人干扰素α2b喷雾剂及其制备方法与流程

人干扰素
α
2b喷雾剂及其制备方法
技术领域
1.本发明涉及生物医药技术领域，特别是涉及一种人干扰素α2b喷雾剂及其制备方法。


背景技术：

2.人干扰素α2b喷雾剂是一种局部外用无菌液体制剂。人干扰素α2b喷雾剂通过皮肤和黏膜给药，主要治疗口、鼻、腔呼吸道及皮表病毒感染，可以保证在使用较小剂量即可实现局部有效地抵抗病毒感染的同时降低或不引起干扰素的全身副作用。然而，人干扰素α2b为具有活性的蛋白类药物，结构不稳定，在生产及储存过程中容易受温度、储存时间及其他因素的影响而失去活性，达不到预期的治疗效果。同时，人干扰素α2b喷雾剂作为多剂量包装的无菌液体制剂，在多次使用过程中容易因微生物的污染及繁殖，使得药物变质、生物学活性下降，不利于患者的使用。
3.因此，在研发作为含有人干扰素α2b的喷雾剂的过程中，最重要的问题是如何保持干扰素活性和防止多次使用过程中微生物污染问题。一部分传统的人干扰素α2b喷雾剂采用人血白蛋白作为保护剂，三氯叔丁醇作为抑菌剂，在2～8℃条件下保存12个月，生物学活性基本保持一致，但其生物学活性能否在较长时间内(例如12～24个月)维持较高的水平还有待研究。一部分传统的人干扰素α2b喷雾剂采用明胶和羟苯甲纤维素作为保护剂，分别将苯甲酸钠和苯扎溴铵作为抑菌剂，在6℃
±
2℃条件下保存24个月，生物学活性分别为0天的80％和70％。对比之下，将苯甲酸钠作为抑菌剂比苯扎溴铵对维持干扰素生物学活性更具有优势。但是，苯甲酸钠多用于普通口服溶液剂，无菌制剂中使用苯甲酸钠抑菌起效慢，难以满足抑菌效力需求。苯扎溴铵则存在较大刺激性和异味，药物用于口腔黏膜等部位时，患者顺应性较差。此外，保护剂明胶和羟苯甲纤维素在水中较难溶解，在制备工艺上也增加了难度。另一部分传统的人干扰素α2b喷雾剂采用蔗糖、依地酸二钠及组氨酸作为保护剂，羟苯甲酯和羟苯丙脂作为抑菌剂，在2～8℃条件下保存24个月，生物学活性可以基本保持一致。但是，羟丙酯类抑菌剂存在焦土气味，不利于口鼻粘膜患者的使用，并且羟苯甲酯溶解度低，通常需要添加乙醇或甘油作为助溶剂，无菌制剂若不含乙醇甘油等，则容易因溶解度低而达不到无菌制剂所需的快速抑菌功效。


技术实现要素：

4.基于此，有必要针对传统的人干扰素α2b喷雾剂刺激性强、抑菌起效慢和有异味的问题，提供一种刺激性弱、无不良气味、无需采用助溶剂就抑菌起效快，且生物活性维持时间较长的人干扰素α2b喷雾剂。
5.此外，还提供一种上述人干扰素α2b喷雾剂的制备方法。
6.一种人干扰素α2b喷雾剂，包括人干扰素α2b、保护剂、抑菌剂、增稠剂和缓冲剂，其中，所述保护剂为海藻糖、蔗糖、人血白蛋白和依地酸二钠中的至少两种，所述抑菌剂选自间甲酚、苯酚和苯甲醇中的至少一种。
7.上述人干扰素α2b喷雾剂通过采用海藻糖、蔗糖、人血白蛋白和依地酸二钠的至少一种作为保护剂，间甲酚、苯酚和苯甲醇中的至少一种作为抑菌剂，使其刺激性弱、无不良气味(例如焦土味)、无需助溶剂就抑菌起效快且生物活性维持时间较长。
8.在其中一个实施例中，人干扰素α2b的质量与保护剂的质量、抑菌剂的质量、增稠剂的质量和缓冲剂的摩尔量之比为(5mg～1000mg)：(0.01g～60g)：(1g～20g)：(1g～40g)：(5mmol～40mmol)。
9.在其中一个实施例中，在所述人干扰素α2b喷雾剂中，所述人干扰素α2b的浓度为5μg/ml～1000μg/ml，所述保护剂的浓度为0.01g/l～60g/l，所述抑菌剂的浓度为1g/l～20g/l，所述增稠剂的浓度为1g/l～40g/l。
10.在其中一个实施例中，所述保护剂为海藻糖、人血白蛋白和依地酸二钠的混合物。
11.在其中一个实施例中，在所述人干扰素α2b喷雾剂中，所述海藻糖的浓度为0.5g/l～60g/l，所述人血白蛋白的浓度为0.1g/l～50g/l，所述依地酸二钠的浓度为0.01g/l～10g/l。
12.在其中一个实施例中，所述缓冲剂选自磷酸缓冲盐、柠檬酸缓冲盐和醋酸缓冲盐中的一种。
13.在其中一个实施例中，所述人干扰素α2b喷雾剂的ph为5.8～8。
14.在其中一个实施例中，所述增稠剂选自甲基纤维素和羟丙甲纤维素中的至少一种。
15.在其中一个实施例中，所述增稠剂为羟丙甲纤维素e5。
16.上述人干扰素α2b喷雾剂的制备方法，包括以下步骤：
