鸭疫里默氏杆菌噬菌体及其应用的制作方法

本技术涉及噬菌体，尤其是涉及鸭疫里默氏杆菌噬菌体及其应用。

背景技术：

1、鸭疫里默氏杆菌病是水禽养殖业中一种常见的细菌性传染病，主要感染鸭、鹅等水禽，尤其对雏鸭危害严重，常表现为纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎和脑膜炎等病理变化，具有高发病率和高死亡率的特点，给养禽业带来了显著的经济损失。鸭疫里默氏杆菌血清型复杂多样，目前已鉴定出至少21种血清型，且不同血清型之间缺乏有效的交叉保护，增加了疫病防控的难度。

2、目前，鸭疫里默氏杆菌病的防治主要依赖抗生素和疫苗。然而，随着抗生素在养殖业中的广泛使用甚至滥用，鸭疫里默氏杆菌的耐药性问题日益突出。研究表明，该菌对多种常用抗生素如四环素、红霉素、新霉素等均表现出不同程度的耐药性，且耐药基因可通过质粒等可移动元件在菌株间传播，进一步加剧了防控难度。此外，疫苗虽然在一定程度上可提供免疫保护，但由于血清型多样且变异性强，现有疫苗难以覆盖所有流行菌株，免疫效果不稳定，限制了其推广应用。

3、噬菌体是能够特异性裂解细菌的病毒，具有宿主专一性强、不破坏正常菌群、可自我复制、不易产生耐药性等优点，在防控多重耐药菌感染方面展现出巨大潜力。针对鸭疫里默氏杆菌的噬菌体研究，近年来虽有一定进展，但仍存在裂解谱窄、环境耐受性差、工业化生产能力不足等问题，限制了其在实际生产中的应用。

4、目前，已经有鸭疫里默氏杆菌噬菌体被分离和报道，但多数噬菌体存在宿主范围局限，难以满足规模化应用需求。

技术实现思路

1、为了提高对鸭疫里默氏杆菌的裂解能力，并满足其众多血清型，本技术提供鸭疫里默氏杆菌噬菌体及其应用。

2、第一方面，本技术提供一株鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24，采用如下的技术方案：

3、一株鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24，所述鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24于2026年7月2日保藏至广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为：gdmccno. 67616-b1，分类命名为：

riemerella anatipestifer phage

rap7arasd24。

4、在一些实施方式中，所述鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24具有一呈多面体立体对称的头部及一个短收缩尾部，头部直径75-90 nm，尾部尾长8-10 nm，尾部直径2-5 nm。

5、第二方面，本技术提供一株鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8，采用如下的技术方案：

6、一株鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8，所述鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8于2026年7月2日保藏至广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为：gdmccno. 67617-b1，分类命名为：

riemerella anatipestifer phage

rap16arasd8。

7、在一些实施方式中，所述鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8具有一呈多面体立体对称的头部及一个短收缩尾部，头部直径45～60 nm，尾部尾长4-7 nm，尾部直径3-4 nm。

8、通过采用上述技术方案，本技术的鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8为从自然界分离获得的烈性噬菌体，具有独特的短尾病毒科形态特征，其对鸭疫里默氏杆菌宿主范围广、裂解能力强，对不同血清型的鸭疫里默氏杆菌的识别率高达94%以上，且对正常微生物菌群无损伤，且表现出优异的环境耐受性和稳定性。更重要的是，二者均可部分识别对各种抗菌药物有较高耐药性的脑膜脓毒伊丽莎白金菌，这对拓展噬菌体疗法的宿主谱、开发针对多重耐药脑膜脓毒伊丽莎白金菌感染的替代或辅助治疗方案具有重要意义。

9、第三方面，本技术提供一种抑制鸭疫里默氏杆菌的组合物，采用如下的技术方案：

10、一种抑制鸭疫里默氏杆菌的组合物，包括鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和/或鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8。

11、通过采用上述技术方案，本技术通过将鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24与rap16arasd8进行配伍，可拓宽噬菌体的宿主裂解谱，并识别和裂解更多血清型的鸭疫里默氏杆菌的菌株，克服了单一噬菌体可能存在的裂解谱局限性。

