一种一氧化氮光激活荧光探针及其制备方法和应用

技术特征：
1.一种一氧化氮光激活荧光探针，其探针的结构式如下所示：2.一种权利要求1所述的一氧化氮光激活荧光探针的制备方法，其特征在于，其合成路线如下：3.根据权利要求2所述的一氧化氮光激活荧光探针的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：它包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的一氧化氮光激活荧光探针的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：第一步：荧光素与乙酸酐进行回流反应，制备化合物m-3；第二步：在还原剂的作用下，化合物m-3与氢气进行还原反应制备化合物m-4；第三步：化合物m-4与酰化剂进行酰化反应制备化合物1；所得化合物1与化合物2进行化学反应制备化合物3，再将得到的化合物3进行酯水解反应制备化合物m-5；第四步：化合物m-5与硼烷四氢呋喃络合物进行回流反应制备中间体，再将所得中间体继与四氯苯醌进行化学反应，制备化合物m-6；第五步：在cs2co3存在的条件下，化合物m-6与化合物4进行化学反应制备化合物m-7；第六步：在酸性条件下，化合物m-7进行水解反应制备荧光探针pno。5.根据权利要求4所述的一氧化氮光激活荧光探针的制备方法，其特征在于，在第二步中，所述还原剂为钯/碳；优选地，所述还原剂的质量为化合物m-3质量的5～15％；更优选地，所述还原剂的质量为化合物m-3质量的10％。6.根据权利要求4所述的一氧化氮光激活荧光探针的制备方法，其特征在于，在第三步中，所述酰化剂为socl2；所述化合物m-4与化合物2的摩尔比为1:0.5～1.0，优选为1:0.67；所述化合物3在氢氧化锂的存在下进行酯水解反应。7.根据权利要求4所述的一氧化氮光激活荧光探针的制备方法，其特征在于，在第四步中，所述化合物m-5与四氯苯醌的摩尔比为1:0.8～1.5，优选为1:1。8.根据权利要求4所述的一氧化氮光激活荧光探针的制备方法，其特征在于，在第五步中，所述化合物m-6与化合物4的摩尔比为1:2～5，优选为1:3；所述化合物m-6与cs2co3的摩尔比为1:1.5～3.5，优选为1:2。9.权利要求1所述的一氧化氮光激活荧光探针在光激活时作为检测一氧化氮的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的一氧化氮光激活荧光探针在细胞水平检测一氧化氮的应用。

技术总结
本发明涉及一种一氧化氮光激活荧光探针及其在制备方法和应用，该探针的结构式如下所示，选用邻硝基苄基作为光敏基团，光解反应迅速，具有检测限低(13nM)，信噪比高，荧光响应倍数高(约500倍)，灵敏度高，选择性好等优势。荧光强度与NO(0-20μM)浓度之间具有良好的线性关系，说明探针适合于生物体内一氧化氮的定量检测；并进一步应用PNO实现了RAW 264.7细胞一氧化氮的荧光成像。氧化氮的荧光成像。氧化氮的荧光成像。氧化氮的荧光成像。


技术研发人员：张玲 李雪娇 应伟武 吴春丽 薛运生 郑友广
受保护的技术使用者：徐州医科大学
技术研发日：2021.11.24
技术公布日：2022/4/26