吡唑并吡啶类化合物或其盐及其制备方法和用途与流程

1.本发明属于化学医药技术领域，具体涉及具有ret抑制活性的吡唑并吡啶类化合物及其制备方法和含有所述化合物的药物组合物，还涉及该吡唑并吡啶类化合物在制备预防或治疗与ret有关的疾病的药物中的用途。


背景技术：

2.ret(rearranged during transfection)蛋白是一种受体酪氨酸激酶(rtk)，同时也是一种跨膜的糖蛋白，由位于10号染色体上的原癌基因ret表达，在胚胎阶段的肾脏和肠神经系统的发育中起着重要作用，另外在多种组织内也很关键，如神经元、神经内分泌、造血组织和男性生殖细胞等。和其他的受体酪氨酸激酶不同，ret并不是直接结合到配体分子：如神经导向素(artemin)、胶质细胞源性神经营养因子(gdnf)、神经生长因子(ngf)，这些都是属于gndf家族配体(gfls)。这些配体通常结合到gdnf家族受体α(gfrα)，形成的gfls-gfrα复合物介导了ret蛋白的自二聚化，引起胞内结构域上酪氨酸的反式自磷酸化反应，招募相关接头蛋白，激活细胞增殖等信号传导的级联反应，从而导致细胞的过度增殖和癌症的产生，相关的信号通路包括mapk、pi3k、jak-stat、pka、pkc等等。
3.ret的致癌激活机制主要有两个：一是染色体的重排产生的新的融合蛋白，通常是ret的激酶结构域和包含自二聚化结构域的蛋白融合；二是ret突变直接或间接地激活了ret激酶活性。这些体细胞或生殖细胞水平地改变涉及多种癌症的发病机制。10％-20％的乳头状甲状腺癌(ptc)患者存在ret染色体重排；而在髓样性甲状腺髓样癌(mtc)中发现有60％存在ret点突变；在所有的非小细胞肺癌(nsclc)患者中，大概有1-2％的具有ret融合蛋白，其中kif5b最为常见。
4.目前主要采取的具有ret抑制活性的多重激酶抑制剂来治疗ret融合的癌症病人。但是在此条件下，由于脱靶效应及药物毒性，药物的剂量不足以达到足够抑制ret的表达水平。此外，在治疗癌症的过程中，癌细胞会通过变异产生耐药性。而一旦耐药性产生，病人的治疗选择将会变得非常有限。因此选择性地抑制异常的ret表达，ret融合及突变的药物非常急需。
5.目前上市或临床在研的选择性地针对ret靶点设计的药物，在非小细胞肺癌和甲状腺癌的临床实验上表现出了好的疗效及安全性。
6.目前，仍然非常需要发现和开发新的ret抑制剂化合物以用于预防和/或治疗与ret有关的疾病。这样的化合物除了应具有令人满意的ret抑制活性外，还期望基于结构的优化而具备良好的、甚至改进的成药性，以便为相关疾病患者提供更多用药选择的同时还能提供更好的治疗效果。
7.发明简述
8.本发明涉及可用于预防或治疗与ret有关的疾病的化合物。特别地，已经鉴定，本发明的化合物显示令人满意的ret抑制活性，而且在体内和/或体外药代动力学实验中显示良好的性能，预示着改进的成药性和改进的生物利用度。因此，本发明化合物不仅可实现用
于预防或治疗与ret有关的疾病的目的，而且所制备的药物有望具有改善的吸收、在同等剂量下疗效提高、或以更低的剂量提供相同疗效和/或降低可能的副作用。由此，本发明还提供了本发明化合物在制备用于预防或治疗与ret有关的疾病的药物中的用途、包含所述化合物的药物组合物和通过施用所述化合物预防和/或治疗与ret有关的疾病的方法。
9.因此，在本发明的一方面，提供式(i)化合物、其立体异构体、互变异构体、稳定的同位素变体、药学上可接受的盐或溶剂合物：
[0010][0011]
其中：
[0012]
r1选自氢、卤素、氰基、硝基和任选被卤素或氰基取代的c
1-c6烷基；
[0013]
r2选自氢、c
6-c
10
芳基、5-9元杂芳基、c
3-c8环烷基、c
3-c8环烯基、3-8元杂环烷基、3-8元杂环烯基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基，其中所述芳基、杂芳基、环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、烷基、烷氧基和烷硫基任选被独立地选自以下的1、2或3个基团取代：卤素、氰基、硝基、羟基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基；
[0014]
r3选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基；
[0015]
r4选自氢、c
6-c
10
芳基、5-9元杂芳基、c
3-c8环烷基、c
3-c8环烯基、3-8元杂环烷基、3-8元杂环烯基、3-8元杂环烷基氧基、3-8元杂环烯基氧基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基，其中所述芳基、杂芳基、环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、烷基、烷氧基和烷硫基任选被独立地选自以下的1、2或3个基团取代：卤素、氰基、硝基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基；
[0016]
r5选自卤素、氰基、硝基、羟基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基；
[0017]
环a选自c
6-c
10
亚芳基、5-9元亚杂芳基、c
3-c8亚环烷基、c
3-c8亚环烯基、3-8元亚杂环烷基和3-8元亚杂环烯基环；
[0018]
环b选自c
6-c
10
芳基、5-9元杂芳基、c
3-c8环烷基、c
3-c8环烯基、3-8元杂环烷基和3-8元杂环烯基环；
[0019]
m是0、1、2或3；且
[0020]
n是0、1、2或3。
[0021]
