用于抑制细胞色素P450家族7亚家族A成员1(CYP7A1)表达的组合物及方法与流程

本发明涉及用于抑制细胞色素p450家族7亚家族a成员1 (cyp7a1)的基因表达的组合物(例如，rnai剂组合物)。

背景技术：

1、原发性硬化性胆管炎(psc)是一种罕见的进行性肝脏疾病，其特征在于胆管炎症、肝纤维化、肝硬化和终末期肝脏疾病。患者频繁出现并发炎症症性肠病(ibd)。驱动发病机制的风险因素和机制未知，但包括人类白细胞抗原(hla)遗传学、免疫功能障碍、肠至肝淋巴细胞归巢、生态失调和毒性胆汁酸的肝内累积。诊断基于碱性磷酸酶(alp)升高和特征性磁共振胆道造影(mrc)发现(胆管成珠(beading)和狭窄)。疲劳和瘙痒为最常见的早期症状，黄疸、腹痛、发热、体重减轻和门静脉高压体征发生在后期。自诊断psc直至肝移植或psc相关死亡的中位存活期估计为13-21年。尽管其为罕见疾患，在全球范围内psc的盛行率为约每100,000人约1-12人且在主要市场中为大约80,000名患者，但psc在美国为肝移植的第五大常见适应症且在其他国家为主要适应症。此外，由于与患有ibd的患者和一般群体相比，儿童和年轻成人中结肠直肠癌、细菌性胆管炎的风险增加，以及全因性肝胰胆管恶性肿瘤、胆管癌和过早死亡的风险，因此psc代表极显著的健康负担。

2、尚无获批用于治疗psc的疗法，并且迄今为止，尚无预防psc患者的肝脏疾病进展的研究性药物进展至关键临床试验。当前临床实践仅限于非适应症(off-label)使用熊脱氧胆酸(udca)，但有证据显示udca在psc患者中具有长期负面结果，并且需管控并发症，诸如显性狭窄的扩张和胆管癌的早期诊断。肝移植目前为进展为肝衰竭的psc患者的唯一延长寿命的疗法。然而，肝移植不排除疾病的复发。

3、cyp7a1为细胞色素p450酶超家族的成员。细胞色素p450蛋白为单加氧酶，其催化参与药物代谢和胆固醇、类固醇和其他脂质的合成的许多反应。该内质网膜蛋白催化肝脏中胆固醇分解代谢路径中的第一反应，该第一反应将胆固醇转化为胆汁酸。该反应为速率限制步骤和调控胆汁酸合成的主要位点，胆汁酸合成是自体内去除胆固醇的主要机制。

4、某些肝脏病症的特征在于胆汁酸稳态紊乱。这些病症包括psc和其他胆汁淤积疾病，诸如进行性家族性肝内胆汁淤积(pfic)和原发性胆汁性胆管炎(pbc)，以及其他肝脏疾病，诸如非酒精性脂肪性肝炎(nash)、非酒精性脂肪肝脏疾病(nafld)和酒精性肝脏疾病(ald)。胆汁酸稳态紊乱的肝脏病症可受益于cyp7a1活性的抑制。

5、因此，本领域中需要用于通过抑制cyp7a1活性来治疗psc和其他病症的组合物及方法。

技术实现思路

1、在一些方面中，本公开提供了rnai剂，其实现编码细胞色素p450家族7亚家族a成员1 (cyp7a1)的基因的rna转录物的rna诱导性沉默复合物(risc)介导的裂解。cyp7a1 rna转录物可在细胞(例如受试者(诸如人类受试者)内的细胞)内。还提供了包含此类rnai剂的组合物和使用此类组合物(例如，用于治疗cyp7a1相关疾病)的方法。

