FXR调节剂及其制备方法和用途

fxr调节剂及其制备方法和用途
技术领域
1.本技术涉及作为fxr受体调节剂的一类化合物，包含所述化合物的药物组合物，以及使用所述化合物或组合物在治疗fxr介导的疾病的药物中的应用。


背景技术：

2.法尼醇x受体(farnesoid x receptor,fxr)是具有核受体超家族成员，最早于1995年在大鼠肝脏cdna文库中筛选发现，因其转录活性可被超生理浓度的法尼酯衍生物增强而命名。fxr作为一种胆汁酸核受体，通过调控一系列基因的表达，参与了多种生理功能的调节，包括胆汁酸代谢、脂代谢、糖代谢等。更重要地是，研究证实，fxr在保护肝脏和抑制肝癌的发生中发挥着关键的作用。fxr对肝脏的保护表现在多个方面，包括：维持胆汁酸的内稳态，抑制肝细胞凋亡，减少组织的氧化应激反应，降低肝脏的纤维化水平，抑制炎症反应，促进肝细胞再生，抑制肝癌的发生及发展，改善胰岛素抵抗，减少脂肪的合成，从而减少肝脏脂肪的沉积等。fxr具有如此多的肝脏保护作用提示它可能是非酒精性脂肪性肝炎(nash)的潜在治疗靶点。
3.近年来，人们对fxr激动剂开展了多方面的研究，并且进一步证实了fxr激动剂治疗非酒精性脂肪性肝病(nafld)的可行性。因此，fxr激动剂的研发具有广阔应用前景并且也是迫切需要的。
4.在该背景下，本技术提供了一类新的化合物，其对fxr具有很好的激动活性，并且具有优异的药效、药代性质和/或毒理性质。因此，具备极佳的临床应用前景。


技术实现要素：

5.在本技术的第一方面中，本技术提供了式(i)的化合物：
[0006][0007]
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：
[0008]
a是5-10元亚芳基或亚杂芳基，并且任选地被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
烷氧基、卤素、取代或未取代的c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”的基团取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基；或者
[0009]
a、r2以及a与r2之间的碳原子连接在一起形成8-15元稠合环，其中，所述稠合环是未被取代的或者被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
烷氧基、卤素、取代或未取代的c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄
基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”的基团取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基；
[0010]
r1、r3独立地是c
1-10
亚烷基，c
2-6
亚烯基、c
2-6
亚炔基，并且任选地是未取代的或者被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”的基团取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基；
[0011]
r2是c
1-10
烷基，c
2-6
烯基、c
2-6
炔基，并且是未取代的或者被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苄基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”的基团进一步取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基；或者
[0012]
r2是-l-(ch2)
p-，并且其l端连接到a上，以形成5-7元环，任选地，所述5-7元环是无取代的或者被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、取代或未取代的c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”所取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基，
[0013]
其中p为1、2、3或4，
[0014]
其中l选自-o-、-s-、-nr
4-和-ch
2-中的一种，
[0015]
其中r4选自氢、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和c
2-6
烯基，
[0016]
任选地，其中当l为ch2时，-(ch2)
p-中的一个或多个-ch
2-可以被o、s或nr4替换或者可以不被替换；
[0017]
d是5-10元单环或多环芳基或杂芳基，并且任选地被c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”中的一种或多种所取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基，并且任选地，所述c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基任选地被c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基中的一种或多种所取代；
[0018]
r5、r6分别独立地选自h、c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”中的一种或多种，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基中的一种或多种，并且任选地，所述c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基任选地被c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧
基、c
1-6
烷基酯基中的一种或多种进一步取代，
[0019]
q是-o-、-s-、-nr
4-或-ch
2-，其中r4选自氢、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和c
2-6
烯基中的一种。
[0020]
在本技术的第二方面中，提供了一种制备式(i)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐的方法，其包括以下步骤：
[0021]
第一步：
[0022][0023]
第二步：
[0024][0025]
第三步：
[0026][0027]
其中，虚线表示a与r2之间存在键或者不存在键；其中，当a与r2之间存在键时，则a、r2以及a与r2之间的碳原子连接在一起形成如上文所述的8-15元稠合环；其中，r1、r2、r3、r5、r6、a、q、d分别如上文所所限定；其中，x1、x2选自氯、溴或碘；
[0028]
其中，在第一步中，式i-a的化合物与式i-b的化合物在碱性条件下反应以得到式i-c的化合物；在第二步中，式i-d的化合物中的x2与g1(g2)n-qh的-qh基团反应得到g1(g2)n-q-r
3-d，随后进行任选的醇解或水解，以得到h2n-q-r
3-d，之后再与酸成盐得到式i-e的盐，其中，g1、g2为任意取代基，只要不干扰g1(g2)n-qh的-qh基团能与i-d的卤素x2反应即可；在第三步中，使i-c与i-e的盐反应得到式(i)的化合物。
[0029]
在本技术的第三方面中，提供了一种药物组合物，其包含一种或多种有效治疗剂量的如本文所述的式(i)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。
[0030]
在本技术的第四方面中，提供了如本文所述的式(i)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐在制备预防或治疗由fxr介导的疾病的药物中的应用。
[0031]
在本技术的第五方面中，提供了如本文所述的式(i)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐在预防或治疗由fxr介导的疾病中的应用。
具体实施方式
[0032]
现将对示例性实施方式进行详细说明。应理解的是，本技术不限于说明书中阐述的细节或方法学。还应理解的是，所作描述仅是为了说明目的而不应被认为是限制性的。
[0033]
此外，在本说明书中列出的任何实例都是说明性的而不是限制性的，并且仅列出了要求保护的本发明的诸多可能的实施方式中的一些实施方式。对各种条件和参数进行其他适当的修改和调整在本领域中是常见的，并且对于本领域的技术人员来说是显而易见的，其属于本公开的精神和范围内。
[0034]
定义
[0035]
除非特别说明，本技术中所用的术语具有如下定义：
[0036]
本发明中所述的“取代”表示被一个或多个基团所替代。当多个基团从同一系列候选取代基中选择时，它们可以相同，也可以不同。
