二氢硫代色烯并吡唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用与流程

1.本公开属于医药领域，涉及一种通式(i)所示的二氢硫代色烯并吡唑类衍生物、其制备方法、含有该衍生物的药物组合物以及其作为治疗剂的用途，特别是作为pi3kδ抑制剂的用途和在制备用于治疗通过对pi3kδ的抑制而改善的病况或病症的药物中的用途。


背景技术：

2.磷脂酰肌醇3
‑
激酶(phosphoinositide 3
‑
kinase，pi3k)是pi3k/akt/mtor信号通路中的关键调节激酶，参与调控细胞的增殖、分化、凋亡以及血管生成等过程。pi3k异常激活与多种肿瘤的发生发展密切相关，不同类型的pi3k发挥着不同的功能。pi3k有四种亚型，分别是α，β，γ和δ，其中pi3kδ主要存在于免疫细胞和血液细胞中，与免疫、血液肿瘤以及炎症的发生密切有关(cell,170(4),605
‑
635)。
3.pi3kδ主要表达于免疫细胞和造血细胞中，参与b细胞中bcr的信号传导，控制机体内b细胞的发育和成熟过程。当有抗原刺激机体时，bcr表面的特异性表面免疫球蛋白ig能与抗原结合，导致cd79a/b复合物胞内段的itam磷酸化，磷酸化的itam能够募集并激活syk，并进一步激活btk及其下游分子plcγ2。活化的syk能与pi3kδ的p85亚基结合，激活pi3kδ，促使生成pip3，生成的pip3能够与btk的n端结构域识别，并与之相互作用介导btk向膜上募集，从而激活btk介导的b细胞信号传导，诱导众多相关基因的表达。另外，磷酸化的cd19也能募集细胞膜上pi3kδ，激活pi3kδ,催化pip2生成pip3，活化akt，促进细胞增殖、迁移、凋亡等过程(n engl j med,379,2052
‑
2062)。除了调节b细胞功能外，近期研究报道pi3kδ激活能促进treg细胞的发育，成熟以及募集(cancer immunol res,2,1080
‑
1089)。抑制pi3kδ能促进cd8 记忆t细胞的增殖和存活(cancer res,77,4135
‑
4145)。因此pi3kδ是治疗b细胞淋巴瘤的一个理想靶点,开发选择性pi3kδ抑制剂作为治疗血液肿瘤的药物越来越受重视。
4.idelalisib是第一个获批上市的pi3kδ选择性抑制剂，2014年被批准用于治疗慢性淋巴细胞白血病(cll),滤泡性淋巴瘤(fl)和小淋巴细胞性淋巴瘤(sll)。随后2018年duvelisib(作用于pi3kδ和γ)被批准治疗慢性淋巴性白血病(cll)和滤泡性淋巴瘤(fl)。尽管pi3kδ抑制剂在治疗这些血液肿瘤上取得了非常不错的效果，但由于早期的这些抑制剂通常对于pi3k激酶的选择性比较差，因此在临床上看到了很多与药物相关的肝毒性及胃肠道毒副作用。为了进一步减低pi3kδ抑制剂潜在的副作用，最近几年很多公司在积极开发了第二代高选择性pi3kδ抑制剂，比较有代表性的有parsaclisib，me
‑
401和ioa
‑
244等，这些药物目前分别处于不同的临床阶段。
5.ioa
‑
24是由ionctura公司开发的第二代pi3kδ抑制剂(wo2011058149a1，wo2014121901a1)，和传统的pi3kδ抑制剂相比，它是一个atp非竞争性的抑制剂，这个特点导致这个药物对于pi3kδ亚型的抑制具有高度的选择性。
6.考虑到目前已上市的第一代pi3kδ抑制剂的副作用都比较明显，限制了该类型药物在更多患者人群中的使用，所以开发第二代高选择性的pi3kδ抑制剂在相关病患人群中
存在重大未满足的医学需求。


技术实现要素：

7.本公开的目的在于提供一种通式(i)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐：
[0008][0009]
其中：
[0010]
r5选自氢、烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、卤代烷基、硝基、氰基、羟烷基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、
‑
or9、
‑
cor9、
‑
coor9、
‑
os(o)
t
r9、
‑
s(o)
t
r9、
‑
nr6cor9、
‑
nr6so2r9和r’中的一个或多个取代基所取代，所述的r’选自环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基，所述的r’各自独立地任选被选自卤素、烷基、卤代烷基、硝基、氰基、羟烷基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、
‑
or9、环烷基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0011]
r1相同或不同，各自独立地选自氢、烷基、卤素、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、羟基、羟烷基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、环烷基、环烷基烷基、环烷基氧基、杂环基、杂环基烷基、杂环基氧基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选地被选自卤素、烷基、卤代烷基、氰基、硝基、
‑
(ch2)
s
nr7r8和
‑
or9中的一个或多个取代基所取代；当m大于等于2时，两个r1可在含氧杂环上形成螺环或桥环系统；
[0012]
r2和r4相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、环烷基、芳基、杂环基、杂芳基、环烷基烷基、芳基烷基、杂环基烷基和杂芳基烷基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选地被选自烷基、卤代烷基、卤素、氰基、硝基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、
‑
or9、
‑
cor9、
‑
coor9、
‑
os(o)
t
r9、
‑
s(o)
t
r9、
‑
nr6cor9和
‑
nr6so2r9中的一个或多个取代基所取代；
[0013]
r3相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、氰基、硝基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、
‑
or9、
‑
cor9、
‑
coor9、
‑
os(o)
t
r9、
‑
s(o)
t
r9、
‑
nr6cor9、
‑
nr6so2r9、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选地被选自烷基、卤代烷基、卤素、氰基、硝基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、
‑
or9、
‑
cor9、
‑
coor9、
‑
os(o)
t
r9、
‑
s(o)
t
r9、
‑
nr6cor9和
‑
nr6so2r9中的一个或多个取代基所取代；
[0014]
r6选自氢原子、烷基、环烷基和芳基，其中所述的烷基、环烷基和芳基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、氧代基、卤素、氨基、氰基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0015]
r7和r8相同或不同，且各自独立地选自氢原子、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0016]
或者r7和r8与相连的氮原子一起形成杂环基，所述的杂环基任选被选自烷基、烷氧基、氧代基、卤素、氨基、氰基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0017]
r9选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基和杂环基中的一个或多个取代基所取代；
[0018]
m为0、1、2、3、4或5；
[0019]
n为1或2；
[0020]
q为0、1、2、3或4；
[0021]
s为0、1、2、3、4或5；且
[0022]
t为0、1或2。
[0023]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r5为芳基或杂芳基，所述的芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、卤代烷基、硝基、氰基、羟烷基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、
‑
or9、
‑
cor9、
‑
coor9、
‑
os(o)
t
r9、
‑
s(o)
t
r9、
‑
nr6cor9、
‑