2、本公开的一些方面提供了用于抑制细胞色素p450家族7亚家族a成员1 (cyp7a1)在细胞中表达的rnai剂，其中rnai剂包含形成双链体区域的有义链和反义链，其中反义链包含与表2中的cyp7a1靶序列的至少15个核苷(例如，至少15、16、17、18、19、20、21、22或23个核苷)的互补性区域，其中互补性区域包含含有与cyp7a1靶序列的不超过3个(例如，0、1、2或3个)错配的核碱基序列，并且其中有义链与反义链至少基本上互补。

3、本公开的一些方面提供了用于抑制细胞色素p450家族7亚家族a成员1 (cyp7a1)在细胞中表达的rnai剂，其中rnai剂包含形成双链体区域的有义链和反义链，其中反义链包含与seq id no: 1的核苷酸113-133、221-241、249-269、290-310、301-321、475-495、476-496、504-524、593-613、600-620、671-691、779-799、839-859、842-862、1003-1023、1009-1029、1037-1057、1082-1102、1189-1209、1207-1227、1215-1235、1225-1245、1226-1246、1235-1255、1289-1309、1296-1316、1384-1404、1415-1435、1431-1451或1559-1579的cyp7a1靶序列的至少15个核苷(例如，至少15、16、17、18、19、20、21、22或23个核苷)的互补性区域，其中互补性区域包含含有与cyp7a1靶序列的不超过3个(例如，0、1、2或3个)错配的核碱基序列，并且其中有义链与反义链至少基本上互补。

4、在一些实施方案中，互补性区域的长度为至少17个核苷(例如，至少17、18或19个核苷)。在一些实施方案中，互补性区域的长度为19-21个(例如，19、20或21个)核苷。

5、在一些实施方案中，反义链包含seq id no: 777-1190中任一者的至少15个连续核碱基(例如，至少15、16、17、18、19个核碱基)。在一些实施方案中，有义链包含seq id no:393-776中任一者的至少15个连续核碱基(例如，至少15、16、17、18、19个核碱基)。

6、在一些实施方案中，有义链的长度为21个核苷并且反义链的长度为23个核苷，任选地其中rnai剂在至少一个链上(例如，在有义链和/或反义链上)包含至少1个(例如，1、2或3个)核苷的3'悬突。

7、在一些实施方案中，反义链包含seq id no: 777-1190中任一者的核碱基2-21(5'→3'计数)，并且有义链包含seq id no: 393-776中任一者的核碱基序列。在一些实施方案中，反义链包含seq id no: 777-1190中任一者的核碱基序列，并且有义链包含seq idno: 393-776中任一者的核碱基序列。

8、在一些实施方案中，rnai剂包含选自以下的sirna的核碱基序列：sirna1-sirna384、sirna12'、sirna27'、sirna38'、sirna47'、sirna51'、sirna72'、sirna73'、sirna81'、sirna100'、sirna101'、sirna118'、sirna122'、sirna124'、sirna125'、sirna158'、sirna161'、sirna172'、sirna174'、sirna190'、sirna199'、sirna203'、sirna205'、sirna206'、sirna212'、sirna226'、sirna231'、sirna250'、sirna256'、sirna260'和sirna272'。

9、在一些实施方案中，反义链包含选自以下的核碱基序列(5'→3')的核碱基2-21(5'→3'计数)：

10、(i) uuugcucugaggaacucaagaag (seq id no: 1161)

11、(ii) uugucauugagaaacaugcgcag (seq id no: 1162)

12、(iii) uuaacuguggguaaagagcuaag (seq id no: 1165)

13、(iv) uauacuggcaggucauucaguag (seq id no: 1166)

14、(v) ugauuugugaugaaauggacaag (seq id no: 1169)

15、(vi) ucuaagugcauuaacugugggag (seq id no: 1173)

16、(vii) uuuaacuguggguaaagagcuag (seq id no: 1174)

17、(viii) ucaagaauaagccauagacaaag (seq id no: 1180)

18、(ix) uuuccgugagggaauucaaggag (seq id no: 1181)

19、(x) uguaugacaagggauuugugaag (seq id no: 1184)