在本发明的另一方面，提供了具有ret抑制活性、用作药物、尤其是用作ret抑制剂的式(i)化合物、其立体异构体、互变异构体、稳定的同位素变体、药学上可接受的盐或溶剂合物。
[0022]
在本发明的另一方面，提供了用于治疗或预防、尤其是用于治疗与ret有关的疾病的式(i)化合物、其立体异构体、互变异构体、稳定的同位素变体、药学上可接受的盐或溶剂合物。
[0023]
在本发明的另一方面，提供了包含本发明化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在一个具体的方面，提供了所述本发明的药物组合物，用于预防或治疗与ret有关
的疾病。在一个具体的方面，药物组合物可以另外包含适合与本发明化合物组合使用的另外的治疗活性成分。
[0024]
在本发明的另一方面，提供了包含本发明化合物和另外的活性剂的药物组合(或药物组合产品)。
[0025]
在本发明的另一方面，提供了用于在个体，例如哺乳动物、特别是人中预防或治疗与ret有关的疾病的方法，该方法包括施用有效量的本文所述的本发明化合物或包含其的药物组合物。
[0026]
在本发明的另一方面，提供了上述本发明的化合物或药物组合物用于预防或治疗与ret有关的疾病的用途。
[0027]
在本发明的另一方面，提供了上述本发明的化合物或药物组合物在制备用于预防或治疗与ret有关的疾病的药物中的用途。
[0028]
优选地，本发明所述的与ret有关的疾病选自肿瘤或肠易激综合症(ibs)，肿瘤包括但不限于非小细胞肺癌、小细胞肺癌、乳头状甲状腺癌、甲状腺髓质癌、分化型甲状腺癌、复发性甲状腺癌、顽固性分化型甲状腺癌、多内分泌肿瘤2a或2b、嗜铬细胞瘤、甲状旁腺增生、乳腺癌、结肠直肠癌、乳头状肾细胞癌、胃肠黏膜神经节瘤、胰管腺癌、多发性内分泌瘤、睾丸癌、慢性单核细胞性白血病、唾腺癌、卵巢癌、子宫颈癌等。
[0029]
在另外的方面，提供了用于合成本发明化合物的方法，其中代表性的合成方案和途径在下文描述。
[0030]
通过阅读随后的详细描述，本发明的其它目的和优点对于本领域技术人员将变得显而易见。
[0031]
对于上述用作药物的本发明化合物、本发明的预防或治疗方法、药物组合物、药物组合或用途而言，优选本文所定义的式(i)化合物的各个优选实施方式，更优选文中所列的具体化合物。
[0032]
定义
[0033]
除非在下文中另有定义，本文中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。提及本文中使用的技术意图指在本领域中通常所理解的技术，包括那些对本领域技术人员显而易见的技术的变化或等效技术的替换。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。
[0034]
本文所用的术语“卤代”或“卤素”意指氟(f)、氯(cl)、溴(br)及碘(i)。优选的卤代为氟或氯。本文所用的术语“被卤素取代的”基团旨在包括单卤代或多卤代基团，其中一个或多个(例如2、3、4、5或6个)相同或不同的卤素取代基团中的一个或多个(例如2、3、4、5或6个)氢。
[0035]
本文所用的术语“氰基”意指基团-cn。
[0036]
本文所用的术语“硝基”意指基团-no2。
[0037]
如本文中所使用的术语“羟基”指-oh。
[0038]
如本文中所使用的术语“烷基”指由碳原子和氢原子组成的直链或支链的饱和烃基团。具体地，烷基具有1-10个，例如1至6个、1至5个、1至4个、1至3个或1至2个碳原子。例如，如本文中所使用，术语“c
1-c6烷基”指具有1至6个碳原子的直链或支链的饱和烃基团，其实例例如甲基、乙基、丙基(包括正丙基和异丙基)、丁基(包括正丁基、异丁基、仲丁基或叔
丁基)、戊基(包括正戊基、异戊基、新戊基)、正己基、2-甲基戊基等。特定的烷基具有1至3个碳原子。
[0039]
本文所用的术语“烷氧基”意指基团-o-烷基，其中烷基具有本文所述的含义。具体地，该术语包括基团-o-c
1-6
烷基，更具体的-o-c
1-3
烷基。烷氧基的代表性实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基(包括正丙氧基、异丙氧基)、丁氧基(包括正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基)、戊氧基(包括正戊氧基、异戊氧基、新戊氧基)、己氧基(包括正己氧基、异己氧基)等。特定的烷氧基具有1至3个碳原子。
[0040]
如本文中所使用的术语“烷硫基”指-s-烷基，其中所述烷基如以上对于“烷基”所定义。具体地，该术语包括基团-s-c
1-6
烷基，更具体的-s-c
1-3
烷基。烷硫基的代表性实例包括但不限于甲硫基、乙硫基、丙硫基(包括正丙硫基、异丙硫基)、丁硫基(包括正丁硫基、异丁硫基、叔丁硫基)、戊硫基(包括正戊硫基、异戊硫基、新戊硫基)、己硫基(包括正己硫基、异己硫基)等。特定的烷硫基具有1至3个碳原子。如本文中所使用的术语“卤素取代的c
1-c6烷基”指上文所述的c
1-c6烷基，其中一个或多个(例如1、2、3、4或5个)氢原子被卤素代替。本领域技术人员应当理解，当卤素取代基多于一个时，卤素可以相同也可以不同，并且可以位于相同或不同的c原子上。“卤素取代的c
1-c6烷基”的实例有例如-ch2f、-chf2、-cf3、-ccl3、-c2f5、-c2cl5、-ch2cf3、-ch2cl、-ch2ch2cf3或-cf(cf3)2等。
[0041]
如本文中所使用的术语“卤素取代的c
1-c6烷氧基”指上文所述的c
1-c6烷氧基，其中一个或多个(例如1、2、3、4或5个)氢原子被卤素代替。本领域技术人员应当理解，当卤素取代基多于一个时，卤素可以相同也可以不同，并且可以位于相同或不同的c原子上。“卤素取代的c
