17(br.s,1h)；4.07(t,2h,j＝6.0hz)；3.19(br.q,2h,j＝6.0hz)；2.66(t,2h,j＝6.0hz)；2.56(t,2h,j＝6.0hz)；2.28(t,2h,j＝6.0hz)；1.70-1.52(m,6h)；1.51-1.39(m,3h)；1.44(s,9h)；1.36-1.19(m,22h)；0.88(t,6h,j＝6.0hz)。
[0826]
中间体ax：8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸4-戊基壬酯
[0827][0828]
化学式:c
24h49
no3[0829]
分子量:399.66
[0830]
向配备有搅拌棒的圆底烧瓶中加入8-溴辛酸4-戊基壬酯(600mg，1.43mmol)、乙醇胺(2.59ml，42.9mmol)和乙醇(1ml)。使所得混合物在40℃下搅拌16h。反应用二氯甲烷稀释，用水洗涤(2次)，并分离各层。将有机层干燥(mgso4)，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸4-戊基壬酯(306mg，0.77mmol，54％)。uplc/elsd:rt＝1.66min。关于c
24h49
no3，ms(es):m/z(mh

)400.31。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 3.97(t,2h,j＝6.0hz)；3.57(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.81(br.s,2h),2.67(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.53(t,2h,j＝6.0hz)；2.22(t,2h,j＝6.0hz)；1.61-1.35(m,6h)；1.32-1.10(m,25h)；0.81(t,6h,j＝6.0hz)。
[0831]
中间体ay：8-((3-羟基丙基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[0832][0833]
化学式：c
24h49
no3[0834]
分子量：399.66
[0835]
向配备有搅拌棒的圆底烧瓶中加入8-溴辛酸3-戊基辛酯(1.00g，2.47mmol)、丙醇胺(5.66ml，74.0mmol)和乙醇(2ml)。使所得混合物在40℃下搅拌16h。反应用二氯甲烷稀释，用水洗涤(2次)，并分离各层。将有机层干燥(mgso4)，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((3-羟基丙基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(374mg，0.94mmol，38％)。uplc/elsd:rt＝1.64min。关于c
24h49
no3，ms(es):m/z(mh

)400.18。
[0836]
中间体az：8-((3-羟基丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[0837][0838]
化学式:c
28h57
no3[0839]
分子量:455.77
[0840]
向配备有搅拌棒的圆底烧瓶中加入8-溴辛酸十七烷-9-基酯(1.00g，2.17mmol)、丙醇胺(4.97ml，65.0mmol)和乙醇(2ml)。使所得混合物在40℃下搅拌16h。反应用二氯甲烷稀释，用水洗涤(2次)，并分离各层。将有机层干燥(mgso4)，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((3-羟基丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(723mg，1.59mmol，73％)。uplc/elsd:rt＝2.06min。关于c
28h57
no3，ms(es):m/z(mh

)456.17。
[0841]
中间体ba：8-((4-羟基丁基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[0842][0843]
化学式：c
29h59
no3[0844]
分子量:469.80
[0845]
向配备有搅拌棒的圆底烧瓶中加入8-溴辛酸十七烷-9-基酯(1.00g，2.17mmol)、4-氨基丁-1-醇(5.99ml，65.0mmol)和乙醇(2ml)。使所得混合物在40℃下搅拌16h。反应用二氯甲烷稀释，用水洗涤(2次)，并分离各层。将有机层干燥(mgso4)，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((4-羟基丁基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(773mg，1.65mmol，76％)。uplc/elsd:rt＝2.02min。关于c
29h59
no3，ms(es):m/z(mh

)470.23。
[0846]
中间体bb：8-((4-羟基丁基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[0847][0848]
化学式:c
25h51
no3[0849]
分子量:413.69
[0850]
向配备有搅拌棒的圆底烧瓶中加入8-溴辛酸3-戊基辛酯(1.00g，2.47mmol)、4-氨基丁-1-醇(6.82ml，74.0mmol)和乙醇(2ml)。使所得混合物在40℃下搅拌16h。反应用二氯甲烷稀释，用水洗涤(2次)，并分离各层。将有机层干燥(mgso4)，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)
纯化以得到呈透明油状的8-((4-羟基丁基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(501mg，1.21mmol，49％)。uplc/elsd:rt＝1.67min。关于c
25h51
no3，ms(es):m/z(mh

)414.24。
[0851]
中间体bc：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[0852][0853]
化学式:c
46h90
n2o6[0854]
分子量：767.23
[0855]
向8-溴辛酸3-丙基己酯(735mg，2.11mmol)和8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(1.00g，2.01mmol)于环戊基甲醚(9ml)和乙腈(9ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.66g，12.0mmol)和碘钾(366mg，2.21mmol)。使反应在80℃下搅拌16h。在冷却时，挥发物在真空下蒸发。残余物用二氯甲烷稀释并用水洗涤。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈金色油状的8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(698mg，0.91mmol，45％)。uplc/elsd:rt＝2.82min。关于c
46h90
n2o6，ms(es):m/z(mh

)767.59。
[0856]
中间体bd：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[0857][0858]
化学式:c
44h86
n2o6[0859]
分子量：739.18
[0860]
向8-溴辛酸3-丁基庚酯(895mg，2.37mmol)和8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-丙基己酯(1.00g，2.26mmol)于环戊基甲醚(10ml)和乙腈(10ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.87g，13.6mmol)和碘钾(412mg，2.49mmol)。使反应在80℃下搅拌16h。在冷却时，挥发物在真空下蒸发。残余物用二氯甲烷稀释并用水洗涤。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈金色油状的8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(972mg，1.32mmol，58％)。uplc/elsd:rt＝2.69min。关于c
44h86
n2o6，ms(es):m/z(mh

)739.46。
[0861]
中间体be：8,8'-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-丙基己基)酯
[0862][0863]
化学式:c
42h82
n2o6[0864]
分子量:711.13
[0865]
向8-溴辛酸3-丙基己酯(829mg，2.37mmol)和8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-丙基己酯(1.00g，2.26mmol)于环戊基甲醚(10ml)和乙腈(10ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.87g，13.6mmol)和碘钾(412mg，2.49mmol)。使反应在80℃下搅拌16h。在冷却时，挥发物在真空下蒸发。残余物用二氯甲烷稀释并用水洗涤。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明粘性油状的8,8'-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-丙基己基)酯(730mg，1.03mmol，45％)。uplc/elsd:rt＝2.58min。关于c
42h82
n2o6，ms(es):m/z(mh

)711.59。
[0866]
中间体bf：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[0867][0868]
化学式:c
48h94
n2o6[0869]
分子量：795.29
[0870]
向8-溴辛酸3-丁基庚酯(794mg，2.11mmol)和8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(1.00g，2.01mmol)于环戊基甲醚(9ml)和乙腈(9ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.66g，12.0mmol)和碘钾(366mg，2.21mmol)。使反应在80℃下搅拌16h。在冷却时，挥发物在真空下蒸发。残余物用二氯甲烷稀释并用水洗涤。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(896mg，1.13mmol，56％)。uplc/elsd:rt＝2.95min。关于c
48h94
n2o6，ms(es):m/z(mh

)795.59。
[0871]
中间体bg：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[0872][0873]
化学式：c
48h94
n2o6[0874]
分子量：795.288
[0875]
uplc/elsd:rt＝2.93min。ms(esi):c
48h95
n2o
6
(m h)m/z计算值795.288；实验值795.71。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm5.66(br.s,1h)；4.88(p,1h)；4.09(t,2h)；3.18(br.d,2h)；2.50(br.d,2h)；2.32(br.d,3h)；2.29(t,4h)；1.65-1.46(m,28h)；1.27(m,44h)；0.90(t,12h)。
[0876]
中间体bh：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯
[0877][0878]
化学式:c
46h90
n2o6[0879]
分子量：767.23
[0880]
向8-溴辛酸壬-5-基酯(882mg，2.53mmol)和8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(1.20g，2.41mmol)于环戊基甲醚(11ml)和乙腈(11ml)中的溶液中加入碳酸钾(2.00g，14.4mmol)和碘钾(439mg，2.65mmol)。使反应在80℃下搅拌16h。在冷却时，挥发物在真空下蒸发。残余物用二氯甲烷稀释并用水洗涤。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈金色油状的8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯(1.06g，1.39mmol，58％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.65(br.s,1h)；4.87(五重峰,2h,j＝6.0hz)；4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.18(br.q,2h,j＝6.0hz)；2.44(br.s,2h)；2.35(br.s,2h)；2.28(t,4h,j＝6.0hz)；1.71-1.17(m,53h)；1.43(s,9h)；0.88(t,12h,j＝6.0hz)。
[0881]
中间体bi：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸十五烷-8-基酯
[0882][0883]
化学式：c
48h94
n2o6[0884]
分子量：795.288
[0885]
uplc/elsd:rt＝2.68min。ms(esi):c
48h95
n2o
6
(m h)m/z计算值795.288；实验值795.71。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm5.66(br.s,1h)；4.89(p,1h)；4.10(t,2h)；3.19(br.d,2h)；2.56-2.35(br.d,5h)；2.30(t,5h)；1.66-1.39(m,66h)；0.90(t,12h)。
[0886]
中间体bj：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯
[0887][0888]
化学式：c
46h90
n2o6[0889]
分子量：767.23
[0890]
向8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基)丙基}氨基)辛酸3-丙基己酯(1.38g，3.11mmol)于乙腈(9ml)中的溶液中加入碘化钾(0.588g，3.54mmol)、碳酸钾(1.73g，12.5mmol)以及8-溴辛酸十三烷-7-基酯(1.26g，3.11mmol)于cmpe(9ml)中的溶液。使反应在77℃下搅拌18小时。将反应冷却至室温并过滤，然后在真空下蒸发滤液。残余物通过硅胶色谱法[0-70％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得呈黄色油状的8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}[8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基]氨基)辛酸3-丙基己酯(1.32g，55.1％)。uplc/elsd:rt＝2.70min实验值，767.34。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.67(br.s,1h)；4.89(p,1h)；4.10(t,2h)；3.20(q,2h)；2.61-2.43(m,2h)；2.43-2.35(m,4h)；2.30(dt,4h)；1.71-1.49(m,14h)；1.49-1.40(m,12h)；1.40-1.19(m,36h)；1.01-0.83(m,12h)。
[0891]
中间体bk：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯
[0892][0893]
化学式：c
44h86
n2o6[0894]
分子量：739.18
[0895]
向8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基)丙基}氨基)辛酸3-丙基己酯(1.50g，3.39mmol)于乙腈(10ml)中的溶液中加入碘化钾(0.619g，3.73mmol)、碳酸钾(1.87g，13.6mmol)以及8-溴辛酸十一烷-6-基酯(1.28g，3.39mmol)于cpme(10ml)中的溶液。使反应在77℃下搅拌18小时。将反应冷却至室温并过滤，然后在真空下蒸发滤液。残余物通过硅胶色谱法[0-70％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得呈黄色油状的8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}[8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基]氨基)辛酸3-丙基己酯(1.53g，61.2％)。uplc/elsd:rt＝2.56min实验值，739.46。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.66(br.s,1h)；4.89(p,1h)；4.10(t,2h)；3.20(q,2h)；2.60-2.44(m,2h)；2.44-2.35(m,
4h)；2.30(t,4h)；1.74-1.49(m,14h)；1.49-1.39(m,12h)；1.39-1.19(m,32h)；0.91(t,12h)。
[0896]
中间体bl：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯
[0897][0898]
化学式：c
42h82
n2o6[0899]
分子量：711.13
[0900]
向8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基)丙基}氨基)辛酸3-丙基己酯(1.50g，3.39mmol)于乙腈(10ml)中的溶液中加入碘化钾(0.619g，3.73mmol)、碳酸钾(1.87g，13.6mmol)以及8-溴辛酸壬-5-基酯(1.18g，3.39mmol)于cmpe(10ml)中的溶液。使反应在77℃下搅拌18小时。将反应冷却至室温并过滤，然后在真空下蒸发滤液。残余物通过硅胶色谱法[0-70％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得呈黄色油状的8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}({8-氧代-8-[(3-丙基己基)氧基]辛基})氨基)辛酸壬-5-基酯(0.483g，20.1％)。uplc/elsd:rt＝2.45min实验值，711.46。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.66(br.s,1h)；4.89(p,1h)；4.11(t,2h)；3.28-3.11(m,2h)；2.60-2.44(m,2h)；2.44-2.35(m,4h)；2.30(t,4h)；1.74-1.49(m,14h)；1.49-1.39(m,12h)；1.39-1.20(m,28h)；0.91(t,12h)。
[0901]
中间体bm：8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[0902][0903]
化学式:c
41h82
n2o4[0904]
分子量:667.12
[0905]
向8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(698mg，0.91mmol)于二氯甲烷(18ml)中的溶液中加入三氟乙酸(1.39ml，18.2mmol)。使反应在室温下搅拌4h。反应用饱和nahco3水溶液淬灭并用二氯甲烷萃取。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(378mg，0.57mmol，62％)。uplc/elsd:rt＝2.26min。关于c
41h82
n2o4，ms(es):m/z(mh

)667.56。
[0906]
中间体bn：8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[0919]
分子量:695.17
[0920]
向8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(896mg，1.13mmol)于二氯甲烷(23ml)中的溶液中加入三氟乙酸(1.72ml，22.5mmol)。使反应在室温下搅拌4h。反应用饱和nahco3水溶液淬灭并用二氯甲烷萃取。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(632mg，0.91mmol，81％)。uplc/elsd:rt＝2.47min。关于c
43h86
n2o4，ms(es):m/z(mh

)695.68。
[0921]
中间体bq：8-((4-氨基丁基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[0922][0923]
化学式：c
44h88
n2o6[0924]
分子量：709.198
[0925]
uplc/elsd:rt＝2.49min。ms(esi):c
44h89
n2o
6
(m h)m/z计算值709.198；实验值695.43。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm4.88(p,1h)；4.09(t,2h)；2.74(t,2h)；2.47(t,2h)；2.39(t,4h)；2.29(t,4h)；1.69-1.38(m,25h)；1.29(br.m,38h)；0.90(t,12h)。
[0926]
中间体br：8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯
[0927][0928]
化学式:c
41h82
n2o4[0929]
分子量:667.12
[0930]
向8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯(1.06g，1.39mmol)于二氯甲烷(28ml)中的溶液中加入三氟乙酸(2.12ml，27.7mmol)。使反应在室温下搅拌4h。反应用饱和nahco3水溶液淬灭并用二氯甲烷萃取。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯(718mg，1.08mmol，78％)。uplc/elsd:rt＝2.31min。关于c
41h82
n2o4，ms(es):m/z(mh

)667.43。
[0931]
中间体bs：8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[0932][0933]
化学式：c
43h86
n3o6[0934]
分子量：695.171
[0935]
uplc/elsd:rt＝2.34min。ms(esi):c
43h87
n3o
6
(m h)m/z计算值695.171；实验值695.430。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；4.10(t,2h)；2.92(t,2h)；2.61(t,2h)；2.46(t,4h)；2.30(t,4h)；1.73-1.41(m,18h)；1.28(br.m,40h)；0.90(t,12h)。
[0936]
中间体bt：8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯
[0937][0938]
化学式：c
41h82
n2o4[0939]
分子量：667.12
[0940]
向8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}[8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基]氨基)辛酸3-丙基己酯(1.32g，1.72mmol)于二氯甲烷(33ml)中的溶液中加入三氟乙酸(6.63ml，34.3mmol)。使反应在室温下搅拌4小时。加入饱和nahco3(水溶液)并用二氯甲烷稀释反应。分离有机层并用饱和nahco3(水溶液)、然后盐水再洗涤两次。有机层经mgso4干燥，然后过滤并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法[0-70％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得呈黄色油状的8-[(3-氨基丙基)[8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基]氨基]辛酸3-丙基己酯(0.774g，67.6％)。uplc/elsd:rt＝2.03min实验值，667.31。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；2.79(t,2h)；2.51(t,2h)；2.42(t,4h)；2.30(t,4h)；1.79-1.39(m,17h)；1.39-1.18(m,36h)；0.90(t,12h)。
[0941]
中间体bu：8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯
[0942][0943]
化学式：c
39h78
n2o4[0944]
分子量：639.06
[0945]
向8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}[8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基]氨基)辛酸3-丙基己酯(1.53g，2.07mmol)于二氯甲烷(40ml)中的溶液中加入三氟乙酸(3.05ml，39.9mmol)。使反应在室温下搅拌4小时。加入饱和nahco3(水溶液)并用二氯甲烷稀释反应。分离有机层并用饱和nahco3(水溶液)、然后盐水再洗涤两次。有机层经mgso4干燥，然后过滤
并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法[0-70％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得呈黄色油状的8-[(3-氨基丙基)[8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基]氨基]辛酸3-丙基己酯(0.682g，51.5％)。uplc/elsd:rt＝1.85min实验值，639.19。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.10(t,2h)；2.82(t,2h)；2.53(t,2h)；2.44(t,4h)；2.30(t,4h)；1.75-1.40(m,17h)；1.40-1.18(m,32h)；0.91(t,12h)。
[0946]
中间体bv：8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯
[0947][0948]
化学式：c
37h74
n2o4[0949]
分子量：611.01
[0950]
向8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}({8-氧代-8-[(3-丙基己基)氧基]辛基})氨基)辛酸壬-5-基酯(0.483g，0.679mmol)于二氯甲烷(13ml)中的溶液中加入三氟乙酸(1.00ml，13.1mmol)。使反应在室温下搅拌4小时。加入饱和nahco3(水溶液)并用二氯甲烷稀释反应。分离有机层并用饱和nahco3(水溶液)、然后盐水再洗涤两次。有机层经mgso4干燥，然后过滤并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法[0-70％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得呈黄色油状的8-[(3-氨基丙基)({8-氧代-8-[(3-丙基己基)氧基]辛基})氨基]辛酸壬-5-基酯(0.202g，48.7％)。uplc/elsd:rt＝1.85min实验值，611.44。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.10(t,2h)；2.80(t,2h)；2.52(t,2h)；2.42(t,4h)；2.30(t,4h)；1.74-1.39(m,17h)；1.39-1.20(m,28h)；0.91(t,12h)。
[0951]
最终化合物的合成：
[0952]
aa.化合物3：8-((2-羟基乙基)(6-((((3-戊基辛基)氧基)羰基)氧基)己基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[0953][0954]
化学式：c
47h93
no6[0955]
分子量：768.26
[0956]
uplc/elsd:rt＝3.04min。关于c
47h93
no6，ms(es):m/z(mh

