一种治疗荨麻疹的复方药物组合物的制作方法

1.本发明属于药物制剂领域，涉及一种治疗荨麻疹的复方药物组合物，具体涉及包含左西替利嗪和卡介菌多糖核酸的药物组合物。


背景技术：

2.荨麻疹俗称风团、风疹团、风疙瘩、风疹块，是一种常见的皮肤病。此病的皮疹表现就像人接触了植物荨麻，所导致的皮肤损害相似，故称其为荨麻疹。此病特点是：全身泛发性风团型皮肤损害，皮疹来去迅速，消退不留痕迹，自觉痒甚，可伴有全身症状和内脏损害，如发烧、腹痛、腹泻或其他全身症状。分为急性荨麻疹、慢性荨麻疹、血管神经性水肿与丘疹状荨麻疹等。
3.慢性荨麻疹是过敏性疾病的常见病、多发病且易复发，其病因复杂，临床治疗较困难，不同程度地影响患者的生活、工作质量。现代医学认为荨麻疹患者t细胞免疫功能紊乱，t辅助细胞亚群(th1/th2)功能失调与过敏性疾病发病密切相关。慢性荨麻疹患者可能存在th2某一亚群亢进和th1某一亚群功能下降。il-4促进b细胞产生lge，ifn-r刺激b细胞产生lgg2a，这两种细胞因子与ciu发生时肥大细胞的活化具有明显的关系。
4.卡介菌多糖核酸由多糖、核酸等成分组成，从卡介菌中提取而来，是我国首创的新型治疗和免疫调节剂，具有促进t淋巴细胞的分化与增殖，抑制ige生成，刺激网状内皮系统，激活单核巨噬细胞的吞噬能力，稳定肥大细胞膜，减少组胺慢反应物质、白三烯、缓激肽与5-羟色胺、嗜酸性细胞趋化因子等一系列生物活性介质的释放，从而调节机体的免疫功能。对r-干扰素有诱生作用，而r-干扰素能抑制th2细胞的增殖，抑制il-4的产生，从而抑制ige的生成。卡介菌多糖核酸不仅可参与机体细胞免疫，而且还可参与机体体液免疫反应。可增强巨噬细胞的吞噬与消化能力，促进单核巨噬细胞增生，对肥大细胞脱颗粒过程有抑制作用，使血管活性物质释放减少，对机体变态反应的控制有重要意义。此外，卡介菌多糖核酸价格低，患者认可度也较高。
5.西替利嗪为第二代h1受体拮抗剂，起效快、具有高效、高选择性，能迅速阻断hl受体，维持时间长，且对中枢神经系统没有抑制作用，能直接对抗组胺的作用并降低变态反应部位组胺的浓度。左西替利嗪为西替利嗪的活性光学异构体，它用药量小，毒副作用较西替利嗪小，抗组胺活性、抗过敏作用优于西替利嗪，而且能减少细胞黏附分子水平，尤其是内皮白细胞黏附分子1(elam-1)和血小板选择蛋白，在体内很少被代谢，是长效、高选择性的外周h1受体拮抗剂，能抑制变态反应相关的多种炎症介质释放而起到广泛的抗炎作用，无心脏毒性，且对肝、肾功能无显著影响，无中枢神经系统镇静作用，安全性高，缓解症状后稳定的持续时间更长。
6.但左西替利嗪在水中易发生化学降解，导致疗效降低，毒副反应增加，并且可发生分子聚集现象，使溶液浑浊。左西替利嗪显示出理化性质的不稳定性，并且其难以随着时间而保持稳定性。左西替利嗪有三个主要降解产物：降解产物a(式i)、降解产物b(式ii)和降解产物e(式iii)。降解产物a和b是通过左西替利嗪的水解产生的。
[0007][0008]
联合疗法更有效，通常降低单一疗法中每种组合物所需的量，因此副作用减少并且患者顺应性提高。
[0009]
由于这些优势，药物的联合疗法的作用在过敏性疾病的治疗中增加。近年来，为了更好的“患者顺应性”以及降低治疗费用，这些以在单一剂型中含有两种活性成分的所谓“固定组合(fixcombination)”形式上市的组合越来越频繁。
[0010]
