一种粪便样本PIK3CA基因突变试剂盒的制作方法

一种粪便样本pik3ca基因突变试剂盒
技术领域
1.本发明涉及一种pik3ca基因突变试剂盒，具体为一种粪便样本pik3ca基因突变试剂盒。


背景技术：

2.试剂盒用于盛放检测化学成分、药物残留、病毒种类等化学试剂的盒子。一般医院、制药企业使用。
3.现有的基因突变试剂盒在使用时存在检测单一以及特异性和准确性低的情况，并且试剂盒在实际的摆放过程中，由于试剂盒存在重心不均衡现象，导致试剂盒在摆放时极易产生倒落现象，并且极易受到外力影响产生摇晃，进而从放置面掉落，引发试剂盒内部物体损坏；当对试剂盒进行携带时，受外力影响，试剂盒容易出现放置不平稳的现象，此时试剂盒内部物体就会出现方向颠覆或倾斜的现象，进而引导物体出现渗漏等现象，不利于保存试剂盒内部物体，为此提出了一种粪便样本pik3ca基因突变试剂盒。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种粪便样本pik3ca基因突变试剂盒，以解决上述背景技术中提出的问题。
5.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种粪便样本pik3ca基因突变试剂盒，用于pik3ca突变检测与gapdh内参；包含核酸提取、肽核酸钳(pna)法检测，所述核酸提取采用丽纳芯核酸提取试剂盒，对保存液中粪便进行核酸提取，nanodrop检测a26/a280，检测dna浓度，所述肽核酸钳(pna)法检测pik3ca的突变80％发生在9号和20号外显子上，有e542k e545d e545k h1047r h1047l5种突变类型；
6.包括隔离盒，所述隔离盒的顶部设置有用于封闭隔离盒或开启隔离盒的盒盖，所述隔离盒的外部两侧均设置有平行槽，所述平行槽的内腔安装有两个用于支撑的加强杆，两个加强杆呈上下对应设置，两个所述加强杆的表面均设置有若干个呈等距设置的定位孔，两个所述加强杆的中部滑动套接有支撑杆，所述支撑杆的内腔安装有卡位机构，所述支撑杆的中部开设有控制环，所述支撑杆的两侧均设置有配重块；
7.所述隔离盒的内壁安装有防护棉层，所述隔离盒的中部安装有用于转向驱动的微型电机，所述微型电机的输出端安装有支撑用的轴承，且轴承的数量有两个，所述轴承的侧面安装有旋转用驱动杆，所述驱动杆的一端安装有放置试剂用的存储盒，所述存储盒的形状呈圆形设置。
8.作为本发明进一步的方案：所述隔离盒的底部开设有定位槽，且盒盖的顶部固定有定位块，所述定位块的外壁与定位槽的内腔相契合。
9.作为本发明进一步的方案：所述卡位机构包括复位弹簧、限位板、定位杆、卡位块，所述支撑杆的内腔安装有可伸缩的复位弹簧，所述复位弹簧的一端安装有限位板，所述限位板的侧面安装有可进行活塞运动的定位杆，所述定位杆的一端安装有卡位块。
10.作为本发明进一步的方案：所述支撑杆的侧面开设有活动槽，且活动槽的直径值小于限位板的直径值。
11.作为本发明进一步的方案：所述卡位块的外部与定位孔的内腔相卡接，所述卡位块的形状呈半圆形，所述卡位块的直径值小于活动槽的直径值。
12.作为本发明进一步的方案：所述存储盒包括下盒体、转向杆、转向管、上盒体，所述驱动杆的一端安装有下盒体，所述下盒体的侧壁固定有转向杆，所述转向杆的一端安装有转向管，所述转向管的一端安装有上盒体。
13.作为本发明进一步的方案：所述上盒体的顶部开设有安装槽，所述安装槽的内腔固定有操控杆，所述上盒体的侧壁表面固定有橡胶材质的弹性密封条，所述下盒体的顶部侧壁开设有密封槽，所述密封槽的内腔与密封条的外部相匹配。
