工程化ATRLP23模式识别受体及使用方法与流程

工程化atrlp23模式识别受体及使用方法1.相关申请的交叉引用2.本技术要求2019年6月27日提交的美国临时专利申请第62/867,327号的权益，该申请的全部内容在此通过引用并入本文。3.对作为文本文件提交的序列表的引用4.序列表的正式副本通过efs-web作为ascii格式化序列表以电子方式提交，文件名为070294-0169seqlst.txt，创建于2020年6月23日，大小为963千字节，并与说明书同时提交。包含在该ascii格式化文件中的序列表是说明书的一部分，并通过引用整体并入本文。发明领域5.本发明涉及植物抗病性和作物植物改良领域，特别涉及制备工程化植物抗病蛋白以及使用这样的工程化抗病蛋白增强作物植物对植物病害的抗性。6.发明背景7.据联合国估计，到2030年，世界人口预计将增加近10亿(联合国经济和社会事务部人口司(2017)“世界人口展望：2017年修订本，主要发现和进展表”，第esa/p/wp/248号工作文件，第1页(unitednations,departmentofeconomicandsocialaffairs,populationdivision(2017)“worldpopulationprospects:the2017revision,keyfindingsandadvancetables,”workingpaperno.esa/p/wp/248,p.1))。由于预测的世界人口的增加以及预测的可用于农业生产的土地的损失，农业科学家需要提高农业生产力，以跟上人类、牲畜、水产养殖生物和宠物对农产品的消耗的不断增长的需求。需要采用多种策略来提高农业生产力，其中可能包括改良的作物植物栽培品种和性状、新的和改良的农用化学品、改良的肥料和生物制品以及改良的作物生产系统。8.虽然合成农用化学品将持续在发达国家的集约化作物生产中发挥重要作用，但发展中国家的许多农民无法承担对其作物使用合成农用化学品的费用。此外，在发达国家，消费者要求可持续生产的食品。农业的可持续集约化将需要更多地使用遗传学解决方案而不是化学解决方案(例如合成杀虫剂)来保护作物免受病原体和害虫的侵害(jones等人(2014)philos.t.roy.soc.b369:20130087)。这样的遗传学解决方案包括，例如，已经通过天然存在的抗性(r)基因的基因渗入而培育成对病原体具有抗性的作物植物，所述天然存在的抗性(r)基因为植物提供针对植物病原体例如诸如细菌、卵菌、病毒、真菌和线虫的抗性。9.虽然r基因已经成功用于增强作物植物对植物病原体的抗性，但随着病原体进化而克服r基因提供的抗性，大多数r基因赋予植物的抗性并不持久。现代农业中对单一栽培的依赖促进了植物病原体的新的强分离株的快速出现，因为随着具有新r基因的栽培品种的释放，植物病原体经历了强选择压力(mcdonald&linde(2002)euphytica124:163-180)。因此，为了保持领先于快速进化的病原体，植物科学家不仅需要发现新的r基因并将其整合到作物植物中，而且还需要开发新的策略来增强作物的抗性。这种新策略可能涉及在病原体攻击后启动的植物信号转导途径的极早期阶段发挥作用的植物蛋白，例如植物用来检测病原体相关分子模式(pamp)的模式识别受体(prr)。10.发明简述11.本发明提供了用于制备工程化atrlp23蛋白的方法。atrlp23是一种受体样蛋白(rlp)，它是能够在植物中识别已知存在于细菌、真菌和卵菌中的病原体相关分子模式(pamp)的模式识别受体(prr)，所述病原体相关分子模式(pamp)源自坏死和乙烯诱导蛋白1(nep1)样蛋白家族的pamp。本发明的工程化atrlp23蛋白是合成蛋白的或人工(即非天然存在的)蛋白。在一些实施方案中，用于制备工程化atrlp23蛋白的方法包括制备具有atrlp23受体功能和源自受体样激酶(rlk)的激酶结构域的嵌合蛋白。特别地，所述方法包括制备包含氨基酸序列的多肽，所述多肽以可操作连接并以n末端到c末端的方向具有以下结构域：来自atrlp23的富亮氨酸重复序列(lrr)结构域或其衍生物，其能够在植物中识别源自nep1样蛋白(nlp)的病原体相关分子模式；超近膜(extra-juxtamembrane)(ejm)结构域；跨膜(tm)结构域；和源自rlk的激酶结构域。如果需要，多肽还可以包含信号肽(sp)结构域，其可操作地连接到lrr结构域的n末端。sp、ejm和tm结构域可以源自atrlp23或一种或多种其他prr，特别是一种或多种其他rlp。12.本发明还提供了用于制备编码本发明的工程化atrlp23蛋白的重组核酸分子的方法。在本发明的一些实施方案中，这样的方法涉及在体外合成编码本发明的工程化atrlp23蛋白的核酸分子。在其他实施方案中，所述方法涉及基因组编辑以在植物细胞中产生编码本发明的工程化atrlp23蛋白的基因核苷酸序列。又在其他实施方案中，所述方法涉及编码工程化atrlp23蛋白的核酸分子或序列的至少一部分的体外合成和基因组编辑二者。13.本发明还提供了产生对植物病原体具有增强的抗性的植物的方法，包括修饰植物细胞以表达本发明的工程化atrlp23蛋白。在一些实施方案中，所述方法包括通过将包含编码工程化atrlp23蛋白的核苷酸序列的核酸分子或序列引入植物细胞来修饰植物细胞，以及任选地将植物细胞再生为包含稳定掺入其基因组中的所述核酸分子或序列的植物，其中所述再生的植物包含对一种或多种植物病原体，特别是包含nlp的植物病原体，更特别是包含nlp的细菌、真菌和卵菌病原体的增强的抗性。在其他实施方案中，所述方法包括修饰植物细胞，通过使用基因组编辑方法在细胞基因组的特定位置引起单链或双链断裂来修饰植物或其至少一个细胞的基因组以包含含有编码工程化atrlp23蛋白的核苷酸序列的多核苷酸，由此产生包含该多核苷酸的植物，并且该植物包含对一种或多种植物病原体，特别是包含nlp的植物病原体，更特别是包含nlp的细菌、真菌和卵菌病原体的增强的抗性。14.还提供了在农作物生产中使用本发明的植物以限制由植物病原体引起的植物病害的方法。在一些实施方案中，所述方法包括种植种子、幼苗、块茎或其他植物部分，其中所述种子、幼苗、块茎或其他植物部分包含核酸分子，所述核酸分子包含编码本发明的工程化atrlp23的核苷酸序列。在一些其他实施方案中，所述方法包括种植种子、幼苗、块茎或其他植物部分，其中所述种子、幼苗、块茎或其他植物部分来自已经被修饰成能够表达至少一种本发明的工程化atrlp23的植物。所述方法还包括在有利于植物生长和发育的环境条件下种植植物，然后任选地从植物中收获至少一个种子、块茎、果实、花或其他的一个或多个植物部分。15.另外提供了工程化atrlp23蛋白和编码本发明的工程化atrlp23蛋白的核酸分子。进一步提供了包含本发明的一种或多种核酸分子的植物、植物部分、种子、果实、块茎、植物细胞、其他宿主细胞、表达盒和载体。附图说明16.图1是受体样蛋白(rlp)atrlp23(seqidno:2)和atrlp42(seqidno:4)、受体样激酶(rlk)atefr(seqidno:6)和atsobir1(seqidno:8)和嵌合受体atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:62)的蛋白结构域结构的图示。这些受体通常分别包含信号肽(sp)、富含富亮氨酸重复序列(lrr结构域)的质外体胞外结构域、质外体超近膜(ejm)结构域、跨膜(tm)结构域以及细胞质羧基末端延伸区(尾)或rlp或rlk的激酶结构域。17.图2是在用10μgzmubi::r-geco1.2::rbcs(seqidno:75)和10μgpuc19(seqidno:74)或可操作地连接到atrlp23-3xflag编码序列(seqidno:13)的2x35s ω启动子构建体(seqidno:72)瞬时转染的玉米原生质体中测量的钙爆发(calciumburst)的图示，所述atrlp23-3xflag编码序列(seqidno:13)可操作地连接到rbcs终止子(seqidno:71)。测量响应于1μmppnlp20(aimyswyfpkdspvtglghr，seqidno:63；通过用原生质体孵育缓冲液稀释100μm储备溶液制备)的荧光。每次测量均在384孔多孔板中使用来自120μl含有瞬时转染的0.32x106个玉米细胞的溶液的25μl等分试样进行。然后加入12.5μl的3μmppnlp20，然后立即监测样品的荧光，激发波长为556nm，发射波长为585nm。值是平均值和标准误差(n＝8)。18.图3是在用10μgzmubi::r-geco1.2::rbcs(seqidno:75)和10μg可操作地连接到2x35s ω启动子构建体和rbcs终止子的atrlp23-3xflag(seqidno:13)、atrlp23-ejm(eeee/adq-)-3xflag(seqidno:45)、atrlp23-ejmatrlp1-3xflag(seqidno:49)、atrlp23-ejmatrlp42-3xflag(seqidno:57)或atrlp23-ejmve1-3xflag(seqidno:53)中的任一种瞬时转染的玉米原生质体中测量的钙爆发的图示。测量响应于原生质体孵育缓冲液或1μmppnlp20(seqidno:63；通过用原生质体孵育缓冲液稀释100μm储备溶液制备)的荧光。每次测量均在96孔多孔板中使用来自120μl含有瞬时转染的0.32x106个玉米细胞的溶液的100μl等分试样进行。然后加入50μl的缓冲液或3μmppnlp20，然后立即监测样品的荧光，激发波长为556nm，发射波长为585nm。对于每次荧光测量，测量荧光相对于背景的瞬时增加，该背景被确定为缓冲液存在下的平均信号。从处理时刻开始测量荧光在40分钟内的总瞬时增加。值是平均值和标准误差(n＝8)。统计学显著性使用单向anova检验接着dunnett事后检验，通过与用atrlp23-3xflag 1μmppnlp20观察到的荧光的总瞬时增加进行比较，n.s.不显著，***p《0.001。19.图4是在用10μgzmubi::r-geco1.2::rbcs(seqidno:75)和10μgpuc19(seqidno:74)或以下atrlp23构建体中的任一种瞬时转染的玉米原生质体中测量的钙爆发的图示：atrlp23-3xflag(seqidno:13)、atrlp23-osxa21-3xflag(seqidno:21)、atrlp23-atefr-3xflag(seqidno:17)、atrlp23 tm-atefr-3xflag(seqidno:33)、atrlp23-atbak1-3xflag(seqidno:25)、atrlp23 tm-atbak1-3xflag(seqidno:37)、atrlp23-atsobir1-3xflag(seqidno:29)或atrlp23 tm-atsobir1-3xflag(seqidno:41)。所有atrlp23构建体均在可操作地连接的2x35s ω启动子构建体(seqidno:72)的控制下表达，并且还包含可操作地连接的rbcs终止子(seqidno:73)。测量响应于原生质体孵育缓冲液或1μmppnlp20(seqidno:63；通过用原生质体孵育缓冲液稀释100μm储备溶液制备)的荧光。每次测量均在384孔多孔板中使用来自120μl含有瞬时转染的0.32x106个玉米细胞的溶液的25μl等分试样进行。然后加入12.5μl的缓冲液或3μmppnlp20，然后立即监测样品的荧光，激发波长为556nm，发射波长为585nm。对于每次荧光测量，测量荧光相对于背景的瞬时增加，该背景确定为缓冲液存在下的平均信号。从处理时刻开始测量荧光在40分钟内的总瞬时增加。值为平均值(n＝8)。20.图5是在用10μgzmubi::脱辅基水母发光蛋白(apoaequorin)::rbcs(seqidno:76)和10μg包含atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:61)的构建体瞬时转染的玉米原生质体中测量的钙爆发的图示，所述构建体在可操作地连接的2x35s ω启动子构建体(seqidno:72)的控制下表达，并且还包含可操作地连接的rbcs终止子(seqidno:73)。测量响应于原生质体孵育缓冲液或1μmppnlp20(aimyswyfpkdspvtglghr，seqidno:63；通过用原生质体孵育缓冲液稀释100μm储备溶液制备)的发光。每次测量均在96孔多孔板中使用来自120μl含有瞬时转染的0.32x106个玉米细胞的溶液的100μl等分试样进行，并与1μm腔肠素一起孵育2小时。然后加入50μl的3μmppnlp20，然后立即监测样品的发光。值是平均值和标准误差(n＝8)。21.图6是在用10μgzmubi::脱辅基水母发光蛋白::rbcs(seqidno:76)和10μg以下构建体之一瞬时转染的玉米原生质体中测量的钙爆发的图示：atrlp23-ejmatrlp42-3xflag(seqidno:57)或atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:61)。两种构建体均在可操作地连接的2x35s ω启动子构建体(seqidno:72)的控制下表达，并且还包含可操作地连接的rbcs终止子(seqidno:73)。测量响应于原生质体孵育缓冲液或1μmppnlp20(seqidno:63)、cgnlp24b(seqidno:64)、fgnlp24c(seqidno:65)、fvnlp24a(seqidno:66)或smnlp24(seqidno:67)的发光。每次测量均在96孔多孔板中使用来自120μl含有瞬时转染的0.32x106个玉米细胞的溶液的100μl等分试样进行，并与1μm腔肠素一起孵育2小时。然后加入50μl缓冲液或3μmppnlp20、cgnlp24b、fgnlp24c、fvnlp24a或smnlp24溶液中的任一种，然后立即监测样品的发光。从处理时刻开始测量40分钟内发光的总瞬时增加。值是平均值和标准误差(n＝8)。统计学显著性通过使用单向anova检验接着dunnett事后检验与相应的缓冲液处理进行比较，*p《0.05，**p《0.01，***p《0.001。22.图7是在用10μgzmubi::脱辅基水母发光蛋白::rbcs(seqidno:76)和10μgatrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:61)瞬时转染的玉米原生质体中测量的钙爆发的图示，所述atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:61)在可操作地连接的2x35s ω启动子构建体(seqidno:72)的控制下表达，并且还包含可操作地连接的rbcs终止子(seqidno:73)。测量响应于原生质体孵育缓冲液或1μmppnlp20(seqidno:63)、smnlp24(seqidno:67)、afnlp24a(seqidno:68)、apnlp24a(seqidno:71)、afnlp24b(seqidno:69)或afnlp24c(seqidno:70)的发光。每次测量均在96孔多孔板中使用来自120μl含有瞬时转染的0.32x106个玉米细胞的溶液的100μl等分试样进行，并与1μm腔肠素一起孵育2小时。然后加入50μl缓冲液或3μmppnlp20、smnlp24、afnlp24a、apnlp24a、afnlp24b或afnlp24c溶液中的任一种，然后立即监测样品的发光。从处理时刻开始测量40分钟内发光的总瞬时增加。值是平均值和标准误差(n＝8)。统计学显著性通过使用单向anova检验接着dunnett事后检验与相应的缓冲液处理进行比较，***p《0.001。23.图8是在用10μg以下构建体之一瞬时转染的玉米原生质体中测量的钙爆发的图示：atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:61)或atrlp23-atpepr1-3xflag(seqidno:572)。两种构建体均在可操作地连接的2x35s ω启动子构建体(seqidno:72)和可操作地连接的rbcs终止子(seqidno:73)的控制下表达。测量响应于原生质体孵育缓冲液或smnlp24(seqidno:67)、cgnlp24b(seqidno:64)、fgnlp24c(seqidno:65)或fvnlp24a(seqidno:66)的发光(rlu)。每次测量均在96孔多孔板中使用来自120μl含有瞬时转染的0.32x106个玉米原生质体的溶液的100μl等分试样进行，并与1μm腔肠素一起孵育2小时。然后加入50μl缓冲液或3μmsmnlp24、cgnlp24b、fgnlp24c或fvnlp24a溶液中的任一种，然后立即监测样品的发光。从处理时刻开始测量40分钟内发光(rlu)的总瞬时增加。值是平均值和标准误差(n＝4)。通过伴随bonferroni进行的anova事后配对比较检验缓冲液和肽处理之间的统计学显著性。除了用fgnlp24a处理的atrlp2-atpepr1-3xflag以外，所有配对均显示p《0.001的统计学显著差异，其中p值《0.001。24.图9是使用表达atrlp23-ejmatrlp42-atefr构建体的温室种植的转基因玉米植物进行的秆腐病(diplodiastalkrot)测定结果的图示，所述构建体包含atrlp23的胞外结构域、atrlp42的ejm结构域、atefr的tm和胞质结构域。“事件1-10”是用构建体转化玉米而产生的十个单独的转基因事件。“转化种质”代表未转化的对照植物。误差条表示差异的标准误差。25.图10是使用表达atrlp23-ejmatrlp42-atrlp23-tm c末端构建体的温室种植的转基因玉米植物进行的秆腐病测定结果的图示，所述构建体包含atrlp23的胞外结构域、atrlp42的ejm结构域和atrlp23的tm和胞质结构域。“事件1-9”是用构建体转化玉米而产生的九个单独的转基因事件。“转化种质”代表未转化的对照植物。误差条表示差异的标准误差。26.图11是使用表达atrlp23-ejmatrlp42-tmatrlp23-atsobir1构建体的温室种植的转基因玉米植物进行的秆腐病测定结果的图示，所述构建体包含atrlp23的胞外结构域、atrlp42的ejm结构域和atrlp23的tm结构域和atsobir1的胞质结构域。“事件1-9”是用构建体转化玉米而产生的九个单独的转基因事件。“转化种质”代表未转化的对照植物。误差条表示差异的标准误差。27.序列表28.随附序列表中列出的核苷酸和氨基酸序列使用标准字母缩写表示核苷酸碱基，使用三字母代码表示氨基酸。核苷酸序列遵循从序列的5'端开始并向前(即，每行从左到右)行进到3'端的标准惯例。仅显示了每个核苷酸序列的一条链，但应理解互补链通过对被显示链的任何参考而包括在内。氨基酸序列遵循从序列的氨基末端开始并向前(即每行从左到右)行进到羧基末端的标准惯例。29.seqidno:1显示了来自拟南芥(arabidopsisthaliana)的atrlp23的编码区的核苷酸序列。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:1的核酸分子的3'端。注意atrlp23的天然终止密码子是tag。30.seqidno:2显示了由atrlp23编码的蛋白atrlp23的氨基酸序列。31.seqidno:3显示了来自拟南芥的atrlp42的编码区的核苷酸序列。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:3的核酸分子的3’端。注意atrlp23的天然终止密码子是taa。32.seqidno:4显示了由atrlp42编码的蛋白atrlp42的氨基酸序列。33.seqidno:5显示了来自拟南芥的atefr的编码区的核苷酸序列。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:5的核酸分子的3’端。注意atefr的天然终止密码子是tag。34.seqidno:6显示了由atefr编码的蛋白atefr的氨基酸序列。35.seqidno:7显示了来自拟南芥的atsobir1的编码区的核苷酸序列。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:7的核酸分子的3’端。注意atsobir1的天然终止密码子是tag。36.seqidno:8显示了由atsobir1编码的蛋白atsobir1的氨基酸序列。37.seqidno:9显示了来自番茄(solanumlycopersicum)的slve1的编码区的核苷酸序列。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:9的核酸分子的3’端。注意slve1的天然终止密码子是tga。38.seqidno:10显示了由slve1编码的蛋白slve1的氨基酸序列。39.seqidno:11显示了来自水稻(oryzasativa)的osxa21的编码区的核苷酸序列。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:11的核酸分子的3’端。注意osxa21的天然终止密码子是tga。40.seqidno:12显示了由osxa21编码的osxa21蛋白的氨基酸序列。41.seqidno:13显示了atrlp23-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。所述构建体包含编码atrlp23的第一核苷酸序列(核苷酸1-2670)，所述atrlp23包含质外体结构域、超近膜(ejm)结构域、跨膜(tm)结构域和胞质结构域，所述第一核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸的第二核苷酸序列(核苷酸2671-2673)，所述第二核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的核苷酸序列(核苷酸2674-2754)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:13的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。42.seqidno:14显示了由seqidno:13编码的atrlp23-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-3xflag蛋白包含atrlp23(氨基酸1-890)，atrlp23包含质外体、ejm、tm、胞质结构域，所述胞质结构域可操作地连接到连接氨基酸(氨基酸891)，所述连接氨基酸可操作地连接到3xflag肽(氨基酸892-918)。43.seqidno:15显示了atrlp23-atefr多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到第二核苷酸序列，所述第二核苷酸序列包含atefrtm结构域和atefr胞质结构域的两个部分中的第一个的编码序列(核苷酸2551-3304)、atefr内含子(核苷酸3305-3391)和第二部分即atefr胞质结构域的编码序列(核苷酸3392-3783)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:15的核酸分子的3’端。44.seqidno:16显示了由seqidno:15编码的atrlp23-atefr蛋白的氨基酸序列。atrlp23-atefr蛋白包含含有atrlp23质外体和ejm结构域的第一多肽(氨基酸1-850)，所述第一多肽可操作地连接到包含atefrtm和胞质结构域的第二多肽(氨基酸851-1232)。45.seqidno:17显示了atrlp23-atefr-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到第二核苷酸序列，所述第二核苷酸序列包含atefrtm结构域和atefr胞质结构域的两个部分中的第一个的编码序列(核苷酸2551-3304)、atefr内含子(核苷酸3305-3391)和第二部分即atefr胞质结构域的编码序列(核苷酸3392-3783)，所述第二核苷酸序列可操作地连接到编码接头的第三核苷酸序列(核苷酸3784-3789)，所述第三核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的第四核苷酸序列(核苷酸3790-3870)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:17的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。46.seqidno:18显示了由seqidno:17编码的atrlp23-atefr-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-atefr-3xflag蛋白包含含有atrlp23质外体和ejm结构域的第一多肽(氨基酸1-850)，所述第一多肽可操作地连接到包含atefrtm和胞质结构域的第二多肽(氨基酸851-1232)，所述第二多肽可操作地连接到接头二肽(氨基酸1233-1234)，所述接头二肽可操作地连接到3xflag肽(氨基酸1235-1261)。47.seqidno:19显示了atrlp23-osxa21多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到编码osxa21tm和胞质结构域的第二核苷酸序列(核苷酸2551-3675)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:19的核酸分子的3’端。48.seqidno:20显示了由seqidno:19编码的atrlp23-osxa21蛋白的氨基酸序列。atrlp23-osxa21蛋白包含含有atrlp23质外体和ejm结构域的第一多肽(氨基酸1-850)，所述第一多肽可操作地连接到包含osxa21tm和胞质结构域的第二多肽(氨基酸851-1225)。49.seqidno:21显示了atrlp23-osxa21-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到编码osxa21tm和胞质结构域的第二核苷酸序列(核苷酸2551-3675)，所述第二核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸的第三核苷酸序列(核苷酸3676-3678)，所述第三核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的第四核苷酸序列(核苷酸3679-3762)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:21的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。50.seqidno:22显示了由seqidno:21编码的atrlp23-osxa21-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-osxa21-3xflag蛋白包含含有atrlp23质外体和ejm结构域的第一多肽(氨基酸1-850)，所述第一多肽可操作地连接到包含osxa21tm和胞质结构域的第二多肽(氨基酸851-1225)，所述第二多肽可操作地连接到连接氨基酸(氨基酸1226)，所述连接氨基酸可操作地连接到3xflag肽(氨基酸1227-1253)。51.seqidno:23显示了atrlp23-atbak1多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到第二核苷酸序列，所述第二核苷酸序列包含atbak1tm结构域和atbak1胞质结构域的四个部分中的第一个的编码序列(核苷酸2551-2671)、第一atbak1内含子(核苷酸2672-2748)、atbak1胞质结构域的第二部分的编码序列(核苷酸2749-3090)、第二atbak1内含子(核苷酸3091-3187)、atbak1胞质结构域的第三部分的编码序列(核苷酸3188-3582)、第三atbak1内含子(核苷酸3583-3663)、atbak1胞质结构域的第四部分的编码序列(核苷酸3664-3984)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:23的核酸分子的3’端。52.seqidno:24显示了由seqidno:23编码的atrlp23-atbak1蛋白的氨基酸序列。atrlp23-atbak1蛋白包含含有atrlp23质外体和ejm结构域的第一多肽(氨基酸1-850)，所述第一多肽可操作地连接到包含atbak1tm和胞质结构域的第二多肽(氨基酸851-1242)。53.seqidno:25显示了atrlp23-atbak1-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。所述构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到第二核苷酸序列，所述第二核苷酸序列包含atbak1tm结构域和atbak1胞质结构域的四个部分中的第一个的编码序列(核苷酸2551-2671)、第一atbak1内含子(核苷酸2672-2748)、atbak1胞质结构域的第二部分的编码序列(核苷酸2749-3090)、第二atbak1内含子(核苷酸3091-3187)、atbak1胞质结构域的第三部分的编码序列(核苷酸3188-3582)、第三atbak1内含子(核苷酸3583-3663)、atbak1胞质结构域的第四部分的编码序列(核苷酸3664-3984)，所述第二核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸的第三核苷酸序列(核苷酸3985-3987)，所述第三核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的第四核苷酸序列(核苷酸3988-4068)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:25的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。54.seqidno:26显示了由seqidno:25编码的atrlp23-atbak1-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-atbak1-3xflag蛋白包含含有atrlp23质外体和ejm结构域的第一多肽(氨基酸1-850)，所述第一多肽可操作地连接到包含atbak1tm和胞质结构域的第二多肽(氨基酸851-1243)，所述第二多肽可操作地连接到连接氨基酸(氨基酸1244)，所述连接氨基酸可操作地连接到3xflag肽(氨基酸1245-1271)。55.seqidno:27显示了atrlp23-atsobir1多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到编码atsobir1tm和胞质结构域的第二核苷酸序列(核苷酸2551-3624)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:27的核酸分子的3’端。56.seqidno:28显示了由seqidno:27编码的atrlp23-atsobir1蛋白的氨基酸序列。atrlp23-atsobir1蛋白包含含有atrlp23质外体和ejm结构域的第一多肽(氨基酸1-850)，所述第一多肽可操作地连接到包含atsobir1tm和胞质结构域的第二多肽(氨基酸851-1208)。57.seqidno:29显示了atrlp23-atsobir1-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到编码atsobir1tm和胞质结构域的第二核苷酸序列(核苷酸2551-3624)，所述第二核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸的第三核苷酸序列(核苷酸3625-3627)，所述第三核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的第四核苷酸序列(核苷酸3628-3708)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:29的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。873)，所述第一多肽可操作地连接到包含atbak1胞质结构域的第二多肽(氨基酸874-1239)。65.seqidno:37显示了atrlp23 tm-atbak1-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体、ejm和tm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2619)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到第二核苷酸序列，所述第二核苷酸序列包含atbak1胞质结构域的四个部分中的第一个的编码序列(核苷酸2620-2659)、第一atbak1内含子(核苷酸2660-2736)、atbak1胞质结构域的第二部分的编码序列(核苷酸2737-3078)、第二atbak1内含子(核苷酸3079-3175)、atbak1胞质结构域的第三部分的编码序列(核苷酸3176-3570)、第三atbak1内含子(核苷酸3571-3651)、atbak1胞质结构域的第四部分的编码序列(核苷酸3652-3972)，所述第二核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸的第三核苷酸序列(核苷酸3973-3975)，所述第三核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的第四核苷酸序列(核苷酸3976-4056)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:37的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。66.seqidno:38显示了由seqidno:37编码的atrlp23 tm-atbak1-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23 tm-atbak1-3xflag蛋白包含含有atrlp23质外体、ejm和tm结构域的第一多肽(氨基酸1-873)，所述第一多肽可操作地连接到包含atbak1胞质结构域的第二多肽(氨基酸874-1239)，所述第二多肽可操作地连接到连接氨基酸(氨基酸1240)，所述连接氨基酸可操作地连接到3xflag肽(氨基酸1241-1267)。67.seqidno:39显示了atrlp23 tm-atsobir1多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体、ejm和tm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2619)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到编码atsobir1胞质结构域的第二核苷酸序列(核苷酸2620-3615)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:39的核酸分子的3’端。68.seqidno:40显示了由seqidno:39编码的atrlp23 tm-atsobir1蛋白的氨基酸序列。atrlp23 tm-atsobir1蛋白包含含有atrlp23质外体、ejm和tm结构域的第一多肽(氨基酸1-873)，所述第一多肽可操作地连接到包含atsobir1胞质结构域的第二多肽(氨基酸874-1205)。69.seqidno:41显示了atrlp23 tm-atsobir1-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。所述构建体包含编码atrlp23的质外体、ejm和tm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2619)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到编码atsobir1胞质结构域的第二核苷酸序列(核苷酸2620-3615)，所述第二核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸的第三核苷酸序列(核苷酸3616-3618)，所述第三核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的第四核苷酸序列(核苷酸3619-3799)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:41的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。