1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶类化合物及其制备方法和应用

1.本发明属于医药技术领域，具体涉及1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶类化合物及其制备方法和应用。


背景技术：

[0002]
癌症又名为恶性肿瘤，中医学中称癌、瘤，指的是细胞不正常增生，且这些增生的细胞可能侵犯身体的其他部分，为由控制细胞分裂增殖机制失常而引起的疾病。癌细胞除了分裂失控外，还会局部侵入周遭正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。但并非所有的肿瘤都会癌化，有些细胞增生不会侵犯身体其他部分，称为良性肿瘤。癌症常见的征象与症状包括新发生的肿块、异常的出血、慢性咳嗽、无法解释的体重减轻、以及肠胃蠕动的改变等等(cancer-signs and symptoms,nhs choices.2014.https://www.nhs.uk/conditions/cancer/symptoms/)。
[0003]
目前针对癌症的治疗方法主要有五种：外科手术、放射线治疗、生物疗法(包括激素治疗、细胞免疫治疗、标靶药物与疫苗等)、基因疗法及药物化学疗法，目前也有一些新的治疗方法不断推陈出新，比如现已在临床使用的有标靶治疗、光动力疗法等(richard a harvey,pharmacology 6th ed.wolters kluwer.2015)。但是化疗与标靶药物治疗癌症仍是治疗癌症的主要手段，但是由于化药的副作用与耐药性问题，仍需药物化学专业从业者不断研发针对新靶点具有全新结构骨架的小分子抑制剂。现临床用来治疗各种恶性肿瘤的小分子药物：
[0004]
吉非替尼(gefitinib)，商品名为艾瑞莎(iressa)，由阿斯利康制药和teva发售，2003年获美国食品药物管理局批准用于治疗非小细胞肺癌，现如今已在64个国家获批。被用为治疗乳癌、肺癌和其它癌症。吉非替尼是表皮生长因子受体抑制剂，抑制靶细胞的表皮生长因子受体。它是第一个选择性作用于表皮生长因子受体的酪胺酸激酶结构域的药物，其会共价结合到酪胺酸激酶的腺苷三磷酸(atp)，也是唯一对表皮生长因子受体突变跟过度表达而产生的癌症的有效药物(sordella r,bell dw,haber da,settleman j.science.2004,305(5687):1163
–
7)。
[0005]
他莫昔芬(tamoxifen)是最早也是被开处方最多的选择性雌激素受体调节剂。他莫昔芬于1977年经美国食品药物管理局批准上市，现常被用于治疗手术后被诊断为激素受体阳性的早期乳腺癌和被诊断患有晚期或转移性激素受体阳性疾病的病人。自获批上市以来，他莫昔芬已被用于治疗数百万被诊断患有激素受体阳性乳腺癌的病人。他莫昔芬选择性激活雌激素作用以后可能会导致一些严重的副作用，包括血栓、中风和子宫内膜癌等，长期服用他莫昔芬可能会导致脂肪肝、脂肪性肝炎、肝硬化，极少数情况下引致临床症状明显的急性肝损伤(morello kc,wurz gt,degregorio mw.clinical pharmacokinetics.2003,42(4):361
–
72)。
[0006]
贝伐珠单抗是2004年美国食品药品管理局(fda)批准用于结直肠癌晚期治疗的一
种重组人源化igg1抗体，2015年罗氏制药宣布通过其非小细胞肺癌的适应症。通过对vegf受体进行识别和结合，贝伐珠单抗能有效地抑制vegf的生物活性，在欧美等国的nsclc患者中得到广泛应用。该药的不良反应主要为高血压、出血、蛋白尿和血栓栓塞等，临床常见副作用为血液学毒性，恶心，呕吐，乏力等(叶丹.临床合理用药杂志,2020,13(08):43-44.)。
[0007]
埃克替尼是2011年贝达药业推出的首个国产以表皮生长因子为靶点的新型口服小分子抑制剂。在iii期临床试验研究中，吉非替尼和埃克替尼的中位无进展生存期分别为3.4个月和4.6个月，提示埃克替尼的疗效优于吉非替尼，而埃克替尼组的药物相关不良反应发生率明显低于吉非替尼组，因此埃克替尼在晚期nsclc的治疗上有更大的潜力。该药的不良反应主要为i、ii度皮疹、腹泻、眼痛和肝功能异常等，但其不良反应通常是可逆的，不需特殊处理便能自行消失(shi y,zhang l,liu x,et al.lancet oncol,2013,14(10):953-961)。


技术实现要素：

[0008]
本发明的目的是提供1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶类化合物及其制备方法和应用，具体为1,3-二甲基-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,7(1h,3h,8h)-三酮类化合物，相应为在制备治疗或/和预防乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肝癌、黑色素瘤、皮肤癌等多种恶行肿瘤疾病药物方面的应用，包括作为多靶点抑制剂在抗肿瘤方面的应用。
[0009]
如式i所示的1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶类化合物、其前体药物和药物活性代谢物以及其药学上可接受的盐；
[0010][0011]
r1、r2独立地选自甲基或乙基；或r1、r2及与它们相连的氮原子一起组成吡咯烷基，吗啉基，4-甲基哌嗪基或4-乙基哌嗪基；
[0012]
r3为取代或未取代苯基，所述取代基为c1-c6烷基或卤素、c1-c4烷氧基、卤素取代的c1-c6烷氧基或c1-c6烷氨基。
[0013]
进一步地，本发明所述的如式i所示1,3-二甲基-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶类化合物、其前体药物和药物活性代谢物以及其药学上可接受的盐：
[0014]
r1、r2与它们相连的氮原子一起组成二甲氨基、吡咯烷基、吗啉基或4-甲基哌嗪基；
[0015]
r3为苯基、4-甲基苯基、3-甲基苯基、2-甲基苯基、4-氯苯基、3-氯苯基、4-氟苯基、2-氟苯基、3-三氟甲基苯基、4-三氟甲基苯基或4-三氟甲氧基苯基。
[0016]
进一步的，本发明优选如下化合物：
[0017]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(对甲苯基)乙酰胺(xqs01)，其结构式如下式i-1所示：
[0018][0019]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(间甲苯基)乙酰胺(xqs02)，其结构式如下式i-2所示：
[0020][0021]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs03)，其结构式如下式i-3所示：
[0022][0023]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(4-氟苯基)乙酰胺(xqs04)，其结构式如下式i-4所示：
[0024][0025]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(邻甲苯基)乙酰胺(xqs05)，其结构式如下式i-5所示：
[0026][0027]
n-(4-氯苯基)-2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs06)，其结构式如下式i-6所示：
[0028][0029]
n-(3-氯苯基)-2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs07)，其结构式如下式i-7所示：
[0030]
[0031]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-苯基乙酰胺(xqs08)，其结构式如下式i-8所示：