1-c6烷氧基”的实例有例如-och2f、-ochf2、-ocf3、-occl3、-oc2f5、-oc2cl5、-och2cf3、-och2cl或-och2ch2cf3等。
[0042]
如本文中所使用的术语“环烷基”指具有指定环原子数的单环、稠合多环、桥接多环或螺环非芳族饱和单价烃环结构。环烷基可具有3至12个碳原子(即c
3-c
12
环烷基)，例如3至10个，3至8个，3至7个，3至6个，5至6个碳原子。适合的环烷基的实例包括但不限于单环结构，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基；或多环(例如双环)结构，包括螺环、稠合或桥连系统，诸如双环[1.1.1]戊基、双环[2.2.1]庚基、螺[3.4]辛烷基、双环[3.1.1]己烷基、双环[3.1.1]庚基或双环[3.2.1]辛基等)。
[0043]
如本文中所使用的术语“亚环烷基”指如上所定义的环烷基，但其为二价基团，该两个价键不在同一环原子上。亚环烷基可具有3至12个碳原子(即c
3-c
12
亚环烷基)，例如3至10个，3至8个，3至7个，3至6个，5至6个碳原子。适合的亚环烷基的实例包括但不限于单环结构，如亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基(例如环戊-1,2-二基、环戊-1,3-二基)、亚环己基(例如环己-1,2-二基、环己-1,3-二基、环己-1,4-二基)、亚环庚基或亚环辛基；或多环(例如双环)结构，包括螺环、稠合或桥连系统，诸如双环[1.1.1]亚戊基、双环[2.2.1]亚庚基、螺[3.4]亚辛烷基、双环[3.1.1]亚己烷基、双环[3.1.1]亚庚基或双环[3.2.1]亚辛基等)。
[0044]
本文所用的术语“环烯基”意指具有指定环原子数的单环、稠合多环、桥接多环或螺环非芳族不饱和烃环结构，包含至少一个(例如1、2、或3个)碳碳双键。环烯基可具有3至12个碳原子(即c
3-c
12
环烯基)，例如3至10个，3至8个，3至7个，3至6个，5至6个碳原子。适合的环烯基的实例包括但不限于单环结构，如环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚烯基、环庚二烯基、环庚三烯基或环辛烯基。
[0045]
如本文中所使用的术语“亚环烯基”指如上所定义的环烯基，但其为二价基团，该两个价键不在同一环原子上。亚环烯基可具有3至12个碳原子(即c
3-c
12
亚环烯基)，例如3至10个，3至8个，3至7个，3至6个，5至6个碳原子。适合的亚环烯基的实例包括但不限于单环结构，如亚环丙烯基、亚环丁烯基、亚环戊烯基、亚环戊二烯基、亚环己烯基、亚环己二烯基、亚环庚烯基、亚环庚二烯基、亚环庚三烯基或亚环辛烯基。
[0046]
本文所用的术语“杂环烷基”意指包括一或多个(例如1、2、3或4个)独立地选自o、n及s的杂原子及指定环原子数的单环、稠合多环、螺环或桥接多环非芳族饱和环结构，或其n-氧化物，或其s-氧化物或s-二氧化物。杂环烷基可具有3至12个环成员(可称为3-12元杂环烷基)，例如3至10个环成员，3至8个环成员，3至7个环成员，4至7个环成员，5至6个环成员。杂环烷基通常含有至多4个(例如1个、2个、3个或4个)杂原子。适合的杂环烷基的实例包括但不限于氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁基、吡咯烷基(例如1-吡咯烷基、2-吡咯烷基及3-吡咯烷基)、四氢呋喃基(例如1-四氢呋喃基、2-四氢呋喃基及3-四氢呋喃基)、四氢噻吩基(例如1-四氢噻吩基、2-四氢噻吩基及3-四氢噻吩基)、哌啶基(例如1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基及4-哌啶基)、四氢吡喃基(例如4-四氢吡喃基)、四氢噻喃基(例如4-四氢噻喃基)、吗啉基(例如吗啉代)、硫吗啉基、二噁烷基、哌嗪基或氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基例如1,4-二氮杂环庚基、3,6-二氮杂-双环[3.1.1]庚基或3-氮杂-双环[3.2.1]辛基。
[0047]
本文所用的术语“亚杂环烷基”意指如上所定义的杂环烷基，但其为二价基团，该两个价键不在同一环原子上。亚杂环烷基可具有3至12个环成员(可称为3-12元亚杂环烷基)，例如3至10个环成员，3至8个环成员，3至7个环成员，4至7个环成员，5至6个环成员。亚杂环烷基通常含有至多4个(例如1个、2个、3个或4个)杂原子。适合的亚杂环烷基的实例包括但不限于氮杂亚环丁烷基、氧杂亚环丁烷基、硫杂亚环丁基、亚吡咯烷基(例如吡咯烷-1,2-二基、吡咯烷-1,3-二基、吡咯烷-2,3-二基)、亚四氢呋喃基(例如四氢呋喃-2,4-二基、四氢呋喃-2,3-二基及四氢呋喃-2,5-二基)、亚哌啶基(例如哌啶-1,2-二基、哌啶-1,3-二基、哌啶-1,4-二基、哌啶-2,4-二基)、亚四氢噻吩基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、亚吗啉基、亚硫吗啉基、亚二噁烷基、亚哌嗪基或氮杂亚环庚烷基、二氮杂亚环庚烷基例如1,4-二氮杂亚环庚基、3,6-二氮杂-双环[3.1.1]亚庚基或3-氮杂-双环[3.2.1]亚辛基，优选
[0048][0049]
本文所用的术语“杂环烯基”意指包含至少一个(例如1、2或3个)双键的本文所定义的“杂环烷基”。适合的杂环烯基的实例包括但不限于：
[0050][0051]
其中各w选自ch2、nh、o及s；各y选自nh、o、c(＝o)、so2及s；且各z选自n及ch，条件是各个环中至少包含一个选自n、o或s的原子；例如吡咯啉基(例如1-吡咯啉基、2-吡咯烷基、3-吡咯啉基、4-吡咯啉基或5-吡咯啉基)、二氢呋喃基(例如1-二氢呋喃基、2-二氢呋喃基、3-二氢呋喃基、4-二氢呋喃基或5-二氢呋喃基)、二氢噻吩基(例如1-二氢噻吩基、2-二氢噻吩基、3-二氢噻吩基或4-二氢噻吩基)、四氢吡啶基(例如1-、2-、3-、4-、5-或6-四氢吡啶基)、四氢吡喃基(例如4-四氢吡喃基)或四氢噻喃基(例如4-四氢噻喃基)。
