1-甲基环丙烯在防止香蕉采后脱把方面的应用的制作方法

1.本发明涉及水果保鲜技术领域，更具体地，涉及1-甲基环丙烯在防止香蕉采后脱把方面的应用。


背景技术：

2.果实脱把是影响香蕉商品化的一个重要参数，随着果实的不断成熟，香蕉果实表面硬度会随之降低，在果实表面硬度过低时，香蕉果实容易因为碰撞而导致果指与果柄分离。发生脱落的区域被称为离区，植物器官脱落先是生理过程导致内部细胞结构和组织结构变化，然后在外力的作用下脱落。植物器官脱落是一个多方面调控的复杂的生理过程，内源激素与细胞壁相关酶活性的变化被认为是影响植物器官脱落的重要方面(高欣欣，2013)。离区细胞壁相关酶如多聚半乳糖醛酸酶(pg)、果胶甲酯酶(pme)、果胶裂解酶(pl)等在离区形成和器官脱落中起着重要作用，据报道，pg和pme活性与无核白葡萄落粒关系呈显著正相关(陈发河，2003)；即将脱落的番茄果实pme与pl活性急剧增加，促进果实与花托连接处离区细胞壁的降解，导致脱落(刘化禹，2019)。此外，植物激素同样也调节着果蔬后熟的整个过程，并影响果实的软化后熟和器官的脱落，研究表明，在山葡萄脱落的果梗中aba的含量上升明显，低浓度iaa与高浓度aba很可能是促使离层出现进而导致幼果脱落的重要原因(韩先焱，2020)。
3.由于香蕉采后乙烯的大量释放，果实内部发生一系列成熟与衰老的生理变化，具体表现为香蕉果皮变黄，果肉变甜软的现象，因此目前香蕉保鲜主要聚焦在如何解决香蕉果实的成熟与衰老的生理变化，即是为了延缓香蕉的成熟软化，现有技术公开了1-甲基环丙烯(1-mcp)是一种乙烯受体抑制剂，与乙烯发生不可逆的竞争，阻断与成熟和衰老相关基因的表达，抑制呼吸跃变型果蔬果蔬乙烯信号转导途径，进而延缓香蕉等果蔬的成熟衰老和延长香蕉的贮藏期和保质期，但是基于香蕉成熟软化与香蕉脱把诱导机制并不一致，且香蕉脱把是由多种复杂原因造成，机理复杂，基于不同的防控目的，其手段并没有显然的共适性，必然无法直接借鉴延缓香蕉成熟软化的方法用于防止香蕉脱把。
4.因此，迫切需要深入研究一种保鲜技术，可有效降低香蕉果实的脱把现象，提高香蕉的耐贮性。


技术实现要素：

5.本发明针对现有香蕉果实防脱把技术的不足，旨在提供1-甲基环丙烯在防止香蕉采后脱把方面的应用，解决了香蕉果实易发生品质劣变和果实脱把的问题，且经催熟处理后果实可正常后熟。
6.本发明的的首要目的是提供1-甲基环丙烯在延缓或防止香蕉果实脱把方面的应用。
7.本发明的另一目的是提供一种防止采后香蕉果实脱把的方法。
8.本发明上述目的通过以下技术方案实现：
9.本发明以1-甲基环丙烯(1-mcp)处理采后的香蕉果实，不仅能显著减轻果实成熟后的脱把率，延缓香蕉成熟，明显延长香蕉的保鲜期和货架期，而且香蕉果实高温贮运后经催熟后能正常成熟，无“青皮熟”现象，保证果实采收后的品质，减轻香蕉在运输过程中的品质劣变现象，可广泛应用于香蕉贮藏运输尤其是在夏季高温条件下的贮藏运输。
10.因此，本发明首先请求保护1-甲基环丙烯在延缓或防止香蕉果实脱把方面的应用。
11.进一步地，本发明研究表明，采用1-甲基环丙烯(1-mcp)处理采后香蕉防止其脱把，是通过抑制细胞壁降解酶活性，包括抑制香蕉果实多聚半乳糖醛酸酶活性，抑制香蕉果实果胶裂解酶活性，抑制香蕉果实果胶甲酯酶活性的增加，以维持细胞的完整结构，防止果实脱把。
12.此外，本发明还提供一种防止采后香蕉果实脱把的方法，利用1-甲基环丙烯熏蒸香蕉果实后，进行包装储藏。
13.优选地，所述1-甲基环丙烯熏蒸的浓度为100nl/l～400nl/l。当1-甲基环丙烯熏蒸浓度过高，会出现明显的后熟障碍，导致果实不能正常转黄、软化。当1-甲基环丙烯熏蒸浓度过低，防脱把的效果不佳。
14.最优选地，所述1-甲基环丙烯熏蒸的浓度为300nl/l。
15.在此需要说明的是，常温状态下1-mcp是气体，常温下不易保存，一般都是将其包结到环糊精(α-或β-)里面形成为白色粉末或以纸片为载体，这样便使用。