[0032][0033]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs09)，其结构式如下式i-9所示：
[0034][0035]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[4-(三氟甲氧代)苯基]乙酰胺(xqs10)，其结构式如下式i-10所示：
[0036][0037]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs11)，其结构式如下式i-11所示：
[0038][0039]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(4-氟苯基)乙酰胺(xqs12)，其结构式如下式i-12所示：
[0040][0041]
2-{[7-(二甲氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(2-氟苯基)乙酰胺(xqs13)，其结构式如下式i-13所示：
[0042][0043]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(邻甲苯基)乙酰胺(xqs14)，其结构式如下式i-14所示：
[0044][0045]
n-(4-氯苯基)-2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs15)，其结构式如下式i-15所示：
[0046][0047]
n-(3-氯苯基)-2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs16)，其结构式如下式i-16所示：
[0048][0049]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-苯乙酰胺(xqs17)，其结构式如下式i-17所示：
[0050][0051]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(对甲苯基)乙酰胺(xqs18)，其结构式如下式i-18所示：
[0052][0053]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(间甲苯基)乙酰胺(xqs19)，其结构式如下式i-19所示：
[0054][0055]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙酰胺(xqs20)，其结构式如下式i-20所示：
[0056]
[0057]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(间甲苯基)乙酰胺(xqs21)，其结构式如下式i-21所示：
[0058][0059]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs22)，其结构式如下式i-22所示：
[0060][0061]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(4-氟苯基)乙酰胺(xqs23)，其结构式如下式i-23所示：
[0062][0063]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(2-氟苯基)乙酰胺(xqs24)，其结构式如下式i-24所示：
[0064][0065]
n-(4-氯苯基)-2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs25)，其结构式如下式i-25所示：
[0066][0067]
n-(3-氯苯基)-2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs26)，其结构式如下式i-26所示：
[0068][0069]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-苯乙酰胺(xqs27)，其结构式如下式i-27所示：
基)氨基]-n-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs34)，其结构式如下式i-34所示：
[0084][0085]
一种药物组合物，包括作为活性成分的本发明所述的化合物，其前体药物和药物活性代谢物，以及其在药学上可接受的盐中任何一个的化合物和药学上可接受的载体或稀释剂。
[0086]“药学上可接受的盐”指保留了式i所示化合物的生物效力和性质，并与非毒性有机或无机酸或有机或无机碱形成的常规酸加成盐或碱加成盐。其中：
[0087]
酸加成盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、高氯酸盐、硫氰酸盐、硫酸氢盐、过硫酸盐、硼酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、戊酸盐、新戊酸盐、己酸盐、庚酸盐、辛酸盐、异辛酸盐、十一烷酸盐、月桂酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、油酸盐、环丙酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、己二酸盐、壬二酸盐、丙烯酸盐、草莓盐、巴豆酸盐、惕格酸盐、衣康酸盐、山梨酸盐、肉桂酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、亚酒石酸盐、扁桃酸盐、二苯乙醇酸盐、托品酸盐、抗坏血酸盐、葡萄糖酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖二酸盐、甘露糖酸盐、乳糖酸盐、苯甲酸盐、酞酸盐、对酞酸盐、糠酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、水杨酸盐、乙酰水杨酸盐、酪酸盐、没食子酸盐、咖啡酸盐、阿魏酸盐、苦味酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、丙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、对氨基苯磺酸盐、氨基磺酸盐、牛磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐、甘氨酸盐、丙氨酸盐、缬氨酸盐、亮氨酸盐、异亮氨酸盐、苯丙氨酸盐、色氨酸盐、酪氨酸盐、天冬氨酸盐、天冬酰胺盐、谷氨酸盐、赖氨酸盐、谷氨酰胺盐、甲硫氨酸盐、丝氨酸盐、苏氨酸盐、半胱氨酸盐、脯氨酸盐、组氨酸盐、精氨酸盐、依地酸盐、丙酮酸盐、α-酮戊二酸盐、藻酸盐、环戊烷丙酸盐、3-苯基丙酸盐、3-环己基丙酸、2-萘甲酸盐、2-萘磺酸盐、双羟萘酸盐、月桂基硫酸盐、甘油磷酸盐、月桂基硫酸盐、果胶脂酸盐。优选用于生成酸加成盐的酸包括盐酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、顺丁烯二酸、苹果酸、苦味酸、柠檬酸、对氨基苯磺酸；碱加成盐包括铵盐，碱金属盐，例如钠和钾盐，碱土金属盐，例如钙和镁盐，有机碱的盐，例如二环己胺盐，n-甲基-d-葡糖胺盐，而且，碱性含氮基团可以用这样的试剂季铵化，例如低级烷基卤化物，如甲基，乙基，丙基和丁基的氯、溴和碘化物；硫酸二烷基酯，如硫酸二甲酯，二乙酯，二丁酯和二戊酯；长链卤化物，如癸基，月桂基，肉豆蔻基和硬脂酰基的氯、溴和碘化物；芳烷基卤化物，如苄基和苯乙基的溴化物。
[0088]
本发明也涉及抑制mek激酶和erk激酶的药用组合物，该组合物含有式i所示化合物或其衍生物或其药学上可接受的酸加成盐以及药学上可接受的载体。