)769.313。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.14(m,4h)；3.54(bm,2h)；2.66-2.37(m,6h)；2.30(m,2h)；1.77-1.17(m,66h)；0.91(m,12h)。
[0957]
ab.化合物4：8-((6-((((3-己基壬基)氧基)羰基)氧基)己基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[0958]
3-己基壬-2-烯酸乙酯
[0959][0960]
化学式:c
17h32
o2[0961]
分子量：268.44
[0962]
膦酸乙酸三乙酯(26.33g，117.4mmol)经20分钟滴加至氢化钠(4.697g，117.4mmol)于thf(294ml)中的悬浮液中并且将所述混合物在室温下搅拌，直至气体逸出停止(大约30min)。将反应混合物冷却至0℃并加入7-十三烷酮(10g，58.7mmol)。使反应逐渐升温至室温，然后加热至回流并搅拌过夜。反应用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭。水相用二乙醚萃取，并且有机萃取物用盐水洗涤，经mgso4干燥，并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-20％etoac:己烷)纯化以提供呈透明油状的3-己基壬-2-烯酸乙酯(6.7g，27.9mmol，47.5％)。
[0963]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.63(s,1h)；4.15(q,2h)；2.61(t,2h)；2.15(t,2h)；1.53-1.20(m,19h)；0.91(m,6h)。
[0964]
3-己基壬酸乙酯
[0965][0966]
化学式:c
17h34
o2[0967]
分子量:270.46
[0968]
在n2下向含有pearlmans催化剂(0.73g，5.2mmol)于乙醇(20ml)中的浆液的烧瓶中加入3-己基壬-2-烯酸乙酯(6.975g,25.9mmol)于乙醇(5ml)中的溶液。将反应在h2(气球)下搅拌16h。反应经由硅藻土垫过滤并在真空下蒸发滤液以提供3-己基壬酸乙酯(6.7g，24.7mmol，95％)。残余物未经进一步纯化即用于下一步骤。
[0969]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.16(q,2h)；2.23(d,2h)；1.86(bs,1h)；1.28(m,23h)；0.90(m,6h)。
[0970]
3-己基壬-1-醇
[0971][0972]
化学式:c
15h32o[0973]
分子量：228.42
[0974]
向氢化锂铝(49.5ml 1m thf溶液，49.5mmol)于thf中的溶液中加入3-己基壬酸乙酯(6.7g，24.7mmol)于thf(20ml)中的溶液。反应在室温下搅拌16h。反应用饱和硫酸钠十水合物溶液淬灭。通过经由硅藻土垫过滤来去除白色固体并在真空下蒸发滤液。残余物通过快速色谱法(isco)利用0-100％乙酸乙酯/己烷纯化以获得3-己基壬-1-醇(5.62g，24.6mmol，99％)。
[0975]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 3.69(t,2h)；1.61-1.19(m,24h)；0.91(m,6h)。
[0976]
碳酸6-溴己酯3-己基壬酯
[0977][0978]
化学式:c
22h43
bro3[0979]
分子量:435.49
[0980]
将3-己基壬-1-醇(1.24g，5.4mmol)在室温下在n2下滴加至装入有磁性搅拌棒的圆底烧瓶中的碳酸6-溴己酯4-硝基苯酯(1.88g，5.43mmol)于dcm(15ml)中的溶液中。使反应保持在n2下并且经10min滴加吡啶(0.55ml，6.8mmol)，接着一次性加入4-二甲基氨基吡啶(0.133g，1.1mmol)。使反应在室温下搅拌16h，然后用水和dcm稀释。分离有机层，并且水层用dcm洗涤。合并的有机物用盐水洗涤，经na2so4干燥，并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法(0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化以得到碳酸6-溴己酯3-己基壬酯(1.3g，3.0mmol，55％)。
[0981]
8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[0982][0983]
化学式:c
33h66
n2o4[0984]
分子量:554.90
[0985]
将8-溴辛酸十七烷-9-基酯(69.2g，0.15摩尔)和(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(130.6g，0.75摩尔)于500ml乙醇中的溶液加热至65℃过夜。浓缩反应混合物，并且粗物质通过快速柱色谱法(sio2:甲醇/二氯甲烷0-20％)纯化以获得呈浅黄色油状的8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(62g，74％)。
[0986]
关于c
33h66
n2o4，ms(ci):m/z(mh

)555.5。1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 5.15(bs,1h)；4.85(五重峰,1h,j＝6.0hz)；3.17(m,2h)；2.65(t,2h,j＝6.6hz)；2.56(t,2h,j＝6.8hz)；2.26(t,2h,j＝7.6hz)；1.68-1.56(m,6h)；1.46(m,5h)；1.43(s,9h)；1.24(m,30h)；0.86(t,6h,j＝6.6hz)。
[0987]
8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(6-((((3-己基壬基)氧基)羰基)氧基)己基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[0988][0989]
化学式:c
55h108
n2o7[0990]
分子量:909.48
[0991]
向碳酸6-溴己酯3-己基壬酯(0.5g，1.15mmol)和8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(0.637g，1.15mmol)于6ml环丙基甲醚和乙腈的1:1混合物中
的溶液中加入碳酸钾(0.635g，4.59mmol)和碘化钾(0.21g，1.26mmol)。使反应在77℃下搅拌16h。冷却反应，过滤并在真空下蒸发挥发物。残余物通过硅胶色谱法(0-100％(20％meoh、80％dcm、1％nh4oh的溶液)/dcm)纯化以得到8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(6-((((3-己基壬基)氧基)羰基)氧基)己基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(0.32g，0.35mmol，31％)。
[0992]
8-((6-((((3-己基壬基)氧基)羰基)氧基)己基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[0993][0994]
化学式:c
55h103
n3o7[0995]
分子量：918.44
[0996]
化合物4类似于化合物14使用8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(6-((((3-己基壬基)氧基)羰基)氧基)己基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯代替8-((3-(((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(6-((2-辛基癸基)氧基)-6-氧代己基)氨基)辛酸十一烷-3-基酯来制备。uplc/elsd:rt＝3.13min。关于c
55h103
n3o7，ms(es):m/z(mh

)919.429。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.87(p,1h)；4.17(m,4h)；3.68(bm,2h)；3.30(m,3h)；2.65-2.41(m,6h)；2.31(m,2h)；1.87-1.19(m,73h)；0.90(m,12h)。
[0997]
ac.化合物5：8-((6-((((3-己基壬基)氧基)羰基)氧基)己基)(2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[0998][0999]
化学式：c
49h97
no6[1000]
分子量：796.32
[1001]
uplc/elsd:rt＝3.16min。关于c
49h97
no6，ms(es):m/z(mh

)797.683。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.14(m,4h)；3.54(bm,2h)；2.68-2.38(m,6h)；2.30(m,2h)；1.77-1.17(m,70h),0.90(m,12h)。
[1002]
ad.化合物6：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(6-((((3-戊基辛基)氧基)羰基)氧基)己基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1003][1004]
化学式:c
53h99
n3o7[1005]
分子量:890.39
[1006]
化合物6类似于化合物4使用6-十一烷酮代替7-十三烷酮来制备。uplc/elsd:rt＝3.04min。关于c
53h99
n3o7，ms(es):m/z(mh

)891.552。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.87(p,1h)；4.17(m,4h)；3.67(bm,2h)；3.28(m,3h)；2.68-2.38(m,6h)；2.31(m,2h)；1.86-1.18(m,69h)；0.90(m,12h)。
[1007][1008]
ae.化合物9：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((2-丙基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1009]
8-((3-(((苄氧基)羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1010][1011]
化学式:c
36h64
n2o4[1012]
分子量:588.92
[1013]
在室温下向8-溴辛酸十七烷-9-基酯(50g，204mmol)和(3-氨基丙基)氨基甲酸苄酯(35g，76mmol)于500ml乙醇中的溶液中一次性加入碳酸氢钠(57g，0.68摩尔)，将所述混合物加热至65℃并搅拌两天。将反应混合物冷却至室温并经由硅藻土垫过滤出固体。浓缩滤液并通过柱色谱法(二氯甲烷/甲醇9:1)纯化以得到呈浅黄色油状的8-((3-(((苄氧基)羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(29.2g，66％)。
[1014]1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.84(m,6h)；1.10-1.57(m,42h)；2.24(t,2h,j＝6.7hz)；2.49(m,2h)；2.56(m,2h)；3.04(m,2h)；4.76(m,1h)；4.99(s,2h)；7.29-7.35(m,5h)。
[1015]
8-((3-(((苄氧基)羰基)氨基)丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸叔丁酯
[1016][1017]
化学式:c
48h86
n2o6[1018]
分子量:787.22
[1019]
在室温下向8-((3-(((苄氧基)羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(14.6g，24.9mmol)于500ml环戊基甲醚/乙腈(1:1，v/v)中的溶液中加入8-溴辛酸叔丁酯(oakwood chemical,estill,sc；7.62g，387ml，27.3mmol)，接着加入碳酸钾(13.7g，99.6mmol)和碘化钾(5g，30mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30min并且然后在85℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温并经由硅藻土垫去除固体。浓缩滤液并通过柱色谱法(己烷/乙酸乙酯，9:1至1:1)纯化以得到呈无色油状的8-((3-(((苄氧基)羰基)氨基)丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸叔丁酯(14.3g，73％)。
[1020]1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.84(m,6h)；1.10-1.64(m,59h)；2.17-2.32(m,8h)；2.42(m,2h)；3.26(m,2h)；4.84(m,1h)；5.07(s,2h)；6.20(m,1h)；7.29-7.35(m,5h)。
[1021]
8-((3-氨基丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸叔丁酯
[1022][1023]
化学式:c
40h80
n2o4[1024]
分子量；653.09
[1025]
向8-((3-(((苄氧基)羰基)氨基)丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸叔丁酯(28.6g，36.3mmol)于500ml乙醇中的溶液中加入钯/碳(3g，10％湿，基质活化)。将反应混合物在氢气球下搅拌过夜。ms显示不再有起始材料，并经由硅藻土垫过滤所述混合物。浓缩滤液以得到呈棕色油状的8-((3-氨基丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸叔丁酯(23.4g，定量)，其未经进一步纯化即用于下一步骤中。
[1026]1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.84(m,6h)；1.22-1.71(m,61h)；2.18(t,2h,j＝6.7hz)；2.25(t,2h,j＝6.7hz)；2.32(m,4h)；2.39(t,2h,j＝6.8hz)；2.70(t,2h,j＝6.7hz)；4.86(m,1h)。
[1027]
8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸叔丁酯
[1028][1029]
化学式:c
45h83
n3o6[1030]
分子量：762.17
[1031]
在0℃下向8-((3-氨基丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸叔丁酯(23.47g，36mmol)于500ml二乙醚中的溶液中加入3,4-二甲氧基环丁-3-烯-1,2-二酮(5.63g，40mmol)并且将反应混合物在室温下搅拌4小时。加入甲胺溶液(2m于甲醇中，23.4ml,46.8mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌过夜。浓缩反应混合物，并且残余物用100ml四氢呋喃湿磨。经由硅藻土垫去除固体。浓缩滤液并通过柱色谱法使用二氯甲烷至二氯甲烷/甲醇/nh4oh(9:1:0.1)纯化以得到呈白色蜡状的8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸叔丁酯(23g，86％)。
[1032]
hplc/uv(254nm,方法-b):rt＝6.73min。关于c
45h83
n3o6，ms(ci):m/z(mh

)762.5。1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.84(m,6h)；1.22-1.64(m,57h)；1.78(m,2h)；2.18(t,2h,j＝6.7hz)；2.26(t,2h,j＝6.7hz)；
[1033]
8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸
[1034][1035]
化学式:c
41h75
n3o6[1036]
分子量:706.07
[1037]
在0℃下向8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸叔丁酯(450mg，0.59mmol)于dcm(9.7ml)中的溶液中加入三氟乙酸(2.4ml，32.0mmol)。使所得混合物在室温下搅拌4h。然后在真空中浓缩反应混合物并且粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈金色油状的8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸(389mg，0.55mmol，93％)。
[1038]
uplc/elsd:rt＝2.12min。关于c
41h75
n3o6，ms(es):m/z(mh

)706.41。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 11.42(br.s,1h)；9.29(br.s,1h)；8.64(br.s,1h)；4.83(五重峰,
1h,j＝6hz)；3.71(br.t,2h,j＝6hz)；3.27(br.s,3h)；3.14(br.t,2h,j＝6hz)；2.94(br.t,4h,j＝6hz)；2.31-2.14(m,4h)；2.04(br.s,2h)；1.77-1.10(m,48h)；0.85(t,6h,j＝6hz)。
[1039]
4-亚甲基十一烷
[1040][1041]
化学式：c
12h24
[1042]
分子量：168.32
[1043]
在-78℃下向甲基三苯基溴化鏻(11g,31mmol)于四氢呋喃中的悬浮液中滴加n-buli溶液(2.5m于己烷中，16.8ml,40mmol)。反应混合物缓慢地升温至0℃持续3小时，直至所有固体均溶解。加入十一烷-4-酮(5g，29.5mmol)于四氢呋喃中的溶液，然后将反应混合物加热至回流过夜。在反应混合物冷却至室温后，在真空下去除溶剂。残余物通过硅胶色谱法(戊烷)纯化以得到呈无色油状的4-亚甲基十一烷(4.9g，99％)。
[1044]1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.87(m,6h)；1.22-1.36(m,12h)；1.97(m,4h)；4.68(s,2h)。
[1045]
2-丙基壬-1-醇
[1046][1047]
化学式：c
12h26o[1048]
分子量：186.34
[1049]
在0℃下向4-亚甲基十一烷(4.9g，29.2mmol)于四氢呋喃中的溶液中滴加硼烷-四氢呋喃复合物(1m于thf中，36ml)。将反应混合物在室温下搅拌3小时，直至tlc显示不再有起始材料，并加入4m naoh水溶液(40ml)。在搅拌10min后，加入30％过氧化氢(10ml)并搅拌4小时。反应混合物用亚硫酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机层干燥(na2so4)，浓缩并通过硅胶色谱法(己烷/乙酸乙酯)纯化以得到呈无色油状的2-丙基壬-1-醇(4.2g，77％)。
[1050]1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.87(m,6h)；1.22-1.36(m,17h)；3.52(d,2h,j＝5.5hz)。
[1051]
8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((2-丙基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1052][1053]
化学式:c
53h99
n3o6[1054]
分子量:874.39
[1055]
向8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环
丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸(830mg，1.17mmol)于二氯甲烷中的溶液中加入2-丙基壬-1-醇(500mg，2.7mmol)、edci(1.3g，6.75mmol)和4-二甲基氨基吡啶(33mg，0.27mmol)，并且将所述混合物在室温下搅拌过夜。反应用水淬灭并分离有机层。水层用二氯甲烷(50ml
×
3)萃取。将合并的有机物干燥(na2so4)，浓缩并通过硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/nh4oh(9:1:0.1))纯化以得到呈浅黄色蜡状的8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((2-丙基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(405mg，57％)。
[1056]
hplc/uv(254nm,方法-a):rt＝7.04min。关于c
53h99
n3o6，ms(ci):m/z(mh

)874.7。1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.86(m,12h)；1.22-1.49(m,60h)；1.60(m,6h)；1.75(m,2h)；2.27(m,4h)；2.43(m,4h)；2.59(m,2h)；3.25(d,3h,j＝4.9hz)；3.63(m,2h)；3.96(d,2h,j＝5.7hz)；4.84(m,1h)。
[1057]
af.化合物10：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸2-丁基壬酯
[1058]
5-亚甲基十二烷
[1059][1060]
化学式：c
13h26
[1061]
分子量：182.35
[1062]
与化合物9相同的程序，但使用十二烷-5-酮代替十一烷-4-酮。
[1063]1h nmr(300mhz，cdcl3)：δ0.87(m，6h)；1.22-1.36(m，14h)；1.99(m，4h)；4.68(s，2h)。
[1064]
2-丁基壬-1-醇
[1065][1066]
化学式：c
13h28o[1067]
分子量200.37
[1068]
与化合物9相同的程序，但使用5-亚甲基十二烷代替4-亚甲基十一烷。
[1069]1h nmr(300mhz，cdcl3)：δ0.87(m，6h)；1.22-1.36(m，19h)；3.52(d，2h，j＝5.5hz)。
[1070]
8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3，4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸2-丁基壬酯
[1071]
[1072]
化学式：c
54h101
n3o6[1073]
分子量：888.42
[1074]
与化合物9相同的程序，但使用2-丁基壬-1-醇代替2-丙基壬-1-醇。浅黄色蜡状物。
[1075]
hplc/uv(254nm,方法-a):rt＝6.98min。关于c
54h101
n3o6，ms(ci):m/z(mh