16.作为一种优选地可实施方式，在熏蒸时，先将香蕉果实放置于贮藏空间中，先计算贮藏空间的体积，然后根据贮藏空间的体积和1-mcp的使用浓度来计算所需要的1-mcp/α-环糊精粉末的量或者1-mcp纸片的量，最后将称好后的1-mcp/α-环糊精粉末置于培养皿等开放容器中，加入水，破坏环糊精的结构，即可释放出所需浓度的1-mcp气体对香蕉果实进行熏蒸；或者将1-mcp/纸片放入密封容器(如果实包装箱)中，利用香蕉果实的呼吸作用释放的水蒸汽与1-mcp纸片结合缓慢释放1-mcp气体对香蕉进行熏蒸。
17.优选地，所述1-甲基环丙烯熏蒸的时间为4～16h(最优选为16h)。
18.优选地，所述香蕉果实为无病虫害、无机械损伤、成熟度为7～8成的香蕉果实。
19.优选地，所述用1-甲基环丙烯熏蒸香蕉果实前，还对香蕉果实依次进行清洗、杀菌、晾干的预处理。
20.进一步优选地，所述杀菌为用浓度为2.5g/l的强力清洗剂浸泡处理5～15min(最优选为10min)，再用浓度为500mg/l的抑菌鲜与500mg/l的咪鲜胺混合溶液浸泡0.5～2min(最优选为1min)进行杀菌。
21.优选地，所述包装为采用聚乙烯袋密封包装。
22.优选地，所述聚乙烯薄膜袋的厚度为0.02mm～0.04mm。进一步优选为0.03mm。
23.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
24.本发明首次研究表明采用1-mcp处理采后的香蕉果实，能显著延缓香蕉果实的硬度和果皮褪绿转黄，并且在果实软化成熟后，能够有效延缓果柄韧度的下降，保持较高的果柄拉力，防止果指脱落，且该方法节能环保、保鲜效果好、操作简便、成本低、应用性强，尤其适用于防止香蕉在夏季的高温运输过程中的软化成熟、品质劣变、青皮熟以及成熟后果指易脱落。
附图说明
25.图1为不同处理对香蕉果实成熟指数变化的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，100nl/l～400nl/l表示不同浓度的1-mcp处理组。lsd表示p≦0.05水平下的最小差异值。
26.图2为不同处理对香蕉果实乙烯合成的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，100nl/l～400nl/l表示不同浓度的1-mcp处理组。lsd表示p≦0.05水平下的最小差异值。
27.图3为不同处理对香蕉果实呼吸速率的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，100nl/l～400nl/l表示不同浓度的1-mcp处理组。lsd表示p≦0.05水平下的最小差异值。
28.图4为不同处理对香蕉果实整果硬度的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，100nl/l～400nl/l表示不同浓度的1-mcp处理组。lsd不同的字母代表在t-检测中具有显著性差异(p≦0.05)。
29.图5为不同处理对香蕉果实果肉硬度的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，100nl/l～400nl/l表示不同浓度的1-mcp处理组。lsd不同的字母代表在t-检测中具有显著性差异(p≦0.05)。
30.图6为不同处理对香蕉果实病情指数的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，100nl/l～400nl/l表示不同浓度的1-mcp处理组。lsd不同的字母代表在t-检测中具有显著性差异(p≦0.05)。
31.图7为不同处理对香蕉果实果柄韧度的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，100nl/l～400nl/l表示不同浓度的1-mcp处理组。lsd不同的字母代表在t-检测中具有显著性差异(p≦0.05)。