国际指南明确推荐使用固定组合。目前还没有左西替利嗪和卡介菌多糖核酸组合物产品上市。“吴汉光,肖雪玲,陈炳贵,廖绪强,陈昌鹏.卡介菌多糖核酸联合盐酸左西替利嗪治疗慢性特发性荨麻疹疗效观察[j].岭南皮肤性病科杂志,2008,(第6期)”文献中报道了卡介菌多糖核酸联合盐酸左西替利嗪治疗慢性特发性荨麻疹，对慢性特发性荨麻疹变态反应的速发相和迟发相均有明显抑制作用，达到抗过敏的效果。对110例治疗组患者观察4周有效率为82.26％，与口服盐酸左西替利嗪对照组比较差异有统计学意义。且不良反应轻微，表明卡介菌多糖核酸联合左西替利嗪治疗慢性荨麻疹疗效满意，值得临床推广应用。
[0011]
目前已公开的左西替利嗪注射液专利文献不多，wo2011003074和cn107961215a中均公开了含氯化钠的左西替利嗪注射液，但是单方左西替利嗪注射液中活性成分左西替利嗪使用量偏大，储存过程中含量不稳定，容易产生更多的相关物质，适用范围小，仍不能很好的满足临床用药的需求。
[0012]
因此开发一种盐酸左西替利嗪与卡介菌多糖核酸复方制剂具有重要临床意义，而且国外内尚无注射用左西替利嗪与卡介菌多糖核酸组合物及其相关制剂专利报道及产品上市。


技术实现要素：

[0013]
本发明的一个目的在于提供一种包括盐酸左西替利嗪与卡介菌多糖核酸的复方注射液，其旨在改善药物稳定性，同时联用起到协同治疗荨麻疹等过敏性疾病的效果，治疗时间缩短，持续给药，改善患者依从性。
[0014]
本发明一方面提供了一种治疗荨麻疹的复方药物组合物，包括两种药物活性成分，左西替利嗪盐酸盐和卡介菌多糖核酸，两者的重量比为5～25:1。
[0015]
作为优选的实施方案，左西替利嗪盐酸盐和卡介菌多糖核酸，两者的重量比为12～20:1。
[0016]
作为优选的实施方案，所述药物组合物是注射液。
[0017]
作为优选的实施方案，所述注射液还包括渗透压调节剂、ph调节剂和无菌注射用水。
[0018]
作为优选的实施方案，所述渗透压调节剂选自甘油、乳糖、甘露醇、葡萄糖、氯化钠、氯化钾、硫酸钠、山梨醇中的一种或几种。
[0019]
作为优选的实施方案，所述ph调节剂选自碳酸氢钠、氢氧化钠、磷酸二氢钠、磷酸
氢二钠、乳酸、马来酸、枸橼酸、枸橼酸钠、硼酸、盐酸中的一种或几种。
[0020]
作为优选的实施方案，所述ph调节剂为氢氧化钠或盐酸，渗透压调节剂为氯化钠。
[0021]
作为优选的实施方案，每支注射液中左西替利嗪盐酸盐含量为1～10mg，优选为2～4mg；卡介菌多糖核酸含量为0.04～25mg，优选为0.04～0.5mg；渗透压调节剂为3～15mg，优选为6～12mg；ph调节剂调节ph为4.5～6.5。
[0022]
作为优选的实施方案，每支注射液中左西替利嗪盐酸盐含量为3mg，卡介菌多糖核酸含量为0.35mg，氯化钠为7mg，氢氧化钠调节ph为5.0～5.3。
[0023]
作为优选的实施方案，所述复方注射液每支给药剂量为0.5ml至10ml的总注射体积，优选为1ml或2ml的总注射体积。
[0024]
本发明还提供了治疗荨麻疹的复方药物组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0025]
步骤1：分别称取处方量的左西替利嗪或药学上可接受的盐、卡介菌多糖核酸，投入配料罐内，加注射用水至全量的80～90％，维持药液温度30～50℃搅拌至完全溶解，再加入处方量的渗透压调节剂，搅拌20～40min至药液澄清，
[0026]
步骤2:加入ph调节剂调节药液ph值为4.5～6.5，加注射用水至全量，继续搅拌，静置。
