一种高稳定性的失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型及其制备方法与流程

1.本发明属于药物化学领域，具体涉及一种高稳定性的失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型及其制备方法。


背景技术：

2.脂肪肝是一种常见肝病变，它是指各种原因引起的肝细胞内脂肪堆积，当脂肪含量超过肝重量(湿重)的5％，或在组织学上超过肝实质30％时，称为脂肪肝。脂肪肝又可细分为酒精性脂肪肝或非酒精性脂肪肝。后者又包含如肥胖型脂肪肝、营养失调性脂肪肝、药物性脂肪肝、妊娠急性脂肪肝、糖尿病性脂肪肝等等。从进程上可以将脂肪肝分为3期，第i期为单纯性脂肪肝，第ii期为脂肪性肝炎，约有10％转化为iii期，第iii期则为脂肪性肝纤维化和肝硬化。脂肪肝在我国是仅次于肝炎的第二大肝病，并且发病率还在稳步提高；在欧美脂肪肝病人多于肝炎病人，也是十大常见死因之一。总之脂肪肝已经成为威胁人类生命健康的严重问题，但是防治脂肪肝的药物还不能满足临床的需求。
3.胆酸类衍生物被报道在治疗脂肪肝中具有一定的效果。失碳熊去氧胆酸(norursodeoxycholic acid，简写norudca)被报道具有防治非酒精性脂肪肝的效果(journal of hepatology,2010,52:s304)，在胆淤型肝硬化中具有较好治疗效果(journal of hepatology,2017,67:549)，还在硫代乙酰胺诱导的肝纤维化模型中表现出具有较好的保护作用。htd1801是一种针对酒精性脂肪肝和原发性硬化性胆管炎的候选药物分子，其结构如下所示，该化合物由熊去氧胆酸与小檗碱复合而成。但是，这些化合物对脂肪肝的治疗效果还有待进一步提高。
[0004][0005]
本发明的发明人在之前的研究中发现(参见申请号为cn2021110940333的中国专利申请)，由失碳熊去氧胆酸和小檗碱盐复合得到的失碳熊去氧胆酸小檗碱盐不仅可以显著降低alt、ast、alp，而且针对肝脏病理损伤(例如肝细胞脂肪变性)具有明显的改善作用。失碳熊去氧胆酸小檗碱盐对脂肪肝、肝纤维化和肝硬化的治疗效果优于失碳熊去氧胆酸与盐酸小檗碱的治疗效果之和；失碳熊去氧胆酸小檗碱盐对脂肪肝、肝纤维化和肝硬化的治疗效果显著优于htd1801。
[0006]
固体化学药物是临床应用的重要药物形式，其质量水平是药物质量监管的主要内容。高质量水平的固体化学药物的基本要求是具有良好的稳定性。因此，在研究固体化学药物的多晶型时，晶型的稳定性是研究的重要内容之一。考察各种晶型固体物质的稳定性不
仅需要观察原料药存放期间的稳定性，而且还要观察在温度、湿度、光线、压力等条件下的晶型稳定性。应选择晶型稳定性好的固体物质状态作为新药开发原料，以保证药品在制备、运输、贮藏及保存过程中不会发生转晶现象而影响到药品质量。
[0007]
因此，开发出失碳熊去氧胆酸小檗碱盐固体药物的高稳定性的晶型具有重要意义。


技术实现要素：

[0008]
本发明的目的是为了提供一种高稳定性的失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型及其制备方法。
[0009]
本发明提供了一种失碳熊去氧胆酸小檗碱盐的晶型，它的结构式如下：
[0010][0011]
它的粉末x射线衍射图谱中，2θ衍射角度在3.54
±
0.2
°
，7.13
±
0.2
°
，13.14
±
0.2
°
，15.95
±
0.2
°
，16.40
±
0.2
°
，18.64
±
0.2
°
，24.90
±
0.2
°
，25.76
±
0.2
°
，26.30
±
0.2
°
处有特征峰。
[0012]
进一步地，它的粉末x射线衍射图谱中，2θ衍射角度在3.54
±
0.2
°
，7.13
±
0.2
°
，7.78
±
0.2
°
，8.38
±
0.2
°
，12.45
±
0.2
°
，13.14
±
0.2
°
，14.30
±
0.2
°
，14.66
±
0.2
°
，15.22
±