[0089]“药学上可接受的”如药学上可接受的载体、赋形剂、前体药物，指药理学上可接受的、并对给药具体化合物的患者基本上无毒性。
[0090]“药学活性代谢物”指药学上可接受并有效的式i所示化合物的代谢产物。
[0091]
本发明中应用的术语“卤素”包括氟、氯、溴及碘。
[0092]
本发明化合物可以通过不同的方法给患者服用，包括以胶囊剂或片剂口服，以无菌溶液剂或混悬剂给药，并且在特定情况下，可以以溶液剂形式静脉注射。可以将本发明的
游离碱化合物以其药学上可接受的酸加成盐形式进行配制和服用。
[0093]
本发明所述化合物作为全新骨架结构的mek激酶抑制剂或erk激酶抑制剂，可用于制备治疗或/和预防乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肝癌、黑色素瘤、皮肤癌等多种恶行肿瘤疾病药物方面的应用，具有良好的应用价值和开发应用前景。
[0094]
本发明化合物的制备路线：
[0095][0096]
本发明所述化合物xqs01-xqs34及药学上可接受的盐、以及其前体药物，具有能够作用于ras/raf/mek/erk信号通路，抑制mek1/2、erk1/2的磷酸化作用，从而达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。
[0097]
本发明有益效果：
[0098]
本发明提供了一类全新抗肿瘤化合物的结构，具有潜在的成药价值，且相应化合物制备路线简便，易于合成且成本低廉。与已上市药物相比，具有更加显著的抗肿瘤细胞增殖活性。
具体实施方式
[0099]
以下述实例详细叙述本发明技术方案。但是，应当明白，本发明不限于于下述实例。
[0100]
实施例1：
[0101]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(对甲苯基)乙酰胺(xqs01)的制备
[0102]
步骤i：将6-氨基-1,3-二甲基嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(23.25g,0.15mol)、氰乙酸(16.59g,0.195mol)、150ml乙酸酐和3ml吡啶置于500ml圆底烧瓶中，加热至65℃，保温反应3h。冷却至室温后经抽滤收集所产生的沉淀，经乙醇洗涤，真空下干燥得3-(6-氨基-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)-3-氧丙腈，灰白色固体27.83g，产率83.55％。
[0103]
步骤ii：取500ml圆底烧瓶，先将钠(4.31g,0.188mol)溶于250ml乙醇中，后加入3-(6-氨基-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)-3-氧丙腈(27.83g,0.125mol)，回流1h后将反应液冷却至室温，抽滤收集所产生的沉淀，用乙醇和水洗涤，真空下干燥得7-氨基-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮，灰白色固体27.82g，产率99.99％。
[0104]
步骤iii：冰盐浴条件下，取500ml三颈烧瓶，将7-氨基-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮(15.95g,71.8mmol)搅拌溶解于150ml浓盐酸中，当体系温度降至0
±
5℃，缓慢滴入溶于20ml水的亚硝酸钠溶液，控制滴速使反应体系温度始终稳定在5℃以下，滴毕，冰浴下继续搅拌1h，用淀粉的碘化钾试纸监测反应进度，撤去冰浴，室温下搅
拌2h，随后收集产生的固体，用水多次洗涤，干燥后得7-氯-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮，浅绿色固体，产量8.8g,产率55.6％。
[0105]
步骤iv：将7-氯-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮(6.85g,28.42mmol)、三乙胺(5.75g,56.84mmol)、四氢吡咯(3.03g,42.63mmol)和50ml乙醇置于100ml圆底烧瓶中，回流过夜反应8h后，将反应液冷却至室温，滤出析出的固体，乙醇洗涤，真空下干燥得1,3-二甲基-7-(吡咯烷-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮，浅绿色固体，产量7.17g，产率91.36％。
[0106]
步骤v：将1,3-二甲基-7-(吡咯烷-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮(4.14g,11.88mmol),三乙胺(5.75g,56.84mmol)和0.1g 4-二甲氨基吡啶溶于15ml乙腈中，再将溶于10ml乙腈的对甲基苯磺酰氯(3.34g,30mmol)溶液快滴加入反应瓶内，室温搅拌20min后加热回流反应3h，将反应液冷却至室温，析出大量固体，抽滤，用乙醇洗涤固体，干燥后得1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基对甲苯磺酸酯，黄白色固体，产量4.75g，产率77.24％。
[0107]
步骤vi：称量1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基对甲苯磺酸酯(0.95g,2mmol)、2-氨基-n-(对甲苯基)乙酰胺盐酸盐(0.76g,3mmol)、三乙胺(0.61g,6mmol)和15ml正丁醇于50ml圆底烧瓶内，加热至125℃回流反应8小时。tlc监测反应完全后，冷却至室温，有大量白色晶体析出。滤出产生的晶体，并用甲醇洗涤，干燥后用二氯甲烷再次重结晶，即可得化合物xqs01，白色固体，产量0.51g，产率53.55％；m.p.：258.9-265.2℃；ms:423.21335[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.11(s,1h),9.19(t,j＝4.9hz,1h),7.48(d,j＝8.1hz,2h),7.12(d,j＝8.1hz,2h),5.15(s,1h),4.07(d,j＝4.9hz,2h),3.46(s,3h),3.43(s,4h),3.23(s,3h),2.25(s,3h),1.93(s,4h)。
[0108]
实施例2：
[0109]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(间甲苯基)乙酰胺(xqs02)的制备
[0110]
参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.59g，收率60.20％；m.p.：228.4-232.1℃；ms:423.21295[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.11(s,1h),9.16(d,j＝5.8hz,1h),7.45(s,1h),7.37(d,j＝8.1hz,1h),7.18
–
7.20(m,1h),6.88(d,j＝7.4hz,1h),5.05(s,1h),4.02(d,j＝4.8hz,2h),3.41(s,7h),3.21(s,3h),2.28(s,3h),1.92(s,4h)。
[0111]
实施例3：
[0112]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs03)的制备
[0113]
参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.63g，收率59.70％；m.p.：271.5-274.6℃；ms:475.16934[m-h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.55(s,1h),9.21(s,1h),8.11(s,1h),7.77(d,j＝8.0hz,1h),7.56(s,1h),7.42(s,1h),5.11(s,1h),4.12(s,2h),3.44(s,3h),3.40(s,4h),3.23(s,3h),1.92(s,4h)。