[0052]
本文所用的术语“亚杂环烯基”意指如上所定义的杂环烯基，但其为二价基团，该两个价键不在同一环原子上。适合的亚杂环烯基的实例包括但不限于：
[0053][0054]
其中各w选自ch2、nh、o及s；各y选自nh、o、c(＝o)、so2及s；且各z选自n及ch，条件是各个环中至少包含一个选自n、o或s的原子；例如亚吡咯啉基、亚二氢呋喃基、亚二氢噻吩基、亚四氢吡啶基、亚四氢吡喃基或亚四氢噻喃基，优选更优选
[0055]
本文所用的术语“芳基”意指通过自芳族环系统中的单个碳原子移除一个氢原子而衍生的单价芳族烃基。具体地，芳基系指具有指定环原子数的单环或稠合多环芳族环结构。具体地，该术语包括包含6至14个、例如6至10个、优选6个环成员的基团。特定的芳基包括苯基及萘基，最具体的芳基为苯基。
[0056]
本文所用的术语“亚芳基”意指如上所定义的芳基，但其为二价基团，该两个价键不在同一环原子上。特定的亚芳基包括亚苯基，例如苯-1,2-二基、苯-1,3-二基或苯-1,4-二基。
[0057]
本文所用的术语“杂芳基”意指包括一或多个(例如1、2、3或4个)独立地选自o、n及s的杂原子及指定环原子数的单环或稠合多环芳族环结构，或其n-氧化物，或其s-氧化物或s-二氧化物。具体地，该芳族环结构可具有5至9个环成员。杂芳基可为例如5-6元单环、或由稠合的两个5元环或稠合的5元环和4元环形成的稠合双环结构。杂芳基环通常将含有至多4个杂原子、更通常至多3个杂原子、更通常至多2个、例如单个独立地选自o、n及s的杂原子，其中n和s可以是氧化状态如n氧化物、s＝o或s(o)2。在一个实施方案中，杂芳基环含有至少一个环氮原子、至少一个环硫原子或至少一个环氧原子。例如，杂芳基可以是包含1或2个独
立地选自n、o或s的杂原子的5-6元杂芳基。适合的5元单环杂芳基的实例包括但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、呋咱基、噁唑基、噁二唑基、噁三唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、三唑基及四唑基；适合的6元单环杂芳基的实例包括但不限于吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基及三嗪基。
[0058]
本文所用的术语“亚杂芳基”意指如上所定义的杂芳基，但其为二价基团，该两个价键不在同一环原子上。亚杂芳基可以是包含1或2个独立地选自n、o或s的杂原子的5-6元亚杂芳基。适合的5元单环亚杂芳基的实例包括但不限于亚吡咯基、亚呋喃基、亚噻吩基、亚咪唑基、亚呋咱基、亚噁唑基、亚噁二唑基、亚噁三唑基、亚异噁唑基、亚噻唑基、亚异噻唑基、亚吡唑基、亚三唑基及亚四唑基；适合的6元单环杂芳基的实例包括但不限于亚吡啶基、亚吡嗪基、亚哒嗪基、亚嘧啶基及亚三嗪基；优选
[0059][0060]
取代基被描述为“任选取代的”意指基团可以是未取代的或被一个或多个(例如0、1、2、3、4或5或更多个，或其中可衍生的任何范围)对该基团所列的取代基取代，其中所述取代基可以相同或不同。在一个实施方案中，任选取代的基团被1个取代基取代。在另一个实施方案中，任选取代的基团被2个取代基取代。在另一个实施方案中，任选取代的基团被3个取代基取代。在另一个实施方案中，任选取代的基团被4个取代基取代。
[0061]
有机合成领域普通技术人员均理解，稳定的化学可行的杂环，无论芳族还是非芳族，其中最大杂原子数或所含杂原子的类型由环大小、不饱和度及杂原子的价数决定。一般而言，杂环可具有1至4个杂原子，前提是杂环或杂芳环在化学可行及稳定。
[0062]
本文所用的术语“本发明的化合物”意欲涵盖如本文所定义的通式(i)的化合物或其任一优选或具体的实施方案(包括式(ia)和式(ib)的化合物)、它们的立体异构体、互变异构体、稳定的同位素变体、药学上可接受的盐或溶剂合物，以及前药。类似地，本文中对“中间体”的称谓，无论其本身是否被请求保护，若上下文允许，则均意欲涵盖其游离形式以及上述各衍生形式。
[0063]
本文所用的术语“药学可接受的”意指由各个国家的相应机构批准的或可由其批准，或列于用于动物且更具体地人类的一般公认药典中，或当向动物例如人类适量施用时不会产生不利、过敏或其它不良反应的分子实体和组合物。
[0064]
本文所用的术语“药学可接受的盐”意指药学上可接受且具有母体化合物所需药理学活性的本发明化合物的盐。具体地，此类盐无毒，可为无机酸加成盐或有机酸加成盐及碱加成盐。具体地，此类盐包括：(1)与无机酸形成的酸加成盐，该无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或与有机酸形成的酸加成盐，该有机酸如乙酸、丙酸、己酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、葡糖庚酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、黏康酸等；或(2)当存在于母体化合物中的酸性质子经金属离子如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子置换时、或与有机碱如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、n-甲基葡糖胺等配位时形成的盐。本领域技术人员将知道制备药用盐的一般原理和技术，例如berge等，pharm scl，66，1-19.
