一种制备羟苯磺酸钙基因毒性杂质的方法与流程

1.本发明涉及化学医药领域，特别是涉及一种制备羟苯磺酸钙中基因毒性杂质的方法。


背景技术：

2.羟苯磺酸钙(calcium dobesilate)是一种作用于毛细胞血管的内皮细胞层和基底层，调节和改善毛细血管的通透性和柔韧性，增加毛细血管壁的抵抗力，降低其通透性，对淋巴循环系统有活化作用，降低血液及血浆黏稠度，纠正白蛋白/球蛋白比值，降低血小板高聚集性，降低血浆黏度，从而防止血栓形成的药物。结构式如下：
[0003][0004]
分子式：2c6h5o5s.ca，分子量：418.41
[0005]
羟苯磺酸钙由于苯环电子云密度较大，在氧化剂存在下羟基容易被氧化。形成一种2-磺酸基-1,4-苯醌结构杂质，又由于本品为苯基磺酸盐，原料重结晶过程中采用乙醇，可能会产生苯磺酸类杂质(含有遗传毒性杂质的警示结构)，该杂质与羟苯磺酸钙极性接近，水溶性好，结构不太稳定，采用合成方法进行制备，常规后处理(柱层析、萃取等)难以分离稳定的目标化合物，容易分解或成分降低。为了更好地控制羟苯磺酸钙终产品的质量，提供高纯度的2-磺酸基-1,4-苯醌杂质作为原料药或其制剂检测时的杂质对照品是非常迫切的。


