一种来源于中药美洲大蠊的修饰肽及其应用

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种来源于中药美洲大蠊的修饰肽及其应用。

背景技术：

1、痛风是常见的炎症性关节炎，其特征是突然出现单关节剧烈疼痛和肿胀，主要原因为尿酸钠（msu）晶体在关节及周围组织中沉积所致。尿酸钠晶体的形成是由于血清尿酸（su）水平高于6.8毫克/分升（高尿酸血症）。只有约9%的人群在血清尿酸水平为7.0~8.9毫克/分升的个体中，在15年内会出现痛风发作，而在血清尿酸水平高于10毫克/分升的个体中，只有约50%会出现明显的临床痛风症状。因为还有其他风险因素会增加患痛风的风险，尤其是与先天免疫反应相关的因素。

2、尿酸是通过饮食或体内嘌呤分解代谢过程产生的一个副产物，由主要存在于肝脏、肠道、肾脏和内皮细胞中的黄嘌呤氧化酶酶催化生成。尿酸为一种弱二元酸，在生理ph环境下，存在于血浆、细胞外液和关节液中时以一价尿酸阴离子的形式存在（约占98%）。尿酸具有多种生理作用，包括作为氧化剂、抗氧化剂、促炎剂、一氧化氮调节剂等。尿酸能够促进nadph氧化酶的增加，该酶会转移到线粒体中产生活性氧物质，从而加剧氧化应激。尿酸还会与过氧氮合物反应生成自由基，包括氨基羰基和三尿酰基羰基自由基。这些产生自由基和活性氧物质的机制能够激活nlrp3炎症小体，并进一步启动促炎信号传导和后续的炎症反应(lancet.2008,372(9654):1953-1961)。

3、与其他自身炎症性疾病一样，痛风也是由无菌性炎症引起的。尿酸钠晶体充当损伤相关分子模式（damps），通过与tlr2/4结合来激活先天免疫反应。这种结合会激活nlrp3炎性小体，从而促进细胞因子的表达。nlrp3炎性小体在痛风的发展过程中起着至关重要的作用。当巨噬细胞遇到尿酸钠晶体时，nlrp3炎性小体会被激活。这种激活会导致释放出促炎性细胞因子，包括il-1β、il-6、il-8、il-18和tnf-α。这种反应说明了与痛风相关的自身炎症机制。调控nlrp3炎性小体形成和活性的基因的遗传多态性与痛风有关，这支持了将其归类为自身炎症性疾病的观点。从临床过程来看，痛风治疗主要包括急性发作期抗炎镇痛、长期降尿酸治疗以及生活方式干预。目前临床治疗已经形成较为成熟的药物体系，但仍存在疗效、安全性、长期依从性以及个体化治疗等方面的问题。有痛风治疗技术的主要缺点主要有：1. 急性期药物存在一定的不良反应和使用限制；2. 降尿酸治疗主要针对“尿酸”，不能完全解决炎症问题；3. 长期治疗存在依从性问题。

4、随着蛋白组学、肽组学和质谱技术的发展，从传统中药美洲大蠊中发现和鉴定活性多肽技术上已经成熟。研究表明，美洲大蠊来源的多肽/低分子量肽组分具有一定的抗炎、抗氧化、抗菌和组织修复等活性。例如，近期研究通过质谱鉴定了大量美洲大蠊来源的肽序列，并观察到相关肽组分具有抗氧化和抗炎等活性。美洲大蠊属于动物药材，其蛋白质和多肽组成十分复杂。传统提取方法通常得到的是多种肽段组成的混合物，难以直接确定其中真正发挥药理作用的“关键活性肽”。同时，天然活性蛋白质和多肽组物质也存在制备困难、潜在的免疫原性、稳定性差等问题。

5、因此，开发一种来源于美洲大蠊的修饰肽成为本领域亟待解决的需求。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种来源于动物类中药美洲大蠊的修饰肽、其制备技术及在抗痛风治疗中的应用。

2、第一方面，本发明提供一种来源于中药美洲大蠊的修饰肽，所述来源于中药美洲大蠊的修饰肽包括人工三肽和天然美洲大蠊截短九肽；

3、所述来源于中药美洲大蠊的修饰肽的氨基酸序列如seq id no:1所示；所述人工三肽的氨基酸序列为ehg；所述天然美洲大蠊截短九肽的氨基酸序列如seq id no:2所示。

