VISTA作为靶点在视网膜新生血管疾病中的应用

本发明属于生物医药，具体涉及vista作为靶点在制备治疗视网膜新生血管疾病的药物中的应用。

背景技术：

1、视网膜新生血管（retinal neovascularization, rnv）是众多视网膜疾病的共同病理特征，其形成是破坏视网膜结构与功能进而致盲的重要原因。正常生理情况下，视网膜血管网络结构稳定，维护血-视网膜屏障完整。然而，高血糖、缺氧、炎症、自身免疫疾病等情况下，正常视网膜微血管结构被破坏、发生出芽增殖，形成病理性的视网膜新生血管。目前临床上治疗视网膜新生血管主要应用玻璃体腔注射抗vegf药物。但患者对抗vegf药物疗效有个体差异，部分患者存在抗vegf疗法耐药，并且存在长期反复注射可导致黄斑萎缩等副作用。因此，需要进一步探索视网膜新生血管形成机制，针对局部病理微环境的促炎、促新生血管细胞类型，开发靶点明确的抗新生血管疗法。

2、vista（v-domain immunoglobulin suppressor of t cell activation，t细胞活化v结构域免疫球蛋白抑制因子），由vsir基因编码，是维持t细胞和髓系细胞稳态的b7家族成员，在髓系细胞、淋巴细胞、肿瘤细胞、内皮细胞等多种类型细胞及上均有表达，在生理状态下发挥免疫调控作用，而当机体在缺氧、炎症或其他病理刺激下，vista在各类细胞和组织中的表达水平与功能发生不同方向和程度的变化。相关研究表明，在多种人类肿瘤类型中，vista的表达随着疾病进展而增加，表现更差的预后结果；而在自身免疫性疾病中，使用激动性抗体可有效缓解组织炎症，因此，靶向调控vista在不同病理条件下展现出复杂的多重作用。目前，靶向vista调控策略正受到越来越多的关注，部分药物已经进入临床试验。但在病理性新生血管领域，尤其是治疗视网膜新生血管性疾病领域，尚无研究报道靶向调控vista对视网膜新生血管的作用先例。

技术实现思路

1、本发明旨在解决现有视网膜新生血管性疾病治疗靶点单一，且存在疗效不足或耐药等问题，提供靶向抑制vista的表达和/或功能的试剂在制备治疗视网膜新生血管性疾病的药物中的新用途。本发明首次证实vista参与视网膜新生血管性疾病的病理进程，通过阻断vista介导的信号通路，可抑制视网膜星形胶质细胞的异常激活，改善视网膜炎症微环境，进而减少病理性新生血管面积及视网膜无灌注区面积，实现抗炎与抗新生血管的协同治疗效果，为该类疾病的药物开发提供新的靶点和理论基础。

2、为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

3、本发明第一方面提供了靶向抑制vista的表达和/或功能的试剂在制备治疗视网膜新生血管性疾病的药物中的应用。

4、优选地，所述试剂选自vista的功能阻断型抗体、小分子抑制剂、核酸抑制剂、蛋白降解剂或基因编辑系统中的一种或多种。

5、优选地，所述核酸抑制剂选自反义寡核苷酸、sirna或shrna中的一种或多种。

6、优选地，所述试剂为vista的功能阻断型抗体，所述vista的功能阻断型抗体优选为vista-nab（品牌：bioxcell，货号：be0310）。

7、优选地，所述试剂用于制备改善与所述视网膜新生血管性疾病相关的下述生理指标的药物：视网膜新生血管面积、视网膜无灌注区面积、视网膜星形胶质细胞激活程度、炎症因子表达水平及促新生血管因子表达水平。