20、(xi) uaaauacccagcuucaaacauag (seq id no: 1188)；和

21、(xii) uaugauacguuggagguuuucag (seq id no: 1190)。

22、在一些实施方案中，反义链包含选自以下的核碱基序列(5'→3')：

23、(i) uuugcucugaggaacucaagaag (seq id no: 1161)

24、(ii) uugucauugagaaacaugcgcag (seq id no: 1162)

25、(iii) uuaacuguggguaaagagcuaag (seq id no: 1165)

26、(iv) uauacuggcaggucauucaguag (seq id no: 1166)

27、(v) ugauuugugaugaaauggacaag (seq id no: 1169)

28、(vi) ucuaagugcauuaacugugggag (seq id no: 1173)

29、(vii) uuuaacuguggguaaagagcuag (seq id no: 1174)

30、(viii) ucaagaauaagccauagacaaag (seq id no: 1180)

31、(ix) uuuccgugagggaauucaaggag (seq id no: 1181)

32、(x) uguaugacaagggauuugugaag (seq id no: 1184)

33、(xi) uaaauacccagcuucaaacauag (seq id no: 1188)；和

34、(xii) uaugauacguuggagguuuucag (seq id no: 1190)。

35、在一些实施方案中，有义链包含选自以下的核碱基序列(5'→3')：

36、(i) ucuugaguuccucagagcaaa (seq id no: 419)；

37、(ii) gcgcauguuucucaaugacaa (seq id no: 517)；

38、(iii) uagcucuuuacccacaguuaa (seq id no: 597)；

39、(iv) acugaaugaccugccaguaua (seq id no: 566)；

40、(v) uguccauuucaucacaaauca (seq id no: 439)；

41、(vi) cccacaguuaaugcacuuaga (seq id no: 604)；

42、(vii) agcucuuuacccacaguuaaa (seq id no: 598)；

43、(viii) uugucuauggcuuauucuuga (seq id no: 404)；

44、(ix) ccuugaauucccucacggaaa (seq id no: 464)；

45、(x) ucacaaaucccuugucauaca (seq id no: 443)；

46、(xi) auguuugaagcuggguauuua (seq id no: 493)；和

47、(xii) gaaaaccuccaacguaucaua (seq id no: 473)。

48、在一些实施方案中，rnai剂包含一个或多个(例如，介于1-45之间的任何整数)经修饰的核苷。在一些实施方案中，反义链的每一个核苷为经修饰的核苷并且有义链的每一个核苷为经修饰的核苷。在一些实施方案中，一个或多个经修饰的核苷为2'修饰的核苷。在一些实施方案中，2'-修饰的核苷选自2'-氟(2'-f)、2'-o-甲基(2'-o-me)、2'-o-甲氧基乙基(2'-moe)、2'-o-氨基丙基(2'-o-ap)、2'-o-二甲基氨基乙基(2'-o-dmaoe)、2'-o-二甲基氨基丙基(2'-o-dmap)、2'-o-二甲基氨基乙氧基乙基(2'-o-dmaeoe)或2'-o-n-甲基乙酰胺基(2'-o-nma)修饰的核苷及其组合。在一些实施方案中，2'-修饰的核苷选自2'-o-甲基(2'-o-me)修饰的核苷、2'-氟(2'-f)修饰的核苷、2'-moe修饰的核苷和其任一组合。在一些实施方案中，反义链的每一个核苷选自2'-f修饰的核苷和2'-o-me修饰的核苷，并且有义链的每一个核苷为选自2'-f修饰的核苷和2'-o-me修饰的核苷的2'-修饰的核苷。