32.图8为不同处理对香蕉果实整果硬度的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。lsd不同的字母代表在t-检测中具有显著性差异(p≦0.05)。
33.图9为不同处理对香蕉果实果肉硬度的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。lsd不同的字母代表在t-检测中具有显著性差异(p≦0.05)。
34.图10为不同处理对香蕉果实病情指数的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。lsd不同的字母代表在t-检测中具有显著性差异(p≦0.05)。
35.图11为不同处理对香蕉果实果柄拉力的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。lsd不同的字母代表在t-检测中具有显著性差异(p≦0.05)。
36.图12为不同处理对香蕉果实香蕉果实表型的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。
37.图13为不同处理对香蕉果实果柄多聚半乳糖醛酸酶(pg)的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。lsd表示p≦0.05水平下的最小差异值。
38.图14为不同处理对香蕉果实果柄果胶裂解酶(pl)的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。lsd表示p≦0.05水平下的最小差异值。
39.图15为不同处理对香蕉果实香蕉果柄果胶甲酯酶(pme)活性的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。lsd表示p≦0.05水平下的最小差异值。
40.图16为不同处理对香蕉果实果柄生长素(iaa)含量的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。lsd表示p≦0.05水平下的最小差异值。
41.图17为不同处理对香蕉果实果柄脱落酸(aba)含量的影响；其中，ck-1表示常温对照组，ck-2表示高温空白处理组，300nl/l1-mcp表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组。lsd表示p≦0.05水平下的最小差异值。
42.图18为不同处理对香蕉果实细胞壁超微结构的影响；其中，ck-1(d1-3)表示常温对照组第5天的细胞壁超微结构，ck-2(e1-3)表示高温处理组第5天的细胞壁超微结构，300nl/l1-mcp(f1-3)表示浓度为300nl/l的1-mcp处理组第5天的细胞壁超微结构。
具体实施方式
43.下面结合说明书附图和具体实施方式对本发明作进一步的说明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非另有说明，本发明实施例采用的原料试剂为常规购买的原料试剂。
44.1－mcp粉剂购自西安北农华农作物保护有限公司。
45.实施例1 1-mcp浓度优化实验
46.1、香蕉果实的保鲜方法
47.(1)预处理：供试香蕉品种为“巴西蕉”，采收果指饱满度为7～8成。香蕉采收后立即运回实验室，进行落梳。落梳完成后，在约4～5cm果柄处留出新伤口，立即用浓度为2.5g/l的强力清洗剂浸泡10min后晾干，再用浓度为500mg/l的抑菌鲜与500mg/l的咪鲜胺混合溶液浸泡1min，取出后晾干。
48.(2)实验分组
49.ck-1：预处理后的香蕉果实，新鲜采摘后用800ul/l乙烯利浸泡1min，晾干后用0.03mm聚乙烯袋包装(不密封)贮于(22
±
1)℃条件下进行成熟。
50.ck-2：预处理后的香蕉果实，晾干后用0.03mm聚乙烯袋包装密封包装贮于(29
±