17.将所述增稠剂与水混合后，加热，制备澄清的增稠液；
18.将所述澄清的增稠液与所述缓冲剂、保护剂和抑菌剂混合，制备辅料；及
19.将所述辅料与所述人干扰素α2b混合后，除菌，制得所述人干扰素α2b喷雾剂。
20.在其中一个实施例中，所述增稠剂为羟丙甲纤维素e5，制备所述澄清的增稠液的步骤包括：将所述增稠剂与所述水的混合物加热至60℃～80℃。
具体实施方式
21.为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使本发明公开内容更加透彻全面。术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文中“羟丙甲纤维素”均是指“羟丙基甲纤维素”。
22.本技术一实施方式提供了一种人干扰素α2b喷雾剂，该人干扰素α2b喷雾剂包括人干扰素α2b、保护剂、抑菌剂、增稠剂和缓冲剂，其中，保护剂为海藻糖、蔗糖、人血白蛋白和依地酸二钠中的至少两种，抑菌剂选自间甲酚、苯酚和苯甲醇中的至少一种。上述人干扰素α2b喷雾剂为局部外用的无菌液体喷雾制剂。上述人干扰素α2b喷雾剂通过采用海藻糖、蔗糖、人血白蛋白和依地酸二钠的至少两种作为保护剂，间甲酚、苯酚和苯甲醇中的至少一种
作为抑菌剂，使其刺激性弱、无不良气味、无需助溶剂就抑菌起效快且生物活性维持时间长。
23.具体地，人干扰素α2b作为活性成分。在一些实施例中，人干扰素α2b为重组人干扰素α2b。具体地，重组人干扰素α2b由表达人干扰素α2b基因的重组菌表达后，经分离纯化而得。
24.在一些实施例中，人干扰素α2b的质量与保护剂的质量、抑菌剂的质量、增稠剂的质量和缓冲剂的摩尔量之比为(5mg～1000mg)：(0.01g～60g)：(1g～20g)：(1g～40g)：(5mmol～40mmol)。进一步地，人干扰素α2b的质量与保护剂的质量、抑菌剂的质量、增稠剂的质量和缓冲剂的摩尔量之比为(5mg～100mg)：(0.05g～20g)：(9g～20g)：(5g～20g)：(10mmol～30mmol)。
25.在一些实施例中，人干扰素α2b的浓度为5μg/ml～1000μg/ml(即5万iu/ml～1000万iu/ml)。在一个可选地具体示例中，人干扰素α2b的浓度为5μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、500μg/ml、800μg/ml或1000μg/ml。进一步地，人干扰素α2b的浓度为5μg/ml～100μg/ml(即5万iu/ml～100万iu/ml)。
26.保护剂用于维持人干扰素α2b活性。在一些实施例中，保护剂的浓度为0.01g/l～60g/l。在一个可选地具体实施例中，保护剂的浓度为0.05g/l、0.1g/l、0.5g/l、1g/l、2.5g/l、5g/l、10g/l、15g/l、20g/l、25g/l、35g/l、45g/l或55g/l。进一步地，保护剂的浓度为0.05g/l～20g/l。
27.在一些实施例中，保护剂选自海藻糖、蔗糖、人血白蛋白和依地酸二钠中的至少两种。在另一些实施例中，保护剂选自海藻糖、蔗糖、人血白蛋白和依地酸二钠中的至少三种。
28.在一些实施例中，保护剂为海藻糖、人血白蛋白和依地酸二钠的混合物。经发明人研究发现，采用单一人血白蛋白难以使干扰素α2b维持较高生物学活性保存至24个月以上。而人血白蛋白、海藻糖和依地酸二钠组合作为保护剂，可以使干扰素α2b维持较高生物学活性保存至24个月以上。其中，人血白蛋白可防止干扰素α2b吸附和聚集、海藻糖可有效的保护干扰素α2b分子结构，防止干扰素α2b降解，依地酸二钠有效的结合金属离子，可防止干扰素α2b降解和聚集。人血白蛋白、海藻糖和依地酸二钠的联合使用具有协同效果，增强了对干扰素α2b的保护作用。此外，人血白蛋白、海藻糖和依地酸二钠的联合使用还可以减少人血白蛋白的用量，节约经济成本。