49、在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中有义链的位置9、10、11和12(5'→3'计数)处的核苷为在糖部分中具有相同2'化学性质的核苷，例如，2'-f修饰的核苷、2'-o-me修饰的核苷、2'-moe修饰的核苷或2'-脱氧核苷，并且位置8或13 (5'→3'计数)处的核苷为在糖部分中具有不同2'化学性质的核苷，包括例如未经修饰的核苷，即2'-羟基核苷。在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中有义链的位置9、10、11和12 (5'→3'计数)处的核苷为未经修饰的核苷，即，2'-羟基核苷，并且位置8和13 (5'→3'计数)处的核苷在糖部分中具有不同的2'化学性质，例如，2'-f修饰的核苷、2'-o-me修饰的核苷、2'-moe修饰的核苷或2'-脱氧核苷。

50、在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中有义链的位置9、10、11、12(5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，并且位置8和13 (5'→3'计数)处的核苷不为2'-f修饰的核苷，例如，为2'-o-me修饰的核苷、2'-moe修饰的核苷、2'-脱氧核苷或2'-羟基核苷。在一些实施方案中，有义链中不为2'-f修饰的核苷的一个或多个核苷(有义链的位置1、2、3、4、5、6、7、8和13、14、15、16、17、18、19、20、21 (5'→3'计数)处的核苷)为2'-o-me修饰的核苷。在一些实施方案中，有义链中不为2'-f修饰的核苷的所有核苷(有义链的位置1、2、3、4、5、6、7、8和13、14、15、16、17、18、19、20、21 (5'→3'计数)处的核苷)为2'-o-me修饰的核苷。

51、在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的位置2、3、5、6、7、8、10和14 (5'→3'计数)中一者或多者处的核苷为2'-f修饰的核苷。在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的位置2和14 (5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷。在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的位置2、3、7、10和14(5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷。在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的位置2、3、7、10和14 (5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，并且反义链的位置5、6和8 (5'→3'计数)中的一者或多者为2'-f修饰的核苷。在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的位置2、3、5、6、7、8、10和14 (5'→3'计数)中一者或多者处的核苷为2'-f修饰的核苷并且其他位置处的核苷不为2'-f修饰的核苷，例如，为2'-o-me修饰的核苷、2'-moe修饰的核苷、2'-脱氧核苷或2'-羟基核苷。在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的位置2、3、5、6、7、8、10和14 (5'→3'计数)中一者或多者处的核苷为2'-f修饰的核苷并且所有未经2'-f修饰的核苷均为2'-o-me修饰的核苷。

52、在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的一个或多个位置1、4、5、6、8、9、11、12、13、15、16、17、18、19、20、21、22和23处的核苷不为2'-f修饰的核苷，例如，为2'-o-me修饰的核苷、2'-moe修饰的核苷、2'-脱氧核苷或2'-羟基核苷。在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的一个或多个位置1、4、5、6、8、9、11、12、13、15、16、17、18、19、20、21、22和23处的核苷为2'-o-me修饰的核苷。

53、在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的位置1、4、9、11、12、13、15、16、17、18、19、20、21、22和23处的核苷不为2'-f修饰的核苷，例如，为2'-o-me修饰的核苷、2'-moe修饰的核苷、2'-脱氧核苷或2'-羟基核苷。在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中反义链的位置1、4、9、11、12、13、15、16、17、18、19、20、21、22和23处的核苷为2'-o-me修饰的核苷。

54、在一些实施方案中，rnai剂包含一个或多个(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个)经修饰的核苷间连键。在一些实施方案中，rnai剂在至少一个链(例如，有义链和/或反义链)中包含一个或多个(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个)硫代磷酸酯核苷间连键。

55、在一些实施方案中，rnai剂在有义链中包含两个硫代磷酸酯核苷间连键，任选地其中两个硫代磷酸酯核苷间连键为有义链中自5'→3’的前两个核苷间连键。在一些实施方案中，rnai剂在反义链中包含四个硫代磷酸酯核苷间连键，其中四个硫代磷酸酯核苷间连键为反义链中自5'→3’的前两个核苷间连键和最后两个核苷间连键。