1)℃下贮藏15d，15天后打开聚乙烯包装袋，用800ul/l乙烯利浸泡1min，晾干后用0.03mm聚乙烯袋包装(不密封)贮于(22
±
1)℃下进行成熟。
51.1-mcp处理组：预处理后的香蕉果实，晾干后分别用1-mcp有效浓度为100nl/l、200nl/l、300nl/l、400nl/l的1－mcp粉剂加少量的水溶解于密闭的泡沫箱内进行熏蒸16h后，用厚度为0.03mm聚乙烯密封包装，在29℃恒温箱中贮藏15d，贮藏15d后用800ul/l乙烯利浸泡1min，晾干后用0.03mm聚乙烯袋包装(不密封)贮于(22
±
1)℃下进行成熟。
52.定期观察并记录各处理果实硬度、色泽、病果率，并取样测定各项品质及生理指标。
53.2、香蕉果实生理指标的测定方法
54.(1)转黄指数的测定
55.参考司振伟等(司振伟，2011)对香蕉果实转黄级别的划分方法，将香蕉转黄级别分为7级。每个处理60个果指，分为三个重复。
56.分级标准如下：
57.1级-七八成以上饱满度的青硬香蕉果实，果皮全绿。
58.2级-香蕉果实有轻微弹性，绿色中略带黄色；
59.3级-果实开始转黄，果皮绿色多于黄色；
60.4级-果实大部分是黄色，两头是绿色。
61.5级-果实大部分是黄色，蕉炳区是绿色；
62.6级-果实全部是黄色，散发出浓郁的香气；
63.7级-果实全黄，并带有褐色斑点或斑块，呈过熟状态；
64.最佳食用状态为5-6级。
65.计算公式：转黄指数＝∑(各级转黄果数x该转黄级数)/总调查果数
66.(2)整果硬度的测定
67.参考沈玲(2018)的方法，使用美国instron公司的5542型果蔬材料硬度测试机测定果实硬度。本实验对稍削去表皮的整根香蕉进行穿刺，通过穿刺所遇到的阻力测定香蕉整果的硬度。穿刺条件：穿刺距离2cm，探头的移动速度为200mm/min，回程距离为4cm。硬度单位为牛顿(n)。每一重复测定6个点，硬度用牛顿表示，3次重复取平均值。
68.(3)果肉硬度的测定
69.参考司振伟(2011)的方法，有所修改。使用美国instron公司的5542型果蔬材料硬度测试机测定果实硬度。本实验对去皮的香蕉进行穿刺，通过穿刺所遇到的阻力测定香蕉果肉的硬度。穿刺条件：穿刺距离2cm，探头的移动速度为200mm/min，回程距离为4cm。硬度单位为牛顿(n)。每一重复测定6个点，硬度用牛顿表示，3次重复。
70.(4)乙烯释放率的测定
71.乙烯释放率是果实成熟品质鉴定的重要指标，乙烯释放率的测定使用日本岛津有限公司gc6820气相色谱仪器测定。每个处理取3个果实放入密封罐中，对果实进行容积、重量测定。于贮藏温度下密闭2h后，轻轻摇动密封罐(勿伤害果实)，待罐内气体混合均匀后抽取1ml测定乙烯释放率，每个处理3次重复，每一重复3针。
72.气相色谱工作条件为：色谱柱为活性氧化铝填充柱，柱温80℃，进样口温度140℃，载气he，流速30ml.min-1，fid温度150℃。
[0073][0074]
(5)病情指数的测定
[0075]
每天观察贮藏果实的发病情况并统计记录，根据公式，计算香蕉的病情指数。参考朱世江(2004)方法将果实发病程度分为5个等级。
[0076]
0级：不发病；
[0077]
1级：发病面积占果实面积的25％以下；
[0078]
2级：发病面积占果实面积的25％-50％；
[0079]
3级：发病面积占果实面积的50％-75％；
[0080]
4级：发病面积占果实面积的75％以上；
[0081]
病情指数(％)＝∑(各级病果数
×
该病级)x100/总调查果数x最高病情级数
[0082]
(6)呼吸速率的测定
[0083]
参考沈玲(2011)方法，采用封罐法，每处理取3个香蕉，每天固定时段放入密封罐中贮藏2h后取气1ml，每个处理三次重复，每一重复2针。用天谱仪器有限公司出产的gc700型气相色谱仪测定。gc条件：柱温50℃，进样口温度120℃，载气he流速30ml.min-1，热导检测器(tcd)，温度150℃。
[0084][0085]
