一种元宝枫蛋白提取方法与流程

1.本发明属于食品生物技术领域，具体涉及一种元宝枫蛋白提取方法。


背景技术：

2.元宝枫是槭属植物，因翅果形状似中国古代的“金锭元宝”而得名，是中国的特有树种，也是一种优良的木本油料。元宝枫的种子富含油脂和蛋白质，无毒，可炒食，味似瓜子。元宝枫籽油脂含量为47.88％，粗纤维含量3.68％，多聚戊糖4 .5％，不含淀粉，元宝枫籽中蛋白含量为27 .15％，元宝枫籽蛋白质中含有8种人体必需的氨基酸，属完全蛋白质。目前对元宝枫籽的加工利用主要集中在油脂的提取，而对榨油后产生的油粕主要用作饲料等用途，很少再深加工利用，造成资源的浪费。目前有关蛋白的提取都需要使用酸或碱来处理，蛋白沉淀后或多或少的掺有酸或碱，对蛋白的品质造成影响。


技术实现要素：

3.为克服上述技术问题，本发明提供了一种从元宝枫翅果中提取元宝枫蛋白方法。
4.为达到上述目的，本发明是通过以下的技术方案来实现的。
5.一种元宝枫蛋白提取方法，包括以下步骤：（1）将元宝枫翅果经风选去除杂质后，用脱粒机脱粒，得到元宝枫种仁；（2）将种仁放入含有粗砂的滚筒中，滚动10~30min，过筛得去红衣的元宝枫种仁；（3）用冷榨机压榨去红皮的元宝枫种仁，压榨温度低于60℃，得元宝枫籽毛油和油粕；（4）将油粕粉碎并过80~100目筛，得油粕细粉；（5）在油粕细粉中加入4~10倍的水分散后，调节ph值至5~6.5，加入复合酶，28~32℃酶解2~3h；所述复合酶包括纤维素酶、果胶酶、枯草溶菌素、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶；（6）将酶解液用蒸汽120~130℃，25~40min灭酶；（7）将灭酶后的酶解液离心分离得上清液，然后精密过滤；（8）将滤液减压浓缩；（9）将浓缩液冷冻干燥，得元宝枫蛋白。
6.以元宝枫翅果为原料，脱壳后的元宝枫种仁经过冷榨，将得到的新鲜油粕经过复合酶一步酶解，释放出油粕中的蛋白质，再经分离、浓缩、干燥而得。相比市场采购的元宝枫油粕，杂质少，蛋白无变性，质量可靠。
7.进一步地所述步骤（2）中先将种仁于-10~-4℃冷冻8~12h，取出后迅速放入含有粗砂的滚筒中，所述粗砂温度为40~50℃。元宝枫种仁外的红皮与种仁连接紧密不易除去，将元宝枫种仁水浸后会在外皮产生粘液，不利于机械操作。直接放入砂筒中仅靠摩擦力去皮，有部分形状不规则的种仁去皮不彻底，延长滚筒时间又造成种仁的损失。通过预先冷冻种仁再用热砂去皮，可以缩短去皮时间，减少种仁损失，破碎率低，效果好。
8.进一步地所述步骤（4）中先将油粕浸入石油醚中，搅拌1~2h，捞出风干后再粉碎。油粕中还残留一部分油脂，不仅影响酶解反应的进行，而且所得酶解液
ꢁ
颜色混浊，影响最
终分离效果。油脂去除的越干净，蛋白质反应中心暴露得越充分，利于酶解反应的进行，并且水解终点明显，固液易于分离。
9.进一步地所述步骤（5）中将用水分散后的浆液置于-20℃冷冻4h，冷冻后常温下融化，反复2次。冻融作用可以降低物质的团聚体的水稳性，使内部的平衡状态发生改变，提高后续酶解的提取率。
10.进一步地所述步骤（5）中将用水分散后的浆液使用超声波处理8~16min。超声波在液体中传播时，使液体介质不断受到拉伸和压缩，而液体耐压不耐拉， 形成空穴作用， 这种空穴作用可破坏植物细胞和细胞膜结构，从而增加细胞内容物通过细胞膜的穿透能力；超声波处理后产生的超声空化气泡随声压变化所发生的迅速增大、压缩振动和气泡崩溃时所产生的冲击波，可促使蛋白质体颗粒的进一步细化，产生良好的均质作用并加速蛋白质的扩散溶出。
11.进一步地所述步骤（5）中纤维素酶、果胶酶、枯草溶菌素、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶的质量比:1~3:1：2 ~5：1~2:1。由于不同蛋白酶的特异性不同，而蛋白原料的蛋白较复杂，使用单一的酶难以对蛋白质进行有效的酶解。纤维素酶与果胶酶一般作为酶解植物蛋白的首选，它能有效破坏细胞壁，提高原料的利用率，枯草溶菌素，菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶分别作用于蛋白质分子中一定的肽键，将底物中蛋白质原料利用完全，蛋白提取率高。