[0037]
本发明中所述的“任选地”表示所定义基团可从一系列候选基团中进行选择，也可以不选。
[0038]
术语“烷基”表示特定原子个数下的饱和直链或支链烷基；“c
1-6
烷基”表示碳原子数为1个到6个的饱和直链或支链烷基，具体地可列举如但不仅限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、己基等。
[0039]
术语“卤代烷基”是指一个或多个氢被卤素取代的烷基，“c
1-6
卤代烷基”是指一个或多个氢被卤素取代的c
1-6
烷基。
[0040]
术语“羟基烷基”是指一个或多个氢被羟基取代的烷基，“c
1-6
羟基烷基”是指一个或多个氢被羟基取代的c
1-6
烷基。
[0041]
术语“烷氧基”是指基团r
–o–
，其中r是任选取代的烷基或任选取代的环烷基，或者r是基团
–y–
z，其中y是任选取代的亚烷基，并且z是任选取代的烯基、任选取代的炔基或任选取代的环烯基，其中，烷基、烯基、炔基、环烷基和环烯基如本文所定义。一般的烷氧基是任选取代的烷基
–o–
，例如，包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、1,2-二甲基丁氧基、三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基等。
[0042]
本文所用的术语“c
3-6
环烷基”是由至少三至六个碳原子组成的具有单环或多个稠合环的非芳族的基于碳的环(即碳环)。环烷基实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。术语环烷基还包括杂环烷基，其中，环的碳原子中的至少一个碳原子被杂原子取代，所述杂原子例如但不限于氮、氧、硫或磷。
[0043]
术语“c
2-6
烯基”是指通常具有2至6个碳原子并且具有至少一个(通常是1-3个)双键的支链或非支链不饱和烃基的单价基团。典型的c
2-6
烯基包括乙烯基、1-丙烯基或烯丙基(-ch2ch＝ch2)、异丙烯基(-c(ch3)＝ch2)等。
[0044]“c
1-6
烷基酯基”是指-cooc
1-6
烷基。
[0045]
术语“酰基”表示基团
–
c(o)r
co
，其中r
co
为氢、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基以及任选取代的杂芳基。
[0046]
本文所用的术语“芳基”为任何的基于碳的芳族基团(即，芳族碳环)，例如具有单环(如苯基)或多环(如联苯)或多个稠合环(稠环)(如萘基或蒽基)的基于碳的芳族基团。这些芳基可以包括但不限于苯、萘、苯基等。
[0047]
术语“杂芳基”意为衍生自以下的基团：具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个碳原子并且在至少一个环内具有1、2、3或4个选自氧、氮、硫和磷的杂原子的芳族环基(即，完全不饱和的)。换言之，杂芳基是由至少三个碳原子组成，并且在芳基环内包含至少一个杂原子的芳族环。这种杂芳基可以具有单环(例如吡啶基或呋喃基)或多稠环(例如
中氮茚基、苯并噻唑基或苯并噻吩基)。杂芳基的实例包括但不限于以下：[1,2,4]噁二唑、[1,3,4]噁二唑、[1,2,4]噻二唑、[1,3,4]噻二唑、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、中氮茚、异吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、异喹啉、喹啉、2,3-二氮杂萘、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、异噻唑、吩嗪、异噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、三唑、噁唑、噻唑、1,5-二氮杂萘等，以及含氮杂芳基化合物的n-氧化物和n-烷氧基衍生物，例如吡啶-n-氧化物衍生物。
[0048]
术语“炔基”是指通常具有2至6个碳原子，并且具有至少1个(通常是1-3个)三键不饱和位点的不饱和烃的单价基团。一般的炔基包括乙炔基(
–
c≡ch)、炔丙基(或丙-1-炔-3-基，
–
ch2c≡ch)等。
[0049]
术语“亚烷基”定义为具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个碳原子，通常是1-10个碳原子，更通常是1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链饱和烃链的二价基团。该术语由以下基团来示例，例如亚甲基(
–
ch2–
)、亚乙基(
–
ch2ch2–
)、亚丙基异构体(例如
–
ch2ch2ch2–
和
–
ch(ch3)ch2–
)等。“c
1-10
亚烷基”是具有1-10个碳原子的直链或支链饱和烃链的二价基团。
[0050]
术语“c
2-6
亚烯基”是指具有2-6个碳的二价烯基。
[0051]
术语“c
2-6
亚炔基”是指具有2-6个碳的二价炔基。
[0052]
术语“亚稠芳基”是指二价稠芳基，其中，所述稠芳基是指具有至少两个稠合环的芳基，至少其中的一个环是芳族。
[0053]
术语“亚芳基”是指二价芳基；术语“亚杂芳基”是指二价杂芳基。
[0054]
术语“氨基”是指
–
nh2基团。术语“取代氨基”是指基团
–
nr
wrw
，其中每个rw独立地选自下组：氢、烷基、环烷基、羧基烷基(例如苄氧羰基)、芳基、杂芳基和杂环基，条件是两个rw基团不同时为氢或基团
–y–
z，其中y是任选取代的亚烷基，并且z是烯基、环烯基或炔基。除非定义有另外限制，否则所有的取代基可以任选地被1-3个选自以下的取代基进一步取代：烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、cf3、氨基、取代氨基、氰基和
–
s(o)
nrso
，其中r
so
是烷基、芳基或杂芳基，并且n是0、1或2。
[0055]
术语“羧基”是指
–
c(o)oh基团。术语“羧基烷基”是指基团
–
c(o)o
–
烷基或
–
c(o)o
–
环烷基，其中烷基和环烷基如本文所定义，并且其可以任选地被烷基、烯基、炔基、烷氧基、卤素、cf3、氨基、取代氨基、氰基和
–
s(o)
nrso
进一步取代，其中r
so
是烷基、芳基或杂芳基，并且n是0、1或2。
[0056]
术语“卤素”、“卤代”或“卤化物”可互换指代，并且是指氟、溴、氯和碘。
[0057]
术语“砜”是指
–
s(o)2r
so
基团，其中r
so
是烷基、芳基或杂芳基。术语“取代砜”是指
–
s(o)2r
so
基团，其中r
so
是如本文所定义的取代烷基、取代芳基或取代杂芳基。
[0058]
术语“酮基”是指
–
c(o)
–
基团。术语“硫代羰基”是指
–
c(s)
–
基团。
[0059]
本技术中烷基或环烷基上的取代，如没有指明发生在特定的碳原子上，则表示可以发生在任何取代基个数尚未达到饱和的碳原子上。多个取代基从同一系列中选择时，它们可以相同，也可以不同。
[0060]
本技术中的芳环、杂芳环或者杂环上的取代，如没有指明发生在特定的原子上，则表示可以发生在任何未被氢以外的其他原子取代的位置。多个取代基从同一系列中选择时，它们可以相同，也可以不同。
[0061]
立体异构体是指是指由分子中原子在空间上排列方式不同所产生的异构体。互变异构体是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。
[0062]
药学上可接受的盐是指化合物保持了期望的生物活性且具有最小的毒副作用。该药学上可接受的盐可以直接在化合物的制备和纯化过程中得到，也可以间接地通过该化合物的游离酸或游离碱与另外一种合适的碱或酸反应得到。
[0063]
药学上可接受的辅料是指生产和调配药物时使用的赋形剂和附加剂。常见的药学上可接受的辅料包括溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、ph值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂等。
[0064]
如本文中所使用的，术语“室温”是20℃至25℃。
[0065]
优选实施方式
[0066]
在本发明的第一方面中，提供了式(i)的化合物：
[0067][0068]
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：
[0069]
a是5-10元亚芳基或亚杂芳基，并且任选地被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
烷氧基、卤素、取代或未取代的c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”的基团取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基；或者
[0070]