(7)香蕉果柄拉力的测定
[0086]
用直径为0.370mm的细绳绑住香蕉的果柄，另一端连接日本三量数字式推拉力计，水平拉断香蕉果柄，拉力计记录最大拉力为果柄最大韧度，单位以n(牛顿)表示，每个处理3次重复。
[0087]
(8)香蕉果实多聚半乳糖醛酸酶(pg)的测定
[0088]
测定方法参照江苏苏州科铭生物公司多聚半乳糖醛酸酶(pg)试剂盒，多聚半乳糖醛酸酶水解果胶酸生成半乳糖醛酸，具有还原性醛基，与dns试剂反应生成红棕色物质，在540nm有特征吸收峰，测定540nm处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。
[0089]
(9)香蕉果实果胶裂解酶(pl)的测定
[0090]
测定方法参照江苏苏州科铭生物公司果实果胶裂解酶(pl)试剂盒。果胶裂解酶作用于果胶中的α-1，4糖苷键，生成在还原端c4和c5之间位置具有不饱和键的不饱和寡聚半乳糖醛酸，在235nm处有特征吸收峰。
[0091]
(10)香蕉果实果胶甲酯酶(pme)活性的测定方法
[0092]
酶液提取：参照肖双灵(2017)等的方法，每处理取1g果肉组织，以w:v＝1:4的比例加入4ml的8.8％的氯化钠溶液，倒入5ml离心管中4℃下12，000r
·
min-1离心10min。取上清液位待测粗酶液。
[0093]
测定方法为3ml的反应体系中含有：0.5％的果胶溶液2ml，0.01％溴麝香酚蓝指示剂0.15ml，酶提取液0.1ml，水0.75ml。反应温度维持在25℃，测定前调节溶液的ph值至7.5，摇匀后于620nm处吸光值，记录其1min的变化值。根据标准曲线求出产生的半乳糖醛酸含量，以每分钟产生1μg的半乳糖醛酸的量为一个酶活力单位(u)，样品的酶活性以u
·
g-1fw表示。每项重复测定3次。测定前必须调节溶液的ph值至7.5(用2mol/lnaoh调节)。
[0094]
(11)内源激素iaa和aba的提取及测定
[0095]
参考王丹(2019)具体方法如下：前处理方法：称取0.5g样品，移入10ml离心管，加入3ml提取液(80％丙酮)，4℃低温(4℃)离心10min，取上清液，氮吹浓缩至0.6ml液体，加入50μl1mol/l的naoh调ph至8-9，将水醚混合液4℃低温离心5min，弃醚相，保留水相(下层)，轻轻摇匀，再加3ml石油醚，低温震荡10min，水相过c18柱，加入10μl甲酸调ph至2-3，轻轻摇匀，加入2ml乙酸乙酯，低温震荡10min，收集乙酸乙酯(上层)，保留水相(下层)，重复加入乙酸乙酯萃取再一遍，合并两次乙酸乙酯，氮吹吹干，加入0.2ml80％的甲醇溶液溶解样品，过0.22μm膜，上机测样。
[0096]
(11)透射电镜观察果实细胞壁超微结构
[0097]
透射电镜方法参考xuetal.，(2016)有所改动。取不同贮藏时间的果实组织皮，取果皮纵切成1
×1×
1mm3小块，用2.5％戊二醛和1％四氧化锇固定，然后用pbs缓冲液洗涤，乙醇梯度洗脱，包埋于spi812树脂中，德国leicade的uct超薄切片机(leica，germany)切片。并用醋酸双氧铀溶液和柠檬酸铅双重染色，再使用透射电子显微镜(tecnai-12，philips，荷兰)观察，并在2kv加速电压拍摄图像。
[0098]
3、生理指标测试结果
[0099]
(1)图1为不同处理对香蕉果实成熟指数变化的影响，从图中不同浓度1-mcp处理组延缓果实转色的情况看来，各处理组均对果实转色有一定影响，高浓度处理组的转色抑制效果更加明显，400nl/l1-mcp处理组果皮颜色不能全部正常褪绿转，引起果实转色不均匀，影响果实的商品价值。而300nl/l1-mcp处理组处理结果相对最佳。
[0100]