56、在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中有义链的位置9、10、11、12(5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，其中反义链的位置2、3、5、7、8、10和14 (5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，其中反义链和有义链中不为2'-f修饰的核苷的所有核苷均为2'-o-me修饰的核苷，并且其中有义链的前两个核苷间连键(自5'→3')以及反义链的前两个和最后两个核苷间连键(自5'→3')为硫代磷酸酯核苷间连键。

57、在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中有义链的位置9、10、11、12(5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，其中反义链的位置2、3、5、6、7、10和14 (5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，其中反义链和有义链中不为2'-f修饰的核苷的所有核苷均为2'-o-me修饰的核苷，并且其中有义链的前两个核苷间连键(自5'→3')以及反义链的前两个和最后两个核苷间连键(自5'→3')为硫代磷酸酯核苷间连键。

58、在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中有义链的位置9、10、11、12(5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，其中反义链的位置2、3、5、6、7、8、10和14 (5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，其中反义链和有义链中不为2'-f修饰的核苷的所有核苷均为2'-o-me修饰的核苷，并且其中有义链的前两个核苷间连键(自5'→3')以及反义链的前两个和最后两个核苷间连键(自5'→3')为硫代磷酸酯核苷间连键。

59、在一些实施方案中，rnai剂包含有义链和反义链，其中有义链的位置9、10、11、12(5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，其中反义链的位置2、3、7、10和14 (5'→3'计数)处的核苷为2'-f修饰的核苷，其中反义链和有义链中不为2'-f修饰的核苷的所有核苷均为2'-o-me修饰的核苷，并且其中有义链的前两个核苷间连键(自5'→3')以及反义链的前两个和最后两个核苷间连键(自5'→3')为硫代磷酸酯核苷间连键。

60、在一些实施方案中，rnai剂包含反义链和有义链，各自包含如表5b、表7b或表9中所提供的结构。在一些实施方案中，rnai剂包含有包含如seq id no: 1605-2054中任一者中所示的结构的反义链。在一些实施方案中，rnai剂包含有包含如seq id no: 1191-1604中任一者中所示的结构的有义链。在一些实施方案中，rnai剂包含有包含如seq id no:1605-2054中任一者中所示的结构的反义链和包含如seq id no: 1191-1604中任一者中所示的结构的有义链。在一些实施方案中，cyp7a1 rnai剂选自表5b、表7b和表9中列出的sirna中的任一者。

61、在一些实施方案中，rnai剂包含：

62、反义链，其包含seq id no: 1173的核碱基序列和[mus][fcs][fu][ma][fa][mg][fu][fg][mc][fa][mu][mu][ma][fa][mc][mu][mg][mu][mg][mg][mgs][mas][mg] (seqid no: 2016)的结构(5'→3')，其中：

63、ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、2'-o-甲基胞苷、2'-o-甲基鸟苷和2'-o-甲基尿苷；

64、fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、2'-氟胞苷、2'-氟鸟苷和2'-氟尿苷；并且

65、s为硫代磷酸酯连键；和/或

66、有义链，其包含seq id no: 604的核碱基序列和[mcs][mcs][mc][ma][mc][ma][mg][mu][fu][fa][fa][fu][mg][mc][ma][mc][mu][mu][ma][mg][mas] (seq id no:1425)的结构(5'→3')，其中：

67、ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、2'-o-甲基胞苷、2'-o-甲基鸟苷和2'-o-甲基尿苷；

68、fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、2'-氟胞苷、2'-氟鸟苷和2'-氟尿苷；并且

69、s为硫代磷酸酯连键。

70、在一些实施方案中，rnai剂包含：

71、反义链，其包含seq id no: 1174的核碱基序列和[mus][fus][fu][ma][fa][mc][fu][fg][mu][fg][mg][mg][mu][fa][ma][ma][mg][ma][mg][mc][mus][mas][mg] (seqid no: 2020)的结构(5'→3')，其中：

72、ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、2'-o-甲基胞苷、2'-o-甲基鸟苷和2'-o-甲基尿苷；