0.2
°
，15.95
±
0.2
°
，16.40
±
0.2
°
，16.80
±
0.2
°
，17.70
±
0.2
°
，18.64
±
0.2
°
，19.74
±
0.2
°
，21.25
±
0.2
°
，21.96
±
0.2
°
，24.90
±
0.2
°
，25.76
±
0.2
°
，26.30
±
0.2
°
，28.00
±
0.2
°
处有特征峰。
[0013]
进一步地，它的粉末x射线衍射图谱中，2θ衍射角度在3.54
±
0.2
°
，7.13
±
0.2
°
，7.78
±
0.2
°
，8.38
±
0.2
°
，10.45
±
0.2
°
，10.72
±
0.2
°
，11.72
±
0.2
°
，12.45
±
0.2
°
，13.14
±
0.2
°
，13.47
±
0.2
°
，14.30
±
0.2
°
，14.66
±
0.2
°
，15.22
±
0.2
°
，15.95
±
0.2
°
，16.40
±
0.2
°
，16.80
±
0.2
°
，17.30
±
0.2
°
，17.70
±
0.2
°
，18.64
±
0.2
°
，18.94
±
0.2
°
，19.74
±
0.2
°
，20.26
±
0.2
°
，20.55
±
0.2
°
，21.25
±
0.2
°
，21.96
±
0.2
°
，22.81
±
0.2
°
，23.62
±
0.2
°
，24.90
±
0.2
°
，25.76
±
0.2
°
，26.30
±
0.2
°
，27.20
±
0.2
°
，28.00
±
0.2
°
，28.75
±
0.2
°
，29.56
±
0.2
°
，30.67
±
0.2
°
，31.53
±
0.2
°
，32.34
±
0.2
°
，32.90
±
0.2
°
，34.04
±
0.2
°
处有特征峰。
[0014]
进一步地，它的粉末x射线衍射图谱中，2θ衍射角度特征峰的相对强度值为：
[0015][0016]
[0017]
进一步地，它的粉末x射线衍射图谱如图1所示。
[0018]
进一步地，它的不对称单元结构中包含两个失碳熊去氧胆酸阴离子、两个小檗碱阳离子和九个水分子。
[0019]
本发明还提供了一种制备上述失碳熊去氧胆酸小檗碱盐的晶型的方法，所述方法为方法一：将失碳熊去氧胆酸小檗碱盐加入正溶剂中溶解，然后于反溶剂气体环境中静置，即得；所述正溶剂、反溶剂中至少一个含有水；失碳熊去氧胆酸小檗碱盐的结构如式i-1所示：
[0020][0021]
或者，所述方法为方法二：取盐酸小檗碱或其水合物溶于50～100℃的热水中，得盐酸小檗碱的水溶液；取失碳熊去氧胆酸溶于碱性水溶液中，然后加入盐酸小檗碱的水溶液中，降至室温，即得。
[0022]
进一步地，方法一中：所述正溶剂为极性有机溶剂或极性有机溶剂与水的混合物，极性有机溶剂为乙腈、二甲基亚砜、n-甲基吡咯烷酮、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、三氟乙醇中的一种或两种以上的混合；所述反溶剂为三氯甲烷、四氢呋喃、正戊烷、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、甲基叔丁基醚、丙酮、水中的一种或两种以上的混合；
[0023]
或者，方法二中，所述热水的温度为70～90℃；所述盐酸小檗碱或其水合物与失碳熊去氧胆酸的摩尔比为1：(0.5～2)；所述碱性水溶液为碱的水溶液，所述碱为氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠中的一种或两种以上的混合。
[0024]
进一步地，方法一中，所述正溶剂为正丙醇，所述反溶剂为水；或者，方法二中，所述热水的温度为80℃；所述盐酸小檗碱或其水合物与失碳熊去氧胆酸的摩尔比为1：1；所述碱为氢氧化钠。
[0025]
进一步地，方法一中，所述静置的温度为室温，时间为3天；所述失碳熊去氧胆酸小檗碱盐与正溶剂的质量体积比为40mg/ml。
[0026]