)888.7。1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.86(m,12h)；1.22-1.49(m,62h)；1.60(m,6h)；1.78(m,2h)；2.27(m,4h)；2.43(m,4h)；2.58(m,2h)；3.25(d,3h,j＝4.8hz)；3.64(m,2h)；3.96(d,2h,j＝5.8hz)；4.84(m,1h)。
[1076]
ag.化合物11：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸2-乙基壬酯
[1077]
3-亚甲基癸烷
[1078][1079]
化学式：c
11h22
[1080]
分子量：154.30
[1081]
与化合物9相同的程序，但使用癸-3-酮代替十一烷-4-酮。1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.87(m,6h)；1.22-1.36(m,10h)；1.99(m,4h)；4.68(s,2h)。
[1082]
2-乙基壬-1-醇
[1083][1084]
化学式:c
11h24o[1085]
分子量：172.31
[1086]
与化合物9相同的程序，但使用3-亚甲基癸烷代替4-亚甲基十一烷。
[1087]1h nmr(300mhz,cdcl3):δ0.87(m,6h)；1.22-1.36(m,15h)；3.52(d,2h,j＝5.5hz)。
[1088]
8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸2-乙基壬酯
[1089][1090]
化学式:c
52h97
n3o6[1091]
分子量:860.36
[1092]
与化合物9相同的程序，但使用2-乙基壬-1-醇代替2-丙基壬-1-醇。浅黄色蜡状物。
[1110]
分子量:447.54
[1111]
向6-溴己酸(606mg，3.1mmol)和2-辛基癸醇(840mg，3.1mmol)于二氯甲烷(3.1ml)中的溶液中加入n-(3-二甲基氨基丙基)-n'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(655mg，3.4mmol)、n,n-二异丙基乙胺(1.2ml，6.8mmol)和dmap(76mg，0.62mmol)。使反应在室温下搅拌16h。反应用二氯甲烷稀释并用饱和碳酸氢钠洗涤。分离有机层并用盐水洗涤，并且经mgso4干燥。过滤有机层并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法(0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化以获得6-溴己酸2-辛基癸酯(849mg，1.9mmol，61％)。
[1112]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.01(d,2h)；3.56(t,0.24)；3.43(t,1.76)；2.35(t,2h)；1.99-1.43(m,8h)；1.29(m,27h)；0.91(m,6h)。
[1113]
8-溴辛酸十一烷-3-基酯
[1114][1115]
化学式:c
19h37
bro2[1116]
分子量:377.41
[1117]
在0℃下向3-十一醇(4.14g，24mmol)、8-溴辛酸(8.01g，36mmol)和dmap(0.58g，4.8mmol)于二氯甲烷(50ml)中的溶液中加入edci(6.9g，36mmol)并且将反应混合物在室温下搅拌过夜。tlc显示反应完成。将反应混合物冷却至0℃并且经20分钟极其缓慢地加入盐酸溶液(10ml浓hcl、90ml水、7.5g氯化钠)。然后加入乙腈(100ml)和己烷(100ml)，分离各层并且干燥并在真空下去除有机层以得到油状物。将所述油状物溶解在己烷(100ml)中并用乙腈(100ml)和5％碳酸氢钠(100ml)的混合物洗涤。分离己烷层并经由硅藻土过滤，所述硅藻土然后用己烷洗涤。在真空下去除溶剂以得到呈无色油状的8-溴辛酸十一烷-3-基酯(8.76g，97％)。含有大约13％相应氯化物。
[1118]1h nmr(300mhz,cdcl3):δppm 4.82-4.76(m,1h)；3.39(t,2h,j＝6.7hz)；2.44(t,0.3h,j＝7.4hz,针对ch2cl)；2.28(t,2h,j＝7.5hz,针对ch2br)；1.88-1.79(m,2h)；1.70-1.42(m,6h)；1.38-1.17(m,18h)；
[1119]
8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}氨基)辛酸十一烷-3-基酯
[1120][1121]
化学式:c
27h54
n2o4[1122]
分子量:470.74
[1123]
类似于化合物34使用8-溴辛酸十一烷-3-基酯代替4-戊基壬基-8-辛酸酯由n-(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯制备以得到8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}氨基)辛酸十一烷-3-基酯。
[1124]
8-((3-(((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(6-((2-辛基癸基)氧基)-6-氧代己基)氨基)
辛酸十一烷-3-基酯
[1125][1126]
化学式:c
51h100
n2o6[1127]
分子量:837.37
[1128]
向6-溴己酸2-辛基癸酯(0.4g，0.894mmol)和8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}氨基)辛酸十一烷-3-基酯(0.501g，0.894mmol)于40ml环丙基甲醚和乙腈的1:1混合物中的溶液中加入碳酸钾(0.741g，5.363mmol)和碘化钾(0.163g，0.983mmol)。将反应加热至77℃并搅拌16小时。将所述混合物冷却至室温，过滤，并在真空下蒸发滤液。残余物通过硅胶色谱法(0-100％(20％meoh、80％dcm、1％nh4oh的溶液)/dcm)纯化以得到8-((3-(((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(6-((2-辛基癸基)氧基)-6-氧代己基)氨基)辛酸十一烷-3-基酯(323mg，0.39mmol，43％)。
[1129]
uplc/elsd:rt＝3.15min。关于c
51h100
n2o6，ms(es):m/z(mh

)837.525。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.64(bm,1h),4.83(p,1h)；3.98(d,2h)；3.19(bm,2h)；2.55-2.23(m,10h)；1.75-1.18(m,72h)；0.90(m,12h)。
[1130]
8-((3-氨基丙基)(6-((2-辛基癸基)氧基)-6-氧代己基)氨基)辛酸十一烷-3-基酯
[1131][1132]
化学式:c
46h92
n2o4[1133]
分子量:737.25
[1134]
向8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}({6-[(2-辛基癸基)氧基]-6-氧代己基})氨基)辛酸十一烷-3-基酯(0.277g，0.331mmol)于dcm(10ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.506ml，6.62mmol)。使反应在rt下搅拌4h。反应用dcm稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液缓慢地淬灭。分离有机层，用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并在真空下蒸发以得到8-((3-氨基丙基)(6-((2-辛基癸基)氧基)-6-氧代己基)氨基)辛酸十一烷-3-基酯(0.24g，0.33mmol，定量)，其未经进一步纯化即进行下一步骤。
[1135]
uplc/elsd:rt＝2.79min。关于c
46h92
n2o4，ms(es):m/z(mh

)737.613。
[1136]
3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-烯-1,2-二酮
[1137][1138]
化学式:c6h7no3[1139]
分子量:141.13
[1140]
向3,4-二甲氧基-3-环丁烯-1,2-二酮(1g，7mmol)于100ml二乙醚中的溶液中加入thf中的2m甲胺溶液(3.8ml，7.6mmol)并且几乎立即形成沉淀物。将所述混合物在室温下搅拌24小时，然后过滤，并且滤出的固体用二乙醚洗涤并风干。将滤出的固体溶解在热etoac中，过滤，使滤液冷却至室温，然后冷却至0℃以得到沉淀物。此沉淀物经由过滤加以分离，用冷etoac洗涤，风干，然后在真空下干燥以得到呈白色固体状的3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(0.70g，5mmol，73％)。
[1141]1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ:ppm 8.50(br.d,1h,j＝69hz)；4.27(s,3h)；3.02(sdd,3h,j＝42hz,4.5hz)。
[1142]
8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(6-((2-辛基癸基)氧基)-6-氧代己基)氨基)辛酸十一烷-3-基酯
[1143][1144]
化学式：c
51h95
n3o6[1145]
分子量:846.34
[1146]
3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(69mg，0.49mmol)如化合物34中使用8-((3-氨基丙基)(6-((2-辛基癸基)氧基)-6-氧代己基)氨基)辛酸十一烷-3-基酯代替双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-氨基丙基)氮烷二基)二辛酸酯发生反应以得到8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(6-((2-辛基癸基)氧基)-6-氧代己基)氨基)辛酸十一烷-3-基酯(80mg，0.09mmol，29％)。
[1147]
uplc/elsd:rt＝2.99min。关于c
51h95
n3o6，ms(es):m/z(mh

)847.392。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.82(p,1h)；3.97(m,2h)；3.69(m,2h)；3.29(m,3h)；-2.62-2.25(m,10h)；1.85-1.17(m,64h)；0.91(m,12h)。
[1148]
ai.化合物15：8-((6-((2-己基癸基)氧基)-6-氧代己基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸十一烷-3-基酯
[1149][1150]
化学式:c
49h91
n3o6[1151]
分子量:818.28
[1152]
化合物15类似于化合物14以癸酸为起始物并使用1-碘己烷代替1-碘辛烷来制备。
[1153]
uplc/elsd:rt＝2.86min。关于c
49h91
n3o6，ms(es):m/z(mh

)819.269。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.78(m,1h)；3.95(m,2h)；3.63(m,2h)；3.28(m,3h)；2.59-2.20(m,13h)；1.83-1.16(m,58h)；0.87(m,12h)。
[1154]
aj.化合物16：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((2-戊基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1155][1156]
化学式:c
55h103
n3o6[1157]
分子量:902.44
[1158]
向8-{[8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基](3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基}辛酸(400mg，0.56mmol)和2-戊基壬-1-醇(364mg，1.7mmol)于5.6ml无水dcm中的溶液中加入4-(二甲基氨基)吡啶(35.0mg，0.28mmol)和二环己基碳化二亚胺(369mg，1.7mmol)。将所述溶液在室温下搅拌18小时，之后通过lc/ms发现无起始醇保留。所述混合物用dcm稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，干燥(mgso4)，过滤并浓缩。残余物通过硅胶色谱法(0-50％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈白色蜡状固体的8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((2-戊基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(154mg，0.17mmol，30％)。
[1159]
uplc/elsd:rt＝3.04min。关于c
55h103
n3o6，ms(es):m/z(mh

)903.8。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.32(s,1h)；4.87(五重峰,1h,j＝6hz)；4.00(d,2h,j＝6hz)；3.68(br.s,2h)；3.29(d,3h,j＝6hz)；2.65(br.s,2h)；2.51(br.m,4h)；2.33(m,5h)；1.81(br.m,3h)；1.64(br.m,6h)；1.52(br.m,9h)；1.28(br.s,61h)；0.88(br.t,13h,j＝7.5hz)。
[1160]
ak.化合物17：8-({8-[(3-异丙基壬基)氧基]-8-氧代辛基}(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1161][1162]
化学式:c
53h99
n3o6[1163]
分子量:874.39
[1164]
向8-{[8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基](3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基}辛酸(400mg，0.57mmol)和3-异丙基壬-1-醇(317mg，1.7mmol)于5.6ml无水dcm中的溶液中加入4-(二甲基氨基)吡啶(35.0mg，0.28mmol)和二环己基碳化二亚胺(369mg，1.7mmol)。所述溶液在室温下搅拌18小时，之后通过lc/ms发现无起始醇保留。所述混合物用dcm稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，干燥(mgso4)，过滤并浓缩。残余物通过硅胶色谱法(0-50％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈白色蜡状固体的8-({8-[(3-异丙基壬基)氧基]-8-氧代辛基}(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(202mg，0.23mmol，41％)。
[1165]
uplc/elsd:rt＝2.92min。关于c
53h99
n3o6，ms(es):m/z(mh

)875.5。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.32(s,1h)；4.87(五重峰,1h,j＝6hz)；4.08(m,2h,j＝7hz)；3.67(br.s,2h)；3.30(d,3h,j＝5hz)；2.64(br.s,2h)；2.51(br.m,4h)；2.31(m,5h)；1.81(br.m,3h)；1.64(br.m,6h)；1.52(br.m,9h)；1.28(br.s,46h)；0.90(br.m,15h)。
[1166]
al.化合物18：8-[(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)({8-氧代-8-[(3-丙基壬基)氧基]辛基})氨基]辛酸十七烷-9-基酯
[1167][1168]
化学式:c
53h99
n3o6[1169]
分子量:874.39
[1170]
向8-{[8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基](3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基}辛酸(400mg，0.57mmol)和3-丙基壬-1-醇(317mg，1.7mmol)于5.6ml无水dcm中的溶液中加入4-(二甲基氨基)吡啶(35.0mg，0.28mmol)和二环己基碳化二亚胺(369mg，1.7mmol)。将所述溶液在室温下搅拌18小时，之后通过lc/ms发现无起始醇保留。所述混合物用dcm稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，干燥(mgso4)，过滤并浓缩。残余物通过硅胶色谱法(0-50％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/
二氯甲烷)纯化以得到呈白色蜡状固体的8-[(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)({8-氧代-8-[(3-丙基壬基)氧基]辛基})氨基]辛酸十七烷-9-基酯(206mg，0.24mmol，42％)。
[1171]
uplc/elsd:rt＝2.93min。关于c
53h99
n3o6，ms(es):m/z(mh

)875.5。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.32(s,2h)；4.87(五重峰,1h,j＝5hz)；4.10(t,2h,j＝8hz)；3.68(br.s,2h)；3.30(d,3h,j＝5hz)；2.67(br.s,2h)；2.53(br.m,4h)；2.31(t,5h,j＝7hz)；1.83(br.m,3h)；1.62(br.m,7h)；1.51(br.m,10h)；1.28(br.s,52h)；0.90(br.m,13h)。
[1172]
am.化合物19：8-({8-[(2-异丙基壬基)氧基]-8-氧代辛基}(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1173][1174]
化学式:c
53h99
n3o6[1175]
分子量：874.39
[1176]
向8-{[8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基](3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基}辛酸(400mg，0.57mmol)和3-丙基壬-1-醇(317mg，1.7mmol)于5.6ml无水dcm中的溶液中加入4-(二甲基氨基)吡啶(35.0mg，0.28mmol)和二环己基碳化二亚胺(369mg，1.7mmol)。所述溶液在室温下搅拌18小时，之后通过lc/ms发现无起始醇保留。所述混合物用dcm稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，干燥(mgso4)，过滤并浓缩。残余物通过硅胶色谱法(0-50％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈白色蜡状固体的8-({8-[(2-异丙基壬基)氧基]-8-氧代辛基}(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(163mg，0.19mmol，33％)。
[1177]
uplc/elsd:rt＝2.95min。关于c
53h99
n3o6，ms(es):m/z(mh

)875.5。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.23(s,1h)；4.87(五重峰,1h,j＝6hz)；3.94(m,2h,j＝5hz)；3.60(br.s,2h)；3.20(d,3h,j＝6hz)；2.94(s,1h)；2.57(br.s,2h)；2.43(br.m,4h)；2.23(br.m,5h)；1.73(br.m,4h)；1.55(br.m,4h)；1.41(br.m,9h)；1.19(br.s,45h)；0.81(br.m,14h)。
[1178]
an.化合物20：8-{[8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基](3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基}辛酸3-丁基壬酯
[1179][1180]
化学式:c
54h101
n3o6[1181]
分子量:888.42
[1182]
向8-{[8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基](3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基}辛酸(400mg，0.57mmol)和3-丁基壬-1-醇(341mg，1.7mmol)于5.6ml无水dcm中的溶液中加入4-(二甲基氨基)吡啶(35.0mg，0.28mmol)和二环己基碳化二亚胺(369mg，1.7mmol)。将所述溶液在室温下搅拌18小时，之后通过lc/ms发现无起始醇保留。所述混合物用dcm稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，干燥(mgso4)，过滤并浓缩。残余物通过硅胶色谱法(0-50％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈白色蜡状固体的8-{[8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基](3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)氨基}辛酸3-丁基壬酯(116mg，0.13mmol，23％)。uplc/elsd:rt＝3.01min。关于c
54h101
n3o6，ms(es):m/z(mh

)888.7。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.23(s,1h)；4.78(五重峰,1h,j＝6hz)；4.01(m,2h,j＝5hz)；3.58(br.s,2h)；3.20(d,3h,j＝6hz)；2.50(br.s,2h)；2.37(br.m,4h)；2.22(br.t,4h)；1.69(br.m,5h)；1.55(br.m,6h)；1.43(br.m,5h)；1.35(br.m,5h)；1.19(br.s,50h)；0.81(br.m,12h)。
[1183]
ao.化合物21：8-((8-((3-己基壬基)氧基)-8-氧代辛基)(2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1184][1185]
化学式：c
50h99
no5[1186]
分子量：794.34
[1187]
uplc/elsd:rt＝3.20min。关于c
50h99
no5，ms(es):m/z(mh

)795.093。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.10(t,2h)；3.56(m,2h)；2.67-2.41(m,6h)；2.30(m,4h),1.74-1.17(m,72h)；0.90(m,12h)。
[1188]
ap.化合物22：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(2-羟基乙基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1189]
步骤1：8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1190][1191]
将8-溴辛酸十七烷-9-基酯(10g，21.67mmol)和乙醇胺(39.70g，649.96mmol)于etoh(5ml)中的溶液加热至65℃持续16h。将反应冷却至室温并溶解在乙酸乙酯中并用水萃取(4次)。分离有机层，用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并在真空下蒸发。残余物通过快速色谱法(isco)利用0-100％(20％meoh、80％dcm、1％nh4oh的溶液)/dcm纯化以获得8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(7.85g，82％)。
[1192]
uplc/elsd:rt＝2.06min。关于c
27h55
no3，ms(es):m/z(mh

)442.689。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；3.66(t,2h)；2.79(t,2h)；2.63(m,2h)；2.30(t,2h)；1.77-1.20(m,40h)；0.90(m,6h)。
[1193]
步骤2：化合物22：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(2-羟基乙基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1194][1195]
向8-溴辛酸3-丁基庚酯(6.15g，16.31mmol)和8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(6.86g，15.53mmol)于cpme(15ml)和乙腈(6ml)的混合物中的溶液中加入碳酸钾(8.59g，62.12mmol)和碘化钾(2.84g，17.08mmol)。使反应在77℃下搅拌16h。冷却反应并过滤，并在真空下蒸发挥发物。残余物通过快速色谱法(isco)利用0-100％(20％meoh、80％dcm、1％nh4oh的溶液)/dcm纯化以获得8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(2-羟基乙基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(4.53g，37.8％)。
[1196][1197]
化学式：c
46h91
no5[1198]
分子量：738.24
[1199]
uplc/elsd:rt＝3.04min。关于c
46h91
no5，ms(es):m/z(mh