(2)图2为不同处理对香蕉果实乙烯合成的影响，从图2可以看到，不同浓度1-mcp处理组均有效地延缓了果实乙烯释放高峰的出现和降低释放峰值，高浓度1-mcp处理抑制效果最为明显。ck-2乙烯释放高峰出现在第1d，后期在第3天果实乙烯释放率出现明显上升趋势，考虑原因可能是由于果实病害加重，导致果实乙烯释放率剧增。1-mcp处理组都能在一定程度上抑制乙烯的释放量，其中300nl/l、400nl/l的抑制效果最好，乙烯释放高峰要显著低于其他处理组，但在货架期后期300nl/l1-mcp处理组乙烯释放量有所上升，与其他处理组差异不明显。而400nl/l在整个货架期保持较低的释放量，可能是造成后熟障碍的原因之一。因此，300nl/l1-mcp处理为最佳处理。
[0101]
(3)图3为不同处理对香蕉果实呼吸速率的影响，从图3可知，ck-1，ck-2香蕉果实呼吸速率在第3d达到峰值，而其它处理组在整个货架期平缓上升，整个货架期1-mcp处理组果实的呼吸速率都显著低于ck-1和ck-2。各处理组在第6天呼吸速率有所上升，考虑后期果实成熟衰老，易致使微生物增加，呼吸速率有所上升。
[0102]
(4)图4为不同处理对香蕉果实整果硬度的影响，图5为不同处理对香蕉果实果肉硬度的影响，从图4和5可知，经过催熟后的果实，不同浓度的1-mcp处理均延缓了果实硬度的下降，其中200、300nl/l1-mcp处理组和400nl/l1-mcp处理组在催熟后第12天仍保持较高的果实硬度，但400nl/l1-mcp处理组较高的果实硬度存在着后熟障碍，果实无法正常成熟软化，影响果实的商品价值。各不同浓度1-mcp处理组均有效地延缓了果实果肉硬度的下降，第5天对照组果实已经完全成熟软化，而高浓度1-mcp处理组仍保持较高的果实硬度，在第7天对照组已完全成熟软化，而高浓度1-mcp处理组仍保持较高的果肉硬度，400nl/l1-mcp处理组果实硬度较高，不能正常软化。
[0103]
(5)图6为不同处理对香蕉果实病情指数的影响，从图6可知，ck-1和ck-2在第6d开始发病，但ck-2的褐变程度要高于ck-1。100nl/l1-mcp处理组在第8d开始出现炭疽病病斑。高浓度1-mcp处理组在10-14d，其发病率较低。
[0104]
(6)图7为不同处理对香蕉果实果柄韧度的影响，从图7可知，ck-2在3d(成熟度5-6级)果柄韧度下降较快，开始出现脱把情况。在7d(成熟度6-7级)把柄极容易脱落。1-mcp处理组在第0天到7天，果柄韧度较大。由此可知，与对照组相比，1-mcp处理对于延缓采后香蕉果实果实脱把，其中以300nl/l、400nl/l1-mcp处理组的浓度效果最为显著。
[0105]
综上所述，300nl/l1-mcp处理对香蕉果实转黄指数、硬度和色度和果柄韧度等表
型指标的综合效果最好，300nl/l1-mcp处理为最佳处理。
[0106]
此外，1-mcp具有结构简单、无毒、无难闻气味、稳定性好、易于合成、使用浓度低等优点，被广泛运用在果蔬保鲜中，本发明采用1-mcp处理香蕉防止其脱把不会造成任何毒副作用。
[0107]
实施例2模拟香蕉商业流通模式
[0108]
1、香蕉果实的保鲜方法
[0109]
(1)预处理：供试香蕉品种为“巴西蕉”，采收果指饱满度为7～8成。香蕉采收后立即运回实验室，进行落梳(不落单指)。落梳完成后，立即用浓度为2.5g/l的强力清洗剂浸泡10min后晾干，再用浓度为500mg/l的抑菌鲜与500mg/l的咪鲜胺混合溶液浸泡1min，取出后晾干。
[0110]
ck-1：预处理后的香蕉果实，新鲜采摘后用800ul/l乙烯利浸泡1min，晾干后用0.03mm聚乙烯袋包装(不密封)贮于(22
±
1)℃条件下进行成熟。
[0111]
ck-2：预处理后的香蕉果实，晾干后用0.03mm聚乙烯袋包装密封包装贮于(29
±
1)℃下贮藏15d，15天后打开聚乙烯包装袋，用800ul/l乙烯利浸泡1min，晾干后用0.03mm聚乙烯袋包装(不密封)贮于(22
±
1)℃下进行成熟。
[0112]
300nl/l的1-mcp处理组：预处理后的香蕉果实，晾干后分别用1-mcp有效浓度为300nl/l的1－mcp粉剂加少量的水溶解于密闭的泡沫箱内进行熏蒸16h后，用厚度为0.03mm聚乙烯密封包装，在29℃恒温箱中贮藏15d，贮藏15d后用800ul/l乙烯利浸泡1min，晾干后用0.03mm聚乙烯袋包装(不密封)贮于(22