(1977)中所述的那些。
[0065]
本文所用的术语“前药”意指具有可裂解基团且通过溶剂分解或在生理条件下变成在体内具有药学活性的本发明化合物的化合物，包括本发明化合物的衍生物。前药包括本领域熟知的酸衍生物，如通过母体酸与适合醇反应制备的酯，或通过母体酸化合物与取代或未取代的胺反应制备的酰胺，或酸酐或混合酸酐。衍生自本发明化合物侧接的酸基的简单脂族或芳族酯、酰胺及酸酐为尤其适用的前药。特定的此类前药为本发明化合物的c
1-8
烷基、c
2-8
烯基、任选被取代的c
6-10
芳基及(c
6-10
芳基)-(c
1-4
烷基)酯。
[0066]
本发明还包括所有药学上可接受的同位素化合物，其与本发明的化合物相同，除了一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于在自然界中占优势的原子质量或质量数的原子替代。适合包含入本发明化合物中的同位素的实例包括(但不限于)氢的同位素(例如2h、3h)；碳的同位素(例如11c、13c及14c)；氯的同位素(例如36cl)；氟的同位素(例如18f)；碘的同位素(例如123i及125i)；氮的同位素(例如13n及15n)；氧的同位素(例如15o、17o及18o)；磷的同位素(例如32p)；及硫的同位素(例如35s)。
[0067]
如本文中所使用的术语“立体异构体”表示由于至少一个不对称中心形成的异构体。在具有一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)不对称中心的化合物中，其可产生外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单独的非对映异构体。特定个别分子也可以以几何异构体(顺式/反式)存在。类似地，本发明的化合物可以以两种或更多种处于快速平衡的不同结构形式的混合物(通常称作互变异构体)存在。互变异构体的代表性实例包括酮-烯醇互变异构体、苯酚-酮互变异构体、亚硝基-肟互变异构体、亚胺-烯胺互变异构体等。例如，亚硝基-肟在溶液中可以下列互变异构形式平衡存在：
[0068][0069]
需要理解的是，本技术的范围涵盖所有这样的以任意比例(例如60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％)的异构体或其混合物。
[0070]
除非另外指明，否则本发明的化合物意欲可以立体异构体(其包括顺式及反式异构体、光学异构体(例如r及s对映异构体)、非对映异构体、几何异构体、旋转异构体、构象异构体、阻转异构体及其混合物)的形式存在。本发明的化合物可表现一种以上类型的异构现象，且由其混合物(例如外消旋混合物及非对映异构体对)组成。
[0071]
本文所用的术语“溶剂合物”是指包含化学计量的或非化学计量的溶剂的溶剂加成形式，包括例如与水的溶剂合物，例如水合物，或与有机溶剂的溶剂合物，例如甲醇、乙醇或乙腈，即分别作为甲醇化物、乙醇化物或乙腈化物；或为任何多晶型物的形式。应当理解的是，本发明化合物的这类溶剂合物还包括本发明化合物的药学可接受盐的溶剂合物。
[0072]
本文所使用的术语“预防“意指给怀疑患上或易感于如本文所定义的与ret有关的疾病、尤其是炎症或自身免疫疾病的个体个体、例如哺乳动物、例如人施用一种或多种本发明的化合物，使得罹患所定义疾病的风险降低。术语“预防”包含在诊断或确定任何临床和/或病理症状以前使用本发明的化合物。
[0073]
本文所用的术语“治疗”是指给患有所述疾病、或者具有所述疾病的症状的受试者、例如哺乳动物、例如人施用一种或多种本文所述的本发明化合物，用以治愈、缓解、减轻
或影响所述疾病或所述疾病的症状。在本发明具体的实施方案中，所述疾病是本文所定义的与ret有关的疾病、尤其是炎症或自身免疫疾病。
[0074]
本文所用的术语“与ret有关的疾病”意指ret对所述疾病的发生和发展起到促进作用，或抑制ret将降低疾病的发生率、减少或消除疾病病状的疾病。对于本发明而言，“与ret有关的疾病”选自肿瘤或肠易激综合症(ibs)，肿瘤包括但不限于非小细胞肺癌、小细胞肺癌、乳头状甲状腺癌、甲状腺髓质癌、分化型甲状腺癌、复发性甲状腺癌、顽固性分化型甲状腺癌、多内分泌肿瘤2a或2b、嗜铬细胞瘤、甲状旁腺增生、乳腺癌、结肠直肠癌、乳头状肾细胞癌、胃肠黏膜神经节瘤、胰管腺癌、多发性内分泌瘤、睾丸癌、慢性单核细胞性白血病、唾腺癌、卵巢癌、子宫颈癌等。
[0075]
如本文中所使用的术语“癌症”或“肿瘤”是指赘生性细胞生长和增殖，无论是恶性的还是良性的，和所有的癌前期细胞和癌细胞和组织。对本发明的化合物、方法、药物组合物、药物组合及用途而言，所述癌症或肿瘤包括但不限于结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底层细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、肺癌、白血病、膀胱癌、胃癌、子宫颈癌、睾丸癌、皮肤癌、直肠癌、甲状腺癌、肾癌、子宫癌、天疱疮癌、肝癌、听神经瘤、少突神经胶质瘤、脑(脊)膜瘤、成神经细胞瘤、眼癌。
[0076]
本文所使用的术语“治疗有效量“意指当向个体施用以治疗疾病时足以减轻或完全缓解病症的症状或其它有害作用；逆转、完全停止或减缓病症的进展；或降低病症恶化的风险的量，“有效量”可视化合物、疾病及其严重程度及待治疗的个体的年龄、体重等而变化。
[0077]
如本文所使用的术语“个体”包括人或非人动物。示例性人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物(例如绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。
[0078]
本发明所述的“药物组合物”，指包含一种或多种式(i)化合物或者其立体异构体、互变异构体、稳定的同位素衍生物、药学上可接受的盐或溶剂合物和在本领域中通常接受的用于将生物活性化合物输送至有机体(例如人)的载体的组合物。
[0079]
本文所用的术语“药物组合”是指本发明化合物可与其它活性剂组合用于实现本发明的目的。所述其他活性剂可以是一种或多种另外的本发明化合物，或可以是与本发明化合物相容即不会相互不利影响、或具有互补活性的第二种或另外的(例如第三种)化合物。这类活性剂以达到预期目的的有效量适宜地组合存在。所述其他活性剂可以与本发明化合物在单一药物组合物中共同施用，或与本发明化合物处于不同的离散单元中分别施用，当分别施用时可以同时或相继进行。所述相继施用在时间上可以是接近或隔远的。
[0080]
本文所用的术语“药学上可接受的赋形剂或载体”是指一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，其药理学上无活性，与组合物中的其它成分相容，并且应是对温血动物如人给药可接受的，用作本发明化合物在施用形式中的载体或介质，其实例包括但不限于纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、醋酸纤维素等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如吐温类)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂等。
[0081]
应理解，当本文描述本发明化合物、包含其的药物组合物、药物组合以及相关的用
途和方法时所涉及的剂量，是基于游离形式的重量，而非基于其任何盐、水合物或溶剂化物等，除非说明书中另外定义。
[0082]
本发明化合物
[0083]
本技术通篇使用的术语“发明的化合物”和“本发明的化合物”等，除非另外指出，涵盖本文各个实施方案及其具体或优选实施方式中定义的式(i)化合物、它们的立体异构体、互变异构体、稳定的同位素变体、药学上可接受的盐或溶剂合物，以及前药。所述立体异构体、互变异构体、稳定的同位素变体、药学上可接受的盐或溶剂合物以及前药如上文定义部分所描述。优选地，本发明化合物为式(i)化合物的游离形式或其药学上可接受的盐或溶剂合物；最优选为式(i)化合物的游离形式或其药学上可接受的盐。
