用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂及其合成方法与流程

1.本发明属于化学合成技术领域，具体涉及用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂及其合成方法。


背景技术：

2.聚乙二醇是一种用于原生质体融合中的优良化学促融剂。是乙二醇的多聚物，分子式为hoch2(ch2o
·
ch2)nch2oh。为白色微黄蜡状固体，可溶于水，有微臭味。存在一系列不同相对分子质量的多聚体，相对分子质量在200～6000之间者均可用作促融剂，但以1000者为chemicalbook好(此时呈液态)。peg的水溶性强，在液相介质中，其分子表面的醚键带有微弱的负电荷，在ca
2
离子的参与下，可将带正电的表面蛋白或带负电荷的糖蛋白通过ca
2
桥相连，从而使细胞发生聚集、融合。在50％peg中，自由水消失，可导致细胞脱水而引起质膜结构变化和细胞融合。
3.聚乙二醇链接剂，可用于修饰各类生物药物，通过正离子亲脂类脂质体纳米颗粒形成配方材料，将可能即时装载靶向分子、实现对任何药物的挂载，可为建立针对肿瘤患者的个性化药物库提供成熟的技术支持。
4.现有的用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂在使用的过程中不方便利用酰胺键和蛋白质欧联，且其合成方法复杂，原料不易得，成本高。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂及其合成方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
6.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂，化学结构式为
7.用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂的合成方法，按照先后顺序包括以下步骤：
8.s1：化合物2的合成：将丙烯酸叔丁酯加到化合物1和氢氧化钾水溶液中，室温反应完全后，反应液过柱得到化合物2；
9.s2：化合物3的合成：将化合物2溶于甲醇，加入树脂和盐酸，室温反应完全后，反应液加入碳酸氢钠，过滤得化合物3；
10.s3：化合物4的合成：0℃下，将甲基磺酰氯缓慢加到化合物3和三乙胺的二氯甲烷溶液中，室温反应完全后，反应液加入水，萃取，水洗，拉干得到化合物4；
11.s4：化合物5的合成：将巯基乙酸钾加到化合物4的dmf溶液中，室温反应完全后，反应液加入水，萃取，水洗，拉干过柱得到化合物5；
12.s5：化合物6的合成：将化合物5溶于甲醇和水中，加入氢氧化锂一水合物，氧气保护下室温反应完全后，反应液萃取，拉干过柱得到化合物6；
13.s6：化合物7的合成：将化合物6溶于hcl中，室温反应完全后，拉干得到化合物7；
14.其中化合物1的化学结构式为化合物2的化学结构式为化合物3的化学结构式为化合物4的化学结构式为化合物5的化学结构式为化合物6的化学结构式为化合物7的化学结构式为
15.优选的是，在步骤s2中，所述过滤后进行旋干。
16.上述任一方案中优选的是，在步骤s3中，所述萃取采用二氯甲烷，所述水洗次数为3次。
17.上述任一方案中优选的是，在步骤s4中，所述萃取采用二氯甲烷，所述水洗次数为8次。
18.上述任一方案中优选的是，在步骤s5中，所述萃取采用二氯甲烷。
19.上述任一方案中优选的是，在步骤s6中，所述hcl的浓度为6mol/l。
20.本发明的技术效果和优点：该用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂中间是双流巯基，使用此类链接剂用于蛋白质的交联或者小分子聚合物的交联可以使使用此类化合物交联过的蛋白质或者聚合物在特定的生物环境下降解，从而释放出包裹或者偶联的目标分子，在药物缓释或者药物的靶向递送领域有着不可替代的生物降解优势，且是两头羧酸，可以方便利用酰胺键和蛋白质欧联，或者修饰纳米脂质体制剂材料的带有氨基单体，从而在蛋白质或者纳米脂质体颗粒表面上方便的引入生物素基团，其合成方法原料易得，操作简单，成本低。
具体实施方式
21.下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
22.实施例1：
23.用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂，化学结构式为