nr6so2r9和r’中的一个或多个取代基所取代，所述的r’选自环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基，所述的r’各自独立地任选被选自卤素、烷基、卤代烷基和
‑
or9中的一个或多个取代基所取代；
[0024]
r6‑
r9、s和t如通式(i)中所定义。
[0025]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r5为芳基或杂芳基，所述的芳基和杂芳基各自独立地任选被r’所取代；所述的r’选自环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基各自独立地任选被选自卤素、烷基和卤代烷基中的一个或多个取代基所取代。
[0026]
优选地,r5为芳基，所述的芳基任选被杂环基烷基取代，所述的杂环基烷基任选被选自卤素、烷基和卤代烷基中的一个或多个取代基所取代。
[0027]
更优选地,r5为6至10元芳基，所述的6至10元芳基任选被3至8元杂环基c1‑6烷基取代，所述的3至8元杂环基c1‑6烷基任选被选自卤素、c1‑6烷基和c1‑6卤代烷基中的一个或多个取代基所取代。
[0028]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其为通式(ii)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐：
[0029][0030]
其中
[0031]
r
10
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、硝基、氰基、羟烷基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、
‑
or9、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选地被选自烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、氰基、硝基和
‑
(ch2)
s
nr7r8中的一个或多个取代基所取代；
[0032]
r
11
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基、硝基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、环烷基、环烷基氧基和环烷基烷基；
[0033]
r
12
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、硝基、氰基、羟烷基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、
‑
or9、环烷基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基和杂芳基；当u大于等于2时，两个r
12
可在吗啉环上形成螺环或桥环系统；
[0034]
w为0、1、2、3或4；
[0035]
u为0、1、2、3、4、5或6；
[0036]
r1‑
r4、r7‑
r9、s、m和q如通式(i)中所定义。
[0037]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)或(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r1相同或不同，各自独立地选自氢、烷基、卤素、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、羟烷基、
‑
(ch2)
s
nr7r8、环烷基、环烷基烷基和环烷基氧基，其中所述的烷基和环烷基各自独立地任选地被选自卤素、烷基、卤代烷基、氰基和
‑
or9中的一个或多个取代基所取代；当m大于等于2时，两个r1可在含氧杂环上形成螺环或桥环系统；
[0038]
优选地,r1相同或不同，各自独立地选自氢、烷基、卤素、烷氧基和卤代烷氧基，其中所述的烷基任选地被选自卤素、氰基和
‑
or9中的一个或多个取代基所取代；
[0039]
更优选地，r1相同或不同，各自独立地选自氢、卤素和c1‑6烷基。
[0040]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)或(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r2和r4相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、环烷基和环烷基烷基，其中所述的烷基和环烷基各自独立地任选地被选自烷基、卤代烷基、卤素、氰基和
‑
or9中的一个或多个取代基所取代；
[0041]
优选地，r2和r4相同或不同，各自独立地选自氢、卤素和c1‑6烷基。
[0042]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)或(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的
盐，其中r3相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、氰基、硝基、
‑
(ch2)
s
nr7r8和
‑
or9；
[0043]
优选地，r3相同或不同，各自独立地选自氢、卤素和c1‑6烷基。
[0044]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)或(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r6选自氢原子、烷基和环烷基，其中所述的烷基和环烷基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、羟基和羟烷基中的一个或多个取代基所取代；
[0045]
优选地，r6为氢原子或c1‑6烷基。
[0046]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)或(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r7和r8相同或不同，且各自独立地选自氢原子、烷基、卤代烷基和环烷基；或者r7和r8与相连的氮原子一起形成杂环基，所述的杂环基任选被选自烷基、烷氧基、卤素、羟烷基和环烷基中的一个或多个取代基所取代；
[0047]
优选地，r7和r8相同或不同，且各自独立地选自氢原子、c1‑6烷基和c1‑6卤代烷基；或者r7和r8与相连的氮原子一起形成杂环基，所述的杂环基任选被选自c1‑6烷基、c1‑6烷氧基和卤素中的一个或多个取代基所取代。
[0048]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)或(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r9独立地选自氢原子、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、氰基和氨基中的一个或多个取代基所取代；
[0049]
优选地，r9独立地选自氢原子、烷基、卤代烷基和环烷基；其中所述的烷基和环烷基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基和卤代烷基中的一个或多个取代基所取代。
[0050]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r
10
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、硝基、氰基、羟烷基、
‑
(ch2)
s
nr7r8和
‑
or9；
[0051]
优选地，r
10
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素和c1‑6烷基。
[0052]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r
11
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基和
‑
(ch2)
s
nr7r8；
[0053]
优选地，r
11
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素和c1‑6烷基。
[0054]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r
12
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、硝基、氰基、羟烷基、
‑
(ch2)
s
nr7r8和
‑
or9；
[0055]
优选地，r
12
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素和c1‑6烷基。