)739.464。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.11(m,2h),3.57(bm,2h)；2.73-2.39(m,6h)；2.30(m,4h)；1.72-1.17(m,64h)；0.92(m,12h)。
[1200]
aq.化合物23：8,8'-((2-羟基乙基)氮烷二基)二辛酸双(3-己基壬基)酯
[1201]
[1202]
化学式：c
48h95
no5[1203]
分子量：766.29
[1204]
uplc/elsd:rt＝3.11min。关于c
48h95
no5，ms(es):m/z(mh

)767.710。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.10(m,4h)；3.55(bm,2h)；2.65-2.37(m,6h)；2.31(m,4h)；1.72-1.16(m,67h)；0.91(m,12h)。
[1205]
ar.化合物24：8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1206][1207]
化学式：c
48h95
no5[1208]
分子量：766.29
[1209]
uplc/elsd:rt＝3.13min。关于c
48h95
no5，ms(es):m/z(mh

)767.586。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.10(t,2h)；3.56(bm,2h),2.68-2.40(m,6h)；2.30(m,4h)；1.74-1.18(m,68h)；0.91(m,12h)。
[1210]
as.化合物25：8,8'-((2-羟基乙基)氮烷二基)二辛酸双(3-戊基辛基)酯
[1211][1212]
化学式：c
44h87
no5[1213]
分子量：710.18
[1214]
uplc/elsd:rt＝2.86min。关于c
44h87
no5，ms(es):m/z(mh

)711.341。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.10(t,4h)；3.55(m,2h)；2.65-2.38(m,6h),2.31(m,4h)；1.73-1.16(m,59)；0.91(m,12h)。
[1215]
at.化合物26：8-((8-((3-己基壬基)氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1216]
3-己基壬-2-烯酸乙酯
[1217][1218]
化学式:c
17h32
o2[1219]
分子量：268.44
[1220]
将膦酸乙酸三乙酯(26.33g，117.4mmol)经20分钟滴加至氢化钠(4.697g，117.4mmol)于thf(294ml)中的悬浮液中并且将所述混合物在室温下搅拌，直至气体逸出停止(大约30min)。将反应混合物冷却至0℃并加入7-十三烷酮(10g，58.7mmol)。使反应逐渐升温至室温，然后加热至回流并搅拌过夜。反应用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭。水相用二乙醚
1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯类似于化合物9使用3-己基壬-1-醇代替2-丙基壬-1-醇来制备。
[1238]
uplc/elsd:rt＝3.17min。关于c
58h105
n3o6，ms(es):m/z(mh

)917.085。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；3.68(bm,2h)；3.28(m；3h)；2.75-2.44(m,6h)；2.31(m,4h)；1.82(m,3h)；1.72-1.18(m,71h)；0.90(m,12h)。
[1239]
au.化合物27：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1240]
步骤1：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1241][1242]
将n-(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(34.35g，197.15mmol)于etoh(200ml)中的溶液加热至65℃并且经3h向其中加入8-溴辛酸十七烷-9-基酯(26g，56.33mmol)于etoh(90ml)中的溶液。将反应在65℃下加热3h。将反应冷却至《50℃并且etoh在真空下蒸发并与庚烷共沸(4次)。向粗产物于2-methf(150ml)中的溶液中加入5％k2co3(150ml)并且将反应混合物搅拌10分钟。使得形成两层。去除水层并用100ml水(
×
3)洗涤2-methf层。分离有机层，用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并在真空下蒸发。残余物通过快速色谱法(isco)利用0-100％(20％meoh、80％dcm、1％nh4oh的溶液)/dcm纯化以获得8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(20g，63.9％)。uplc/elsd:rt＝2.34min。关于c
33h66
n2o4，ms(es):m/z(mh

)555.319。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.18(bs,1h)；4.89(p,1h)；3.22(m,2h)；2.64(t,2h)；2.59(t,2h)；2.30(t,2h)；1.73-1.21(m,50h)；0.90(m,6h)。
[1243]
步骤2：8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1244][1245]
向8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}氨基)辛酸十七烷-9-基酯(11.76g，21.19mmol)和8-溴辛酸3-丁基庚酯(9.2g，24.37mmol)于丙腈(52ml)中的溶液中加入碳酸钾(4.39g，31.79mmol)和碘化钾(0.53g，3.18mmol)。将反应在80℃加热持续16h。冷却反应并过滤，并在真空下蒸发挥发物。残余物通过快速色谱法(isco)利用0-100％(20％meoh、80％dcm、1％nh4oh的溶液)/dcm纯化以获得8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(9.68g，53.6％)。uplc/elsd:rt＝3.07min。关于c
52h102
n2o6，ms(es):m/z(mh

)851.216。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.68(bs,1h)；4.90(p,1h)；4.11(t,2h)；3.20(m,2h)；2.52-2.24(m,10h)；1.76-1.20(m,74h)；0.90(m,12h)。
[1246]
步骤3：8-((3-氨基丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸3-丁基
庚酯
[1247][1248]
向8-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}[8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基]氨基)辛酸3-丁基庚酯(7g，8.22mmol)于dcm(25ml)中的溶液中加入三氟乙酸(9.4ml，123.32mmol)。使反应在室温下搅拌2h。在真空下蒸发反应。将残余物溶解在甲基thf/庚烷(1:9)混合物中并用饱和碳酸氢钠萃取(3次)。分离有机层，用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并在真空下蒸发以获得8-((3-氨基丙基)(8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯。其未经进一步纯化即作为粗物质用于下一步骤。uplc/elsd:rt＝2.63min。关于c
47h94
n2o4，ms(es):m/z(mh

)751.305。
[1249]
步骤4：化合物27：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1250][1251]
化学式:c
52h97
n3o6[1252]
分子量:860.36
[1253]
向8-[(3-氨基丙基)[8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基]氨基]辛酸3-丁基庚酯(7g，9.32mmol)于甲基thf(31ml)中的溶液中加入3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(1.71g，12.11mmol)和10％碳酸氢钠水溶液(8.6ml，10.25mmol)。使反应在50℃下搅拌2.5h。将反应冷却至室温并用庚烷稀释并用水萃取。分离有机层，用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并在真空下蒸发。残余物通过快速色谱法(isco)利用0-100％(20％meoh、80％dcm、1％nh4oh的溶液)/dcm纯化以获得8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(5.4g，63％)。uplc/elsd:rt＝2.98min。关于c
52h97
n3o6，ms(es):m/z(mh

)861.714。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.10(t,2h)；3.75(m,2h)；3.39-3.20(m,5h)；3.08(m,4h)；2.31(m,4h)；2.12(bm,2h)；1.81-1.20(m,65h)；0.90(m,12h)。
[1254]
av.化合物28：8,8'-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-己基壬基)酯
[1255][1256]
化学式:c
54h101
n3o6[1257]
分子量:888.42
[1258]
化合物28类似于化合物34以3-己基壬基-8-溴辛酸酯代替4-戊基壬基-8-溴辛酸酯为起始物来制备。
[1259]
uplc/elsd:rt＝3.08min。关于c
54h101
n3o6，ms(es):m/z(mh

)889.332。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.10(m,4h)；3.67(bm,2h)；3.28(m,3h)；2.57(m,2h)；2.44(m,4h)；2.31(m,4h)；1.77(m,2h)；1.62(m,8h)；1.52-1.19(m,58h)；0.90(m,12h)。
[1260]
aw.化合物29：8-((3-((2-(甲基氨基)-3，4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1261][1262]
化学式：c
54h101
n3o6[1263]
分子量：888.42
[1264]
化合物29类似于化合物9以6-十一烷酮代替7-十三烷酮为起始物来制备。
[1265]
uplc/elsd：rt＝3.12min。关于c
54h101
n3o6，ms(es)：m/z(mh

)889.332。1h nmr(300mhz，cdcl3)δ：ppm 4.87(p，1h)；4.10(t，2h)；3.67(bm，2h)；3.29(m，3h)；2.67-2.41(m，6h)；2.31(m，4h)；1.85-1.18(m，71h)，0.90(m，12h)。
[1266]
ax.化合物30：8，8
′‑
((3-((2-(甲基氨基)-3，4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-戊基辛基)酯
[1267]
步骤1：8，8
′‑
((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-戊基辛基)酯
[1268][1269]
化学式：c
50h98
n2o6[1270]
分子量：823.34
[1271]
向8-溴辛酸3-戊基辛酯(5.61g，13.8mmol)和8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(6.00g，12.0mmol)于丙腈(30ml)中的溶液中加入碳酸钾(2.49g，18.0mmol)和碘钾(300mg，1.80mmol)。使反应在80℃下搅拌16h。在冷却至室温时，反应混合物经由真空过滤进行过滤。容器中的残余物和漏斗上的滤饼用丙腈洗涤两次。然后在40℃下在真空中浓缩滤液。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-20-25-30-35-40-50-80-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈浅黄色透明油状的8,8'-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-戊基辛基)酯(7.37g，8.95mmol，74％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.66(br.s,1h)；4.08(t,4h,j＝6.0hz)；3.17(br.q,2h,j＝6.0hz)；2.43(t,2h,j＝6.0hz)；2.34(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.28(t,4h,j＝9.0hz)；1.67-1.52(m,10h)；1.48-1.37(m,14h)；1.35-1.17(m,45h)；0.88(t,12h,j＝6.0hz)。
[1272]
步骤2：8,8'-((3-氨基丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-戊基辛基)酯
[1273][1274]
化学式:c
45h90
n2o4[1275]
分子量:723.23
[1276]
向配备有搅拌棒的圆底烧瓶中加入8,8'-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-戊基辛基)酯(3.00g，3.64mmol)。将所述油状物溶解在环戊基甲醚(8ml)中并搅拌5分钟。滴加含3m hcl的环戊基甲醚(6.07ml，18.2mmol)。在添加完成后，将反应加热至40℃持续1小时并通过tlc/lcms分析监测反应完成。将反应冷却至室温，然后冷却至0℃。然后将10％k2co3溶液滴加至反应混合物中。在添加完成后，所述水性/环戊基甲醚乳液用etoac稀释并将所得混合物搅拌10分钟。将所述溶液转移至分液漏斗并分离各层。将有机层干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。将残余物再溶解在庚烷中并用mecn洗涤两次。将庚烷层干燥(mgso4)，过滤，并浓缩以提供呈灰白色油状的粗物质8,8'-((3-氨基丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-戊基辛基)酯(2.43g，3.36mmol，92％)。所述粗物质未经进一步纯化即继续用于下一步骤。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.08(t,4h,j＝6.0hz)；2.98(t,2h,j＝6.0hz)；2.71(t,2h,j＝6.0hz)；2.54(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.28(t,6h,j＝6.0hz)；1.76(宽五重峰,2h,j＝2.0hz)；1.66-1.52(m,9h)；1.52-1.43(m,4h)；1.37-1.18(m,45h)；0.88(t,12h,j＝6.0hz)。
[1277]
步骤3：化合物30：8,8'-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-戊基辛基)酯
50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明粘性油状的8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-((4-戊基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(242mg，0.31mmol，27％)。uplc/elsd:rt＝3.18min。关于c
49h97
no5，ms(es):m/z(mh

)780.66。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.83(五重峰,1h,j＝6.0hz)；4.00(t,2h,j＝6.0hz)；3.64(br.s,1h),3.53(t,2h,j＝6.0hz)；2.59(t,2h,j＝3.0hz)；2.46(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.30-2.18(m,4h)；1.65-1.37(m,15h)；1.36-1.11(m,55h)；0.91-0.78(m,12h)。
[1288]
az.化合物32：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((4-戊基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1289][1290]
化学式:c
55h103
n3o6[1291]
分子量:902.44
[1292]
在室温下向8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸(706mg，1.00mmol)、4-戊基壬-1-醇(322mg，1.50mmol)和dmap(37.0mg，0.30mmol)于二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入n,n'-二环己基碳化二亚胺(309mg，1.50mmol)。使所得混合物在室温下搅拌16h。反应然后用额外二氯甲烷稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。有机层用1m hcl洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈米色油状的8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((4-戊基壬基)氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(186mg，0.21mmol，21％)。
[1293]
uplc/elsd:rt＝3.15min。关于c
55h103
n3o6，ms(es):m/z(mh

)902.65。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 8.78(br.s,1h)；8.18(br.s,1h)；4.83(五重峰,2h,j＝6hz)；4.01(t,2h,j＝6hz)；3.68(br.d,2h,j＝6hz)；3.28(d,3h,j＝6hz)；3.15(br.s,2h)；2.95(br.s,4h)；2.32-2.20(m,4h)；2.12-1.97(br.m,2h)；1.73-1.41(m,14h)；1.40-1.11(m,54h)；0.93-0.78(m,12h)。
[1294]
ba.化合物33：双(4-戊基壬基)-8,8'-((2-羟基乙基)氮烷二基)二辛酸酯
[1295]
双(4-戊基壬基)-8,8'-((2-羟基乙基)氮烷二基)二辛酸酯(化合物33)
[1296]
[1297]
化学式:c
46h91
no5[1298]
分子量:738.24
[1299]
向4-戊基壬基-8-溴辛酸酯(337mg，0.80mmol)和4-戊基壬基-8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸酯(306mg，0.77mmol)于环戊基甲醚(4ml)和乙腈(4ml)中的溶液中加入碳酸钾(635mg，4.59mmol)和碘化钾(140mg，0.84mmol)。使所得反应混合物在80℃下搅拌16h。然后将反应混合物冷却至室温，并在真空下蒸发挥发物。所得残余物用二氯甲烷稀释并用水和盐水洗涤。分离有机层，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的双(4-戊基壬基)-8,8'-((2-羟基乙基)氮烷二基)二辛酸酯(224mg，0.30mmol，40％)。uplc/elsd:rt＝3.05min。关于c
46h91
no5，ms(es):m/z(mh

)738.48。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.02(t,4h,j＝6.0hz)；3.51(t,2h,j＝6.0hz)；3.25(br.s,1h)；2.56(t,2h,j＝6.0hz)；2.43(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.27(t,4h,j＝6.0hz)；1.67-1.50(m,8h)；1.48-1.36(m,5h)；1.36-1.12(m,50h)；0.93-0.80(m,12h)。
[1300]
bb.化合物34：双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸酯
[1301]
4-戊基壬基-8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸酯
[1302][1303]
化学式:c
30h60
n2o4[1304]
分子量:512.82
[1305]
在室温下经20min过程向n-(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.99g，17.2mmol)于乙醇(8ml)中的溶液中加入4-戊基壬基-8-溴辛酸酯(1.2g，2.86mmol)于乙醇(7ml)中的溶液。将反应加热至60℃，并使其在此温度下搅拌16h。然后将反应混合物冷却至室温，并且使溶剂蒸发。所得残余物用乙酸乙酯稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤(5次)，直至在水层中未观察到白色沉淀物。分离有机层，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的4-戊基壬基-8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸酯(802mg，1.56mmol，55％)。uplc/elsd:rt＝2.11min。关于c
30h60
n2o4，ms(es):m/z(mh

)513.26。
[1306]
双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸酯
[1307][1308]
化学式:c
52h102
n2o6[1309]
分子量:851.40
[1310]
向4-戊基壬基-8-溴辛酸酯(667mg，1.59mmol)和4-戊基壬基-8-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氨基)辛酸酯(777mg，1.52mmol)于环戊基甲醚(7ml)和乙腈(7ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.26g，9.09mmol)和碘化钾(277mg，1.67mmol)。使所得反应混合物在80℃下搅拌16h。然后将反应混合物冷却至室温，并在真空下蒸发挥发物。所得残余物用二氯甲烷稀释并用水和盐水洗涤。分离有机层，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸酯(742mg，0.87mmol，57％)。
[1311]
uplc/elsd:rt＝3.11min。关于c
52h102
n2o6，ms(es):m/z(mh

)851.59。
[1312]
双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-氨基丙基)氮烷二基)二辛酸酯
[1313][1314]
化学式:c
47h94
n2o4[1315]
分子量:751.28
[1316]
向双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸酯(742mg，0.87mmol)于二氯甲烷(17ml)中的溶液中加入三氟乙酸(1.33ml，17.4mmol)。使所得混合物在室温下搅拌4h，然后用饱和碳酸氢钠淬灭。水层用二氯甲烷萃取。合并的有机物用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明油状的双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-氨基丙基)氮烷二基)二辛酸酯(414mg，0.55mmol，63％)。
[1317]
uplc/elsd:rt＝2.58min。关于c
47h94
n2o4，ms(es):m/z(mh

)751.68。
[1318]
双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸酯
[1319][1320]
化学式:c
52h97
n3o6[1321]
分子量：860.36
[1322]
向双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-氨基丙基)氮烷二基)二辛酸酯(414mg，0.55mmol)于四氢呋喃(4ml)和水(750μl)中的溶液中加入3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(117mg，0.83mmol)。使反应在67℃下搅拌20h。20h后，将反应冷却至室温并用二乙醚稀
释。有机物用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈灰白色蜡状固体的双(4-戊基壬基)-8,8'-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸酯(179mg，0.21mmol，38％)。
[1323]
uplc/elsd:rt＝2.97min。关于c
52h97
n3o6，ms(es):m/z(mh

)860.59。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 7.29(br.s,1h)；4.03(t,4h,j＝6hz)；3.64(br.s,2h)；3.27(d,3h,j＝3hz)；2.54(br.t,2h,j＝6hz)；2.41(br.t,4h,j＝6hz)；2.29(t,4h,j＝9hz)；1.81-1.69(m,2h)；1.68-1.51(m,8h)；1.48-1.13(m,55h)；0.94-0.80(m,12h)。
[1324]
bc.化合物35：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(2-羟基乙基)氨基)辛酸2-(4-乙基环己基)乙酯
[1325][1326]
化学式：c
45h87
no5[1327]
分子量：722.19
[1328]
uplc/elsd:rt＝2.92min。关于c
45h87
no5，ms(es):m/z(mh

