一种长根菇菌株中海2号及其应用

本发明属于食用菌，具体涉及一种长根菇菌株中海2号及其应用。

背景技术：

1、长根菇，真菌分类学名为卵孢小奥德蘑（hymenopellis raphanipes），俗称长根菇、黑皮鸡枞、露水鸡枞，是我国极具发展潜力的珍稀特色食用菌，子实体含有丰富的蛋白质、多糖、三萜类、牛磺酸、叶酸等营养与活性功能成分，兼具食用价值与药用开发潜力，市场经济价值突出。目前国内已审定、鉴定的卵孢小奥德蘑栽培品种数量有限，有四川审定品种露水鸡枞，以及云南审定的 云鸡枞1号、 云鸡枞3号、 云鸡枞4号、 云鸡枞5号、 黑皮鸡枞6号等少数选育品种，市场流通可用栽培菌株资源相对匮乏。现有主流栽培菌株大多来源于野生菌株简单驯化，普遍存在适宜生长温度区间较窄的短板，菌丝对低温、高温胁迫耐受能力不足。

2、厄尔尼诺气候效应下，各地区气候温度波动较大，无论是仿野生高原山地栽培环境下，或者大棚栽培过程中，天气影响温控稳定性，低温或高温天气下，大棚的保温或降温能力会受到严重影响。棚内温度可能骤降，导致菌丝冻伤或出菇停止；高温时，棚内温度可能超过30℃，容易出现发菌迟缓、菌丝老化腐烂、杂菌侵染、病害发生概率升高等问题，造成菌棒报废、减产甚至绝收，制约了该菌种在规模化推广应用。随着人工栽培技术不断成熟，云南等低纬高海拔地区栽培规模持续扩大，产业端对广适应性、高抗逆、丰产稳产的优良生产菌株需求日益迫切。

3、同时，长根菇菌株具有典型的四极性交配系统，其交配型可表示为a1a2b1b2。长根菇的交配型由两个彼此不连锁的交配型位点控制，分别为a交配型位点和b交配型位点。因此，长根菇子实体经减数分裂产生的单核担孢子后代可形成a1b1、a1b2、a2b1和a2b2四种交配型。在四极性交配系统中，两个单核菌株只有在a交配型位点和b交配型位点均具有不同等位型，即两个交配型位点均互补时，才能完成有效交配并形成具有出菇能力的双核菌丝。例如，交配型为a1b1的单核菌株可与交配型为a2b2的单核菌株交配出菇，交配型为a1b2的单核菌株可与交配型为a2b1的单核菌株交配出菇。相反，当两个单核菌株的a交配型位点或b交配型位点相同时，不能杂交出菇。例如，a1b1与a1b2的a交配型位点相同，a1b1与a2b1的b交配型位点相同，因而均不属于交配型完全互补的组合，不能出菇。

4、因此，准确鉴定单核担孢子后代的交配型，是筛选可交配亲本和开展长根菇杂交育种的重要前提。若不预先确定交配型，需要对大量单核菌株进行逐一配对和培养验证，工作量较大。利用交配型分子标记，可在菌丝生长阶段对单核菌株进行交配型鉴定，预先筛选a、b两个交配型位点均互补的单核菌株组合，从而减少无效配对，为杂交亲本选择及后续出菇试验提供依据。

技术实现思路

1、本发明旨在提供一种长根菇菌株中海2号及其应用，以解决背景技术中存在的问题，具体本发明提供以下技术方案：

2、一方面，本发明提供一种长根菇菌株中海2号，分类命名为hymenopellisraphanipes,保藏编号为gdmcc no:68835。保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期：2026年08月14日，保藏编号为gdmcc no:68835。该生物材料的存活性经保藏中心于2026年08月14日检测，结果是存活。

