一种萝卜红气味定量检测方法与流程

1.本技术涉及萝卜红气味提取技术领域，特别是一种萝卜红气味定量检测方法。


背景技术：

2.随着食品工业的发展，为了丰富食品颜色，提高食品味觉感官，现有食品着色剂需要满足安全性、天然性的要求。通过添加合适的着色剂，能改善食品的味感，提高产品档次，满足食品各方面加工工艺需要。
3.为了满足食品安全的要求，部分国家已禁止在食品中使用合成色素，随着经济的发展，更多的人崇尚自然，而天然色素追求健康和安全第一的心里要求，食用天然色素的发展更加迅速。近年来我国天然色素发展迅速，产品原材料种植量、产品生产量、产品出口量都不断扩大，已成为世界天然色素的生产大国，取得了巨大的经济效益。
4.虽然大多数食用天然色素无毒、无副作用，安全性更高，但国内天然色素的使用情况较少，除了天然色素成本高等因素外，天然色素的使用，还受到天然色素本身带有的气味所限制。
5.在食品加工过程中，天然色素带来的不愉快气味，容易对食品本身的气味产生不良混杂，形成消费者难以接受的味道，降低了天然着色剂在国内的使用量。
6.萝卜红作为众多食用天然色素中的一种，也是国家较早允许使用于食品工业中的天然色素。但由于其添加后特殊的萝卜气味难以消除，限制了其在食品工业中的应用。近年来，萝卜红生产企业在脱除萝卜红气味方面投入大量的人力物力，取得了较大的成果，据查询，公开发表的关于萝卜红脱臭方面的专利数量较多，但对萝卜红气味检测控制及评判专利几乎没有，现有实验手段主要通过受试人员品尝食品后，根据感官评价打分表对食品气味进行打分，属于量化、感受型指标。现缺乏对脱嗅后产品气味的有效定量检测手段，制约着该色素生产过程及产品气味的准确评价。
7.另一方面，由于各生产企业脱除萝卜红气味的技术方法不同，如生产企业在脱味技术中除去的只是萝卜红臭味前体分解后的异硫氰酸酯等含硫臭味物质，在后期储存，运输等过程中，萝卜红中臭味前体硫代葡萄糖苷以及硫代葡萄糖苷仍会分解，再次产生大量的异硫氰酸酯等含硫臭味物质，导致已销售萝卜红产品及添加了萝卜红色素的食品再次出现特殊臭味，俗称无味萝卜红“回味”，造成已销售萝卜红产品质量问题，最终影响到添加萝卜红食品的品质。
8.同时现有技术对萝卜红气味检测方法只能对已经产生臭味物质，且向外散发气味的样品进行检测，对于不散发臭味的物质无法有效检测，进而无法在出厂前对产品进行有效的检测，导致销售易回味产品，影响产品质量。
9.现有萝卜红国标gb25536
‑
2010使用紫外分光光度计只能检测萝卜红色价，无法同时实现对萝卜红前体和分解后臭味物质进行准确定量有效检测。


技术实现要素：

10.本技术提供了一种萝卜红气味定量检测方法，该方法用于解决现有技术中存在的无法定量测量萝卜红样品中前体硫代葡萄糖苷以及硫代葡萄糖苷分解后的异硫氰酸酯等含硫臭味物质，导致销售后产品出现回味影响产品质量；现有技术对萝卜红中气味物质含量检测难度大，且只能检测呈现气味的物质，对于未氧化形成臭味物质的产品，存在无法有效准确检测其中臭味前提物质含量的技术问题。
11.本技术提供了一种萝卜红气味定量检测方法，包括以下步骤：
12.1)以色价已知的萝卜红样品为待检样品，加入去离子水完全溶解后再加入有机溶剂促溶得到稀释溶液；
13.2)将所得稀释溶液置于烧瓶中组装冷凝回流装置后，水浴蒸馏冷凝回流提取后，将烧瓶中剩余溶液冷却后转移至分液漏斗中静置分层后，分离去除下层液体后回收上层有机溶剂液层，并得到待检样品测试液；
14.3)将待检样品测试液定容至200ml后，以有机溶剂溶液为空白对照，取定容后的待检样品测试液、空白对照溶液置于比色皿中，用紫外分光光度计在265
±
10nm的最大吸收波长处测定待检样品测试液的吸光度，并按下式计算样品的检测得到的气味物质含量(w％)：
15.w％＝a/(m*e)
16.式中：
17.a——实测试样液的吸光度；
18.m——待检样品称样量；
19.e——待检样品色价。
20.原理：萝卜红产生臭味的主要原因是，萝卜红臭味前体硫代葡萄糖苷以及硫代葡萄糖苷分解后的异硫氰酸酯等含硫臭味物质，导致萝卜红具有萝卜红特征气味，这些物质极易溶于正己烷等有机溶剂，而色素则不溶，经正己烷回流提取并萃取得到的提取液，用紫外分光光度计在265
±