进一步地，方法二中，盐酸小檗碱或其水合物与热水的质量体积比为1:(80-120)g/ml，失碳熊去氧胆酸与碱性水溶液的质量体积比为1:(10-30)g/ml，热水与碱性水溶液的体积比为(4-6):1；优选地，盐酸小檗碱或其水合物与热水的质量体积比为1:100g/ml，失碳熊去氧胆酸与碱性水溶液的质量体积比为1:20g/ml，热水与碱性水溶液的体积比为5:1。
[0027]
本发明还提供一种预防和/或治疗肝病的药物，它是以上述的晶型为活性成分，加上药学上可接受的辅料制得的制剂。
[0028]
进一步地，所述制剂为固体制剂，优选为片剂、胶囊剂、丸剂、微丸或颗粒剂。
[0029]
本发明还提供了上述的晶型在制备预防和/或治疗肝病的药物中的用途。
[0030]
本发明中，室温指25
±
5℃。
[0031]
本发明开发了一种失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a，该晶型a的不对称单元由2个失碳熊去氧胆酸的阴离子(-1价态)，2个小檗碱阳离子( 1价)以及9个结晶水分子所组成。与失碳熊去氧胆酸小檗碱盐的其它晶型相比，该晶型a具有更加优异的物理稳定性、化学稳定性、研磨稳定性和压力稳定性，在制备高质量水平的固体化学药物中具有良好的应用前景。
[0032]
本发明失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a的制备方法简单，原料易得，适合扩大生产。
[0033]
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0034]
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
[0035]
图1为失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a的xrpd图谱。
[0036]
图2为晶型a的tga/dsc结果。
[0037]
图3为晶型a的1h nmr图谱。
[0038]
图4为实施例1所得晶型a与实施例2所得晶型a的xrpd比较图谱。
[0039]
图5为失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型b的xrpd图谱。
[0040]
图6为晶型b的tga/dsc结果。
[0041]
图7为晶型b的1h nmr图谱。
[0042]
图8为失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型c的xrpd图谱。
[0043]
图9为晶型c的tga/dsc结果。
[0044]
图10为晶型c的1h nmr图谱。
[0045]
图11为失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型d的xrpd图谱。
[0046]
图12为晶型d的tga/dsc结果。
[0047]
图13为晶型d的1h nmr图谱。
[0048]
图14为失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型f的xrpd图谱。
[0049]
图15为晶型f的tga/dsc结果。
[0050]
图16为晶型f的1h nmr图谱。
[0051]
图17为失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型g与晶型a的xrpd比较图谱。
[0052]
图18为失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型h的xrpd图谱。
[0053]
图19为培养所得单晶的xrpd图谱。
[0054]
图20为晶型a单晶的不对称单元结构。
[0055]
图21为晶型a单晶的分子堆积结构示意图。
[0056]
图22为晶型a、c、d混悬竞争xrpd叠图。
[0057]
图23为晶型a动态水分吸附(dvs)图。
[0058]
图24为晶型a经过dvs测试前后xrpd叠图。
[0059]