70.seqidno:42显示了由seqidno:41编码的atrlp23 tm-atsobir1-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23 tm-atsobir1-3xflag蛋白包含含有atrlp23质外体、ejm和tm结构域的第一多肽(氨基酸1-873)，所述第一多肽可操作地连接到包含atsobir1胞质结构域的第二多肽(氨基酸874-1205)，所述第二多肽可操作地连接到连接氨基酸(氨基酸1206)，所述连接氨基酸可操作地连接到3xflag肽(氨基酸1207-1233)。71.seqidno:43显示了atrlp23-ejm(eeee/adq-)多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体以可操作连接包含编码atrlp23质外体结构域、修饰的atrlp23ejm结构域、atrlp23tm结构域和atrlp23胞质结构域的核苷酸序列。相对于野生型atrlp23ejm结构域的氨基酸序列，修饰的atrlp23ejm结构域包括在野生型atrlp23的氨基酸841处用d置换e、在氨基酸843处用q置换e，以及在氨基酸844-846处用ev置换eev。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:43的核酸分子的3’端。72.seqidno:44显示了由seqidno:43编码的atrlp23-ejm(eeee/adq-)蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejm(eeee/adq-)蛋白包含atrlp23质外体结构域、修饰的atrlp23ejm结构域、atrlp23tm结构域和atrlp23胞质结构域。相对于野生型atrlp23ejm结构域的氨基酸序列，修饰的atrlp23ejm结构域包括在野生型atrlp23的氨基酸841处用d置换e、在氨基酸843处用q置换e，以及在氨基酸844-846处用ev置换eev。73.seqidno:45显示了atrlp23-ejm(eeee/adq-)-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含seqidno:43的核苷酸序列(核苷酸1-2667)，所述seqidno:43的核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸的核苷酸序列(核苷酸2668-2670)，所述编码连接氨基酸的核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的核苷酸序列(核苷酸2671-2751)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:45的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。74.seqidno:46显示了由seqidno:45编码的atrlp23-ejm(eeee/adq-)-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejm(eeee/adq-)-3xflag蛋白包含seqidno:44所示的氨基酸序列(氨基酸1-889)，所述seqidno:44所示的氨基酸序列可操作地连接到连接氨基酸(氨基酸890)，所述连接氨基酸可操作地连接到3xflag肽(氨基酸891-917)。75.seqidno:47显示了atrlp23-ejmatrlp1多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体以可操作连接包含编码atrlp23质外体结构域的核苷酸序列(核苷酸1-2496)、编码atrlp1ejm结构域的核苷酸序列(核苷酸2497-2544)、编码atrlp23tm和胞质结构域的核苷酸序列(核苷酸2545-2664)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:47的核酸分子的3’端。76.seqidno:48显示了由seqidno:47编码的atrlp23-ejmatrlp1蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejmatrlp1蛋白包含atrlp23质外体结构域(氨基酸1-832)、atrlp1ejm结构域(氨基酸833-848)和atrlp23tm和胞质结构域(氨基酸849-888)。77.seqidno:49显示了atrlp23-ejmatrlp1-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含seqidno:47的核苷酸序列(核苷酸1-2664)，所述seqidno:47的核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸的核苷酸序列(核苷酸2665-2667)，所述编码连接氨基酸的核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的核苷酸序列(核苷酸2668-2748)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:49的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。78.seqidno:50显示了由seqidno:49编码的atrlp23-ejmatrlp1-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejmatrlp1-3xflag蛋白包含seqidno:48所示的氨基酸序列(氨基酸1-888)，所述seqidno:48所示的氨基酸序列可操作地连接到连接氨基酸(氨基酸889)，所述连接氨基酸可操作地连接到3xflag肽(氨基酸890-916)。79.seqidno:51显示了atrlp23-ejmve1多核苷酸构建体的核苷酸序列。所述构建体以可操作连接包含编码atrlp23质外体结构域的核苷酸序列(核苷酸1-2496)、编码slve1ejm结构域的核苷酸序列(核苷酸2497-2547)、编码atrlp23tm和胞质结构域的核苷酸序列(核苷酸2548-2667)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:51的核酸分子的3’端。80.seqidno:52显示了由seqidno:51编码的atrlp23-ejmve1蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejmve1蛋白包含atrlp23质外体结构域(氨基酸1-832)、slve1ejm结构域(氨基酸833-849)以及atrlp23tm和胞质结构域(氨基酸850-889)。81.seqidno:53显示了atrlp23-ejmve1-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含seqidno:51的核苷酸序列(核苷酸1-2667)，所述seqidno:51的核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸的核苷酸序列(核苷酸2668-2670)，所述编码连接氨基酸的核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的核苷酸序列(核苷酸2671-2751)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:53的核酸分子的3’端。注意到在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。82.seqidno:54显示了由seqidno:53编码的atrlp23-ejmve1-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejmve1-3xflag蛋白包含seqidno:52所示的氨基酸序列(氨基酸1-889)，所述seqidno:52所示的氨基酸序列可操作地连接到连接氨基酸(氨基酸890)，所述连接氨基酸可操作地连接到3xflag肽(氨基酸891-917)。83.seqidno:55显示了atrlp23-ejmatrlp42多核苷酸构建体的核苷酸序列。所述构建体以可操作连接包含编码atrlp23质外体结构域的核苷酸序列(核苷酸1-2496)、编码atrlp42ejm结构域的核苷酸序列(核苷酸2497-2544)、编码atrlp23tm和胞质结构域的核苷酸序列(核苷酸2545-2664)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:55的核酸分子的3’端。84.seqidno:56显示了由seqidno:55编码的atrlp23-ejmatrlp42蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejmatrlp42蛋白包含atrlp23质外体结构域(氨基酸1-832)、atrlp42ejm结构域(氨基酸833-848)和atrlp23tm和胞质结构域(氨基酸849-888)。85.seqidno:57显示了atrlp23-ejmatrlp42-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含seqidno:55的核苷酸序列(核苷酸1-2664)，所述seqidno:55的核苷酸序列可操作地连接到编码连接氨基酸核苷酸序列(核苷酸2665-2667)，所述编码连接氨基酸核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的核苷酸序列(核苷酸2668-2748)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:57的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。86.seqidno:58显示了由seqidno:57编码的atrlp23-ejmatrlp42-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejmatrlp42-3xflag蛋白包含seqidno:56所示的氨基酸序列(氨基酸1-888)，所述seqidno:56所示的氨基酸序列可操作地连接到连接氨基酸(氨基酸889)，所述连接氨基酸可操作地连接到3xflag肽(氨基酸890-916)。87.seqidno:59显示了atrlp23-ejmatrlp42-atefr多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体以可操作连接包含编码atrlp23质外体结构域的核苷酸序列(核苷酸1-2496)、编码atrlp42ejm结构域的核苷酸序列(核苷酸2497-2544)、编码atrlp23tm和胞质结构域的两个部分中的第一部分的核苷酸序列(核苷酸2545-3298)、atefr内含子(核苷酸3299-3385)和编码胞质结构域的第二部分的核苷酸序列(核苷酸3386-3777)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:59的核酸分子的3’端。88.seqidno:60显示了由seqidno:59编码的atrlp23-ejmatrlp42-atefr蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejmatrlp42-atefr蛋白包含atrlp23质外体结构域(氨基酸1-832)、atrlp42ejm结构域(氨基酸833-848)以及atefrtm和胞质结构域(氨基酸849-1230)。89.seqidno:61显示了atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。所述构建体包含seqidno:59的核苷酸序列(核苷酸1-3777)，所述seqidno:59的核苷酸序列可操作地连接到编码接头二肽的核苷酸序列(核苷酸3778-3783)，所述编码接头二肽的核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的核苷酸序列(核苷酸3784-3864)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:61的核酸分子的3’端。注意在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。90.seqidno:62显示了由seqidno:61编码的atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag蛋白包含seqidno:60所示的氨基酸序列(氨基酸1-1230)，所述seqidno:60所示的氨基酸序列可操作地连接到接头二肽(氨基酸1231-1232)，所述接头二肽可操作地连接到3xflag肽(氨基酸1233-1259)。91.seqidno:63显示了来自寄生疫霉(phytophthoraparasitica)的ppnlp20肽的氨基酸序列。92.seqidno:64显示了来自禾生炭疽菌(colletotrichumgraminicola)m1.001的cgnlp24b肽的氨基酸序列。93.seqidno:65显示了来自禾谷镰刀菌(fusariumgraminearum)ph-1的fgnlp24c肽的氨基酸序列。94.seqidno:66显示了来自轮状镰刀菌(fusariumverticillioides)7600的fvnlp24a肽的氨基酸序列。95.seqidno:67显示了来自玉米狭壳柱孢菌(stenocarpellamaydis)a1-1的smnlp24肽的氨基酸序列。96.seqidno:68显示了来自黄曲霉(aspergillusflavus)nrrl3357的afnlp24a肽的氨基酸序列。97.seqidno:69显示了来自黄曲霉nrrl3357的afnlp24b肽的氨基酸序列。98.seqidno:70显示了来自黄曲霉nrrl3357的afnlp24c肽的氨基酸序列。99.seqidno:71显示了来自寄生曲霉(aspergillusparasiticus)su-1的apnlp24a肽的氨基酸序列。100.seqidno:72显示了2x35s 欧米加(ω)启动子构建体的核苷酸序列。该构建体以可操作连接包含两个拷贝的花椰菜花叶病毒35s(camv35s)启动子(核苷酸1-327和328-653)和来自烟草花叶病毒的5’‑非翻译区(utr)欧米加(ω)区(核苷酸627-828)。101.seqidno:73显示了来自豌豆(pisumsativum)的小亚基二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶e9基因的3'utr的核苷酸序列(本文称为“rbcs终止区”、“rbcs终止子”或简称“rbcs”)。102.seqidno:74显示了环状puc19载体的核苷酸序列。103.seqidno:75显示了环状zmubi::r-geco1.2::rbcs载体构建体的核苷酸序列。该构建体以可操作的连接包含玉米(zeamays)泛素启动子(zmubi)(核苷酸5-899)、玉米泛素5'-utr的两个部分中的第一个(核苷酸900-981)、存在于玉米泛素5’‑utr内的该相同位置的来自玉米泛素基因的内含子(核苷酸982-1991)、和玉米泛素5'-utr的第二部分(核苷酸1992-1993)、r-geco1.2的编码序列(核苷酸1994-3247)和rbcs终止区(核苷酸3252-3893)。104.seqidno:76显示了环状zmubi::水母发光蛋白(aequorin)::rbcs载体构建体的核苷酸序列。该构建体以可操作连接包含玉米泛素启动子(zmubi)(核苷酸5-899)、玉米泛素5'-utr的两个部分中的第一个(核苷酸900-981)、存在于玉米泛素5’‑utr内的该相同位置的来自玉米泛素基因的内含子(核苷酸982-1991)和玉米泛素5'-utr的第二部分(核苷酸1992-1993)、水母发光蛋白的编码序列(核苷酸1994-2584)和rbcs终止区(核苷酸2589-3230)。105.seqidno:77-240和561-563中的每一个显示了来自来自拟南芥、蒺藜苜蓿(medicagotruncatula)、水稻或番茄的植物受体样激酶(rlk)的激酶结构域的氨基酸序列，其可以如本文别处所述用于本发明的方法和组合物中。在以下对这些序列中的每一个的描述中，rlk亚组(如果已指定或以其他方式已知)和rlk的每个序列来源的植物物种都提供在括号中。106.seqidno:77显示了来自由基因座at1g01740编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rlck；拟南芥)。107.seqidno:78显示了来自由基因座at1g80640编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rlck；拟南芥)。108.seqidno:79显示了来自由基因座at3g59350编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rlck；拟南芥)。109.seqidno:80显示了来自由基因座at4g35230编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rlck；拟南芥)。110.seqidno:81显示了来自由基因座at5g13160编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rlck；拟南芥)。111.seqidno:82显示了来自由基因座at5g57670编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rlck；拟南芥)。112.seqidno:83显示了来自由基因座at5g58940编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rlck；拟南芥)。113.seqidno:84显示了来自由基因座at2g39180编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(cr4l；拟南芥)。114.seqidno:85显示了来自由基因座loc_os08g01830编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(cr4l；水稻)。115.seqidno:86显示了来自由基因座medtr1g064560编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(cr4l；蒺藜苜蓿)。116.seqidno:87显示了来自由基因座solyc09g007750.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(cr4l；番茄)。117.seqidno:88显示了来自由基因座solyc07g049180.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lysm；番茄)。118.seqidno:89显示了来自由基因座at3g24550编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(perk；拟南芥)。119.seqidno:90显示了来自由基因座loc_os03g16260编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(perk；水稻)。120.seqidno:91显示了来自由基因座loc_os05g12680编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(perk；水稻)。121.seqidno:92显示了来自由基因座medtr5g034210编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(perk；蒺藜苜蓿)。122.seqidno:93显示了来自由基因座medtr6g088610编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(perk；蒺藜苜蓿)。123.seqidno:94显示了来自由基因座solyc10g051330.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(perk；番茄)。124.seqidno:95显示了来自由基因座solyc12g007110.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(perk；番茄)。125.seqidno:96显示了来自由基因座at1g11050编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rkf3；拟南芥)。126.seqidno:97显示了来自由基因座loc_os05g34950编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rkf3；水稻)。127.seqidno:98显示了来自由基因座medtr2g006910编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rkf3；蒺藜苜蓿)。128.seqidno:99显示了来自由基因座solyc01g104050.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(rkf3；番茄)。129.seqidno:100显示了来自由基因座at3g28040编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viia；拟南芥)。130.seqidno:101显示了来自由基因座loc_os01g72700编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viia；水稻)。131.seqidno:102显示了来自由基因座medtr7g022160v2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viia；蒺藜苜蓿)。132.seqidno:103显示了来自由基因座solyc09g098290.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viia；番茄)。133.seqidno:104显示了来自由基因座at1g66980编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrk10l-2/gdpd；拟南芥)。134.seqidno:105显示了来自由基因座at1g49730编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(urk；拟南芥)。135.seqidno:106显示了来自由基因座medtr3g075440编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(未指定；蒺藜苜蓿)。136.seqidno:107显示了来自由基因座at1g21250编码的rlk蛋白(wak1)的激酶结构域的氨基酸序列(wak；拟南芥)。137.seqidno:108显示了来自由基因座loc_os04g51040编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak；水稻)。138.seqidno:109显示了来自由基因座loc_os04g51050编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak5；水稻)。139.seqidno:110显示了来自由基因座medtr1g010250编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak；蒺藜苜蓿)。140.seqidno:111显示了来自由基因座medtr1g027670编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak；蒺藜苜蓿)。141.seqidno:112显示了来自由基因座medtr6g083020编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak；蒺藜苜蓿)。142.seqidno:113显示了来自由基因座osxa21编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr；水稻)。143.seqidno:114显示了来自由基因座solyc09g015240.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak；番茄)。144.seqidno:115显示了来自由基因座solyc11g072140.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak；番茄)。145.seqidno:116显示了来自由基因座at1g18390v2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrk10l-1；拟南芥)。146.seqidno:117显示了来自由基因座at5g38210v2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrk10l-1；拟南芥)。147.seqidno:118显示了来自由基因座solyc02g086210.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrk10l-2；番茄)。148.seqidno:119显示了来自由基因座medtr7g082470v2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak；蒺藜苜蓿)。149.seqidno:120显示了来自由基因座solyc03g119240.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak；番茄)。150.seqidno:121显示了来自由基因座at1g66930v2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrk10l-2/wak；拟南芥)。151.seqidno:122显示了来自由基因座loc_os01g49614编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrk10l-2/wak；水稻)。152.seqidno:123显示了来自由基因座at4g23190编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(duf26-ib；拟南芥)。153.seqidno:124显示了来自由基因座medtr1g105650编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(duf26-ib；蒺藜苜蓿)。154.seqidno:125显示了来自由基因座solyc02g080040.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(duf26-ib；番茄)。155.seqidno:126显示了来自由基因座loc_os07g35310编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(duf26-ig；水稻)。156.seqidno:127显示了来自由基因座loc_os01g04409编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(wak；水稻)。157.seqidno:128显示了来自由基因座at1g52310编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(c-lec；拟南芥)。158.seqidno:129显示了来自由基因座loc_os01g01410编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(c-lec；水稻)。159.seqidno:130显示了来自由基因座medtr2g043380编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(c-lec；蒺藜苜蓿)。160.seqidno:131显示了来自由基因座solyc02g068370.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(c-lec；番茄)。161.seqidno:132显示了来自由基因座at4g02010v2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；拟南芥)。162.seqidno:133显示了来自由基因座at5g56890编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；拟南芥)。163.seqidno:134显示了来自由基因座loc_os01g14932编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；水稻)。164.seqidno:135显示了来自由基因座loc_os01g51290编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；水稻)。165.seqidno:136显示了来自由基因座loc_os05g11750编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；水稻)。166.seqidno:137显示了来自由基因座loc_os05g33080编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；水稻)。167.seqidno:138显示了来自由基因座medtr1g082580编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；蒺藜苜蓿)。168.seqidno:139显示了来自由基因座medtr2g039290编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；蒺藜苜蓿)。169.seqidno:140显示了来自由基因座medtr2g084120编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；蒺藜苜蓿)。170.seqidno:141显示了来自由基因座medtr7g109670编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；蒺藜苜蓿)。171.seqidno:142显示了来自由基因座solyc01g079340.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；番茄)。172.seqidno:143显示了来自由基因座solyc07g039340.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；番茄)。173.seqidno:144显示了来自由基因座solyc07g055180.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(伸展蛋白；番茄)。174.seqidno:145显示了来自由基因座at1g65790编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-1a/g-lec；拟南芥)。175.seqidno:146显示了来自由基因座at2g41890编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-3/g-lec；拟南芥)。176.seqidno:147显示了来自由基因座at4g00340编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-2b/g-lec；拟南芥)。177.seqidno:148显示了来自由基因座loc_os01g45520编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-2b/g-lec；水稻)。178.seqidno:149显示了来自由基因座loc_os03g35600编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-1a/g-lec；水稻)。179.seqidno:150显示了来自由基因座loc_os07g36780编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-2b/g-lec；水稻)。180.seqidno:151显示了来自由基因座medtr0280s0040编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-2b/g-lec；蒺藜苜蓿)。181.seqidno:152显示了来自由基因座medtr4g091670编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-1a/g-lec；蒺藜苜蓿)。182.seqidno:153显示了来自由基因座medtr7g092050编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-3/g-lec；蒺藜苜蓿)。183.seqidno:154显示了来自由基因座medtr8g030500编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-2b/g-lec；蒺藜苜蓿)。184.seqidno:155显示了来自由基因座solyc01g094830.2v2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-2b/g-lec；番茄)。185.seqidno:156显示了来自由基因座solyc02g079590.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-1a/g-lec；番茄)。186.seqidno:157显示了来自由基因座solyc03g063650.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(sd-3/g-lec；番茄)。187.seqidno:158显示了来自由基因座at2g31880编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(未指定；拟南芥)，所述基因座at2g31880是编码atsobir1的基因座。全长atsobir1氨基酸序列在seqidno:8中显示。188.seqidno:159显示了来自由基因座loc_os01g72990编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-1；水稻)。189.seqidno:160显示了来自由基因座loc_os05g40770编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-1；水稻)。