[0056]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)或(ii)所示的化合物，或其互变
异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中m为0、1或2，优选为0或1，更优选为0。
[0057]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中n为1。
[0058]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(i)或(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中q为0、1、2或3，优选为1。
[0059]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中u为0、1、2或3，优选为0或1，更优选为0。
[0060]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中w为0、1或2，优选为0或1，更优选为0。
[0061]
在本公开的一些优选的实施方案中，一种通式(ii)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中m为0或1；r1选自氢、卤素和c1‑6烷基；r2和r4相同或不同，各自独立地选自氢、卤素和c1‑6烷基；q为1；r3选自氢、卤素和c1‑6烷基；w为0或1；r
10
选自氢、卤素和c1‑6烷基；r
11
相同或不同，各自独立地选自氢、卤素和c1‑6烷基；u为0或1；r
12
选自氢、卤素和c1‑6烷基。
[0062]
表a本公开的典型化合物包括但不限于：
[0063]
[0064][0065]
或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐。
[0066]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(i)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐的方法，该方法包括以下步骤：
[0067][0068]
通式(ia)的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐与硫化试剂反应，得到通式(i)的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0069]
其中r1‑
r5、n、q和m如通式(i)中所定义。
[0070]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(ii)所示的化合物或其互变异构体、内消旋
体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐的方法，该方法包括以下步骤：
[0071][0072]
通式(iia)的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐与硫化试剂反应，得到通式(ii)的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0073]
其中r1‑
r4、r
10
‑
r
12
、q、u、w和m如通式(ii)中所定义。
[0074]
本公开的另一方面涉及一种药物组合物，所述药物组合物含有治疗有效量的本公开通式(i)、(ii)或表a所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0075]
本公开进一步涉及通式(i)、(ii)或表a所示的化合物、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，在制备用于抑制pi3kδ的药物中的用途。
[0076]
本公开进一步涉及通式(i)、(ii)或表a所示的化合物、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐、或包含其的药物组合物，在制备用于治疗和/或预防pi3kδ介导的疾病的药物中的用途。
[0077]
本公开进一步涉及通式(i)、(ii)或表a所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物在制备用于治疗和/或预防炎性疾病、自身免疫性疾病、癌症及相关疾病的药物中的用途，所述的癌症优选选自黑色素瘤、皮肤癌、肝癌、肾癌、肺癌、鼻咽癌、胃癌、食道癌、结肠直肠癌、胆囊癌、胆管癌、绒毛膜上皮癌、胰腺癌、真性红细胞增多症、儿科肿瘤、宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、输尿管肿瘤、前列腺癌、精原细胞瘤、睾丸肿瘤、白血病、头颈瘤、子宫内膜癌、甲状腺癌、淋巴瘤、肉瘤、骨瘤、成神经细胞瘤、神经母细胞瘤、神经内分泌癌、脑瘤、cns癌、骨髓瘤、星形细胞瘤、胶质母细胞瘤和胶质瘤，所述的白血病优选选自慢性淋巴细胞白血病、急性淋巴细胞性白血病(all)、急性髓细胞样白血病(aml)、慢性髓细胞样白血病(cml)和毛细胞性白血病，所述的淋巴瘤优选选自小淋巴细胞淋巴瘤、边缘带淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤(nhl)、淋巴质浆细胞淋巴瘤、结外边缘区淋巴瘤、t细胞淋巴瘤、b细胞淋巴瘤和弥漫性大b细胞淋巴瘤，所述的肺癌优选为非小细胞肺癌或小细胞肺癌，所述的骨髓瘤优选为多发性骨髓瘤(mm)，所述的自身免疫性疾病
优选选自哮喘、类风湿性关节炎、急性播散性脑脊髓炎(adem)、艾迪生病、斑秃、僵直性脊椎炎、抗磷脂抗体综合征(aps)、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳疾病、天疱疮、类天疱疮、白塞病、乳糜泻、抗
‑
谷氨酰胺转胺酶、查加斯病、慢性阻塞性肺病、克罗恩病、皮肌炎、1型糖尿病、子宫内膜异位、肺出血
‑
肾炎综合征、格雷夫斯病、格林
‑
巴利综合征(gbs)、桥本氏病、化脓性汗腺炎、川崎病、甲型球蛋白肾病变、免疫性血小板减少紫斑症、特发性血小板减少性紫癜(itp)、间质性膀胱炎、狼疮、狼疮性肾炎、膜性肾病、混合性结缔组织疾病、硬斑病、多发性硬化病(ms)、重肌无力症、猝睡症、神经性肌强直、恶性贫血、牛皮癣、银屑病关节炎、多发性肌炎、原发性胆汁性肝硬化、精神分裂症、硬皮症、口眼干燥综合症、舍格伦综合征、僵人综合征、颞动脉炎、溃疡性结肠炎、血管炎、白斑和韦格纳肉芽肿，所述的狼疮优选为红斑性狼疮或系统性红斑狼疮，所述的天疱疮优选为寻常性天疱疮，所述肝癌优选为肝细胞癌，所述头颈瘤优选为头颈鳞状细胞癌，所述肉瘤优选为骨肉瘤或软组织肉瘤，所述结肠直肠癌优选为结肠癌或直肠癌。
[0078]
本公开还涉及一种抑制pi3kδ的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(i)、(ii)或表a或所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物。
[0079]
本公开还涉及一种治疗和/或预防pi3kδ介导的疾病的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(i)、(ii)或表a所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物。
[0080]
本公开还涉及一种治疗和/或预防炎性疾病、自身免疫性疾病、癌症及相关疾病的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(i)、(ii)或表a所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物；所述的癌症优选选自黑色素瘤、皮肤癌、肝癌、肾癌、肺癌、鼻咽癌、胃癌、食道癌、结肠直肠癌、胆囊癌、胆管癌、绒毛膜上皮癌、胰腺癌、真性红细胞增多症、儿科肿瘤、宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、输尿管肿瘤、前列腺癌、精原细胞瘤、睾丸肿瘤、白血病、头颈瘤、子宫内膜癌、甲状腺癌、淋巴瘤、肉瘤、骨瘤、成神经细胞瘤、神经母细胞瘤、神经内分泌癌、脑瘤、cns癌、骨髓瘤、星形细胞瘤、胶质母细胞瘤和胶质瘤，所述的白血病优选选自慢性淋巴细胞白血病、急性淋巴细胞性白血病(all)、急性髓细胞样白血病(aml)、慢性髓细胞样白血病(cml)和毛细胞性白血病，所述的淋巴瘤优选选自小淋巴细胞淋巴瘤、边缘带淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤(nhl)、淋巴质浆细胞淋巴瘤、结外边缘区淋巴瘤、t细胞淋巴瘤、b细胞淋巴瘤和弥漫性大b细胞淋巴瘤，所述的肺癌优选为非小细胞肺癌或小细胞肺癌，所述的骨髓瘤优选为多发性骨髓瘤(mm)，所述的自身免疫性疾病优选选自哮喘、类风湿性关节炎、急性播散性脑脊髓炎(adem)、艾迪生病、斑秃、僵直性脊椎炎、抗磷脂抗体综合征(aps)、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳疾病、天疱疮、类天疱疮、白塞病、乳糜泻、抗