12、可选的，还包括粪肠球菌噬菌体p35aefln26，所述粪肠球菌噬菌体p35aefln26的保藏编号为cctcc no: m2025336。

13、通过采用上述技术方案，本技术的组合物进一步引入粪肠球菌噬菌体p35aefln26，可显著拓展组合物的抑菌谱系和应用范围。粪肠球菌是水禽养殖环境中常见的条件致病菌，常与鸭疫里默氏杆菌形成混合感染，且其耐药性较强，传统抗生素难以有效清除。将粪肠球菌噬菌体p35aefln26与鸭疫里默氏杆菌噬菌体复配后，组合物不仅能够高效裂解鸭疫里默氏杆菌，还可特异性抑制粪肠球菌，实现对混合感染的协同防控。

14、第四方面，本技术提供一种生物杀菌剂，采用如下的技术方案：

15、一种生物杀菌剂，包括鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和/或鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8。

16、通过采用上述技术方案，本技术提供的生物杀菌剂以鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和/或rap16arasd8为核心活性成分，充分发挥了噬菌体作为天然抗菌生物制剂的独特优势。

17、可选的，所述生物杀菌剂的剂型为溶液剂、粉剂、凝胶剂、颗粒剂或冻干剂中之一。

18、可选的，还包括化学性杀菌剂，所述化学性杀菌剂包括十二烷基二甲基苄基氯化铵。

19、通过采用上述技术方案，本技术的组合物进一步引入化学性杀菌剂十二烷基二甲基苄基氯化铵，实现了生物噬菌体与化学消毒剂的协同复配，显著提升了组合物的综合杀菌效能和环境适应性。十二烷基二甲基苄基氯化铵作为一种季铵盐类阳离子表面活性剂，具有快速杀菌、广谱抑菌和良好渗透性的特点，能够迅速破坏细菌细胞膜结构，对环境中多种病原微生物均有杀灭作用；将其与鸭疫里默氏杆菌噬菌体复配后，一方面利用化学杀菌剂快速降低环境中的菌载量、控制疫情暴发初期的感染压力，另一方面借助噬菌体的特异性增殖能力和持续抑菌作用，实现对鸭疫里默氏杆菌的靶向清除和长效防控。

20、第五方面，本技术提供一种药物，采用如下的技术方案：

21、一种药物，包括鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和/或鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8。

22、通过采用上述技术方案，本技术提供的药物以鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和/或rap16arasd8作为活性成分，为治疗和预防鸭疫里默氏杆菌感染提供了一种高效、安全的新型生物药剂。

23、第六方面，本技术提供一种饲料添加剂，采用如下的技术方案：

24、一种饲料添加剂，包括鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和/或鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8。

25、通过采用上述技术方案，本技术提供的饲料添加剂以鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和/或rap16arasd8为核心功能成分，为水禽养殖过程中鸭疫里默氏杆菌病的防控提供了一种绿色、安全、可持续的饲用解决方案。该饲料添加剂具有良好的制粒耐受性和贮存稳定性，通过喷雾干燥或冷冻干燥工艺制备成粉剂后，噬菌体活性保持良好，效价无显著下降，能够适应饲料加工和储存过程中的环境条件。

26、第七方面，本技术提供一种试剂盒，采用如下的技术方案：

27、一种试剂盒，包括鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和/或鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8。

28、通过采用上述技术方案，本技术提供的试剂盒以鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和/或rap16arasd8作为特异性识别元件，为鸭疫里默氏杆菌的快速、灵敏、精准检测提供了高效工具。该试剂盒利用噬菌体与其宿主菌之间的高度特异性识别机制，能够从复杂样本中准确检出目标病原菌，有效避免了传统检测方法中可能出现的假阳性或交叉反应问题。

29、综上所述，本技术包括以下至少一种有益技术效果：

30、1. 本技术提供的鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap7arasd24和鸭疫里默氏杆菌噬菌体rap16arasd8为从自然界分离获得的烈性噬菌体，具有独特的短尾病毒科形态特征，其对鸭疫里默氏杆菌宿主范围广、裂解能力强，对不同血清型的鸭疫里默氏杆菌的识别率高达94%以上，且对正常微生物菌群无损伤，且表现出优异的环境耐受性和稳定性；

31、2. 本技术的组合物进一步引入粪肠球菌噬菌体p35aefln26，可显著拓展组合物的抑菌谱系和应用范围。粪肠球菌是水禽养殖环境中常见的条件致病菌，常与鸭疫里默氏杆菌形成混合感染，且其耐药性较强，传统抗生素难以有效清除。将粪肠球菌噬菌体p35aefln26与鸭疫里默氏杆菌噬菌体复配后，组合物不仅能够高效裂解鸭疫里默氏杆菌，还可特异性抑制粪肠球菌，实现对混合感染的协同防控。