29.可选地，海藻糖的浓度为0.5g/l～60g/l。在一个可选地具体示例中，海藻糖的浓度为0.5g/l、1g/l、5g/l、10g/l、15g/l、20g/l、30g/l、40g/l、50g/l或60g/l。进一步地，海藻糖的浓度为5g/l～20g/l。可选地，人血白蛋白的浓度为0.1g/l～50g/l。在一个可选地具体示例中，人血白蛋白的浓度为0.1g/l、0.5g/l、2g/l、5g/l、10g/l、15g/l、20g/l、30g/l、40g/l或50g/l。进一步地，人血白蛋白的浓度为0.5g/l～20g/l。可选地，依地酸二钠的浓度为0.01g/l～10g/l。在一个可选地具体示例中，依地酸二钠的浓度为0.01g/l、0.05g/l、0.1g/l、0.5g/l、1g/l、2g/l、5g/l、8g/l或10g/l。进一步地，依地酸二钠的浓度为0.05g/l～10g/l。
30.抑菌剂用于抑制微生物生长，防止多次使用过程中微生物污染。在一些实施例中，抑菌剂的浓度为1g/l～20g/l。进一步地，抑菌剂的浓度为9g/l～20g/l。经发明人研究发现，同时含有苯环和羟基的抑菌剂具有良好的水溶性，抑菌起效快、安全性良好且对人干扰
素α2b活性影响小。在一些实施例中，抑菌剂为苯甲醇、间甲酚或苯酚。经验证，苯甲醇对人干扰素α2b活性影响小，而其他抑菌剂，例如苯甲酸钠、羟苯甲酯和羟苯丙酯，对人干扰素α2b的活性有不同程度的影响，尤其是苯甲酸钠。此外，苯甲醇作为抑菌剂无异味，刺激性弱，无需助溶剂就抑菌起效快。在一个可选地具体示例中，苯甲醇的浓度为1g/l、2.5g/l、5g/l、8g/l、10g/l、15g/l或20g/l。进一步地，苯甲醇的浓度为9g/l～20g/l。
31.增稠剂用于延长人干扰素α2b在喷涂位置的滞留时间，软化皮表角质层，促进人干扰素α2b的吸收。在一些实施例中，增稠剂的浓度为1g/l～40g/l。在一个可选地具体示例中，增稠剂的浓度为1g/l、5g/l、10g/l、15g/l、20g/l、30g/l或40g/l。进一步地，增稠剂的浓度为5g/l～20g/l。可选地，增稠剂选自甲基纤维素和羟丙甲纤维素中的至少一种。在一些实施例中，增稠剂为低粘度羟丙甲纤维素。可选地，低粘度羟丙甲纤维素在25℃条件下的粘度为2mpa.s～15mpa.s。在一个可选地具体示例中，增稠剂为羟丙甲纤维素e5。可以理解的是，在其他实施例中，增稠剂不限于上述，还可以是其他物质。
32.缓冲剂用于维持体系的ph。在一些实施例中，人干扰素α2b喷雾剂的ph为5.8～8。进一步地，人干扰素α2b喷雾剂的ph为6.5～7.5。在一些实施例中，缓冲剂选自磷酸缓冲盐、柠檬酸缓冲盐和醋酸缓冲盐中的一种。可选地，缓冲剂的浓度为5mmol/l～40mmol/l。在一个具体示例中，缓冲剂的浓度为5mmol/l、10mmol/l、20mmol/l、30mmol/l或40mmol/l。进一步地，缓冲剂的浓度为10mmol/l～30mmol/l。可以理解的是，在其他实施例中，缓冲剂不限于上述，还可以是其他物质。
33.在一些实施例中，上述人干扰素α2b喷雾剂不含有助溶剂。
34.可以理解的是，上述人干扰素α2b喷雾剂还含有水。在一些实施例中，水为注射用水。
35.此外，本技术一实施方式还提供了一种上述人干扰素α2b喷雾剂的制备方法，该人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括步骤s110、步骤s120和步骤s130。
36.步骤s110：将增稠剂溶于水，加热，制备澄清的增稠液。
37.具体地，增稠剂如上文所述，此处不再赘述。由于增稠剂常温下难溶于水，因此，将增稠剂与水混合后加热，使得增稠剂更容易溶于水而制备澄清的含有增稠剂的溶液(增稠液)，进而巧妙地解决了人干扰素α2b喷雾剂中增稠剂难溶的问题。在一些实施例中，制备澄清的增稠液的步骤包括：将增稠剂与水混合后，加热至60℃～80℃，制备澄清的增稠液。可以理解的是，在加热过程中还包括搅拌增稠剂与水的混合物，以加速增稠剂溶解。在一个可选地具体示例中，加热的温度为60℃、65℃、70℃、75℃或80℃。
38.步骤s120：将澄清的增稠液与缓冲剂、保护剂和抑菌剂混合，制备辅料。
39.具体地，缓冲剂、保护剂和抑菌剂如上文所述，此处不再赘述。
40.在其中一个实施例中，将缓冲剂、保护剂和抑菌剂加入澄清的增稠液中，搅拌，使得缓冲剂、保护剂和抑菌剂溶于增稠液中，制备辅料。可以理解的是，将澄清的增稠液与其他组分混合时，澄清的增稠液已经充分冷却至低于40℃。
41.步骤s130：将辅料与人干扰素α2b混合后，除菌，制得人干扰素α2b喷雾剂。