图25为晶型a样品稳定性测试前后xrpd叠图。
[0060]
图26为晶型d样品稳定性测试前后xrpd叠图。
[0061]
图27为晶型a研磨稳定性测试前后xrpd叠图。
[0062]
图28为晶型d研磨稳定性测试前后xrpd叠图。
[0063]
图29为晶型a压力稳定性测试前后xrpd叠图。
[0064]
图30为晶型d压力稳定性测试前后xrpd叠图。
具体实施方式
[0065]
本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
[0066]
实施例1、失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a的制备
[0067]
1、制备失碳熊去氧胆酸小檗碱盐起始样品
[0068]
按照申请号为cn2021110940333的中国专利申请实施例1记载的方法制备失碳熊去氧胆酸小檗碱盐起始样品，具体操作如下：
[0069]
0.79克盐酸小檗碱(2.12mmol)溶于4毫升甲醇中，加入硫酸钠干燥60分钟，过滤，再加入硫酸钠备用。另取0.80克norudca(s-1，2.11mmol)溶于4毫升乙醇中，加入0.15克乙醇钠(2.20mmol)，室温下搅拌10分钟后，浓缩至干。所得固体用4毫升甲醇溶解，将溶液滴入盐酸小檗碱的甲醇溶液中，室温下搅拌1小时，过滤，滤液浓缩至干，所得粗品用乙酸乙酯分散结晶，烘干得化合物i-1(即失碳熊去氧胆酸小檗碱盐起始样品)共计1.18克，收率78.1％。
[0070]1hnmr(dmso-d6，400mhz)：δppm：9.88(s，1h)，8.92(s，1h)，8.20(d，j＝9.1hz，1h)，8.00(d，j＝9.1hz，1h)，7.79(s，1h)，7.08(s，1h)，4.96-4.88(m，2h)，4.09(s，3h)，4.06(s，3h)，3.79(s，1h)，3.33-3.23(m，2h)，3.23-3.16(m，2h)，2.09-2.00(m，1h)，1.96-1.88(m，1h)，1.84-1.54(m，6h)，1.58-1.25(m，9h)，1.25-0.91(m，7h)，0.91-0.88(m，3h)，0.88-0.82(m，6h)，0.61(s，3h)。
[0071]
2、制备失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a
[0072]
取20mg失碳熊去氧胆酸小檗碱盐起始样品于洁净4ml玻璃瓶中，加入0.5ml正丙醇作为正溶剂溶解样品，将上述4ml玻璃瓶敞口置于装有3ml水作为反溶剂的20ml玻璃瓶中，并将20ml玻璃瓶加盖密封，室温下放置3天，得到失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a。
[0073]
以下为对晶型a的表征：
[0074]
晶型a的粉末x射线衍射(xrpd)图谱如图1所示。图1中，晶型a在以下2θ衍射角度处有特征峰：3.54
°
，7.13
°
，7.78
°
，8.38
°
，10.45
°
，10.72
°
，11.72
°
，12.45
°
，13.14
°
，13.47
°
，14.30
°
，14.66
°
，15.22
°
，15.95
°
，16.40
°
，16.80
°
，17.30
°
，17.70
°
，18.64
°
，18.94
°
，19.74
°
，
20.26
°
，20.55
°
，21.25
°
，21.96
°
，22.81
°
，23.62
°
，24.90
°
，25.76
°
，26.30
°
，27.20
°
，28.00
°
，28.75
°
，29.56
°
，30.67
°
，31.53
°
，32.34
°
，32.90
°
，34.04
°
。
[0075]
晶型a的xrpd图谱中，2θ衍射角度特征峰的相对强度值为：
[0076]
[0077][0078]