[0114]
实施例4：
[0115]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(4-氟苯基)乙酰胺(xqs04)的制备
[0116]
参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.49g，收率58.31％；m.p.：241.5-245.4
℃；ms:427.18892[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.26(s,1h),9.17(t,j＝4.9hz,1h),7.66
–
7.56(m,2h),7.16(dd,j＝9.9,7.8hz,2h),5.08(s,1h),4.05(d,j＝4.9hz,2h),3.42(s,3h),3.40(s,4h),3.22(s,3h),1.92(s,4h)。
[0117]
实施例5：
[0118]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(邻甲苯基)乙酰胺(xqs05)的制备
[0119]
参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.63g，收率61.54％；m.p.：247.9-252.3℃；ms:423.21403[m h]

；1h nmr(400mhz,)δ7.42(s,1h),7.24(s,3h),5.20(s,1h),4.17(s,2h),3.45(s,4h),3.34(s,6h),3.22(s,2h),1.94(s,3h),1.22(d,j＝10.3hz,2h).
[0120]
实施例6：
[0121]
n-(4-氯苯基)-2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs06)的制备
[0122]
参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.47g，收率57.36％；m.p.：266.6-273.0℃；ms:443.15934[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.33(s,1h),9.14(t,j＝4.8hz,1h),7.61(d,j＝8.4hz,2h),7.35(d,j＝8.4hz,2h),4.98(s,1h),4.01(d,j＝4.8hz,2h),3.38(s,3h),3.32(s,4h),3.20(s,3h),1.90(s,4h)。
[0123]
实施例7：
[0124]
n-(3-氯苯基)-2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs07)的制备
[0125]
参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.41g，收率58.36％；m.p.：253.2-256.3℃；ms:443.15961[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.40(s,1h),9.19(t,j＝4.9hz,1h),7.80
–
7.82(m,1h),7.44
–
7.46(m,1h),7.33
–
7.35(m,1h),7.12(dd,j＝8.1,2.1hz,1h),5.08(s,1h),4.08(d,j＝5.0hz,2h),3.43(s,3h),3.40(s,4h),3.22(s,3h),1.92(s,4h)。
[0126]
实施例8：
[0127]
2-{[1,3-二甲基-2,4-二氧代-7-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-苯基乙酰胺(xqs08)的制备
[0128]
参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.40g，收率60.87％；m.p.：245.2-249.6℃；ms:409.19876[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.20(s,1h),9.19(t,j＝4.9hz,1h),7.69
–
7.52(m,2h),7.37
–
7.24(m,2h),7.06
–
7.08(m,1h),5.10(s,1h),4.07(d,j＝4.9hz,2h),3.43(s,3h),3.40(s,4h),3.22(s,3h),1.92(s,4h)。
[0129]
实施例9：
[0130]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs09)的制备
[0131]
采用实施例1的方法制得化合物7-氯-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮；
[0132]
步骤iv：将7-氯-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮(6.85g,28.42mmol)、三乙胺(5.75g,56.84mmol)、二甲胺盐酸盐(3.45g,42.63mmol)和50ml乙醇置于100ml圆底烧瓶中，回流过夜反应8h后，将反应液冷却至室温，滤出析出的固体，乙醇洗涤，真空下干燥得7-(二甲氨基)-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮，
浅绿色固体，产量6.76g，产率95.11％。
[0133]
步骤v：将7-(二甲氨基)-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮(2.97g,11.88mmol),三乙胺(5.75g,56.84mmol)和0.1g 4-二甲氨基吡啶溶于15ml乙腈中，再将溶于10ml乙腈的对甲基苯磺酰氯(3.34g,30mmol)溶液快滴加入反应瓶内，室温搅拌20min后加热回流反应3h，将反应液冷却至室温，析出大量固体，抽滤，用乙醇洗涤固体，干燥后得7-(二甲氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基对甲苯磺酸盐，黄白色固体，产量3.61g，产率75.22％。
[0134]
步骤vi：称量7-(二甲氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基对甲苯磺酸盐(0.81g,2mmol)、2-氨基-[3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺盐酸盐(0.75g,3mmol)、三乙胺(0.61g,6mmol)和15ml正丁醇于50ml圆底烧瓶内，加热至125℃回流反应8小时。tlc监测反应完全后，冷却至室温，有大量白色晶体析出。滤出产生的晶体，并用甲醇洗涤，干燥后用二氯甲烷再次重结晶，即可得xqs09，白色固体，产量0.64g，产率53.55％。m.p.：251.8-254.7℃；ms:451.17046[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.56(s,1h),9.22(s,1h),8.11(s,1h),7.77(d,j＝8.1hz,1h),7.55
–
7.57(m,1h),7.42(d,j＝7.7hz,1h),5.27(s,1h),4.14(d,j＝4.7hz,2h),3.45(s,3h),3.23(s,3h),3.06(s,6h)。
[0135]
实施例10：
