通用抗hpv组合物及其制备方法与流程

本发明属于抗hpv制剂与应用领域，涉及通用抗hpv组合物及其制备方法。

背景技术：

1、人乳头瘤病毒（human papillomavirus，hpv）是一类具有多种基因型的dna病毒，不同hpv型别具有不同的组织嗜性及临床表现。部分低危皮肤型hpv可感染皮肤上皮并形成疣状外化病变，例如跖疣通常与hpv1、2、4、27、57等型别相关；而发生于生殖器部位的尖锐湿疣则通常与低危黏膜型hpv，尤其是hpv6和hpv11等型别相关。此外，持续性高危型hpv感染还可涉及宫颈等黏膜部位，并与宫颈上皮异常病变相关。因此，hpv感染并非局限于单一人体部位或单一临床表现，而是可根据病毒型别及感染组织的不同表现为皮肤疣体、外生殖器疣以及生殖道黏膜相关病变等不同形式。

2、现有hpv局部干预产品通常针对特定感染部位或特定使用人群进行剂型设计。例如，针对女性生殖道黏膜的局部制剂通常采用阴道泡腾片、栓剂或阴道用凝胶等形式，以适应阴道或宫颈相关部位的局部给药需求；而对于男性外生殖器或皮肤表面的外化病变，则更常采用乳膏、软膏或其他外用制剂。不同剂型在涂布方式、局部停留、黏膜适应性以及使用便利性等方面存在差异，使得针对女性生殖道黏膜设计的制剂难以直接适用于男性外生殖器或其他皮肤表面，而针对皮肤外用设计的制剂又未必适合生殖道黏膜局部使用。

3、另一方面，不同hpv型别对应的感染部位和外化表现存在差异，使得现有局部抗hpv制剂往往按照单一病变部位或单一使用场景进行开发。尤其对于皮肤型hpv所形成的跖疣等外化病变、低危黏膜型hpv所形成的外生殖器病变以及高危型hpv持续感染相关的生殖道黏膜病变，不同局部环境对制剂的涂布、附着、滞留、刺激性及活性成分释放均具有不同要求。因此，能够在不同局部组织环境中保持稳定并实现有效接触的通用型局部制剂具有实际需求。

4、此外，姜黄素、表没食子儿茶素没食子酸酯（egcg）、白藜芦醇和丹参酮iia具有不同的理化性质，其中部分活性成分水溶性较低，而egcg具有较强的水相亲和性。将上述多种活性成分直接混合并制备成局部凝胶时，可能面临活性成分溶解性差异、分散稳定性不足以及凝胶体系均一性下降等制剂学问题。若仅采用常规混合方式进行制备，难以同时兼顾多种活性成分的稳定分散和最终凝胶的涂布、附着性能。

5、因此，现有技术仍需要一种能够针对hpv不同型别所对应的不同局部病变表现，在皮肤、外生殖器以及生殖道黏膜等不同局部使用场景下均具有适用性的通用型局部制剂；同时，该制剂还需要解决多种具有不同理化性质的抗hpv活性成分在凝胶体系中的稳定分散及成胶问题，使所得制剂能够兼顾活性成分的组合效应、制剂均一性、局部涂布性、附着保持性以及局部组织相容性。

技术实现思路

1、本发明旨在提供一种通用抗hpv局部用凝胶组合物及其制备方法，以解决现有抗hpv局部制剂通常针对单一感染部位或单一局部使用场景进行设计，难以兼顾皮肤型hpv相关疣状皮损、低危黏膜型hpv相关局部感染或病变以及高危黏膜型hpv相关上皮异常等不同局部应用需求的问题。

2、同时，针对姜黄素或姜黄素类活性组分、表没食子儿茶素没食子酸酯、白藜芦醇和丹参酮iia理化性质存在差异，多种活性组分直接混合后容易出现溶解、分散及制剂均一性方面的问题，本发明进一步提供与所述四元活性组合相适配的凝胶载体及制备方法，以提高多种活性组分在局部凝胶体系中的分散适配性。

3、为实现上述目的，本发明提供一种通用抗hpv局部用凝胶组合物，包括四元活性组合物、凝胶基质、助溶及稳定体系、保湿体系以及水。

4、所述四元活性组合物包括姜黄素或姜黄素类活性组分、表没食子儿茶素没食子酸酯、白藜芦醇和丹参酮iia。以表没食子儿茶素没食子酸酯的摩尔量为1计，姜黄素或姜黄素类活性组分、表没食子儿茶素没食子酸酯、白藜芦醇和丹参酮iia的摩尔比为4∶1∶12.5∶（1～2）。

5、本发明所述摩尔比按照各活性组分的实际有效含量进行折算；对于纯度不足的原料，根据原料中对应活性成分的实际含量折算实际投料量，辅料不计入所述四元活性组合物的摩尔比。