)723.059。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.12(m,2h)；3.57(bm,2h)；2.73-2.22(m,10h)；1.82-1.15(m,61h),0.90(m,11h)。
[1329]
bd.化合物37：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(2-羟基乙基)氨基)辛酸2-(3-乙基环戊基)乙酯
[1330][1331]
化学式：c
44h85
no5[1332]
分子量：708.17
[1333]
uplc/elsd:rt＝2.89min。关于c
44h85
no5，ms(es):m/z(mh

)709.614。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.09(m,2h)；3.56(m,2h)；2.66-2.40(m,6h)；2.30(m,4h)；2.06-1.05(m,60h),0.90(m,10h)。
[1334]
be.化合物39：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-(2-(4-丙基环己基)乙氧基)辛基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯
[1335][1336]
化学式:c
52h95
n3o6[1337]
分子量:858.35
[1338]
化合物39类似于化合物26以4-丙基环己酮代替7-十三烷酮为起始物来制备。
[1339]
uplc/elsd:rt＝2.97min。关于c
52h95
n3o6，ms(es):m/z(mh

)859.727。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.87(p,1h)；4.12(t,2h)；3.68(bm,2h)；3.28(m,3h)；2.66-2.40(m,6h)；2.32(m,4h)；1.84-1.12(m,65h)；0.90(m,12h)。
[1340]
bf.化合物40：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氨基)辛酸2-(3-乙基环戊基)乙酯
[1341][1342]
化学式：c
50h91
n3o6[1343]
分子量：830.29
[1344]
化合物40类似于化合物26以3-乙基环戊酮代替7-十三烷酮为起始物来制备。
[1345]
uplc/elsd：rt＝2.84min。关于c
50h91
n3o6，ms(es)：m/z(mh

)831.604。1h nmr(300mhz，cdcl3)δ：ppm 5.79(p，1h)；4.87(t，2h)；4.08(bm，2h)；3.66(m，3h)；3.50(m，2h)；3.28(m，3h)；2.57(m，2h)；2.44(m，4h)；2.31(m，4h)；2.03-1.08(m，63h)；0.89(m，8h)；0.71(m，1h)。
[1346]
bg.化合物42：8，8
′‑
((3-羟基丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-戊基辛基)酯
[1347][1348]
化学式：c
45h89
no5[1349]
分子量：724.21
[1350]
向8-溴辛酸3-戊基辛酯(398mg，0.98mmol)和8-((3-羟基丙基)氨基)辛酸3-戊基
[1359]
分子量:752.26
[1360]
向8-溴辛酸3-丁基庚酯(629mg，1.67mmol)和8-((3-羟基丙基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(723mg，1.59mmol)于环戊基甲醚(7ml)和乙腈(7ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.32g，9.52mmol)和碘化钾(290mg，1.75mmol)。使所得反应混合物在80℃下搅拌16h。然后将反应混合物冷却至室温，并在真空下蒸发挥发物。所得残余物用二氯甲烷稀释并用水和盐水洗涤。分离有机层，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明粘性油状的8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(3-羟基丙基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(503mg，0.67mmol，42％)。uplc/elsd:rt＝3.04min。关于c
47h93
no5，ms(es):m/z(mh

)752.42。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 5.68(br.s,1h)；4.86(五重峰,1h,j＝6.0hz)；4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.79(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.63(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.39(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.28(dt,4h,j＝6.0,3.0hz)；1.73-1.17(m,65h)；0.96-0.82(m,12h)。
[1361]
bj.化合物50：8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(4-羟基丁基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1362][1363]
化学式:c
48h95
no5[1364]
分子量:766.29
[1365]
向8-溴辛酸3-丁基庚酯(652mg，1.65mmol)和8-((4-羟基丁基)氨基)辛酸十七烷-9-基酯(773mg，1.65mmol)于环戊基甲醚(8ml)和乙腈(8ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.36g，9.87mmol)和碘化钾(300mg，1.81mmol)。使所得反应混合物在80℃下搅拌16h。然后将反应混合物冷却至室温，并在真空下蒸发挥发物。所得残余物用二氯甲烷稀释并用水和盐水洗涤。分离有机层，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明粘性油状的8-((8-(十七烷-9-基氧基)-8-氧代辛基)(4-羟基丁基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(829mg，1.08mmol，66％)。uplc/elsd:rt＝3.05min。关于c
48h95
no5，ms(es):m/z(mh

)766.48。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 6.58(br.s,1h)；4.86(五重峰,1h,j＝6.0hz)；4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.55(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.44(br.t,6h,j＝6.0hz)；2.27(dt,4h,j＝6.0,3.0hz)；1.70-1.41(m,19h)；1.36-1.18(m,48h)；0.94-0.81(m,12h)。
[1366]
bk.化合物51：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[1367][1368]
化学式：c
46h85
n3o6[1369]
分子量:776.20
[1370]
向8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(378mg，0.57mmol)于乙醇(5ml)中的溶液中加入3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(120mg，0.85mmol)。使反应在67℃下搅拌20h。20h后，将反应冷却至室温并用二乙醚稀释。有机物用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈浅黄色无定形固体状的8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(198mg，0.26mmol，45％)。uplc/elsd:rt＝2.54min。关于c
46h85
n3o6，ms(es):m/z(mh

)776.22。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 7.25(br.s,1h)；4.07(t,4h,j＝6.0hz)；3.65(br.s,2h)；3.27(d,3h,j＝6.0hz)；2.54(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.41(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.29(t,4h,j＝6.0hz)；1.74(宽五重峰,2h,j＝6.0hz)；1.67-1.52(m,8h)；1.49-1.18(m,43h)；0.88(t,12h,j＝6.0hz)。
[1371]
bl.化合物52：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1372][1373]
化学式：c
44h81
n3o6[1374]
分子量:748.15
[1375]
向8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(503mg，0.79mmol)于乙醇(7ml)中的溶液中加入3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(167mg，1.18mmol)。使反应在67℃下搅拌20h。20h后，将反应冷却至室温并用二乙醚稀释。有机物用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈浅黄色无定形固体状的8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(228mg，0.31mmol，39％)。uplc/elsd:
50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈灰白色蜡状固体的8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯(240mg，0.30mmol，33％)。uplc/elsd:rt＝2.67min。关于c
48h89
n3o6，ms(es):m/z(mh

)804.22。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 7.38(br.s,1h)；7.03(br.s,1h)；4.07(t,4h,j＝6.0hz)；3.65(br.s,2h,j＝6.0hz)；3.27(d,3h,j＝6.0hz)；2.52(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.40(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.28(t,4h,j＝6.0hz)；1.75(宽五重峰,2h,j＝6.0hz)；1.67-1.51(m,8h)；1.47-1.17(m,46h)；0.93-0.82(m,12h)。
[1386]
bo.化合物55：8,8'-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)氮烷二基)二辛酸双(3-丁基庚基)酯
[1387][1388]
化学式：c
46h85
n3o6[1389]
精确质量：775.64
[1390]
分子量：776.20
[1391]
uplc/elsd:rt＝2.52min。关于c
46h85
n3o6，ms(es):m/z(mh

)776.462。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.10(m,4h)；3.67(bm,2h)；3.29(m,3h)；2.58(m,2h)；2.43(m,4h)；2.32(t,4h)；1.84-1.16(m,54h)；0.91(m,12h)。
[1392]
bp.化合物57：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[1393][1394]
化学式：c
48h89
n3o6[1395]
分子量：804.255
[1396]
向8-[(3-氨基丙基)[8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基]氨基]辛酸十一烷-6-基酯(0.870g，1.304mmol)于thf(6.5ml)和水(1.1ml)中的溶液中加入3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(0.321g，2.274mmol，1.744当量)。使反应在67℃下搅拌16h。将反应冷却至室温，干燥，并过滤。在真空下去除有机物。残余物通过硅胶色谱法[0-30％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得8-[(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)[8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基]氨基]辛酸3-戊基辛酯(0.126g，12％)。uplc/elsd:rt＝2.68min。ms(esi):c
48h90
n3o
6
(m h)m/z计算值804.255；实验值804.47。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；3.67(br.s,2h)；3.30(d,3h)；2.59(br.t,2h)；2.41(br.t,4h)；2.31(t,4h)；1.78-1.28(m,58h)；0.90(t,12h)。
[1397]
bq.化合物58：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯
[1398][1399]
化学式:c
46h85
n3o6[1400]
分子量:776.20
[1401]
向8-((3-氨基丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯(718mg，1.08mmol)于乙醇(10ml)中的溶液中加入3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(228mg，1.61mmol)。使反应在67℃下搅拌20h。20h后，将反应冷却至室温并用二乙醚稀释。有机物用盐水洗涤，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈灰白色蜡状固体的8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯(215mg，0.28mmol，26％)。uplc/elsd:rt＝2.55min。关于c
46h85
n3o6，ms(es):m/z(mh

)776.34。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 7.22(br.s,1h)；6.80(br.s,1h)；4.86(五重峰,1h,j＝6.0hz)；4.07(t,2h,j＝6.0hz)；3.65(br.s,2h)；3.27(d,3h,j＝6.0hz)；2.54(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.41(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.29(t,4h,j＝6.0hz)；1.74(宽五重峰,2h,j＝6.0hz)；1.67-1.47(m,10h)；1.45-1.19(m,41h)；0.88(t,12h,j＝6.0hz)。
[1402]
br.化合物60：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1403][1404]
化学式：c
48h89
n3o6[1405]
精确质量：803.68
[1406]
分子量：804.26
[1407]
uplc/elsd:rt＝2.74min。关于c
48h89
n3o6，ms(es):m/z(mh

)804.220。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；3.70(bm,2h)；3.30(m,3h)；2.90-2.57(m,5h)；2.31(m,4h)；1.90(bm,2h)；1.74-1.19(m,56h)；0.91(m,12h)。
[1408]
bs.化合物61：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1409][1410]
化学式：c
46h85
n3o6[1411]
精确质量：775.64
[1412]
分子量：776.20
[1413]
uplc/elsd:rt＝2.56min。关于c
46h85
n3o6，ms(es):m/z(mh

)776.344。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；3.72(bm,2h)；3.33(m,3h)；3.15-2.72(m,5h)；2.31(m,4h)；2.01(bm,2h)；1.77-1.18(m,52h)；0.91(m,12h)。
[1414]
bt.化合物62：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-(壬-5-基氧基)-8-氧代辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯：
[1415][1416]
化学式：c
44h81
n3o6[1417]
精确质量：747.61
[1418]
分子量：748.15
[1419]
uplc/elsd:rt＝2.36min。关于c
44h81
n3o6，ms(es):m/z(mh

)748.344。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；3.68(bm,2h)；3.30(m,3h)；2.74-2.43(m,6h)；2.31(m,4h)；1.82(bm,2h)；1.73-1.16(m,47h)；0.91(m,12h)。
[1420]
bu.化合物63：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸十五烷-8-基酯
[1421][1422]
化学式：c
48h89
n3o6[1423]
分子量：804.255
[1424]
向8-[(3-氨基丙基)({8-氧代-8-[(3-丙基己基)氧基]辛基})氨基]辛酸十五烷-8-基酯(3.779g，5.436mmol，1当量)于thf(10ml)中的溶液中加入含3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(1.151g，8.154mmol，1.5当量)的水(0.4ml)。使反应在回流下在67
℃下搅拌16h。将反应冷却至室温，干燥，并过滤。在真空下去除有机物。残余物通过硅胶色谱法[0-30％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得8-[(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)({8-氧代-8-[(3-丙基己基)氧基]辛基})氨基]辛酸十五烷-8-基酯(0.252g，6％)。uplc/elsd:rt＝2.75min。ms(esi):c
48h90
n3o
6
(m h)m/z计算值804.255；实验值804.34。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 9.05(br.s,1h)；8.37(br.s,1h)；4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；3.73(br.d,2h)；3.34(d,3h)；3.26(m,2h)；3.07(br.t,4h)；2.30(t,4h)；2.11(br.t,2h)；1.71-1.28(m,61h)；0.90(t,12h)。
[1425]
bv.化合物64：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯
[1426][1427]
化学式：c
46h85
n3o6[1428]
分子量：776.20
[1429]
向8-[(3-氨基丙基)[8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基]氨基]辛酸3-丙基己酯(0.774g，1.16mmol)于四氢呋喃(5.8ml)和水(1.0ml)中的溶液中加入3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(0.246g，1.74mmol)。使反应在67℃下搅拌18小时。将反应冷却至室温并用二氯甲烷(40ml)稀释，然后用饱和nahco3(水溶液)洗涤。分离有机层并用饱和nahco3(水溶液)再洗涤两次。有机层经mgso4干燥，然后过滤并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法[0-70％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化为呈蜡状黄色固体的8-[(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)[8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基]氨基]辛酸3-丙基己酯(0.317g，0.375mmol，产率32.3％)。uplc/elsd:rt＝2.48min实验值，776.34。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；3.78-3.55(m,2h)；3.29(d,3h)；2.56(t,2h)；2.43(t,4h)；2.31(t,4h)；1.85-1.70(m,2h)；1.70-1.48(m,11h)；1.48-1.39(m,4h)；1.39-1.17(m,36h)；0.90(t,12h)。
[1430]
bw.化合物65：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯：
[1431][1432]
化学式：c
44h81
n3o6[1433]
分子量：748.15
[1434]
向8-[(3-氨基丙基)[8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基]氨基]辛酸3-丙基己酯
(0.682g，1.07mmol)于四氢呋喃(5.4ml)和水(0.9ml)中的溶液中加入3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(0.226g，1.60mmol)。使反应在67℃下搅拌18小时。将反应冷却至室温并用二氯甲烷(40ml)稀释，然后用饱和nahco3(水溶液)洗涤。分离有机层并用饱和nahco3(水溶液)再洗涤两次。有机层经mgso4干燥，然后过滤并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法[0-70％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得呈蜡状黄色/白色固体的8-[(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)[8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基]氨基]辛酸3-丙基己酯(0.377g，44.8％)。uplc/elsd:rt＝2.42min实验值，748.47。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；3.76-3.57(m,2h)；3.29(d,3h)；2.56(t,2h)；2.43(t,4h)；2.31(t,4h)；1.84-1.71(m,2h)；1.71-1.48(m,11h)；1.48-1.40(m,4h)；1.40-1.17(m,32h)；0.91(t,12h)。
[1435]
bx.化合物66：8-((3-((2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基)氨基)丙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸壬-5-基酯：
[1436][1437]
化学式：c
42h77
n3o6[1438]
分子量：720.09
[1439]
向8-[(3-氨基丙基)({8-氧代-8-[(3-丙基己基)氧基]辛基})氨基]辛酸壬-5-基酯(0.20g，0.33mmol)于四氢呋喃(1.7ml)和水(0.3ml)中的溶液中加入3-甲氧基-4-(甲基氨基)环丁-3-烯-1,2-二酮(0.070g，0.49mmol)。使反应在67℃下搅拌18小时。将反应冷却至室温并用二氯甲烷(40ml)稀释，然后用饱和nahco3(水溶液)洗涤。分离有机层并用饱和nahco3(水溶液)再洗涤两次。有机层经mgso4干燥，然后过滤并在真空下蒸发。残余物通过硅胶色谱法[0-70％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷]纯化以获得呈黄色蜡状固体的8-[(3-{[2-(甲基氨基)-3,4-二氧代环丁-1-烯-1-基]氨基}丙基)({8-氧代-8-[(3-丙基己基)氧基]辛基})氨基]辛酸壬-5-基酯(0.131g，51.9％)。uplc/elsd:rt＝2.24min实验值，720.22。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.88(p,1h)；4.10(t,2h)；3.77-3.55(m,2h)；3.29(d,3h)；2.56(t,2h)；2.43(t,4h)；2.31(t,4h)；1.89-1.70(m,3h)；1.70-1.50(m,10h)；1.50-1.39(m,4h)；1.39-1.17(m,28h)；0.91(t,12h)。
[1440]
by.化合物67：8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯
[1441]
[1442]
化学式:c
40h79
no5[1443]
分子量:654.07
[1444]
向8-溴辛酸3-戊基辛酯(517mg，1.28mmol)和8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸3-丙基己酯(400mg，1.21mmol)于环戊基甲醚(6ml)和乙腈(6ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.01g，7.28mmol)和碘化钾(222mg，1.36mmol)。使所得反应混合物在80℃下搅拌16h。然后将反应混合物冷却至室温，并在真空下蒸发挥发物。所得残余物用二氯甲烷稀释并用水和盐水洗涤。分离有机层，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明粘性油状的8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-((3-丙基己基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-戊基辛酯(310mg，0.47mmol，39％)。uplc/elsd:rt＝2.58min。关于c
40h79
no5，ms(es):m/z(mh

)654.23。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.08(t,4h,j＝6.0hz)；3.54(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.59(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.46(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.28(t,4h,j＝6.0hz)；1.68-1.52(m,8h)；1.50-1.37(m,6h)；1.35-1.19(m,37h)；0.88(t,12h,j＝6.0hz)。
[1445]
bz.化合物68：8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯
[1446][1447]
化学式:c
38h75
no5[1448]
分子量:626.02
[1449]
向8-溴辛酸十一烷-6-基酯(481mg，1.28mmol)和8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸3-丙基己酯(400mg，1.21mmol)于环戊基甲醚(6ml)和乙腈(6ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.01g，7.28mmol)和碘化钾(222mg，1.36mmol)。使所得反应混合物在80℃下搅拌16h。然后将反应混合物冷却至室温，并在真空下蒸发挥发物。所得残余物用二氯甲烷稀释并用水和盐水洗涤。分离有机层，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明粘性油状的8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-(十一烷-6-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯(461mg，0.74mmol，61％)。uplc/elsd:rt＝2.43min。关于c
28h75
no5，ms(es):m/z(mh