[0027]
步骤3：将步骤2的药液经0.22μm微孔滤膜过滤、灌装，封口、121℃热压灭菌15min，制得1ml至2ml的灭菌小容量注射液。
[0028]
作为优选的实施方案，所述药液维持温度40℃，所述搅拌时间为30min。
[0029]
本发明意外地发现，复方注射液制备过程中，药液温度及搅拌时间与注射液的稳定性直接相关。本发明付出了创造性的劳动后发现，使药液温度保持在40℃，搅拌30min，制备所得盐酸左西替利嗪和卡介菌多糖核酸实施例10的复方注射液澄清，符合注射规定，有利于后期工艺操作，具体情况见表1。
[0030]
表1：药液温度和搅拌时间的考察
[0031][0032]
实验过程中发现，盐酸左西替利嗪与卡介菌多糖核酸复方注射液在制备过程中不发生相互反应，不存在配伍禁忌，相容性好。
[0033]
本发明中术语“包括”可以仅由x组成或可以包括其他物质，例如x y。
[0034]
如本文所用，术语“受试者”是指动物。典型地，所述动物是哺乳动物。受试者还指例如灵长类动物(例如人，男性或女性)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠、鱼、鸟等。在某些实施例中，受试者是灵长类动物。在优选的实施例中，该受试者是人。当指人时，术语“受试者”与“患者”可互换使用。
[0035]
如本文所用，如果受试者将在生物学上、在医学上或在生活质量上从治疗中获益，则所述受试者是“需要”这种治疗的。
[0036]
术语“治疗”在本文中被定义为将根据本披露的复方药物组合物应用或施用于受试者或来自受试者的分离的组织或细胞系，其中所述受试者患有特定的疾病(例如荨麻疹)，具有与所述疾病(例如荨麻疹)相关的症状或向所述疾病(例如荨麻疹)发展的倾向(如
果适用)，其中治疗的目的是治愈(如果适用)所述疾病，延迟所述疾病的发作，降低其严重性，减缓、改善疾病的一种或多种症状，改善所述疾病，减少或改善任何与疾病相关的症状或向疾病发展的倾向。术语“治疗”包括治疗怀疑患有疾病的患者以及患病或已诊断患有疾病或医学病症的患者，并且包括抑制临床复发。
[0037]
本专利申请的发明人通过大量试验，令人惊喜地发现，本发明的盐酸左旋西替利嗪卡介菌多糖核酸注射液组均表现出很好的抗过敏活性，比市售盐酸左旋西替利氯化钠注射液和单独的卡介菌多糖核酸注射液抗敏效果强，起到协同作用，起效更迅速，抗过敏效果更持久，无溶血作用。更重要的是，本发明的复方注射液比单独的左旋西替利嗪或卡介菌多糖核酸注射液含量稳定，相关物质少，表现出出乎意料的稳定性。
具体实施方式
[0038]
通过如下实施例来对本发明做进一步说明，其中实施例1～15为盐酸左西替利嗪(以下重量以左西替利嗪计)与卡介菌多糖核酸的制剂实施方案，但本发明的应用范围并不仅仅限于以下实施例。
[0039]
实施例1～15复方注射液的制备
[0040]
表2复方注射液的处方
[0041][0042]
制备工艺：
[0043]
步骤1：分别称取处方量的左西替利嗪或药学上可接受的盐、卡介菌多糖核酸，投入配料罐内，加注射用水至全量的80～90％，维持药液温度40℃搅拌至完全溶解，再加入处方量的渗透压调节剂，搅拌30min至药液澄清；
[0044]
步骤2:加入ph调节剂调节药液ph值，加注射用水至全量，继续搅拌，静置；
[0045]
步骤3：将步骤2的药液经0.22μm微孔滤膜过滤、灌装，封口、121℃热压灭菌10min，制得1ml的灭菌小容量注射液。
[0046]