[0024][0025]
用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂的合成方法，按照先后顺序包括以下步骤：
[0026]
s1：化合物2的合成：将丙烯酸叔丁酯加到化合物1和氢氧化钾水溶液中，室温反应完全后，反应液过柱得到化合物2；
[0027]
s2：化合物3的合成：将化合物2溶于甲醇，加入树脂和盐酸，室温反应完全后，反应液加入碳酸氢钠，过滤得化合物3；
[0028]
s3：化合物4的合成：0℃下，将甲基磺酰氯缓慢加到化合物3和三乙胺的二氯甲烷溶液中，室温反应完全后，反应液加入水，萃取，水洗，拉干得到化合物4；
[0029]
s4：化合物5的合成：将巯基乙酸钾加到化合物4的dmf溶液中，室温反应完全后，反应液加入水，萃取，水洗，拉干过柱得到化合物5；
[0030]
s5：化合物6的合成：将化合物5溶于甲醇和水中，加入氢氧化锂一水合物，氧气保护下室温反应完全后，反应液萃取，拉干过柱得到化合物6；
[0031]
s6：化合物7的合成：将化合物6溶于hcl中，室温反应完全后，拉干得到化合物7；
[0032]
其中化合物1的化学结构式为化合物2的化学结构式为化合物3的化学结构式为化合物4的化学结构式为化合物5的化学结构式为化合物6的化学结构式为化合物7的化学结构式为其中化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6、化合物7分子中间的聚乙二醇部分的聚乙二醇重复单元可以是1到n个重复单元不等。。
[0033]
具体的，在步骤s2中，过滤后进行旋干。
[0034]
具体的，在步骤s3中，萃取采用二氯甲烷，水洗次数为3次。
[0035]
具体的，在步骤s4中，萃取采用二氯甲烷，水洗次数为8次。
[0036]
具体的，在步骤s5中，萃取采用二氯甲烷。
[0037]
具体的，在步骤s6中，hcl的浓度为6mol/l。
[0038]
实施例2：化合物2的合成
[0039]
本实施例化合物1分子中间的聚乙二醇部分的聚乙二醇重复单元是8个，室温下，将丙烯酸叔丁酯(296.1g,2.31mol)缓慢加到化合物1(350g,0.77mol，此化合物是从武汉博仁凯润药业有限公司购买，具体信息请参照www.borenpharm.com)和4.32g50％氢氧化钾水溶液中去，加完室温过夜，tlc显示反应完全，反应液直接过柱子得到240g黄色油状物，为化合物2，收率53.49％。化合物1的化学结构式为化合物2的化学结构式为
[0040]
实施例3：化合物3的合成
[0041]
室温下，将化合物2(413g,0.709mol)溶于2l甲醇，加入树脂(1.5g)和4ml 6n盐酸，1h后tlc显示反应完全，反应液加碳酸氢钠调碱后过滤，滤液旋干得到374g黄色油状物，为化合物3，收率106％。化合物3的化学结构式为
[0042]
实施例4：化合物4的合成
[0043]
0℃下，将甲基磺酰氯(89g,0.78mol)缓慢加到化合物3(353g,0.709mol)和三乙胺(85.24g,0.844mol)的二氯甲烷(2l)溶液中去，加完室温1h，tlc显示反应已完全。反应液加入200ml水，二氯甲烷萃取，水洗3次，拉干得到417g黄色油状物,为化合物4，收率102％。化合物4的化学结构式为
[0044]
实施例5：化合物5的合成
[0045]
室温下，将巯基乙酸钾(110.77g,0.851mol)缓慢加到化合物4(408.6g,0.709mol)的dmf(2.5l)溶液中去，加完室温过夜，tlc显示反应已完全。反应液加入2l水，二氯甲烷萃取，水洗8次，拉干过柱子得到363g白色固体,为化合物5，收率92％。化合物5的化学结构式为
[0046]
实施例6：化合物6的合成
[0047]
室温下，将化合物5(340g,0.611mol)溶于0.75l甲醇和0.75l水中，加入氢氧化锂一水合物(26.95g,0.642mol)，氧气保护下室温过夜，tlc显示反应完全，反应液直接用二氯甲烷萃取，拉干过柱子得到201g黄色油状物，为化合物6，收率64％。化合物6的化学结构式为
[0048]
实施例7：化合物7的合成
[0049]
室温下，将化合物6(170g,0.165mol)溶于6n hcl(1l)，tlc显示反应完全后直接拉干得到150g黄油，为化合物7，化合物7即为本发明的用于蛋白质修饰的聚乙二醇链接剂，收率为99.32％。化合物7的化学结构式为
[0050]
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。