10nm处的具有最大吸收波长检测得到吸光度，通过计算可以得到单位色价萝卜红中含有的臭味物质含量。
21.该方法以无法通过气味分析仪或人体感官评价检测出萝卜特殊气味的样品为待检测样品进行检测后，能准确得出造成萝卜红产生臭味的前体硫代葡萄糖苷以及硫代葡萄糖苷分解后的异硫氰酸酯等含硫臭味物质的准确含量，测量结果准确，检测方法操作简单，检测难度低，且能有效用于对采用现有常用气味分析仪、测试人员感官评价无法区分的样品中的上述物质的含量，尤其适用于工业大规模生产中使用。且能实现对上述多种物质的定量检测，检测效果较好，便于对出厂产品进行有效品控。
22.优选的，所述步骤2)中还包括：对步骤2)中所得有机溶剂液层再次重复步骤2)中水浴蒸馏冷凝回流提取后，回收静置分层所得上层溶液作为待检样品测试液。通过对第一次水浴蒸馏提取所得有机液层再次进行蒸馏提取，能有效提高所处理萝卜红样品中待检测样品的提取分离率，提高检测结果准确性。
23.优选的，所述萝卜红样品为：无法通过气味分析仪或人体感官评价检测出萝卜特殊气味的样品。本技术提供方法能对此类样品进行有效准确的定量检测，检测结果准确性高，测量方法简便。
24.优选的，所述萝卜红样品为粉状或液态萝卜红。本技术提供方法能对各类样品进
行有效准确的检测。
25.优选的，所述步骤1中溶解步骤为：采用去离子水将待检样品稀释为色价8.0～12.0的稀释液。通过将样品色价调整至该范围内，能有效提高检测结果准确性。
26.优选的，所述有机溶剂为正己烷、乙酸乙酯、环己烷中的至少一种。
27.优选的，所述有机溶剂的添加量为溶解步骤所用去离子水体积的5～8倍量。使用该比例添加有机溶剂，能提高对样品中所含臭味前体及臭味物质进行充分溶解，保证检测结果准确性。此处有机溶剂添加量为体积，去离子水添加量为质量。
28.优选的，水浴温度60～70℃，回流提取次数为1～3次。采用该温度进行水浴加热，能避免臭味前体物质及臭味物质变性，又能使其从萝卜红样品中提取全面的出来。
29.优选的，静置分液时间为30～60min。采用该静置时间，能有利于样品中所含待检测物质与其他物质的有效分离，提高检测准确性。
30.本技术能产生的有益效果包括：
31.1)本技术所提供的萝卜红气味定量检测方法，该方法通过检测萝卜红产生臭味前体硫代葡萄糖苷以及硫代葡萄糖苷分解后的异硫氰酸酯等含硫臭味物质含量，定量判断产品品质以及控制加工过程是否脱除萝卜红所有臭味成分，用于对工业化生产食品添加剂萝卜红及添加食品添加剂萝卜红食品的生产过程及产品品质监控，对提高我国萝卜红产品品质，提高萝卜红终端产品应用具有重要的意义。
32.2)本技术所提供的萝卜红气味定量检测方法，以萝卜红为待检测样品，用水溶解后经正己烷回流提取分液，提取液用紫外分光光度计在265
±
10nm的最大吸收波长处测定吸光度，从而能通过检测后计算得到单位色价吸光值浓度，并据此得出样品中萝卜红产生臭味前体硫代葡萄糖苷以及硫代葡萄糖苷分解后的异硫氰酸酯等含硫臭味物质含量。该方法用于评判萝卜红气味品质具有速度快，样品用量少，准确性高，检测结果能同时反映萝卜红产生臭味关键物质的含量，设备需求起点低，操作简便，样品处理简便，适用于各生产企业生产萝卜红产品及使用萝卜红产品时有效控制产品质量，提高产品品质，实现定量准确检测。
具体实施方式
33.为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例对本技术提供技术方案进行详细说明。
34.实施例
35.以下实施例中所用试剂、仪器均可通过商业渠道购得，特别是天然色素生产企业均基本具备检测条件。
36.实施例1
37.取色价值为50的无味萝卜红粉3.00g置于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水12.00g溶解完全，所得稀释溶液的色价为10，再加入90ml正己烷充分摇匀，烧瓶加装冷凝回流装置置于65℃水浴锅中，回流提取1h取出冷却，待冷却后将烧瓶中物料转移至分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中45分钟，旋开旋塞，下层液体从漏斗管流下圆底烧瓶收集，当下层液体流尽时，立即关闭旋塞，然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来用200ml容量瓶收集。