)626.24。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.87(五重峰,1h,j＝6.0hz)；4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.52(t,2h,j＝6.0hz)；2.57(t,2h,j＝6.0hz)；2.44(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.28(t,4h,j＝6.0hz)；1.67-1.38(m,16h)；1.37-1.18(m,32h)；0.88(dt,12h,j＝6.0,3.0hz)。
[1450]
ca.化合物69：8,8'-((2-羟基乙基)氮烷二基)二辛酸双(3-丁基庚基)酯
[1451][1452]
化学式：c
40h79
no5[1453]
精确质量：653.60
[1454]
分子量：654.07
[1455]
uplc/elsd:rt＝2.66min。关于c
40h79
no5，ms(es):m/z(mh

)654.34。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.11(t,4h)；3.56(bm,2h)；2.69-2.39(bm,6h),2.31(t,4h)；1.73-1.17(m,50h)；0.92(m,12h)。
[1456]
cb.化合物70：8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-((3-戊基辛基)氧基)辛基)氨基)辛酸3-丁基庚酯
[1457][1458]
化学式：c
40h79
no5[1459]
精确质量：653.60
[1460]
分子量：654.07
[1461]
uplc/elsd:rt＝2.63min。关于c
40h79
no5，ms(es):m/z(mh

)654.357。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.89(p,1h)；4.11(t,2h)；3.54(m,2h)；3.03(bs,1h)；2.59(m,2h)；2.45(m,4h)；2.30(m,4h)；1.74-1.18(m,51h)；0.91(m,12h)。
[1462]
cc.化合物71：8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯
[1463][1464]
化学式：c
40h79
no5[1465]
分子量:654.07
[1466]
向8-溴辛酸十三烷-7-基酯(517mg，1.28mmol)和8-((2-羟基乙基)氨基)辛酸3-丙基己酯(400mg，1.21mmol)于环戊基甲醚(6ml)和乙腈(6ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.01g，7.28mmol)和碘化钾(222mg，1.36mmol)。使所得反应混合物在80℃下搅拌16h。然后将反应混合物冷却至室温，并在真空下蒸发挥发物。所得残余物用二氯甲烷稀释并用水和盐水洗涤。分离有机层，干燥(mgso4)，过滤，并浓缩。粗残余物通过硅胶色谱法(0-5-10-25-50-100％(1％nh4oh、20％meoh于二氯甲烷中的混合物)/二氯甲烷)纯化以得到呈透明粘性油
状的8-((2-羟基乙基)(8-氧代-8-(十三烷-7-基氧基)辛基)氨基)辛酸3-丙基己酯(377mg，0.58mmol，47％)。uplc/elsd:rt＝2.60min。关于c
40h79
no5，ms(es):m/z(mh