晶型a的tga/dsc结果如图2所示，1h nmr图谱如图3所示。tga结果显示晶型a在100℃之前有9.74％的失重，且1h nmr图谱观察到水峰，说明晶型a为水合物晶型；dsc结果显示晶型a在120.0℃和127.9℃有两个吸热峰(峰值温度)。
[0079]
实施例2、失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a的制备
[0080]
取3.00g市售盐酸小檗碱水合物(标示分子量为371.81，8.07mmol，)与300ml水混合，加热至80℃溶解，得盐酸小檗碱的水溶液。另取0.3g氢氧化钠溶于60ml水中，取3.05g失碳熊去氧胆酸(8.06mmol)溶于氢氧化钠水溶液中，再缓慢加入到盐酸小檗碱的水溶液中，保持80℃搅拌30分钟，后降至室温，过滤烘干得黄色固体：失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a。
[0081]
实施例2和实施例1所得晶型的xrpd图谱比较如图4所示，可以看出，两个晶型样品2θ衍射角度特征峰位置及强度相同，说明实施例2所得晶型也是晶型a。
[0082]
以下为对照晶型的制备方法。
[0083]
对照例1、失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型b的制备
[0084]
取150mg实施例2所得晶型a，与2ml乙醇/正庚烷(体积比为1:5)溶液相混合，50℃
下搅拌3天，得到晶型b。
[0085]
晶型b的xrpd图谱如图5所示。晶型b在以下2θ衍射角度处有特征峰：3.68
°
，7.28
°
，7.81
°
，8.44
°
，9.36
°
，10.52
°
，10.92
°
，12.36
°
，13.31
°
，14.52
°
，15.31
°
，16.15
°
，16.85
°
，17.73
°
，18.75
°
，21.13
°
，22.42
°
，25.80
°
。
[0086]
晶型b的tga/dsc结果如图6所示，1h nmr结果如图7所示。tga结果显示晶型b在150℃之前有9.32％的失重，1h nmr结果表明残留溶剂为乙醇，对应失重6.4％。dsc结果显示晶型b在98.1、116.3和163.4℃有三个吸热峰(峰值温度)。
[0087]
对照例2、失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型c的制备
[0088]
取150mg实施例2所得晶型a，与2ml正丙醇/异丙苯(体积比为1:4)溶液相混合，室温下搅拌3天，得到晶型c。
[0089]
晶型c的xrpd图谱如图8所示。晶型c在以下2θ衍射角度处有特征峰：3.64
°
，7.19
°
，7.86
°
，8.44
°
，10.78
°
，11.73
°
，12.58
°
，13.22
°
，13.54
°
，14.40
°
，14.82
°
，15.32
°
，16.08
°
，16.54
°
，16.92
°
，17.72
°
，18.73
°
，19.85
°
，25.05
°
，25.94
°
，26.56
°
。
[0090]
晶型c的tga/dsc结果如图9所示，1h nmr结果如图10所示。tga结果显示晶型c在150℃之前有14.4％的失重，1h nmr结果表明残留溶剂为正丙醇，对应失重6.9％。dsc结果显示晶型c在49.5、83.1和89.9℃有三个吸热峰(峰值温度)，在109.3、155.6、162.1℃有三个放热峰(峰值温度)。
[0091]
对照例3、失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型d的制备
[0092]
取150mg实施例2所得晶型a，与2ml乙腈溶液相混合，50℃下搅拌3天，得到晶型d。
[0093]
晶型d的xrpd图谱如图11所示。晶型d在以下2θ衍射角度处有特征峰：4.55
°
，6.57
°
，9.20
°
，12.56
°
，13.11
°
，13.89
°
，15.11
°
，15.36
°
，16.53
°
，16.87
°
，17.95
°
，24.82
°
，25.64
°