[0136]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙酰胺(xqs10)的制备
[0137]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.55g，收率61.93％；m.p.：248.1-252.5℃；ms:465.14876[m-h]-；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.41(s,1h),9.17(s,1h),7.70(d,j＝8.8hz,2h),7.31(d,j＝8.5hz,2h),5.24
–
5.17(s,1h),4.09(d,j＝4.5hz,2h),3.42(s,3h),3.22(s,3h),3.04(s,6h)。
[0138]
实施例11：
[0139]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs11)的制备
[0140]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.41g，收率62.86％；m.p.：269.5-273.3℃；ms:449.15399[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.58(s,1h),9.21(s,1h),7.80(s,2h),7.68(s,2h),5.26(s,1h),4.14(s,2h),3.44(s,3h),3.23(s,3h),3.06(s,6h)。
[0141]
实施例12：
[0142]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(4-氟苯基)乙酰胺(xqs12)的制备
[0143]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.51g，收率68.64％；m.p.：260.3-265.5℃；ms:401.17326[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.26(s,1h),9.15(t,j＝4.7hz,1h),7.66
–
7.55(m,2h),7.13
–
7.15(m,2h),5.16(s,1h),4.03(d,j＝4.8hz,2h),3.39(s,3h),3.20(s,3h),3.02(s,6h)。
[0144]
实施例13：
[0145]
2-{[7-(二甲氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(2-氟苯基)乙酰胺(xqs13)的制备
[0146]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.55g，收率61.29％；m.p.：276.7-279.9
℃；ms:401.17357[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.99(s,1h),9.13(s,1h),7.94(d,j＝9.2hz,1h),7.31
–
7.23(m,1h),7.17(s,2h),5.16(s,1h),4.10(d,j＝4.9hz,2h),3.37(s,3h),3.19(s,3h),3.02(s,6h)。
[0147]
实施例14：
[0148]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(邻甲苯基)乙酰胺(xqs14)的制备
[0149]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.39g，收率61.48％；m.p.：273.9℃-276.6℃；ms:397.19868[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.52(s,1h),9.16(s,1h),7.46(s,1h),7.29
–
7.04(m,3h),5.23(s,1h),4.10(s,2h),3.40(s,3h),3.20(s,3h),3.05(s,6h),2.21(s,3h)。
[0150]
实施例15：
[0151]
n-(4-氯苯基)-2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs15)的制备
[0152]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.49g，收率59.63％；m.p.：281.6℃-286.3℃；ms:415.12801[m-h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.34(s,1h),9.14(t,j＝4.7hz,1h),7.61(d,j＝8.8hz,2h),7.38
–
7.31(m,2h),5.13(s,1h),4.03(d,j＝4.7hz,2h),3.39(s,3h),3.20(s,3h),3.01(s,6h)。
[0153]
实施例16：
[0154]
n-(3-氯苯基)-2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs16)的制备
[0155]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.45g，收率62.65％；m.p.：210.8-213.4℃；ms:417.14376[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.43(s,1h),9.17(t,j＝4.9hz,1h),7.80
–
7.82(m,1h),7.44(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.32
–
7.34(m,1h),7.15
–
7.07(m,1h),5.20(s,1h),4.08(d,j＝4.9hz,2h),3.42(s,3h),3.22(s,3h),3.04(s,6h)。
[0156]
实施例17：
[0157]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-苯乙酰胺(xqs17)的制备
[0158]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.40g，收率61.19％；m.p.：260.8-264.3℃；ms:383.18306[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.20(s,1h),9.15(t,j＝4.8hz,1h),7.60(d,j＝7.9hz,2h),7.30
–
7.32(m,2h),7.05
–
7.07(m,1h),5.16(s,1h),4.03(d,j＝4.7hz,2h),3.39(s,3h),3.20(s,3h),3.02(s,6h)。
[0159]
实施例18：
[0160]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(对甲苯基)乙酰胺(xqs18)的制备
[0161]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.51g，收率59.99％；m.p.：272.1-277.3℃；ms:419.18065[m h]

；1h nmr(400mhz,)δ11.98(s,1h),10.12(s,1h),9.19(t,j＝4.9hz,1h),7.48(d,j＝8.2hz,2h),7.13(s,1h),5.27(d,j＝2.8hz,1h),4.08(d,j＝5.0hz,2h),3.31(s,6h),3.23(s,6h),2.25(s,3h).