190.seqidno:161显示了来自由基因座loc_os12g10740编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-1；水稻)。191.seqidno:162显示了来自由基因座medtr3g062590编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-1；蒺藜苜蓿)。192.seqidno:163显示了来自由基因座medtr8g070880编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-1；蒺藜苜蓿)。193.seqidno:164显示了来自由基因座at3g14840编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-2；拟南芥)。194.seqidno:165显示了来自由基因座loc_os09g17630编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-2；水稻)。195.seqidno:166显示了来自由基因座loc_os12g41710编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-2；水稻)。196.seqidno:167显示了来自由基因座medtr2g075010编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-2；蒺藜苜蓿)。197.seqidno:168显示了来自由基因座solyc12g014350.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-viii-2；番茄)。198.seqidno:169显示了来自由基因座at3g51550编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(crrlk1l-1；拟南芥)。199.seqidno:170显示了来自由基因座loc_os03g21540编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(crrlk1l-1；水稻)。200.seqidno:171显示了来自由基因座medtr7g073660编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(crrlk1l-1；蒺藜苜蓿)。201.seqidno:172显示了来自由基因座at3g08870编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(l-lec；拟南芥)。202.seqidno:173显示了来自由基因座at3g59700编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(l-lec；拟南芥)。203.seqidno:174显示了来自由基因座loc_os07g03830编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(l-lec；水稻)。204.seqidno:175显示了来自由基因座medtr7g062990编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(l-lec；蒺藜苜蓿)。205.seqidno:176显示了来自由基因座solyc05g053010.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(l-lec；番茄)。206.seqidno:177显示了来自由基因座solyc06g009550.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(crrlk1l1；番茄)。207.seqidno:178显示了来自由基因座at1g53730编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-v；拟南芥)。208.seqidno:179显示了来自由基因座loc_os03g08550编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-v；水稻)。209.seqidno:180显示了来自由基因座medtr7g117520编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-v；蒺藜苜蓿)。210.seqidno:181显示了来自由基因座solyc03g123740.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-v；番茄)。211.seqidno:182显示了来自由基因座at5g38280编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrk10l-2/奇异果甜蛋白；拟南芥)。212.seqidno:183显示了来自由基因座at1g48480编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-iii；拟南芥)。213.seqidno:184显示了来自由基因座loc_os03g50450编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-iii；水稻)。214.seqidno:185显示了来自由基因座medtr8g107470编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-iii；蒺藜苜蓿)。215.seqidno:186显示了来自由基因座solyc03g118510.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-iii；番茄)。216.seqidno:187显示了来自由基因座loc_os06g18000编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(未指定；水稻)。217.seqidno:188显示了来自由基因座at3g47090编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xii；拟南芥)。218.seqidno:189显示了来自由基因座at5g20480编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xii-atefr；拟南芥)，所述基因座at5g20480是编码atefr的基因座。全长atefr氨基酸序列在seqidno:6中显示。219.seqidno:190显示了来自由基因座loc_os12g42520编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xii；水稻)。220.seqidno:191显示了来自由基因座medtr5g019070v2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xii；蒺藜苜蓿)。221.seqidno:192显示了来自由基因座medtr5g044680编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xii；蒺藜苜蓿)。222.seqidno:193显示了来自由基因座solyc03g019980.1v2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xii；番茄)。223.seqidno:194显示了来自由基因座solyc06g076910.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xii；番茄)。224.seqidno:195显示了来自由基因座at2g16250编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xiv；拟南芥)。225.seqidno:196显示了来自由基因座loc_os03g51440编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xiv；水稻)。226.seqidno:197显示了来自由基因座medtr3g116640编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xiv；蒺藜苜蓿)。227.seqidno:198显示了来自由基因座solyc01g109650.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xiv；番茄)。228.seqidno:199显示了来自由基因座at3g46420编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ia；拟南芥)。229.seqidno:200显示了来自由基因座loc_os05g44970编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ia；水稻)。230.seqidno:201显示了来自由基因座medtr8g015340编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ia；蒺藜苜蓿)。231.seqidno:202显示了来自由基因座solyc03g121230.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ia；番茄)。232.seqidno:203显示了来自由基因座at4g33430.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ii；拟南芥)。233.seqidno:204显示了来自由基因座loc_os08g07760编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ii；水稻)。234.seqidno:205显示了来自由基因座medtr2g008360编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ii；蒺藜苜蓿)。235.seqidno:206显示了来自由基因座solyc04g039730.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ii；番茄)。236.seqidno:207显示了来自由基因座solyc10g047140.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ii；番茄)。237.seqidno:208显示了来自由基因座at2g45340编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-iv；拟南芥)。238.seqidno:209显示了来自由基因座loc_os06g04370编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-iv；水稻)。239.seqidno:210显示了来自由基因座medtr3g071480编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-iv；蒺藜苜蓿)。240.seqidno:211显示了来自由基因座medtr6g060230编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-iv；蒺藜苜蓿)。241.seqidno:212显示了来自由基因座solyc01g091230.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-iv；番茄)。242.seqidno:213显示了来自由基因座at1g66150编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ix；拟南芥)。243.seqidno:214显示了来自由基因座loc_os03g50810编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ix；水稻)。244.seqidno:215显示了来自由基因座medtr5g077430编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ix；蒺藜苜蓿)。245.seqidno:216显示了来自由基因座solyc09g092460.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ix；番茄)。246.seqidno:217显示了来自由基因座solyc11g006040.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-ix；番茄)。247.seqidno:218显示了来自由基因座at2g40270编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-vi；拟南芥)。248.seqidno:219显示了来自由基因座at5g07150编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-vi；拟南芥)。249.seqidno:220显示了来自由基因座loc_os03g18370编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-vi；水稻)。250.seqidno:221显示了来自由基因座solyc06g051030.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-vi；番茄)。251.seqidno:222显示了来自由基因座at4g39400编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xb；拟南芥)。252.seqidno:223显示了来自由基因座loc_os09g12240编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xb；水稻)。253.seqidno:224显示了来自由基因座medtr3g095100编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xb；蒺藜苜蓿)。254.seqidno:225显示了来自由基因座solyc04g051510.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xb；番茄)。255.seqidno:226显示了来自由基因座at1g75820编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xi；拟南芥)。256.seqidno:227显示了来自由基因座loc_os03g56270编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xi；水稻)。257.seqidno:228显示了来自由基因座medtr4g070970编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xi；蒺藜苜蓿)。258.seqidno:229显示了来自由基因座solyc04g081590.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xi；番茄)。259.seqidno:230显示了来自由基因座solyc06g071810.1编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xv；番茄)。260.seqidno:231显示了来自由编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列基因座loc_os04g59320(urk-i；水稻)。261.seqidno:232显示了来自由基因座medtr4g085810编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(urk-i；蒺藜苜蓿)。262.seqidno:233显示了来自由基因座solyc01g108000.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(urk-i；番茄)。263.seqidno:234显示了来自由基因座at2g26330编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xiiib；拟南芥)。264.seqidno:235显示了来自由基因座loc_os02g53720编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xiiib；水稻)。265.seqidno:236显示了来自由基因座medtr1g015530编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xiiib；蒺藜苜蓿)。266.seqidno:237显示了来自由基因座solyc08g061560.2编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lrr-xiiib；番茄)。267.seqidno:238显示了来自由基因座at3g21630编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lysm-i；拟南芥)。268.seqidno:239显示了来自由基因座loc_os08g42580编码的rlk蛋白(oscerk1)的激酶结构域的氨基酸序列(lysm-i；水稻)。269.seqidno:240显示了来自由基因座medtr3g080050编码的rlk蛋白的激酶结构域的氨基酸序列(lysm-i；蒺藜苜蓿)。270.seqidno:241-390、541-547和564-566中的每一个显示了来自拟南芥、蒺藜苜蓿、水稻或番茄的植物受体样激酶(rlk)的超近膜(ejm)结构域的氨基酸序列，其可以如本文别处所述用于本发明的方法和组合物中。271.seqidno:241显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g062990编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。272.seqidno:242显示了来自由水稻的基因座loc_os07g03830编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。273.seqidno:243显示了来自由拟南芥的基因座at3g08870编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。274.seqidno:244显示了来自由水稻的基因座loc_os03g35600编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。275.seqidno:245显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr4g091670编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。276.seqidno:246显示了来自由拟南芥的基因座at1g65790编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。277.seqidno:247显示了来自由水稻的基因座loc_os07g36780编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。278.seqidno:248显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr0280s0040编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。279.seqidno:249显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr8g030500编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。280.seqidno:250显示了来自由水稻的基因座loc_os05g11750编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。281.seqidno:251显示了来自由拟南芥的基因座at3g24550编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。282.seqidno:252显示了来自由番茄的基因座solyc10g051330.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。283.seqidno:253显示了来自由番茄的基因座solyc06g051030.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。284.seqidno:254显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g071480编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。285.seqidno:255显示了来自由拟南芥的基因座at4g02010编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。286.seqidno:256显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g109670编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。287.seqidno:257显示了来自由水稻的基因座loc_os01g14932编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。288.seqidno:258显示了来自由水稻的基因座loc_os05g12680编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。289.seqidno:259显示了来自由番茄的基因座solyc12g007110.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。290.seqidno:260显示了来自由番茄的基因座solyc03g123740.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。291.seqidno:261显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g117520编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。292.seqidno:262显示了来自由拟南芥的基因座at1g53730编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。293.seqidno:263显示了来自由水稻的基因座loc_os03g08550编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。294.seqidno:264显示了来自由拟南芥的基因座at1g48480编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。295.seqidno:265显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr8g107470编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。296.seqidno:266显示了来自由拟南芥的基因座at3g28040编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。297.seqidno:267显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g022160v2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。298.seqidno:268显示了来自由番茄的基因座solyc09g098290.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。299.seqidno:269显示了来自由水稻的基因座loc_os01g72700编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。300.seqidno:270显示了来自由拟南芥的基因座at1g66150编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。301.seqidno:271显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr5g077430编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。302.seqidno:272显示了来自由水稻的基因座loc_os03g50810编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。303.seqidno:273显示了来自由拟南芥的基因座at5g56890编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。304.seqidno:274显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g039290编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。305.seqidno:275显示了来自由拟南芥的基因座at3g46420编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。306.seqidno:276显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr8g015340编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。307.seqidno:277显示了来自由水稻的基因座loc_os05g44970编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。308.seqidno:278显示了来自由水稻的基因座loc_os03g21540编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。309.seqidno:279显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g073660编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。310.seqidno:280显示了来自由番茄的基因座solyc01g108000.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。311.seqidno:281显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr4g085810编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。312.seqidno:282显示了来自由拟南芥的基因座at1g49730编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。313.seqidno:283显示了来自由番茄的基因座solyc06g071810.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。314.seqidno:284显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g075440编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。315.seqidno:285显示了来自由水稻的基因座loc_os06g18000编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。316.seqidno:286显示了来自由拟南芥的基因座at1g18390编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。317.seqidno:287显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g082470v2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。318.seqidno:288显示了来自由番茄的基因座solyc02g086210.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。319.seqidno:289显示了来自由拟南芥的基因座at1g66930编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。320.seqidno:290显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr1g064560编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。321.seqidno:291显示了来自由拟南芥的基因座at2g39180编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。322.seqidno:292显示了来自由水稻的基因座loc_os04g51040编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。323.seqidno:293显示了来自由水稻的基因座loc_os04g51050编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。324.seqidno:294显示了来自由番茄的基因座solyc11g072140.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。325.seqidno:295显示了来自由番茄的基因座solyc01g109650.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。326.seqidno:296显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g116640编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。327.seqidno:297显示了来自由拟南芥的基因座at2g16250编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。328.seqidno:298显示了来自由拟南芥的基因座at4g00340编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。329.seqidno:299显示了来自由番茄的基因座solyc01g094830.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。330.seqidno:300显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g084120编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。331.seqidno:301显示了来自由番茄的基因座solyc03g019980.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。332.seqidno:302显示了来自由水稻的基因座osxa21lrr编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。333.seqidno:303显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr5g044680编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。334.seqidno:304显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr5g019070v2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。335.seqidno:305显示了来自由番茄的基因座solyc06g076910.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。336.seqidno:306显示了来自由水稻的基因座loc_os12g42520编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。337.seqidno:307显示了来自由拟南芥的基因座at3g47090编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。338.seqidno:308显示了来自由拟南芥的基因座at5g20480编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。at5g20480是编码atefr的基因座。全长atefr氨基酸序列在seqidno:6中显示。339.seqidno:309显示了来自由番茄的基因座solyc04g051510.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。340.seqidno:310显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g095100编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。341.seqidno:311显示了来自由拟南芥的基因座at4g39400编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。342.seqidno:312显示了来自由水稻的基因座loc_os09g12240编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。343.seqidno:313显示了来自由拟南芥的基因座at2g26330编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。344.seqidno:314显示了来自由番茄的基因座solyc08g061560.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。345.seqidno:315显示了来自由水稻的基因座loc_os03g56270编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。