73、fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、2'-氟胞苷、2'-氟鸟苷和2'-氟尿苷；并且

74、s为硫代磷酸酯连键；和/或

75、有义链，其包含seq id no: 598的核碱基序列和[mas][mgs][mc][mu][mc][mu][mu][mu][fa][fc][fc][fc][ma][mc][ma][mg][mu][mu][ma][ma][mas] (seq id no:1418)的结构(5'→3')，其中：

76、ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、2'-o-甲基胞苷、2'-o-甲基鸟苷和2'-o-甲基尿苷；

77、fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、2'-氟胞苷、2'-氟鸟苷和2'-氟尿苷；并且

78、s为硫代磷酸酯连键。

79、在一些实施方案中，rnai剂包含：

80、反义链，其包含seq id no: 1180的核碱基序列和[mus][fcs][fa][ma][fg][fa][fa][fu][ma][fa][mg][mc][mc][fa][mu][ma][mg][ma][mc][ma][mas][mas][mg] (seqid no: 2029)的结构(5'→3')，其中：

81、ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、2'-o-甲基胞苷、2'-o-甲基鸟苷和2'-o-甲基尿苷；

82、fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、2'-氟胞苷、2'-氟鸟苷和2'-氟尿苷；并且

83、s为硫代磷酸酯连键；和/或

84、有义链，其包含seq id no: 404的核碱基序列和[mus][mus][mg][mu][mc][mu][ma][mu][fg][fg][fc][fu][mu][ma][mu][mu][mc][mu][mu][mg][mas] (seq id no:1202)的结构(5'→3')，其中：

85、ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、2'-o-甲基胞苷、2'-o-甲基鸟苷和2'-o-甲基尿苷；

86、fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、2'-氟胞苷、2'-氟鸟苷和2'-氟尿苷；并且

87、s为硫代磷酸酯连键。

88、在一些实施方案中，rnai剂包含：

89、反义链，其包含seq id no: 1181的核碱基序列和[mus][fus][fu][mc][fc][fg][fu][mg][ma][fg][mg][mg][ma][fa][mu][mu][mc][ma][ma][mg][mgs][mas][mg] (seqid no: 2033)的结构(5'→3')，其中：

90、ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、2'-o-甲基胞苷、2'-o-甲基鸟苷和2'-o-甲基尿苷；

91、fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、2'-氟胞苷、2'-氟鸟苷和2'-氟尿苷；并且

92、s为硫代磷酸酯连键；和/或

93、有义链，其包含seq id no: 464的核碱基序列和[mcs][mcs][mu][mu][mg][ma][ma][mu][fu][fc][fc][fc][mu][mc][ma][mc][mg][mg][ma][ma][mas] (seq id no:1267)的结构(5'→3')，其中：

94、ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、2'-o-甲基胞苷、2'-o-甲基鸟苷和2'-o-甲基尿苷；

95、fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、2'-氟胞苷、2'-氟鸟苷和2'-氟尿苷；并且

96、s为硫代磷酸酯连键。

97、在一些实施方案中，rnai剂进一步包含靶向部分。在一些实施方案中，靶向部分缀合至rnai剂的有义链的3'端。在一些实施方案中，靶向部分包含n-乙酰基-半乳糖胺(galnac)。在一些实施方案中，靶向部分包含galnac三聚体。在一些实施方案中，靶向部分包含通过单价、二价、三价或四价分支接头连接的galnac的一个或多个实例。在一些实施方案中，靶向部分包含式(z6)的结构：

98、(z6)；

99、或其药学上可接受的盐，其中指示共价连接至所述有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的连接点。对于式(z6)，除直接连接至有义链的磷之外，标记为

y的磷的每一个实例结合至相邻单元的标记为

z的氧，并且除直接连接至氢的氧之外，标记为

z的氧的每一个实例结合至相邻单元的标记为

y的磷。在一些实施方案中，靶向部分包含下式的结构：

100、或其药学上可接受的盐，其中指示共价连接至所述有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的连接点。