14.与现有技术相比，本发明的有益效果是：在手指插入控制环中，根据需要调节的重量方向，利用控制环带动支撑杆在加强杆上进行水平移动，加强杆起到了对隔离盒的支撑效果，使得隔离盒不易变形，支撑杆移动时同步带动配重块进行移动，当支撑杆移动到所需位置时，卡位机构上的卡位块在复位弹簧推动限位板，随后限位板带动定位杆使卡位块进入定位孔中，此时实现了支撑杆移动后的位置固定，进而利用配重块改变了整个试剂盒的重心，实现了试剂盒的稳定放置；在携带试剂盒时，启动微型电机，微型电机带动轴承使驱动杆旋转，驱动杆则带动存储盒进行同步旋转，进而使得携带过程中的存储盒不会因为携带位置的变化，导致存储盒内部物体颠倒或倾斜，有效的实现了存储盒内部试剂瓶等物体的稳定放置，不会产生泄露，同时配合防护棉层还起到保温效果，确保了使用的检测多样，特异性及准确性高。
附图说明
15.图1为粪便样本pik3ca基因突变试剂盒的整体结构示意图；
16.图2为粪便样本pik3ca基因突变试剂盒中的侧面结构示意图；
17.图3为粪便样本pik3ca基因突变试剂盒中的卡位机构安装结构示意图；
18.图4为粪便样本pik3ca基因突变试剂盒中的隔离盒内腔结构示意图；
19.图5为粪便样本pik3ca基因突变试剂盒中的存储盒结构示意图；
20.图6为粪便样本pik3ca基因突变试剂盒中的实验结果图。
21.图中标记：1、隔离盒；2、盒盖；3、定位块；4、定位槽；5、平行槽；6、加强杆； 7、定位孔；8、支撑杆；9、卡位机构；91、复位弹簧；92、限位板；93、定位杆；94、卡位块；10、控制环；11、防护棉层；12、微型电机；13、轴承；14、驱动杆；15、存储盒；151、下盒体；152、转向杆；153、转向管；154、上盒体；16、操控杆；17、密封条； 18、密封槽；19、配重块。
具体实施方式
22.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
23.请参阅图1～6，本发明实施例中，一种粪便样本pik3ca基因突变试剂盒，用于
pik3ca突变检测与gapdh内参；包含核酸提取、肽核酸钳(pna)法检测，所述核酸提取采用丽纳芯核酸提取试剂盒，对保存液中粪便进行核酸提取，nanodrop检测a26/a280，检测dna浓度，所述肽核酸钳(pna)法检测pik3ca的突变80％发生在9号和20号外显子上，有e542ke545de545kh1047rh1047l5种突变类型；
24.包括隔离盒1，所述隔离盒1的顶部设置有用于封闭隔离盒1或开启隔离盒1的盒盖2，所述隔离盒1的外部两侧均设置有平行槽5，所述平行槽5的内腔安装有两个用于支撑的加强杆6，两个加强杆6呈上下对应设置，两个所述加强杆6的表面均设置有若干个呈等距设置的定位孔7，两个所述加强杆6的中部滑动套接有支撑杆8，所述支撑杆8的内腔安装有卡位机构9，所述支撑杆8的中部开设有控制环10，所述支撑杆8的两侧均设置有配重块19；
25.所述隔离盒1的内壁安装有防护棉层11，所述隔离盒1的中部安装有用于转向驱动的微型电机12，所述微型电机12的输出端安装有支撑用的轴承13，且轴承13的数量有两个，所述轴承13的侧面安装有旋转用驱动杆14，所述驱动杆14的一端安装有放置试剂用的存储盒15，所述存储盒15的形状呈圆形设置。
26.其中，隔离盒1的底部开设有定位槽4，且盒盖2的顶部固定有定位块3，所述定位块3的外壁与定位槽4的内腔相契合，当多个试剂盒进行叠加放置时，利用定位块3与定位槽4的配合，可实现多个试剂盒叠加放置时的稳定性。
27.其中，所述卡位机构9包括复位弹簧91、限位板92、定位杆93、卡位块94，所述支撑杆8的内腔安装有可伸缩的复位弹簧91，所述复位弹簧91的一端安装有限位板92，所述限位板92的侧面安装有可进行活塞运动的定位杆93，所述定位杆93的一端安装有卡位块94，卡位机构9可对加强杆6进行组装，进而实现支撑杆8的位置限定，实现支撑杆8移动后的位置稳定性。
28.其中，所述支撑杆8的侧面开设有活动槽，且活动槽的直径值小于限位板92的直径值，限位板92无法通过活动槽，使卡位机构9不会出现脱离支撑杆8的情况。
29.其中，所述卡位块94的外部与定位孔7的内腔相卡接，所述卡位块94的形状呈半圆形，所述卡位块94的直径值小于活动槽的直径值，由于卡位块94呈半圆形，使得卡位块94与定位孔7分离较为简单，同时卡位块94可通过活动槽进行伸缩，两者互不阻碍。