346.seqidno:316显示了来自由番茄的基因座solyc04g081590.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。347.seqidno:317显示了来自由拟南芥的基因座at1g75820编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。348.seqidno:318显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr4g070970编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。349.seqidno:319显示了来自由番茄的基因座solyc10g047140.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。350.seqidno:320显示了来自由拟南芥的基因座at4g33430编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。351.seqidno:321显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g008360编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。352.seqidno:322显示了来自由水稻的基因座loc_os08g07760编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。353.seqidno:323显示了来自由水稻的基因座loc_os05g40770编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。354.seqidno:324显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr8g070880编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。355.seqidno:325显示了来自由水稻的基因座loc_os12g10740编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。356.seqidno:326显示了来自由水稻的基因座loc_os01g72990编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。357.seqidno:327显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g062590编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。358.seqidno:328显示了来自由拟南芥的基因座at3g21630编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。359.seqidno:329显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g080050编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。360.seqidno:330显示了来自由番茄的基因座solyc07g049180.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。361.seqidno:331显示了来自由水稻的基因座loc_os08g42580编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。362.seqidno:332显示了来自由番茄的基因座solyc12g014350.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。363.seqidno:333显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g075010编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。364.seqidno:334显示了来自由拟南芥的基因座at3g14840编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。365.seqidno:335显示了来自由水稻的基因座loc_os09g17630编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。366.seqidno:336显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g092050编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。367.seqidno:337显示了来自由拟南芥的基因座at2g41890编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。368.seqidno:338显示了来自由番茄的基因座solyc03g063650.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。369.seqidno:339显示了来自由拟南芥的基因座at1g11050编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。370.seqidno:340显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g006910编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。371.seqidno:341显示了来自由水稻的基因座loc_os05g34950编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。372.seqidno:342显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g043380编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。373.seqidno:343显示了来自由番茄的基因座solyc02g068370.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。374.seqidno:344显示了来自由番茄的基因座solyc07g055180.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。375.seqidno:345显示了来自由番茄的基因座solyc05g053010.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。376.seqidno:346显示了来自由番茄的基因座solyc03g118510.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。377.seqidno:347显示了来自由水稻的基因座loc_os01g51290编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。378.seqidno:348显示了来自由水稻的基因座loc_os05g33080编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。379.seqidno:349显示了来自由番茄的基因座solyc11g006040.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。380.seqidno:350显示了来自由拟南芥的基因座at1g52310编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。381.seqidno:351显示了来自由水稻的基因座loc_os03g51440编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。382.seqidno:352显示了来自由番茄的基因座solyc09g007750.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。383.seqidno:353显示了来自由番茄的基因座solyc03g119240.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。384.seqidno:354显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr6g088610编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。385.seqidno:355显示了来自由拟南芥的基因座at2g40270编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。386.seqidno:356显示了来自由水稻的基因座loc_os04g59320编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。387.seqidno:357显示了来自由水稻的基因座loc_os03g50450编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。388.seqidno:358显示了来自由水稻的基因座loc_os01g01410编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。389.seqidno:359显示了来自由番茄的基因座solyc04g039730.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。390.seqidno:360显示了来自由番茄的基因座solyc02g080040.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。391.seqidno:361显示了来自由番茄的基因座solyc01g079340.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。392.seqidno:362显示了来自由水稻的基因座loc_os03g16260编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。393.seqidno:363显示了来自由拟南芥的基因座at3g59350编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。394.seqidno:364显示了来自由拟南芥的基因座at1g21250编码的rlk蛋白(wak1)的ejm结构域的氨基酸序列。395.seqidno:365显示了来自由番茄的基因座solyc09g015240.1编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。396.seqidno:366显示了来自由拟南芥的基因座at5g07150编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。397.seqidno:367显示了来自由拟南芥的基因座at2g31880编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。at2g31880是编码atsobir1的基因座。全长atsobir1氨基酸序列在seqidno:8中显示。398.seqidno:368显示了来自由水稻的基因座loc_os01g04409编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。399.seqidno:369显示了来自由水稻的基因座loc_os01g49614编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。400.seqidno:370显示了来自由拟南芥的基因座at3g51550编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。401.seqidno:371显示了来自由番茄的基因座solyc01g104050.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。402.seqidno:372显示了来自由水稻的基因座loc_os08g01830编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。403.seqidno:373显示了来自由拟南芥的基因座at1g66980编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。404.seqidno:374显示了来自由拟南芥的基因座at5g38210编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。405.seqidno:375显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr1g105650编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。406.seqidno:376显示了来自由拟南芥的基因座at4g23190编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。407.seqidno:377显示了来自由水稻的基因座loc_os07g35310编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。408.seqidno:378显示了来自由水稻的基因座loc_os01g45520编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。409.seqidno:379显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr1g082580编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。410.seqidno:380显示了来自由拟南芥的基因座at2g45340编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。411.seqidno:381显示了来自由番茄的基因座solyc01g091230.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。412.seqidno:382显示了来自由水稻的基因座loc_os06g04370编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。413.seqidno:383显示了来自蒺藜苜蓿的基因座medtr6g060230由编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。414.seqidno:384显示了来自由番茄的基因座solyc03g121230.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。415.seqidno:385显示了来自由番茄的基因座solyc02g079590.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。416.seqidno:386显示了来自由拟南芥的基因座at1g80640编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。417.seqidno:387显示了来自由拟南芥的基因座at3g59700编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。418.seqidno:388显示了来自由水稻的基因座loc_os03g18370编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。419.seqidno:389显示了来自由拟南芥的基因座at5g38280编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。420.seqidno:390显示了来自由番茄的基因座solyc07g039340.2编码的rlk蛋白的ejm结构域的氨基酸序列。421.seqidno:391-540、548-553和567-569中的每一个显示了来自拟南芥、蒺藜苜蓿、水稻或番茄的植物受体样激酶(rlk)的跨膜(tm)结构域的氨基酸序列，其可以如本文别处所述用于本发明的方法和组合物中。在以下对这些序列中的每一个的描述中，rlk亚组(如果已指定或以其他方式已知)和rlk的每个序列来源的植物物种都提供在括号中。422.seqidno:391显示了来自由水稻的基因座loc_os09g17630编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。423.seqidno:392显示了来自由番茄的基因座solyc01g094830.2v2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。424.seqidno:393显示了来自由拟南芥的基因座at2g26330编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。425.seqidno:394显示了来自由番茄的基因座solyc08g061560.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。426.seqidno:395显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g080050编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。427.seqidno:396显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g062990编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。428.seqidno:397显示了来自由水稻的基因座loc_os07g03830编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。429.seqidno:398显示了来自由番茄的基因座solyc11g072140.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。430.seqidno:399显示了来自由水稻的基因座loc_os04g51040编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。431.seqidno:400显示了来自由番茄的基因座solyc04g039730.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。432.seqidno:401显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g071480编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。433.seqidno:402显示了来自由拟南芥的基因座at2g40270编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。434.seqidno:403显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr4g091670编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。435.seqidno:404显示了来自由番茄的基因座solyc09g015240.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。436.seqidno:405显示了来自由水稻的基因座loc_os03g50450编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。437.seqidno:406显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr8g107470编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。438.seqidno:407显示了来自由拟南芥的基因座at1g48480编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。439.seqidno:408显示了来自由番茄的基因座solyc03g118510.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。440.seqidno:409显示了来自由拟南芥的基因座at3g21630编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。441.seqidno:410显示了来自由水稻的基因座loc_os01g04409编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。442.seqidno:411显示了来自由拟南芥的基因座at1g65790编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。443.seqidno:412显示了来自由番茄的基因座solyc10g051330.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。444.seqidno:413显示了来自由水稻的基因座loc_os04g51050编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。445.seqidno:414显示了来自由拟南芥的基因座at3g47090编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。446.seqidno:415显示了来自由拟南芥的基因座at5g20480编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。at5g20480是编码atefr的基因座。全长atefr氨基酸序列在seqidno:6中显示。447.seqidno:416显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g082470v2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。448.seqidno:417显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr6g088610编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。449.seqidno:418显示了来自由拟南芥的基因座at3g24550编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。450.seqidno:419显示了来自由番茄的基因座solyc12g007110.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。451.seqidno:420显示了来自由水稻的基因座loc_os05g12680编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。452.seqidno:421显示了来自由水稻的基因座loc_os07g36780编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。453.seqidno:422显示了来自由水稻的基因座loc_os03g18370编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。454.seqidno:423显示了来自由番茄的基因座solyc01g079340.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。455.seqidno:424显示了来自由拟南芥的基因座at4g02010v2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。456.seqidno:425显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g109670编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。457.seqidno:426显示了来自由水稻的基因座loc_os01g14932编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。458.seqidno:427显示了来自由番茄的基因座solyc06g051030.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。459.seqidno:428显示了来自由水稻的基因座loc_os03g51440编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。460.seqidno:429显示了来自由番茄的基因座solyc10g047140.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。461.seqidno:430显示了来自由拟南芥的基因座at4g33430.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。462.seqidno:431显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g008360编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。463.seqidno:432显示了来自由水稻的基因座loc_os08g07760编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。464.seqidno:433显示了来自由水稻的基因座loc_os08g42580编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。465.seqidno:434显示了来自由水稻的基因座loc_os05g40770编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。466.seqidno:435显示了来自由拟南芥的基因座at3g51550编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。467.seqidno:436显示了来自由水稻的基因座loc_os03g21540编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。468.seqidno:437显示了来自由番茄的基因座solyc07g049180.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。469.seqidno:438显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g073660编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。470.seqidno:439显示了来自由水稻的基因座loc_os03g50810编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。471.seqidno:440显示了来自由番茄的基因座solyc11g006040.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。472.seqidno:441显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr5g077430编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。473.seqidno:442显示了来自由拟南芥的基因座at1g66150编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。474.seqidno:443显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g062590编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。475.seqidno:444显示了来自由水稻的基因座loc_os01g72990编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。476.seqidno:445显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr4g070970编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。477.seqidno:446显示了来自由水稻的基因座loc_os08g01830编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。478.seqidno:447显示了来自由水稻的基因座loc_os03g16260编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。479.seqidno:448显示了来自由拟南芥的基因座at1g66980编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。480.seqidno:449显示了来自由水稻的基因座loc_os12g10740编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。481.seqidno:450显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g075010编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。482.seqidno:451显示了来自由番茄的基因座solyc12g014350.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。483.seqidno:452显示了来自由拟南芥的基因座at3g14840编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。484.seqidno:453显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr0280s0040编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。485.seqidno:454显示了来自由番茄的基因座solyc03g123740.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。486.seqidno:455显示了来自由水稻的基因座loc_os03g08550编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。487.seqidno:456显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g117520编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。488.seqidno:457显示了来自由拟南芥的基因座at1g53730编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。489.seqidno:458显示了来自由拟南芥的基因座at5g07150编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。490.seqidno:459显示了来自由番茄的基因座solyc01g104050.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。491.seqidno:460显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g006910编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。492.seqidno:461显示了来自由拟南芥的基因座at1g11050编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。493.seqidno:462显示了来自由番茄的基因座solyc03g119240.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。494.seqidno:463显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g075440编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。495.seqidno:464显示了来自由拟南芥的基因座at2g31880编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。at2g31880是编码atsobir1的基因座。全长atsobir1氨基酸序列在seqidno:8中显示。496.seqidno:465显示了来自由水稻的基因座loc_os06g1800编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。497.seqidno:466显示了来自由番茄的基因座solyc06g071810.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。498.seqidno:467显示了来自由拟南芥的基因座at3g59700编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。499.seqidno:468显示了来自由拟南芥的基因座at1g18390v2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。500.seqidno:469显示了来自由拟南芥的基因座at5g38210v2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。501.seqidno:470显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr8g070880编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。