4、优选地，所述人工三肽的氨基酸残基螯合了zn2+离子进行修饰。

5、优选地，通过向所述来源于中药美洲大蠊的修饰肽中加入zn2+离子溶液使所述人工三肽的氨基酸残基螯合zn2+离子。

6、第二方面，本发明提供上述来源于中药美洲大蠊的修饰肽在制备治疗和/或缓解痛风药物中的应用。

7、优选地，所述来源于中药美洲大蠊的修饰肽通过抑制炎症促炎细胞因子‌白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α的表达、促进抗炎细胞因子白细胞介素-10的表达治疗和/或缓解痛风。

8、第三方面，本发明提供一种药物，包含上述来源于中药美洲大蠊的修饰肽。

9、优选地，所述来源于中药美洲大蠊的修饰肽通过多肽固相合成技术，使用天然氨基酸为原料合成。

10、优选地，所述药物还包括在生物医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物和/或可接受的辅料；所述辅料包括填充剂、矫味剂、ph调节剂、稳定剂、注射用水、抗氧化剂、渗透压调节剂中的至少一种。

11、优选地，所述药物的剂型包括注射剂、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、丸剂、膏剂、霜剂中的至少一种。

12、优选地，所述药物的使用方式包括注射、口服、滴鼻、滴眼中的至少一种，所述药物的导入部位包括肌肉、内皮、皮下、静脉、粘膜组织中的任意一种。

13、本发明与现有技术相比具有以下有益效果：

14、本发明提供的来源于中药美洲大蠊的修饰肽，通过将中药美洲大蠊中的天然多肽进行截短得到由9个氨基酸残基所组成的短肽序列，进一步以该肽段为模板，在其氨基端通过酰胺键修饰具有金属锌离子螯合作用的三肽。本发明提供修饰肽相较于天然多肽对痛风具有显著更优的治疗效果，且该修饰肽在高浓度时，对细胞活力也没有显著影响，对红细胞也无明显毒性。

15、本发明的修饰肽以廉价的天然氨基酸为原料，通过多肽固相合成技术进行制备，再通过色谱技术进行纯化，操作便捷、重复性好、纯度稳定可靠、工艺简单、制备成本低廉，能满足产品的开发与应用的需要。

1.一种来源于中药美洲大蠊的修饰肽，其特征在于，所述来源于中药美洲大蠊的修饰肽包括人工三肽和天然美洲大蠊截短九肽；

2.根据权利要求1所述的来源于中药美洲大蠊的修饰肽，其特征在于，所述人工三肽的氨基酸残基螯合了zn2+离子进行修饰。

3.根据权利要求2所述的来源于中药美洲大蠊的修饰肽，其特征在于，通过向所述来源于中药美洲大蠊的修饰肽中加入zn2+离子溶液使所述人工三肽的氨基酸残基螯合zn2+离子。

4.如权利要求1~3任一项所述的来源于中药美洲大蠊的修饰肽在制备治疗和/或缓解痛风药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述来源于中药美洲大蠊的修饰肽通过抑制炎症促炎细胞因子‌白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α的表达、促进抗炎细胞因子白细胞介素-10的表达治疗和/或缓解痛风。

6.一种药物，其特征在于，包含权利要求1~3任一项所述的来源于中药美洲大蠊的修饰肽。

7.根据权利要求6所述的药物，其特征在于，所述来源于中药美洲大蠊的修饰肽通过多肽固相合成技术，使用天然氨基酸为原料合成。

8.根据权利要求6所述的药物，其特征在于，所述药物还包括在生物医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物和/或可接受的辅料；

9.根据权利要求6所述的药物，其特征在于，所述药物的剂型包括注射剂、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、丸剂、膏剂、霜剂中的至少一种。

10.根据权利要求6所述的药物，其特征在于，所述药物的使用方式包括注射、口服、滴鼻、滴眼中的至少一种，所述药物的导入部位包括肌肉、内皮、皮下、静脉、粘膜组织中的任意一种。