8、优选地，所述视网膜星形胶质细胞激活程度通过gfap阳性细胞的形态变化和/或数量增加来表征。

9、优选地，所述炎症因子包括肿瘤坏死因子α（tnf-α）和补体c1q亚基a（c1qa），所述促新生血管因子包括碱性成纤维细胞生长因子（fgf2）。

10、优选地，所述药物的剂型为眼用制剂。

11、优选地，所述眼用制剂选自眼用注射剂、滴眼剂、眼用植入剂或眼贴膜中的一种或多种。

12、优选地，所述眼用制剂的剂型为溶液剂、凝胶剂、乳剂或混悬剂中的一种或多种。

13、优选地，所述药物的给药途径为眼局部给药。

14、优选地，所述眼局部给药选自滴眼给药、眼内注射给药或植入给药中的至少一种。

15、优选地，所述眼内注射给药为玻璃体内注射给药。

16、本发明第二方面提供了一种用于治疗视网膜新生血管性疾病的药物组合物，包含有效量的靶向抑制vista的表达和/或功能的试剂以及药学上可接受的载体或辅料。

17、优选地，所述药学上可接受的辅料选自溶剂、增溶剂、表面活性剂、抑菌剂、抗氧化剂、螯合剂中的一种或多种。

18、如无特别说明，本发明上下文中所述“靶向vista”均指能够特异性作用于vista的药剂，包括但不限于vista表达抑制剂或功能抑制剂。所述抑制剂可选自vista的功能阻断型抗体、小分子抑制剂、核酸抑制剂（如反义寡核苷酸、sirna、shrna）、蛋白降解剂或基因编辑系统等，可通过市售途径获得或按本领域已知方法自行制备。为便于本领域技术人员理解和实施，本发明具体实施方式中以市售vista的功能阻断型抗体（品牌：bioxcell，货号：be0310，以下简称vista-nab）为例进行验证，但vista-nab仅作为示例，并不用于限定本发明的保护范围。

19、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

20、（1）本发明首次证实vista是调控视网膜病理性新生血管生成及炎症微环境的关键分子，为视网膜新生血管性疾病提供了全新的药物作用靶点。与现有技术主要依赖抗vegf单一通路不同，靶向抑制vista通过调控星形胶质细胞激活及视网膜炎症微环境发挥治疗作用，为克服现有疗法的局限性提供了新的干预策略。

21、（2）本发明明确了靶向vista发挥治疗作用的具体机制：vista抑制剂通过阻断vista介导的信号通路，抑制视网膜星形胶质细胞的异常激活，下调促炎症因子tnf-α、c1qa及促新生血管因子fgf2的表达水平，改善视网膜炎症微环境，减少病理性新生血管面积及视网膜无灌注区面积，进而改善视网膜组织结构。

22、（3）本发明通过功能阻断型抗体（vista-nab）在动物模型中验证了靶向vista的治疗有效性，证实了该策略在制备治疗视网膜新生血管性疾病药物中的可行性，为开发新型靶向药物奠定了理论基础。

1.靶向抑制vista的表达和/或功能的试剂在制备治疗视网膜新生血管性疾病的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂选自vista的功能阻断型抗体、小分子抑制剂、核酸抑制剂、蛋白降解剂或基因编辑系统中的一种或多种。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述核酸抑制剂选自反义寡核苷酸、sirna或shrna中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂用于制备改善与所述视网膜新生血管性疾病相关的下述生理指标的药物：视网膜新生血管面积、视网膜无灌注区面积、视网膜星形胶质细胞激活程度、炎症因子表达水平及促新生血管因子表达水平。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述视网膜星形胶质细胞激活程度通过gfap阳性细胞的形态变化和/或数量增加来表征。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述炎症因子包括tnf-α和c1qa，所述促新生血管因子包括fgf2。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为眼用制剂。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述眼用制剂选自眼用注射剂、滴眼剂、眼用植入剂或眼贴膜中的一种或多种。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述眼用制剂的剂型为溶液剂、凝胶剂、乳剂或混悬剂中的一种或多种。

10.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的给药途径为眼局部给药，所述眼局部给药选自滴眼给药、眼内注射给药或植入给药中的至少一种。