502.seqidno:471显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g092050编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。503.seqidno:472显示了来自由拟南芥的基因座at2g41890编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。504.seqidno:473显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr1g105650编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。505.seqidno:474显示了来自由水稻的基因座loc_os03g35600编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。506.seqidno:475显示了来自由番茄的基因座solyc03g121230.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。507.seqidno:476显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr5g044680编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。508.seqidno:477显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr5g019070v2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。509.seqidno:478显示了来自由番茄的基因座solyc02g080040.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。510.seqidno:479显示了来自由拟南芥的基因座at4g23190编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。511.seqidno:480显示了来自由番茄的基因座solyc07g055180.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。512.seqidno:481显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g084120编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。513.seqidno:482显示了来自由水稻的基因座loc_os05g11750编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。514.seqidno:483显示了来自由拟南芥的基因座at1g66930v2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。515.seqidno:484显示了来自由水稻的基因座loc_os05g34950编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。516.seqidno:485显示了来自由拟南芥的基因座at3g59350编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。517.seqidno:486显示了来自由拟南芥的基因座at3g08870编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。518.seqidno:487显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr8g015340编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。519.seqidno:488显示了来自由水稻的基因座loc_os12g42520编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。520.seqidno:489显示了来自由番茄的基因座solyc03g019980.1v2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。521.seqidno:490显示了来自由水稻的基因座loc_os09g12240编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。522.seqidno:491显示了来自由水稻的基因座osxa21编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。523.seqidno:492显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr1g064560编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。524.seqidno:493显示了来自由番茄的基因座solyc06g076910.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。525.seqidno:494显示了来自由水稻的基因座loc_os07g35310编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。526.seqidno:495显示了来自由拟南芥的基因座at1g75820编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。527.seqidno:496显示了来自由拟南芥的基因座at5g38280编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。528.seqidno:497显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr4g085810编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。529.seqidno:498显示了来自由拟南芥的基因座at1g49730编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。530.seqidno:499显示了来自由番茄的基因座solyc01g108000.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。531.seqidno:500显示了来自由水稻的基因座loc_os04g59320编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。532.seqidno:501显示了来自由拟南芥的基因座at3g46420编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。533.seqidno:502显示了来自由水稻的基因座loc_os01g45520编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。534.seqidno:503显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g043380编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。535.seqidno:504显示了来自由番茄的基因座solyc02g068370.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。536.seqidno:505显示了来自由水稻的基因座loc_os01g01410编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。537.seqidno:506显示了来自由拟南芥的基因座at1g52310编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。538.seqidno:507显示了来自由拟南芥的基因座at4g00340编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。539.seqidno:508显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g116640编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。540.seqidno:509显示了来自由番茄的基因座solyc01g109650.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。541.seqidno:510显示了来自由拟南芥的基因座at2g16250编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。542.seqidno:511显示了来自由拟南芥的基因座at1g80640编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。543.seqidno:512显示了来自由拟南芥的基因座at1g21250编码的rlk蛋白(wak1)的tm结构域的氨基酸序列。544.seqidno:513显示了来自由番茄的基因座solyc04g051510.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。545.seqidno:514显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr3g095100编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。546.seqidno:515显示了来自由拟南芥的基因座at4g39400编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。547.seqidno:516显示了来自由番茄的基因座solyc09g007750.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。548.seqidno:517显示了来自由拟南芥的基因座at2g39180编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。549.seqidno:518显示了来自由水稻的基因座loc_os01g49614编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。550.seqidno:519显示了来自由番茄的基因座solyc05g053010.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。551.seqidno:520显示了来自由水稻的基因座ospi03g56270编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。552.seqidno:521显示了来自由番茄的基因座solyc01g091230.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。553.seqidno:522显示了来自由拟南芥的基因座at2g45340编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。554.seqidno:523显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr8g030500编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。555.seqidno:524显示了来自由水稻的基因座loc_os06g04370编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。556.seqidno:525显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr2g039290编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。557.seqidno:526显示了来自由水稻的基因座loc_os01g51290编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。558.seqidno:527显示了来自由拟南芥的基因座at5g56890编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。559.seqidno:528显示了来自由番茄的基因座solyc07g039340.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。560.seqidno:529显示了来自由番茄的基因座solyc09g098290.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。561.seqidno:530显示了来自由拟南芥的基因座at3g28040编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。562.seqidno:531显示了来自由水稻的基因座loc_os01g72700编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。563.seqidno:532显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr7g022160v2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。564.seqidno:533显示了来自由番茄的基因座solyc02g086210.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。565.seqidno:534显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr6g060230编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。566.seqidno:535显示了来自由水稻的基因座loc_os05g44970编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。567.seqidno:536显示了来自由番茄的基因座solyc04g081590.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。568.seqidno:537显示了来自由蒺藜苜蓿的基因座medtr1g082580编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。569.seqidno:538显示了来自由番茄的基因座solyc03g063650.1编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。570.seqidno:539显示了来自由水稻的基因座loc_os05g33080编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。571.seqidno:540显示了来自由番茄的基因座solyc02g079590.2编码的rlk蛋白的tm结构域的氨基酸序列。572.seqidno:541显示了在本文中称为ejm(eeee/adq-)的合成ejm结构域的氨基酸序列。573.seqidno:542显示了来自拟南芥的atrlp1的ejm结构域的氨基酸序列。574.seqidno:543显示了来自拟南芥的atrlp23的ejm结构域的氨基酸序列。575.seqidno:544显示了来自拟南芥的atrlp30的ejm结构域的氨基酸序列。576.seqidno:545显示了来自拟南芥的atrlp42的ejm结构域的氨基酸序列。577.seqidno:546显示了来自番茄的cf-4的ejm结构域的氨基酸序列。578.seqidno:547显示了来自番茄的ve1的ejm结构域的氨基酸序列。579.seqidno:548显示了来自拟南芥的atrlp1的tm结构域的氨基酸序列。580.seqidno:549显示了来自拟南芥的atrlp23的tm结构域的氨基酸序列。581.seqidno:550显示了来自拟南芥的atrlp30的tm结构域的氨基酸序列。582.seqidno:551显示了来自拟南芥的atrlp42的tm结构域的氨基酸序列。583.seqidno:552显示了来自番茄的cf-4的tm结构域的氨基酸序列。584.seqidno:553显示了来自番茄的ve1的tm结构域的氨基酸序列。585.seqidno:554显示了来自拟南芥的atrlp1的sp结构域的氨基酸序列。586.seqidno:555显示了来自拟南芥的atrlp23的sp结构域的氨基酸序列。587.seqidno:556显示了来自拟南芥的atrlp30的sp结构域的氨基酸序列。588.seqidno:557显示了来自拟南芥的atrlp42的sp结构域的氨基酸序列。589.seqidno:558显示了来自番茄的cf-4的sp结构域的氨基酸序列。590.seqidno:559显示了来自番茄的ve1的sp结构域的氨基酸序列。591.seqidno:560显示了氨基酸序列，其包含来自拟南芥的atrlp23592.lrr结构域的氨基酸序列。593.seqidno:561显示了来自由基因座loc_os06g29810v2(水稻)编码的rlk蛋白(ospi-d2)的激酶结构域的氨基酸序列。594.seqidno:562显示了来自由基因座at1g73080(拟南芥)编码的rlk蛋白(atpepr1)的激酶结构域的氨基酸序列。595.seqidno:563显示了来自由基因座at2g33580(拟南芥)编码的rlk蛋白(atlyk5)的激酶结构域的氨基酸序列。596.seqidno:564显示了来自由基因座loc_os06g29810v2(水稻)编码的rlk蛋白(ospi-d2)的ejm结构域的氨基酸序列。597.seqidno:565显示了来自由基因座at1g73080(拟南芥)编码的rlk蛋白(atpepr1)的ejm结构域的氨基酸序列。598.seqidno:566显示了来自由基因座at2g33580(拟南芥)编码的rlk蛋白(atlyk5)的ejm结构域的氨基酸序列。599.seqidno:567显示了来自由基因座loc_os06g29810v2(水稻)编码的rlk蛋白(ospi-d2)的tm结构域的氨基酸序列。600.seqidno:568显示了来自由基因座at1g73080(拟南芥)编码的rlk蛋白(atpepr1)的tm结构域的氨基酸序列。601.seqidno:569显示了来自由基因座at2g33580(拟南芥)编码的rlk蛋白(atlyk5)的tm结构域的氨基酸序列。602.seqidno:570显示了atrlp23-atpepr1多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到第二核苷酸序列，所述第二核苷酸序列包含atpepr1tm结构域和激酶结构域的编码序列(核苷酸2551-3612)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:570的核酸分子的3’端。603.seqidno:571显示了由seqidno:19编码的atrlp23-atpepr1蛋白的氨基酸序列。atrlp23-atpepr1蛋白包含含有atrlp23质外体和ejm结构域的第一多肽(氨基酸1-850)，所述第一多肽可操作地连接到包含osxa21tm和胞质结构域的第二多肽(氨基酸851-1204)。604.seqidno:572显示了atrlp23-atpepr1-3xflag多核苷酸构建体的核苷酸序列。该构建体包含编码atrlp23的质外体和ejm结构域的第一核苷酸序列(核苷酸1-2550)，所述第一核苷酸序列可操作地连接到包含atpepr1tm结构域和激酶结构域的编码序列的第二核苷酸序列(核苷酸2551-3612)，所述第二核苷酸序列可操作地连接到编码3xflag肽的第三核苷酸序列(核苷酸3613-3696)。如果需要，终止密码子(例如taa、tag或tga)可以可操作地连接到包含seqidno:572的核酸分子的3’端。注意到在以下实施例中，对该构建体使用终止密码子tga。605.seqidno:573显示了由seqidno:21编码的atrlp23-atpepr1-3xflag蛋白的氨基酸序列。atrlp23-atpepr1-3xflag蛋白包含含有atrlp23质外体和ejm结构域的第一多肽(氨基酸1-850)，所述第一多肽可操作地连接到包含atpepr1tm和激酶结构域的第二多肽(氨基酸851-1204)，所述第二多肽可操作地连接到3xflag肽(氨基酸1205-1232)。606.发明详述607.现在将在下文中参考附图更全面地描述本发明，其中展示了本发明的一些但不是所有实施方案。实际上，这些发明可以以许多不同的形式来体现，并且不应被解释为局限于本文所阐述的实施方案；相反，提供这些实施方案是为了便于使本公开满足适用的法律要求。相同的数字始终指代相同的要素。608.受益于前述描述和相关附图中呈现的教导，这些发明所属领域的技术人员将想到本文阐述的发明的许多修改和其他实施方案。因此，应当理解，本发明不限于所公开的具体实施方案，并且意图将修改和其他实施方案包括在所附权利要求的范围内。尽管本文使用了特定的术语，但它们仅以一般性和描述性意义使用，而不是出于限制的目的。609.本发明涉及制备和使用工程化atrlp23蛋白和编码这样的atrlp23蛋白的核酸分子的方法。因此，本发明的atrlp23蛋白和核酸分子是合成或人工(即，非天然存在的)蛋白和核酸分子。本发明的此类合成或人工atrlp23蛋白在本文中也称为“工程化atrlp23蛋白”。atrlp23蛋白和编码其的核酸分子可用于增强植物，特别是作物植物对植物病原体的抗性。这样的对植物病原体具有增强的抗性的作物植物因限制或减少了植物病害而在农业中得以应用。610.本发明还涉及包含至少一种本发明的工程化atrlp23蛋白和/或至少一种编码这样的工程化atrlp23蛋白的核酸分子的组合物。这样的组合物包括但不限于包含一种或多种这样的工程化atrlp23蛋白和/或核酸分子的植物、植物细胞和其他宿主细胞，以及包含一种或多种这样的核酸分子的表达盒和载体。611.本发明提供了用于制备工程化atrlp23蛋白的方法，所述蛋白包含源自受体样蛋白(rlp)的能够在植物中识别病原体相关分子模式(pamp)的富亮氨酸重复序列(lrr)结构域，所述pamp源自坏死和乙烯诱导蛋白1(nep1)样蛋白家族的pamp。已知nep1样蛋白(nlp)存在于细菌、真菌和卵菌中。尽管本发明不受特定生物学机制的束缚，但认为nlp在prr识别源自nlp的pamp后触发植物中的植物防御反应。最近，拟南芥属(arabidopsis)rlp，atrlp23被鉴定为识别nlp的prr(albert等人，2015.nat.plants1:15140,doi:10.1038/nplants.2015.140)。albert等人证明了在atrlp23的存在下，拟南芥属植物可以感知来自致病疫霉(phytophthorainfestans)的nlp20，以及源自活体营养型卵菌(hyaloperonosporaarabidopsidis)(hanlp3)、灰葡萄孢菌(botrytiscinerea)(bcnep2)和枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)(bsnpp)的各种nlp的nlp24肽。612.用于制备工程化atrlp23蛋白的方法包括制备嵌合蛋白，所述嵌合蛋白包含源自atrlp23的lrr结构域和源自受体样激酶(rlk)的激酶结构域。这样的方法包括制备包含以可操作连接并以n末端到c末端的方向上具有以下结构域的氨基酸序列的多肽：源自rlp的lrr结构域，其能够在植物中识别源自nlp的病原体相关分子模式；超近膜(ejm)结构域；跨膜(tm)结构域；和源自rlk的激酶结构域。如果需要，多肽还可以包含可操作地连接到lrr结构域并且在其n末端侧的sp结构域。优选地，当sp结构域与多肽可操作地连接时，这样的sp结构域能够将多肽靶向到植物细胞的质膜。613.认识到当包含sp结构域的多肽在植物中表达时，sp结构域通常在翻译后不久被信号肽酶切割。因此，本发明的工程化atrlp23蛋白不仅包括本文公开的包含sp结构域的工程化atrlp23蛋白，还包括缺乏sp结构域的工程化atrlp23蛋白。应认识到这样的不包含sp结构域的工程化atrlp23蛋白包括例如最初在植物细胞或其他宿主细胞中合成并包含sp结构域但后来被从该工程化atrlp23蛋白切除的工程化atrlp23蛋白，以及任何其他缺乏sp结构域的全部或至少一部分的工程化atrlp23蛋白。614.本发明的方法可以包括使用源自特定目标蛋白的结构域(例如源自atrlp23的lrr结构域)。“源自”是指该结构域具有与目标蛋白中的天然结构域相同的氨基酸序列，或者是修饰的结构域，所述修饰的结构域包含与天然结构域的全长氨基酸序列不同的修饰的氨基酸序列，并且与来自目标蛋白的天然结构域具有相同的生物学功能(例如pamp识别、膜定位、激酶活性)，或相对于atrlp23的生物学功能(即识别源自nlp的pamp)，不改变工程化atrlp23蛋白的生物学功能。这样的修饰的结构域或变体结构域是人工的或非天然存在的蛋白结构域，其包含修饰的氨基酸序列并且可以例如通过修饰一个天然结构域或甚至两个或更多个天然结构域的氨基酸序列或甚至通过组合两个或更多个天然结构域的多个部分产生。如此“修饰氨基酸序列”包括对天然结构域的氨基酸序列的一个或多个氨基酸的置换、添加和/或缺失。优选地，本发明的工程化atrlp23蛋白能够在植物中识别源自nlp的pamp，并且包含当与本文别处公开的或本领域中其他已知的一种或多种分析中的atrlp23的活性或反应性相比时增加的活性或增加的响应性。615.工程化atrlp23蛋白包含源自atrlp23的lrr结构域。在本发明的一些实施方案中，lrr结构域是atrlp23的天然lrr结构域，其包含seqidno:560所示的氨基酸序列。在其他实施方案中，lrr结构域将包含变体atrlp23lrr结构域，其与seqidno:560所示的atrlp23lrr结构域的氨基酸序列具有至少约50％、55％、60％、65％70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。优选地，当这样的变体或修饰的atrlp23lrr结构域包含在本发明的工程化atrlp23蛋白中时，这样的变体或修饰的atrlp23lrr结构域将保留atrlp23lrr结构域的生物学功能—也就是说，包含变体atrlp23lrr结构域的工程化atrlp23蛋白将能够在植物中识别源自nlp的pamp。认识到变体atrlp23lrr结构域的生物学功能可以例如通过用变体lrr结构域替代atrlp23的天然lrr结构域并通过本文别处公开的方法测定嵌合蛋白的活性或功能来确定。616.源自rlk蛋白的不同激酶结构域可以用于本发明的方法和组合物中。可以用于本发明的方法和组合物中的一些rlk激酶结构域的实例包括seqidno:77-240和561-563所示的氨基酸序列及其变体。在本发明的某些实施方案中，本发明的工程化atrlp23蛋白将包含变体rlk激酶结构域，其与seqidno:77-240和561-563所示的激酶结构域氨基酸序列中的一个或多个具有至少约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。在本发明的某些其他实施方案中，激酶结构域源自osxa21、atsobir1、atpepr1或atefr。osxa21、atsobir1、atpepr1和atefr的激酶结构域的氨基酸序列分别显示在seqidno:113、158、562和189中。617.在本发明的一些实施方案中，工程化atrlp23蛋白包含天然atrlp23的sp、ejm和tm结构域。在其他实施方案中，工程化atrlp23蛋白包含其中sp、ejm和tm结构域中的一个或多个与相应的天然结构域不同的多肽。优选地，当这样的非天然结构域包含在本发明的工程化atrlp23蛋白中时，这样的非天然结构域将保留相应的atrlp23结构域的生物学功能—也就是说，包含一个或更多个这样的非天然结构域的工程化atrlp23蛋白将能够在植物中识别源自nlp的pamp。认识到非天然sp、ejm或tm结构域的生物学功能可以例如通过用非天然sp、ejm或tm替代相应的atrlp23天然结构域并通过本文别处公开的方法测定嵌合蛋白的活性或功能来确定。618.天然atrlp23ejm结构域的氨基酸序列显示在seqidno:543中。可以用于本发明的方法和组合物中的一些非天然ejm结构域的实例包括seqidno:241-390、541、542、545-547和564-566所示的氨基酸序列及其变体，以及seqidno:543所示的氨基酸序列的变体。在本发明的某些实施方案中，本发明的工程化atrlp23蛋白将包含变体ejm结构域，其与seqidno:241-390、541-547和564-566所示的ejm结构域氨基酸序列中的一个或多个具有至少约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。在本发明的某些其他实施方案中，ejm是源自rlp，特别是sobir1依赖性rlp的ejm结构域，包括但不限于，源自atrlp1(seqidno:542)、atrlp23(seqidno:543)、atrlp30(seqidno:544)、atrlp42(seqidno:545)、cf-4(seqidno:546)和/或ve1(seqidno:547)的ejm结构域。虽然ejm结构域的天然存在的形式可以用于方法和组合物中，但可以使用非天然存在的或合成ejm结构域，例如ejm(eeee/adq-)(seqidno:541)，它是atrlp23和atrlp42的ejm之间的嵌合体，如以下实施例2中所述。619.如上所述，通过本发明的方法制备的工程化atrlp23蛋白可以包含sp结构域和tm结构域。优选地，sp结构域源自质膜结合蛋白。更优选地，sp结构域和tm结构域各自源自质膜结合蛋白。更优选地，sp域和tm域源自相同的prr或两种不同的prr。在本发明的方法的一些优选的实施方案中，sp结构域源自atrlp23，并且tm结构域和激酶结构域源自atefr、atpepr1或osxa21。在其他优选实施方案中，sp、lrr和tm结构域源自atrlp23，并且激酶结构域源自atsobir1。620.天然atrlp23tm结构域的氨基酸序列显示在seqidno:549中。可以用于本发明的方法和组合物中的一些非天然tm结构域的实例包括seqidno:391-540、548、550-553和567-569所示的氨基酸序列及其变体，以及seqidno:549所示的氨基酸序列的变体。在本发明的某些实施方案中，本发明的工程化atrlp23蛋白将包含变体tm结构域，其与seqidno:391-541、548-553和567-569所示的tm结构域氨基酸序列中的一个或多个具有至少约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。621.天然atrlp23tm结构域的氨基酸序列显示在seqidno:555中。可以用于本发明的方法和组合物中的一些非天然sp结构域的实例包括seqidno:554和556-559所示的氨基酸序列及其变体，以及seqidno:555所示的氨基酸序列的变体。在本发明的某些实施方案中，本发明的工程化atrlp23蛋白将包含变体sp结构域，其与seqidno:554-559所示的tm结构域氨基酸序列中的一个或多个具有至少约50％、55％、60％、65％70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。优选地，用于本发明的工程化atrlp23蛋白的sp结构域能够使可操作地连接的工程化atrlp23蛋白靶向植物细胞的质膜。622.通过本发明的方法制备的编码工程化atrlp23蛋白的氨基酸序列包括但不限于seqidno:16、20、32、40和60所示的氨基酸序列。在本发明的一些实施方案中，工程化atrlp23蛋白还包含可操作地连接到激酶结构域的c末端的3xflag标签。3xflag标签被添加到本发明的某些工程化atrlp23蛋白中以帮助检测和/或纯化工程化atrlp23蛋白，并且被认为不改变工程化atrlp23蛋白的生物学功能和/或膜定位。包含激酶结构域和3xflag标签的本发明的工程化atrlp23蛋白的实例具有seqidno:18、22、34、42和62所示的氨基酸序列。623.用于制备工程化atrlp23蛋白的方法包括或还包括修饰atrlp23蛋白的氨基酸序列，由此产生工程化atrlp23蛋白，其中对应于atrlp23蛋白的氨基酸序列部分(即没有激酶结构域和与其连接的任何衔接子或接头的氨基酸序列)包含与atrlp23的全长氨基酸序列不同的氨基酸序列。如此“修饰氨基酸序列”包括对atrlp23蛋白的氨基酸序列的一个或多个氨基酸的置换、添加和/或缺失。如上所述，包含修饰的氨基酸序列的蛋白通常通过以下制备：修饰核酸分子的核苷酸序列，由此产生编码期望的修饰的氨基酸序列的修饰的核苷酸序列，然后在细胞中或在体外表达所述核苷酸序列，由此产生包含期望的修饰的氨基酸序列的蛋白。624.在本发明的一些实施方案中，所述方法包括将atrlp23蛋白的sp、ejm和tm结构域中的一个或多个或其一个部分或多个部分替换为源自另一种prr的对应结构域或该对应结构域的一个部分或多个部分。625.在本发明的一个实施方案中，工程化atrlp23蛋白包含修饰的ejm结构域，该修饰的ejm结构域源自另一种rlp的ejm结构域，包括但不限于atrlp1、atrlp23、atrlp30、atrlp42、cf-4和ve1的天然ejm结构域及其修饰形式，相对于atrlp23蛋白的活性，所述其修饰形式不降低工程化atrlp23蛋白的生物活性。在本发明的另一个实施方案中，工程化atrlp23蛋白包含修饰的ejm结构域，该修饰的ejm结构域源自两种或更多种prr的ejm结构域。这样的工程化atrlp23蛋白实例是atrlp23-ejm(eeee/adq-)蛋白(seqidno:44)，其包含在本文中称为ejm(eeee/adq-)(seqidno:541)的修饰的ejm结构域，并且进一步描述于下文的实施例2中。626.应认识到，在制备工程化atrlp23蛋白时，可能需要或必须在此类蛋白的多个结构域中的任意一个或多个之间添加衔接子或接头，以相对于缺乏这样的衔接子或接头的该工程化蛋白，维持或改善工程化蛋白的生物活性或功能。这样的衔接子或接头可用于阻止蛋白中离散结构域之间的不希望的相互作用。这样的衔接子或接头可以是寡肽(即2-20个氨基酸)，但在一些情况下，衔接子和接头可以是长度为约21-50个氨基酸、优选21-31个氨基酸的相对短的多肽。627.本发明的方法包括制备包含修饰的氨基酸序列的工程化atrlp23蛋白。工程化atrlp23蛋白可以例如通过以下制备：化学合成包含修饰的氨基酸序列的多肽，或制备编码包含修饰的氨基酸序列的多肽的核酸分子，并在细胞中或在体外表达核苷酸分子，由此产生包含修饰的氨基酸序列的工程化atrlp23蛋白。应认识到，这样的核酸分子可以例如通过其他地方公开的或本领域其他已知的常规分子生物学方法，或使用dna合成仪通过化学合成来制备。这样的分子生物学方法包括但不限于基因编辑、pcr扩增、克隆、定向诱变、限制性核酸酶消化、连接等。还认识到，使用下文公开的或本领域其他已知的基因组编辑方法，可以在植物细胞或其他宿主细胞的基因组内产生编码包含修饰的氨基酸序列的工程化atrlp23蛋白的核酸分子。628.通过本发明的方法制备的编码工程化atrlp23蛋白的氨基酸序列包括但不限于seqidno:44、48、52和56中所示的氨基酸序列。在本发明的一些实施方案中，工程化atrlp23蛋白还包含可操作地连接到工程化atrlp23蛋白的c末端的3xflag标签。