[0162]
实施例19：
[0163]
2-{[7-(二甲基氨基)-1,3-二甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(间甲苯基)乙酰胺(xqs19)的制备
[0164]
参照实施例9的制备方法，得到白色固体0.56g，收率63.26％；m.p.：227.8-230.4℃；ms:397.19861[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.13(s,1h),9.17(t,j＝4.8hz,1h),7.45(d,j＝2.1hz,1h),7.41
–
7.33(m,1h),7.18
–
7.20(m,1h),6.87
–
6.89(m,1h),5.19(s,1h),4.04(d,j＝4.8hz,2h),3.41(s,3h),3.21(s,3h),3.04(s,6h),2.28(s,3h)。
[0165]
实施例20：
[0166]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙酰胺(xqs20)的制备
[0167]
采用实施例1的方法制得化合物7-氯-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮。
[0168]
步骤iv：将7-氯-1,3-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮(6.85g,28.42mmol)、三乙胺(5.75g,56.84mmol)、n-甲基哌嗪(3.45g,42.63mmol)和50ml乙醇置于100ml圆底烧瓶中，回流过夜反应8h后，将反应液冷却至室温，滤出析出的固体，乙醇洗涤，真空下干燥得1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮，浅绿色固体，产量6.36g，产率95.11％。
[0169]
步骤v：将1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5(1h,3h,8h)-三酮(2.97g,11.88mmol),三乙胺(5.75g,56.84mmol)和0.1g 4-二甲氨基吡啶溶于15ml乙腈中，再将溶于10ml乙腈的对甲基苯磺酰氯(3.34g,30mmol)溶液快滴加入反应瓶内，室温搅拌20min后加热回流反应3h，将反应液冷却至室温，析出大量固体，抽滤，用乙醇洗涤固体，干燥后得1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基对甲苯磺酸盐，黄白色固体，产量3.70g，产率75.22％。
[0170]
步骤vi：称量1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基对甲苯磺酸盐(0.81g,2mmol)、2-氨基-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙酰胺盐酸盐(0.75g,3mmol)、三乙胺(0.61g,6mmol)和15ml正丁醇于50ml圆底烧瓶内，加热至125℃回流反应8小时。tlc监测反应完全后，冷却至室温，有大量白色晶体析出。滤出产生的晶体，并用甲醇洗涤，干燥后用二氯甲烷再次重结晶，即可得xqs21，白色固体，产量0.67g，产率53.55％。m.p.：290.4-296.2℃；ms:522.20778[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.38(s,1h),9.19(t,j＝5.0hz,1h),7.74
–
7.67(m,2h),7.32(d,j＝8.6hz,2h),5.44(s,1h),4.12(d,j＝5.0hz,2h),3.56(t,j＝5.0hz,4h),3.40(s,3h),3.22(s,3h),2.36(t,j＝5.0hz,4h),2.20(s,3h)。
[0171]
实施例21：
[0172]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(间甲苯基)乙酰胺(xqs21)的制备
[0173]
参照实施例20的制备方法，得到白色固体0.55g，收率64.56％；m.p.：248.1℃～253.3℃；ms:452.24018[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.10(s,1h),9.21(t,j＝5.0hz,1h),7.44(s,1h),7.36(d,j＝8.2hz,1h),7.19
–
7.21(m,1h),6.89(d,j＝7.5hz,1h),5.49(s,1h),4.11(d,j＝5.1hz,2h),3.58(t,j＝5.0hz,4h),3.43(s,3h),3.23(s,3h),2.37(t,j＝5.0hz,4h),2.28(s,3h),2.21(s,3h)。
[0174]
实施例22：
[0175]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs22)的制备
[0176]
参照实施例20的制备方法，得到白色固体0.55g，收率63.62％；m.p.：309.5-314.1℃；ms:506.21225[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.55(s,1h),9.21(s,1h),7.80(d,j＝8.2hz,2h),7.68(d,j＝8.4hz,2h),5.48(s,1h),4.17(d,j＝5.0hz,2h),3.57(s,4h),3.42(s,3h),3.23(s,3h),2.37(t,j＝4.9hz,4h),2.20(s,3h)。
[0177]
实施例23：
[0178]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(4-氟苯基)乙酰胺(xqs23)的制备
[0179]
参照实施例20的制备方法，得到白色固体0.51g，收率61.69％；m.p.：292.7-297.3℃；ms:456.21531[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.24(s,1h),9.19(t,j＝5.1hz,1h),7.65
–
7.57(m,2h),7.15
–
7.17(m,2h),5.48(s,1h),4.11(d,j＝5.1hz,2h),3.61
–
3.54(m,4h),3.42(s,3h),3.22(s,3h),2.37(t,j＝5.0hz,4h),2.21(s,3h)。
[0180]
实施例24：
[0181]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-(2-氟苯基)乙酰胺(xqs24)的制备
[0182]
参照实施例20的制备方法，得到白色固体0.48g，收率58.74％；m.p.：280.6-283.6℃；ms:456.21483[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.96(s,1),9.19(t,j＝5.3hz,1h),7.90
–
7.95(m,1h),7.25
–
7.28(m,1h),7.14
–
7.19(m,2h),5.50(s,1h),4.19(d,j＝5.3hz,2h),3.59(s,4h),3.42(s,3h),3.22(s,3h),2.40(s,4h),2.23(s,3h)。