对比例1
[0047]
按照wo2011003074文献中注射液处方，制备左旋西替利嗪盐酸盐注射液，规格为每支2ml，每毫升注射液含有5mg盐酸左西替利嗪、6.5mg氯化钠、注射用水、根据需要选择的氢氧化钠和/或盐酸将ph调节至5.5。
[0048]
对比例2
[0049]
按照cn107961215a实施例18的注射液处方制备左旋西替利嗪盐酸盐注射液，单瓶剂量：总体积：1ml/瓶，左西替利嗪量：6mg/瓶，具体处方如下：
[0050]
盐酸左西替利嗪6mg
[0051]
氯化钠13.5mg
[0052]
ph调节至5.1
[0053]
注射用水适量
[0054]
制备工艺为首先将氯化钠和左西替利嗪溶解在注射用水中，搅拌至溶解，然后添加ph调节剂将ph调节至5.1，无菌过滤、灌装，制成2ml的灭菌小容量注射剂。
[0055]
效果实施例
[0056]
一、稳定性实验
[0057]
大量试验研究发现，ph值对注射剂稳定性影响很大，以注射剂的澄清度、外观性状、无菌、热原情况为指标优选制剂ph值范围为5.0～5.3。将所制得制剂，置于温度40℃、rh75％的条件下，加速试验6个月，考察ph值、澄清度、外观性状、无菌、热原情况、含量、相关物质。ph值、澄清度、热原情况、含量检测方法分别参照《中国药典》(2020版)通则0631、0902、1142、3106。经加速实验和长期稳定性留样观察，利用上述工艺制得的本发明的盐酸左西替利嗪卡介菌多糖核酸注射液质量稳定，实验数据见表3和表4。
[0058]
加速稳定性实验的储存条件是40℃，75％rh下包含在小袋包装中，试验时间为初始和1、3、6个月。
[0059]
左旋西替利嗪含量和相关物质检测条件：
[0060]
采用的色谱柱为waters 2695-2996高压液相色谱仪(gimini c18 150
×
4.6mm色谱柱)，洗脱剂是dw∶乙腈∶10％tfa＝69∶30∶1(体积/体积)，检测器是uv吸收检测器(在230nm和的吸光度)。
[0061]
卡介菌多糖核酸含量和相关物质检测条件：
[0062]
agilent 1200hplc系统：agilent g1311a泵；agilent g1362a示差检测器；
[0063]
色谱柱：shodex ohpak sb-804hq凝胶色谱柱
[0064]
色谱条件：流动相：0.1mol/l nacl(过滤、脱气)；流速：0.5ml/min；柱温：35℃；示差检测器温度：35℃；进样量：50ul。
[0065]
表3：实施例1～15、对比例1～2加速条件(40℃、rh75％)实验结果
[0066]
[0067][0068][0069]
表4：实施例1～15、对比例1～2样品长期稳定性实验(25℃、rh60％)测定结果
[0070]
[0071]
[0072][0073]
如表3和表4所示，本发明采用氯化钠作为渗透压调节剂制备得到的左西替利嗪卡介菌多糖核酸注射液在加速实验体检下6个月和长期稳定性实验24个月的外观性状、澄明度、无菌和热原符合标准，盐酸左西替利嗪、卡介菌多糖核酸含量的ph值、含量稳定，有关物质很少，展现出非常优异的储存稳定性。
[0074]
然而对比例wo2011003074和cn107961215a中公开的单方左西替利嗪注射液处方含量不稳定，左西替利嗪的有关物质随着储存时间的延长会明显增多，制剂稳定性差。
[0075]
本发明的盐酸左旋西替利嗪卡介菌多糖核酸注射液组中使用的盐酸左旋西替利嗪剂量相较于对比例1-2中的单方注射液活性成分减少，但是稳定性却更加优异、有关物质更少，令人惊喜的是，稳定性没有变差，反而更好。
