Venetoclax或其药学上可接受的盐在制备治疗肝癌的药物中的应用

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种bcl-2选择性抑制剂venetoclax（abt-199）在制备治疗肝癌的药物中的新用途。

背景技术：

1、肝癌是全球范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一。据世界卫生组织国际癌症研究机构（iarc）统计，2020年全球肝癌新发病例约90.6万例，死亡病例约83.0万例，发病率与死亡率分别居全部恶性肿瘤的第6位和第3位。其中肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma, hcc）占原发性肝癌的75%-85%，是最主要的病理类型。

2、目前肝癌的治疗手段主要包括外科手术切除、肝移植、局部消融治疗、经动脉化疗栓塞（tace）、系统治疗等。对于早期肝癌患者，外科手术切除和肝移植可获得较好的疗效；但多数患者确诊时已处于中晚期，丧失手术机会，主要依赖系统治疗。索拉非尼（sorafenib）和仑伐替尼（lenvatinib）是一线靶向药物，但客观缓解率和总生存获益均十分有限。瑞戈非尼（regorafenib）、卡博替尼（cabozantinib）、雷莫芦单抗（ramucirumab）等二线药物的疗效同样有限。因此，临床上亟需开发新的治疗策略，以改善肝癌患者的预后。

3、foxk1（forkhead box protein k1）是forkhead转录因子家族的成员，定位于人类染色体7p22.1，编码一个含733个氨基酸残基的蛋白质。foxk1参与调控细胞增殖、分化、代谢、自噬、衰老和免疫应答等多种生物学过程。近年研究发现，foxk1在多种恶性肿瘤中异常高表达，包括肝癌、胃癌、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌和胶质瘤等，并与肿瘤的发生发展、侵袭转移和不良预后密切相关。

4、在肝癌中，多项研究证实foxk1表达水平显著上调，且与肿瘤分期、组织学分化和患者总生存期密切相关。机制研究表明，foxk1通过调控下游靶基因参与肝癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和代谢重编程等过程，被认为是肝癌的潜在治疗靶点。然而，目前临床上尚无靶向foxk1的获批药物，亟需开发针对foxk1的小分子抑制剂。

5、venetoclax（abt-199）是一种口服可生物利用的选择性bcl-2（ b-celllymphoma-2）小分子抑制剂，由艾伯维（abbvie）和罗氏（roche）联合开发。bcl-2是一种抗凋亡蛋白，在多种肿瘤中过表达，通过抑制细胞凋亡促进肿瘤细胞存活。venetoclax通过与bcl-2结合，释放被bcl-2隔离的促凋亡蛋白，进而激活bax/bak介导的线粒体凋亡通路，从而发挥抗肿瘤作用。

6、venetoclax已于2016年获美国食品药品监督管理局（fda）批准用于治疗慢性淋巴细胞白血病（cll），其后获批扩展至小淋巴细胞淋巴瘤（sll）和急性髓系白血病（aml）等血液系统恶性肿瘤的治疗。在血液肿瘤领域，venetoclax展现出显著的疗效和可控的安全性，已成为多个适应症的一线推荐药物。

7、近年来，研究者开始探索venetoclax在实体瘤中的应用，但进展较为有限，主要原因是实体瘤的bcl-2依赖性相对较低，且venetoclax对实体瘤的疗效和作用机制尚不明确。截至目前，尚未有venetoclax靶向foxk1治疗肝癌的报道。

8、本发明首次发现venetoclax能够通过直接结合转录因子foxk1并下调其下游靶基因cbll1的表达，显著抑制肝癌细胞的增殖和体内肿瘤生长，为肝癌治疗提供了新的药物用途和作用机制。

技术实现思路

1、针对现有技术中缺乏靶向foxk1治疗肝癌的有效药物这一技术问题，本发明提供了venetoclax在制备治疗肝癌的药物中的新用途。本发明首次公开了venetoclax通过靶向foxk1发挥抗肝癌作用的新机制，为肝癌的药物治疗提供了新策略。

2、为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：

3、本发明中，所述venetoclax的化学名为4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-n-({3-硝基-4-[(四氢-2h-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺（cas登记号：1257044-40-8），其为已知的bcl-2选择性小分子抑制剂，研发代号为abt-199。术语"药学上可接受的盐"是指venetoclax与药学上可接受的无机酸或有机酸形成的盐，所述无机酸包括但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸，所述有机酸包括但不限于乙酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、甲磺酸、苯磺酸和对甲苯磺酸；所述盐可在体内释放出母体化合物venetoclax，具有与venetoclax相当的抗肝癌活性。本领域技术人员可以依据常规方法制备所述盐。

4、venetoclax或其药学上可接受的盐在制备治疗肝癌的药物中的应用（对应权利要求1-9）。具体而言，本发明提供一种bcl-2抑制剂venetoclax用于制备治疗肝癌的药物组合物的用途。所述肝癌包括肝细胞癌（hcc），优选为foxk1高表达的肝癌。该方案基于venetoclax直接结合foxk1、抑制foxk1下游信号通路、并在体外和体内实验中显著抑制肝癌生长的实验数据。

5、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

6、1. 药物安全性成熟：venetoclax是已上市的获批药物（适应症为cll/sll、aml等），其药代动力学、安全性和剂量范围已在大量临床数据中得到验证，临床开发风险显著低于全新化合物。

7、2. 新靶点机制：本发明首次发现venetoclax通过直接结合转录因子foxk1发挥抗肝癌作用，而非通过其原有的bcl-2靶点，为肝癌治疗开辟了全新的作用机制和适应症。

8、3. 精准治疗潜力：本发明特别适用于foxk1高表达的肝癌患者，可通过检测foxk1表达水平筛选治疗优势人群，实现精准治疗。

9、4. 多重证据链：本发明通过虚拟筛选、分子对接、cetsa、体外药效（细胞增殖、克隆形成、凋亡）、体内药效（裸鼠移植瘤）和机制研究（chip-seq、rna-seq、靶基因验证）多层次证据链，充分证明了venetoclax的抗肝癌作用和机制。

1. venetoclax或其药学上可接受的盐在制备治疗肝癌的药物中的应用，其中所述venetoclax的化学名为4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-n-({3-硝基-4-[(四氢-2h-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肝癌为肝细胞癌。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物用于治疗foxk1高表达的肝癌。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，venetoclax与foxk1蛋白直接结合。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，venetoclax与foxk1蛋白的结合涉及选自gln-312、tyr-342、tyr-341、tyr-310、ala-311、asn-356、trp-349和arg-397中的一种或多种氨基酸残基，且所述结合包含疏水相互作用和/或氢键。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，venetoclax抑制foxk1高表达的肝癌细胞的增殖、抑制其克隆形成、并促进其凋亡。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，venetoclax增强foxk1蛋白的热稳定性，细胞热位移实验中δtm≥5℃。

8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，venetoclax下调foxk1下游靶基因cbll1的mrna水平。

9.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为口服制剂或注射剂。