[0183]
实施例25：
[0184]
n-(4-氯苯基)-2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs25)的制备
[0185]
参照实施例20的制备方法，得到白色固体0.55g，收率65.62％；m.p.：291.6-296.9℃；ms:472.18573[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.31(s,1h),9.20(t,j＝5.1hz,1h),7.67
–
7.58(m,2h),7.42
–
7.33(m,2h),5.48(s,1h),4.13(d,j＝5.1hz,2h),3.57(t,j＝4.8hz,4h),3.42(s,3h),3.23(s,3h),2.37(t,j＝5.0hz,4h),2.20(s,3h)。
[0186]
实施例26：
[0187]
n-(3-氯苯基)-2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}乙酰胺(xqs26)的制备
[0188]
参照实施例20的制备方法，得到白色固体0.50g，收率60.11％；m.p.：268.3-273.4℃；ms:472.18662[m h]

；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.36(s,1h),9.17(t,j＝4.9hz,1h),7.80(s,1h),7.44(d,j＝8.2hz,1h),7.32
–
7.34(m,1h),7.11(d,j＝7.9hz,1h),5.40(s,1h),4.09(d,j＝4.9hz,2h),3.54(t,j＝5.0hz,4h),3.39(s,3h),3.21(s,3h),2.36(t,j＝4.9hz,4h),2.20(s,3h)。
[0189]
实施例27：
[0190]
2-{[1,3-二甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基]氨基}-n-苯乙酰胺(xqs27)的制备
基)氨基]-n-(4-氟苯基)乙酰胺(xqs30)的制备
[0203]
参照实施例29的制备方法，得到白色固体0.50g，收率61.78％；m.p.：259.0-262.3℃；ms:440.9[m-h]-；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.23(s,1h),9.21(t,j＝5.1hz,1h),7.66
–
7.54(m,2h),7.21
–
7.10(m,2h),5.45(s,1h),4.10(d,j＝5.1hz,2h),3.68(dd,j＝5.9,3.8hz,4h),3.53(t,j＝4.8hz,4h),3.41(s,3h),3.22(s,3h)。
[0204]
实施例31：
[0205]
2-[(1,3-二甲基-7-吗啉基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基)氨基]-n-(对甲苯基)乙酰胺(xqs31)的制备
[0206]
参照实施例29的制备方法，得到白色固体0.44g，收率60.93％；m.p.：295.4-295.9℃；ms:437.1[m-h]-；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.08(s,1h),9.21(t,j＝5.1hz,1h),7.47(d,j＝8.2hz,2h),7.12(d,j＝8.1hz,2h),5.47(s,1h),4.09(d,j＝5.1hz,2h),3.68(dd,j＝5.8,3.8hz,4h),3.54(t,j＝4.8hz,4h),3.42(s,3h),3.22(s,3h),2.25(s,3h)。
[0207]
实施例32：
[0208]
n-(4-氯苯基)-2-[(1,3-二甲基-7-吗啉基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基)氨基]乙酰胺(xqs32)的制备
[0209]
参照实施例29的制备方法，得到白色固体0.40g，收率57.82％；m.p.：291.0-295.3℃；ms:456.9[m-h]-；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.31(s,1h),9.21(t,j＝5.0hz,1h),7.67
–
7.56(m,2h),7.41
–
7.28(m,2h),5.45(s,1h),4.11(d,j＝5.1hz,2h),3.67(t,j＝4.7hz,4h),3.53(t,j＝4.8hz,4h),3.41(s,3h),3.22(s,3h)。
[0210]
实施例33：
[0211]
2-[(1,3-二甲基-7-吗啉基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基)氨基]-n-[3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs33)的制备
[0212]
参照实施例29的制备方法，得到白色固体0.60g，收率60.82％；m.p.：254.5-257.0℃；ms:490.9[m-h]-；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.51(s,1h),9.23(t,j＝5.0hz,1h),8.09(s,1h),7.76(d,j＝8.2hz,1h),7.54
–
7.56(m,1h),7.41(d,j＝7.8hz,1h),5.46(s,1h),4.15(d,j＝5.1hz,2h),3.67(t,j＝4.7hz,4h),3.60
–
3.48(m,4h),3.41(s,3h),3.22(s,3h)。
[0213]
实施例34：
[0214]
2-[(1,3-二甲基-7-吗啉基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基)氨基]-n-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(xqs34)的制备
[0215]
参照实施例29的制备方法，得到白色固体0.52g，收率61.69％；m.p.：295.5-299.4℃；ms:491.0[m-h]-；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.54(s,1h),9.23(t,j＝5.1hz,1h),7.80(d,j＝8.5hz,2h),7.67(d,j＝8.6hz,2h),5.45(s,1h),4.16(d,j＝5.1hz,2h),3.68(t,j＝4.8hz,4h),3.53(t,j＝4.8hz,4h),3.41(s,3h),3.22(s,3h)。
[0216][0217]
[0218]
[0219]
[0220]
[0221][0222]
药理实施例
[0223]
实施例35：受试化合物对mcf7、a375、sk-mel-2、sk-hep-1细胞增殖的抑制活性
[0224]
(1)实验材料
[0225]
细胞系：mcf7、a375、sk-mel-2、sk-hep-1细胞分别以4000、5000、4000、4000个/孔的密度铺于96孔板，每孔200ul，24h后使用。
[0226]
编号xqs01-xqs34目标化合物：以dmso溶解，用培养液稀释配制为100μm、50μm、25μm、12.5μm、6.25μm、3.125μm六个不同浓度保存于-20℃待用，dmso在培养液中的终浓度低于0.1％。