6、在优选实施方式中，所述四元活性组合物的摩尔比为4∶1∶12.5∶1或4∶1∶12.5∶2。

7、本发明通过四元组合筛选发现，上述两种比例均能够产生协同的细胞增殖抑制作用。其中，4∶1∶12.5∶1组合的组合指数约为0.84，4∶1∶12.5∶2组合的组合指数约为0.34；其中4∶1∶12.5∶2组合处理后的细胞存活率为36.10%，增殖抑制率为63.90%，表明特定四元摩尔组成并非各活性成分的简单叠加，而具有进一步的组合效应。

8、所述凝胶基质用于形成适于局部施用的凝胶载体。优选地，所述凝胶基质包括卡波姆、黄原胶或纤维素衍生物中的一种或多种。

9、所述助溶及稳定体系用于改善四元活性组分在制剂体系中的分散适配性，优选包括羟丙基环糊精、丙二醇、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和peg/ppg-17/6共聚物中的一种或多种。

10、所述组合物还可以包括保湿体系，所述保湿体系包括甘油、丁二醇中的一种或多种。

11、进一步地，所述组合物还可以包括植物来源辅助组分，所述植物来源辅助组分包括积雪草提取物、苦参根提取物、蛇床子提取物、蒲公英提取物和栎根提取物中的一种或多种。

12、需要说明的是，所述四元活性组合物与植物来源辅助组分分别进行计量；植物提取物的添加量不折算为对应单体活性成分的添加量。尤其是苦参碱与苦参根提取物分别作为不同组分进行计量和添加。

13、本发明所述组合物以局部凝胶作为主要制剂形态，能够形成适于不同局部组织环境使用的凝胶载体。根据局部使用部位的不同，可用于皮肤型hpv相关皮肤局部病变、低危黏膜型hpv相关局部感染或病变以及高危黏膜型hpv相关上皮异常的局部制剂制备。

14、其中，针对皮肤型hpv相关应用，所述组合物可用于疣状皮损等皮肤局部病变；针对低危黏膜型hpv相关应用，可用于外生殖器、阴道、宫颈及肛周等局部部位；针对高危黏膜型hpv相关应用，可用于持续hpv感染相关异常增殖以及宫颈上皮内瘤变等局部制剂的制备。

15、本发明还提供上述通用抗hpv局部用凝胶组合物的制备方法。

16、首先，将四元活性组合物与助溶及稳定体系进行预处理，形成活性组分分散体系；将所述活性组分分散体系与包含凝胶基质、保湿体系和水的水相体系混合，并加入任选的植物来源辅助组分；随后调节混合体系的ph并进行脱泡处理，获得所述通用抗hpv局部用凝胶组合物。

17、在优选实施方式中，水相体系通过将部分纯化水与凝胶基质混合并充分水化形成；活性组分分散体系通过将助溶及稳定体系加热搅拌后加入四元活性组合物并进行超声分散形成；植物来源辅助组分经分散并过滤后加入混合体系。

18、优选地，助溶及稳定体系与四元活性组合物进行预处理时的温度为55～65℃，超声处理3～5min；所得活性组分分散体系冷却至25～45℃后与水相体系混合；所得混合体系的ph调节至5.2～5.8，并在−0.05～−0.08mpa条件下脱泡3～5min。

19、与现有技术相比，本发明至少具有以下有益效果：

20、1.本发明采用姜黄素或姜黄素类活性组分、表没食子儿茶素没食子酸酯、白藜芦醇和丹参酮iia构成四元活性组合，并通过组合筛选确定4∶1∶12.5∶（1～2）的特定摩尔关系。实验结果表明，4∶1∶12.5∶1和4∶1∶12.5∶2均表现出协同增殖抑制作用，其中4∶1∶12.5∶2组合的组合指数约为0.34，具有较强的协同作用。

21、2.本发明将上述四元活性组合与局部凝胶体系结合，通过助溶及稳定体系对不同理化性质的活性组分进行预处理，再与凝胶基质进行组合，有利于形成均一的局部凝胶制剂，从而改善多组分活性物直接混合可能产生的分散适配问题。

22、3.本发明以局部凝胶作为主要制剂形态，使四元活性组合能够通过局部制剂与目标皮肤或黏膜组织直接接触，并能够根据不同局部应用环境进行制剂化设计。

23、4.本发明并非仅针对单一hpv型别或单一解剖部位，而是构建覆盖皮肤型hpv相关疣状皮损、低危黏膜型hpv相关局部感染或病变以及高危黏膜型hpv相关上皮异常的局部应用体系，从而扩大了同一局部凝胶技术平台的适用场景。