42.在一些实施例中，采用滤膜过滤的方式除菌。在一个可选地具体示例中，采用粒径为0.22μm的滤膜过滤辅料与人干扰素α2b的混合物。可以理解的是，在其他一些实施例中，还可以采用其他方式除菌。当然，人干扰素α2b、增稠剂、水、缓冲剂、保护剂和抑菌剂的用量
是根据需要制备的人干扰素α2b喷雾剂中各自的浓度进行称量。
43.在一些实施例中，在除菌的步骤之后，还包括分装的步骤。
44.上述人干扰素α2b喷雾剂的制备方法通过加热的方式将难溶的增稠剂先制成澄清的增稠液之后再与其他辅料成分及人干扰素α2b混合，解决了增稠剂难溶于水的问题，并且操作简便，是一种稳定高效的制备方法。
45.具体实施例
46.以下结合具体实施例进行详细说明。以下实施例如未特殊说明，则不包括除不可避免的杂质外的其他组分。实施例中采用试剂和仪器如非特别说明，均为本领域常规选择。实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规条件，例如文献、书本中所述的条件或者生产厂家推荐的方法实现。
47.实施例1
48.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的处方如下：
49.人干扰素α2b：1g；
50.海藻糖：5g；
51.十二水磷酸氢二钠：1.61g；
52.一水磷酸二氢钠:2.14g；
53.羟丙甲纤维素e5：10g；
54.苯甲醇：10g；
55.注射用水加至：1000ml；
56.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括但不限于如下步骤：
57.称取处方量的羟丙甲纤维素e5倒入有一定注射用水的烧杯中，加热至75℃，搅拌频率：25hz，搅拌时间：30min。静置冷却至室温(25℃，下同)后，依次加入处方量的十二水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠、海藻糖和苯甲醇搅拌均匀，最后加入人干扰素α2b并加入注射用水定容至1000ml，搅拌均匀，0.22μm滤膜除菌过滤，无菌分装于容器中。
58.实施例2
59.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的处方如下：
60.人干扰素α2b：1g；
61.依地酸二钠：0.1g；
62.十二水磷酸氢二钠：1.61g；
63.一水磷酸二氢钠：2.14g；
64.羟丙甲纤维素e5：10g；
65.苯甲醇：10g；
66.注射用水加至：1000ml。
67.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括但不限于如下步骤：
68.称取处方量的羟丙甲纤维素e5倒入有一定注射用水的烧杯中，加热至75℃，搅拌频率：25hz，搅拌时间：30min，静置冷却至室温后依次加入处方量的十二水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠、依地酸二钠和苯甲醇搅拌均匀，最后加入人干扰素α2b并加入注射用水定容至1000ml，搅拌均匀，0.22μm滤膜除菌过滤，无菌分装于容器中。
69.实施例3
70.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的处方如下：
71.人干扰素α2b：1g；
72.海藻糖：5g；
73.依地酸二钠：0.1g；
74.十二水磷酸氢二钠：1.61g；
75.一水磷酸二氢钠：2.14g；
76.羟丙甲纤维素e5：10g；
77.苯甲醇：10g；
78.注射用水加至：1000ml。
79.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括但不限于如下步骤：
80.称量处方量的羟丙甲纤维素e5倒入有一定注射用水的烧杯中，加热至75℃，搅拌频率：25hz，搅拌时间：30min，静置冷却至室温后依次加入处方量的十二水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠、海藻糖、依地酸二钠和苯甲醇搅拌均匀，最后加入人干扰素α2b并加入注射用水定容至1000ml，搅拌均匀，0.22μm滤膜除菌过滤，无菌分装于容器中。
81.实施例4
82.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的处方如下：