101、应理解，在进一步包含缀合至有义链的3'末端核苷的靶向部分的rnai剂(例如，cyp7a1 rnai剂)中，3'-末端核苷通过硫代磷酸酯连键连接至靶向部分。因此，当将有义链的3'-末端核苷表示为[mas] (例如，本公开中表9和别处所提供的sirna的有义链)时，“s”对应于靶向部分的第一重复单元(即，直接共价连接至有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的重复单元)的硫代磷酸酯连键(例如，，其中x为-sh，即)，其中靶向部分包含下式的结构：(i)、(i-a)、(i-a-1)、(i-b)、(i-b-1)、(i-c)、(i-c-1)、(i-d)、(i-d-1)、(i-e)、(i-e-1)、(i-f)、(i-f-1)、(i-g)、(i-h)、(i-i)、(i-j)、(ii)、(ii-a)、(ii-b)、(ii-c)、(iii)、(iii-a)、(iv)、(iv-a)、(iv-b)、(iv-c)、(iv-d)、(iv-e)、(iv-f)或(z1)-(z16)。

102、在一些实施方案中，所得缀合物包含以下结构：

103、，

104、或其药学上可接受的盐。

105、本文进一步提供了rnai剂，其包含：

106、反义链，其包含seq id no: 1173的核碱基序列和[mus][fcs][fu][ma][fa][mg][fu][fg][mc][fa][mu][mu][ma][fa][mc][mu][mg][mu][mg][mg][mgs][mas][mg] (seqid no: 2016)的结构(5'→3')；和

107、有义链，其包含seq id no: 604的核碱基序列和[mcs][mcs][mc][ma][mc][ma][mg][mu][fu][fa][fa][fu][mg][mc][ma][mc][mu][mu][ma][mg][mas] (seq id no:1425)的结构(5'→3')；

108、其中ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、胞苷、鸟苷和尿苷；fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、胞苷、鸟苷和尿苷；并且s为硫代磷酸酯连键；

109、并且其中所述有义链的3'末端核苷共价连接至式(z6)的结构

110、(z6)，

111、或其药学上可接受的盐，其中指示共价连接至所述有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的连接点。应理解，有义链的3'-末端[mas]的“s”对应于靶向部分的第一重复单元(即，直接共价连接至有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的重复单元)的硫代磷酸酯连键(例如，，其中x为-sh，即)，其中靶向部分包含式(z6)的结构。

112、本文进一步提供了rnai剂，其包含：

113、反义链，其包含seq id no: 1174的核碱基序列和[mus][fus][fu][ma][fa][mc][fu][fg][mu][fg][mg][mg][mu][fa][ma][ma][mg][ma][mg][mc][mus][mas][mg] (seqid no: 2020)的结构(5'→3')；和

114、有义链，其包含seq id no: 598的核碱基序列和[mas][mgs][mc][mu][mc][mu][mu][mu][fa][fc][fc][fc][ma][mc][ma][mg][mu][mu][ma][ma][mas] (seq id no:1418)的结构(5'→3')；

115、其中ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、胞苷、鸟苷和尿苷；fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、胞苷、鸟苷和尿苷；并且s为硫代磷酸酯连键；

116、并且其中所述有义链的3'末端核苷共价连接至式(z6)的结构

117、(z6)，

118、或其药学上可接受的盐，其中指示共价连接至所述有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的连接点。应理解，有义链的3'-末端[mas]的“s”对应于靶向部分的第一重复单元(即，直接共价连接至有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的重复单元)的硫代磷酸酯连键(例如，，其中x为-sh，即)，其中靶向部分包含式(z6)的结构。

119、本文进一步提供了rnai剂，其包含：

120、反义链，其包含seq id no: 1180的核碱基序列和[mus][fcs][fa][ma][fg][fa][fa][fu][ma][fa][mg][mc][mc][fa][mu][ma][mg][ma][mc][ma][mas][mas][mg] (seqid no: 2029)的结构(5'→3')；和