12.进一步地所述步骤（5）中复合酶为油粕细粉质量的0.1~0.3%。
13.进一步地所述步骤（5）中纤维素酶、果胶酶、枯草溶菌素、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶的质量比为1~3:1：2 ~5：1~2:1。
14.进一步地所述步骤（7）中上清液若非无色，加入硅藻土浸泡15~30min脱色，然后分离出清液。
15.进一步地所述步骤（9）中浓缩温度不超过70℃，浓缩至原体积的1/4~1/5。
16.有益效果：与现有技术相比，本发明的优点在于：1）以元宝枫翅果为原料，精密分离出种仁，冷榨后的油粕，蛋白的来源可靠，杂质少，蛋白无变性，最终产品质量有保证；2）经过冻融、超声波处理提高后续酶解的提取率；3）采用复合酶酶解，分别作用于蛋白质分子中一定的肽键，将底物中蛋白质原料利用完全，蛋白提取率高。
具体实施方式
17.下面结合实例对本发明作进一步的详细说明。本发明所用的原料均为市售产品。
18.实施例1一种元宝枫蛋白提取方法，包括以下步骤：（1）将元宝枫翅果经风选去除杂质后，用脱粒机脱粒，得到元宝枫种仁；（2）先将种仁于-10℃冷冻8h，取出后迅速放入含有粗砂的滚筒中，粗砂温度为40℃，滚动10min，过筛得去红衣的元宝枫种仁；（3）用冷榨机压榨去红皮的元宝枫种仁，压榨温度低于60℃，得元宝枫籽毛油和油粕；（4）将油粕浸入石油醚中，搅拌1h，捞出风干后粉碎并过100目筛，得油粕细粉；（5）在油粕细粉中加入4倍的水分散后制成浆液，用乙酸/乙酸钠缓冲溶液调节ph值至
5，加入油粕质量0.1%的复合酶，28℃酶解3h；所述复合酶包括纤维素酶、果胶酶、枯草溶菌素、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶，其质量比为3:1:2: 2:1；（6）将酶解液用蒸汽120℃，25min灭酶；（7）将灭酶后的酶解液离心分离得上清液，若上清液呈黄色，则加入硅藻土浸泡15min脱色，然后分离出清液，再精密过滤；（8）将滤液减压浓缩，浓缩温度不超过70℃，浓缩至原体积的1/5；（9）将浓缩液冷冻干燥，得元宝枫蛋白。蛋白提取率63.4%。
19.实施例2一种元宝枫蛋白提取方法，包括以下步骤：（1）将元宝枫翅果经风选去除杂质后，用脱粒机脱粒，得到元宝枫种仁；（2）先将种仁于-4℃冷冻12h，取出后迅速放入含有粗砂的滚筒中，粗砂温度为50℃，滚动30min，过筛得去红衣的元宝枫种仁；（3）用冷榨机压榨去红皮的元宝枫种仁，压榨温度低于60℃，得元宝枫籽毛油和油粕；（4）将油粕浸入石油醚中，搅拌2h，捞出风干后粉碎并过80目筛，得油粕细粉；（5）在油粕细粉中加入10倍的水分散后制成浆液，用乙酸/乙酸钠缓冲溶液调节ph值至6.5，加入油粕质量0.3%的复合酶，32℃酶解2h；所述复合酶包括纤维素酶、果胶酶、枯草溶菌素、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶，其质量比为1:1: 5:1:1；（6）将酶解液用蒸汽125℃，30min灭酶；（7）将灭酶后的酶解液离心分离得上清液，若上清液呈黄色，则加入硅藻土浸泡30min脱色，然后分离出清液，再精密过滤；（8）将滤液减压浓缩，浓缩温度不超过70℃，浓缩至原体积的1/4；（9）将浓缩液冷冻干燥，得元宝枫蛋白。蛋白提取率71.6%。
20.实施例3一种元宝枫蛋白提取方法，包括以下步骤：（1）将元宝枫翅果经风选去除杂质后，用脱粒机脱粒，得到元宝枫种仁；（2）先将种仁于-6℃冷冻10h，取出后迅速放入含有粗砂的滚筒中，粗砂温度为40℃，滚动15min，过筛得去红衣的元宝枫种仁；（3）用冷榨机压榨去红皮的元宝枫种仁，压榨温度低于60℃，得元宝枫籽毛油和油粕；（4）将油粕浸入石油醚中，搅拌2h，捞出风干后粉碎并过100目筛，得油粕细粉；（5）在油粕细粉中加入8倍的水分散后制成浆液，用乙酸/乙酸钠缓冲溶液调节ph值至6，加入油粕质量0.2%的复合酶，30℃酶解2h；所述复合酶包括纤维素酶、果胶酶、枯草溶菌素、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶，其质量比为2:1:3: 2:1；（6）将酶解液用蒸汽130℃，40min灭酶；（7）将灭酶后的酶解液离心分离得上清液，若上清液呈黄色，则加入硅藻土浸泡20min脱色，然后分离出清液，再精密过滤；（8）将滤液减压浓缩，浓缩温度不超过70℃，浓缩至原体积的1/4；（9）将浓缩液冷冻干燥，得元宝枫蛋白。蛋白提取率77.1%。