)654.23。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ:ppm 4.87(五重峰,1h,j＝6.0hz)；4.08(t,2h,j＝6.0hz)；3.53(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.58(br.t,2h,j＝6.0hz)；2.45(br.t,4h,j＝6.0hz)；2.28(dt,4h,j＝9.0,3.0hz)；1.69-1.39(m,16h)；1.38-1.18(m,36h)；0.94-0.81(m,12h)。
[1467]
实施例2：样品制剂
[1468]
包括治疗剂和/或预防剂的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)可根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物的选择、额外脂质的选择、脂质组分中每种脂质的量和脂质组分与治疗剂和/或预防剂的wt:wt比率进行优化。
[1469]
制备包括作为磷脂的dspc、作为结构脂质的胆固醇、作为peg脂质的peg-1和根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物的脂质纳米粒子(例如空lnp或负载lnp)。表2a和表2b概述所述制剂的特征。
[1470]
如表2a和表2b所示，根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物的选择显著影响所述组合物的大小(例如直径)、多分散性指数(“pdi”)和囊封效率(“％ee”)。
[1471]
表2a.包含本公开化合物的纳米粒子的特征。
[1472]
化合物cad纯度大小(nm)％eepdi5190.458.395.90.125290.070.584.90.165383.7106.784.20.285487.864.398.30.105597.177.088.90.255783.669.490.10.125892.563.990.10.12
[1473]
表2b.包含本公开化合物的纳米粒子的特征。
[1474]
化合物cad纯度大小(nm)％eepdi6077.560.498.80.146195.563.598.10.096298.291.083.00.176384.856.298.10.156491.773.689.20.136595.083.188.60.176694.3145.381.70.25
[1475]
实施例3-7：样品制剂的表达、清除和耐受性
[1476]
开发本公开脂质以促进治疗剂有效递送至细胞，同时维持组织中的短半衰期(即，
低代谢稳定性)并因此在重复给药时降低组织中的脂质积聚。组织中的高脂质积聚可能触发毒性效应，并且因此是不希望的。另一方面，在组织中快速地代谢的脂质可能无法向细胞递送足以有效的治疗剂(例如mrna)。下文概述的研究的目的是鉴定具有最佳代谢稳定性并且还生成高效力脂质纳米粒子(lnp)的氨基脂质。
[1477]
实施例3：小鼠中由样品制剂诱导的hepo表达和肝脏中的残余脂质水平
[1478]
为了评估本公开脂质的表达效力和代谢稳定性，测量在向小鼠施用本公开纳米粒子(例如，负载lnp)之后的肝细胞蛋白表达(hepo)。
[1479]
包括作为磷脂的dspc、作为结构脂质的胆固醇、作为peg脂质的peg-1、根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物和编码hepo的mrna的脂质纳米粒子(lnp)经静脉内施用至cd-1小鼠。在注射后6h测试血清中的hepo浓度。所测试的粒子具有约0.1-0.4之间的pdi、约82-99％之间的囊封效率和约56-145nm的粒子直径。所有所测试的lnp均证明mrna有效递送至肝细胞，其中在24h后变化量的脂质保留在小鼠的肝脏中。
[1480]
表3.小鼠中通过施用包含本公开脂质的lnp诱导的hepo表达和肝脏中的残余脂质水平
[1481]
[1482]
[1483][1484]a总剂量计算的百分比假设具有1.5g肝脏的25g小鼠
[1485]b》95％等于脂质的极缓慢代谢
[1486]
实施例4：小鼠和大鼠中由样品制剂诱导的荧光素酶表达
[1487]
为了进一步评估本公开脂质的表达效力和代谢稳定性，测量在向啮齿动物施用包含含有荧光素酶的mrna的本公开纳米粒子(例如，负载lnp)后的荧光素酶表达。
[1488]
包括作为磷脂的dspc、作为结构脂质的胆固醇、作为peg脂质的peg-1、根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物和编码荧光素酶的mrna的脂质纳米粒子(lnp)经静脉内施用至cd-1小鼠和sprague dawley大鼠。在注射后6h，经由生物发光离体测试肝脏中的表达水平。所测试的粒子具有约0.09-0.25之间的pdi和约89-98％之间的囊封效率。所有所测试的lnp均证明mrna有效递送至肝脏并且mrna表达于肝细胞中，其中在24h后变化量的脂质保留在大鼠的肝组织中。
[1489]
表4a.小鼠和大鼠中通过施用包含本公开脂质的lnp诱导的npi-荧光素酶表达
[1490][1491][1492]
表4b.小鼠中通过施用包含本公开脂质的lnp诱导的荧光素酶表达和肝脏中的残余脂质水平
[1493]
化合物编号6h时的总全身通量(p/s)24h时剩余的脂质％
76.09e 10《183.82e 10《1122.39e 10《1133.77e 10《191.82e 1068
±
10104.6e 0967
±
7111.04e 1023
±6[1494]
实施例5：大鼠中的耐受性
[1495]
为了评估本公开脂质的耐受性，在大鼠中评估由样品制剂诱导的报告基因抗体构建体表达。
[1496]
包括作为磷脂的dspc、作为结构脂质的胆固醇、作为peg脂质的peg-1、根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物和编码报告基因抗体构建体的mrna的脂质纳米粒子(lnp)经静脉内施用至sprague dawley大鼠。在注射后6h，经由酶联免疫吸附测定(elisa)测试报告基因抗体构建体的水平。关于所测试的制剂，测量到高水平的报告基因抗体，具有极少肝毒性迹象。
[1497]
表5.大鼠中通过施用包含本公开脂质的lnp诱导的报告基因抗体构建体表达
[1498][1499]
实施例6：大鼠中由样品制剂诱导的hepo表达
[1500]
为了进一步评估本公开脂质的表达效力和代谢稳定性，测量在向大鼠施用本公开纳米粒子(例如，负载lnp)之后的肝细胞蛋白表达(hepo)。
[1501]
包括作为磷脂的dspc、作为结构脂质的胆固醇、作为peg脂质的peg-1、根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物和编码hepo的mrna的脂质纳米粒子(lnp)经静脉内施用至sprague dawley大鼠。在注射后6h测试血清中的hepo浓度。所有所测试的lnp均证明mrna有效递送至肝细胞，其中在6h后变化量的脂质保留在大鼠的肝脏中。
[1502]
表6.大鼠中通过施用包含本公开脂质的lnp诱导的hepo表达
[1503][1504]
实施例7：非人类灵长类动物中由样品制剂诱导的荧光素酶表达
[1505]
为了评估不同物种中本公开脂质的表达效力和代谢稳定性，测量在向非人类灵长类动物施用含有mrna的本公开纳米粒子(例如，负载lnp)之后的mrna表达。
[1506]
包括作为磷脂的dspc、作为结构脂质的胆固醇、作为peg脂质的peg-1、根据式(1-1)、(2-1)、(i-a)、(a)、(b)、(a-1)、(a-2)、(a-3)、(ia)、(ib)、(b-1)、(b-2)、(b-3)、(a-a)、(a-a1)、(a-a2)、(a-a3)、(a-b)、(a-b1)、(a-b2)、(a-b3)、(a-c)或(b-c)的化合物和编码荧光素酶的mrna的脂质纳米粒子(lnp)经静脉内施用至食蟹猕猴。在注射后6h，经由elisa离体测量肝脏中的荧光素酶水平。所有所测试的lnp均证明mrna有效递送至非人类灵长类动物的肝细胞。
[1507]
表7.非人类灵长类动物中通过施用包含本公开脂质的lnp诱导的荧光素酶表达
[1508][1509]
列举的实施方案
[1510]
实施方案1.一种式(1-a)化合物：
[1511]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1512]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1513]
r'
支链
是：r'
环状
是：
[1514]raα
、r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
[1515]
r2和r3独立地选自由h、c
1-14
烷基、c
2-14
烯基、-r*yr*”、-yr*”和-r*or*”组成的组，
或r2和r3连同其所连接的原子形成杂环或碳环；
[1516]
r4选自由氢、c
3-6
碳环、-(ch2)nq、-(ch2)nchqr、-(ch2)oc(r
12
)2(ch2)
n-o
q、-chqr、-cq(r)2、-c(o)nqr和未被取代的c
1-6
烷基组成的组，其中q选自由碳环、杂环、-or、-o(ch2)nn(r)2、-c(o)or、-oc(o)r、-cx3、-cx2h、-cxh2、-cn、-n(r)2、-c(o)n(r)2、-n(r)c(o)r、-n(r)s(o)2r、-n(r)c(o)n(r)2、-n(r)c(s)n(r)2、-n(r)r8、-n(r)s(o)2r8、-o(ch2)nor、-n(r)c(＝nr9)n(r)2、-n(r)c(＝chr9)n(r)2、-oc(o)n(r)2、-n(r)c(o)or、-n(or)c(o)r、-n(or)s(o)2r、-n(or)c(o)or、-n(or)c(o)n(r)2、-n(or)c(s)n(r)2、-n(or)c(＝nr9)n(r)2、-n(or)c(＝chr9)n(r)2、-c(＝nr9)n(r)2、-c(＝nr9)r、-c(o)n(r)or、-(ch2)nn(r)2、-c(r)n(r)2c(o)or、nc(r)＝r
11
、n(c＝nr
15
)r
11
、nrc(c(o)nr
14r14
')2、-nrc(o)(ch2)
p
c(o)nr
14r14
'和组成的组，其中a是c
6-10
芳基或杂环；并且
[1517]
每个o独立地选自由1、2、3和4组成的组；p是0、1、2、3或4；a是1、2、3或4；并且每个n独立地选自由1、2、3、4和5组成的组；或
[1518]
r4是其中
[1519]
xa和xb各自独立地是o或s；
[1520]r10
选自由h、卤基、-oh、r、-n(r)2、-cn、-n3、-c(o)oh、-c(o)or、-oc(o)r、-or、-sr、-s(o)r、-s(o)or、-s(o)2or、-no2、-s(o)2n(r)2、-n(r)s(o)2r、-nh(ch2)
t1
n(r)2、-nh(ch2)
p1
o(ch2)
q1
n(r)2、-nh(ch2)
s1
or、-n((ch2)
s1
or)2、-n(r)-碳环、-n(r)-杂环、-n(r)-芳基、-n(r)-杂芳基、-n(r)(ch2)
t1-碳环、-n(r)(ch2)
t1-杂环、-n(r)(ch2)
t1-芳基、-n(r)(ch2)
t1-杂芳基、碳环、杂环、芳基和杂芳基组成的组；
[1521]
n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1522]
r是0或1；
[1523]
t1选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1524]
p1选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1525]
q1选自由1、2、3、4和5组成的组；并且
[1526]
s1选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1527]
每个r5独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1528]
每个r6独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1529]
m和m'独立地选自由-oc(o)o-、-c(o)o-、-oc(o)-、-oc(o)-m
”‑
c(o)o-、-oc(o)-nr
m-c(o)o-、-o-m
”‑
o-、-c(o)n(rm)-、-n(rm)c(o)-、-oc(o)n(rm)-、-n(rm)c(o)o-、-nrmc(o)nr
m-、-o-n＝c(rm)-、-c(o)-、-c(s)-、-c(s)s-、-sc(s)-、-ch(oh)-、-p(o)(orm)o-、-s(o)
2-、-s-s-、-so-、-os-、s(rm)2o-、-o-s(rm)
2-、-s(o)o-、-os(o)-、芳基和杂芳基组成的组，其中m”是键、-(ch2)zc(o)-、c
1-13
烷基、c
2-13
烯基、-b(r**)-、-si(r**)
2-、-s(r**)
2-或-s(o)-，其中z是1、2、3或4；
[1530]
r7选自由c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1531]
r8选自由c
3-6
碳环和杂环组成的组；
[1532]
r9选自由h、cn、no2、c
1-6
烷基、-or、-s(o)2r、-s(o)2n(r)2、c
2-6
烯基、c
3-6
碳环和杂环组成的组；
[1533]r11
选自由c
3-6
碳环和杂环组成的组，其中所述c
3-6
碳环和杂环各自任选地被一个或多个r
13
取代；
[1534]r12
选自由h、oh、c
1-3
烷基和c
2-3
烯基组成的组；
[1535]
每个r
13
独立地选自由oh、氧代基、卤基、c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
2-6
烯基、c
1-6
烷基氨基、二-(c
1-6
烷基)氨基、nh2、c(o)nh2、cn和no2组成的组；
[1536]
每个r
14
独立地选自由h、oh、c
1-6
烷基和c
2-3
烯基组成的组；
[1537]
每个r
14
'独立地选自由h、oh、c
1-6
烷基和c
2-3
烯基组成的组；
[1538]r15
独立地选自由h、oh、c
1-6
烷基和c
2-3
烯基组成的组；
[1539]
每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
1-3
烷基-芳基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1540]
每个r'独立地选自由c
1-18
烷基、c
2-18
烯基、-r*yr*”、-yr*”、(ch2)qor*和h组成的组；
[1541]
每个rm独立地选自由h、c
1-6
烷基和c
2-6
烯基组成的组；
[1542]
每个r*”选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1543]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1544]
每个r*独立地选自由c
1-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
[1545]
每个r**独立地选自由h、oh、c
1-12
烷基、c
2-12
烯基、(ch2)qor*和(ch2)qoh组成的组；
[1546]
每个y独立地是c
3-6
碳环；
[1547]
ya是c
3-6
碳环；
[1548]
每个x独立地选自由f、cl、br和i组成的组；
[1549]
每个q独立地选自由1、2和3组成的组；
[1550]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1551]
s选自由0、1、2、3、4、5和6组成的组；并且
[1552]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1553]
实施方案2.一种式(1-b)化合物：
[1554]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1555]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1556]
r'
支链
是：r'
环状
是：
[1557]raα
、r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
[1558]rbα
、r
bβ
、r
bγ
和r
bδ
各自独立地选自由h、c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组；
[1559]
r4选自由氢、c
3-6
碳环、-(ch2)nq、-(ch2)nchqr、-(ch2)oc(r
12
)2(ch2)
n-o
q、-chqr、-cq(r)2、-c(o)nqr和未被取代的c
1-6
烷基组成的组，其中q选自由碳环、杂环、-or、-o(ch2)nn(r)2、-c(o)or、-oc(o)r、-cx3、-cx2h、-cxh2、-cn、-n(r)2、-c(o)n(r)2、-n(r)c(o)r、-n(r)s(o)2r、-n(r)c(o)n(r)2、-n(r)c(s)n(r)2、-n(r)r8、-n(r)s(o)2r8、-o(ch2)nor、-n(r)c(＝nr9)n(r)2、-n(r)c(＝chr9)n(r)2、-oc(o)n(r)2、-n(r)c(o)or、-n(or)c(o)r、-n(or)s(o)2r、-n(or)c(o)or、-n(or)c(o)n(r)2、-n(or)c(s)n(r)2、-n(or)c(＝nr9)n(r)2、-n(or)c(＝chr9)n(r)2、-c(＝nr9)n(r)2、-c(＝nr9)r、-c(o)n(r)or、-(ch2)nn(r)2、-c(r)n(r)2c(o)or、nc(r)＝r
11
、n(c＝nr
15
)r
11
、nrc(c(o)nr
14r14
')2、-nrc(o)(ch2)
p
c(o)nr
14r14
'和组成的组，其中a是c
6-10
芳基或杂环；并且
[1560]
每个o独立地选自由1、2、3和4组成的组；p是0、1、2、3或4；a是1、2、3或4；并且每个n独立地选自由1、2、3、4和5组成的组；或
[1561]
r4是其中
[1562]
xa和xb各自独立地是o或s；
[1563]r10
选自由h、卤基、-oh、r、-n(r)2、-cn、-n3、-c(o)oh、-c(o)or、-oc(o)r、-or、-sr、-s(o)r、-s(o)or、-s(o)2or、-no2、-s(o)2n(r)2、-n(r)s(o)2r、-nh(ch2)
t1
n(r)2、-nh(ch2)
p1
o(ch2)
q1
n(r)2、-nh(ch2)
s1
or、-n((ch2)
s1
or)2、-n(r)-碳环、-n(r)-杂环、-n(r)-芳基、-n(r)-杂芳基、-n(r)(ch2)
t1-碳环、-n(r)(ch2)
t1-杂环、-n(r)(ch2)
t1-芳基、-n(r)(ch2)
t1-杂芳基、碳环、杂环、芳基和杂芳基组成的组；
[1564]
n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1565]
r是0或1；
[1566]
t1选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1567]
p1选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1568]
q1选自由1、2、3、4和5组成的组；并且
[1569]
s1选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1570]
每个r5独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1571]
每个r6独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1572]
m和m'独立地选自由-oc(o)o-、-c(o)o-、-oc(o)-、-oc(o)-m
”‑
c(o)o-、-oc(o)-nr
m-c(o)o-、-o-m
”‑
o-、-c(o)n(rm)-、-n(rm)c(o)-、-oc(o)n(rm)-、-n(rm)c(o)o-、-nrmc(o)nr
m-、-o-n＝c(rm)-、-c(o)-、-c(s)-、-c(s)s-、-sc(s)-、-ch(oh)-、-p(o)(orm)o-、-s(o)
2-、-s-s-、-so-、-os-、s(rm)2o-、-o-s(rm)
2-、-s(o)o-、-os(o)-、芳基和杂芳基组成的组，其中m”是键、-(ch2)zc(o)-、c
1-13
烷基、c
2-13
烯基、-b(r**)-、-si(r**)
2-、-s(r**)
2-或-s(o)-，其中z是1、2、3或4；
[1573]
r7选自由c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1574]
r8选自由c
3-6
碳环和杂环组成的组；
[1575]
r9选自由h、cn、no2、c
1-6
烷基、-or、-s(o)2r、-s(o)2n(r)2、c
2-6
烯基、c
3-6
碳环和杂环组成的组；
[1576]r11
选自由c
3-6
碳环和杂环组成的组，其中所述c
3-6
碳环和杂环各自任选地被一个或多个r
13
取代；
[1577]r12
选自由h、oh、c
1-3
烷基和c
2-3
烯基组成的组；
[1578]
每个r
13
独立地选自由oh、氧代基、卤基、c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
2-6
烯基、c
1-6
烷基氨基、二-(c
1-6
烷基)氨基、nh2、c(o)nh2、cn和no2组成的组；
[1579]
每个r
14
独立地选自由h、oh、c
1-6
烷基和c
2-3
烯基组成的组；
[1580]
每个r
14
'独立地选自由h、oh、c
1-6
烷基和c
2-3
烯基组成的组；
[1581]r15
独立地选自由h、oh、c
1-6
烷基和c
2-3
烯基组成的组；
[1582]
每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
1-3
烷基-芳基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1583]
每个r'独立地选自由c
1-18
烷基、c
2-18
烯基、-r*yr*”、-yr*”、(ch2)qor*和h组成的组；
[1584]
每个rm独立地选自由h、c
1-6
烷基和c
2-6
烯基组成的组；
[1585]
每个r*”选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1586]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1587]
每个r*独立地选自由c
1-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
[1588]
每个r**独立地选自由h、oh、c
1-12
烷基、c
2-12
烯基、(ch2)qor*和(ch2)qoh组成的组；
[1589]
每个y独立地是c
3-6
碳环；
[1590]
ya是c
3-6
碳环；
[1591]
每个x独立地选自由f、cl、br和i组成的组；
[1592]
每个q独立地选自由1、2和3组成的组；
[1593]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1594]
s选自由0、1、2、3、4、5和6组成的组；并且
[1595]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1596]
实施方案3.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r7是h。
[1597]
实施方案4.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中m是-c(o)o-或-oc(o)-。
[1598]
实施方案5.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中m'是-c(o)o-或-oc(o)-。
[1599]
实施方案6.一种式(a)化合物：
[1600]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1601]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1602]
r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
[1603]
其中r
aα
是h，并且r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组，其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
中的至少一者选自由c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
[1604]
r2和r3各自是c
1-14
烷基；
[1605]
r4选自由-(ch2)2oh、-(ch2)3oh、-(ch2)4oh、-(ch2)5oh和组成的组，其中r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1606]
每个r5独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1607]
每个r6独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1608]
r7是h；
[1609]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
[1610]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1611]
ya是c
3-6
碳环；
[1612]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1613]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1614]
s是2或3；并且
[1615]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1616]
实施方案7.一种式(b)化合物：
[1617]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1618]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1619]
r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
[1620]
其中r
aα
和r
aβ
各自是h，并且r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组，其中r
aγ
和r
aδ
中的至少一者选自由c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
[1621]rbα
、r
bβ
、r
bγ
和r
bδ
各自独立地选自由h、c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组，其中r
bα
、r
bβ
、r
bγ
和r
bδ
中的至少一者选自由c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组；
[1622]
r4选自由-(ch2)2oh、-(ch2)3oh、-(ch2)4oh、-(ch2)5oh和组成的组，其中r
10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1623]
每个r5独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1624]
每个r6独立地选自由oh、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1625]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
[1626]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1627]
ya是c
3-6
碳环；
[1628]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1629]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1630]
s是2或3；并且
[1631]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1632]
实施方案8.如前述实施方案中任一项所述的化合物，每个r5独立地选自由c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组。
[1633]
实施方案9.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中每个r6独立地选自由c
1-3
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；
[1634]
实施方案10.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r5和r6各自是h。
[1635]
实施方案11.一种式(1-1)化合物：
[1636]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1637]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1638]
r'
支链
是：并且r'
环状
是：并且
[1639]
r'b是：
[1640]
其中表示连接点；
[1641]
其中r
aγ
和r
bγ
各自独立地是c
2-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1642]
r2和r3各自独立地选自由c
1-14
烷基和c
2-14
烯基组成的组；
[1643]
r4是-(ch2)2oh，其中表示连接点；
[1644]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1645]
每个r'独立地是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1646]
ya是c
3-6
碳环；
[1647]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；并且
[1648]
s是2或3。
[1649]
实施方案12.一种式(2-1)化合物：
[1650]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1651]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1652]
r'
支链
是：并且r'
环状
是：并且
[1653]
r'b是：
[1654]
其中表示连接点；
[1655]
其中r
aγ
和r
bγ
各自独立地是c
2-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1656]
r2和r3各自独立地选自由c
1-14
烷基和c
2-14
烯基组成的组；
[1657]
r4是其中表示连接点；
[1658]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1659]
每个r'独立地是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1660]
ya是c
3-6
碳环；
[1661]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；并且
[1662]
s是2或3。
[1663]
实施方案13.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其具有以下结构：其中r
aγ
是c
2-6
烷基。
[1664]
实施方案14.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其具有以下结构：
烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1682]
r2和r3各自是c
1-14
烷基；
[1683]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1684]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1685]
r5和r6各自是h；
[1686]
r7是h；
[1687]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
[1688]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1689]
ya是c
3-6
碳环；
[1690]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1691]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1692]
s是2或3；并且
[1693]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1694]
实施方案26.一种式(a-2)化合物：
[1695]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1696]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1697]
r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
[1698]
其中r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1699]
r2和r3各自是c
1-14
烷基；
[1700]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1701]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1702]
r5和r6各自是h；
[1703]
r7是h；
[1704]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
[1705]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1706]
ya是c
3-6
碳环；
[1707]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1708]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1709]
s是2或3；并且
[1710]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1711]
实施方案27.一种式(a-3)化合物：
[1712]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1713]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1714]
r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
[1715]
其中r
aα
、r
aγ
和r
aβ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1716]
r2和r3各自是c
1-14
烷基；
[1717]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1718]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1719]
r5和r6各自是h；
[1720]
r7是h；
[1721]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
[1722]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1723]
ya是c
3-6
碳环；
[1724]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1725]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1726]
s是2或3；并且
[1727]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1728]
实施方案28.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r2和r3各自是c
1-14
烷基。
[1729]
实施方案29.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r2和r3各自是c8烷基。
[1730]
实施方案30.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r2和r3中的一者是c2烷基并且另一者是c8烷基。
[1731]
实施方案31.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其具有以下结构：
[1732][1733]
实施方案32.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其具有以下结构：
[1734][1735]
实施方案33.一种式(b-1)化合物：
[1736]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1737]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1738]
r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
[1739]
其中r
aα
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1740]rbα
、r
bγ
和r
bδ
各自独立地选自由h、c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组；并且r
bβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1741]
r4是其中
[1742]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1743]
r5和r6各自是h；
[1744]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
[1745]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1746]
ya是c
3-6
碳环；
[1747]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1748]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1749]
s是2或3；并且
[1750]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1751]
实施方案34.一种式(b-2)化合物：
[1752]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1753]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1754]
r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
[1755]
其中r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1756]rbα
、r
bβ
和r
bδ
各自独立地选自由h、c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组；并且r
bγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1757]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1758]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1759]
r5和r6各自是h；
[1760]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
[1761]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1762]
ya是c
3-6
碳环；
[1763]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1764]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1765]
s是2或3；并且
[1766]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1767]
实施方案35.一种式(b-3)化合物：
[1768]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1769]
其中r'a是r'
支链
或r'
环状
；其中
[1770]
r'
支链
是：r'
环状
是：其中表示连接点；
[1771]
其中r
aα
、r
aβ
和r
aγ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1772]rbα
、r
bβ
和r
bγ
各自独立地选自由h、c
2-30
烷基和c
5-20
烯基组成的组；并且r
bδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1773]
r4是-(ch2)2oh或
[1774]
其中表示连接点；
[1775]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1776]
r5和r6各自是h；
[1777]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；
[1778]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基；
[1779]
ya是c
3-6
碳环；
[1780]
r*”a
选自由c
1-15
烷基和c
2-15
烯基组成的组；
[1781]
l选自由1、2、3、4和5组成的组；
[1782]
s是2或3；并且
[1783]
m选自由5、6、7、8、9、10、11、12和13组成的组。
[1784]
实施方案36.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r'a是r'
环状
。
[1785]
实施方案37.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中s是2或3。
[1786]
实施方案38.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中ya是环己基。
[1787]
实施方案39.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中yar*”a
是
[1788]
实施方案40.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中ya是环戊基。
[1789]
实施方案41.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中yar*”a
是
[1790]
实施方案42.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r*”a
是c2烷基或c3烷基。
[1791]
实施方案43.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r'a是r'
支链
。
[1792]
实施方案44.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aα
、r
aβ
和r
aδ
各自是h；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基。
[1793]
实施方案45.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bα
、r
bγ
和r
bδ
各自是h，
并且r
bβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基。
[1794]
实施方案46.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bα
、r
bβ
和r
bδ
各自是h；r
bγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基。
[1795]
实施方案47.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bα
、r
bβ
和r
bγ
各自是h，并且r
bδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基。
[1796]
实施方案48.一种式(a-a)化合物：
[1797]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1798]
其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组，其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
中的至少一者选自由c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
[1799]
r4选自由-(ch2)2oh、-(ch2)3oh、-(ch2)4oh和-(ch2)5oh组成的组；
[1800]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；并且
[1801]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
[1802]
实施方案49.一种式(a-a1)化合物：
[1803]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1804]
其中r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1805]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1806]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1807]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；并且