a、r2以及a与r2之间的碳原子连接在一起形成8-15元稠合环，其中，所述稠合环是未被取代的或者被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
烷氧基、卤素、取代或未取代的c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”的基团取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基；
[0071]
r1、r3独立地是c
1-10
亚烷基，c
2-6
亚烯基、c
2-6
亚炔基，并且任选地是未取代的或者被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”的基团取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基；
[0072]
r2是c
1-10
烷基，c
2-6
烯基、c
2-6
炔基，并且是未取代的或者被一个或多个选自c
1-6
烷
基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苄基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”的基团进一步取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基；或者
[0073]
r2是-l-(ch2)
p-，并且其l端连接到a上，以形成5-7元环，任选地，所述5-7元环是无取代的或者被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、取代或未取代的c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”所取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基，
[0074]
其中p为1、2、3或4，
[0075]
其中l选自-o-、-s-、-nr
4-和-ch
2-中的一种，
[0076]
其中r4选自氢、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和c
2-6
烯基，
[0077]
任选地，其中当l为ch2时，-(ch2)
p-中的一个或多个-ch
2-可以被o、s或nr4替换或者可以不被替换；
[0078]
d是是5-10元单环或多环芳基或杂芳基，并且任选地被c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”中的一种或多种所取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基，并且任选地，所述c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基任选地被c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基中的一种或多种所取代；
[0079]
r5、r6分别独立地选自h、c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”中的一种或多种，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基中的一种或多种，并且任选地，所述c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基任选地被c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基中的一种或多种进一步取代，
[0080]
q是-o-、-s-、-nr
4-或-ch
2-，其中r4选自氢、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和c
2-6
烯基中的一种。
[0081]
在第一方面的一个实施方式中，a可以选自对亚苯基、间亚苯基、邻亚苯基、亚吡啶基、亚呋喃基、亚噻吩基、亚吡咯基、亚异噁唑基、亚吡唑基、亚噁唑基、亚噻唑基、亚咪唑基、亚哒嗪基、亚嘧啶基、亚吡嗪基，并且是未取代的或任选地被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
羟基烷氧基、c
1-6
烷氧基、卤素、取代或未取代的c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”的基团取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基。
[0082]
在另一个实施方式中，a选自在另一个实施方式中，a选自
[0083]
优选地，a为
[0084]
在一个具体的实施方式中，上述结构是未取代。在另一个具体的实施方式中，上述结构被一个或多个选自下述的基团取代：甲基、乙基、正丙基、异丙基、氟、氯、溴、碘、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、二氟甲氧基、二氟甲基、2,2,2-三氟乙基、2,2,2-三氟乙氧基、氰基。
[0085]
在第一方面的另一个实施方式中，a中的两个相邻的碳、r2以及a与r2之间的碳原子连接在一起形成如下结构的8-15元含非芳香环的亚稠芳基：
[0086][0087]
其中，l可以为o、s、nr4或ch2，其中r4可以选自氢、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和c
2-6
烯基，波浪线表示与其他基团的连接点。
[0088]
在另一个实施方式中，当l为ch2时，非芳香环中的一个或多个-ch
2-被o、s或nr4替换。
[0089]
在另一个实施方式中，当l为ch2时，非芳香环中的一个或多个-ch
2-不被o、s或nr4替换。
[0090]
在另一个实施方式中，芳香环a部分和非芳香环部分是未取代的或独立地被选自c
1-6
烷基、c
1-6
羟基烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、取代或未取代的c
3-6
环烷基、取代或未取代的c
2-6
烯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的苯基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”中的一种或多种所取代，其中，r’和r”可以分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
可以选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基。
[0091]
在另一个实施方式中，a与r2以及a和r2之间的碳原子一起形成
[0092][0093]
优选地，其一起形成
[0094]
其中，上述结构是未取代的或被任选取代的，其中，波浪线表示与其他基团的连接点。
[0095]
当被取代时，上述结构可以被一个或多个选自下述的基团取代：甲基、乙基、正丙基、异丙基、氟、氯、溴、碘、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、二氟甲基、二氟甲氧基、2,2,2-三氟乙基、2,2,2-三氟乙氧基、氰基。
[0096]
在第一方面的另一个实施方式中，d选自苯基、萘基、蒽基、菲基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、异噁唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、异噻唑基、三氮唑基、四氮唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、吲哚基或喹啉基，其中，d可以是未取代的或者可以被c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基、-conr’r”中的一种或多种取代，其中，r’和r”分别独立地选自氢、c
1-6
烷基、羧基取代的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基、-so2r
”’
、-c
1-6
烷基-so2r
”’
，其中，r
”’
选自羟基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基。任选地，所述c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
3-6
环烷基、c
2-6
烯基、苯基、苄基任选地可以被一个或多个选自c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
3-6
环烷基取代的c
1-6
烷氧基、卤素、c
3-6