3xflag标签被添加到本发明的某些工程化atrlp23蛋白中以帮助检测和/或纯化工程化atrlp23蛋白，并且被认为不改变工程化atrlp23蛋白的生物学功能和/或膜定位。缺少激酶但包含3xflag标签的本发明的工程化atrlp23蛋白的实例具有seqidno:46、50、54和58所示的氨基酸序列。629.本发明还提供了用于制备编码本发明的工程化atrlp23蛋白的核酸分子的方法，所述工程化atrlp23蛋白能够赋予植物对至少一种植物病原体的增强的抗性。所述方法包括合成编码本发明的工程化atrlp23的氨基酸序列的核酸分子。认识到制备编码目标蛋白的核酸分子是常规的，并且这样的核酸分子可以使用例如dna合成仪和/或使用下文描述或本领域其他已知的标准分子生物学方法合成，所述方法诸如例如限制性核酸内切酶消化、连接、聚合酶链反应(pcr)扩增、定点诱变、测序等。可通过本发明的方法制备的编码这样的工程化atrlp23蛋白的核酸分子的实例是包含seqidno:15、17、19、21、31、33、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61所示的核苷酸序列中的至少一个的核酸分子。630.本发明不仅提供了包含激酶结构域的工程化atrlp23蛋白，而且还提供了缺乏激酶结构域的工程化atrlp23蛋白。缺乏激酶结构域的本发明的此类工程化atrlp23蛋白包含与atrlp23的全长氨基酸序列不相同的氨基酸序列或由其组成，并且可以通过本文公开的方法制备。631.本发明还涉及包含至少一种本发明的工程化atrlp23蛋白和/或至少一种编码这样的工程化atrlp23蛋白的核酸分子的组合物。这样的组合物包括但不限于包含一个或多个这样的工程化atrlp23蛋白和/或一个或多个编码这样的工程化atrlp23蛋白的核酸分子的植物、植物细胞和其他宿主细胞，以及包含一个或多个这样的核酸分子的表达盒和载体。632.本发明另外提供了用于增强植物，特别是包含对植物病原体的部分抗性的植物对该植物病原体的抗性的方法。如本文所使用，全抗性或完全抗性被定义为病原体不能在宿主植物基因型内扩散。在全抗性的情况下，在与病原体接触后在植物上观察到局部细胞死亡，但没有扩散的病变。相比而言，对于部分抗性，虽然病原体可能仍然能够感染宿主植物并引起扩散的病变，但与易感植物相比，病变的扩散受到局限或限制。633.用于增强植物抗性的这样的方法包括将植物细胞修饰成能够表达(在本文中也称为过表达)至少一种工程化atrlp23蛋白。所述方法任选地还包括将修饰的植物细胞再生为修饰的植物，该修饰的植物包含对植物病原体的增强的抗性。634.在一些实施方案中，所述方法包括使用本文别处描述的或本领域中其他已知的植物转化方法将多核苷酸构建体引入至少一个植物细胞，所述构建体包含驱动在植物中表达的启动子和可操作地连接的编码工程化atrlp23蛋白的核酸分子。用于增强植物对植物病原体的抗性的优选的启动子是已知驱动高水平基因表达的启动子，例如camv35s启动子。适用于本发明的方法的另外的启动子在下文描述。635.本发明的方法可用于产生对由植物病原体引起的植物病害具有增强的抗性的植物。通常，本发明的方法将使主题植物对植物病原体的一种菌株或对植物病原体的两种或更多种菌株中的每一种的抗性与对照对该植物病原体的同一菌株或多个菌株的抗性相比增强或提高至少25％、50％、75％、100％、150％、200％、250％、500％或更多。除非另有说明或从使用的上下文中明显的，本发明的对照植物是不包含本发明的多核苷酸构建体的植物。优选地，对照植物与包含本发明的多核苷酸构建体的植物基本相同(例如相同的物种、亚种和品种)，只是对照不包含该多核苷酸构建体。在一些实施方案中，对照植物将包含多核苷酸构建体，但在本发明的多核苷酸构建体中不包含编码工程化atrlp23蛋白的一个或多个核苷酸序列。在其他实施方案中，对照植物将不包含本发明的工程化atrlp23蛋白。636.包含本文公开的工程化atrlp23蛋白的本发明的植物可用于限制农作物生产中由至少一种植物病原体引起的植物病害的方法，特别是在这样的植物病害普遍存在且已知会对农业收成产生负面影响，或者至少有可能对农业收成产生负面影响的地区。本发明的方法包括种植本发明的植物(例如幼苗)、种子或块茎，其中所述植物、种子或块茎包含至少一种本发明的工程化atrlp23蛋白和/或至少一种编码工程化atrlp23蛋白的核苷酸分子。所述方法还包括在有利于植物生长和发育的环境条件下种植源自幼苗、种子或块茎的植物，并任选地从植物收获至少一种果实、块茎、叶或种子。这样的环境条件可以包括例如空气温度、土壤温度、土壤含水量、光周期、光强度、土壤ph和土壤肥力。认识到有利于目标植物生长和发育的环境条件将根据例如植物物种或甚至特定品种(例如栽培品种)或目标植物的基因型而变化。还认识到有利于本发明的目标植物的生长和发育的环境条件是本领域已知的。637.另外，本发明提供了通过本发明的方法产生的和/或包含本发明的多核苷酸构建体的植物、种子和植物细胞。还提供了包含本发明的多核苷酸构建体的子代植物及其种子。本发明还提供了由本发明的转化植物和/或子代植物产生的种子、营养部分和其他植物部分，以及由这样的植物部分制备的食品和其他农产品，所述食品和其他农产品旨在被人和其他动物，包括但不限于宠物(例如狗和猫)和牲畜(例如猪、牛、鸡、火鸡和鸭)消耗或使用。638.本发明包括分离的或基本上纯化的多核苷酸(本文也称为“核酸分子”、“核酸”等)或蛋白(本文也称为“多肽”)组合物，其包括例如包含在随附序列表中所示的序列的多核苷酸和蛋白以及这样的多核苷酸和蛋白的变体和片段。“分离的”或“纯化的”多核苷酸或蛋白或其生物活性部分实质上或基本上不含通常伴随在其天然存在的环境中发现的多核苷酸或蛋白或与其相互作用的组分。因此，分离或纯化的多核苷酸或蛋白在通过重组技术制备时基本上不含其他细胞材料或培养基，或者在化学合成时基本上不含化学前体或其他化学品。最佳地，“分离的”多核苷酸不含在该多核苷酸所来源的生物体的基因组dna中天然位于所述多核苷酸的侧翼(即，位于该多核苷酸的5'和3'端的序列)的序列(最佳地为蛋白编码序列)。例如，在多种实施方案中，分离的多核苷酸可以包含少于约5kb、4kb、3kb、2kb、1kb、0.5kb或0.1kb的在该多核苷酸所来源的细胞的基因组dna中天然位于所述多核苷酸侧翼的核苷酸序列。基本上不含细胞物质的蛋白包括具有少于约30％、20％、10％、5％或1％(以干重计)的污染性蛋白的蛋白制剂。当通过重组产生本发明的蛋白或其生物活性部分时，最佳培养基代表小于约30％、20％、10％、5％或1％(以干重计)的化学前体或非目标蛋白化学品。639.所公开的多核苷酸的片段和变体以及由其编码的蛋白也被本发明所涵盖。意图“片段”是指多核苷酸的一部分或由其编码的氨基酸序列以及由其编码的蛋白质的一部分。包含编码序列的多核苷酸的片段可以编码保留全长或天然蛋白的生物活性的蛋白片段。供选择地，可用作杂交探针的多核苷酸的片段通常不编码保留生物活性的蛋白或不保留启动子活性。因此，核苷酸序列的片段范围可以为至少约20个核苷酸、约50个核苷酸、约100个核苷酸以及多达本发明的全长多核苷酸。[0640]“变体”旨在表示基本相似的序列。对于多核苷酸，变体包含在5'和/或3'端具有缺失(即截短)的多核苷酸；在天然多核苷酸的一个或多个内部位点缺失和/或添加一个或多个核苷酸；和/或在天然多核苷酸中的一个或多个位点置换一个或多个核苷酸。如本文所使用，“天然”多核苷酸或多肽分别包含天然存在的核苷酸序列或氨基酸序列。对于多核苷酸，保守变体包括由于遗传密码的简并性而编码本发明的工程化atrlp23蛋白之一的氨基酸序列的那些序列。变体多核苷酸包括合成来源的多核苷酸，例如通过使用定点诱变产生但仍编码本发明的工程化atrlp23蛋白的那些。通常，如通过本文别处所述的序列比对程序和参数确定的，本发明的多核苷酸的变体与该多核苷酸将具有至少约80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。在本发明的某些实施方案中，本发明的特定多核苷酸的变体将与至少一种选自seqidno:15、17、19、21、31、33、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少约80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。[0641]本发明的多核苷酸(即，参考多核苷酸)的变体也可以通过比较由变体多核苷酸编码的多肽和由参考多核苷酸编码的多肽之间的序列同一性百分比来评价。因此，例如，公开了编码与seqidno:16、18、20、22、32、34、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60或62的多肽具有给定序列同一性百分比的多肽的多核苷酸。可以使用本文别处描述的序列比对程序和参数计算任何两个多肽之间或任何两个肽的相应部分(例如结构域)之间的序列同一性百分比。当通过比较本发明的任何给定的一对多核苷酸编码的两个多肽共有的序列同一性百分比来评价这对多核苷酸或其相应部分时，两个编码的多肽之间的序列同一性百分比为至少约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。在本发明的某些实施方案中，本发明的特定多肽或其结构域的变体将与seqidno:16、18、20、22、32、34、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62所示的全长氨基酸序列中的至少一种具有至少约80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。优选地，本发明的特定多肽的变体将具有一个或多个结构域(例如，sp结构域、lrr结构域、ejm结构域、tm结构域、激酶结构域)，所述结构域将与seqidno:77-560所示的氨基酸序列中相应结构域的氨基酸具有至少约50％、55％、60％、65％70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。[0642]“变体”蛋白意指通过以下而源自天然蛋白的蛋白：在天然蛋白的n末端和/或c末端处缺失(所谓的截短)一个或多个氨基酸；在天然蛋白中的一个或多个内部位点处缺失和/或添加一个或多个氨基酸；或在天然蛋白中的一个或多个位点处置换一个或多个氨基酸。本发明的蛋白的生物活性变体可以有少至1-15个氨基酸残基，少至1-10个，例如6-10个，少至5个，少至4个、3个、2个或甚至1个氨基酸残基与该蛋白不同。如通过本文别处所述的序列比对程序和参数确定的，本发明的工程化atrlp23蛋白的生物活性变体将与序列表中所示的工程化atrlp23蛋白的氨基酸序列(例如seqidno:16、18、20、22、32、34、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60或62所示的氨基酸序列)具有至少约80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。本发明的工程化atrlp23蛋白的此类生物活性变体将通常包含多个结构域(例如sp结构域、lrr结构域、ejm结构域、tm结构域、激酶结构域)。如通过本文别处所述的序列比对程序和参数确定的，这样的生物活性变体的任意一个或多个结构域的氨基酸序列将包含与序列表中所示的工程化atrlp23蛋白的相应结构域的氨基酸序列至少约50％、55％、60％、65％70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性。本发明的蛋白的生物活性变体或其结构域可以有少至1-15个氨基酸残基，少至1-10个，例如6-10个，少至5个，少至4个、3个、2个或甚至1个氨基酸残基与该蛋白或结构域不同。[0643]本发明的蛋白可以以各种方式改变，包括氨基酸置换、缺失、截短和插入。这些操纵的方法通常是本领域中已知的。用于诱变和多核苷酸改变的方法是本领域众所周知的。参见，例如kunkel(1985)proc.natl.acad.sci.usa82:488-492；kunkel等人(1987)methodsinenzymol.154:367-382；美国专利号4,873,192；walker和gaastra编辑(1983)techniquesinmolecularbiology(macmillanpublishingcompany,newyork)及其中引用的参考文献。在通过引用并入本文的dayhoff等人(1978)atlasofproteinsequenceandstructure(natl.biomed.res.found.,washington,d.c.)的模型中可以获得关于不影响目标蛋白的生物活性的适当氨基酸置换的指导。保守置换，例如将一个氨基酸与另一个具有相似性质的氨基酸交换可能是最佳的。[0644]预期本文所涵盖的蛋白序列的缺失、插入和置换不会产生蛋白特性的根本变化。然而，当在这样做之前难以预测置换、缺失或插入的确切影响时，本领域技术人员将理解该影响将通过常规筛选测定来评价。也就是说，活性可以通过例如用于监测在向表达工程化atrlp23蛋白的植物原生质体群体中添加诱导物(elicitor)后胞质ca2 浓度的瞬时变化的测定来评价。这样的测定在下文实施例1-5中详细描述。优选地，在本文别处公开的或本领域其他已知的一种或多种测定中，本发明的工程化atrlp23蛋白包含与atrlp23(或atrlp23-3xflag或其他合适的对照)的活性或响应性相比增加的活性或增加的响应性。[0645]例如，对由目标植物病原体引起的植物病害敏感的植物可以用编码本发明的工程化atrlp23蛋白的多核苷酸构建体转化，再生成包含所述多核苷酸构建体的转化的植物或转基因植物，并使用本领域已知的或本文别处描述的标准抗病性测定来测试抗性。[0646]变体多核苷酸和蛋白还包括从诱变和重组发生程序如dna重排获得的序列和蛋白。这样的dna重排的策略是本领域已知的。参见，例如，stemmer(1994)proc.natl.acad.sci.usa91:10747-10751；stemmer(1994)nature370:389-391；crameri等人(1997)naturebiotech.15:436-438；moore等人(1997)j.mol.biol.272:336-347；zhang等人(1997)proc.natl.acad.sci.usa94:4504-4509；crameri等人(1998)nature391:288-291；和美国专利第5,605,793号和第5,837,458号。[0647]优选地，本发明的工程化atrlp23蛋白和编码它们的多核苷酸赋予或能够赋予包含这样的蛋白或多核苷酸的植物对至少一种植物病原体，但优选对两种、三种、四种、五种或更多种植物病原体的增强的抗性。[0648]pcr扩增可以用于本发明的方法的某些实施方案中。用于设计pcr引物和pcr扩增的方法通常是本领域中已知的，并且公开在sambrook等人(1989)molecularcloning:alaboratorymanual(第2版，coldspringharborlaboratorypress,plainview,newyork)中。还参见innis等人编辑(1990)pcrprotocols:aguidetomethodsandapplications(academicpress,newyork)；innis和gelfand编辑(1995)pcrstrategies(academicpress,newyork)；和innis和gelfand编辑(1999)pcrmethodsmanual(academicpress,newyork)。已知的pcr扩增方法包括但不限于使用配对引物、巢式引物、单一特异性引物、简并引物、基因特异性引物、载体特异性引物、部分错配引物等的方法。[0649]认识到编码本发明的工程化atrlp23蛋白的核酸分子包括包含与seqidno:15、17、19、21、31、33、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和/或61的核苷酸序列足够相同的核苷酸序列的核酸分子。术语“足够相同”在本文中用于指第一氨基酸或核苷酸序列包含足够或最小数量的与第二氨基酸或核苷酸序列相同或等效的(例如，具有相似侧链)的氨基酸残基或核苷酸，使得该第一和第二氨基酸或核苷酸序列具有一个或多个共同的结构域和/或共同的功能活性，诸如例如抗病性。例如，包含具有至少约45％、55％或65％的同一性，优选75％的同一性，更优选85％、86％、87％、88％、89％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性的共同结构域和/或序列的氨基酸或核苷酸序列可以是足够相同的。[0650]为了确定两个氨基酸序列或两个核酸的同一性百分比，为了最佳比较目的对序列进行比对。两个序列之间的同一性百分比是这些序列共享的相同位置的数目的函数(即，同一性百分比＝相同位置的数目/位置总数(例如重叠位置)x100)。在一个实施例中，两个序列的长度相同。在允许或不允许空位的情况下，两个序列之间的同一性百分比可以使用类似于下文描述的技术来确定。在计算同一性百分比时，通常会对精确匹配计数。[0651]可以使用数学算法来实现两个序列之间的同一性百分比的确定。用于比较两个序列的数学算法的一个优选的非限制性的实例是karlin和altschul(1990)proc.natl.acad.sci.usa87:2264的算法，在karlin和altschul(1993)proc.natl.acad.sci.usa90:5873-5877中进行了改良。将这样的算法引入altschul等人(1990)j.mol.biol.215:403的nblast和xblast程序中。blast核苷酸搜索可以用nblast程序进行，得分＝100，字长＝12，以获得与本发明的多核苷酸分子同源的核苷酸序列。blast蛋白搜索可以用xblast程序进行，得分＝50，字长＝3，以获得与本发明的蛋白分子同源的氨基酸序列。为了获得用于比较目的的带空位的比对，可以按照altschul等人(1997)nucleicacidsres.25:3389描述的使用带空位的blast。供选择地，psi-blast可用于执行迭代搜索，以检测分子之间的远缘关系。参见前述altschul等人(1997)。当使用blast、带空位的blast和psi-blast程序时，相应程序的默认参数(例如xblast和nblast；可在万维网ncbi.nlm.nih.gov上获得)。用于序列比较的数学算法的另一个优选的非限制性实例是myers和miller(1988)cabios4:11-17的算法。这样的算法被引入align程序(2.0版)，它是gcg序列比对软件包的一部分。当使用align程序比较氨基酸序列时，可以使用pam120权重残基表、空位长度罚分12和空位罚分4。比对也可以通过手动检查进行。[0652]除非另有说明，否则本文提供的序列同一性/相似性值是指使用本发明的全长序列并且使用包含在软件包vectorntisuite第7版(informax,inc.,bethesda,md,usa)中的程序alignx或其任何等效程序，使用默认参数，借助算法clustalw(nucleicacidresearch,22(22):4673-4680,1994)使用多重比对获得的值。“等效程序”是指任何序列比较程序，其对于所讨论的任何两个序列产生的比对结果具有与通过clustalw(1.83版)使用默认参数(可在万维网上的欧洲生物信息学研究所网站：ebi.ac.uk/tools/clustalw/index.html获得)生成的相应比对结果相同的核苷酸或氨基酸残基匹配和相同序列同一性百分比的比对。[0653]术语“多核苷酸”的使用并非旨在将本发明局限于包含dna的多核苷酸。本领域普通技术人员将认识到多核苷酸可以包括核糖核苷酸以及核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸的组合。这样的脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸包括天然存在的分子和合成类似物二者。本发明的多核苷酸还涵盖所有形式的序列，包括但不限于单链形式、双链形式、发夹、茎环结构等。[0654]可以在表达盒中提供包含工程化atrlp23蛋白编码区的多核苷酸构建体，以在植物或其他生物体或目标宿主细胞中表达。该盒将包括可操作地连接到蛋白编码区的5'和3'调控序列。“可操作地连接”旨在表示两个或更多个元件之间的功能连接。例如，目标多核苷酸或基因与调控序列(即，启动子)之间的可操作连接是允许目标多核苷酸表达的功能连接。可操作地连接的元件可以是连续的或不连续的。当用于指两个蛋白编码区的连接时，可操作地连接是指这些编码区在相同的阅读框中。盒可以额外包含至少一种待共转化到生物体中的另外的基因。供选择地，可以在多个表达盒上提供另外的(多个)基因。这样的表达盒被提供为具有用于插入蛋白编码区的多个限制性位点和/或重组位点，以处于调控区的转录调控下。表达盒可以另外包含选择性标志物基因。[0655]表达盒将以5'-3'转录方向包括在植物或其他生物体或非人类宿主细胞中起作用的转录和翻译起始区(即启动子)、本发明的工程化atrlp23蛋白编码区和转录和翻译终止区(即终止区)。本发明的调控区(即，启动子、转录调控区和翻译终止区)和/或本发明的工程化atrlp23蛋白编码区可以是天然的/与宿主细胞类似或彼此类似。供选择地，本发明的调控区和/或工程化的atrlp23蛋白编码区可以相对于宿主细胞异源或彼此异源。[0656]如本文所使用，关于核酸分子或核苷酸序列的“异源”是源自外来物种的核酸分子或核苷酸序列，或者如果来自相同物种，则在组成和/或基因组位点上因故意的人为干预而从其天然形式被修饰而成。例如，可操作地连接到异源多核苷酸的启动子来自与该多核苷酸所来源的物种不同的物种，或者如果来自相同/类似的物种，则其一或两者都在实质上被从其原始形式和/或基因组位点被修饰，或启动子不是可操作地连接的多核苷酸的天然启动子。如本文所用，嵌合基因包含可操作地连接到与编码序列异源的转录起始区的编码序列。[0657]本发明提供了包含至少本发明的核酸分子、表达盒和载体的宿主细胞。在本发明的优选实施方案中，宿主细胞是植物细胞。在其他实施方案中，宿主细胞选自细菌、真菌细胞和动物细胞。在某些实施方案中，宿主细胞是非人类动物细胞。然而，在一些其他实施方案中，宿主细胞是体外培养的人细胞。[0658]终止区可以是转录起始区天然带有的，可以是可操作连接的目标工程化atrlp23编码区天然带有的，可以是植物宿主天然带有的，或可以源自另一来源(即相对于启动子、目标蛋白和/或植物宿主是外来的或异源的)，或其任何组合。方便的终止区可从根癌农杆菌(a.tumefaciens)的ti质粒中获得，例如章鱼碱合酶和胭脂碱合酶终止区。还参见guerineau等人(1991)mol.gen.genet.262:141-144；proudfoot(1991)cell64:671-674；sanfacon等人(1991)genesdev.5:141-149；mogen等人(1990)plantcell2:1261-1272；munroe等人(1990)gene91:151-158；ballas等人(1989)nucleicacidsres.17:7891-7903；和joshi等人(1987)nucleicacidsres.15:9627-9639。[0659]在适当的情况下，可以优化多核苷酸以增加在转化植物中的表达。也就是说，可以使用植物偏好性密码子来合成多核苷酸以改善表达。参见例如campbell和gowri(1990)plantphysiol.92:1-11对宿主偏好性密码子使用的讨论。本领域中可获得用于合成植物偏好性基因的方法。参见例如美国专利第5,380,831号和第5,436,391号以及murray等人(1989)nucleicacidsres.17:477-498，其通过引用并入本文。[0660]另外的可增强细胞宿主中的基因表达的序列修饰是已知的。这些包括消除编码假(spurious)多腺苷酸化信号、外显子-内含子剪接位点信号、转座子样重复序列和其他此类可能对基因表达有害的充分表征的序列的序列。可以将序列的g-c含量调整为给定细胞宿主的平均水平，如通过参考宿主细胞中表达的已知基因计算得出的平均水平。当可能时，对序列进行修饰以避免预测的二级mrna发夹结构。[0661]此外，可以修饰多核苷酸以改变工程化atrlp23蛋白的氨基酸序列，例如，以提高翻译效率、蛋白稳定性和/或任何其他期望的一种或多种性质，和/或减少任何一种或多种不希望的性质，同时改善或至少不显著降低工程化atrlp23蛋白的生物活性。例如，可以修饰多核苷酸以去除由其编码的蛋白中的潜在致敏性区域。参照allergenonline数据库的已知和推定的过敏原的完整列表(goodman等人(2016)mol.nutr.foodres.60(5):1183-1198；可在万维网：allergenonline.org获取)。[0662]表达盒可以另外包含5'前导序列。这样的前导序列可以起到增强翻译的作用。翻译前导序列是本领域已知的并且包括：细小核糖核酸病毒前导序列，例如，emcv前导序列(脑心肌炎5'非编码区)(elroy-stein等人(1989)proc.natl.acad.sci.usa86:6126-6130)；马铃薯y病毒前导序列，例如tev前导序列(烟草蚀纹病毒)(gallie等人(1995)gene165(2):233-238)、mdmv前导序列(玉米矮花叶病毒)(virology154:9-20)和人类免疫球蛋白重链结合蛋白(bip)(macejak等人(1991)nature353:90-94)；来自苜蓿花叶病毒外壳蛋白mrna的非翻译前导序列(amvrna4)(jobling等人(1987)nature325:622-625)；烟草花叶病毒前导序列(tmv)(gallie等人(1989)molecularbiologyofrna,cech编辑(liss,newyork),237-256页)；和玉米褪绿斑驳病毒前导序列(mcmv)(lommel等人(1991)virology81:382-385)。另见della-cioppa等人(1987)plantphysiol.84:965-968。[0663]在制备表达盒时，可以对各种dna片段进行操纵，以便以正确的取向，并且在适当的情况下以正确的阅读框提供dna序列。为此，可以使用衔接子(也称为“衔接体”)或接头来连接dna片段，或者可以包括其他操纵以提供方便的限制性位点、去除多余的dna、去除限制性位点等。为此目的，可以包括体外诱变、引物修复、限制性消化、退火、重新置换，例如转换和颠换。[0664]在本发明的实践中可以使用许多启动子。可以基于期望的结果来选择启动子。核酸可以与组成型、组织偏好性或其他启动子组合以在植物中表达。这样的组成型启动子包括例如核心camv35s启动子(odell等人(1985)nature313:810-812)；水稻肌动蛋白启动子(mcelroy等人(1990)plantcell2:163-171)；泛素启动子(christensen等人(1989)plantmol.biol.12:619-632和christensen等人(1992)plantmol.biol.18:675-689)；pemu启动子(last等人(1991)theor.appl.genet.81:581-588)；mas启动子(velten等人(1984)emboj.3:2723-2730)；als启动子(美国专利第5,659,026号)等。其他组成型启动子包括，例如，美国专利第5,608,149号；第5,608,144号；第5,604,121号；第5,569,597号；第5,466,785号；第5,399,680号；第5,268,463号；第5,608,142号和第6,177,611号。[0665]组织偏好性启动子可用于靶向增强的工程化atrlp23蛋白编码序列在特定植物组织内的表达。这样的组织偏好性启动子包括但不限于，叶偏好性启动子、根偏好性启动子、种子偏好性启动子和茎偏好性启动子。组织偏好性启动子包括yamamoto等人(1997)plantj.12(2):255-265；kawamata等人(1997)plantcellphysiol.38(7):792-803；hansen等人(1997)mol.gengenet.254(3):337-343；russell等人(1997)transgenicres.6(2):157-168；rinehart等人(1996)plantphysiol.112(3):1331-1341；vancamp等人(1996)plantphysiol.112(2):525-535；canevascini等人(1996)plantphysiol.112(2):513-524；yamamoto等人(1994)plantcellphysiol.35(5):773-778；lam(1994)resultsprobl.celldiffer.20:181-196；orozco等人(1993)plantmolbiol.23(6):1129-1138；matsuoka等人(1993)procnatl.acad.sci.usa90(20):9586-9590；和guevara-garcia等人(1993)plantj.4(3):495-505。如有必要，可以对这样的启动子进行修饰以进行弱表达。[0666]转基因可以使用诱导型启动子表达，诸如例如病原体诱导型启动子。这样的启动子包括来自病原体感染后诱导的发病机制相关蛋白(pr蛋白)的启动子；例如，来自pr蛋白、sar蛋白、β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶等的启动子。参见例如，redolfi等人(1983)neth.j.plantpathol.89:245-254；uknes等人(1992)plantcell4:645-656；和vanloon(1985)plantmol.virol.4:111-116。还参见wo99/43819，本文通过引用将其并入。[0667]关注的是在病原体感染部位或附近局部表达的启动子。参见例如marineau等人(1987)plantmol.biol.9:335-342；matton等人(1989)molecularplant-microbeinteractions2:325-331；somsisch等人(1986)proc.natl.acad.sci.usa83:2427-2430；somsisch等人(1988)mol.gen.genet.2:93-98；和yang(1996)proc.natl.acad.sci.usa93:14972-14977。还参见chen等人(1996)plantj.10:955-966；zhang等人(1994)proc.natl.acad.sci.usa91:2507-2511；warner等人(1993)plantj.3:191-201；siebertz等人(1989)plantcell1:961-968；美国专利第5,750,386号(线虫诱导型)；以及其中引用的参考文献。特别关注的是玉米prms基因的诱导型启动子，其表达是由病原体串珠镰刀菌(fusariummoniliforme)诱导的(参见，例如，cordero等人(1992)physiol.mol.plantpath.41:189-200)。[0668]此外，当病原体通过伤口或昆虫损伤处进入植物时，可以在本发明的构建物中使用伤口诱导型启动子。这样的伤口诱导型启动子包括马铃薯蛋白酶抑制剂(pinii)基因(ryan(1990)ann.rev.phytopath.28:425-449；duan等人(1996)naturebiotechnology14:494-498)；wun1和wun2，美国专利号第5,428,148号；win1和win2(stanford等人(1989)mol.gen.genet.215:200-208)；系统素(mcgurl等人(1992)science225:1570-1573)；wip1(rohmeier等人(1993)plantmol.biol.22:783-792；eckelkamp等人(1993)febsletters323:73-76)；mpi基因(corderok等人(1994)plantj.6(2):141-150)等等，其被通过引用并入本文。[0669]化学物质调控的启动子可以用于通过施加外源化学调控剂来调控植物中基因的表达。根据目的，启动子可以是其中施加化学物质诱导基因表达的化学诱导型启动子，或其中施加化学物质抑制基因表达的化学抑制型启动子。化学诱导型启动子是本领域已知的，并且包括但不限于，由苯磺酰胺除草剂安全剂激活的玉米in2-2启动子，由用作萌发前除草剂的疏水亲电子化合物激活的玉米gst启动子，以及由水杨酸激活的烟草pr-1a启动子。受关注的其他化学物质调控的启动子包括类固醇响应型启动子(参见，例如，schena等人(1991)proc.natl.acad.sci.usa88:10421-10425和mcnellis等人(1998)plantj.14(2):247-257中的糖皮质激素诱导型启动子)和四环素诱导型和四环素抑制型启动子(参见，例如gatz等人(1991)mol.gen.genet.227:229-237，和美国专利第5,814,618号和第5,789,156号)，其被通过引用并入本文。[0670]表达盒还可以包含用于选择转化的细胞的选择性标志物基因。选择性标志物基因用于选择转化的细胞或组织。标志物基因包括编码抗生素抗性的基因，例如编码新霉素磷酸转移酶ii(neo)和潮霉素磷酸转移酶(hpt)的基因，以及赋予对除草剂化合物的抗性的基因，所述除草剂化合物例如草铵膦、溴苯腈、咪唑啉酮和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-d)。另外的选择性标志物包括表型标志物，例如β-半乳糖苷酶和荧光蛋白例如绿色荧光蛋白(gfp)(su等人(2004)biotechnolbioeng85:610-9和fetter等人(2004)plantcell16:215-28)、青色荧光蛋白(cyp)(bolte等人(2004)j.cellscience117:943-54和kato等人(2002)plantphysiol129:913-42)和黄色荧光蛋白(来自evrogen的phiyfptm，参见bolte等人(2004)j.cellscience117:943-54)。对于另外的选择性标志物，一般参见yarranton(1992)curr.opin.biotech.3:506-511；christopherson等人(1992)proc.natl.acad.sci.usa89:6314-6318；yao等人(1992)cell71:63-72；reznikoff(1992)mol.microbiol.6:2419-2422；barkley等人(1980),theoperon,第177-220页；hu等人(1987)cell48:555-566；brown等人(1987)cell49:603-612；figge等人(1988)cell52:713-722；deuschle等人(1989)proc.natl.acad.aci.usa86:5400-5404；fuerst等人(1989)proc.natl.acad.sci.usa86:2549-2553；deuschle等人(1990)science248:480-483；gossen(1993)博士论文,universityofheidelberg；reines等人(1993)proc.natl.acad.sci.usa90:1917-1921；labow等人(1990)mol.cell.biol.10:3343-3356；zambretti等人(1992)proc.natl.acad.sci.usa89:3952-3956；baim等人(1991)proc.natl.acad.sci.usa88:5072-5076；wyborski等人(1991)nucleicacidsres.19:4647-4653；hillen和wissman(1989)topicsmol.struc.biol.10:143-162；degenkolb等人(1991)antimicrob.agentschemother.35:1591-1595；kleinschnidt等人(1988)biochemistry27:1094-1104；bonin(1993)博士论文,universityofheidelberg；gossen等人(1992)proc.natl.acad.sci.usa89:5547-5551；oliva等人(1992)antimicrob.agentschemother.36:913-919；hlavka等人(1985)handbookofexperimentalpharmacology,vol.78(springer-verlag,berlin)；gill等人(1988)nature334:721-724。这些公开内容被通过引用并入本文。