[0084]
本发明的某些化合物可以以多晶型或无定形形式存在，它们也落入本发明的范围内。当为固体结晶形式时，式(i)化合物可以是与另一种化学实体的共晶体形式，并且本说明书包括所有这些共晶体。
[0085]
在存在手性中心时，本发明的化合物可以以单独的对映异构体或对映体混合物形式存在。根据一个实施方案，提供了式(i)化合物或其药学上可接受的盐，其是对映体过量(％ee)＞95、＞98％或＞99％的单一对映体。优选地，单一对映异构体以＞99％的对映异构体过量(％ee)存在。
[0086]
具体地，一方面，本发明提供式(i)化合物、其立体异构体、互变异构体、稳定的同位素变体、药学上可接受的盐或溶剂合物：
[0087][0088]
其中：
[0089]
r1选自氢、卤素、氰基、硝基和任选被卤素或氰基取代的c
1-c6烷基；
[0090]
r2选自氢、c
6-c
10
芳基、5-9元杂芳基、c
3-c8环烷基、c
3-c8环烯基、3-8元杂环烷基、3-8元杂环烯基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基，其中所述芳基、杂芳基、环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、烷基、烷氧基和烷硫基任选被独立地选自以下的1、2或3个基团取代：卤素、氰基、硝基、羟基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基；
[0091]
r3选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基；
[0092]
r4选自氢、c
6-c
10
芳基、5-9元杂芳基、c
3-c8环烷基、c
3-c8环烯基、3-8元杂环烷基、3-8元杂环烯基、3-8元杂环烷基氧基、3-8元杂环烯基氧基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基，其中所述芳基、杂芳基、环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、烷基、烷氧基和烷硫基任选被独立地选自以下的1、2或3个基团取代：卤素、氰基、硝基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基；
[0093]
r5选自卤素、氰基、硝基、羟基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基；
[0094]
环a选自c
6-c
10
亚芳基、5-9元亚杂芳基、c
3-c8亚环烷基、c
3-c8亚环烯基、3-8元亚杂环烷基和3-8元亚杂环烯基环；
[0095]
环b选自c
6-c
10
芳基、5-9元杂芳基、c
3-c8环烷基、c
3-c8环烯基、3-8元杂环烷基和3-8元杂环烯基环；
[0096]
m是0、1、2或3；且
[0097]
n是0、1、2或3。
[0098]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r1是卤素、氰基或硝基。
[0099]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r1是氰基。
[0100]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r2选自包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5-6元杂芳基(具体实例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基或嘧啶基)、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基，其任选被独立地选自以下的1、2或3个基团取代：卤素、羟基和c
1-c6烷基；
[0101]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r2选自包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5元杂芳基(具体实例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基或吡唑基)、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基，其任选被独立地选自以下的1个基团取代：羟基和c
1-c6烷基；
[0102]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r2选自任选被c
1-c6烷基取代的包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5元杂芳基(具体实例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基或吡唑基)和任选被羟基取代的c
1-c6烷氧基；
[0103]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r2是甲基取代的吡唑基或羟基取代的c
1-c6烷氧基；
[0104]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r2是
[0105]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r3选自氢和c
1-c6烷基。
[0106]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r3选自氢和c
1-c3烷基。
[0107]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r3是氢或甲基。
[0108]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r3是氢。
[0109]
在一种式(i)化合物的实施方式中，与r3连接的碳是s或r构型的。
[0110]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r4选自苯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5-6元杂芳基、5-6元杂环烷基、5-6元杂环烯基、5-6元杂环烷基氧基、5-6元杂环烯基氧基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基，其任选被独立地选自以下的1、2或3个基团取代：卤素、羟基和c
1-c6烷基；
[0111]
优选地，所述5-6元杂芳基选自吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基和嘧啶基；
[0112]
所述5-6杂环烷基选自吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基)、吗啉基、硫吗啉基、二噁烷基或哌嗪基；
[0113]
所述5-6元杂环烯基选自吡咯啉基、二氢呋喃基、二氢噻吩基、四氢吡啶基、四氢吡喃基和四氢噻喃基。
[0114]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r4选自包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5元杂芳基(具体实例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑
基、异噻唑基或吡唑基)、5-6元杂环烷基、5-6元杂环烷基氧基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基，其任选被独立地选自以下的1、2或3个基团取代：卤素和c
1-c6烷基。
[0115]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r4选自吡唑基、吡咯烷基、四氢吡喃基氧基、吗啉基、四氢呋喃基氧基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基，其任选被卤素取代。
[0116]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r4是吡咯烷-1-基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、三氟甲氧基或cf3。
[0117]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r5选自卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基；
[0118]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r5选自c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6烷硫基。
[0119]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r5选自c
1-c3烷基；
[0120]
在一种式(i)化合物的实施方式中，r5选自甲基、乙基和丙基，优选为甲基；
[0121]
在一种式(i)化合物的实施方式中，m是0或1。
[0122]
在一种式(i)化合物的实施方式中，n是0或1。
[0123]
在一种式(i)化合物的实施方式中，m是1。
[0124]
在一种式(i)化合物的实施方式中，n是0。
[0125]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环a选自亚苯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5-9元亚杂芳基、c
3-c8亚环烷基、c
3-c8亚环烯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的3-8元亚杂环烷基和包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的3-8元亚杂环烯基环；
[0126]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环a选自亚苯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5-6元亚杂芳基、c
3-c8亚环烷基、c
3-c8亚环烯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的3-8元亚杂环烷基和包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的3-8元亚杂环烯基；
[0127]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环a选自亚苯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5元亚杂芳基、c
3-c6亚环烷基、c
3-c6亚环烯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的3-6元亚杂环烷基和包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的3-6元亚杂环烯基；
[0128]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环a选自亚苯基、亚吡咯基、亚呋喃基、亚噻吩基、亚咪唑基、亚呋咱基、亚噁唑基、亚噁二唑基、亚噁三唑基、亚异噁唑基、亚噻唑基、亚异噻唑基、亚吡唑基、亚噻二唑基、亚三唑基、亚四唑基、亚吡啶基、亚吡嗪基、亚哒嗪基、嘧啶基、亚三嗪基、亚氮杂环丁烷基、亚吡咯烷基、亚吡咯啉基、亚环丁基、亚环戊基、亚环己基、亚环庚基、亚哌嗪基、亚哌啶基、亚四氢吡啶基、3,6-二氮杂-双环[3.1.1]亚庚基、3-氮杂-双环[3.2.1]亚辛基和1,4-二氮杂亚环庚基。
[0129]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环a选自亚吡唑基、亚噻二唑基、亚吡咯烷基、亚吡咯啉基、亚环己基、亚哌嗪基、亚哌啶基、亚四氢吡啶基、3,6-二氮杂-双环[3.1.1]亚庚基、3-氮杂-双环[3.2.1]亚辛基和1,4-二氮杂亚环庚基。
[0130]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环a选自
[0131][0132]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环b选自苯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5-9元杂芳基、c
3-c8环烷基、c
3-c8环烯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的3-8元杂环烷基和包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的3-8元杂环烯基环；
[0133]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环b选自苯基和包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的5-6元杂芳基；
[0134]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环b选自苯基、包含1、2或3个独立地选自n、o或s的杂原子的6元杂芳基；
[0135]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环b选自苯基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、呋咱基、噁唑基、噁二唑基、噁三唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基和三嗪基环。
[0136]
在一种式(i)化合物的实施方式中，环b是吡啶基环。
[0137]
在一种式(i)化合物的实施方式中，基团选自
[0138]
[0139]
需要说明的是，本发明的式(i)化合物涵盖以上各个独立的实施方式或各个具体实施方式，还涵盖上述各个实施方式或具体实施方式的任何组合或亚组合构成的实施方式，也涵盖以上任何优选或例举的任何组合所构成的实施方式。
[0140]
应当理解的是，通式化合物中基团的组合和/或取代应当以符合价键规则为前提。
[0141]
优选地，本发明的式(i)化合物具有式(ia)结构，
[0142][0143]
其中r1、r2、r3、r4、r5、m、n和a各自具有上文对式(i)化合物的一般或具体实施方式中所定义的含义。
[0144]
更优选地，本发明的式(i)化合物具有式(ib)结构，
[0145][0146]
其中r1、r2、r3、r4、r5、n和a各自具有上文对式(i)化合物的一般或具体实施方式中所定义的含义。
[0147]
更优选地，本发明的式(i)化合物具有式(ic)结构，
[0148][0149]
其中r2、r3、r4、r5、n和a各自具有上文对式(i)化合物的一般或具体实施方式中所定义的含义。