环烷基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基、c
1-6
烷基酯基的基团取代。
[0097]
在第一方面的另一个实施方式中，d选自苯基、萘基、[1,2,4]噁二唑基、[1,3,4]噁二唑基、[1,2,4]噻二唑基、[1,3,4]噻二唑基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基中的一种，优选地，d选自苯基、呋喃基、吡啶基。
[0098]
在一个具体的实施方式中，d可以是未取代的。在另一个具体的实施方式中，d可以被一个或多个选自下述的基团取代：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、环丙基甲氧基、环戊基甲氧基、环己基甲氧基、羟甲基、2-羟基乙氧基、2-羟基丙氧基、3-羟基丙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、二氟甲基、二氟甲氧基、2,2,2-三氟乙基、2,2,2-三氟乙氧基、氟、氯、溴、碘、羧基、酯基、-conr’r”，其中，r’和r”分别独立地选自氢、甲基、乙基、羧基取代的甲基、羧基取代的乙基、-so2r
”’
、-ch
2-so2r
”’
，-ch2ch
2-so2r
”’
其中，r
”’
选自羟基、甲基、乙基、环丙基、环戊基、环己基。
[0099]
在第一方面的一个实施方式中，r1可以为-ch
2-。
[0100]
在第一方面的一个实施方式中，r2可以选自甲基、乙基、正丙基中的一种。
[0101]
在第一方面的一个实施方式中，r3可以选自-ch
2-、中的一种。
[0102]
在第一方面的一个实施方式中，q为-o-。
[0103]
在第一方面的一个实施方式中，r6可以选自h、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、氟、氯、溴、碘、环丙基、环戊基、环己基、苯基、苄基、羟基、氨基或取代氨基、氰基、硝基、羧基中的一种。优选地，r6可以选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、环戊基。更优选地，r6选自异丙基、环丙基。
[0104]
在第一方面的一个实施方式中，r5可以选自苯基、萘基、[1,2,4]噁二唑基、[1,3,4]噁二唑基、[1,2,4]噻二唑基、[1,3,4]噻二唑基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基，优选地，r5选自苯基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基。
[0105]
在一个具体的实施方式中r5是未取代的。在另一个具体的实施方式中，r5被一个或多个选自下述的基团取代：甲基、乙基、正丙基、异丙基、氟、氯、溴、碘、甲氧基、乙氧基、三氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲基、二氟甲基、2,2,2-三氟乙基、2,2,2-三氟乙氧基、羟甲基、2-羟基乙氧基、2-羟基丙氧基、3-羟基丙氧基、氰基。
[0106]
在第一方面的一个实施方式中，式(i)选自以下中的任一种：
[0107]
[0108]
[0109]
[0110]
[0111]
[0112]
[0113][0114]
在本技术的第二方面中，提供了一种制备上述式(i)的方法，其通过以下步骤进行：
[0115]
第一步：
[0116][0117]
第二步：
[0118][0119]
第三步：
[0120][0121]
其中，虚线表示a与r2之间可存在键或者可不存在键。当a与r2之间存在键时，则a、r2以及a与r2之间的碳原子连接在一起形成如上文所述的8-15元稠合环；其中，r1、r2、r3、r5、r6、a、q、d分别如上文定义；其中，x1、x2选自氯、溴或碘。
[0122]
在上述方法中，首先，在第一步中，使异噁唑片段i-a与含a片段i-b在碱性条件下反应以得到中间体i-c。接着，在第二步中，中间体i-d中的卤素x2与g1(g2)n-qh的-qh基团反应得到g1(g2)n-q-r
3-d，随后进行任选的醇解或水解，以得到h2n-q-r
3-d，之后再与酸成盐得到中间体h3n
-q-r
3-d(i-e)的盐，其中，g1、g2为任意取代基，只要不干扰g1(g2)n-qh的-qh基团能与i-d的卤素x2反应即可。在第三步中，使i-c与i-e的盐反应得到式(i)的化合物。
[0123]
具体来说，第一步为异噁唑片段i-a与含a片段i-b连接得到i-c的步骤。在一个实施方式中，异噁唑片段i-a与含a片段i-b在碱性条件下反应得到i-c。该反应在碱的存在下进行。所述碱例如碳酸钾、碳酸钠、三乙胺。
[0124]
在一个实施方式中，第一步的反应在常温、常压下进行。
[0125]
在一个实施方式中，第一步在选自n,n-二甲基甲酰胺、乙腈、二甲基亚砜、丙酮或四氢呋喃中的一种或多种中进行。
[0126]
第二步为中间体i-e的盐的制备反应。在该反应步骤中，g1(g2)n-qh例如是羟胺。在一个实施方式中，羟胺例如是n-羟基邻苯二甲酰亚胺。
[0127]
在一个实施方式中，g1(g2)n-qh与i-d的反应在常温、常压下进行。
[0128]
在另一个实施方式中，g1(g2)n-qh与i-d的反应在高于或等于45℃、高于或等于50℃、高于或等于55℃、高于或等于60℃、高于或等于65℃、高于或等于70℃、高于或等于75℃、甚至高于或等于80℃的温度下进行。
[0129]
在一个实施方式中，g1(g2)n-qh与i-d的反应在惰性环境中进行。在一个实施方式中，g1(g2)n-qh与i-d的反应在氮气或氦气保护下进行。
[0130]
在一个实施方式中，g1(g2)n-qh与i-d的反应在碱的存在下进行，所述碱例如是n,n-二异丙基乙胺。
[0131]
在一个实施方式中，第二步中的水解或醇解在常温、常压下进行。在另一个实施方式中，第二步中的水解或醇解在碱的存在下进行，所述碱例如是正丁胺、三乙胺等。醇解所用的醇例如是甲醇、乙醇等。
[0132]
在一个实施方式中，第二步中的成盐反应在冰浴条件下进行。
[0133]
在一个实施方式中，第二步中的成盐反应所用的酸例如为盐酸。
[0134]
任选地，在第三步之后，可使产物进行另外的反应，例如水解、醇解、取代、还原、氧化、成盐等。
[0135]
上述反应原料i-a、i-b、i-d等可商购获得或者通过本领域已知的常规反应获得。
[0136]
在本技术的第二方面的另一个实施方式中，当r1是亚甲基时，所述i-a即为其通过下述反应步骤得到：
[0137]
(1)在碱的存在下，使r5cho与盐酸羟胺反应得到r5ch＝n-oh；优选地，所述碱选自氢氧化钠、吡啶或乙酸钾中的一种或多种；
[0138]
(2)使r5ch＝n-oh与卤代试剂反应以使卤素替代r5ch＝n-oh中的oh，优选地，所述卤代试剂选自n-氯代丁二酰亚胺、n-溴代丁二酰亚胺；
[0139]
(3)使(2)的反应产物与r6c(o)ch2coor反应以得到其中r是c
1-6
烷基；
[0140]
(4)对(3)的产物进行还原反应以得到例如，在还原剂的存在下进行，例如，还原剂为氢化锂铝；
[0141]
(5)对(4)的产物进行卤代，任选地，卤代试剂选自四溴化碳。
[0142]
在本技术的第三方面的一个实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含一种或多种有效治疗剂量的如上所述的式(i)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可
接受的盐，以及药学上可接受的辅料
[0143]
在本技术的第四方面的一个实施方式中，提供了如上所述的式(i)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐在制备预防或治疗由fxr介导的疾病的药物中的应用。
[0144]
在本技术的第四方面的另一个实施方式中，所述由fxr介导的疾病选自非酒精性脂肪性肝炎、非酒精性脂肪性肝病、慢性肝内或肝外胆汗淤积病症、急性肝内或肝外胆汗淤积病症、肝纤维化、慢性乙型肝炎、胆囊结石、肝癌、结肠癌、肠道炎性疾病、糖尿病肾病。
[0145]
在本技术的第五方面的一个实施方式中，提供了如上所述的式(i)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐在预防或治疗由fxr介导的疾病中的应用。
[0146]
在本技术的第五方面的另一个实施方式中，所述由fxr介导的疾病选自非酒精性脂肪性肝炎、非酒精性脂肪性肝病、慢性肝内或肝外胆汗淤积病症、急性肝内或肝外胆汗淤积病症、肝纤维化、慢性乙型肝炎、胆囊结石、肝癌、结肠癌、肠道炎性疾病、糖尿病肾病。
[0147]
本技术的式(i)的化合物可能含有碱性或酸性基团，这类化合物可以与适宜的酸或碱形成药学上可接受的盐，这都将是属于本技术的一部分
[0148]