。
[0094]
晶型d的tga/dsc结果如图12所示，1h nmr结果如图13所示。tga结果显示晶型d在150℃之前有6.79％的失重，1h nmr结果表明残留溶剂为乙腈，对应失重3.9％。dsc结果显示晶型d在75.4和160.8℃有两个吸热峰(峰值温度)。
[0095]
对照例4、失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型f的制备
[0096]
取150mg实施例2所得晶型a，在15ml dmso中经气固渗透得到晶型f。
[0097]
晶型f的xrpd图谱如图14所示。晶型f在以下2θ衍射角度处有特征峰：5.48
°
，5.73
°
，9.30
°
，9.75
°
，15.13
°
，15.85
°
，16.60
°
，17.10
°
，17.77
°
，18.10
°
，18.98
°
，21.28
°
，22.06
°
，23.68
°
，25.09
°
，25.63
°
。
[0098]
晶型f的tga/dsc结果如图15所示，1h nmr结果如图16所示。tga结果显示晶型f在加热至200℃时有20.98％的失重，1h nmr结果表明残留溶剂为dmso，对应失重22.7％。dsc结果显示晶型f在71.8、113.4和162.2℃有三个吸热峰(峰值温度)。
[0099]
对照例5、失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型g的制备
[0100]
取150mg实施例2所得晶型a，氮气吹扫1小时后得到晶型g。
[0101]
晶型g与晶型a的xrpd图谱比较如图17所示。
[0102]
晶型g为无水晶型，加热至150℃再降温至30℃没有发生变化，但开盖一小时恢复到室温后又转变回晶型a。
[0103]
对照例6、失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型h的制备
[0104]
取150mg实施例2所得晶型a，溶解于3ml n-甲基吡咯烷酮中，置于装有水的大瓶中，经过气液渗透得到晶型h。
[0105]
晶型h的xrpd图谱如图18所示。晶型h在以下2θ衍射角度处有特征峰：5.42
°
，10.94
°
，16.53
°
，22.13
°
，27.68
°
，33.50
°
。
[0106]
以下通过实验例证明本发明的有益效果。
[0107]
实验例1、失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a的单晶培养和解析
[0108]
取10.0mg失碳熊去氧胆酸小檗碱盐起始样品于洁净4ml玻璃瓶中，加入0.8ml乙腈与水(体积比为1:5)的混合液作为正溶剂溶解样品，将上述4ml玻璃瓶封口后在瓶盖上扎一小孔，随后将其转入装有3ml三氯甲烷反溶剂的20ml玻璃瓶中，并将20ml玻璃瓶加盖密封，放入40℃生化培养箱中静置进行气液扩散培养，得到刀刃状单晶。
[0109]
所得单晶经xrpd检测确定为晶型a，图谱结果如图19所示。
[0110]
单晶结构解析显示：该晶体结构的不对称单元由2个失碳熊去氧胆酸的阴离子(-1价态)，2个小檗碱阳离子( 1价)以及9个结晶水分子所组成。可用如下结构式表示失碳熊去氧胆酸与小檗碱组成的离子盐的半九水合物：
[0111][0112]
该晶体的不对称单元结构表示如图20，分子堆积结构示意图如图21。晶体学数据记录如下表1：
[0113]
表1失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型a单晶晶体学数据
[0114][0115]
实验例2、晶型a、c、d混悬竞争实验
[0116]
混悬竞争实验共选择6个溶剂体系，分别为四氢呋喃、四氢呋喃/水(0.98:0.02，aw～0.2)、乙醇/水(0.96:0.04，aw～0.4)、乙醇/水(0.92:0.08，aw～0.6)、乙醇/水(0.87:0.13，aw～0.8)、水。取实施例1步骤1起始样品，加入对应体积的溶剂，在室温下混悬搅拌2小时，用0.4μm ptfe滤膜过滤得到饱和溶液。分别称取约3mg的a、c、d晶型样品，至hplc小瓶中，加入1ml饱和溶液，至于室温中混悬搅拌。8天后过滤得到固体，经xrpd鉴定晶型变化。aw表示水分活度。