38.圆底烧瓶收集的色素层再加入90ml正己烷充分摇匀，烧瓶加装冷凝回流装置置于65℃水浴锅中，回流提取1h取出冷却，待冷却后将烧瓶中物料转移至分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中45分钟，旋开旋塞，下层液体从漏斗管流下圆底烧瓶收集，当下层液体流尽时，立即关闭旋塞，然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来用200ml容量瓶收集得到待检样品测试液。
39.两次收集得到的待检样品测试液混合并定容至200ml，以正己烷做空白对照，取此试样液置于1cm比色皿中，用紫外分光光度计在265
±
10nm的最大吸收波长处测定吸光度，经扫描在波峰265nm处有最大吸光值，通过计算得w％＝0.168％。
40.实施例2
41.取色价50无味萝卜红液3.00g置于500ml圆底烧瓶，加入去离子水12.00g溶解完全，所得稀释溶液的色价为12，再加入90ml正己烷充分摇匀，烧瓶加装冷凝回流装置置于65℃水浴锅中，回流提取1h取出冷却，待冷却后将烧瓶中物料转移至分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中45分钟，旋开旋塞，下层液体从漏斗管流下圆底烧瓶收集，当下层液体流尽时，立即关闭旋塞，然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来用200ml容量瓶收集。
42.圆底烧瓶收集的色素层再加入90ml正己烷充分摇匀，烧瓶加装冷凝回流装置置于65℃水浴锅中，回流提取1h取出冷却，待冷却后将烧瓶中物料转移至分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中45分钟，旋开旋塞，下层液体从漏斗管流下圆底烧瓶收集，当下层液体流尽时，立即关闭旋塞，然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来用200ml容量瓶收集得到待检样品测试液。
43.两次收集得到的待检样品测试液混合并定容至200ml，以正己烷做空白对照，取此试样液置于1cm比色皿中，用紫外分光光度计在265
±
10nm的最大吸收波长处测定吸光度，经扫描在波峰265nm处有最大吸光值，通过计算得w％＝0.174％。
44.实施例3
45.取色价50无味萝卜红液3.00g置于500ml圆底烧瓶，加入去离子水12.00g溶解完全，所得稀释溶液的色价为12，再加入90ml正己烷充分摇匀，烧瓶加装冷凝回流装置置于65℃水浴锅中，回流提取1h取出冷却，待冷却后将烧瓶中物料转移至分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中45分钟，旋开旋塞，下层液体从漏斗管流下圆底烧瓶收集，当下层液体流尽时，立即关闭旋塞，然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来用200ml容量瓶收集。
46.圆底烧瓶收集的色素层再加入90ml正己烷充分摇匀，烧瓶加装冷凝回流装置置于65℃水浴锅中，回流提取1h取出冷却，待冷却后将烧瓶中物料转移至分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中45分钟，旋开旋塞，下层液体从漏斗管流下圆底烧瓶收集，当下层液体流尽时，立即关闭旋塞，然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来用200ml容量瓶收集得到待检样品测试液。
47.两次收集得到的待检样品测试液混合并定容至200ml，以正己烷做空白对照，取此试样液置于1cm比色皿中，用紫外分光光度计在265
±
10nm的最大吸收波长处测定吸光度，经扫描在波峰265nm处有最大吸光值，通过计算得w％＝1.586％。
48.实施例4
49.取色价50无味萝卜红粉3.00g置于500ml圆底烧瓶，加入去离子水12.00g溶解完全，所得稀释溶液的色价为11，再加入90ml正己烷充分摇匀，烧瓶加装冷凝回流装置置于65