‑
谷氨酰胺转胺酶、查加斯病、慢性阻塞性肺病、克罗恩病、皮肌炎、1型糖尿病、子宫内膜异位、肺出血
‑
肾炎综合征、格雷夫斯病、格林
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巴利综合征(gbs)、桥本氏病、化脓性汗腺炎、川崎病、甲型球蛋白肾病变、免疫性血小板减少紫斑症、特发性血小板减少性紫癜(itp)、间质性膀胱炎、狼疮、狼疮性肾炎、膜性肾病、混合性结缔组织疾病、硬斑病、多发性硬化病(ms)、重肌无力症、猝睡症、神经性肌强直、恶性贫血、牛皮癣、银屑病关节炎、多发性肌炎、原发性胆汁性肝硬化、精神分裂
症、硬皮症、口眼干燥综合症、舍格伦综合征、僵人综合征、颞动脉炎、溃疡性结肠炎、血管炎、白斑和韦格纳肉芽肿，所述的狼疮优选为红斑性狼疮或系统性红斑狼疮，所述的天疱疮优选为寻常性天疱疮，所述肝癌优选为肝细胞癌，所述头颈瘤优选为头颈鳞状细胞癌，所述肉瘤优选为骨肉瘤或软组织肉瘤，所述结肠直肠癌优选为结肠癌或直肠癌。
[0081]
本公开进一步涉及一种通式(i)、(ii)或表a示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐或包含其的药物组合物，其用作药物。
[0082]
本公开还涉及通式(i)、(ii)或表a所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用作pi3kδ抑制剂。
[0083]
本公开还涉及通式(i)、(ii)或表a所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其治疗和/或预防pi3kδ介导的疾病。
[0084]
本公开还涉及通式(i)、(ii)或表a所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用于治疗和/或预防炎性疾病、自身免疫性疾病、癌症及相关疾病，所述的癌症优选选自黑色素瘤、皮肤癌、肝癌、肾癌、肺癌、鼻咽癌、胃癌、食道癌、结肠直肠癌、胆囊癌、胆管癌、绒毛膜上皮癌、胰腺癌、真性红细胞增多症、儿科肿瘤、宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、输尿管肿瘤、前列腺癌、精原细胞瘤、睾丸肿瘤、白血病、头颈瘤、子宫内膜癌、甲状腺癌、淋巴瘤、肉瘤、骨瘤、成神经细胞瘤、神经母细胞瘤、神经内分泌癌、脑瘤、cns癌、骨髓瘤、星形细胞瘤、胶质母细胞瘤和胶质瘤，所述的白血病优选选自慢性淋巴细胞白血病、急性淋巴细胞性白血病(all)、急性髓细胞样白血病(aml)、慢性髓细胞样白血病(cml)和毛细胞性白血病，所述的淋巴瘤优选选自小淋巴细胞淋巴瘤、边缘带淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤(nhl)、淋巴质浆细胞淋巴瘤、结外边缘区淋巴瘤、t细胞淋巴瘤、b细胞淋巴瘤和弥漫性大b细胞淋巴瘤，所述的肺癌优选为非小细胞肺癌或小细胞肺癌，所述的骨髓瘤优选为多发性骨髓瘤(mm)，所述的自身免疫性疾病优选选自哮喘、类风湿性关节炎、急性播散性脑脊髓炎(adem)、艾迪生病、斑秃、僵直性脊椎炎、抗磷脂抗体综合征(aps)、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳疾病、天疱疮、类天疱疮、白塞病、乳糜泻、抗
‑
谷氨酰胺转胺酶、查加斯病、慢性阻塞性肺病、克罗恩病、皮肌炎、1型糖尿病、子宫内膜异位、肺出血
‑
肾炎综合征、格雷夫斯病、格林
‑
巴利综合征(gbs)、桥本氏病、化脓性汗腺炎、川崎病、甲型球蛋白肾病变、免疫性血小板减少紫斑症、特发性血小板减少性紫癜(itp)、间质性膀胱炎、狼疮、狼疮性肾炎、膜性肾病、混合性结缔组织疾病、硬斑病、多发性硬化病(ms)、重肌无力症、猝睡症、神经性肌强直、恶性贫血、牛皮癣、银屑病关节炎、多发性肌炎、原发性胆汁性肝硬化、精神分裂症、硬皮症、口眼干燥综合症、舍格伦综合征、僵人综合征、颞动脉炎、溃疡性结肠炎、血管炎、白斑和韦格纳肉芽肿，所述的狼疮优选为红斑性狼疮或系统性红斑狼疮，所述的天疱疮优选为寻常性天疱疮，所述肝癌优选为肝细胞癌，所述头颈瘤优选为头颈鳞状细胞癌，所述肉瘤优选为骨肉瘤或软组织肉瘤，所述结肠直肠癌优选为结肠癌或直肠癌。
[0085]
本公开中所述的pi3kδ介导的疾病选自炎性疾病、自身免疫性疾病、癌症及相关疾
病；所述的癌症优选选自黑色素瘤、皮肤癌、肝癌、肾癌、肺癌、鼻咽癌、胃癌、食道癌、结肠直肠癌、胆囊癌、胆管癌、绒毛膜上皮癌、胰腺癌、真性红细胞增多症、儿科肿瘤、宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、输尿管肿瘤、前列腺癌、精原细胞瘤、睾丸肿瘤、白血病、头颈瘤、子宫内膜癌、甲状腺癌、淋巴瘤、肉瘤、骨瘤、成神经细胞瘤、神经母细胞瘤、神经内分泌癌、脑瘤、cns癌、骨髓瘤、星形细胞瘤、胶质母细胞瘤和胶质瘤，所述的白血病优选选自慢性淋巴细胞白血病、急性淋巴细胞性白血病(all)、急性髓细胞样白血病(aml)、慢性髓细胞样白血病(cml)和毛细胞性白血病，所述的淋巴瘤优选选自小淋巴细胞淋巴瘤、边缘带淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤(nhl)、淋巴质浆细胞淋巴瘤、结外边缘区淋巴瘤、t细胞淋巴瘤、b细胞淋巴瘤和弥漫性大b细胞淋巴瘤，所述的肺癌优选为非小细胞肺癌或小细胞肺癌，所述的骨髓瘤优选为多发性骨髓瘤(mm)，所述的自身免疫性疾病优选选自哮喘、类风湿性关节炎、急性播散性脑脊髓炎(adem)、艾迪生病、斑秃、僵直性脊椎炎、抗磷脂抗体综合征(aps)、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳疾病、天疱疮、类天疱疮、白塞病、乳糜泻、抗
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谷氨酰胺转胺酶、查加斯病、慢性阻塞性肺病、克罗恩病、皮肌炎、1型糖尿病、子宫内膜异位、肺出血
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肾炎综合征、格雷夫斯病、格林
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巴利综合征(gbs)、桥本氏病、化脓性汗腺炎、川崎病、甲型球蛋白肾病变、免疫性血小板减少紫斑症、特发性血小板减少性紫癜(itp)、间质性膀胱炎、狼疮、狼疮性肾炎、膜性肾病、混合性结缔组织疾病、硬斑病、多发性硬化病(ms)、重肌无力症、猝睡症、神经性肌强直、恶性贫血、牛皮癣、银屑病关节炎、多发性肌炎、原发性胆汁性肝硬化、精神分裂症、硬皮症、口眼干燥综合症、舍格伦综合征、僵人综合征、颞动脉炎、溃疡性结肠炎、血管炎、白斑和韦格纳肉芽肿，所述的狼疮优选为红斑性狼疮或系统性红斑狼疮，所述的天疱疮优选为寻常性天疱疮，所述肝癌优选为肝细胞癌，所述头颈瘤优选为头颈鳞状细胞癌，所述肉瘤优选为骨肉瘤或软组织肉瘤，所述结肠直肠癌优选为结肠癌或直肠癌。
[0086]
可将活性化合物制成适合于通过任何适当途径给药的形式，通过常规方法使用一种或多种药学上可接受的载体来配制本公开的组合物。因此，本公开的活性化合物可以配制成用于口服给药、注射(例如静脉内、肌肉内或皮下)给药，吸入或吹入给药的各种剂型。本公开的化合物也可以配制成持续释放剂型，例如片剂、硬或软胶囊、水性或油性混悬液、乳剂、注射液、可分散性粉末或颗粒、栓剂、锭剂或糖浆。
[0087]
作为一般性指导，活性化合物优选是以单位剂量的方式，或者是以患者可以以单剂自我给药的方式。本公开化合物或组合物的单位剂量的表达方式可以是片剂、胶囊、扁囊剂、瓶装药水、药粉、颗粒剂、锭剂、栓剂、再生药粉或液体制剂。合适的单位剂量可以是0.1～1000mg。
[0088]
本公开的药物组合物除活性化合物外，可含有一种或多种辅料，所述辅料选自以下成分：填充剂(稀释剂)、粘合剂、润湿剂、崩解剂或赋形剂等。根据给药方法的不同，组合物可含有0.1至99重量％的活性化合物。
[0089]
片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂、造粒剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。
[0090]
也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂或其中活性成分与水溶性载体或油溶媒
混合的软明胶胶囊提供口服制剂。
[0091]
