一种检测霓虹脂鲤属下物种存在的环境DNA的方法

技术特征：
1.一种检测霓虹脂鲤属下物种存在的环境dna的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)待测样品环境dna的提取；2)以待测样品环境dna为模板，采用霓虹脂鲤属下物种特异性引物对进行pcr扩增；3)根据电泳结果是否发生特异性的扩增判断待测样品中是否存在霓虹脂鲤属下物种；所述霓虹脂鲤属下物种特异性引物对如下：上游引物：5
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；下游引物：5
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。2.根据权利要求1所述的检测霓虹脂鲤属下物种存在的环境dna的方法，其特征在于，若电泳结果中出现450-500bp的条带，则表明待测样品来源的环境中存在霓虹脂鲤属下物种；若电泳结果未发生特异性的扩增，则待测样品来源的环境中不存在霓虹脂鲤属下物种。3.根据权利要求1所述的检测霓虹脂鲤属下物种存在的环境dna的方法，其特征在于，pcr反应体系为：每26μl体系中，含有taq酶12.5μl，上下游引物各1μl，dna模板1μl和ddh2o 10.5μl。4.根据权利要求1所述的检测霓虹脂鲤属下物种存在的环境dna的方法，其特征在于，pcr扩增程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；72℃延伸5min。5.用于环境dna检测霓虹脂鲤属下物种存在的特异性引物对，其特征在于，所述特异性引物对如下：上游引物：5
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；下游引物：5
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。6.含有权利要求5所述的用于环境dna检测霓虹脂鲤属下物种存在的特异性引物对的检测试剂或检测试剂盒。

技术总结
本发明公开了一种检测霓虹脂鲤属下物种存在的环境DNA的方法，属于生物技术检测领域。包括以下步骤：1)待测样品环境DNA的提取；2)以待测样品环境DNA为模板，采用霓虹脂鲤属下物种特异性引物对进行PCR扩增；3)根据电泳结果是否发生特异性的扩增判断待测样品中是否存在霓虹脂鲤属下物种。本发明利用霓虹脂鲤属下物种残留水体中的粪便、皮肤脱落物及尸体等遗迹提取环境DNA样品，结合分子生物学技术，开发出具有特异性且扩增效率高的PCR引物，建立了可针对霓虹脂鲤属下物种的快速，准确的检测鉴定方法。为监测可能发生的外来物种入侵提供了新的技术手段，对于防止霓虹脂鲤属下物种的入侵具有重要意义。侵具有重要意义。侵具有重要意义。


技术研发人员：王嘉陈 许唯 刘宏毅 卢轶凡
受保护的技术使用者：南京林业大学
技术研发日：2022.05.05
技术公布日：2022/7/15