具体地，本技术的部分化合物含有碱性官能团，例如但不仅限于当a为吡啶环时，可以与合适的酸形成药学上可接受的盐。所述合适的酸可以是无机酸，也可以是有机酸。药学上可接受的盐的代表性例子包括但不限于：盐酸盐、硫酸盐、氢溴酸盐、甲磺酸盐、硝酸、磷酸盐、乙酸盐、草酸盐、丁二酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、精氨酸盐等。
[0149]
本技术的部分化合物含有酸性官能团，例如但不仅限于当d环上的取代基为cooh时，可以与合适的碱形成药学上可接受的盐。所述合适的碱可以是无机碱，也可以是有机碱。药学上可接受的盐的代表性例子包括但不限于：与无机离子形成的盐，如钠盐、钾盐、锂盐、钙盐、铝盐、锌盐、铵盐等；与有机碱形成的盐，如甲胺盐、乙胺盐、三乙胺盐、葡甲胺盐、氨基丁三醇盐等。
[0150]
本技术的部分化合物或其药学上可接受的盐是从水或有机溶剂中结晶或重结晶而来，晶体中可能包含所使用的溶剂分子。此外，不同的结晶条件可能导致化合物的晶型不同。因此，含有不同化学剂量的结晶溶剂以及所有晶型的式(i)，所示的化合物或其药学上可接受的盐都在本技术的范围内。
[0151]
本技术的部分化合物具有一个或多个手性中心，例如但不仅限于当r3包含一个或多个手性碳剂时，因而可能存在外消旋体、外消旋混合物、对映异构体、非对映异构体、非对映异构混合物等多种形式。式(i)所示化合物的所有这些异构形式都在本技术的保护范围内。式(i)所示的部分化合物可能以顺反异构体的形式存在，例如但不仅限于当r1是乙烯基时，因此某一种异构体以及两种顺反异构体的混合体都在本技术的保护范围内。
[0152]
本技术提供了式(i)所示的化合物，其被证明对fxr具有很好的激动活性，并且具有优异的药效、药代性质和/或毒理性质。
[0153]
实施例
[0154]
以下将以实施例进一步说明本发明。需要特别指出的是，这些实施例只用于举例说明本发明，而不以任何方式限制本发明。实例中的所有参数及其余说明，除另加说明外，都是以质量为依据的。柱层析分离所用填料若未说明均为硅胶。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
[0155]
实施例中所用的核磁1h谱分析仪为瑞士布鲁克(bruker)公司的bruker ac400或bruker ac500；质谱分析仪为安捷伦(agilent)公司的agilent 6120。
[0156]
试剂购自上海毕得医药科技有限公司，上海皓鸿生物医药科技有限公司，韶远科技(上海)有限公司
[0157]
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明中。文中所述的方法与材料仅作示范之用。
[0158]
制备实施例
[0159]
实施例1
[0160]
制备4-((((1-(4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸(结构如下)。
[0161][0162]
(1)2,6-二氯苯甲醛肟的制备
[0163][0164]
在冰浴条件下，将氢氧化钠水溶液(1.656g，41.4mmol，溶于20ml水中)滴加入盐酸羟胺(3.94g，56.7mmol)的水(10ml)溶液中，搅拌半小时，再将2，6二氯苯甲醛(10g，57.1mmol)溶于乙醇，滴加入反应体系中，然后升高温度到室温，搅拌过夜，减压浓缩得到粗品，将粗品用乙醇/水(1：10)重结晶，过滤干燥得2，6-二氯苯甲醛肟(9.5g，产率89％)为白色固体。ms(esi)m/e[m h]

：189.9。
[0165]
(2)2,6-二氯苯甲酰氯肟的制备
[0166][0167]
向2，6-二氯苯甲醛肟(3g，15.87mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(50ml)的溶液中分批加入n-氯代丁二酰亚胺(2.124g，15.9mmol)。加样完毕之后室温搅拌五个小时，再加入乙酸乙酯溶液稀释，用饱和食盐水洗涤有机相，干燥，减压浓缩得到粗品，粗品用正己烷重结晶得到2,6-二氯苯甲酰氯肟(3.478，产率94％)，为白色固体。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.71(d,j＝1.7hz,1h),7.69(d,j＝0.7hz,1h),7.64(dd,j＝9.2,6.8hz,1h)。
[0168]
(3)5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯的制备
[0169][0170]
室温下，将三乙胺(1137mg，11.15mmol)滴加入3-环丙基-3-羰基-丙酸乙酯
(2679mg，17.16mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(30ml)溶液中，搅拌五个小时。再将2,6-二氯苯甲酰氯肟(2000mg，8.583mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)，滴加入反应体系中，搅拌过夜，加水(20ml)淬灭反应，用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取反应体系，合并有机相，干燥，浓缩并用硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝4：1)纯化得到5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯(1651mg，产率59％)为白色固体。ms(esi)m/e[m h]

：326.0；1h nmr(400mhz,氘仿)δ7.41(d,j＝1.9hz,1h),7.39(d,j＝0.7hz,1h),7.33(dd,j＝9.3,6.6hz,1h),4.12(q,j＝7.1hz,2h),2.93(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),1.45
–
1.36(m,2h),1.36
–
1.23(m,2h),1.02(t,j＝7.1hz,3h)。
[0171]
(4)(5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲醇的制备
[0172][0173]
冰浴条件下，向5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯(1000mg，3.076mmol)的四氢呋喃的溶液(20ml)中滴加氢化锂铝(128.2mg，3.384mmol)的四氢呋喃溶液(1.41ml，2.5mol/l)滴加完毕之后，反应体系升高至室温，反应两个小时。加入饱和氯化铵溶液(30ml)淬灭反应，搅拌十分钟，减压过滤除去固体，减压浓缩滤液，再用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取滤液，有机相干燥，浓缩并用正己烷重结晶得到(5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲醇(657mg,产率75％)为白色固体。ms(esi)m/e[m h]

:284.0；1h nmr(400mhz,氘仿)δ7.44(d,j＝1.6hz,1h),7.42(d,j＝0.7hz,1h),7.36(dd,j＝9.2,6.8hz,1h),4.41(d,j＝5.8hz,2h),2.19(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),1.28(ddd,j＝6.7,5.0,4.1hz,2h),1.18
–
1.10(m,2h)。
[0174]
(5)4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑的制备
[0175][0176]
冰浴条件下，向(5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲醇(400mg，1.414mmol)的二氯甲烷溶液(10ml)中加入三苯基膦(606.6mg，2.121mmol)搅拌十分钟后分批加入四溴化碳(693.5mg，2.121mmol)，搅拌两个小时，将反应体系浓缩，，粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚，乙酸乙酯＝20：1)，得到4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(420mg，86.2％)为白色固体。ms(esi)m/e[m h]

:345.9；1h nmr(400mhz,氘仿)δ7.46(d,j＝1.9hz,1h),7.44(d,j＝0.7hz,1h),7.38(dd,j＝9.3,6.6hz,1h),4.23(s,2h),2.13(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),1.30(ddd,j＝6.3,5.0,3.8hz,2h),1.23
–
1.16(m,2h).
