一种高效生产烟酰胺单核苷酸的枯草芽胞杆菌培养基的制作方法

技术特征：
1.一种高效生产烟酰胺单核苷酸的枯草芽胞杆菌培养基，其特征在于，其包括如下组分：碳源20-50g/l，酵母浸膏5-20g/l，钠盐0.2-2g/l，钾盐1-10g/l，镁盐2-20g/l，磷酸盐5-20g/l，铵盐1-5g/l。2.根据权利要求1所述的枯草芽胞杆菌培养基，其特征在于，所述碳源包括葡萄糖，甘油，山梨糖醇中的一种或者至少两种的组合，优选为甘油；所述的钠盐优选为柠檬酸钠；所述的钾盐和磷酸盐优选为磷酸氢二钾和/或磷酸二氢钾；所述的镁盐优选为硫酸镁；所述的铵盐优选为硫酸铵。3.根据权利要求2所述的枯草芽胞杆菌培养基，其特征在于，所述其由以下组分组成：甘油30-40g/l，酵母浸膏15-20g/l，磷酸氢二钾6-8g/l，磷酸二氢钾1-3g/l，柠檬酸钠1-2g/l，硫酸镁5-10g/l，硫酸铵1-3g/l。4.一种烟酰胺单核苷酸的制备方法，其特征在于，工艺步骤如下：s1:一级种的制备：从含新霉素20ug/ml的lb平板上挑选含烟酰胺磷酸核糖转移酶表达元件的重组枯草芽孢杆菌株单菌落，接入4ml lb液体培养基中，于37℃、220rpm培养过夜，所得的菌种为一级种；s2；二级种的制备：将一级种接种于800ml lb液体培养基，于37℃，220rpm培养至od600为0.6左右，时间为4～5小时；s3:三级种的制备：将二级种接种到80l权利要求书1-3所述的发酵培养基中，在37℃条件下，以柠檬酸、naoh控ph 7.0左右，通风搅拌，溶氧控制在20～30％，培养至od600为0.6左右，时间为5～6小时；s4:生产罐发酵：将三级种接种到3t权利要求书1-3所述的发酵培养基中中，加入0.1％-1％烟酰胺，在36～38℃条件下，通风搅拌，溶氧控制在20～30％，以柠檬酸、naoh控ph 6～8,培养24-48小时,破胞后分离纯化可得烟酰胺单核苷酸产品。

技术总结
本发明涉及生物技术领域，且公开了一种高效生产烟酰胺单核苷酸的枯草芽胞杆菌培养基，其包括如下组分：碳源20-50g/L，酵母浸膏5-20g/L，钠盐0.2-2g/L，钾盐1-10g/L。该高效生产烟酰胺单核苷酸的枯草芽胞杆菌培养基，提供组分优化的发酵培养基，以用于利用重组枯草芽孢杆菌高效发酵生产烟酰胺单核苷酸，通常培养基优化的目的是利用高密度培养以获得更多的菌体，从而得到更高的表达产物，然而，这个办法对于利用重组枯草芽孢杆菌发酵转化烟酰胺得到烟酰胺单核苷酸并不适用，因此，本发明调整发酵培养的成分，减少或剔除不利于烟酰胺单核苷酸生成的组分，提高或优化有利于烟酰胺单核苷酸生成的组分，从而获得一种高效生产烟酰胺单核苷酸的枯草芽胞杆菌培养基。核苷酸的枯草芽胞杆菌培养基。


技术研发人员：李晓明 卢运琨 梁树华 韦航 李丛 陆迪 于春娇
受保护的技术使用者：南宁邦尔克生物技术有限责任公司
技术研发日：2022.06.10
技术公布日：2022/8/19