[1808]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
[1809]
实施方案50.一种式(a-a2)化合物：
[1810]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1811]
其中r
aβ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1812]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1813]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1814]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；并且
[1815]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
[1816]
实施方案51.一种式(a-a3)化合物：
[1817]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1818]
其中r
aβ
和r
aγ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1819]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1820]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；
[1821]
m和m'各自独立地选自由-c(o)o-和-oc(o)-组成的组；并且
[1822]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
[1823]
实施方案52.一种式(a-b)化合物：
[1824]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1825]
其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组，其中r
aβ
、r
aγ
和r
aδ
中的至少一者选自由c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；
[1826]
r4选自由-(ch2)2oh、-(ch2)3oh、-(ch2)4oh和-(ch2)5oh组成的组；并且
[1827]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
[1828]
实施方案53.一种式(a-b1)化合物：
[1829]
或其n-氧化物，或其盐或异构
体，
[1830]
其中r
aγ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1831]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1832]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；并且
[1833]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
[1834]
实施方案54.一种式(a-b2)化合物：
[1835]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1836]
其中r
aβ
和r
aδ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1837]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1838]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；并且
[1839]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
[1840]
实施方案55.一种式(a-b3)化合物：
[1841]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1842]
其中r
aβ
和r
aγ
各自独立地选自由h、c
2-12
烷基和c
2-12
烯基组成的组；并且r
aδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1843]
r4是-(ch2)2oh或其中
[1844]r10
是n(r)2；每个r独立地选自由c
1-6
烷基、c
2-3
烯基和h组成的组；并且n2选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组；并且
[1845]
r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
[1846]
实施方案56.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aγ
和r
aδ
各自是h；并且r
aβ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基。
[1847]
实施方案57.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aβ
和r
aδ
各自是h；并且r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基。
[1848]
实施方案58.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aβ
和r
aγ
各自是h；并且r
aδ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基。
[1849]
实施方案59.一种式(a-c)化合物：
[1850]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1851]
其中r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；并且
[1852]
r4是-(ch2)2oh或并且r'是c
1-12
烷基。
[1853]
实施方案60.一种式(b-c)化合物：
[1854]
或其n-氧化物，或其盐或异构体，
[1855]
其中r
aγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；
[1856]rbγ
是c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基或c6烷基；并且
[1857]
r4是-(ch2)2oh或并且r'是c
1-12
烷基。
[1858]
实施方案61.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r4是-(ch2)2oh。
[1859]
实施方案62.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r4是-(ch2)3oh。
[1860]
实施方案63.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r4是-(ch2)4oh。
[1861]
实施方案64.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r4是
[1862]
实施方案65.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中n2是2。
[1863]
实施方案66.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
10
是-n(r)2。
[1864]
实施方案67.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
10
是-nhch3。
[1865]
实施方案68.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r4是
[1866]
实施方案69.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r4是
[1867]
实施方案70.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中m'和m各自是-c(o)o-。
[1868]
实施方案71.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中m'是-c(o)o-并且m是-oc(o)-。
[1869]
实施方案72.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中m'是-oc(o)-并且m是-c(o)o-。
[1870]
实施方案73.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中l是5。
[1871]
实施方案74.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中m是7。
[1872]
实施方案75.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r'是c
1-12
烷基或c
2-12
烯基。
[1873]
实施方案76.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r'是c2烷基。
[1874]
实施方案77.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r'是c3或c4烷基。
[1875]
实施方案78.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r'是c3烷基。
[1876]
实施方案79.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r'是c5烷基。
[1877]
实施方案80.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aγ
是c
2-6
烷基并且r'是c3烷基。
[1878]
实施方案81.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aγ
是c
2-6
烷基并且r'是c4烷基。
[1879]
实施方案82.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aβ
是h。
[1880]
实施方案83.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aβ
是c
2-c4烷基。
[1881]
实施方案84.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aβ
是正丙基或正丁基。
[1882]
实施方案85.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aβ
是异丙基、仲丁基或叔丁基。
[1883]
实施方案86.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aβ
是c5烷基或c6烷基。
[1884]
实施方案87.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aγ
是h。
[1885]
实施方案88.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aγ
是c2烷基、c3烷基或c4烷基。
[1886]
实施方案89.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aγ
是正丙基或正丁基。
[1887]
实施方案90.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aγ
是异丙基、仲丁基或叔丁基。
[1888]
实施方案91.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aγ
是c5烷基或c6烷基。
[1889]
实施方案92.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aδ
是h。
[1890]
实施方案93.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aδ
是c2烷基、c3烷基或c4烷基。
[1891]
实施方案94.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aδ
是正丙基或正丁基。
[1892]
实施方案95.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aδ
是异丙基、仲丁基或叔丁基。
[1893]
实施方案96.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
aδ
是c5烷基或c6烷基。
[1894]
实施方案97.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bβ
是h。
[1895]
实施方案98.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bβ
是c2烷基、c3烷基或c4烷基。
[1896]
实施方案99.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bβ
是正丙基或正丁基。
[1897]
实施方案100.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bβ
是异丙基、仲丁基或叔丁基。
[1898]
实施方案101.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bβ
是c5烷基或c6烷基。
[1899]
实施方案102.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bγ
是h。
[1900]
实施方案103.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bγ
是c2烷基、c3烷基或c4烷基。
[1901]
实施方案104.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bγ
是正丙基或正丁基。
[1902]
实施方案105.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bγ
是异丙基、仲丁基或叔丁基。
[1903]
实施方案106.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bγ
是c5烷基或c6烷基。
[1904]
实施方案107.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bδ
是h。
[1905]
实施方案108.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bδ
是c2烷基、c3烷基或c4烷基。
[1906]
实施方案109.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bδ
是正丙基或正丁基。
[1907]
实施方案110.如前述实施方案中任一项所述的化合物，其中r
bδ
是异丙基、仲丁基或叔丁基。
[1908]
实施方案111.一种化合物，所述化合物选自：
[1909]
[1910]
[1911]
[1912][1913]
实施方案112.一种化合物，所述化合物选自：
[1914][1915]
实施方案113.一种化合物，所述化合物选自：
[1916]
[1917]
[1918][1919]
实施方案114.一种空脂质纳米粒子(空lnp)，所述空脂质纳米粒子(空lnp)包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质。
[1920]
实施方案115.一种负载脂质纳米粒子(负载lnp)，所述负载脂质纳米粒子(负载lnp)包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质、peg脂质和一种或多种治疗剂和/或预防剂。
[1921]
实施方案116.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，所述空lnp或负载lnp包含约40％至约60％的量的所述化合物。
[1922]
实施方案117.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，所述空lnp或负载lnp包含约0％至约20％的量的所述磷脂。
[1923]
实施方案118.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，所述空lnp或负载lnp包含约30％至约50％的量的所述结构脂质。
甘油-磷酸胆碱(dmpc)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dopc)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dppc)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dspc)、1,2-二(十一烷酰基)-sn-甘油-磷酸胆碱(dupc)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(popc)、1,2-二-o-十八烯基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(18:0diether pc)、1-油酰基-2-胆固醇基半琥珀酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(ochemspc)、1-十六烷基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(c16 lyso pc)、1,2-二亚麻酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二花生四烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二(二十二碳六烯酰基)-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dope)、1,2-二植烷酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(me 16.0pe)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二亚麻酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二花生四烯酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二(二十二碳六烯酰基)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)钠盐(dopg)、鞘磷脂和它们的混合物。
[1942]
实施方案137.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述磷脂是1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dspc)。
[1943]
实施方案138.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述结构脂质选自由胆固醇、粪固醇、植固醇、麦角固醇、菜油固醇、豆固醇、菜子固醇、西红柿碱、熊果酸、α-生育酚和它们的混合物组成的组。
[1944]
实施方案139.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述结构脂质是或其盐。
[1945]
实施方案140.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述结构脂质是胆固醇：或其盐。
[1946]
实施方案141.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质选自由经peg修饰的磷脂酰乙醇胺、经peg修饰的磷脂酸、经peg修饰的神经酰胺、经peg修饰的二烷基胺、经peg修饰的二酰基甘油和经peg修饰的二烷基甘油以及它们的混合物组成的组。
[1947]
实施方案142.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质选自由1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油甲氧基聚乙二醇(peg-dmg)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-[氨基(聚乙二醇)](peg-dspe)、peg-二硬脂基甘油(peg-dsg)、peg-二棕榈油烯基、peg-二油烯基、peg-二硬脂基、peg-二酰基甘酰胺(peg-dag)、peg-二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(peg-dppe)或peg-1,2-二肉豆蔻基氧基丙基-3-胺(peg-c-dma)组成的组。
[1948]
实施方案143.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质是peg-dmg。
[1949]
实施方案144.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质是式(pl-i)化合物：
[1950][1951]
或其盐，其中：
[1952]r3pl1
是-or
opl1
；
[1953]ropl1
是氢、任选被取代的烷基或氧保护基团；
[1954]rpl1
是1与100之间的整数(包括端点)；
[1955]
l1是任选被取代的c
1-10
亚烷基，其中所述任选被取代的c
1-10
亚烷基的至少一个亚甲基独立地被任选被取代的亚碳环基、任选被取代的亚杂环基、任选被取代的亚芳基、任选被取代的亚杂芳基、o、n(r
npl1
)、s、c(o)、c(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)、-c(o)o、oc(o)、oc(o)o、oc(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)o或nr
npl1
c(o)n(r
npl1
)代替；
[1956]
d是通过点击化学获得的部分或在生理条件下可裂解的部分；
[1957]mpl1
是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；
[1958]
a具有下式：
[1959]
l2的每种情况独立地是键或任选被取代的c
1-6
亚烷基，其中所述任选被取代的c
1-6
亚烷基的一个亚甲基单元任选地被o、n(r
npl1
)、s、c(o)、c(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)、c(o)o、oc(o)、oc(o)o、-oc(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)o或nr
npl1
c(o)n(r
npl1
)代替；
[1960]r2sl
的每种情况独立地是任选被取代的c
1-30
烷基、任选被取代的c
1-30
烯基或任选被取代的c
1-30
炔基；任选地其中r
2sl
的一个或多个亚甲基单元独立地被任选被取代的亚碳环基、任选被取代的亚杂环基、任选被取代的亚芳基、任选被取代的亚杂芳基、n(r
npl1
)、o、s、c(o)、c(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)、-nr
npl1
c(o)n(r
npl1
)、c(o)o、oc(o)、oc(o)o、oc(o)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(o)o、c(o)s、-sc(o)、c(＝nr
npl1
)、c(＝nr
npl1
)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(＝nr
npl1
)、-nr
npl1
c(＝nr
npl1
)n(r
npl1
)、c(s)、c(s)n(r
npl1
)、nr
npl1
c(s)、nr
npl1
c(s)n(r
npl1
)、s(o)、os(o)、s(o)o、os(o)o、os(o)2、s(o)2o、os(o)2o、n(r
npl1
)s(o)、s(o)n(r
npl1
)、-n(r
npl1
)s(o)n(r
npl1
)、os(o)n(r
npl1
)、n(r
npl1
)s(o)o、s(o)2、n(r
npl1
)s(o)2、-s(o)2n(r
npl1
)、n(r
npl1
)s(o)2n(r
npl1
)、os(o)2n(r
npl1
)或n(r
npl1
)s(o)2o代替；
[1961]rnpl1
的每种情况独立地是氢、任选被取代的烷基或氮保护基团；
[1962]
环b是任选被取代的碳环基、任选被取代的杂环基、任选被取代的芳基或任选被取代的杂芳基；并且
[1963]
p
sl
是1或2。
[1964]
实施方案145.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质是式(pl-i-oh)化合物：或其盐。
[1965]
实施方案146.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质是式(pl-ii-oh)化合物：
[1966]
或其盐或异构体，其中：
[1967]r3peg
是-oro；
[1968]ro
是氢、c
1-6
烷基或氧保护基团；
[1969]rpeg
是1与100之间的整数；
[1970]r5peg
是c
10-40
烷基、c
10-40
烯基或c
10-40
炔基；并且任选地r
5peg
的一个或多个亚甲基基团独立地被c
3-10
亚碳环基、4至10元亚杂环基、c
6-10
亚芳基、4至10元亚杂芳基、-n(r
npeg
)-、-o-、-s-、-c(o)-、-c(o)n(r
npeg
)-、-nr
npeg
c(o)-、-nr
npeg
c(o)n(r
npeg
)-、-c(o)o-、-oc(o)-、-oc(o)o-、-oc(o)n(r
npeg
)-、-nr
npeg
c(o)o-、-c(o)s-、-sc(o)-、-c(＝nr
npeg
)-、-c(＝nr
npeg
)n(r
npeg
)-、-nr
npeg
c(＝nr
npeg
)-、-nr
npeg
c(＝nr
npeg
)n(r
npeg
)-、-c(s)-、-c(s)n(r
npeg
)-、-nr
npeg
c(s)-、-nr
npeg
c(s)n(r
npeg
)-、-s(o)-、-os(o)-、-s(o)o-、-os(o)o-、-os(o)
2-、-s(o)2o-、-os(o)2o-、-n(r
npeg
)s(o)-、-s(o)n(r
npeg
)-、-n(r
npeg
)s(o)n(r
npeg
)-、-os(o)n(r
npeg
)-、-n(r
npeg
)s(o)o-、-s(o)
2-、-n(r
npeg
)s(o)
2-、-s(o)2n(r
npeg
)-、-n(r
npeg
)s(o)2n(r
npeg
)-、-os(o)2n(r
npeg
)-或-n(r
npeg
)s(o)2o-代替；并且
[1971]rnpeg
的每种情况独立地是氢、c
1-6
烷基或氮保护基团。
[1972]
实施方案147.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中在式(pl-ii-oh)的peg脂质中，r是40与50之间的整数。
[1973]
实施方案148.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中在式(pl-ii-oh)的peg脂质中，r是45。
[1974]
实施方案149.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中在式(pl-ii-oh)的peg脂质中，r5是c
17
烷基。
[1975]
实施方案150.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质是式(pl-ii)化合物：其中r
peg
是1与100之间的整数。
[1976]
实施方案151.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质是式(peg-1)化合物：
[1977]
实施方案152.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质是式(pl-iii)化合物：或其盐或异
构体，其中s
pl1
是1与100之间的整数。
[1978]
实施方案153.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，其中所述peg脂质是下式化合物：
[1979]
实施方案154.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质的空脂质纳米粒子(空lnp)，其中所述磷脂是dspc并且所述结构脂质是胆固醇。
[1980]
实施方案155.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质的空脂质纳米粒子(空lnp)，其中所述结构脂质是胆固醇并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[1981]
实施方案156.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质的空脂质纳米粒子(空lnp)，其中所述结构脂质是胆固醇并且所述peg脂质是peg-1。
[1982]
实施方案157.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质的空脂质纳米粒子(空lnp)，其中所述磷脂是dspc并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[1983]
实施方案158.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质的空脂质纳米粒子(空lnp)，其中所述磷脂是dspc并且所述peg脂质是peg-1。
[1984]
实施方案159.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质的空脂质纳米粒子(空lnp)，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[1985]
实施方案160.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质的空脂质纳米粒子(空lnp)，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg-1。
[1986]
实施方案161.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质以及一种或多种治疗剂和/或预防剂的负载脂质纳米粒子(负载lnp)，其中所述磷脂是dspc并且所述结构脂质是胆固醇。
[1987]
实施方案162.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质以及一种或多种治疗剂和/或预防剂的负载脂质纳米粒子(负载lnp)，其中所述结构脂质是胆固醇并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[1988]
实施方案163.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质以及一种或多种治疗剂和/或预防剂的负载脂质纳米粒子(负载lnp)，其中所述结构脂质是胆固醇并且所述peg脂质是peg-1。
[1989]
实施方案164.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质以及一种或多种治疗剂和/或预防剂的负载脂质纳米粒子(负载lnp)，其中所述磷脂是dspc并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[1990]
实施方案165.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质以及一种或多种治疗剂和/或预防剂的负载脂质纳米粒子(负载lnp)，其中所述磷脂是dspc并且所述peg脂质是peg-1。
[1991]
实施方案166.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质以及一种或多种治疗剂和/或预防剂的负载脂质纳米粒子(负载lnp)，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg
2k-dmg。
[1992]
实施方案167.一种包含前述实施方案中任一项所述的化合物、磷脂、结构脂质和peg脂质以及一种或多种治疗剂和/或预防剂的负载脂质纳米粒子(负载lnp)，其中所述磷脂是dspc，所述结构脂质是胆固醇，并且所述peg脂质是peg-1。
[1993]
实施方案168.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，所述空lnp或负载lnp包含约0％至约20％的量的dspc。
[1994]
实施方案169.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，所述空lnp或负载lnp包含约30％至约50％的量的胆固醇。
[1995]
实施方案170.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，所述空lnp或负载lnp包含约0％至约5％的量的peg
2k-dmg。
[1996]
实施方案171.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，所述空lnp或负载lnp包含约0％至约5％的量的peg-1。
[1997]
实施方案172.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，所述空lnp或负载lnp包含约40mol％至约60mol％的前述实施方案中任一项所述的化合物、约0mol％至约20mol％dspc、约30mol％至约50mol％胆固醇和约0mol％至约5mol％peg
2k-dmg。
[1998]
实施方案173.如前述实施方案中任一项所述的空lnp或负载lnp，所述空lnp或负载lnp包含约40mol％至约60mol％的前述实施方案中任一项所述的化合物、约0mol％至约20mol％dspc、约30mol％至约50mol％胆固醇和约0mol％至约5mol％peg-1。
[1999]
实施方案174.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp，其中所述治疗剂和/或预防剂的囊封效率在80％与100％之间。
[2000]
实施方案175.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp，其中所述脂质组分与所述mrna的wt/wt比率为约10:1至约60:1。
[2001]
实施方案176.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp，其中所述脂质组分与所述mrna的wt/wt比率为约20:1。
[2002]
实施方案177.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp，其中n:p比率为约5:1至约8:1。
[2003]
实施方案178.一种药物组合物，所述药物组合物包含前述实施方案中任一项所述的负载lnp和药学上可接受的载剂。
[2004]
实施方案179.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含冷冻保护剂、缓冲液或它们的组合。
[2005]
实施方案180.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，其中所述冷冻保护剂包含蔗糖。
[2006]
实施方案181.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，其中所述冷冻保护剂包含乙酸钠。
[2007]
实施方案182.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，其中所述冷冻保护剂包含蔗糖和乙酸钠。
[2008]
实施方案183.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，其中所述缓冲液选自
由乙酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液和tris缓冲液组成的组。
[2009]
实施方案184.一种向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防剂的方法，所述方法包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的负载lnp。
[2010]
实施方案185.一种向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防剂的方法，所述方法包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的负载lnp。
[2011]
实施方案186.一种用于向受试者的靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂的方法，所述方法包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的负载lnp。
[2012]
实施方案187.一种在受试者内的细胞中产生目标多肽的方法，所述方法包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的负载lnp。
[2013]
实施方案188.一种治疗有需要的受试者的疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的前述实施方案中任一项所述的负载lnp。
[2014]
实施方案189.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp用于制造用于向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防剂的药物的用途。
[2015]
实施方案190.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp用于制造用于向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防剂的药物的用途。
[2016]
实施方案191.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp用于制造用于向受试者的靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂的药物的用途。
[2017]
实施方案192.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp用于制造用于在受试者内的细胞中产生目标多肽的药物的用途。
[2018]
实施方案193.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp用于制造用于治疗有需要的受试者的疾病或病症的药物的用途。
[2019]
实施方案194.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp，其用于向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防剂，其中所述递送包括向所述受试者施用治疗有效量的所述负载lnp。
[2020]
实施方案195.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp，其用于向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防剂，其中所述递送包括向所述受试者施用治疗有效量的所述负载lnp。
[2021]
实施方案196.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp，其用于向受试者的靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂，其中所述用途包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的负载lnp。
[2022]
实施方案197.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp，其用于在受试者内的细胞中产生目标多肽，所述用途包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的负载lnp。
[2023]
实施方案198.如前述实施方案中任一项所述的负载lnp，其用于治疗有需要的受试者的疾病或病症，其中所述治疗包括向受试者施用治疗有效量的所述负载lnp。
[2024]
实施方案199.一种向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防剂的方法，所述方法包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的药物组合物。
[2025]
实施方案200.一种向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防剂的方法，所述方法包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的药物组合物。
[2026]
实施方案201.一种用于向受试者的靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂的方法，所述方法包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的药物组合物。
[2027]
实施方案202.一种在受试者内的细胞中产生目标多肽的方法，所述方法包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的负载lnp。
[2028]
实施方案203.一种治疗有需要的受试者的疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的前述实施方案中任一项所述的药物组合物。
[2029]
实施方案204.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物用于制造用于向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防剂的药物的用途。
[2030]
实施方案205.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物用于制造用于向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防剂的药物的用途。
[2031]
实施方案206.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物用于制造用于向受试者的靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂的药物的用途，所述方法包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的药物组合物。
[2032]
实施方案207.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物用于制造用于在受试者内的细胞中产生目标多肽的药物的用途。
[2033]
实施方案208.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物用于制造用于治疗有需要的受试者的疾病或病症的药物的用途。
[2034]
实施方案209.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物用于向受试者内的细胞递送治疗剂和/或预防剂，其中所述递送包括向所述受试者施用治疗有效量的所述药物组合物。
[2035]
实施方案210.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物用于向受试者的器官特异性地递送治疗剂和/或预防剂，其中所述递送包括向所述受试者施用治疗有效量的所述药物组合物。
[2036]
实施方案211.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物用于向受试者的靶组织增强递送治疗剂和/或预防剂，其中所述用途包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的药物组合物。
[2037]
实施方案212.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物用于在受试者内的细胞中产生目标多肽，所述用途包括向所述受试者施用前述实施方案中任一项所述的药物组合物。
[2038]
实施方案213.如前述实施方案中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物用于治疗有需要的受试者的疾病或病症，其中所述治疗包括向受试者施用治疗有效量的所述药物组合物。
[2039]
实施方案214.如前述实施方案中任一项所述的方法、用途或使用的负载lnp或药物组合物，其中所述器官选自由肝脏、肾脏、肺和脾脏组成的组。
[2040]
实施方案215.如前述实施方案中任一项所述的方法、用途或使用的负载lnp或药物组合物，其中所述靶组织选自由肝脏、肾脏、肺和脾脏组成的组。
[2041]
实施方案216.如前述实施方案中任一项所述的方法或使用的负载lnp或药物组合物，其中所述施用是经肠胃外进行。
[2042]
实施方案217.所述方法或使用的负载lnp或药物组合物，其中所述施用是经肌肉
内、皮内、皮下和/或静脉内进行。
[2043]
实施方案218.如前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述药物是用于肠胃外施用。
[2044]
实施方案219.如前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述药物是用于肌肉内、皮内、皮下和/或静脉内施用。
[2045]
实施方案220.如前述实施方案中任一项所述的方法、用途或使用的负载lnp或药物组合物，其中所述受试者是人类。
[2046]
等同物
[2047]
应理解，虽然本公开已结合其具体实施方式加以描述，但前述描述旨在说明而非限制本公开的范围，所述范围由所附权利要求的范围限定。其他方面、优点和改变在所附权利要求的范围内。