水混悬液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂、分散剂或湿润剂。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。
[0092]
油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油，或矿物油配制而成。油悬浮液可含有增稠剂。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂保存这些组合物。
[0093]
本公开的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油，或矿物油或其混合物。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂，乳剂也可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。
[0094]
本公开的药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本公开化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置。这种装置的实例是deltec cadd
‑
plus.tm.5400型静脉注射泵。
[0095]
本公开的药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何调和固定油。此外，脂肪酸也可以制备注射剂。
[0096]
可按用于直肠给药的栓剂形式给予本公开化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。
[0097]
可通过加入水来制备水混悬的可分散粉末和颗粒给予本公开化合物。可通过将活性成分与分散剂或湿润剂、悬浮剂或一种或多种防腐剂混合来制备这些药物组合物。
[0098]
如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、疾病的严重性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行为、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、化合物的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。
[0099]
术语说明
[0100]
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
[0101]
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)碳原子的烷基，更优选为含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1
‑
二甲基丙基、1,2
‑
二甲基丙基、2,2
‑
二甲基丙基、1
‑
乙基丙基、2
‑
甲基丁基、3
‑
甲基丁基、正己基、1
‑
乙基
‑2‑
甲基丙基、1,1,2
‑
三甲基丙基、1,1
‑
二甲基丁基、1,2
‑
二甲基丁基、2,2
‑
二甲基丁基、1,3
‑
二甲基丁基、2
‑
乙基丁基、2
‑
甲基戊基、3
‑
甲基戊基、4
‑
甲基戊基、2,3
‑
二甲基丁基、正庚基、2
‑
甲基己基、3
‑
甲基己基、4
‑
甲基己基、5
‑
甲基己基、2,
3
‑
二甲基戊基、2,4
‑
二甲基戊基、2,2
‑
二甲基戊基、3,3
‑
二甲基戊基、2
‑
乙基戊基、3
‑
乙基戊基、正辛基、2,3
‑
二甲基己基、2,4
‑
二甲基己基、2,5
‑
二甲基己基、2,2
‑
二甲基己基、3,3
‑
二甲基己基、4,4
‑
二甲基己基、2
‑
乙基己基、3
‑
乙基己基、4
‑
乙基己基、2
‑
甲基
‑2‑
乙基戊基、2
‑
甲基
‑3‑
乙基戊基、正壬基、2
‑
甲基
‑2‑
乙基己基、2
‑
甲基
‑3‑
乙基己基、2,2
‑
二乙基戊基、正癸基、3,3
‑
二乙基己基、2,2
‑
二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1
‑
二甲基丙基、1,2
‑
二甲基丙基、2,2
‑
二甲基丙基、1
‑
乙基丙基、2
‑
甲基丁基、3
‑
甲基丁基、正己基、1
‑
乙基
‑2‑
甲基丙基、1,1,2
‑
三甲基丙基、1,1
‑
二甲基丁基、1,2
‑
二甲基丁基、2,2
‑
二甲基丁基、1,3
‑
二甲基丁基、2
‑
乙基丁基、2
‑
甲基戊基、3
‑
甲基戊基、4
‑
甲基戊基、2,3
‑
二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自d原子、卤素、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0102]
术语“亚烷基”指饱和的直链或支链脂肪族烃基，其为从母体烷的相同碳原子或两个不同的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)碳原子，更优选含有1至6个碳原子的亚烷基。亚烷基的非限制性实例包括但不限于亚甲基(
‑
ch2‑
)、1,1
‑
亚乙基(
‑
ch(ch3)
‑
)、1,2
‑
亚乙基(
‑
ch2ch2)
‑
、1,1
‑
亚丙基(
‑
ch(ch2ch3)
‑
)、1,2
‑
亚丙基(
‑
ch2ch(ch3)
‑
)、1,3
‑
亚丙基(
‑
ch2ch2ch2‑
)、1,4
‑
亚丁基(
‑
ch2ch2ch2ch2‑
)等。亚烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自烯基、炔基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基和氧代基中的一个或多个取代基。
[0103]
术语“烯基”指分子中含有至少一个碳碳双键的烷基化合物，其中烷基的定义如上所述。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0104]
术语“炔基”指分子中含有至少一个碳碳三键的烷基化合物，其中烷基的定义如上所述。炔基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0105]
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，优选包含3至8个(例如3、4、5、6、7和8个)碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。
[0106]
术语“螺环烷基”指5至20元，单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选
为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：
[0107][0108]
术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为3元/4元、3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/4元、5元/5元、5元/6元、6元/3元、6元/4元、6元/5元和6元/6元的双环稠环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：
[0109][0110]
术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更优选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：
[0111][0112]
所述环烷基环包括如上所述的环烷基(包括单环、螺环、稠环和桥环)稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括等；优选等；优选
[0113]
环烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0114]
术语“烷氧基”指
‑
o
‑
(烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自d原子、卤素、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂
芳基。
[0115]
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或硫的杂原子，所述的硫可任选被氧代(即形成亚砜或砜)，但不包括
‑
o
‑
o
‑
、
‑
o
‑
s
‑
或
‑
s
‑
s
‑
的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个(例如3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)环原子，其中1～4个(例如1、2、3和4个)是杂原子；更优选包含3至8个环原子(例如3、4、5、6、7和8个)，其中1