[0076]
二、动物模型药理学实验
[0077]
本试验的目的在于评价左西替利嗪卡介菌多糖核酸注射液在过敏性大鼠动物模型受试者中的抗过敏(荨麻疹)效力，所有实验均按照当地动物实验伦理委员的指南进行。
[0078]
对比例1～2和实施例1～15的使用剂量参见盐酸左旋西替利嗪市售制剂的fda说明书https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label～/2019/211415s000lbl.pdf。
[0079]
1.制备动物模型
[0080]
使用来源于由中国药科大学饲养单位繁殖的雄性或雌性大鼠，取健康大鼠120只，雌雄各半，90-100g，spf级，氢氧化铝凝胶(4％)加入天花粉配成5mg/ml混悬液，分别于每只大鼠四足掌皮下注射0.1ml。致敏14天后，眼球取血，置于离心机中低速离心，分离血清，所得大鼠抗血清备用。
[0081]
实验设计由20大组组成，其中1组是0.9％的空白氯化钠注射液，每大组分为3个小组，于每只大鼠的两只耳廓处皮下注射所得大鼠血清0.2ml，过48h后于右后腿皮下注射药物，分别在20min、0.5、1、2、4、8、10h后，各尾静脉注射0.25ml0.5％伊文思蓝溶液(含天花粉
0.25mg)，半小时后将大鼠脱臼处死，剪下耳廓备用。
[0082]
2.吸光度测定
[0083]
将剪下的大鼠耳廓进行吸光度测定。将每只大鼠两只耳廓置于试管内加入0.75ml koh(1mol/l)溶液37℃过夜，然后加3.5ml磷酸溶液(0.6mol/l)和丙酮的混合液(比例5:13)，振摇均匀，再以3000r/min离心15min,取上清液，在640nm处测吸光度，比较不同给药组的吸光度差异。吸光度值越小，抗过敏反应越强，实验结果如表5所示：
[0084]
表5:不同时间的吸光度
[0085][0086][0087]
与空白对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；与对比例1-2组分别比较，#p＜0.05，##p＜0.01。
[0088]
通过注射液药理学试验证实：与空白对照组相比，对比例1～2组具有抗敏效果，但
与空白对照组无显著性差异，抗敏效果较盐酸左旋左西替利嗪卡介菌多糖复方注射液弱、起效较慢，本发明的盐酸左旋西替利嗪卡介菌多糖核酸注射液组中使用的盐酸左旋西替利嗪剂量相较于对比例1-2中的单方注射液活性成分减少，但是却表现出更优异的抗过敏活性，起效更迅速，抗过敏效果更持久，无溶血作用。因此认为，与单独的盐酸左西替利嗪相比，本发明所述左旋西替利嗪卡介菌多糖核酸注射液起到协同作用，在抗过敏反应尤其是抗荨麻疹方面具有很大优势。
[0089]
本技术领域技术人员可以理解，除非另外定义，这里使用的所有术语(包括技术术语和科学术语)具有与本技术所属领域中的普通技术人员的一般理解相同的意义。还应该理解的是，诸如通用字典中定义的那些术语应该被理解为具有与现有技术的上下文中的意义一致的意义，并且除非像这里一样定义，不会用理想化或过于正式的含义来解释。
[0090]
以上述依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本项发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。