±
1)℃下进行成熟。
[0113]
定期记录各处理组香蕉的硬度、脱把情况等生理变化情况，具体方法同实施例1。
[0114]
2、生理指标测试结果
[0115]
(1)图8为不同处理对香蕉果实整果硬度的影响，图9为不同处理对香蕉果实果肉硬度的影响，从图8和9可知，经过高温贮藏后，300nl/l1-mcp处理组整果硬度和果肉硬度与刚采收的果实相比，变化不明显，仍保持较高的硬度。经过高温贮藏后，ck-2整果硬度和果肉硬度明显下降，在货架期催熟后整果硬度下降迅速。300nl/l1-mcp处理组能有效延缓成熟进程中整果硬度和果肉硬度的下降。
[0116]
(2)图10为不同处理对香蕉果实病情指数的影响，从图10可以看到，ck-2在第5天出现炭疽病病斑，病情指数皆随贮藏时间的推移逐渐升高。在货架期第8天，300nl/l1-mcp病情指数显著仍低于ck-2，与新鲜采摘后催熟的香蕉果实在发病情况上无明显差别。由此可知，1-mcp处理能够有效缓解高温运输后采后病害对香蕉果实的影响，降低采后香蕉果实的病情指数。
[0117]
(3)图11为不同处理对香蕉果实果柄拉力的影响，图12为不同处理对香蕉果实香蕉果实表型的影响，从图11、12可看到，经过高温处理，ck-2在第4天开始出现脱把的现象，香蕉果实果柄拉力在20n左右，在每分钟内晃动整把香蕉的果指脱落，影响果实的商品性。而1-mcp处理组在第8天才出现整把脱落，与常温对照ck-1相比，出现整把脱把的时间要晚两天。由此可知，1-mcp处理后能有效延缓果实的脱把现象，保证香蕉果实的商品率。
[0118]
(4)图13为不同处理对香蕉果实果柄多聚半乳糖醛酸酶(pg)的影响，从图13中可看到，在果柄上，香蕉果实多聚半乳糖醛酸酶活性随贮藏时间延长呈上升趋势，300nl/l1-mcp处理组多聚半乳糖醛酸酶在0到5天都保持较低的活性，在成熟衰老后期有所上升，整个
货架期多聚半乳糖醛酸酶活性含量要显著低于ck-2。表明1-mcp处理能够抑制高温贮放下香蕉果实多聚半乳糖醛酸酶活性，从而延缓细胞壁的降解。
[0119]
(5)图14为不同处理对香蕉果实果柄果胶裂解酶(pl)的影响，从图14可知，在果柄中，ck-1果胶裂解酶在前5天平缓上升，在5到7天稍有下降。ck-2在整个货架期维持较高的活性，要显著高于其他处理组。1-mcp处理组果胶裂解酶活性不断上升，在前3天上升明显，整体活性要低于高温处理组。表明1-mcp处理组能够抑制高温贮放下香蕉果实果胶裂解酶活性，在一定程度延缓细胞壁的降解。
[0120]
(6)图15为不同处理对香蕉果实香蕉果柄果胶甲酯酶(pme)活性的影响，从图15可知，香蕉果实果胶甲酯酶活性随贮藏时间延长呈曲折上升趋势。在果柄中，ck-1、1-mcp处理组果胶甲酯酶活性随着贮藏时间延长不断上升，1-mcp处理组果胶甲酯酶活性在整个货架期要低于对照组。ck-2在前期活性要明显高于其他两个处理组，并不断上升，保持较高的果胶甲酯酶活性。表明1-mcp处理组能够在一定程度上抑制高温贮放下香蕉果实果胶甲酯酶活性的增加。
[0121]
(7)图16为不同处理对香蕉果实iaa含量的影响，ck-1常温处理iaa含量在第一天出现峰值后逐渐下降，高温处理后的ck-2果实内源激素先上升后下降，整个货架期都保持较高的含量，显著高于1-mcp处理组。而1-mcp处理内源激素iaa平缓上升，这一现象出现可能是由于高温会影响果蔬激素的释放，但1-mcp处理组能够抑制香蕉果实iaa的合成积累，但随着香蕉果实后熟，内源激素iaa有所上升，恢复正常水平。
[0122]
(8)图17为不同处理对香蕉果实aba含量的影响,在香蕉果实采后贮藏过程中，常温处理组ck-1和高温处理组ck-2大体呈现上升后下降的趋势，释放高峰出现在第3天，最大值达到90ng/g。而1-mcp处理组aba含量在货架期内持续上升，在第7天达到最高值75ng/g，1-mcp处理组在0-7天aba的含量都要显著低于对照组。这一现象说明，1-mcp处理能够有效降低脱落酸的合成和积累，可能与减轻果实的脱把相关。
