用于治疗溃疡性结肠炎的组合物及其制备方法

本发明涉及生物医药，具体涉及用于治疗溃疡性结肠炎的组合物及其制备方法。

背景技术：

1、溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，uc）是一种器质性病变疾病，其临床表现为慢性腹泻和便血，约30%的患者伴有原发性硬化胆管炎等非肠道疾病。其常规治疗手段为口服美沙拉嗪或使用美沙拉嗪栓剂，中至重度患者需口服糖皮质激素或使用维得利珠单抗缓解病症。但长期使用糖皮质激素会导致骨质疏松、糖尿病等并发症，维得利珠单抗等生物制剂会增加患者患肿瘤和血栓的风险，这些副作用严重限制了药物的长期使用。

2、此外，尽管对于溃疡性结肠炎的治疗不断进步，但其药物应答率最高仅为30-60%。确诊5年后，约20%的uc患者住院，约7%的患者接受结肠切除手术；患病20年后，患者患结肠癌的风险高达4.5%，较普通人群高约1.7倍，且平均寿命较未患病人群缩短约5年。

3、因此，亟需一种用于治疗溃疡性结肠炎的药物以解决上述问题。

技术实现思路

1、为此，本发明提供用于治疗溃疡性结肠炎的组合物及其制备方法，以解决现有技术中由于药物作用缺乏物理修复屏障、靶点单一和依赖激素及生物制剂类药物而导致的应答率低、副作用大的问题。

2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、根据本发明的第一方面，提供了用于治疗溃疡性结肠炎的组合物，该组合物包括以下质量份组分：温敏凝胶60-80份、石耳提取物1-10份、植物发酵物10-15份、丁酸盐及其衍生物1-5份、微囊化丁酸梭菌1-10份和植物提取物1-10份；除温敏凝胶外的各组分制备后分散于磷酸盐缓冲液，且质量组分以溶质干重计；除温敏凝胶外各组分质量之和与磷酸盐缓冲液的质量体积比为(0.5-1)g：1ml。

4、进一步地，所述温敏凝胶为壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏凝胶，所述植物发酵物为茭白、荇菜和莼菜的丁酸梭菌发酵产物，所述微囊化丁酸梭菌为经微囊化包封处理的丁酸梭菌，所述植物提取物为黄连、党参、三七和白及的提取物，所述丁酸盐及其衍生物为丁酸钠。

5、进一步地，所述植物发酵物中茭白、荇菜和莼菜的丁酸梭菌发酵产物的质量比为2:1:1；所述植物提取物中黄连、党参、三七和白及的提取物的质量比为3:3:1:3。

6、根据本发明的第二方面，提供了用于治疗溃疡性结肠炎的组合物的制备方法，用于制备上述的组合物，具体包括以下步骤：

7、s1、植物发酵物的制备：

8、将茭白、荇菜和莼菜洗净、干燥并破碎成80-100目的粉末后，分别与丁酸梭菌悬液以质量体积比1g：5ml混合，37℃下厌氧孵育24-48h，过滤后121℃高压灭菌10min，冻干后分别得茭白、荇菜和莼菜的发酵物；

9、s2、温敏凝胶液的制备：

10、冰浴条件下，将β-甘油磷酸钠溶液缓慢滴加至壳聚糖溶液中，调ph7.0-7.2，搅拌30-60min，得温敏凝胶液；

11、s3、微囊化丁酸梭菌的制备：

12、将β-环糊精溶于磷酸盐缓冲液中，100℃、200-400rpm下搅拌10-30min，加入结冷胶和海藻酸钠后再搅拌10min，得微囊壁材液；121℃高压灭菌10min并冷却后与丁酸梭菌悬液混合，50-100rpm搅拌30min混合均匀，冻干得微囊化丁酸梭菌；

13、s4、组合物的制备：

14、将丁酸钠、石耳提取物、植物提取物、植物发酵物、微囊化丁酸梭菌均匀混合后以磷酸盐缓冲液分散，各组分混合物与磷酸盐缓冲液的质量体积比为(0.5-1)g：1ml，得活性物质悬液；

15、将温敏凝胶液和活性物质悬液混合，室温下30-50rpm搅拌10min，得组合物。

16、进一步地，步骤s1中所述丁酸梭菌悬液的制备包括以下步骤：

17、将丁酸梭菌以体积分数5%的接种量接入rcm培养基，200rpm、37℃厌氧孵育24-36h，孵育结束后4℃低温离心，沉淀以生理盐水洗涤后以磷酸盐缓冲液分散至活菌数为1×107-1×108cfu/ml，得丁酸梭菌悬液。

