抗TNFα的单域抗体及其用途的制作方法

技术特征：
1.抗tnfα的单域抗体，其特征在于：所述的单域抗体由重链构成，重链包括重链cdr1、重链cdr2和重链cdr3；所述的重链cdr1、重链cdr2和重链cdr3的氨基酸序列为下述（1）-（9）的一种：（1）seq id no:55所示的cdr1，seq id no:57所示的cdr2，seq id no:65所示的cdr3；（2）seq id no:50所示的cdr1，seq id no:60所示的cdr2，seq id no:70所示的cdr3；（3）seq id no:49所示的cdr1，seq id no:62所示的cdr2，seq id no:64所示的cdr3；（4）seq id no:54所示的cdr1，seq id no:58所示的cdr2，seq id no:68所示的cdr3；（5）seq id no:53所示的cdr1，seq id no:59所示的cdr2，seq id no:67所示的cdr3；（6）seq id no:50所示的cdr1，seq id no:61所示的cdr2，seq id no:70所示的cdr3；（7）seq id no:52所示的cdr1，seq id no:63所示的cdr2，seq id no:66所示的cdr3；（8）seq id no:51所示的cdr1，seq id no:61所示的cdr2，seq id no:69所示的cdr3；（9）seq id no:48所示的cdr1，seq id no:56所示的cdr2，seq id no:71所示的cdr3。2.根据权利要求1所述的抗tnfα的单域抗体，其特征在于：所述重链cdr1中，1至5个氨基酸残基可由其保守氨基酸替换；所述重链cdr2中，1至5个氨基酸残基可由其保守氨基酸替换；所述重链cdr3中，1至5个氨基酸残基可由其保守氨基酸替换。3.根据权利要求1所述的抗tnfα的单域抗体，其特征在于：所述的单域抗体还包括框架区fr；所述框架区fr包括fr1、fr2、fr3和fr4的氨基酸序列；框架区fr的氨基酸序列分别为：seq id no: 21-27中的任意一条所示的fr1或fr1的变体，所述fr1的变体在所述fr1中包含至多5个氨基酸的替换；seq id no: 28-36中的任意一条所示的fr2或fr2的变体，所述fr2的变体在所述fr2中包含至多5个氨基酸的替换；seq id no: 37-44中的任意一条所示的fr3或fr3的变体，所述fr3的变体在所述fr3中包含至多5个氨基酸的替换；seq id no:45-47中的任意一条所示的fr4或fr4的变体，所述fr4的变体在所述fr4中包含至多5个氨基酸的替换。4.抗tnfα的单域抗体，其特征在于：所述单域抗体的氨基酸序列分别如seq id no.1-10所示。5.一种双特异性抗体，其特征在于：所述双特异性抗体包括第一抗原结合部分和第二抗原结合部分，第一抗原结合部分为权利要求1-4任意一项所述的抗tnfα的单域抗体。6.权利要求1-4任意一项所述的抗tnfα的单域抗体在制备双特异性抗体中的用途。7.权利要求1-4任意一项所述的抗tnfα的单域抗体的fc融合抗体或人源化抗体。8.一种编码权利要求1-4任意一项所述的抗tnfα的单域抗体的核苷酸分子，其特征在于：其核苷酸序列分别如seq id no：11-20所示。9.一种表达载体，其特征在于：其包含编码权利要求1-4任意一项所述的抗tnfα的单域抗体或者权利要求7所述的fc融合抗体或人源化抗体的核苷酸分子或者权利要求8所述的核苷酸分子。10.一种宿主细胞，其特征在于：其可以表达出权利要求1-4任意一项所述的抗tnfα的单域抗体，或其包含权利要求9所述的表达载体。11.根据权利要求10所述的宿主细胞，其特征在于：所述细胞为真核细胞或原核细胞。
12.一种重组蛋白，其特征在于：所述重组蛋白包含权利要求1-4任意一项所述的抗tnfα的单域抗体。13.药物组合物，其特征在于：其包含选自权利要求1-4任意一项的抗tnfα的单域抗体和药学上可接受的载体。14.用于治疗与tnfα异常表达相关的病症的药剂，其特征在于：其包含权利要求1-4任意一项所述的抗tnfα的单域抗体作为活性成分。15.一种检测tnfα水平的试剂盒，其特征在于：其含有权利要求1-4任意一项所述的抗tnfα的单域抗体。

技术总结
本发明属于免疫学领域，涉及抗TNFα的单域抗体及其用途。所述的单域抗体由重链构成，重链包括SEQ ID NO:48-SEQ ID NO:55任意一条所示的重链CDR1、SEQ ID NO:56-SEQ ID NO:63任意一条所示的重链CDR2和SEQ ID NO:64-SEQ ID NO:71任意一条所示的重链CDR3。相对于现有技术，本发明的有益效果是：本发明使用生物基因工程技术筛选出特异性针对TNFα的单域抗体，这些抗体亲和力较好，并且能阻断特定细胞释放细胞因子，通过原核表达及真核表达均具有良好的结合活性，具有一定的成药性。具有一定的成药性。具有一定的成药性。


技术研发人员：苏志鹏 孟巾果 王乐飞 张云 谢维
受保护的技术使用者：南京融捷康生物科技有限公司
技术研发日：2022.03.25
技术公布日：2022/6/7