[0671]上述选择性标志物基因的列表并非旨在限制。任何选择性标志物基因都可以用于本发明。molecularbiology(schuler和zielinski编辑)academicpress,inc.(1989)。转化方法取决于要转化的植物细胞、使用的载体的稳定性、基因产物的表达水平和其他参数。[0678]将核苷酸序列引入植物细胞并随后插入植物基因组的其他合适的方法包括如crossway等人(1986)biotechniques4:320-334的显微注射；如riggs等人(1986)proc.natl.acad.sci.usa83:5602-5606描述的电穿孔；如townsend等人的美国专利第5,563,055号、zhao等人的美国专利第5,981,840号描述的农杆菌属介导的转化；paszkowski等人(1984)emboj.3:2717-2722描述的直接基因转移；和例如sanford等人的美国专利第4,945,050号；tomes等人的美国专利第5,879,918号；tomes等人的美国专利第5,886,244号；bidney等人的美国专利第5,932,782号；tomes等人(1995)“directdnatransferintointactplantcellsviamicroprojectilebombardment,”plantcell,tissue,andorganculture:fundamentalmethods,gamborg和phillips编辑(springer-verlag,berlin)；mccabe等人(1988)biotechnology6:923-926中描述的弹道粒子加速；和lec1转化(wo00/28058)。另外参见weissinger等人(1988)ann.rev.genet.22:421-477；sanford等人(1987)particulatescienceandtechnology5:27-37(洋葱)；christou等人(1988)plantphysiol.87:671-674(大豆)；mccabe等人(1988)bio/technology6:923-926(大豆)；finer和mcmullen(1991)invitrocelldev.biol.27p:175-182(大豆)；singh等人(1998)theor.appl.genet.96:319-324(大豆)；datta等人(1990)biotechnology8:736-740(水稻)；klein等人(1988)proc.natl.acad.sci.usa85:4305-4309(玉米)；klein等人(1988)biotechnology6:559-563(玉米)；tomes,美国专利第5,240,855号；buising等人，美国专利第5,322,783号和第5,324,646号；tomes等人(1995)“directdnatransferintointactplantcellsviamicroprojectilebombardment”,plantcell,tissue,andorganculture:fundamentalmethods,gamborg编辑(springer-verlag,berlin)(玉米)；klein等人(1988)plantphysiol.91:440-444(玉米)；fromm等人(1990)biotechnology8:833-839(玉米)；hooykaas-vanslogteren等人(1984)nature(london)311:763-764；bowen等人，美国专利第5,736,369号(谷物)；bytebier等人(1987)proc.natl.acad.sci.usa84:5345-5349(百合科(liliaceae))；dewet等人(1985),theexperimentalmanipulationofovuletissues,chapman等人编辑(longman,newyork),197-209页(花粉)；kaeppler等人(1990)plantcellreports9:415-418和kaeppler等人(1992)theor.appl.genet.84:560-566(晶须介导的转化)；d’halluin等人(1992)plantcell4:1495-1505(电穿孔)；li等人(1993)plantcellreports12:250-255以及christou和ford(1995)annalsofbotany75:407-413(水稻)；osjoda等人(1996)naturebiotechnology14:745-750(玉米，经由根瘤农杆菌(agrobacteriumtumefaciens))；其全部被通过引用并入本文。[0679]本发明的多核苷酸可以通过使植物与病毒或病毒核酸接触而引入植物中。通常，这样的方法包括将本发明的多核苷酸构建体掺入病毒dna或rna分子内。此外，认识到本发明的启动子还包括用于通过病毒rna聚合酶转录的启动子。用于将多核苷酸构建体引入植物并表达其中编码的蛋白质的方法，包括病毒dna或rna分子，是本领域已知的。参见例如美国专利第5,889,191号、第5,889,190号、第5,866,785号、第5,589,367号和第5,316,931号；其被通过引用并入本文。[0680]如果需要，修饰的病毒或修饰的病毒核酸可以制备成制剂。这样的制剂以已知方式制备(综述参见例如us3,060,084，ep-a707445(对于液体浓缩物)，browning,“agglomeration”,chemicalengineering,dec.4,1967,147-48，perry’schemicalengineer’shandbook,第4版,mcgraw-hill,newyork,1963,第8-57页及以下，wo91/13546，us4,172,714，us4,144,050，us3,920,442，us5,180,587，us5,232,701，us5,208,030，gb2,095,558，us3,299,566，klingman,weedcontrolasascience,johnwileyandsons,inc.,newyork,1961，hance等人weedcontrolhandbook,第8版,blackwellscientificpublications,oxford,1989和mollet,h.,grubemann,a.,formulationtechnology,wileyvchverlaggmbh,weinheim(germany),2001,2.d.a.knowles,chemistryandtechnologyofagrochemicalformulations,kluweracademicpublishers,dordrecht,1998(isbn0-7514-0443-8)，例如通过用适用于农用化学品制剂的助剂扩展活性化合物，所述助剂如溶剂和/或载体，如果需要的话，乳化剂、表面活性剂和分散剂、防腐剂、消泡剂、防冻剂，以及对于种子处理制剂还有任选的着色剂和/或粘合剂和/或胶凝剂。[0681]在特定实施方案中，本发明的多核苷酸构建体和表达盒可以使用本领域已知的多种瞬时转化方法提供给植物。这样的方法包括，例如，显微注射或粒子轰击。参见例如，crossway等人(1986)molgen.genet.202:179-185；nomura等人(1986)plantsci.44:53-58；hepler等人(1994)pnassci.91:2176-2180和hush等人(1994)j.cellscience107:775-784，将其全部通过引用并入本文。供选择地，可以使用本领域已知的技术将多核苷酸瞬时转化到植物中。这样的技术包括病毒载体系统和如本文别处所述的根瘤农杆菌介导的瞬时表达。[0682]可以按照常规方式将已被转化的细胞培育成植物。参见，例如，mccormick等人(1986)plantcellreports5:81-84。然后可以种植这些植物，并用相同的转化株或不同株授粉，并且所得的杂合体被鉴定到期望表型特征的组成型表达。可以培育两代或更多代以确保期望表型特征的表达被稳定维持和遗传，然后收获种子以确保期望表型特征的表达被实现。以这种方式，本发明提供了转化的种子(也称为“转基因种子”)，其具有稳定地掺入到其基因组中的本发明的多核苷酸构建体，例如，本发明的表达盒。[0683]本领域已知的用于修饰植物基因组中的dna的此类方法包括例如突变育种和基因组编辑技术，诸如例如涉及靶向诱变、定点整合(sdi)和同源重组的方法。靶向诱变或类似技术公开于美国专利第5,565,350号；第5,731,181号；第5,756,325号；第5,760,012号；第5,795,972号；第5,871,984号和第8,106,259号；其全部被通过引用整体并入本文。用于基因修饰或基因置换的包括同源重组的方法可包括使用锌指核酸酶(zfn)、tal(转录激活因子样)效应物核酸酶(talen)、成簇规则间隔短回文重复序列/crispr相关核酸酶(crispr/cas核酸酶)或归巢核酸内切酶诱导dna中的单链或双链断裂，所述核酸内切酶是工程化的核酸内切酶以在植物、其他生物体或宿主细胞的基因组中的特定识别序列处产生双链断裂。参见例如durai等人(2005)nucleicacidsres.33:5978-90；mani等人(2005)biochem.biophys.res.comm335:447-57；美国专利第7,163,824号、第7,001,768号和第6,453,242号；arnould等人(2006)jmol.biol.355:443-58；ashworth等人(2006)nature441:656-9；doyon等人(2006)jamchemsoc128:2477-84；rosen等人(2006)nucleicacidsres.34:4791-800；和smith等人(2006)nucleicacidsres.34:e149；美国专利申请公开案第2009/0133152号；美国专利申请公开案第2007/0117128号；其全部被通过引用整体并入本文。[0684]tal效应物核酸酶(talen)可以用于在植物基因组中的特定识别序列处产生双链断裂，以通过同源重组进行基因修饰或基因置换。tal效应物核酸酶是一类序列特异性核酸酶，其可用于在植物或其他生物体基因组中的特定靶序列处产生双链断裂。tal效应物核酸酶是通过将天然或工程化转录激活因子样(tal)效应物或其功能部分融合到核酸内切酶的催化结构域，例如foki来产生的。独特的模块化tal效应物dna结合结构域允许设计可能具有任何给定dna识别特异性的蛋白。因此，可以对tal效应物核酸酶的dna结合结构域进行工程化，以识别特定的dna靶位点，从而用于在期望的靶序列处产生双链断裂。参见wo2010/079430；morbitzer等人(2010)pnas10.1073/pnas.1013133107；scholze和boch(2010)virulence1:428-432；christian等人genetics(2010)186:757-761；li等人(2010)nuc.acidsres.(2010)doi:10.1093/nar/gkq704；和miller等人(2011)naturebiotechnology29:143–148；其全部被通过引用并入本文。[0685]crispr/cas核酸酶系统还可用于在植物基因组中的特定识别序列处产生单链或双链断裂，以通过同源重组进行基因修饰或基因置换。crispr/cas核酸酶是rna导向的(简单的向导rna，简称sgrna)dna核酸内切酶系统，在与设计的rna同源的dna片段中执行序列特异性双链断裂。可以设计序列的特异性(chos.w.等人,nat.biotechnol.31:230-232,2013；congl.等人,science339:819-823,2013；malip.等人,science339:823-826,2013；fengz.等人,cellresearch:1-4,2013)。[0686]此外，zfn可用于在植物基因组中的特定识别序列处产生双链断裂，以通过同源重组进行基因修饰或基因置换。锌指核酸酶(zfn)是一种融合蛋白，包含负责dna切割的foki限制性核酸内切酶蛋白部分和锌指蛋白，该融合蛋白识别特定的设计的基因组序列并在这些序列处切割双链dna，从而产生游离的dna末端(urnovf.d.等人,natrevgenet.11:636-46,2010；carrolld.,genetics.188:773-82,2011)。[0687]使用位点特异性核酸酶，诸如例如本文上述的那些核酸酶使dna断裂可以增加断裂区域中的同源重组率。因此，如上所述的此类效应物与核酸酶的偶联能够在基因组中产生靶向变化，包括添加、缺失和其他修饰。[0688]除非明确说明或从使用的上下文中明显看出，本发明的方法和组合物可以用于任何植物物种，包括例如单子叶植物、双子叶植物和松柏科植物。受关注的植物物种的实例包括但不限于玉米(玉米(zeamays))，芸苔属(brassica)的种(例如，甘蓝型油菜(b.napus)、芜菁(b.rapa)、芥菜(b.juncea))，尤其是可用作种子油来源的芸苔属的种，紫花苜蓿(alfalfa(medicagosativa))，水稻(rice(oryzasativa))，黑麦(rye(secalecereale))，黑小麦(×小黑麦属(triticosecale)或小麦属(triticum)×黑麦属(secale))，高粱(sorghum)(两色蜀黍(sorghumbicolor)、高粱(sorghumvulgare))，埃塞俄比亚画眉草(teff(eragrostistef))，粟(例如珍珠粟(pearlmillet)(pennisetumglaucum))、黍(prosomillet(panicummiliaceum))、谷子(谷子(setariaitalica))、龙爪稷(fingermillet(eleusinecoracana))、柳枝稷(switchgrass(panicumvirgatum))，向日葵(sunflower(helianthusannuus))，红花(safflower(carthamustinctorius))，小麦(wheat(triticumaestivum))，大豆(soybean(glycinemax))，烟草(tabacoo(nicotianatabacum))，马铃薯(potato(solanumtuberosum))，花生(peanut(arachishypogaea))，棉花(海岛棉(gossypiumbarbadense)、陆地棉(gossypiumhirsutum))、草莓(例如草莓属(fragaria)×草莓属(ananassa)、野草莓(fragariavesca)、麝香草莓(fragariamoschata)、弗吉尼亚草莓(fragariavirginiana)、智利草莓(fragariachiloensis))，甘薯(sweetpotato(ipomoeabatatus))，薯蓣(薯蓣属的种(dioscoreaspp.)、几内亚薯蓣(d.rotundata)、黄薯蓣(d.cayenensis)、参薯(d.alata)、多穗状花薯蓣(d.polystachya)、黄独(d.bulbifera)、毛薯(d.esculenta)、灌丛薯蓣(d.dumetorum)、三裂叶薯蓣(d.trifida))，木薯(cassava(manihotesculenta))，咖啡(咖啡属的种(coffeaspp.))，椰子(coconut(cocosnucifera))，油棕(例如非洲油棕(elaeisguineensis)、美洲油棕(elaeisoleifera))，菠萝(pineapple(ananascomosus))，柑橘树(柑橘属的种(citrusspp.))，可可(cocoa(theobromacacao))，茶(茶树(camelliasinensis))，香蕉(芭蕉属的种(musaspp.))，鳄梨(avocado(perseaamericana))，无花果(fig(ficuscasica))，番石榴(guava(psidiumguajava))，芒果(mango(mangiferaindica))，橄榄(油橄榄(oleaeuropaea))，木瓜(番木瓜(caricapapaya))、腰果(cashew(anacardiumoccidentale))，夏威夷果(澳洲坚果(macadamiaintegrifolia))，杏树(扁桃(prunusamygdalus))，枣(椰枣(phoenixdactylifera))，甜菜(betavulgaris)的栽培形式(甜菜、根甜菜(gardenbeets)、叶茎用甜菜(chard)或莙荙菜(spinachbeet)、饲料甜菜(mangelwurzel)或饲用甜菜(fodderbeet))，甘蔗(甘蔗属的种(saccharumspp.))，燕麦(oat(avenasativa))，大麦(barley(hordeumvulgare))，大麻属(大麻(cannabissativa)、印度大麻(c.indica)、莠草大麻(c.ruderali))，白杨(杨属的种(populusspp.))，桉树(桉属的种(eucalyptusspp.))，拟南芥，发根拟南芥(arabidopsisrhizogenes)，本氏烟(nicotianabenthamiana)，二穗短柄草(brachypodiumdistachyo)蔬菜，观赏植物和松柏科植物以及其他树。在具体的实施方案中，本发明的植物是作物植物(例如玉米、高粱、小麦、粟、水稻、大麦、燕麦、甘蔗、紫花苜蓿、大豆、花生、向日葵、棉花、红花、芸苔属的种、莴苣、草莓、苹果、柑橘等)。[0689]蔬菜包括番茄(tomato(lycopersiconesculentum))，茄子(eggplant)(也称为“茄子(aubergine)”或“茄子(brinjal)”)(茄子(solanummelongena))，辣椒(pepper(capsicumannuum))，莴苣(例如莴苣(lactucasativa))，青豆(菜豆(phaseolusvulgaris))，利马豆(莱豆(phaseoluslimensis))，豌豆(山黧豆属的种(lathyrusspp.))，鹰嘴豆(chickenpea(cicerarietinum))和黄瓜属(cucumis)的成员，例如黄瓜(cucumber(c.sativus))、香瓜(麝香甜瓜(c.cantalupensis))和甜瓜(muskmelon(c.melo))。观赏植物包括杜鹃花(杜鹃花属的种(rhododendronspp.))、绣球花(hyfrangea(macrophyllahydrangea))、木槿(朱槿(hibiscusrosasanensis))、玫瑰(蔷薇属的种(rosaspp.))、郁金香(郁金香属的种(tulipaspp.))、水仙花(水仙属的种(narcissusspp.))、喇叭花(矮牵牛(petuniahybrida))、康乃馨(carnation(dianthuscaryophyllus))、一品红(poinsettia(euphorbiapulcherrima))和菊花。果树和相关植物包括例如苹果、梨、桃子、李子、橙子、葡萄柚、酸橙、柚子、棕榈树和香蕉。坚果树和相关植物包括例如杏树、腰果、胡桃、开心果、澳洲坚果、欧洲榛(filbert)、榛子(hazelnut)和美洲山核桃(pecan)。[0690]在具体实施方案中，本发明的植物是作物植物，例如玉米(maize)(玉米(corn))、大豆、小麦、水稻、棉花、紫花苜蓿、向日葵、油菜(芸苔属的物种，特别是甘蓝型油菜、芜菁、芥菜)、油菜籽(甘蓝型油菜)、高粱、粟、大麦、黑小麦、红花、花生、甘蔗、烟草、马铃薯、番茄和辣椒。[0691]除非上下文另有明确说明，否则术语“植物”旨在涵盖处于任何成熟或发育阶段的植物，以及取自或源自任何这样的植物的任何细胞、组织或器官(植物部分)。植物部分包括但不限于果实、茎、块茎、根、花、胚珠、雄蕊、花瓣、叶、下胚轴、上胚轴、子叶、胚、分生组织区、愈伤组织、花药培养物、配子体、孢子体、花粉、小孢子、原生质体、种子等。认识到本发明的植物原生质体可以由上述植物部分中的任何一种或多种并且在发育和/或成熟的任何阶段制备。[0692]同样，除非上下文另有明确说明，否则术语“植物细胞”旨在涵盖从处于任何成熟或发育阶段的植物获得的植物细胞或在处于任何成熟或发育阶段的植物中的植物细胞。植物细胞可以来自植物部分或在植物部分中，植物部分包括但不限于果实、茎、块茎、根、花、胚珠、雄蕊、叶、胚、分生组织区、愈伤组织、花药培养物、配子体、孢子体、花粉、小孢子、体外培养的组织、器官或细胞等。认识到本发明的植物原生质体可以由上述植物细胞中的任何一种或多种并且在发育和/或成熟的任何阶段制备。如本文所使用，除非另有明确说明或从上下文的使用中明显，否则术语“植物细胞”旨在涵盖植物原生质体。[0693]在本发明的一些实施方案中，用编码本发明的工程化atrlp23蛋白的多核苷酸构建体转化植物细胞。如本文所使用，术语“表达”是指基因产物的生物合成，包括所述基因产物的转录和/或翻译。由dna分子“表达”或“产生”蛋白或多肽是指转录和翻译编码序列以产生蛋白或多肽，而由rna分子“表达”或“产生”蛋白或多肽是指分子是指翻译rna编码序列以产生蛋白或多肽。本文别处描述了编码工程化atrlp23蛋白的多核苷酸构建体和核酸分子的实例。[0694]本文使用的术语“dna”或“rna”并非旨在将本发明局限于包含dna或rna的多核苷酸分子。本领域普通技术人员将认识到本发明的方法和组合物包括由脱氧核糖核苷酸(即dna)、核糖核苷酸(即rna)或核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸的组合构成的多核苷酸分子。这样的脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸包括天然存在的分子和合成类似物二者，包括但不限于合成的、天然存在的和非天然存在的核苷酸类似物或修饰的骨架残基或连接，其具有与参考核酸相似的结合特性，并且其代谢方式与参考核苷酸相似。这样的类似物的实例包括但不限于硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、甲基膦酸酯、手性甲基膦酸酯、2-o-甲基核糖核苷酸、肽-核酸(pna)。本发明的多核苷酸分子还涵盖所有形式的多核苷酸分子，包括但不限于单链形式、双链形式、发夹结构、茎环结构等。此外，本领域普通技术人员应理解，本文公开的核苷酸序列还包括该示例性核苷酸序列的互补序列。[0695]本发明涉及用于产生对由一种、两种、三种、四种或更多种植物病原体引起的植物病害具有增强的抗性的植物的组合物和方法。“对植物病害的抗性”或“抗病性”是指植物避免因植物-病原体相互作用的结果而表现疾病症状。也就是说，防止一种或多种病原体引起一种植物病害或多种植物病害和相关的病害症状，或供选择地最小化或减轻由一种或多种病原体引起的病害症状。[0696]本发明涵盖本文或随附的序列表和/或附图中公开的多核苷酸构建体，包括但不限于包含选自如本文别处所公开的seqidno:15、17、19、21、31、33、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61及其变体的核苷酸序列的多核苷酸构建体。本发明还包括植物、植物细胞、宿主细胞和包含这样的多核苷酸构建体中的至少一种的载体，以及由这样的植物制备的食品。本发明还包括包含这样的多核苷酸构建体中的至少一种的植物在本文别处公开的方法中的用途，所述方法诸如例如在农作物生产中限制植物病害的方法。[0697]植物病原体包括例如细菌、真菌、卵菌、病毒、线虫等。主要作物的特定病原体包括：大豆：大雄疫霉大豆专化型(phytophthoramegaspermafsp.glycinea)、壳球孢菌(macrophominaphaseolina)、立枯丝核菌(rhizoctoniasolani)、核盘菌(sclerotiniasclerotiorum)、尖孢镰刀菌(fusariumoxysporum)、菜豆间座壳大豆变种(diaporthephaseolorumvar.sojae)(大豆拟茎点菌(phomopsissojae))、菜豆间座壳大豆茎溃疡变种(diaporthephaseolorumvar.caulivora)、齐整小核菌(sclerotiumrolfsii)、菊池尾孢(cercosporakikuchii)、大豆尾孢(cercosporasojina)、东北霜霉(peronosporamanshurica)、束状炭疽菌(colletotrichumdematium)(平头炭疽菌(colletotichumtruncatum))、多主棒孢霉(corynesporacassiicola)、大豆褐纹壳针孢(septoriaglycines)、大豆生叶点霉(phyllostictasojicola)、互隔交链孢霉(alternariaalternata)、丁香假单胞菌大豆致病变种(pseudomonassyringaep.v.glycinea)、野油菜黄单胞菌菜豆致病变种(xanthomonascampestrisp.v.phaseoli)、扩散叉丝壳(microsphaeradiffusa)、半裸镰刀菌(fusariumsemitectum)、大豆茎褐腐病菌(phialophoragregata)、大豆花叶病毒、大豆小丛壳(glomerellaglycines)、烟草环斑病毒、烟草条纹病毒、豆薯层锈菌(phakopsorapachyrhizi)、瓜果腐霉菌(pythiumaphanidermatum)、终极腐霉菌(pythiumultimum)、德巴利腐霉(pythiumdebaryanum)、番茄斑萎病毒、大豆胞囊线虫(heteroderaglycines)、腐皮镰孢霉菌(fusariumsolani)；油菜：白锈病菌(albugocandida)、芸薹链格孢(alternariabrassicae)、十字花科小球腔菌(leptosphaeriamaculans)、立枯丝核菌、核盘菌、芸苔生球腔菌(mycosphaerellabrassicicola)、终极腐霉菌、寄生霜霉(peronosporaparasitica)、粉红镰刀菌(fusariumroseum)、互隔交链孢霉；紫花苜蓿：密执安棒形杆菌诡谲亚种(clavibactermichiganesesubsp.insidiosum)、终极腐霉菌、畸雌腐霉(pythiumirregulare)、华丽腐霉(pythiumsplendens)、德巴利腐霉、瓜果腐霉菌、大雄疫霉(phytophthoramegasperma)、三叶草霜霉菌(peronosporatrifoliorum)、苜蓿茎点霉苜蓿变种(phomamedicaginisvar.medicaginis)、苜蓿尾孢(cercosporamedicaginis)、苜蓿假盘菌(pseudopezizamedicaginis)、苜蓿黄斑病菌(leptotrochilamedicaginis)、尖孢镰刀菌、黑白轮枝菌(verticilliumalbo-atrum)、野油菜黄单胞菌苜蓿致病变种(xanthomonascampestrisp.v.alfalfae)、根腐丝囊霉(aphanomyceseuteiches)、草色匍柄霉(stemphyliumherbarum)、苜蓿匍柄霉(stemphyliumalfalfae)、三叶草炭疽菌(colletotrichumtrifolii)、苜蓿小光壳(leptosphaerulinabriosiana)、条纹锈病菌(uromycesstriatus)、三叶草核盘菌(sclerotiniatrifoliorum)、苜蓿壳多孢(stagonosporameliloti)、葱叶枯匍柄霉(stemphyliumbotryosum)、苜蓿纤毛菌(leptotrichilamedicaginis)；小麦：丁香假单胞菌致黑致病变种(pseudomonassyringaep.v.atrofaciens)、冰草条黑粉菌(urocystisagropyri)、野油菜黄单胞菌半透明致病变种(xanthomonascampestrisp.v.translucens)、丁香假单胞菌丁香致病变种(pseudomonassyringaep.v.syringae)、互隔交链孢霉、腊叶芽枝霉(cladosporiumherbarum)、禾谷镰孢菌(fusariumgraminearum)、燕麦镰孢菌(fusariumavenaceum)、黄色镰孢菌(fusariumculmorum)、小麦散黑粉菌(ustilagotritici)、小麦壳二孢(ascochytatritici)、禾谷头孢霉(cephalosporiumgramineum)、禾生炭疽菌(collotetrichumgraminicola)、禾谷白粉病菌小麦专化型(erysiphegraminisf.sp.tritici)、禾柄锈菌小麦专化型(pucciniagraminisf.sp.tritici)、隐匿柄锈菌小麦专化型(pucciniareconditaf.sp.tritici)、条形柄锈菌(pucciniastriiformis)、偃麦草核腔菌(pyrenophoratritici-repentis)、颖枯壳针孢(septorianodorum)、小麦壳针孢(septoriatritici)、燕麦壳针孢(septoriaavenae)、铺毛拟小尾孢(pseudocercosporellaherpotrichoides)、立枯丝核菌、禾谷丝核菌(rhizoctoniacerealis)、禾顶囊壳小麦变种(gaeumannomycesgraminisvar.tritici)、瓜果腐霉菌、强雄腐霉(pythiumarrhenomanes)、终极腐霉菌、根腐离蠕孢(bipolarissorokiniana)、大麦黄矮病毒、雀麦花叶病毒、土壤传播小麦花叶病毒、小麦条纹花叶病毒、小麦梭条斑花叶病毒、美洲小麦条点花叶病毒、紫色麦角菌(clavicepspurpurea)、小麦腥黑粉菌(tilletiatritici)、光滑腥黑粉菌(tilletialaevis)、小麦散黑粉菌、印度腥黑粉菌(tilletiaindica)、立枯丝核菌、强雄腐霉(pythiumarrhenomannes)、禾生腐霉(pythiumgramicola)、瓜果腐霉菌、高地平原病毒、欧洲小麦条点病毒；向日葵：霍尔斯单轴霉(plasmoporahalstedii)、核盘菌、紫菀黄化病、向日葵壳针孢(septoriahelianthi)、向日葵拟茎点霉(phomopsishelianthi)、向日葵链格孢菌(alternariahelianthi)、百日草链格孢菌(alternariazinniae)、灰葡萄孢菌、麦氏茎点霉(phomamacdonaldii)、壳球孢菌、菊科白粉菌(erysiphecichoracearum)、米根霉(rhizopusoryzae)、少根根霉(rhizopusarrhizus)、匍枝根霉(rhizopusstolonifer)、向日葵柄锈菌(pucciniahelianthi)、大丽轮枝菌(verticilliumdahliae)、胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜致病变种(erwiniacarotovorumpv.carotovora)、顶头孢霉(cephalosporiumacremonium)、隐地疫霉(phytophthoracryptogea)、婆罗门参白锈菌(albugotragopogonis)；玉米：禾生炭疽菌、串珠镰刀菌亚粘团变种(fusariummoniliformevar.subglutinans)、斯氏欧文氏菌(erwiniastewartii)、玉米赤霉(gibberellazeae)(禾谷镰孢菌)、轮状镰刀菌(fusariumverticilloides)、玉米狭壳柱孢菌(stenocarpellamaydi)(玉米色二孢菌(diplodiamaydis))、畸雌腐霉、德巴利腐霉、禾生腐霉菌(pythiumgraminicola)、华丽腐霉、终极腐霉菌、瓜果腐霉菌、黄曲霉(aspergillusflavus)、玉米离蠕孢(bipolarismaydis)o、t(异旋孢腔菌(cochliobolusheterostrophus))、碳色长蠕孢(helminthosporiumcarbonum)i、ii和iii(碳色旋孢腔菌(cochlioboluscarbonum))、大斑凸脐蠕孢(exserohilumturcicum)i、ii和iii、梗花长蠕孢(helminthosporiumpedicellatum)、玉米节壶菌(physodermamaydis)、玉米叶点霉菌(phyllostictamaydis)、玉米球梗孢(kabatiellamaydis)、高粱尾孢菌(cercosporasorghi)、玉米黑粉菌(ustilagomaydis)、高粱柄锈菌(pucciniasorghi)、多堆柄锈菌(pucciniapolysora)、壳球孢菌、草酸青霉(penicilliumoxalicum)、稻黑孢菌(nigrosporaoryzae)、腊叶芽枝霉、新月弯孢(curvularialunata)、不等弯孢(curvulariainaequalis)、苍白弯孢(curvulariapallescens)、密执安棒形杆菌内布拉斯加亚种(clavibactermichiganensesubsp.nebraskense)、绿色木霉(trichodermaviride)、玉米矮花叶病毒a和b、小麦条纹花叶病毒、玉米褪绿矮缩病毒、高粱麦角菌(clavicepssorghi)、燕麦假单胞菌(pseudonomasavenae)、菊欧文氏菌玉米致病变种(erwiniachrysanthemipv.zea)、胡萝卜软腐欧文氏菌、谷物矮小螺原体(cornstuntspiroplasma)、大孢色二孢(diplodiamacrospora)、大孢指疫霉(sclerophthoramacrospora)、高粱指霜霉(peronosclerosporasorghi)、菲律宾指霜霉(peronosclerosporaphilippinensis)、玉米指霜霉(peronosclerosporamaydis)、甘蔗指霜霉(peronosclerosporasacchari)、玉米丝黑穗菌(sphacelothecareiliana)、玉米壳锈菌(physopellazeae)、玉米头孢霉(cephalosporiummaydis)、顶头孢霉(cephalosporiumacremonium)、玉米褪绿斑驳病毒、高地平原病毒、玉米花叶病毒、玉米雷亚多非纳病毒、玉米条纹病毒、玉米斑纹病毒、玉米粗缩病毒；高粱：大斑凸脐蠕孢、亚线孢炭疽菌(c.sublineolum)、高粱尾孢菌、高粱胶尾孢(gloeocercosporasorghi)、高粱壳二孢(ascochytasorghina)、丁香假单胞菌丁香致病变种、野油菜黄单胞菌栖绒毛草致病变种(xanthomonascampestrisp.v.holcicola)、须芝草假单胞菌(pseudomonasandropogonis)、紫柄锈菌(pucciniapurpurea)、壳球孢菌、拳须黑团孢(perconiacircinata)、串珠镰刀菌、互隔交链孢霉、高粱双极霉(bipolarissorghicola)、高粱生长蠕孢(helminthosporiumsorghicola)、新月弯孢、诡谲茎点霉(phomainsidiosa)、燕麦假单胞菌(pseudomonasavenae)(白沉淀假单胞菌(pseudomonasalboprecipitans))、高粱座枝孢(ramulisporasorghi)、高粱生座枝孢(ramulisporasorghicola)、甘蔗黑痣菌(phyllacharasacchari)、玉米丝黑穗菌(sporisoriumreilianum)(玉米轴黑粉菌(sphacelothecareiliana))、散轴黑粉菌(sphacelothecacruenta)、高粱丝黑穗菌(sporisoriumsorghi)、甘蔗花叶病毒h、玉米矮花叶病毒a和b、高粱麦角菌、立枯丝核菌、枝顶孢霉(acremoniumstrictum)、大孢指疫霉(sclerophthonamacrospora)、高粱指霜霉、菲律宾指霜霉、禾生指梗霉(sclerosporagraminicola)、禾谷镰孢菌、轮状镰刀菌(fusariumverticillioides)、尖孢镰刀菌、强雄腐霉、禾生腐霉菌等；番茄：密执安棒形杆菌密执安致病变种(corynebacteriummichiganensepv.michiganense)、丁香假单胞菌番茄致病变种(pseudomonassyringaepv.tomato)、青枯雷尔氏菌(ralstoniasolanacearum)、疱病黄单胞菌(xanthomonasvesicatoria)、穿孔黄单胞菌(xanthomonasperforans)、茄链格孢、葱链格孢(alternariaporri)、炭疽菌属的种(collectotrichumspp.)