℃水浴锅中，回流提取1h取出冷却，待冷却后将烧瓶中物料转移至分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中45分钟，旋开旋塞，下层液体从漏斗管流下圆底烧瓶收集，当下层液体流尽时，立即关闭旋塞，然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来用200ml容量瓶收集。
50.圆底烧瓶收集的色素层再加入90ml正己烷充分摇匀，烧瓶加装冷凝回流装置置于65℃水浴锅中，回流提取1h取出冷却，待冷却后将烧瓶中物料转移至分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中30分钟，旋开旋塞，下层液体从漏斗管流下圆底烧瓶收集，当下层液体流尽时，立即关闭旋塞，然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来用200ml容量瓶收集得到待检样品测试液。
51.两次收集得到的待检样品测试液混合并定容至200ml，以正己烷做空白对照，取此试样液置于1cm比色皿中，用紫外分光光度计在265
±
10nm的最大吸收波长处测定吸光度，经扫描在波峰265nm处有最大吸光值，通过计算得w％＝1.524％。
52.实施例5
53.与实施例2的区别在于：所用有机溶剂为乙酸乙酯，加入量为60ml；水浴温度为70℃；单次蒸馏回流提取中，回流提取次数为3次。在分液漏斗静置60min。
54.实施例6
55.与实施例3的区别在于：所用有机溶剂为环己烷，加入量为96ml。
56.对比例1
57.与实施例2的区别在于：采用去离子水将待检样品稀释为色价15.0的稀释液。所得w％＝1.28％
58.对比例2
59.与实施例2的区别在于：采用去离子水将待检样品稀释为色价7.0的稀释液。所得w％＝1.38％
60.由实施例2与对比例1～2所得结果对比可知，当对样品稀释后色价不满足本技术提供数值范围时，会导致检测结果出现数量级的误差，无法进行准确检测。
61.为验证上述实施例检测结果的有效性、准确性，对上述实施例中检测样品在储存0天、20℃下储存60天后分别用气味检测仪进行检测，具体操作方法如下：
62.1、将上述各实施例中检测所用样品用取离子水稀释至10色价，再分别用气味检测仪对样品稀释液的气味进行检测验证。
63.2、将上述实施例样品放置于恒温箱保持20℃，放置60天，之后取出实施例样品用去离子水稀释至10色价，用气味检测仪再次对气味进行检测验证。
64.检测结果如表1所示。
65.表1
[0066][0067]
表1结果说明：
[0068]
上述实施例1～4中样品储存0天时，通过气味检测仪检测结果发现，产品的气味强度差别较小，鼻嗅基本无萝卜红特殊臭味。但各样品在储存0天时，采用本技术提供方法均可检测得到臭味物质及其前体的定量含量。
[0069]
同时通过本技术提供方法检测，实施例3、实施例4检测值约是实施1、实施例2值的9倍，说明实施例3、实施例4样品虽然经过脱味处理，但并未能彻底脱出臭味物质及其前体。说明本技术提供方法用于检测含臭味物质前体量较高的样品时，能准确检测得到检测结果，且能有效避免受到气味的迷惑，提高检测准确性。
[0070]
由表1可知，实施例3～4样品在脱味上未彻底脱出干净，上述实施例样品放置于恒温箱保持20℃，放置60天，用气味检测仪检测气味强度较高，与存储0天时测量结果差别较大，鼻嗅有较重萝卜红特殊臭味。说明实施例3～4中脱味上未彻底脱出干净，后期产品存储、运输等过程仍会重新出现萝卜红气味。
[0071]
而实施例1～2存储前后的气味检测仪检测结果差别较小，鼻嗅基本无萝卜红特殊臭味。
[0072]
采用本技术提供萝卜红气味定量检测方法对于产生萝卜红臭味前体物质含量高，易回味样品检测结果与前体含量低样品差别较大，说明本技术提供方法检测结果较准确，且能对后期运输、储存等导致臭味回味的样品也能准确检测。
[0073]
经实施例验证，证明该方法有效，准确，能对萝卜红气味品质起到控制目的。
[0074]
尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。