30.其中，所述存储盒15包括下盒体151、转向杆152、转向管153、上盒体154，所述驱动杆14的一端安装有下盒体151，所述下盒体151的侧壁固定有转向杆152，所述转向杆152的一端安装有转向管153，所述转向管153的一端安装有上盒体154，通过转向杆152与转向管153的配合，可实现上盒体154在下盒体151上的开合运动。
31.其中，所述上盒体154的顶部开设有安装槽，所述安装槽的内腔固定有操控杆16，所述上盒体154的侧壁表面固定有橡胶材质的弹性密封条17，所述下盒体151的顶部侧壁开设有密封槽18，所述密封槽18的内腔与密封条17的外部相匹配，通过拉动操控杆16可实现上盒体154的有效操作，避免缺乏施力点，利用密封条17与密封槽18的连接，实现了上盒体154与下盒体151的有效合并。
32.肽核酸钳(pna)法检测pik3ca的突变80％发生在9号和20号外显子上，有e542ke545de545kh1047rh1047l5种突变类型
33.引物：
34.正向引物反向引物
[0035][0036]
探针：
[0037]
探针
[0038]
e543k atcctctctctaaaatcact
[0039]
e545k aaatcactaagcagga
[0040]
e545d tctgaaatcactgatcag
[0041]
h1047r atgatgcacgtcatggt
[0042]
h1047l atgcacttcatggtggc
[0043]
荧光信号：
[0044]
5' 3'
[0045]
fam bhq-1
[0046]
joe tamra
[0047]
cy3 bhq-2
[0048]
pna bloker:
[0049]
pna
[0050]
e543k tctctgaaatcactgagcagga
[0051]
e545k tctgaaatcactgagcagga
[0052]
e545d tcctgctcagtgatttcaga
[0053]
h1047r atgaatgatgcacatcatg
[0054]
h1047l atgaatgatgcacatcatg
[0055]
内参基因引物：
[0056]
f:agaaggctggggctcatttg
[0057]
r:aggggccatccacagtcttc
[0058]
荧光pcr 反应条件
[0059]
试剂名称 用量
[0060]
2x chamq geno-snp probe master mix 10ul
[0061]
primer f(10um)0.2-0.6ul
[0062]
primer r(10um)0.2-0.7ul
[0063]
taqman probe(10um)0.1-0.3ul
[0064]
template dna/cdna 2ng-10ng
[0065]
blocker pna 0.4ul
[0066]
dd h2o up to 20ul
[0067][0068]
工作时，手指插入控制环10中，根据需要调节的重量方向，利用控制环10带动支撑杆8在加强杆6上进行水平移动，加强杆6起到了对隔离盒1的支撑效果，使得隔离盒1 不易变形，支撑杆8移动时同步带动配重块19进行移动，当支撑杆8移动到所需位置时，卡位机构9上的卡位块94在复位弹簧91推动限位板92，随后限位板92带动定位杆93使卡位块94进入定位孔7中，此时实现了支撑杆8移动后的位置固定，进而利用配重块19 改变了整个试剂盒的重心，实现了试剂盒的稳定放置；在携带试剂盒时，启动微型电机12，微型电机12带动轴承13使驱动杆14旋转，驱动杆14则带动存储盒15进行同步旋转，进而使得携带过程中的存储盒15不会因为携带位置的变化，导致存储盒15内部物体颠倒或倾斜，有效的实现了存储盒15内部试剂瓶等物体的稳定放置，同时配合防护棉层11还起到保温效果。
[0069]
尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。