83.人干扰素α2b：1g；
84.海藻糖：5g；
85.依地酸二钠：0.1g；
86.人血白蛋白：10g；
87.十二水磷酸氢二钠：1.61g；
88.一水磷酸二氢钠：2.14g；
89.羟丙甲纤维素e5：10g；
90.苯甲醇：10g；
91.注射用水加至：1000ml。
92.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括但不限于如下步骤：
93.称量处方量的羟丙甲纤维素e5倒入有一定注射用水的烧杯中，加热至75℃，搅拌频率：25hz，搅拌时间：30min，静置冷却至室温后依次加入处方量的十二水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠、海藻糖、依地酸二钠、人血白蛋白和苯甲醇搅拌均匀，最后加入人干扰素α2b并加入注射用水定容至1000ml，搅拌均匀，0.22μm滤膜除菌过滤，无菌分装于容器中。
94.实施例5
95.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的处方如下：
96.人干扰素α2b：1g；
97.海藻糖：5g；
98.依地酸二钠：0.1g；
99.人血白蛋白：10g；
100.十二水磷酸氢二钠：1.61g；
101.一水磷酸二氢钠：2.14g；
102.羟丙甲纤维素e5：10g；
103.羟苯甲脂：2.5g；
104.羟苯丙脂：0.2g；
105.注射用水加至：1000ml。
106.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括但不限于如下步骤：
107.称量处方量的羟丙甲纤维素e5倒入有一定注射用水的烧杯中，加热至75℃，搅拌频率：25hz，搅拌时间：30min，静置冷却至室温后依次加入处方量的十二水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠、海藻糖、依地酸二钠、人血白蛋白、羟苯甲脂和羟苯丙脂搅拌均匀，最后加入人干扰素α2b并加入注射用水定容至1000ml，搅拌均匀，0.22μm滤膜除菌过滤，无菌分装于容器中。
108.实施例6
109.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的处方如下：
110.人干扰素α2b：1g；
111.海藻糖：5g；
112.依地酸二钠：0.1g；
113.人血白蛋白：10g；
114.十二水磷酸氢二钠：1.61g；
115.一水磷酸二氢钠：2.14g；
116.羟丙甲纤维素e5：10g；
117.苯甲酸钠：10g；
118.注射用水加至：1000ml。
119.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括但不限于如下步骤：
120.称量处方量的羟丙甲纤维素e5倒入有一定注射用水的烧杯中，加热至75℃，搅拌频率：25hz，搅拌时间：30min，静置冷却至室温后依次加入处方量的十二水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠、海藻糖、依地酸二钠、人血白蛋白和苯甲酸钠搅拌均匀，最后加入人干扰素α2b并加入注射用水定容至1000ml，搅拌均匀，0.22μm滤膜除菌过滤，无菌分装于容器中。
121.实施例7
122.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的处方如下：
123.人干扰素α2b：1g；
124.人血白蛋白：10g；
125.十二水磷酸氢二钠：1.61g；
126.一水磷酸二氢钠：2.14g；
127.羟丙甲纤维素：10g；
128.苯甲醇：10g；
129.注射用水加至：1000ml。
130.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括但不限于如下步骤：
131.称量处方量的羟丙甲纤维素e5倒入有一定注射用水的烧杯中，加热至75℃，搅拌频率：25hz，搅拌时间：30min，静置冷却至室温后依次加入处方量的十二水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠、人血白蛋白、苯甲醇搅拌均匀，最后加入人干扰素α2b并加入注射用水定容至1000ml，搅拌均匀，0.22μm滤膜除菌过滤，无菌分装于容器中。