技术实现要素：

[0006]
本发明要解决的技术问题是提供一种制备羟苯磺酸钙中如式ⅰ所示基因毒性杂质2-磺酸基-1,4-苯醌锰盐的方法。该方法既可以采用常规的合成方法制备出该杂质，也能满足在后续分离提纯过程中不易分解或造成杂质成分降低的风险，获得该杂质，满足研究需求。
[0007][0008]
分子式：2c6h3o5s.mn，分子量：429.23。
[0009]
本发明所述的制备方法如下：
[0010][0011]
(1)将对苯二酚加入有机溶剂中，加入磺化剂，升温反应，反应完毕后得羟苯磺酸；
[0012]
(2)将步骤(1)所得的羟苯磺酸加入到溶剂中，加入氧化剂氧化，待反应完毕后，加冰水过滤，所得滤液冻干制备得到式ⅰ所示基因毒性杂质2-磺酸基-1,4-苯醌锰盐。
[0013]
在一些实施方式中，本发明步骤(1)所述有机溶剂为烷烃类溶剂，在一种具体的实施方式中，有机溶剂为环己烷或异辛烷。
[0014]
在一些实施方式中，本发明步骤(1)所述有机溶剂用量为对苯二酚质量的3～10倍，优选的为3～7倍。
[0015]
在一些实施方式中，本发明步骤(1)所述磺化剂选自氯磺酸、浓硫酸或发烟硫酸等，从安全和经济角度考虑，优选为原料购买成本较低、易保存的浓硫酸，且发明人发现，采用浓硫酸可进一步提高产品纯度。本发明所述的浓硫酸是指质量分数大于或等于70％的硫酸水溶液。
[0016]
在一些实施方式中，本发明步骤(1)所述磺化剂用量为对苯二酚摩尔量的1～2倍，优选1.5～1.65倍。
[0017]
在一些实施方式中，本发明步骤(1)升温反应的温度为70～80℃。
[0018]
在一些实施方式中，本发明步骤(1)反应完毕后冷却至室温，过滤得羟苯磺酸。
[0019]
在一些实施方式中，步骤(2)所述溶剂为水、甲醇、乙醇、四氢呋喃或乙腈等，优选乙腈，由于无机锰盐易溶解于水中，采用乙腈作为反应溶剂可避免使用水作溶剂或水后处理过程中产物中无机锰盐的残留，可以进一步提高产物的纯度。
[0020]
在一些实施方式中，本发明步骤(2)所述溶剂用量为5～20ml/g对苯二酚。
[0021]
在一些实施方式中，本发明步骤(2)所述氧化剂为mno2、ddq或25～33％的双氧水等，为更加稳定获得目标产物优选mno2。在本发明的一些实施例中，当选用mno2时，控制加入温度低于30℃。
[0022]
在一些实施方式中，本发明步骤(2)氧化剂用量为对苯二酚摩尔量的3～7倍，优选为4.5～5.5倍。
[0023]
在一些实施方式中，本发明步骤(2)氧化反应是在室温下搅拌10～15小时。
[0024]
在一些实施方式中，本发明步骤(2)中冰水加入量为溶剂质量的3～10倍，优选4～6倍。
[0025]
在一些实施方式中，本发明步骤(2)反应完毕后，先将反应液倾入冰无水乙醇中，过滤后再加入冰水过滤，发明人发现在冰水过滤之前添加无水乙醇过滤可有效避免反应液中游离盐过滤到产品中，例如反应液中的游离锰盐，有效避免产物灼烧残渣偏高。在一些具体实施例中，冰无水乙醇加入量为溶剂质量的1～5倍，优选1～3倍。
[0026]
本发明步骤(2)中滤液冻干可以为本领域的常规方法和常规参数，例如冻干操作预冻冷却剂温度设定为-45℃，到达设定温度时间：30min，保持300min。升华干燥、解析干燥采取抽真空，并且开启加热的方式。
[0027]
本发明的有益效果为：
[0028]
本发明提供了一种操作简便、适合工业上生产的、收率高的制备羟苯磺酸钙中基因毒性杂质2-磺酸-1,4-苯醌锰盐的方法。所得产品可以用于羟苯磺酸钙原料药或其制剂的质量控制中，作为杂质对照品使用。
附图说明
[0029]
图1为基因毒性杂质2-磺酸-1,4-苯醌锰盐的核磁共振氢谱(1h-nmr)图。
[0030]
图2为基因毒性杂质2-磺酸-1,4-苯醌锰盐的高分辨质谱(hrms)图。
[0031]
图3为基因毒性杂质2-磺酸-1,4-苯醌锰盐的电感耦合等离子直读光谱(icp)图。
具体实施方式
[0032]
以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，下述实施例是为了举例说明本发明的优选的实施方案，并不是为了限制本发明的保护范围。
[0033]
本发明实施例中的原材料和试剂均为市售产品。
[0034]
本发明实施例制备方法如下：
[0035][0036]
本发明实施例若无特别说明，产物的相关检测如下：
[0037]
结合2-磺酸-1,4-苯醌锰盐对照品合成工艺路线，再经核磁共振氢谱、高分辨质谱、电感耦合等离子光谱测定确定了其化学结构。
[0038]
1)核磁共振谱(1h-nmr)
[0039]
仪器：bruker av-300型核磁共振仪
[0040]
溶剂：dmso-d6
[0041]
内标：tms
[0042]
2)高分辨质谱(hrms)
[0043]
仪器：agilent 6200q-tof质谱仪
[0044]
溶剂：甲醇
[0045]
离子化方式：esi(-)
[0046]
3)金属离子元素(icp)分析测定
[0047]
仪器：pe5300dv型电感耦合等离子直读光谱仪
[0048]
检测方法：jy/t015-1996感耦等离子体原子发射光谱分析
[0049]
实施例1
[0050]
在室温(20～25℃)、氮气保护、机械搅拌下将浓硫酸(14.7g，0.15mol)缓慢滴加入对苯二酚(10g，0.09mol)的环己烷(50g)溶液中，滴毕，加热至70～80℃反应0.5小时，冷却至室温，加入水(50ml)溶解固体，溶清后，分液，分出下层水层，将其置于一个250ml三口瓶
中，再加入纯化水(50ml)，控制内温＜30℃下加入二氧化锰(40g，0.46mol)，室温下搅拌反应12小时。反应完毕，将反应液倾入到冰水中(400ml，4v/v，以反应液体积计)，过滤除去二氧化锰残渣，所得滤液再采用0.45微米滤膜过滤，所得滤液冻干得到2-磺酸-1,4-苯醌锰盐5g，hplc：98.78％。冻干操作如下：
[0051]
控制导热油温度达到-10℃，开始进箱。
[0052]
预冻：设定导热油温度为-45℃，到达设定温度时间：30min，保持300min。
[0053]
升华干燥、解析干燥：抽真空，并且开启加热。
[0054]
升温程序：
[0055][0056]
冻干完成后加塞，出箱，轧盖。
[0057]
实施例2：
[0058]
在室温(20～25℃)、氮气保护、机械搅拌下将浓硫酸(29.4g，0.30mol)缓慢滴加入对苯二酚(20g，0.18mol)的环己烷(100g)溶液中，滴毕，加热至70～80℃反应0.5小时，冷却至室温，分离出环己烷，加入乙腈(200ml)溶解固体，溶清后，控制内温＜30℃下加入二氧化锰(80g，0.92mol)，室温下搅拌反应12小时。反应完毕，将反应液倾入冰无水乙醇中(400ml，2v/v)，过滤除去二氧化锰残渣，所得滤液再加入到冰水中(800ml，4v/v，以反应液体积计)，再采用0.45微米滤膜过滤，所得滤液冻干得到2-磺酸-1,4-苯醌锰盐14g，hplc：99.6％。冻干操作如下：
[0059]
控制导热油温度达到-10℃，开始进箱。
[0060]
预冻：设定导热油温度为-45℃，到达设定温度时间：30min，保持300min。
[0061]
升华干燥、解析干燥：抽真空，并且开启加热。
[0062]
升温程序：
[0063][0064]
冻干完成后加塞，出箱，轧盖。
[0065]
本实施例样品核磁共振氢谱参见附图1，由于样品是二价位的锰盐结构，金属锰离子对质子出峰存在干扰，造成响应偏小。
[0066]
本实施例样品高分辨质谱(hrms)参见附图2，从高分辨率分析报告中得出样品esi(-)条件下测得元素组成为：c6h4o5s，实测值和理论计算值误差小于0.0030，与2-磺酸-1,4-苯醌的分子式c6h4o5s一致。
[0067]
本实施例样品电感耦合等离子直读光谱(icp)参见附图3，2-磺酸-1,4-苯醌锰盐杂质样品中由于锰离子呈正二价态，可结合两个带有磺酸基团的母核成盐，根据母核的分子量为187.15，锰离子的分子量为54.94，根据分子量折算锰离子含量为12.8％，样品按21.3％折水后，按78.7％的含量折算后锰离子含量为10.2％，与仪器测定结果基本吻合，可初步判定供试品与目标物的分子组成一致，从而确定本品结构为锰盐结构。