[0177]
(6)1-(4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)乙-1-酮的制备
[0178][0179]
将4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(400mg，1.16mmol)和4-羟基苯乙酮(158mg，1.16mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中，再加入无水碳酸钾(240mg，1.74mmol)室温搅拌过夜。加入乙酸乙酯(20ml)稀释，用饱和食盐水(50
×
3)洗涤，有机层干燥，浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚，乙酸乙酯＝4：1)，得到1-(4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)乙-1-酮(380mg,产率82％)，为白色固体。ms(esi)m/e[m h]

:402.0；1h nmr(500mhz,氘仿)δ7.89
–
7.83(m,2h),7.39(dd,j＝8.1,0.9hz,2h),7.31(dd,j＝9.0,7.2hz,1h),6.85
–
6.80(m,2h),4.87(s,2h),2.53(s,3h),2.17(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),1.30
–
1.26(m,2h),1.18
–
1.12(m,2h).
[0180]
(7)4-((1,3-二氧异吲哚啉-2-基)氧基)甲基)苯甲酸甲酯的制备
[0181][0182]
将4-溴甲基苯甲酸甲酯(1000mg，4.367mmol)和n-羟基邻苯二甲酰亚胺(1067mg，6.55mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(30ml)，氮气保护，加入n,n-二异丙基乙胺(1693mg,13.1mmol)70℃反应三个小时，冷却至室温，边搅拌边加入水，固体完全析出后用布氏漏斗过滤，用水洗涤固体至白色，烘干固体得到4-((1,3-二氧异吲哚啉-2-基)氧基)甲基)苯甲酸甲酯(1100mg，产率81％)，为白色固体。ms(esi)m/e[m h]

:312.0；1h nmr(400mhz,氘仿)δ8.09
–
8.03(m,2h),7.84
–
7.79(m,2h),7.75(dd,j＝5.5,3.1hz,2h),7.62(d,j＝8.2hz,2h),5.27(s,2h),3.92(s,3h)。
[0183]
(8)4-(氨基氧基)甲基苯甲酸甲酯盐酸盐的制备。
[0184][0185]
将4-((1,3-二氧异吲哚啉-2-基)氧基)甲基)苯甲酸甲酯(500mg，1.60mmol)加入甲醇溶液(20ml)中，氮气保护，再加入正丁胺(117mg，1.60mmol)搅拌过夜。在冰浴条件下加入盐酸乙醇溶液(20ml，1mol/l)搅拌一个小时，常温旋干，得到粗品，再将粗品用甲基叔丁基醚(30ml
×
3)洗涤，过滤，常温烘干，得到4-(氨基氧基)甲基苯甲酸甲酯盐酸盐(280mg，产率80％)为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.00(dd,j＝8.3,4.0hz,2h),7.60
–
7.51(m,2h),5.11(d,j＝2.7hz,2h),3.87(s,3h).
[0186]
(9)4-(((1-(4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸甲酯的制备
[0187]
[0188]
将1-(4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)乙-1-酮(200mg，0.49mmol)和4-(氨基氧基)甲基苯甲酸甲酯盐酸盐(129mg，0.59mmol)溶于甲醇溶液(5ml)中，搅拌过夜，旋干，得到粗品，粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝4：1)得到4-(((1-(4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸甲酯(220mg，产率78％)为无色液体。ms(esi)m/e[m h]

:565.1；1h nmr(400mhz,氘仿)δ8.08
–
7.97(m,2h),7.54
–
7.47(m,2h),7.45(d,j＝8.1hz,2h),7.42
–
7.35(m,2h),7.30(dd,j＝9.0,7.0hz,1h),6.81
–
6.72(m,2h),5.25(s,2h),4.80(s,2h),3.91(s,3h),2.23(s,3h),2.15(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),1.28
–
1.24(m,2h),1.17
–
1.08(m,2h)。
[0189]
(10)4-((((1-(4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸的制备
[0190][0191]
将4-(((1-(4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸甲酯(100mg，0.18mmol)和一水合氢氧化锂(22mg，0.53mmol)加入混合溶剂7ml中(四氢呋喃：甲醇：水＝3：3：1)，40度反应三个小时。旋干溶剂，加入水(10ml)搅拌，用盐酸(1mmol/l)调节ph至5析出固体，过滤，干燥，得到4-((((1-(4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸(82mg,产率84％)为白色固体。ms(esi)m/e[m h] :551.1；1h nmr(400mhz,氘仿)δ8.12
–
8.05(m,2h),7.49(t,j＝8.2hz,4h),7.39(d,j＝1.4hz,1h),7.37(s,1h),7.30(dd,j＝9.1,7.0hz,1h),6.81
–
6.72(m,2h),5.27(s,2h),4.80(s,2h),2.24(s,3h),2.16(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),1.31
–
1.26(m,2h),1.16
–
1.10(m,2h)
[0192]
实施例2-27
[0193]
参照实施例1的路线合成如下化合物。其中，在实施例11-14、16-18、20、22-24、27中，用3-三氟甲氧基苯甲醛替代实施例1中所用的2,6-二氯苯甲醛。在实施例2-27中，用下表中所列的起始原料1替代实施例1中所用的4-羟基苯乙酮；并且用下表所列的起始原料2替代实施例1中所用的4-溴甲基苯甲酸甲酯。其他操作步骤同制备实施例1。需要说明的是，下述起始原料1和起始原料2可商购获得，或者由商购原料通过本领域已知的反应，例如，溴代、氯代、还原、氧化等获得。
[0194]
[0195]
[0196]
[0197][0198]
实施例28
[0199]
3-((((6-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)-3,4-二氢萘-1(2氢)-亚基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸的制备
[0200][0201]