[0123]
(9)图18为不同处理对香蕉果实细胞壁超微结构的影响，从图18可知，细胞壁完整性是维持果实硬度的关键因素，细胞壁是由果胶、蛋白质、纤维素和半纤维素组成的复杂结构。透射电镜观察了常温对照(ck-1)、高温对照(ck-2)和1-mcp处理组细胞壁组织超微结构的变化，与对照相比，1-mcp处理延缓了的果实细胞壁结构的降解，明显抑制了贮藏后期中胶层细胞壁纤维微丝的降解。ck-1在第5天，细胞壁的变薄，中胶层被分解(d3)，叶绿体结构崩解(d2)。ck-2在第5天，细胞壁和细胞膜出现了质壁分离的现象(e1)，中胶层模糊不清(e3)。叶绿体严重肿胀变形，里面的结构出现了离散和分解，叶绿体膜严重受损甚至消失(e2)。
[0124]
1-mcp处理组细胞壁开始变薄，但中胶层和微纤维丝仍然清晰可见，明暗分明(f1、f3)。线粒体和叶绿体分布在细胞壁周围，线粒体结构完整，叶绿体有轻微变形但里面的结构仍较为完整(f2)。ck-1果实在第7d，细胞内可观察的细胞器数量少，细胞器基本被分解完(g1)，中胶层完全被分解(g3)。
[0125]
综上所述，1-mcp处理香蕉果实能够抑制乙烯产生和呼吸作用，抑制果实后熟软化，减轻病害发生，更好地延缓香蕉果实硬度的下降，抑制了细胞壁降解酶活性的升高，维持细胞的完整结构，防止果实脱把。
[0126]
对比例1
[0127]
本对比例对香蕉的处理方法同实施例1中的1-mcp处理组，区别在于，采用有效浓度为300nl/l的1－mcp粉剂加少量的水溶解于密闭的泡沫箱内进行熏蒸2h。
[0128]
实验结果表明，熏蒸2h后，1-mcp处理组也有一定的效果，但果实转黄速度较快，延缓后熟的效果不如16h的1-mcp处理。在经过长时间的高温后，果实硬度下降较快，延缓果实脱把效果不显著，在完熟后期，果实的发病情况较为严重。
[0129]
对比例2
[0130]
本对比例对香蕉的处理方法同实施例1中的1-mcp处理组，区别在于，采用有效浓度为300nl/l的1－mcp粉剂加少量的水溶解于密闭的泡沫箱内进行熏蒸20h。
[0131]
实验结果表明，熏蒸20h后，过长的处理时间会导致香蕉果实无法后熟，即使是通过高浓度的乙烯利催熟，仍产生一系列的后熟障碍，果皮无法褪绿转黄，果实保持较高的硬度，失去商品价值。
[0132]
对比例3
[0133]
本对比例对香蕉的处理方法同实施例1中的1-mcp处理组，区别在于，采用有效浓度为600nl/l的1－mcp粉剂加少量的水溶解于密闭的泡沫箱内进行熏蒸16h。
[0134]
实验结果表明，600nl/l 1-mcp处理的香蕉催熟后不能正常转黄，无法褪绿，外观品质较差，在货架期第7天后熟指数低于4级，香蕉的整果硬度较大，与刚采摘的香蕉硬度无差异，乙烯释放量较低，出现明显的后熟障碍，失去商品性。
[0135]
对比例4
[0136]
本对比例对香蕉的处理方法同实施例1中的1-mcp处理组，区别在于，采用有效浓度为50nl/l的1－mcp粉剂加少量的水溶解于密闭的泡沫箱内进行熏蒸16h。
[0137]
实验结果表明，50nl/l 1-mcp处理的香蕉延缓果实后熟效果不明显，出现不同程度的青皮熟，亮度和饱和度明显低于实施例1中各1-mcp处理组。本对比例的方法无法延缓果实硬度下降和防止果指脱把，在成熟度达到5-6级，香蕉果指易与果柄分离，脱把程度与实施例1中的对照组无显著差异。
[0138]
综上实验表明，本技术采用1-甲基环丙烯熏蒸香蕉果实需要控制其特定的浓度和熏蒸时间，才能有效解决香蕉果实高温运输过程中出现品质劣变和果实易于脱把的问题，且能保证香蕉经催熟处理后果实可正常后熟(果皮褪绿转黄和果肉软化)。
[0139]
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。