121、有义链，其包含seq id no: 404的核碱基序列和[mus][mus][mg][mu][mc][mu][ma][mu][fg][fg][fc][fu][mu][ma][mu][mu][mc][mu][mu][mg][mas] (seq id no:1202)的结构(5'→3')；

122、其中ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、胞苷、鸟苷和尿苷；fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、胞苷、鸟苷和尿苷；并且s为硫代磷酸酯连键；

123、并且其中所述有义链的3'末端核苷共价连接至式(z6)的结构

124、(z6)，

125、或其药学上可接受的盐，其中指示共价连接至所述有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的连接点。应理解，有义链的3'-末端[mas]的“s”对应于靶向部分的第一重复单元(即，直接共价连接至有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的重复单元)的硫代磷酸酯连键(例如，，其中x为-sh，即)，其中靶向部分包含式(z6)的结构。

126、本文进一步提供了rnai剂，其包含：

127、反义链，其包含seq id no: 1181的核碱基序列和[mus][fus][fu][mc][fc][fg][fu][mg][ma][fg][mg][mg][ma][fa][mu][mu][mc][ma][ma][mg][mgs][mas][mg] (seqid no: 2033)的结构(5'→3')；和

128、有义链，其包含seq id no: 464的核碱基序列和[mcs][mcs][mu][mu][mg][ma][ma][mu][fu][fc][fc][fc][mu][mc][ma][mc][mg][mg][ma][ma][mas] (seq id no:1267)的结构(5'→3')；

129、其中ma、mc、mg和mu分别为2'-o-甲基腺苷、胞苷、鸟苷和尿苷；fa、fc、fg和fu分别为2'-氟腺苷、胞苷、鸟苷和尿苷；并且s为硫代磷酸酯连键；

130、并且其中所述有义链的3'末端核苷共价连接至式(z6)的结构

131、(z6)，

132、或其药学上可接受的盐，其中指示共价连接至所述有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的连接点。应理解，有义链的3'-末端[mas]的“s”对应于靶向部分的第一重复单元(即，直接共价连接至有义链的3'末端核苷的糖部分的3'-o的重复单元)的硫代磷酸酯连键(例如，，其中x为-sh，即)，其中靶向部分包含式(z6)的结构。

133、本公开的其他方面提供了用于抑制编码cyp7a1的基因的表达的药物组合物，其包含本文所述的rnai剂。

134、本公开的其他方面提供了抑制细胞中cyp7a1基因的表达的方法，该方法包括使细胞与本文所提供的rnai剂或药物组合物接触，从而抑制细胞中cyp7a1基因的表达。在一些实施方案中，细胞在受试者内，任选地其中受试者为人类。在一些实施方案中，受试者患有cyp7a1疾病或cyp7a1相关疾病。

135、本公开的其他方面提供了治疗患有cyp7a1疾病或cyp7a1相关疾病的受试者的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的本文所提供的rnai剂或药物组合物，从而治疗患有cyp7a1疾病或cyp7a1相关疾病的受试者。

136、本公开的其他方面提供了治疗患有cyp7a1疾病或cyp7a1相关疾病的受试者的至少一种症状的方法，其包括向受试者施用有效量的本文所提供的rnai剂或药物组合物，从而治疗患有cyp7a1疾病或cyp7a1相关疾病的受试者的至少一种症状，任选地其中cyp7a1疾病或cyp7a1相关疾病为肝脏疾病。在一些实施方案中，cyp7a1疾病或cyp7a1相关疾病为胆汁淤积性肝脏疾病，诸如原发性硬化性胆管炎(psc)。在一些实施方案中，受试者为人类。在一些实施方案中，该方法进一步包括施用用于治疗cyp7a1疾病或cyp7a1相关疾病的剂。