(1)6-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)-3,4-二氢萘-1(2氢)-酮的制备。
[0202][0203]
将4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(合成步骤同实施例1)(300mg，0.87mmol)和6-羟基-1-四氢萘酮(141mg，0.87mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)。再向反应体系中加入无水碳酸钾(180mg，1.30mmol)。室温搅拌过夜，加入乙酸乙酯10ml稀释，用饱和食盐水(50
×
3)洗涤，干燥浓缩，得到粗品，粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝4：1)得到5-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)-3,4-二氢萘-1(2氢)-酮(320mg,86％)为白色固体。ms(esi)m/e[m h]

:428.0；1h nmr(500mhz,氘仿)δ7.94(d,j＝8.7hz,1h),7.40(dd,j＝8.0,0.9hz,2h),7.32(dd,j＝9.0,7.2hz,1h),6.71(dd,j＝8.7,2.6hz,1h),6.63
–
6.56(m,1h),4.85(s,2h),2.87(t,j＝6.1hz,2h),2.59
1(2氢)-亚基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸的制备
[0214][0215]
将3-(((((6-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)-3,4-二氢萘-1(2氢)-亚基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸甲酯(100mg，0.17mmol)和一水合氢氧化锂(21.3mg,0.51mmol)加入混合溶剂(四氢呋喃：甲醇：水＝3：3：1)，40度反应三个小时。旋干溶剂，加入水(10ml)搅拌，用盐酸(1mmol/l)调节ph至5析出固体，过滤，干燥，得到3-((((6-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)-3,4-二氢萘-1(2氢)-亚基)氨基)氧基)甲基)苯甲酸(84mg,产率86.5％)，为白色固体。ms(esi)m/e[m h] :591.1；1h nmr(500mhz,氘仿)δ8.12(s,1h),8.03(d,j＝7.7hz,1h),7.82(d,j＝8.8hz,1h),7.65(d,j＝7.6hz,1h),7.46(t,j＝7.7hz,1h),7.39(d,j＝1.0hz,1h),7.37(s,1h),7.30(dd,j＝8.9,7.3hz,1h),6.63(dd,j＝8.7,2.7hz,1h),6.52(d,j＝2.6hz,1h),5.23(s,2h),4.79(s,2h),2.75(t,j＝6.6hz,2h),2.65(t,j＝6.1hz,2h),2.16(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),1.81(p,j＝6.4hz,2h),1.28(td,j＝4.8,2.8hz,2h),1.15
–
1.10(m,2h)。
[0216]
实施例29-40
[0217]
参照实施例1的路线合成如下化合物。其中，在实施例38-40中，用3-三氟甲氧基苯甲醛替代实施例1中所用的2,6-二氯苯甲醛。在实施例29-40中，用下表中所列的起始原料1替代实施例1中所用的4-羟基苯乙酮；并且用下表所列的起始原料2替代实施例1中所用的4-溴甲基苯甲酸甲酯。其他操作步骤同制备实施例1。需要说明的是，下述起始原料1和起始原料2可商购获得，或者由商购原料通过本领域已知的反应，例如，溴代、氯代、还原、氧化等获得。
[0218]
[0219][0220]
实施例41-75
[0221]
参照实施例28的路线合成如下化合物。其中，在实施例44-47、52-55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75中，用3-三氟甲氧基苯甲醛替代实施例28中所用的2,6-二氯苯甲醛。在实施例41-75中，用下表中所列的起始原料1替代实施例28中所用的6-羟基-1-四氢萘酮；并且用下表所列的起始原料2替代实施例28中所用的3-溴甲基苯甲酸甲酯。其他操作步骤同制备实施例28。需要说明的是，下述起始原料1和起始原料2可商购获得，或者由商购原料通过本领域已知的反应，例如，溴代、氯代、还原、氧化等获得。
[0222]
[0223]
[0224]
[0225]
[0226]
[0227][0228]
实施例76
[0229]
(3-(((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酰基)甘氨酸
[0230][0231]
(1)(3-((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酰基)甘氨酸甲酯的制备
[0232][0233]
将实施例21中制得的3-((((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酸(500mg，0.82mmol)，n,n-二异丙基乙胺(317mg，2.4mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)，搅拌半小时，加入1-丙基磷酸酐(312mg，0.98mmol)和甘氨酸盐酸盐(123mg，0.98mmol)搅拌过夜，加入乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗涤，干燥，浓缩得到粗品，粗品用硅胶柱层析纯化，得到(3-((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酰基)甘氨酸甲酯(480mg，产率为86.1％)
[0234]
(2)(3-(((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酰基)甘氨酸的制备。
[0235][0236]
将(3-((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6
--
二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酰基)甘氨酸甲酯(100mg，0.147mmol)溶于混合溶剂(7ml，四氢呋喃：甲醇：水＝3：3：1)，加入一水合氢氧化锂(18.5mg，0.44mmol)，常温搅拌过夜，旋干溶剂，加入水(10ml)，搅拌形成混悬液，加入盐酸(1mmol/l)调节ph至沉淀完全析出，过滤得到(3-(((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酰基)甘氨酸(76mg,产率77％),ms(esi)m/e[m h]:667.0；1h nmr(500mhz,氘仿)δ8.04
–
7.92(m,1h),7.83(dd,j＝8.0,1.7hz,1h),7.75(d,j＝8.0hz,1h),7.39(d,j＝1.2hz,1h),7.38(d,j＝0.6hz,1h),7.31(dd,j＝9.0,7.1hz,1h),7.12(d,j＝8.5hz,1h),6.81(d,j＝5.8hz,1h),6.79(d,j＝2.5hz,1h),6.67(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),5.41(s,2h),4.79(s,2h),4.26(d,j＝5.1hz,2h),2.26(s,3h),2.13(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),1.29