21.实施例4一种元宝枫蛋白提取方法，包括以下步骤：
（1）将元宝枫翅果经风选去除杂质后，用脱粒机脱粒，得到元宝枫种仁；（2）先将种仁于-6℃冷冻10h，取出后迅速放入含有粗砂的滚筒中，粗砂温度为40℃，滚动15min，过筛得去红衣的元宝枫种仁；（3）用冷榨机压榨去红皮的元宝枫种仁，压榨温度低于60℃，得元宝枫籽毛油和油粕；（4）将油粕浸入石油醚中，搅拌2h，捞出风干后粉碎并过100目筛，得油粕细粉；（5）在油粕细粉中加入8倍的水分散后制成浆液，将浆液置于-20℃冷冻4h，冷冻后常温下融化，反复2次，在用乙酸/乙酸钠缓冲溶液调节ph值至6，加入油粕质量0.2%的复合酶，30℃酶解2h；所述复合酶包括纤维素酶、果胶酶、枯草溶菌素、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶，其质量比为2:1:3: 2:1；（6）将酶解液用蒸汽125℃，30min灭酶；（7）将灭酶后的酶解液离心分离得上清液，若上清液呈黄色，则加入硅藻土浸泡20min脱色，然后分离出清液，再精密过滤；（8）将滤液减压浓缩，浓缩温度不超过70℃，浓缩至原体积的1/4；（9）将浓缩液冷冻干燥，得元宝枫蛋白。蛋白提取率79.3%。
22.实施例5一种元宝枫蛋白提取方法，包括以下步骤：（1）将元宝枫翅果经风选去除杂质后，用脱粒机脱粒，得到元宝枫种仁；（2）先将种仁于-6℃冷冻10h，取出后迅速放入含有粗砂的滚筒中，粗砂温度为40℃，滚动15min，过筛得去红衣的元宝枫种仁；（3）用冷榨机压榨去红皮的元宝枫种仁，压榨温度低于60℃，得元宝枫籽毛油和油粕；（4）将油粕浸入石油醚中，搅拌2h，捞出风干后粉碎并过100目筛，得油粕细粉；（5）在油粕细粉中加入8倍的水分散后制成浆液，将浆液超声波处理8min；用乙酸/乙酸钠缓冲溶液调节ph值至6，加入油粕质量0.2%的复合酶，30℃酶解2h；所述复合酶包括纤维素酶、果胶酶、枯草溶菌素、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶，其质量比为2:1:3: 2:1；（6）将酶解液用蒸汽125℃，30min灭酶；（7）将灭酶后的酶解液离心分离得上清液，若上清液呈黄色，则加入硅藻土浸泡20min脱色，然后分离出清液，再精密过滤；（8）将滤液减压浓缩，浓缩温度不超过70℃，浓缩至原体积的1/4；（9）将浓缩液冷冻干燥，得元宝枫蛋白。蛋白提取率78.8%。
23.实施例6一种元宝枫蛋白提取方法，包括以下步骤：（1）将元宝枫翅果经风选去除杂质后，用脱粒机脱粒，得到元宝枫种仁；（2）先将种仁于-6℃冷冻10h，取出后迅速放入含有粗砂的滚筒中，粗砂温度为40℃，滚动15min，过筛得去红衣的元宝枫种仁；（3）用冷榨机压榨去红皮的元宝枫种仁，压榨温度低于60℃，得元宝枫籽毛油和油粕；（4）将油粕浸入石油醚中，搅拌2h，捞出风干后粉碎并过100目筛，得油粕细粉；（5）在油粕细粉中加入8倍的水分散后制成浆液，将浆液置于-20℃冷冻4h，冷冻后常温下融化，反复2次；然后再超声波处理16min；用乙酸/乙酸钠缓冲溶液调节ph值至6，加入油粕质量0.2%的复合酶，30℃酶解2h；所述复合酶包括纤维素酶、果胶酶、枯草溶菌素、菠萝蛋
白酶、无花果蛋白酶，其质量比为2:1:3: 2:1；（6）将酶解液用蒸汽125℃，30min灭酶；（7）将灭酶后的酶解液离心分离得上清液，若上清液呈黄色，则加入硅藻土浸泡20min脱色，然后分离出清液，再精密过滤；（8）将滤液减压浓缩，浓缩温度不超过70℃，浓缩至原体积的1/4；（9）将浓缩液冷冻干燥，得元宝枫蛋白。蛋白提取率83.2%。
24.本发明按照上述实施例进行了说明，应当理解，上述实施例不以任何形式限定本发明，凡采用等同替换或等效变换方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。