‑
3个(例如1、2和3个)是杂原子；更优选包含3至6个环原子，其中1
‑
3个是杂原子；最优选包含5或6个环原子，其中1
‑
3个是杂原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、四氢吡喃基、1,2,3,6
‑
四氢吡啶基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。
[0116]
术语“螺杂环基”指5至20元，单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或硫的杂原子，所述的硫可任选被氧代(即形成亚砜或砜)，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：
[0117][0118]
术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或硫的杂原子，所述的硫可任选被氧代(即形成亚砜或砜)，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为3元/4元、3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/4元、5元/5元、5元/6元、6元/3元、6元/4元、6元/5元和6元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：
[0119][0120][0121]
术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或硫的杂原子，所述的硫可任选被氧代(即形成亚砜或砜)，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选
为双环、三环或四环，更优选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：
[0122][0123]
所述杂环基环包括如上所述的杂环基(包括单环、螺杂环、稠杂环和桥杂环)稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：
[0124]
等。
[0125]
杂环基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0126]
术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(稠合多环是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。所述芳基环包括如上所述的芳基环稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：
[0127][0128][0129]
芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0130]
术语“杂芳基”指包含1至4个(例如1、2、3和4个)杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元(例如5、6、7、8、9或10元)，更优选为5元或6元，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、n
‑
烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基等。所述杂芳基环包括如上述的杂芳基稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：
[0131][0132]
杂芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0133]
上述环烷基、杂环基、芳基和杂芳基包括从母体环原子上除去一个氢原子所衍生的残基，或从母体的相同或两个不同的环原子上除去两个氢原子所衍生的残基，即“二价环烷基”、“二价杂环基”、“亚芳基”、“亚杂芳基”。
[0134]
术语“环烷基氧基”指环烷基
‑
o
‑
，其中环烷基如上所定义。
[0135]
术语“杂环基氧基”指杂环基
‑
o
‑
，其中杂环基如上所定义。
[0136]
术语“芳基氧基”指芳基
‑
o
‑
，其中芳基如上所定义。
[0137]
术语“杂芳基氧基”指杂芳基
‑
o
‑
，其中杂芳基如上所定义。
[0138]
术语“环烷基烷基”指环烷基
‑
烷基
‑
，其中环烷基和烷基如上所定义。
[0139]
术语“杂环基烷基”指杂环基
‑
烷基
‑
，其中杂环基和烷基如上所定义。
[0140]
术语“芳基烷基”指芳基
‑
烷基
‑
，其中芳基和烷基如上所定义。
[0141]
术语“杂芳基烷基”指杂芳基
‑
烷基
‑
，其中杂芳基和烷基如上所定义。
[0142]
术语“烷硫基”指烷基
‑
s
‑
，其中烷基如上所定义。
[0143]
术语“卤代烷基”指烷基被一个或多个卤素取代，其中烷基如上所定义。
[0144]
术语“卤代烷氧基”指烷氧基被一个或多个卤素取代，其中烷氧基如上所定义。
[0145]
术语“氘代烷基”指烷基被一个或多个氘原子取代，其中烷基如上所定义。
[0146]
术语“羟烷基”指烷基被一个或多个羟基取代，其中烷基如上所定义。
[0147]
术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。
[0148]
术语“羟基”指
‑
oh。
[0149]
术语“巯基”指
‑
sh。
[0150]
术语“氨基”指
‑
nh2。
[0151]
术语“氰基”指
‑
cn。
[0152]
术语“硝基”指
‑
no2。
[0153]
术语“氧代基”或“氧代”指“＝o”。
[0154]
术语“羰基”指c＝o。
[0155]
术语“羧基”指
‑
c(o)oh。
[0156]
术语“羧酸酯基”指
‑
c(o)o(烷基)、
‑
c(o)o(环烷基)、(烷基)c(o)o
‑
或(环烷基)c(o)o
‑
，其中烷基和环烷基如上所定义。
[0157]
本公开的化合物还可包含其同位素衍生物。术语“同位素衍生物”指结构不同仅在于存在一种或多种同位素富集原子的化合物。例如，具有本公开的结构，除了用“氘”或“氚”代替氢，或者用
18
f
‑
氟标记(
18
f同位素)代替氟，或者用
11
c
‑
，
13
c
‑
，或者
14
c
‑
富集的碳(
11
c
‑
，
13
c
‑
，或者
14
c
‑
碳标记；
11
c
‑
，
13
c
‑
，或者
14
c
‑
同位素)代替碳原子的化合物处于本公开的范围内。这样的化合物可用作例如生物学测定中的分析工具或探针，或者可以用作疾病的体内诊断成像示踪剂，或者作为药效学、药动学或受体研究的示踪剂。
[0158]
本公开还包括各种氘化形式的化合物。是指与碳原子连接的各个可用的氢原子可独立地被氘原子替换。本领域技术人员能够参考相关文献合成氘化形式的化合物。在制备氘代形式的化合物时可使用市售的氘代起始物质，或它们可使用常规技术采用氘代试剂合成，氘代试剂包括但不限于氘代硼烷、三氘代硼烷四氢呋喃溶液、氘代氢化锂铝、氘代碘乙烷和氘代碘甲烷等。氘代物通常可以保留与未氘代的化合物相当的活性，并且当氘代在某些特定位点时可以取得更好的代谢稳定性，从而获得某些治疗优势。
[0159]“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
[0160]“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为1～5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下(通过实验或理论)确定可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
[0161]“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
[0162]“可药用的盐”是指本公开化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。可以在化合物的最终分离和纯化过程中，或通过使合适的基团与合适的碱或酸反应来单独制备盐。通常用于形成药学上可接受的盐的碱包括无机碱，例如氢氧化钠和氢氧化钾，以及有机碱，例如氨。通常用于形成药学上可接受的盐的酸包括无机酸以及有机酸。
[0163]
针对药物或药理学活性剂而言，术语“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。
[0164]
本文所用的术语“溶剂化物”是指本公开的化合物与一种或多种，优选地为1
‑
3种，无论是有机的还是无机的溶剂分子的物理结合。该物理结合包括氢键。在某些情况下，例如，当在结晶固体的晶格中掺入一种或多种，优选1