–
1.26(m,2h),1.17
–
1.11(m,2h)。
[0237]
实施例77
[0238]
2-(3-((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酰氨基)乙基-1-磺酸
[0239][0240]
将实施例21中制得的3-((((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酸(500mg，0.82mmol)溶于dmf(4ml),加入hatu(2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯)(570mg,1.5mmol),搅拌一段时间，加入牛磺酸(187mg,1.5mmol)和n,n-二异丙基乙胺(387mg,3mmol)。搅拌过夜，用制备柱分离得到目标产物。
[0241]
实施例78
[0242]
3-((((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基-n-(甲基磺酰基)苯甲酰胺
[0243][0244]
将实施例21中制得的3-((((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基苯甲酸(50mg，0.082mmol)，4-二甲氨基吡啶(10mg，0.082mmol),2-氯-1-甲基吡啶碘化物(250mg，0.984mmol),甲基磺酰胺(155.8mg，1.64mmol)，溶于二氯甲烷(5ml)，搅拌半个小时，加入三乙胺(248mg，2.46mmol)，反应结束后旋干，加入乙酸乙酯(10ml)溶解，用盐酸(20
×
3，1mmol/l)洗涤，干燥，浓缩后用
硅胶制备板纯化，得到(e)-3-((((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基-n-(甲基磺酰基)苯甲酰胺(32mg，产率57％)为白色固体。ms(esi)m/e[m-h]:-685.0；1h nmr(500mhz,氘仿)δ8.00(d,j＝1.9hz,1h),7.88(dd,j＝8.1,1.8hz,1h),7.80(d,j＝8.0hz,1h),7.40(d,j＝1.3hz,1h),7.38(s,1h),7.32(dd,j＝9.0,7.1hz,1h),7.11(d,j＝8.5hz,1h),6.80(d,j＝2.5hz,1h),6.68(dd,j＝8.5,2.5hz,1h),5.40(s,2h),4.78(s,2h),3.42(s,3h),2.26(s,3h),2.14(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),2.01(s,1h),1.28(dt,j＝6.8,4.5hz,2h),1.18
–
1.12(m,2h)。
[0245]
实施例79
[0246]
3-((((((1-(2-氯-4-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲氧基)苯基)亚乙基)氨基)氧基)甲基)-4-氰基-n-(环丙基磺酰基)苯甲酰胺
[0247][0248]
参照实施例78，用环丙基磺酰胺代替甲基磺酰胺，制备得到目标产物。ms.713.0。1h nmr(500mhz,氘仿)δ7.99(d,j＝1.7hz,1h),7.88(dd,j＝8.1,1.8hz,1h),7.80(d,j＝8.0hz,1h),7.40(d,j＝1.3hz,1h),7.38(d,j＝0.6hz,1h),7.32(dd,j＝9.0,7.1hz,1h),7.12(d,j＝8.5hz,1h),6.80(d,j＝2.5hz,1h),6.68(dd,j＝8.5,2.6hz,1h),5.41(s,2h),4.78(s,2h),3.10(tt,j＝8.1,4.8hz,1h),2.27(s,3h),2.13(tt,j＝8.4,5.1hz,1h),2.01(s,1h),1.50
–
1.42(m,2h),1.30
–
1.26(m,2h),1.17(dddd,j＝13.1,8.4,6.2,3.1hz,4h)。
[0249]
实施例80-82
[0250]
参照实施例28的路线合成如下化合物。其中，在实施例91-99、105、109、112、114-116中，用3-三氟甲氧基苯甲醛替代实施例28中所用的2,6-二氯苯甲醛，在实施例117-122中用2-二氟甲氧基苯甲醛替代实施例28中所用的2,6-二氯苯甲醛，在实施例123中用2,6-二氯-4-氟苯甲醛替代实施例28中所用的2,6-二氯苯甲醛。在实施例80-123中，用下表中所列的起始原料1替代实施例28中所用的6-羟基-1-四氢萘酮；并且用下表所列的起始原料2替代实施例28中所用的3-溴甲基苯甲酸甲酯。其他操作步骤同制备实施例28。需要说明的是，下述起始原料1和起始原料2可商购获得，或者由商购原料通过本领域已知的反应，例如，溴代、氯代、还原、氧化等获得。
[0251]
[0252]
[0253]
[0254]
[0255]
[0256]
[0257]
[0258]
[0259][0260]
实施例124生物活性测试
[0261]
huh7细胞培养于含10％fbs的dmem培养液。细胞接种至10cm细胞培养皿。待增殖至约90％满时，以脂质体lipofectamine 2000(40μl)共转染人fxr真核表达质粒ex-t0601-m02(1.6μg)以及含fxr应答序列驱动的报告基因质粒fxr-luc(14.4μg)。操作步骤按照lipofectamine 2000说明书进行。转染次日，以无酚红dmem培养液(含5％charcoal treated fbs(活性碳处理fbs))接种至96孔细胞培养板，接种密度为每孔20000细胞，体积为每孔135μl。接种6h后细胞贴壁。溶解于dmso中的化合物以无酚红dmem培养液(含5％charcoal treated fbs)稀释20倍至10倍终浓度后加入细胞孔，每孔15μl，即化合物再次被稀释10倍达到终浓度。设置阳性对照为oca(10μm)，空白对照为0.5％dmso。完成加药后，细胞在37℃,5％co2培养箱中过夜培养(16h)。孵育完成后，弃培养液，每孔加入无血清无酚红dmem培养液35μl，每孔加入35μl，室温避光震荡10min后，用flexstation检测化学发光值。化合物的激动活性计算方法如下：效果％＝(化合物-空白对照)/(阳性对照-空白对照)
×
100％。化合物的ec
50
以graphpad prism 5.0拟合化合物的激动活性和化合物浓度的对数值获得。ec
50
值越低，说明活性越好。
[0262]
[0263]
[0264]
[0265][0266]
从上述结果中可以看出，本发明的绝大多数化合物对fxr激动的ec
50
达到1000nm以下，显示出了良好的fxr激动活性，实施例41-45、49、51、55、56、58、59对fxr激动的ec
50
甚至达到10nm以下，显示出极佳的fxr激动活性。
[0267]
总之，本发明化合物对fxr具有很好的激动活性，具有优异的体内外药效、药代性质，具备较佳的临床应用前景。
[0268]
尽管已根据各种实施例/实施方案描述了所要求保护的主题，但本领域技术人员将认识到，可在不脱离本发明精神的情况下进行各种修改/修饰、替换、删减和改变/变化。因此，所要求保护的主题的范围旨在仅由所附权利要求的范围限定，包括其等同物。