[0117]
混悬竞争xrpd叠图结果如图22所示，结果显示，当aw为0时，混悬竞争得到无定形固体，当aw为0.2-1时，得到晶型a。说明混悬竞争时c、d晶型会向a晶型转变。
[0118]
实验例3、引湿性实验
[0119]
通过动态水分吸附仪(dvs)对晶型a在25℃恒温条件下、各湿度下的质量变化百分比进行测试，测试湿度变化为30％rh～95％rh～0％rh～95％rh。
[0120]
结果如图23所示，晶型a样品在相对湿度0％～10％过程中迅速吸水，相对湿度升至10％后缓慢吸水，至80％rh时水分吸附为8.7％。对dvs测试后的样品进行xrpd检测，结果显示如图24，表明晶型a经过dvs测试前后晶型未发生改变。晶型a具有良好的物理稳定性。
[0121]
实验例4、稳定性实验
[0122]
将晶型a、晶型d样品分别在25℃/60％rh条件下和40℃/75％rh条件下敞口放置1周，通过xrpd和hplc检测样品的物理和化学稳定性。测试结果记录如下表2，晶型a的xrpd结果如图25，晶型d的xrpd结果如图26。
[0123]
表2晶型a、d固体稳定性结果
[0124][0125]
结果表明，晶型a在上述2种条件下纯度未发生明显变化，化学稳定性良好；同时晶型也未发生改变，物理稳定性良好。而晶型d在25℃/60％rh条件下放置一周后纯度下降了0.37％，在40℃/75％rh条件下放置一周后纯度下降了0.62％，虽然晶型未发生明显改变，但结晶度下降，且样品变为了深棕色。综上，晶型a物理和化学稳定性均优于晶型d。
[0126]
实验例5、研磨稳定性实验
[0127]
分别取50mg晶型a和晶型d样品，手动研磨后通过xrpd检测。晶型a测试结果如图27所示，晶型d检测结果如图28所示。
[0128]
结果表明，晶型a经研磨后，晶型不变，结晶度下降。晶型d经研磨后转变为无定型。综上，晶型a研磨稳定性明显优于晶型d。
[0129]
实验例6、压力稳定性实验
[0130]
分别取100mg晶型a和晶型d样品，加入至6mg的圆形平冲中，采用10kn压力压制成圆形片剂。记录装载质量(ml)和片剂质量(mt)，随后利用公式ma＝(ml-mt)/ml
×
100％计算出粉末黏附到冲头的质量百分比(ma)；将压制好的片剂放置于干燥器中24小时，进行弹性复原。弹性复原后，采用游标卡尺测量片剂的直径(d)和厚度(t)。采用片剂硬度测定仪测试其径向破碎力(硬度，h)，同时测试破碎后样品的xrpd，晶型a结果如图29所示，晶型d结果如图30所示。利用公式t＝2h/πdt计算出不同硬度下粉体的抗张强度。结果记录如下表3：
[0131]
表3晶型a和晶型d的压力稳定性测试结果
[0132]
参数晶型a晶型d压片直径d(毫米)6.026.02压片厚度t(毫米)2.902.90硬度h(牛)65.3746.31抗张强度t(mpa)2.381.69装载质量(mg)104.999.9片剂质量(mg)103.296.9黏附量(mg)1.73.3黏附百分比％1.63.3
[0133]
结果表明，同样压片条件下，相比晶型d，晶型a所得片剂硬度更高，抗张强度更大，黏附量更少，更有利于获得稳定的制剂；同样压片条件下，晶型a和晶型d均未发生改变。
[0134]
综上，本发明提供了一种高稳定性的失碳熊去氧胆酸小檗碱盐晶型及其制备方
法。所述晶型的粉末x射线衍射图谱中，2θ衍射角度在3.54
±
0.2
°
，7.13
±
0.2
°
，13.14
±
0.2
°
，15.95
±
0.2
°
，16.40
±
0.2
°
，18.64
±
0.2
°
，24.90
±
0.2
°
，25.76
±
0.2
°
，26.30
±
0.2
°
处有特征峰。与失碳熊去氧胆酸小檗碱盐的其它晶型相比，该晶型具有更加优异的物理稳定性、化学稳定性、研磨稳定性和压力稳定性，在制备高质量水平的固体化学药物中具有良好的应用前景。