3、再一方面，本发明提供一种长根菇菌丝，由所述的菌株中海2号培养获得。

4、再一方面，本发明提供一种长根菇子实体，由所述的菌株中海2号栽培获得。

5、再一方面，本发明提供一种长根菇菌粉，由所述的子实体干燥、粉碎后获得。

6、再一方面，本发明提供所述的长根菇子实体或所述的长根菇菌粉在制备食品中的应用。

7、再一方面，本发明提供一种食品，所述食品含有所述的长根菇子实体或所述的长根菇菌粉。

8、再一方面，本发明提供一种所述长根菇中海2号交配型分子标记，所述交配型为a1、a2、b1和b2，其特征在于，

9、所述交配型a1的分子标记为hap1蛋白或编码该蛋白的基因；

10、所述交配型a2的分子标记为hap2蛋白或编码该蛋白的基因；

11、所述交配型b1的分子标记为hrpr1蛋白或编码该蛋白的基因；

12、所述交配型b2的分子标记为hrpr2蛋白或编码该蛋白的基因；

13、所述hap1蛋白氨基酸序列如seq id no.2所示；所述hap2蛋白氨基酸序列如seqidno.4所示；所述hrpr1蛋白氨基酸序列如seq id no.6所示；所述hrpr2蛋白氨基酸序列如seqid no.8所示。

14、再一方面，本发明提供一种试剂盒，所述试剂盒含扩增所述分子标记的引物，所述试剂盒含有：扩增hap1基因片段的引物如seq id no.9和10所示；扩增hap2基因片段的引物如seq id no.11和12所示；扩增hrpr1基因片段的引物如seq id no.13和14所示；扩增hrpr2基因片段的引物如seq id no.15和16所示。

15、再一方面，本发明提供所述分子标记、所述试剂盒在筛选交配型为a1b1、a2b2、a1b2或a2b1单核长根菇中的应用。

16、再一方面，本发明提供一种单核长根菇交配型的鉴定方法，包括以下步骤：

17、s1：提取待测样品dna；

18、s2：以待测样品dna为模板，用所述试剂盒中的引物进行pcr扩增，得到扩增产物，如扩增产物中存在目的基因片段，则该样品存在对应的交配型。

19、本发明达到的技术效果：

20、1、温度适应范围广，抗逆能力突出

21、本发明中海2号菌株的菌丝可在 10℃-35℃温度区间生长，栽培袋发菌阶段 10℃、35℃极端温度条件下仍具备生长活性，35℃高温环境下菌丝虽轻微黄化，后续仍可实现部分出菇。对比对照品种云鸡枞5号，30℃菌丝呈现褐色老化，35℃完全不生长，10-15℃低温下发菌严重受阻，高温易出现菌丝老化腐烂、不出菇现象。本发明菌株耐低温、耐高温能力更强，对栽培环境温度波动容忍度高，降低了生产过程因温度异常导致菌棒报废的风险，降低栽培设施控温成本，且可适用于云南山地昼夜温差大的栽培环境。

22、2、抗杂抗病性能优良，生产损耗低

23、经区域栽培试验表明，中海2号发菌期菌棒污染率平均仅 2.84%，开袋覆土出菇期菌棒污染率平均 4.29%，子实体发病率低至 0.73%；本发明菌株杂菌、病害发生水平显著低于对照品种云鸡枞5号，有效减少栽培过程菌棒损耗，提升栽培成功率，降低生产成本。

24、3、适配中高海拔种植，丰产增产效果显著

25、本菌株在海拔1650-2300m 区域均具有良好栽培适应性，尤其在 1900-2300m 的中高海拔地区增产效果突出；在海拔 2300m 试验点，相较对照品种云鸡枞 5 号增产幅度可达 117.49%。弥补现有长根菇品种在云南中高海拔地区栽培产量低、适应性差的短板，拓展了长根菇适宜栽培地域，助力高原食用菌产业发展。

26、4、检测本发明提供的长根菇交配型分子标记，可根据相应特异条带的有无，将待测单核长根菇菌株鉴定为a1b1、a1b2、a2b1或a2b2交配型。常规方式下以锁状联合为标记鉴别是否为单核菌丝体，然后对单核体进行多轮两两交配反应才能相对确定单核菌株交配型，工序繁琐，耗时长；本发明提供的方法能够在菌丝生长阶段完成单核菌株的交配型鉴定，并据此预先筛选a、b两个交配型位点均互补的单核菌株组合，减少后续杂交育种中的无效配对，为长根菇杂交亲本选择、杂交组合配置及新品种选育提供技术支持。