[0227]
阳性对照药：5-氟尿嘧啶(5-fu,fluorouracil)。
[0228]
mtt：以pbs溶解为2mg/ml，保存于-20℃。
[0229]
(2)实验方法
[0230]
利用mtt方法，选取mcf7、a375、sk-mel-2细胞来评价供试样品的抗肿瘤增值活性。mcf7、a375、sk-mel-2细胞株在dmem培养基上进行培养，该培养基包含10％小牛血清(fbs)。当细胞增殖至80-90％时使其合并随后进行不超过20代的传代培养，然后在下一步处置前使它们适应环境达到24h。将这些细胞置于96孔板上，然后在含有5％co2、恒温37℃的孵箱中培养至细胞贴壁完全。24h过后加入不同浓度的本发明代表性化合物xqs01-xqs34。再经
过24h的培养，向其中加入mtt(2mg/ml)并继续培养4h。移除培养基质，将晶体溶解于dmso中，利用酶标仪(thermo multiskan go,thermo fisher,美国)在570nm波长下测量吸光度。根据公式：细胞生长抑制率＝(1-药物组od值/对照组od值)
×
100％，计算相应浓度下的细胞生长抑制率，以受试化合物的不同浓度及对细胞的抑制率作对数曲线，计算受试化合物相对应的ic
50
值。按照上述方法测定本发明代表性化合物。
[0231]
[0232]
[0233][0234]
在上述制得的34个化合物中，少数化合物表现出了良好的抑制a549、a375、sk-mel-2和sk-hep-1肿瘤细胞增殖活性，其中以xqs27为最佳，对四株肿瘤细胞的抑制增殖活性(分别为10.52
±
0.14μm、5.2
±
0.09μm、11.79
±
0.25μm、2.04
±
0.15μm)都明显优于阳性对照药5-氟尿嘧啶(分别为13.42
±
0.59μm、13.98
±
0.25μm、9.38
±
0.12μm、5.34
±
0.62μm)。此外xqs33表现出了对两株恶性黑色素瘤细胞a375和sk-mel-2优于5-氟尿嘧啶的抑制增至活性。
[0235]
制剂实施例
[0236]
下列制剂实施例仅举例说明本发明的保护范围，但不以任何方式构成限定。以下实施例中所述的活性化合物即指上述实施例中制得的化合物xqs01～xqs34。
[0237]
实施例36：片剂配方
[0238]
活性化合物25-1000mg，淀粉45mg，微晶纤维素35mg，聚乙烯吡咯烷酮(为10％水溶液)4ml，羧甲基纤维素钠4.5mg，硬脂酸镁0.5mg，滑石1mg。
[0239]
实施例37：悬浮剂配方
[0240]
活性化合物0.1-1000mg，羧甲基纤维素钠50mg，糖浆1.25mg，苯甲酸钠0.1mg，矫味剂25mg，着色剂5mg，加纯水至5ml。
[0241]
实施例38：气溶胶配方
[0242]
活性化合物0.25mg，乙醇25-75ml，抛射剂22(氯二氟甲烷)70mg。
[0243]
实施例39：栓剂配方
[0244]
活性化合物250mg，饱和脂肪酸甘油酯类2000ml。
[0245]
实施例40：可注射制剂配方
[0246]
活性化合物50mg，等渗盐溶液1000ml。
[0247]
实施例41：软膏配方
[0248]
微粉化活性化合物0.025g，液体石蜡10g，加软白蜡至100g。
[0249]
实施例42：软膏配方
[0250]
活性化合物0.025g，丙二醇5g，脱水山梨醇倍半油酸酯5g，液体石蜡10g，加软白蜡至100g。
[0251]
实施例43：水包油霜剂配方
[0252]
活性化合物0.025g，十六醇5g，单硬脂酸甘油酯5g，液体石蜡10g，鲸蜡醇聚氧乙烯醚2g，柠檬酸0.1g，柠檬酸钠0.2g，丙二醇35g，加水至100g。
[0253]
实施例44：水包油霜剂配方
[0254]
微粉化活性化合物0.025g，软白蜡15g，液体石蜡5g，十六醇5g，sorbimacrogol stearate(特定药用辅料级的吐温65)2g，脱水山梨醇单硬脂酸酯0.5g，山梨酸0.2g，柠檬酸0.1g，柠檬酸钠0.2g，加水至100g。
[0255]
实施例45：油包水霜剂配方
[0256]
活性化合物0.025g，软白蜡35g，液体石蜡5g，脱水山梨醉倍半油酸酯5g，山梨酸0.2g，柠檬酸0.1g，柠檬酸钠0.2g，加水至100g。
[0257]
实施例46：洗剂配方
[0258]
活性化合物0.25g，异丙醇0.5ml，羧基乙烯基聚合物3mg，naoh 2mg，加水至1g。
[0259]
实施例47：注射用悬浮液配方
[0260]
活性化合物10mg，羧甲基纤维素钠7mg，nacl 7mg，聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯0.5mg，苯甲醇8mg，加无菌水至1ml。
[0261]
实施例48：用于口腔和鼻吸入的气雾剂配方
[0262]
活性化合物0.1％w/w，脱水山梨醇三油酸酯0.7％w/w，三氯氟甲烷24.8％w/w，二氯四氟乙烷24.8％w/w，二氯二氟甲烷49.6％w/w。
[0263]
实施例49：雾化溶液配方
[0264]
活性化合物7mg，丙二醇5mg，加水至10g。
[0265]
实施例50：用于吸入的粉剂配方
[0266]
用下述成份的混合物填充明质胶囊，微粉化活性化合物0.1mg，乳糖20mg，借助于吸入装置吸入该粉末。
[0267]
实施例51：用于吸入的粉剂配方
[0268]
球化的粉剂装入多剂粉末吸入器，每剂含有微粉化活性化合物0.1mg。
[0269]
实施例52：用于吸入的粉剂配方
[0270]
将球化的粉剂装入多剂粉末吸入器，每剂含有微粉化活性化合物0.1mg，微粉化乳糖1mg。
[0271]
实施例53：胶囊剂配方
[0272]
活性化合物1.0mg，小糖球321mg，aquacoat ecd 30 6.6mg，乙酰柠檬酸三丁酯0.5mg，吐温-80 0.1mg，eudragit l 100-55 17.5mg，柠檬酸三乙酯1.8mg，滑石粉8.8mg，消泡剂mms 0.lmg。
[0273]
实施例54：胶囊剂苗体配方
[0274]
活性化合物2.0mg，小糖球305mg，aquocoat ecd 30 5.0mg，乙酰柠檬三丁酯0.4mg，吐温-80 0.14mg，eudragit ne30 d 12.6mg，eudragit s 100 12.6mg，滑石粉
0.l6mg。
[0275]
实施例55：灌肠剂配方
[0276]
活性化合物2mg，羧甲基纤维素钠25mg，乙二胺四乙酸二钠0.5mg，对羟基苯甲酸甲酯0.8mg，对羟基苯甲酸丙酯0.2mg，氯化钠7mg，柠檬酸1.8mg，吐温-80 0.01mg，加纯水至1ml。
[0277]
实施例56：含有脂质体的配方
[0278]
a.滴注配方的制备
[0279]
将二棕榈酰基卵磷脂(45mg)，二肉豆蔻酰基卵磷脂(7mg)，二棕榈酰基磷脂酰甘油(1mg)和活性化合物(5mg)放入玻璃管中，将所有组份溶解在氯仿中，用n2蒸发掉大部分溶剂，然后减压，由此，在玻璃管表面形成脂质薄膜.在该脂质中加入水溶液(0.9％nacl)，在高于脂质的转相温度下形成脂质体，所得悬液含有大小范围为极小囊泡至2μm的脂质体。
[0280]
b.吸入用配方的制备
[0281]
按实施例a制备脂质体，其中的水溶液含有10％乳糖，乳糖与脂质之比为7:3。将该脂质体悬液用干冰冷冻，并且进行冷冻干燥，将干燥产物微粉化，所得颗粒的质均空气动力学直径(mmad)约为2μm。
[0282]
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。