、番茄叶霉病菌(fulviafulva)、同物异名黄枝孢霉(cladosporiumfulvum)、尖孢镰刀菌番茄专化型(fusariumoxysporumf.lycopersici)、鞑靼内丝白粉菌(leveillulataurica)/辣椒拟粉孢霉(oidiopsistaurica)、致病疫霉、其他疫霉属的种(phytophthoraspp.)、煤污假尾孢(pseudocercosporafuligena)、同物异名煤污尾孢(cercosporafuligena)、齐整小核菌、番茄壳针孢(septorialycopersici)、根结线虫属的种(meloidogynespp.)；马铃薯：青枯雷尔氏菌、青枯假单胞菌(pseudomonassolanacearum)、胡萝卜软腐欧文氏菌黑腐亚种(erwiniacarotovorasubsp.atroseptica)、胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜亚种(erwiniacarotovorasubsp.carotovora)、胡萝卜软腐果胶杆菌黑腐亚种(pectobacteriumcarotovorumsubsp.atrosepticum)、荧光假单胞菌(pseudomonasfluorescens)、密执安棒形杆菌坏腐亚种(clavibactermichiganensissubsp.sepedonicus)、坏腐棒杆菌(corynebacteriumsepedonicum)、疮茄病链霉菌(streptomycesscabiei)、辣椒炭疽菌(colletotrichumcoccodes)、互隔交链孢霉、马铃薯菌绒孢(mycovellosiellaconcors)、茄生尾孢(cercosporasolani)、壳球孢菌、甘薯生小核菌(sclerotiumbataticola)、瓜笄霉(choanephoracucurbitarum)、pucciniapittieriana、短缩锈菌(aecidiumcantensis)、茄链格孢、镰刀菌属的种(fusariumspp.)、茄生茎点霉马铃薯专化型(phomasolanicolaf.foveata)、灰葡萄孢菌、富克葡萄孢盘菌(botryotiniafuckeliana)、致病疫霉、腐霉属的种(pythiumspp.)、phomaandigenavar.andina、枯叶格孢腔菌(pleosporaherbarum)、草色匍柄霉、菊科白粉菌、马铃薯粉痂菌(spongosporasubterranean)、立枯丝核菌、瓜亡革菌(thanatephoruscucumeris)、座坚壳属的种(roselliniasp.)、黑柄孢菌属的种(dematophorasp.)、茄壳针孢菌、茄长蠕孢(helminthosporiumsolani)、马铃薯蛇孢霉(polyscytalumpustulans)、齐整小核菌、罗氏阿太菌(atheliarolfsii)、茄黑粉病菌(angiosorussolani)、黑细极格孢、黑白轮枝菌、大丽轮枝菌(v.dahlia)、癌肿瓶菌(synchytriumendobioticum)、核盘菌、青枯韧皮杆菌暂定种(candidatusliberibactersolanacearum)；香蕉：尖孢镰刀菌古巴专化型(fusariumoxysporumf.sp.cubense)、芭蕉炭疽菌(colletotrichummusae)、蜜环菌(armillariamellea)、假蜜环菌(armillariatabescens)、青枯假单胞菌、香蕉生黑痣菌(phyllachoramusicola)、斐济球腔菌(mycosphaerellafijiensis)、锥孢座坚壳(roselliniabunodes)、假单胞菌属的种(pseudomasspp.)、生屑拟盘多毛孢霉(pestalotiopsisleprogena)、香蕉褐斑尾孢霉(cercosporahayi)、青枯假单胞菌、奇异长喙壳(ceratocystisparadoxa)、可可轮枝孢(verticilliumtheobromae)、trachysphaerafructigena、芭蕉枝孢(cladosporiummusae)、亮松氏孔菌(junghuhniavincta)、约氏暗双孢菌(cordanajohnstonii)、芭蕉暗双孢菌(cordanamusae)、苍白镰刀菌(fusariumpallidoroseum)、芭蕉炭疽菌、可可轮枝孢、镰刀菌属的种(fusariumspp.)、支顶孢属的种(acremoniumspp.)、帚梗柱孢属的种(cylindrocladiumspp.)、松柏小窦氏霉(deightoniellatorulosa)、芒果那特斯拉菌(nattrassiamangiferae)、巨大内脐蠕孢(dreschsleragigantean)、芭蕉球座菌(guignardiamusae)、茶藨子葡萄座腔菌(botryosphaeriaribis)、腐皮镰孢霉菌、鞭毛藻丛赤壳菌(nectriahaematococca)、尖孢镰刀菌、丝核菌属的种(rhizoctoniaspp.)、芭蕉炭疽菌、芭蕉夏孢锈菌(uredomusae)、芭蕉单胞锈菌(uromycesmusae)、单纯支顶孢(acrodontiumsimplex)、画眉草弯孢霉(curvulariaeragrostidis)、大蕉内脐蠕孢(drechsleramusae-sapientum)、香蕉小球腔菌(leptosphaeriamusarum)、广布拟盘多毛孢(pestalotiopsisdisseminate)、奇异长喙壳、芭蕉担担孢菌(haplobasidionmusae)、绒毛微皮伞(marasmiellusinoderma)、青枯假单胞菌、相似穿孔线虫(radopholussimilis)、可可球二孢菌(lasiodiplodiatheobromae)、苍白镰刀菌、可可轮枝孢、掌状拟盘多毛孢(pestalotiopsispalmarum)、芭蕉褐针孢(phaeoseptoriamusae)、稻瘟梨形孢(pyriculariagrisea)、串珠镰刀菌、藤仓赤霉(gibberellafujikuroi)、胡萝卜软腐欧文氏菌、菊欧文氏菌(erwiniachrysanthemi)、芭蕉柱孢(cylindrocarponmusae)、花生根结线虫(meloidogynearenaria)、南方根结线虫(meloidogyneincognita)、爪哇根结线虫(meloidogynejavanica)、咖啡短体线虫(pratylenchuscoffeae)、古氏短体线虫(pratylenchusgoodeyi)、最短尾短体线虫(pratylenchusbrachyurus)、肾形短体线虫(pratylenchusreniformia)、核盘菌、叶生丛赤壳(nectriafoliicola)、香蕉生球腔菌(mycosphaerellamusicola)、芭蕉假尾孢菌(pseudocercosporamusae)、limacinulatenuis、芭蕉球腔菌(mycosphaerellamusae)、多带螺旋线虫(helicotylenchusmulticinctus)、双宫螺旋线虫(helicotylenchusdihystera)、球黑孢霉(nigrosporasphaerica)、trachysphaerafrutigena、芭蕉枝氯霉(ramichloridiummusae)、可可轮枝孢、致病疫霉、寄生疫霉、栎树猝死病菌(phytophthoraramorum)、番薯疫霉(phytophthoraipomoeae)、紫茉莉疫霉(phytophthoramirabilis)、辣椒疫霉(phytophthoracapsici)、葱疫霉、大豆疫霉(phytophthorasojae)、棕榈疫霉(phytophthorapalmivora)和菜豆疫霉(phytophthoraphaseoli)。[0698]细菌病原体包括但不限于，根瘤农杆菌、亚洲韧皮杆菌暂定种(candidatusliberibacterasiaticus)、青枯韧皮杆菌暂定种、密执安棒形杆菌(clavibactermichiganensis)、坏腐棒形杆菌(clavibactersepedonicus)、达达尼丁黑胫病菌(dickeyadadantii)、茄黑胫病菌(dickeyasolani)、解淀粉欧文氏菌(erwiniaamylovora)、黑腐果胶杆菌(pectobacteriumatrosepticum)、胡萝卜软腐果胶杆菌(pectobacteriumcarotovorum)、须芝草假单胞菌、燕麦假单胞菌、白沉淀假单胞菌、荧光假单胞菌、萨氏假单胞菌(pseudomonassavastanoi)、青枯假单胞菌、丁香假单胞菌(pseudomonassyringae)、青枯雷尔氏菌、地毯草黄单胞菌(xanthomonasaxonopodis)、野油菜黄单胞菌(xanthomonascampestris)、柑桔黄单孢菌(xanthomonascitri)、穿孔黄单胞菌、疱病黄单胞菌、稻黄单孢菌(xanthomonasoryzae)和叶缘焦枯病菌(xylellafastidiosa)。[0699]卵菌病原体包括但不限于，致病疫霉、番薯疫霉、紫茉莉疫霉、菜豆疫霉、大雄疫霉大豆专化型(phytophthoramegaspermafsp.glycinea)、大雄疫霉(phytophthoramegasperma)、隐地疫霉、霜霉属的种(peronosporaspp.)和腐霉属的种(pythiumspp.)。[0700]本发明的方法和组合物的另外的实施方案在本文别处描述。[0701]以下实施例是以说明方式而非限制方式提供的。实施例[0702]实施例1：atrlp23-3xflag在玉米中的异源表达赋予了对ppnlp20的辨识[0703]植物使用受体样激酶(rlk)和受体样蛋白(rlp)作为模式识别受体(prr)来监测其质外体环境并检测非自身模式和受损的自身模式作为潜在危险的标志(boutrot和zipfel,2017.annu.rev.phytopathol.55:257,doi:10.1146/annurev-phyto-080614-120106)。rlk和rlp包含配体结合胞外结构域和单程跨膜结构域。rlk具有细胞内激酶结构域，而rlp缺乏任何明显的细胞内信号传导结构域(图1)。[0704]在配体(也称为诱导物)结合后，prr被激活并诱导胞质ca2 浓度的瞬时增加，作为pti反应的一部分。可以在表达钙结合荧光蛋白(如rgeco1.2)或发光蛋白(如水母发光蛋白)的植物原生质体群体中监测胞质ca2 浓度响应于给定诱导物的瞬时增加。在高通量方法中，可以使用荧光计或发光计以及以96孔或384孔形式的微孔板测量胞质ca2 浓度的prr依赖性瞬时变化的动力学。[0705]坏死和乙烯诱导蛋白1(nep1)样蛋白(nlp)家族的pamp存在于细菌、真菌和卵菌中(等人,2014.plospathog.10:e1004491,doi:10.1371/journal.ppat.1004491；oome等人,2014.proc.natl.acad.sci.usa111:16955,doi:10.1073/pnas.1410031111；albert等人,2015.nat.plants1:15140,doi:10.1038/nplants.2015.140)。24-kdanep1蛋白最初是在真菌尖孢镰刀菌中发现的(bailey,1995.cellbiol.85:1250,doi:10.1094/phyto-85-1250)，并且后来在卵菌，瓜果腐霉菌(veit等人,2001.plantphysiol.127:832,doi:10.1104/pp.010350)和大豆疫霉(qutob等人,2002.plantj.32:361,doi:10.1046/j.1365-313x.2002.01439.x)以及在细菌耐盐芽孢杆菌(bacillushalodurans)和天蓝色链霉菌(streptomycescoelicolor)(qutob等人,2002.plantj.32:361,doi:10.1046/j.1365-313x.2002.01439.x)和胡萝卜软腐欧文氏菌(pemberton等人,2005.mol.plantmicrobe.interact.18:343,doi:10.1094/mpmi-18-0343)中通过同源性鉴定了nlp。[0706]nlp携带足以触发植物免疫反应的24个氨基酸(nlp24)的保守模式(等人,2014.plospathog.10:e1004491,doi:10.1371/journal.ppat.1004491；oome等人,2014.proc.natl.acad.sci.usa111:16955,doi:10.1073/pnas.1410031111；albert等人,2015.nat.plants1:15140,doi:10.1038/nplants.2015.140)。在这24个氨基酸区域内的更小的表位也具有诱导植物防御反应的能力(等人,2014.plospathog.10:e1004491,doi:10.1371/journal.ppat.1004491；oome等人,2014.proc.natl.acad.sci.usa111:16955,doi:10.1073/pnas.1410031111；albert等人,2015.nat.plants1:15140,doi:10.1038/nplants.2015.140)。一个源自寄生疫霉的保守的20聚体片段(nlp20)(ppnlp20；seqidno:63)被证实在拟南芥属中具有强诱导活性(等人,2014.plospathog.10:e1004491,doi:10.1371/journal.ppat.1004491)。[0707]尽管nlp的系统发生分布多样，但nlp具有高度的序列相似性，并且该家族的几个成员具有在多达20种双子叶植物中诱导细胞死亡的惊人的能力(pemberton和salmond,2004.mol.plantpathol.5:353,doi:10.1111/j.1364-3703.2004.00235.x)。有趣的是，当用从尖孢镰刀菌(f.oxysporum)中纯化的蛋白nep1(在玉米、小麦(triticumaestivum)、偏序钝叶草(stenotaphrumsecundatum)和虉草(phalarisarundinacea)中测试)(bailey,1995.cellbiol.85:1250,doi:10.1094/phyto-85-1250)或用来自瓜果腐霉菌的重组蛋白panie(在玉米、燕麦(avenasativa)和吊竹梅(tradescantiazebrina)中测试)(veit等人,2001.plantphysiol.127:832,doi:10.1104/pp.010350)处理时，被测试的单子叶植物没有产生任何可检测的反应。[0708]最近，拟南芥属的受体样蛋白(rlp)atrlp23被鉴定为识别nlp的prr(albert等人,2015.nat.plants1:15140,doi:10.1038/nplants.2015.140)。在atrlp23的存在下，拟南芥属植物可以辨识来自致病疫霉的nlp20，以及源自活体营养型卵菌(hanlp3)、灰葡萄孢菌(bcnep2)和枯草芽孢杆菌(bsnpp)的各种nlp的nlp24肽。[0709]为了检查atrlp23在玉米中的功能，从10天大的玉米幼苗的叶子中分离玉米原生质体，所述玉米幼苗基本上如sheen等人(1990)plantcell2:1027-1038中所述，在25℃下保持在黑暗中。使用yoo等人(2007)natprotocols2:1565-1572的方法的改编，用10μg在可操作地连接的2x35s ω启动子构建体(seqidno:72)的控制下且包含可操作地连接的rbcs终止子(seqidno:73)的atrlp23-3xflag构建体(seqidno:13)或10μg对照dna(puc19，seqidno:74)，以及10μg报告物构建体(zmubi::r-geco1.2::rbcs，seqidno:75)通过peg介导的转化共转染32x104个玉米(玉米(zeamays))原生质体。将100μl被转染的原生质体(32x104个原生质体)转移到白色96孔微孔板(greinerbio-one，lumitrac，型号655075)的每个孔中，然后将50μl的3μmppnlp20肽(aimyswyfpkdspvtglghr，seqidno:63；通过用原生质体孵育缓冲液稀释100μm储备溶液制备)加入每个孔中。使用配备有100hz氙闪光灯的荧光计监测荧光，该闪光灯在556nm处激发，每22.6秒在585nm处测量发射100ms，持续42分钟。如图2所示，玉米原生质体中atrlp23-3xflag的瞬时表达导致ca2 响应于ppnlp20处理显著增加。这些结果表明玉米原生质体中的atrlp23-3xflag表达导致ppnlp20辨识。[0710]实施例2：将atrlp23的超近膜(ejm)结构域与另一个ejm结构域交换提高了活性[0711]最近的证据表明atrlp23与rlk、atsobir1组成型相互作用(gust和felix,2014.curr.opin.plantbiol.21:104,doi:10.1016/j.pbi.2014.07.007)。由于atsobir1仅包含短的胞外结构域，因此rlp/sobir1异二聚体可以作为双模块rlk发挥作用，其中rlp胞外结构域识别诱导物而sobir1激酶结构域在细胞内信号传导中发挥功能(gust和felix,2014.curr.opin.plantbiol.21:104,doi:10.1016/j.pbi.2014.07.007)。有趣的是，已知以sobir1依赖性方式起作用的来自富亮氨酸重复序列家族的所有rlp(即atrlp1、atrlp23、atrlp30、atrlp42、cf-4和ve1(shibuya和desaki,2015.nat.plants1:15149,doi:10.1038/nplants.2015.149))包含高度带负电荷的ejm，而sobir1ejm高度带正电荷。这些互补电荷对于rlp/sobir1异二聚体的物理相互作用和稳定可能是重要的(gust和felix,2014.curr.opin.plantbiol.21:104,doi:10.1016/j.pbi.2014.07.007)。[0712]我们设计了一系列嵌合atrlp23变体，这些变体包含选自以下三种sobir1依赖性rlp的ejm结构域：ve1(来自番茄，genbank：aak58682.1)，atrlp1(at1g07390.4，来自拟南芥col-0)，atrlp42(at3g25020.1，来自拟南芥col-0)。存在于构建体atrlp23-ejm(eeee/adq-)-3xflag(seqidno:45)中的第四个ejm是atrlp23和atrlp42的ejm之间的嵌合体。[0713]用10μg报告物构建体(zmubi::r-geco1.2::rbcs，seqidno:75)和10μg以下atrlp23构建体之一共转染如实施例1中所述制备的32x104个玉米原生质体：atrlp23-3xflag(seqidno:13)、atrlp23-ejm(eeee/adq-)-3xflag(seqidno:45)、atrlp23-ejmatrlp1-3xflag(seqidno:49)、atrlp23-ejmatrlp42-3xflag(seqidno:57)或atrlp23-ejmve1-3xflag(seqidno:53)。所有atrlp23构建体都具有可操作地连接的2x35s ω启动子构建体(seqidno:72)和可操作地连接的rbcs终止子(seqidno:73)。[0714]将100μl原生质体(32x104个原生质体)转移到白色96孔微孔板(greinerbio-one，lumitrac，型号655075)的每个孔中，然后将50μl原生质体孵育缓冲液或3μmppnlp20肽(aimyswyfpkdspvtglghr，seqidno:63；通过用原生质体孵育缓冲液稀释100μm储备溶液制备)添加到每个孔中。使用配备有100hz氙闪光灯的荧光计监测荧光，该闪光灯在556nm处激发，每20.2秒在585nm处测量发射30ms，持续40分钟。对于每次荧光测量，r-geco1.2荧光(δf)的瞬时变化自背景校正强度值计算为(f-fo)，其中f表示用诱导物处理的一批原生质体的平均荧光强度，并且fo表示用不含诱导物但其他方面在组成上与包含诱导物的溶液相同或基本相同的对照溶液处理的同一批原生质体的平均荧光强度。[0715]如图3所示，atrlp23-3xflag、atrlp23-ejm(eeee/adq-)-3xflag、atrlp23-ejmatrlp1-3xflag、atrlp23-ejmatrlp42-3xflag或atrlp23-ejmve1-3xflag在玉米原生质体中的瞬时表达导致ca2 响应于ppnlp20处理而增加。在ppnlp20处理后，与atrlp23-3xflag的瞬时表达相比，atrlp23-ejmatrlp42-3xflag的瞬时表达赋予了统计学上显著的响应增加。[0716]实施例3：将atrlp23胞外结构域与rlk的激酶结构域融合可以提高atrlp23的活性[0717]几种富含亮氨酸重复序列(lrr)型rlp的功能取决于它们与常见的衔接子激酶sobir1的关联。这些在没有配体的情况下形成的rlp/衔接子复合物已被描述为rlk的双分子等价物(gust和felix,2014.curr.opin.plantbiol.21:104,doi:10.1016/j.pbi.2014.07.007)。[0718]为了确定rlp是否可以独立于其天然常见衔接子激酶sobir1的存在而在异源宿主中发挥作用，我们评价了包含atrlp23的胞外结构域和atsobir1的激酶的嵌合受体的功能。此外，我们还评价了包含atrlp23的胞外结构域和参与植物防御的其他rlk的激酶结构域的嵌合体的功能，以探索atrlp23prr的功能是否可以通过其他激酶融合得到改善。[0719]用10μg报告物构建体(zmubi::r-geco1.2::rbcs，seqidno:75)和10μgpuc19(seqidno:74)或以下atrlp23构建体之一共转染如实施例1中所述制备的32x104个玉米原生质体：atrlp23-3xflag(seqidno:13)、atrlp23-osxa21-3xflag(seqidno:21)、atrlp23-atefr-3xflag(seqidno:17)、atrlp23 tm-atefr-3xflag(seqidno:33)、atrlp23-atbak1-3xflag(seqidno:25)、atrlp23 tm-atbak1-3xflag(seqidno:37)、atrlp23-atsobir1-3xflag(seqidno:29)或atrlp23 tm-atsobir1-3xflag(seqidno:41)。所有atrlp23构建体在可操作地连接的2x35s ω启动子构建体(seqidno:72)的控制下表达，并且还包含可操作地连接的rbcs终止子(seqidno:73)。[0720]将25μl原生质体(8x104个原生质体)转移到白色384孔微孔板(corning，低总量的(lowvolume)非结合表面，型号3824)的每个孔中，然后将12.5μl原生质体孵育缓冲液或3μmppnlp20肽(aimyswyfpkdspvtglghr，seqidno:63；通过用原生质体孵育缓冲液稀释100μm储备溶液制备)添加到每个孔中。使用配备有100hz氙闪光灯的荧光计监测荧光，该闪光灯在556nm处激发，每22.6秒在585nm处测量发射30ms，持续40分钟。对于每次荧光测量，测量相对于背景的荧光瞬时增加。对于给定的构建体，背景被确定为观察到的响应于缓冲液的平均信号。从处理时间开始测量40分钟内荧光的总瞬时增加。[0721]如图4所示，与atrlp23-3xflag相比，玉米原生质体中atrlp23-atbak1-3xflag、atrlp23 tm-atbak1-3xflag或atrlp23-atsobir1-3xflag的瞬时表达导致对ppnlp20处理的反应性降低。atrlp23 tm-atefr-3xflag或atrlp23-3xflag在玉米原生质体中的瞬时表达导致类似的对ppnlp20处理的反应性。与atrlp23-3xflag相比，atrlp23-osxa21-3xflag、atrlp23-atefr-3xflag或atrlp23 tm-atsobir1-3xflag在玉米原生质体中的瞬时表达导致对ppnlp20处理的反应性增加。[0722]植物激酶在植物中构成大的多基因家族；例如，拟南芥基因组中存在940种激酶，占该物种基因模型的3.4％。rlk的激酶结构域形成与动物pelle和相关细胞质激酶具有共同起源的单系群(shiu和bleeker,2001.proc.natl.acad.sci.98:10763–10768)。在拟南芥属中，鉴定到620个与rlk相关的序列，并进一步分为由其细胞外结构域定义的46个结构类别，其中最大的组(包括14个亚组)包含富亮氨酸重复序列(lrr)结构域(shiu和bleecker，2001)。在rlk单系群中也发现了一些细胞质激酶。包括单子叶植物和双子叶植物在内的多个植物物种中显示了类似的系统发生关系以及rlk的组和亚组的划分(综述于在lehti-shiu和shiu,2012.phil.trans.r.soc.b.367:2619–2639中)。[0723]atrlp23胞外结构域与属于lrr-xii亚组的atefr或osxa21的激酶结构域以及来自rlk内与atefr和osxa21的系统发生关系较远的不同亚组的atsobir激酶结构域(dufayard等人,2017.frontplantsci.2017.doi:10.3389/fpls.2017.00381；fischer等人,2016.plantphysiol.170:1595-610)的融合导致对ppnlp20处理的反应性增加。因此，我们预计rlk超家族中的许多激酶结构域，诸如例如，seqidno:77-240和561-563中提供的任何一种或多种在与atrlp23胞外结构域融合时也会发挥类似的作用。为了生成代表rlk超家族的激酶结构域的列表，我们使用了shiu和bleecker,2003.plant.physiol.132:530–543定义的46个拟南芥属rlk代表物，补充了atsobir1(at2g31880)、osxa21(os11g0559200)，并将atfsl2替换为atefr(at5g20480)。使用全长蛋白序列，我们对手动挑选的来自水稻、番茄和苜蓿属(medicago)的rlk集合进行了blastp搜索。选择每个植物物种中得分最高的命中物并提取所有激酶结构域，从而从这四种植物物种中得到164个激酶结构域。[0724]实施例4：atrlp23-ejmatrlp42-atefr功能可以使用水母发光蛋白报告物在原生质体中测定[0725]在通过prr检测配体后，可以在表达来自水母维多利亚多管发光水母(aequoreavictoria)的基因编码的蛋白质型生物发光ca2 传感器脱辅基水母发光蛋白的植物原生质体群体中监测胞质ca2 浓度的瞬时增加。脱辅基水母发光蛋白与其辅基腔肠素荧光素之间形成的复合物被称为水母发光蛋白，它在结合三个ca2 离子后发出波长为470nm的光。[0726]从10天大的玉米幼苗的叶子中分离玉米原生质体，所述玉米幼苗基本上如sheen,1990.plantcell2:1027,doi:10.1105/tpc.2.10.1027中所述，在25℃下保持在黑暗中。使用yoo等人(2007)natprotocols2:1565-1572的方法的改编，用10μgprr构建体(atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag，seqidno:61)和10μg报告物构建体(zmubi::脱辅基水母发光蛋白::rbcs，seqidno:76)通过peg介导的转化共转染32x104个玉米(玉米(zeamays))原生质体。过夜静置后，基本如maintz等人,2014.plantcellphysiol.55:1813,doi:10.1093/pcp/pcu112中针对拟南芥属原生质体所述，将瞬时转染的玉米原生质体与1μm腔肠素一起孵育2小时。将100μl转染的原生质体(32x104个原生质体)转移到白色96孔微孔板(greinerbio-one，lumitrac，型号655075)的每个孔中，然后将50μl原生质体孵育缓冲液或3umppnlp20肽(aimyswyfpkdspvtglghr，seqidno:63；通过用原生质体孵育缓冲液稀释100μm储备溶液制备)添加到每个孔中。使用高分辨率光子计数系统(hrpcs)相机立即监测发光并持续60分钟。[0727]如图5所示，玉米原生质体中atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(在图1中示意性地呈现)的瞬时表达导致ca2 响应于ppnlp20处理显著增加而响应于原生质体孵育缓冲液不增加。这些结果表明，玉米原生质体中的atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag表达导致ppnlp20辨识。[0728]实施例5：atrlp23还赋予对来自四种玉米病原体的nlp20肽的识别[0729]玉米秆腐病和穗腐病是由禾生炭疽菌、轮状镰刀菌、禾谷镰刀菌和玉米狭壳柱孢菌引起的，而曲霉属(aspergillus)穗腐病是由黄曲霉引起的。为了确定玉米中atrlp23的异位表达是否会导致对玉米的这些真菌病原体中存在的nlp表位的辨识，我们搜索了它们的基因组中与来自尖孢镰刀菌古柯专化型(fusariumoxysporumf.sp.erythroxyli)的nep1蛋白(genbank:aac97382.1)同源的候选蛋白。我们确定了几个候选基因(表1)并订购了与ppnlp24表位的直系同源区域相对应的合成肽(在等人,2014.plospathog.10:e1004491,doi:10.1371/journal.ppat.1004491中描述为ppnlp20活性的10倍)。[0730]表1.从玉米病原体中鉴定的nlp肽[0731][0732][0733]用10μg报告物构建体zmubi::脱辅基水母发光蛋白::rbcs(seqidno:76)和10μgatrlp23-ejmatrlp42-3xflag(seqidno:57)或atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:61)中的任一种共转染如实施例4中所述制备的包含32x104个玉米原生质体的样品。如实施例4所述孵育后，用50μl的任一种原生质体孵育缓冲液、3μmppnlp20肽(aimyswyfpkdspvtglghr，seqidno:63)、3μmcgnlp24b肽(aimyayympkdspspglghrhdwe，seqidno:64)、3μmfgnlp24c肽(aimyswympkdspspglghrhdwe，seqidno:65)、3μmfvnlp24a肽(imyswympkdspspglghrhdwe，seqidno:66)或3μmsmnlp24肽(vvmycwympkdqpldgntagghrhefe，seqidno:67)处理原生质体。如上所述分析发光。[0734]如图6所示，玉米原生质体中atrlp23-ejmatrlp42-3xflag(seqidno:57)或atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:61)的瞬时表达导致ca2 响应于ppnlp20(来自寄生疫霉)、cgnlp24b(来自禾生炭疽菌m1.001)、fgnlp24c(来自禾谷镰刀菌ph-1)、fvnlp24a(来自轮状镰刀菌7600)和smnlp24(来自玉米狭壳柱孢菌a1-1)增加。对于这五种肽，在atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag的存在下观察到比在atrlp23-ejmatrlp42-3xflag的存在下更强的反应。[0735]然后如上所述测定atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:61)对来自玉米病原体的另外的nlp的反应。如图7所示，atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag(seqidno:61)在玉米原生质体中的瞬时表达导致ca2 响应于ppnlp20(来自寄生疫霉)、smnlp24(来自玉米狭壳柱孢菌a1-1)、afnlp24a(来自黄曲霉nrrl3357)、apnlp24a(来自寄生曲霉su-1)、afnlp24b(来自黄曲霉nrrl3357和寄生曲霉su-1)和afnlp24c(来自黄曲霉nrrl3357和寄生曲霉su-1)增加。[0736]实施例6：atrlp23胞外结构域与rlk超家族成员的激酶结构域的融合[0737]为了测试rlk超家族(以上实施例3中所述)内的其他激酶与atrlp23胞外结构域的融合是否导致对至少一个nlp序列的识别，我们生成了将atrlp23胞外结构域(seqidno:560)和ejm与tm和来自以下的激酶结构域融合的嵌合构建体：oscerk1(分别为seqidno:331、433和239)、os01g49614(分别为seqidno:369、518和122)、ospi-d2(分别为seqidno:564、567和561)、medtr3g3g095100(分别为seqidno:310、514和224)、mt7g073660(分别为seqidno:279、438和172)、atwak1(分别为seqidno:364、512和107)、atpepr1(分别为seqidno:565、568和562)、atlyk5(分别为seqidno:566、568和563)、at伸展蛋白(分别为seqidno:273、527和133)、atc_凝集素(分别为seqidno:350、506和128)、solyc01g108000(分别为seqidno:280、499和233)或solyc06g051030(分别为seqidno:253、427和221)。[0738]用10μg报告物构建体zmubi::脱辅基水母发光蛋白::rbcs(seqidno:76)和10μg上述嵌合体中的每一种共转染如实施例4所述制备的32x104个玉米原生质体样品。如实施例4所述孵育后，用50μl的任一种原生质体孵育缓冲液或3μmcgnlp24b肽(seqidno:64)、3μmfgnlp24c肽(seqidno:65)、3μmfvnlp24a肽(seqidno:66)或3μmsmnlp24肽(seqidno:67)处理原生质体。如上所述分析发光。[0739]如图8所示，仅atrlp23-atpepr1-3xflag嵌合体(seqidno:572)在玉米原生质体中的瞬时表达导致响应于所有测试的nlp肽的ca2 爆发(未显示其他嵌合体的数据)。atrlp23-atpepr1-3xflag嵌合体的响应在强度上与对照构建体atrlp23-ejmatrlp42-atefr-3xflag的响应相似(fgnlp24c)或更弱(所有其他nlp)。然而，对于所有测试的肽，atrlp23-atpepr1-3xflag嵌合体的ca2 增加与对照缓冲液处理相比是统计学显著的。[0740]实施例7：表达修饰的atrlp23基因的转基因玉米植物具有增强的对秆腐病的抗性[0741]产生在组成型启动子控制下表达修饰的atrlp23基因的t1阶段的转基因玉米(玉米(zeamays)植物并在温室中种植。在vt生长阶段，通过损伤茎杆和向伤口注射玉米色二孢菌病原体接种物的悬浮液来感染两个茎节。来自每个事件的十六株植物被接种。在接种后约2-3周评价玉米植物的秆腐病。收获茎秆，除去叶子，将茎秆纵向劈开。病害严重程度报告为切割表面的坏死百分比，并与未转化植物的坏死百分比进行比较，如图9-11所示。表达修饰的atrlp23基因的转基因玉米植物具有增强的对玉米色二孢菌的抗病性。[0742]冠词“一个/种(a)”和“一个/种(an)”在本文中用于指代一个/种或多于一个/种(即至少一个/种)该冠词的语法对象。例如，“一个/种要素”是指一个/种或多个/种要素。[0743]在整个说明书中，词语“包含/括(comprising)”或诸如“包含/括(comprises)”或“包含/括(comprising)”的变形将被理解为暗示包含所述要素、整数或步骤，或要素、整数或步骤的组，但不排除任何其他要素、整数或步骤，或要素、整数或步骤的组。[0744]说明书中提到的所有出版物和专利申请都表明本发明所属领域的技术人员的水平。所有的出版物和专利申请都以引用的方式并入本文，其程度如同每个单独的出版物或专利申请被具体地和单独地指明通过引用并入。[0745]尽管为了清楚理解的目的已经通过说明和实例的方式对前述发明进行了一些细节方面的描述，但是显而易见的是，可以在所附权利要求的范围内进行某些改变和修改。当前第1页12当前第1页12