132.实施例8
133.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的处方如下：
134.干扰素α2b：1g；
135.海藻糖：5g；
136.依地酸二钠：0.1g；
137.人血白蛋白：10g；
138.十二水磷酸氢二钠：1.61g；
139.一水磷酸二氢钠：2.14g；
140.羟丙甲纤维素e5：10g；
141.注射用水加至：1000ml。
142.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括但不限于如下步骤：
143.称量处方量的羟丙甲纤维素e5倒入有一定注射用水的烧杯中，加热至75℃，搅拌频率：25hz，搅拌时间：30min，静置冷却至室温后依次加入十二水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠、海藻糖、依地酸二钠和人血白蛋白搅拌均匀，最后加入人干扰素α2b并加入注射用水定容至1000ml，搅拌均匀，0.22μm滤膜除菌过滤，无菌分装于容器中。
144.实施例9
145.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的处方如下：
146.人干扰素α2b：1g；
147.十二水磷酸氢二钠：1.61g；
148.一水磷酸二氢钠:2.14g；
149.羟丙甲纤维素e5：10g；
150.苯甲醇：10g；
151.注射用水加至：1000ml；
152.本实施例的人干扰素α2b喷雾剂的制备方法包括但不限于如下步骤：
153.称取处方量的羟丙甲纤维素e5倒入有一定注射用水的烧杯中，加热至75℃，搅拌频率：25hz，搅拌时间：30min。静置冷却至室温后，依次加入处方量的十二水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠和苯甲醇搅拌均匀，最后加入人干扰素α2b并加入注射用水定容至1000ml，搅拌均匀，0.22μm滤膜除菌过滤，无菌分装于容器中。
154.测试：
155.1.将各实施例所制备人干扰素α2b喷雾剂进行抑菌效力检查，部分结果如表1所示。表1中，n/a：表示没有抑菌效果；ni：表示试验菌未增加。
156.表1
[0157][0158]
按照皮肤给药制剂抑菌效力判断标准，应使三种细菌在2天、7天分别减少2lg、3lg值才符合要求。由表1可知，实施例4的以苯甲醇作为抑菌剂的人干扰素α2b喷雾剂符合抑菌标准，且无明显气味，抑菌起效快，作用力强。
[0159]
2.测试各实施例所制备人干扰素α2b喷雾剂中干扰素α2b在不同时间点的活性，以检测不同抑菌剂对干扰素α2b的活性的影响，部分结果如表2所示。
[0160]
表2
[0161][0162]
由表2可知，苯甲醇几乎对干扰素α2b生物活性无影响。
[0163]
3.将各实施例所制备的人干扰素α2b喷雾剂置于2～8℃长期条件下，考察24个月稳定性，部分结果见表3。
[0164]
表3
[0165]
[0166][0167]
由表3可知，采用以海藻糖、人血白蛋白和依地酸二钠的混合物作为保护剂的人干扰素α2b喷雾剂的稳定性更好，保护效果更佳，更有利于干扰素α2b的长期储存。
[0168]
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0169]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，便于具体和详细地理解本发明的技术方案，但并不能因此而理解为对发明专利保护范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。应当理解的是，在本领域技术人员在本发明提供的技术方案的基础上，通过合乎逻辑的分析、推理或有限的试验得到的技术方案，均在本发明所附权利要求的保护范围内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求的内容为准，说明书可以用于解释权利要求的内容。