‑
3种溶剂分子时，溶剂化物将被分离。示
例性的溶剂化物包括但不限于水合物、乙醇化物、甲醇化物和异丙醇化物。溶剂化方法是本领域公知的。
[0165]“前药”是指可以在生理条件下，例如通过在血液中水解，在体内转化以产生活性原药化合物。
[0166]
本文所用的术语“药学上可接受的”是指这些化合物、材料、组合物和/或剂型，在合理的医学判断范围内，适用于与患者组织接触而没有过度毒性、刺激性、过敏反应或其他问题或并发症，具有合理的获益/风险比，并且对预期的用途是有效。
[0167]
本文所使用的，单数形式的“一个”、“一种”和“该”包括复数引用，反之亦然，除非上下文另外明确指出。
[0168]
当将术语“约”应用于诸如ph、浓度、温度等的参数时，表明该参数可以变化
±
10％，并且有时更优选地在
±
5％之内。如本领域技术人员将理解的，当参数不是关键的时，通常仅出于说明目的给出数字，而不是限制。
[0169]
本公开化合物的合成方法
[0170]
为了完成本公开的目的，本公开采用如下技术方案：
[0171]
方案一
[0172]
本公开通式(i)所示的化合物或其盐的制备方法，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐制备方法，包括以下步骤：
[0173][0174]
通式(ia)的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐与硫化试剂反应，得到通式(i)的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0175]
其中r1‑
r5、n、q和m如通式(i)中所定义。
[0176]
方案二
[0177]
本公开通式(ii)所示的化合物或其盐的制备方法，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐制备方法，包括以下步骤：
[0178][0179]
通式(iia)的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐与硫化试剂反应，得到通式(ii)的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0180]
其中r1‑
r4、r
10
‑
r
12
、q、u、w和m如通式(ii)中所定义。
[0181]
上述反应所述的硫化试剂可选自劳森试剂(2,4
‑
双(对甲氧苯基)
‑
1,3
‑
二硫一二磷杂环丁烷
‑
2,4硫化物)、2,4
‑
双(苯硫基)
‑
1,3
‑
二硫杂
‑
2,4
‑
二磷杂
‑
2,4
‑
二硫代环己烷、p4s
10
、p2s5、cs2、六甲基二硅氧烷、六甲基二硅噻烷和三氯氧磷与硫脲的组合，优选为劳森试剂。
[0182]
上述反应优选在溶剂中进行，所用溶剂包括但不限于：醋酸、甲醇、乙醇、乙腈、正丁醇、甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亚砜、1,4
‑
二氧六环、乙二醇二甲醚、水、甲苯、二甲苯、吡啶、二噁烷、n,n
‑
二甲基乙酰胺或n,n
‑
二甲基甲酰胺及其混合物。
具体实施方式
[0183]
以下结合实施例用于进一步描述本公开，但这些实施例并非限制着本公开的范围。
[0184]
实施例
[0185]
化合物的结构是通过核磁共振(nmr)或/和质谱(ms)来确定的。nmr位移(d)以10
‑
6(ppm)的单位给出。nmr的测定是用bruker avance neo 500m核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso
‑
d6)、氘代氯仿(cdcl3)、氘代甲醇(cd3od)，内标为四甲基硅烷(tms)。
[0186]
ms的测定用agilent 1200/1290dad
‑
6110/6120quadrupole ms液质联用仪(生产商：agilent，ms型号：6110/6120quadrupole ms)、waters acquity uplc
‑
qd/sqd(生产商：waters，ms型号：waters acquity qda detector/waters sq detector)、thermo ultimate 3000
‑
q exactive(生产商：thermo，ms型号：thermo q exactive)。
[0187]
高效液相色谱法(hplc)分析使用agilent hplc 1200dad、agilent hplc1200vwd和waters hplc e2695
‑
2489液相色谱仪。
[0188]
手性hplc分析测定使用agilent 1260dad高效液相色谱仪。
[0189]
高效液相制备使用waters 2545
‑
2767、waters 2767
‑
sq detecor2、shimadzu lc
‑
20ap和gilson gx
‑
281制备型色谱仪。
[0190]
手性制备使用shimadzu lc
‑
20ap制备型色谱仪。
[0191]
combiflash快速制备仪使用combiflash rf200(teledyne isco)。
[0192]
薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，薄层色谱法(tlc)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
[0193]
硅胶柱色谱法一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
[0194]
激酶平均抑制率及ic50值的测定用novostar酶标仪(德国bmg公司)。
[0195]
本公开的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自abcr gmbh&co.kg，acros organics，aldrich chemical company，韶远化学科技(accela chembio inc)、达瑞化学品等公司。
[0196]
实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。
[0197]
氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氩气或氮气气球。
[0198]
氢气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氢气气球。
[0199]
加压氢化反应使用parr 3916ekx型氢化仪和清蓝ql
‑
500型氢气发生器或hc2
‑
ss型氢化仪。
[0200]
氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。
[0201]
微波反应使用cem discover
‑
s 908860型微波反应器。
[0202]
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
[0203]
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
[0204]
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(tlc)，反应所使用的展开剂，纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：a：二氯甲烷/甲醇体系，b：正己烷/乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
[0205]
实施例1
[0206]
(6
‑
氟
‑1‑
(4
‑
(吗啉基甲基)苯基)
‑
5,5
‑
二氧负基
‑
1,4
‑
二氢硫代色烯并[4,3
‑
c]吡唑
‑3‑
基)(吗啉基)甲烷硫酮1
[0207][0208]
将化合物1a(250mg,0.475mmol，采用专利“cn102695710b中说明书第339页的实施例339”公开的方法制备而得)、劳森试剂(289mg,0.715mmol，毕得医药)加入到25ml四氢呋喃中，加热到70℃反应4小时。将反应液冷却到室温，加入50ml饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙
酯萃取(30ml
×
3)，合并有机相，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系b纯化得到标题化合物1(120.3mg，产率：46.7％)。
[0209]
ms m/z(esi):543.1[m 1]
[0210]1h nmr(500mhz,dmso
‑
d6):δ7.613
‑
7.442(m,6h),6.70
‑
6.68(m,1h),4.96(s,2h),4.35
‑
4.33(m,2h),3.91
‑
3.89(m,2h),3.82
‑
3.80(m,2h),3.66
‑
3.56(m,8h),2.42
