组氨酸标签的核酸适配体

1.本发明涉及组氨酸标签的核酸适配体，属于生物加工技术领域。


背景技术：

2.组氨酸标签（his-tag），是由6个组氨酸分子组成的短肽，是生物加工链中工具酶标签，一般连接在重组蛋白n-端或c-端。在生物技术加工尤其是蛋白质工程、酶工程中，为了便于蛋白酶或多肽的分离纯化，常在蛋白酶末端连接上组氨酸标签。
3.核酸适配体（aptamer）是通过指数富集配体进化技术从体外筛选得到的寡核苷酸片段，具有低成本、易合成、可修饰、批次差异小和免疫原性较低等生物特性，可快速与相应的靶标专一性地亲密结合，特异性识别各种靶标。核酸适配体作为化学和生物传感识别分子已成功应用于食品安全分析和生物医学研究等诸多领域。
4.6h7-original适配体是现有技术中已报道的针对组氨酸标签的核酸适配体，其与组氨酸标签之间的解离平衡常数（kd）为5.0 μmol/l，对组氨酸标签的亲和力有限，有必要对其进行强化以获得亲和力更强的核酸适配体。


技术实现要素：

5.针对上述现有技术，本发明提供了若干条组氨酸标签的核酸适配体。本发明以6h7-original适配体为初始链，通过核心区的内嵌协同进行亲和性强化改造，得到了若干条对组氨酸标签具有高亲和性的核酸适配体。
6.本发明是通过以下技术方案实现的：组氨酸标签的核酸适配体，其核苷酸序列如seq id no.4所示或seq id no.5所示或seq id no.6所示或seq id no.7所示或seq id no.8所示。
7.上述组氨酸标签的核酸适配体在制备用于检测带组氨酸标签的蛋白或多肽的检测产品中的应用。所述检测产品选自检测探针、检测试剂、检测试剂盒或检测传感器。
8.上述组氨酸标签的核酸适配体在带组氨酸标签的蛋白或多肽的检测、分离、富集或纯化中的应用。
9.本发明的组氨酸标签的核酸适配体，是以6h7-original适配体为初始链，采用核心区内嵌协同的强化方法进行改造而得到的，其强化特点为：通过对6h7-original适配体二级结构的预测，根据其结构特点进行核心区内嵌协同，从而提高了适配体与靶标的亲和力。通过本发明的核心区内嵌协同的强化方法改造得到的核酸适配体，对组氨酸标签的亲和力得到了明显的提升。
10.本发明的组氨酸标签的核酸适配体，对组氨酸标签的亲和力高，可用于制备检测带组氨酸标签的蛋白或多肽的检测产品，可用于带组氨酸标签的蛋白或多肽的检测、分离、富集或纯化，对实际生物加工过程中蛋白酶的检测、监控、分离、富集、纯化等具有重要意义，本发明的组氨酸标签的核酸适配体具有巨大的应用潜力。
11.本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。
ababb、6h7-ababab这三条强化后的核酸适配体与靶标组氨酸标签的亲和力均显著提高，尤其是6h7-ababab，其kd值低至0.0989 μmol/l，相比6h7-original适配体，亲和力提升了50.56倍，说明对关键碱基的片段的嵌合协同有利于核酸适配体与靶标的相互作用。
19.表1给本领域技术人员提供上述实施例，以完全公开和描述如何实施和使用所主张的实施方案，而不是用于限制本文公开的范围。对于本领域技术人员而言显而易见的修饰将在所附权利要求的范围内。


技术特征：
1.组氨酸标签的核酸适配体，其特征在于：其核苷酸序列如seq id no.4所示。2.组氨酸标签的核酸适配体，其特征在于：其核苷酸序列如seq id no.5所示。3.组氨酸标签的核酸适配体，其特征在于：其核苷酸序列如seq id no.6所示。4.组氨酸标签的核酸适配体，其特征在于：其核苷酸序列如seq id no.7所示。5.组氨酸标签的核酸适配体，其特征在于：其核苷酸序列如seq id no.8所示。

技术总结
本发明公开了组氨酸标签的核酸适配体，属于生物加工技术领域。所述组氨酸标签的核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示或SEQ ID NO.5所示或SEQ ID NO.6所示或SEQ ID NO.7所示或SEQ ID NO.8所示。本发明的组氨酸标签的核酸适配体是以6H7-Original适配体为初始链，通过核心区的内嵌协同进行亲和性强化改造得到的，对组氨酸标签的亲和力高。本发明的组氨酸标签的核酸适配体具有巨大的应用潜力。酸标签的核酸适配体具有巨大的应用潜力。


技术研发人员：王赛 毛相朝 张玲 魏凯悦
受保护的技术使用者：中国海洋大学
技术研发日：2022.06.13
技术公布日：2022/7/15