一种耐高温类胡萝卜素降解酶及其制备方法和应用与流程

技术特征：
1.枯草芽孢杆菌在制备耐高温的类胡萝卜素降解酶，和/或，在烟草发酵中的应用，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis subsp.subtilis)cicc24406，其保藏于中国工业微生物菌种保藏管理中心。2.一种利用如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌制备类胡萝卜素降解酶的方法，其特征在于，所述方法包括：向发酵培养基中接种所述枯草芽孢杆菌进行发酵，离心获得上清液，即获得所述类胡萝卜素降解酶的粗酶液。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵温度为25℃～30℃，转速为100～200r/min，培养时间为60～96h；优选的，发酵温度为28℃，转速为160r/min，培养时间为72h。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基的组成包括：糖、亚硝酸钠、酵母粉；优选的，所述糖选自葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、甘露醇、淀粉中的一种或多种；更优选的，所述糖为甘露醇；更优选的，按质量百分比计，所述发酵培养基组成包括：1％～5％糖、0.1％～0.5％亚硝酸钠和0.2％～0.6％酵母粉；优选的，所述发酵培养基组成为2％糖、0.2％亚硝酸钠和0.4％酵母粉。5.采用枯草芽孢杆菌发酵获得的类胡萝卜素降解酶，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis subsp.subtilis)cicc24406，其保藏于中国工业微生物菌种保藏管理中心；优选的，所述类胡萝卜素降解酶的酶促作用温度为20℃～90℃，ph为4～6；更优选的，温度为80℃，ph为5。6.如权利要求5所述的类胡萝卜素降解酶在制备类胡萝卜素致香物质中的应用；优选的，所述类胡萝卜素致香物质包括1-甲基-2,3-环己二酮、氧化异佛尔酮、β-紫罗兰酮、巨豆三烯酮、二氢猕猴桃内酯。7.一种利用如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌发酵烟草的方法，其特征在于，所述方法包括：将所述枯草芽孢杆菌接种于烟草中，混合发酵。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的菌悬液od
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值为0.4～0.5，所述菌悬液与烟草的质量比为2：(3～4)；优选的，所述菌悬液与烟草的质量比为2:3。9.采用枯草芽孢杆菌发酵获得的烟草发酵物，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis subsp.subtilis)cicc24406，其保藏于中国工业微生物菌种保藏管理中心。10.含有权利要求9所述的烟草发酵物的烟草产品。

技术总结
本发明提供了枯草芽孢杆菌在制备耐高温的类胡萝卜素降解酶，和/或，在烟草发酵中的应用，枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis subsp.Subtilis)CICC24406，其保藏于中国工业微生物菌种保藏管理中心。本申请公开了枯草芽胞杆菌CICC24406能够产生高酶活性的类胡萝卜素降解酶，为类胡萝卜素降解酶的生产来源提供了一个新的途径。该类胡萝卜素降解酶粗酶液降解效率可达到70％以上，且在80℃高温环境下能有效加速类胡萝卜素的降解，打破了高温对普通类胡萝卜素降解酶的限制，为高温工艺提供了一种新的类胡萝卜素降解酶。该酶可降解类胡萝卜素生成致香物质应用于烟草产品中。解类胡萝卜素生成致香物质应用于烟草产品中。解类胡萝卜素生成致香物质应用于烟草产品中。


技术研发人员：郝捷 张善林 云晶 于涛 费玥 李力群 李剑梅 柴林山 朱万芹 张疏雨 谢存一
受保护的技术使用者：内蒙古昆明卷烟有限责任公司
技术研发日：2022.04.22
技术公布日：2022/7/22