‑
2.40(m,4h)。
[0211]
实施例2
[0212]
(6
‑
氯
‑1‑
(4
‑
(吗啉基甲基)苯基)
‑
5,5
‑
二氧化
‑
1,4
‑
二氢硫代色烯并[4,3
‑
c]吡唑
‑3‑
基)(吗啉基)甲烷硫酮2
[0213][0214]
第一步
[0215]1‑
(4
‑
(吗啉基甲基)苯基)肼
‑1‑
羧酸叔丁酯2b
[0216]
在氩气氛下，将化合物4
‑
(4
‑
碘代苄基)吗啉2a(51g，168.24mmol，采用专利申请“wo2008032191a2”中说明书第59页实施例17.1公开的方法制备而得)和肼基甲酸叔丁酯(23.347g，176.66mmol，韶远)溶解于400ml二甲亚砜中，搅拌10分钟，再加入碘化亚铜(1.603g,8.42mmol)，升温至50℃，搅拌反应17小时。加入400ml水，水相用乙酸乙酯(300ml
×
6)萃取，合并有机相，减压浓缩，残余物用combiflash快速制备仪以洗脱剂体系a纯化，得到标题化合物2b(51g，产率98.6％)。
[0217]
ms m/z(esi):308.1[m 1]。
[0218]
第二步
[0219]4‑
(4
‑
肼基苄基)吗啉2c
[0220]
在0℃下，将化合物2b(51g，165.91mmol)溶解于80ml甲醇中，滴加氯化氢的1,4
‑
二氧六环溶液(350ml，4.0m，研峰科技)，自然升温至室温，搅拌反应17小时。减压浓缩，得到粗品标题化合物2c(45.4g，产率132.3％)，产品不经纯化直接用于下一步反应。
[0221]
第三步
[0222]2‑
(8
‑
氯
‑
1,1
‑
二氧化
‑4‑
氧代硫代色烷
‑3‑
基)
‑2‑
氧代乙酸乙酯2e
[0223]
将化合物2
‑
(8
‑
氯
‑4‑
氧代硫代色烷
‑3‑
基)
‑2‑
氧代乙酸乙酯2d(25.7g，86.03mmol，采用专利“cn102695710b”中说明书第104页中间体e4公开的方法制备而得)和间氯过氧苯甲酸(43.664g，215.07mmol，沃凯)溶解于250ml二氯甲烷中，搅拌17小时。过滤，滤液减压浓缩，残余物用combiflash快速制备仪以洗脱剂体系a纯化，得到标题化合物2e(28.323g，产率99.5％)。
[0224]
ms m/z(esi):330.9[m 1]。
[0225]
第四步
[0226]6‑
氯
‑1‑
(4
‑
(吗啉基甲基)苯基)
‑
1,4
‑
二氢硫代色烯并[4,3
‑
c]吡唑
‑3‑
羧酸乙酯5,5
‑
二氧化物2f
[0227]
将化合物2e(10g，30.24mmol)、粗品化合物2c(9.192g，33.26mmol，75％)和乙酸(3.632g，60.48mmol，沪试)溶解于300ml无水乙醇中，升温至回流，搅拌3小时。加入300ml饱和碳酸氢钠溶液，混合液用乙酸乙酯(250ml
×
3)萃取，合并有机相，减压浓缩，残余物用combiflash快速制备仪以洗脱剂体系a纯化，得到标题化合物2f(10g，产率65.9％)。
[0228]
ms m/z(esi):502.0[m 1]。
[0229]
第五步
[0230]6‑
氯
‑1‑
(4
‑
(吗啉基甲基)苯基)
‑
1,4
‑
二氢硫代色烯并[4,3
‑
c]吡唑
‑3‑
羧酸5,5
‑
二氧化物2g
[0231]
将化合物2f(10g，19.92mmol)溶解于150ml四氢呋喃中，加入氢氧化钠水溶液(39.8ml，2.5m，自配)，搅拌4小时。加入浓盐酸溶液，调节ph约等于3，减压浓缩，得到粗品标题化合物2g(17.028g，产率180.3％)，产品不经纯化直接用于下一步反应。
[0232]
ms m/z(esi):474.0[m 1]。
[0233]
第六步
[0234]
(6
‑
氯
‑1‑
(4
‑
(吗啉基甲基)苯基)
‑
5,5
‑
二氧化
‑
1,4
‑
二氢硫代色烯并[4,3
‑
c]吡唑
‑3‑
基)(吗啉基)甲酮2h
[0235]
将化合物2g(800mg,1.688mmol,55.2％)、n,n,n
′
,n
′‑
四甲基
‑
o
‑
(7
‑
氮杂苯并三唑
‑1‑
基)六氟磷酸脲(2.901g,4.559mmol)和n,n
‑
二异丙基乙胺(1.025g,10.130mmol)溶解于50ml n,n
‑
二甲基甲酰胺中，控温0℃下，加入化合物吗啉(309mg,3.547mmol，国药)，升温至室温，搅拌4小时。加入100ml饱和碳酸氢钠溶液，水相用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取，合并有机相，减压浓缩，所得残余物用combiflash快速制备仪以洗脱剂体系a纯化，得到标题产物2h(405mg,产率：44.2％)。
[0236]
ms m/z(esi):543.0[m 1]。
[0237]
第七步
[0238]
(6
‑
氯
‑1‑
(4
‑
(吗啉基甲基)苯基)
‑
5,5
‑
二氧化
‑
1,4
‑
二氢硫代色烯并[4,3
‑
c]吡唑
‑3‑
基)(吗啉基)甲烷硫酮2
[0239]
将化合物2h(50mg,92.075μmol)、劳森试剂(56mg,138.45μmol，毕得医药)加入到15ml四氢呋喃中，加热到70℃反应4小时。将反应液冷却到室温，加入50ml饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)，合并有机相，减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系b纯化得到标题化合物2(13.2mg，产率：25.6％)。
[0240]
ms m/z(esi):558.9[m 1]。
[0241]1h nmr(500mhz,dmso
‑
d6):δ7.65
‑
7.63(m,1h),7.52
‑
7.48(m,3h),7.43
‑
7.41(m,2h),6.84
‑
6.83(m,1h),4.97(s,2h),4.34
‑
4.32(m,2h),3.91
‑
3.89(m,2h),3.81
‑
3.79(m,2h),3.66
‑
3.64(m,2h),3.61
‑
3.57(m,6h),2.41
‑
2.39(m,4h)。
[0242]
测试例：
[0243]
生物学评价
[0244]
测试例1、本公开化合物对pi3kδ酶的抑制活性和选择性测试
[0245]
一、实验目的：
[0246]
本实验的目的是为了测试化合物对pi3kδ酶学活性的抑制作用和选择性，根据ic
50
大小评价化合物的体外活性。
[0247]
二、实验原理：
[0248]
本实验使用adp
‑
glo
tm
kinase assay kit，在酶的作用下，底物被磷酸化同时产生adp，加入adp
‑
glo reagent除去反应体系中未反应的atp，激酶检测试剂(kinase detection reagent)检测反应产生的adp。在化合物存在的条件下，通过测量信号值算出化合物的抑制率。
[0249]
三、实验材料
[0250]
1、仪器
[0251]
仪器名称供货公司型号离心机eppendorf5430酶标仪perkin elmerenvision，sn.1050214echo 550labcyteecho 550
[0252]
2、试剂和耗材
[0253]
试剂名称供货公司货号pik3cd/pik3r1carna11
‑
103pi103selleckchems1038dmsosigmad8418
‑
1l384
‑
well white plateperkinelmer6007290
[0254]
四、实验方法
[0255]
受试化合物测试浓度为10000nm起始，3倍稀释，11个浓度，复孔测试。在384孔板中梯度稀释成100倍终浓度的11个不同浓度的溶液。用echo转移50nl到384孔板的化合物孔；阴性对照孔和阳性对照孔中分别加50nl的dmso。用1
×
激酶缓冲液(kinase buffer)配制2倍终浓度的激酶溶液。在化合物孔和阳性对照孔分别加2.5μl的2倍终浓度的激酶溶液；在
阴性对照孔中加2.5μl的1
×
激酶缓冲液(kinase buffer)。1000rpm离心30秒，振荡混匀后室温孵育10分钟。用1
×
激酶缓冲液(kinase buffer)配制2倍终浓度的atp和底物p1p2的混合溶液。加入2.5μl的2倍终浓度的atp和底物的混合溶液，起始反应。将384孔板1000rpm离心30秒，振荡混匀后室温反应120分钟。加入5μladp
‑
glo reagent，1000rpm离心30秒，振荡混匀后室温孵育40分钟。加入10μl激酶检测试剂(kinase detection reagent)，1000rpm离心30秒，振荡混匀后室温孵育30分钟。用envision酶标仪读取发光值rlu。
[0256]
五、数据分析
[0257]
用graphpad prism软件计算化合物抑制活性的ic
50
值，结果参见下表1。
[0258]
表1本公开化合物对pi3kδ酶的抑制和选择性活性数据(单位nm)
[0259][0260]
结论:本公开化合物对pi3kδ酶具有较强的抑制活性和选择性。