18、进一步地，步骤s2中所述的β-甘油磷酸钠溶液的浓度为0.56g/ml，壳聚糖溶液为浓度0.03g/ml的壳聚糖-稀盐酸溶液，β-甘油磷酸钠溶液和壳聚糖溶液的体积比为1:3，壳聚糖溶液中壳聚糖的脱乙酰度≥80%。

19、进一步地，步骤s3中所述的丁酸梭菌悬液的活菌数为1×107-1×108cfu/ml，微囊壁材液中β-环糊精、结冷胶和海藻酸钠在磷酸盐缓冲液中的浓度分别为50mg/ml、30mg/ml和30mg/ml，微囊壁材液与丁酸梭菌悬液的体积比为3:1。

20、根据本发明的第三方面，提供了用于治疗溃疡性结肠炎的组合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。

21、进一步地，所述药物的剂型为凝胶剂，其在常温下为液态，在人体体温环境下成凝胶态；给药方式为肛门给药，推注凝胶剂至乙状结肠，在乙状结肠处原位形成温敏凝胶。

22、本发明具有如下优点：

23、本发明通过壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏凝胶液在结肠内原位成型凝胶，以液态形式灌肠给药提升药剂覆盖范围的同时形成物理屏障覆盖溃疡面，隔离肠道内刺激物并为结肠修复提供支架。以黄连、党参、三七和白及提取物协同发挥抗炎、止血、促愈功能，并添加丁酸钠为结肠上皮细胞补充营养来源。还以丁酸梭菌发酵茭白、莼菜和荇菜等高多糖、高膳食纤维含量的植物，补充丁酸盐的同时，将其中的抗炎物质水解为更易于吸收利用的小分子化合物。此外，本发明还添加了微囊化包裹的丁酸梭菌，以微胶囊确保活菌有效递送至结肠，恢复结肠局部菌群，促进结肠上皮细胞的修复。本发明中各组分通过物理屏障-抗炎修复-菌群调节的多靶点协同作用，有效改善了溃疡性结肠炎。

1.用于治疗溃疡性结肠炎的组合物，其特征在于，该组合物包括以下质量份组分：温敏凝胶60-80份、石耳提取物1-10份、植物发酵物10-15份、丁酸盐及其衍生物1-5份、微囊化丁酸梭菌1-10份和植物提取物1-10份；除温敏凝胶外的各组分制备后分散于磷酸盐缓冲液，且质量组分以溶质干重计；除温敏凝胶外各组分质量之和与磷酸盐缓冲液的质量体积比为(0.5-1)g：1ml。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述温敏凝胶为壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏凝胶，所述植物发酵物为茭白、荇菜和莼菜的丁酸梭菌发酵产物，所述微囊化丁酸梭菌为经微囊化包封处理的丁酸梭菌，所述植物提取物为黄连、党参、三七和白及的提取物，所述丁酸盐及其衍生物为丁酸钠。

3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述植物发酵物中茭白、荇菜和莼菜的丁酸梭菌发酵产物的质量比为2:1:1；所述植物提取物中黄连、党参、三七和白及的提取物的质量比为3:3:1:3。

4.用于治疗溃疡性结肠炎的组合物的制备方法，用于制备权利要求1-3任一项所述的组合物，其特征在于，具体包括以下步骤：

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述丁酸梭菌悬液的制备包括以下步骤：

6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述的β-甘油磷酸钠溶液的浓度为0.56g/ml，壳聚糖溶液为浓度0.03g/ml的壳聚糖-稀盐酸溶液，β-甘油磷酸钠溶液和壳聚糖溶液的体积比为1:3，壳聚糖溶液中壳聚糖的脱乙酰度≥80%。

7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤s3中所述的丁酸梭菌悬液的活菌数为1×107-1×108cfu/ml，微囊壁材液中β-环糊精、结冷胶和海藻酸钠在磷酸盐缓冲液中的浓度分别为50mg/ml、30mg/ml和30mg/ml，微囊壁材液与丁酸梭菌悬液的体积比为3:1。

8.用于治疗溃疡性结肠炎的组合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于，采用权利要求1-3任一项所述的组合物制备。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为凝胶剂，其在常温下为液态，在人体体温环境下成凝胶态；给药方式为肛门给药，推注凝胶剂至乙状结肠，在乙状结肠处原位形成温敏凝胶。