[0150]
最优选地，本发明式(i)化合物选自以下具体化合物实例：
[0151]
[0152]
[0153][0154]
发明的有益效果
[0155]
本发明提供了一类具有通式(i)结构特征的吡唑并吡啶类化合物，经研究发现，该类化合物可有效抑制ret激酶、ret融合及突变活性，作为ret表达异常的相关类疾病的治疗药物。
[0156]
本发明的化合物具有下列有益效果：
[0157]
高的ret激酶抑制活性；激酶ret抑制测定实验中显示ic50在0.1nm～1μm范围，优选在0.1nm～0.1μm范围；和/或
[0158]
高的ret融合及突变活性；和/或
[0159]
具有良好的药物代谢动力学性质，例如具有更长的t
1/2
，从而例如可以加大给药间隔，更长的半衰期，使患者具有更好的依从性；和/或
[0160]
具有改善的auc0-t数据，具有更好的成药性，更高的生物利用度，如下文活性实施例6所验证；和/或
[0161]
良好的安全性，如透膜性、p450(减少的药物相互作用风险)、溶解性等优异的性质。
[0162]
基于以上本发明化合物的有益效果，本发明还提供以下各个方面的技术方案。
[0163]
用于治疗或用作药物的本发明化合物
[0164]
一方面，本发明提供用作药物、尤其是用作ret抑制剂的本发明化合物。
[0165]
另一方面，本发明提供用于治疗、尤其是用于治疗和/或预防与ret有关疾病的本发明化合物。
[0166]
在具体的实施方式中，本发明提供用于治疗和/或预防ret对所述疾病的发生和发展起到促进作用或抑制ret将降低疾病的发生率、减少或消除疾病病状的疾病的本发明化合物，所述疾病例如肿瘤或肠易激综合症(ibs)，肿瘤包括但不限于非小细胞肺癌、小细胞肺癌、乳头状甲状腺癌、甲状腺髓质癌、分化型甲状腺癌、复发性甲状腺癌、顽固性分化型甲状腺癌、多内分泌肿瘤2a或2b、嗜铬细胞瘤、甲状旁腺增生、乳腺癌、结肠直肠癌、乳头状肾细胞癌、胃肠黏膜神经节瘤、胰管腺癌、多发性内分泌瘤、睾丸癌、慢性单核细胞性白血病、唾腺癌、卵巢癌、子宫颈癌等。
[0167]
药物组合物及其施用
[0168]
另一方面，为了使用本说明书的化合物用于治疗或预防目的，可以将本发明化合物根据标准药学实践配制为药物组合物。同时，基于本发明化合物良好的药物代谢动力学性质、改善的auc0-last、良好的成药性，由本发明化合物可制备具有更好的药动学性质、更
高生物利用度的药物。
[0169]
因此，本发明提供一种药物组合物，其包含上述本发明化合物和药学可接受的赋形剂。
[0170]
在一个具体的实施方式中，提供了所述本发明的药物组合物，用于在例如哺乳动物如人个体中预防或治疗与ret有关的疾病。
[0171]
在一个具体的实施方式中，本发明的药物组合物可以另外包含适合与本发明化合物组合使用的另外的治疗活性成分。
[0172]
本发明的药物组合物可以通过本领域技术人员已知的技术来配制，如在remington’spharmaceutical sciences第20版中公开的技术。例如，上述本发明的药物组合物，可以通过将本发明化合物与一种或多种药学可接受的赋形剂混合来制备。制备可进一步包括将一种或多种其它活性成分与本发明化合物和一种或多种药学可接受的赋形剂混合的步骤。
[0173]
选择包含在特定组合物中的赋形剂将取决于多种因素、例如给药方式和所提供的组合物的形式。合适的药学可接受的赋形剂是本领域技术人员熟知的且描述于例如ansel,howard c.,等,ansel’s pharmaceutical dosage forms and drug delivery systems.philadelphia:lippincott,williams&wilkins,2004中，包括例如佐剂、稀释剂(例如葡萄糖、乳糖或甘露醇)、载体、ph调节剂、缓冲剂、甜味剂、填充剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、加香剂、调味剂、其它已知添加剂。
[0174]
本发明的药物组合物可以以标准方式施用。例如，合适的施用方式包括口服、静脉内、直肠、肠胃外、局部、经皮、眼、鼻、颊或肺(吸入)给药，其中肠胃外输注包括肌肉、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。为了这些目的，本发明的化合物可以通过本领域已知的方法配制成例如片剂、胶囊、糖浆、粉末、颗粒、水性或油性溶液或悬浮液、(脂质)乳剂、可分散粉末、栓剂、软膏、乳膏、滴剂、气溶胶、干粉制剂和无菌可注射水性或油性溶液或悬浮液的形式。
[0175]
本发明化合物的预防或治疗剂量的大小将根据一系列因素而变化，包括所治疗的个体、病症或病况的严重性、给药的速率、化合物的处置及处方医师的判断。一般而言，有效剂量在每日每kg体重约0.0001至约5000mg，例如约0.01至约1000mg/kg/日(单次或分次给药)。对70kg的人而言，这会合计为约0.007mg/日至约7000mg/日，例如约0.7mg/日至约1500mg/日。根据给药模式，本发明化合物在药物组合物中的含量或用量可以是约0.01mg至约1000mg，适合地是0.1-500mg，优选0.5-300mg，更优选1-150mg，特别优选1-50mg，例如1.5mg、2mg、4mg、10mg、25mg等；相应地，本发明的药物组合物将包含0.05至99％w/w(重量百分比)，例如0.05至80％w/w，例如0.10至70％w/w，例如0.10至50％w/w的本发明化合物，所有重量百分比均基于总组合物。应当理解，可能有必要在某些情况下使用超出这些限制的剂量。
[0176]
在一种具体实施方式中，本发明提供了一种药物组合物，其包含本发明化合物和一种或多种药学可接受的赋形剂，该组合物被配制用于口服施用。该组合物可以以单位剂型提供，例如以片剂、胶囊或口服液体制剂的形式。这样的单位剂型可以含有0.1mg至1g，例如5mg至250mg的本发明化合物作为活性成分。
[0177]
在一种具体实施方式中，本发明提供了一种药物组合物，其包含本发明化合物和一种或多种药学可接受的赋形剂，该组合物被配制用于局部施用。局部施用可以是以例如乳膏剂、洗剂、软膏剂或透皮贴剂的形式。
[0178]
在一种具体实施方式中，本发明提供了一种药物组合物，其包含本发明化合物和一种或多种药学可接受的赋形剂，该组合物被配制用于吸入施用。吸入施用可以通过口服吸入，也可以通过鼻内施用。当通过口服吸入施用时，本发明的化合物可以以每日剂量有效地用于本发明，例如至多500μg，如0.1-50μg、0.1-40μg、0.1-30μg、0.1-20μg或0.1-10μg的本发明化合物。口服吸入的本发明药物组合物可以配制成干粉、悬浮液(在液体或气体中)或溶液(在液体中)，且可以以任何合适的形式和使用任何本领域已知的合适的吸入器装置施用，包括例如定量吸入器(mdi)、干粉吸入器(dpi)、喷雾器和软雾吸入器。多室装置可用于递送本说明书的化合物和一种或多种其它活性成分(当存在时)。
[0179]
治疗方法和用途
[0180]
基于上述本发明化合物具有的有益效果，本发明化合物可用于治疗动物，特别是哺乳动物例如人的各种病症的方法中。
[0181]
因此，另一方面，本发明提供了调节、尤其是抑制ret活性的方法，所述方法包括使细胞与如前所述的本发明化合物相接触以调节、尤其是抑制细胞中ret的活性。
[0182]
另一方面，本发明提供了预防或治疗与ret相关的疾病(例如通过ret抑制可治疗或预防的疾病)的方法，所述方法包括向需要其的个体施用有效量的如前所述的本发明化合物或包含其的本发明药物组合物。
[0183]
另一方面，本发明提供了如前所述的本发明化合物或包含其的药物组合物的用途，用于抑制ret活性，或者用于治疗和/或预防与ret相关的疾病、例如通过ret抑制可治疗或预防的疾病。
[0184]
另一方面，本发明还提供了如前所述的本发明化合物或包含其的药物组合物在制备药物中的用途，尤其是具有ret受体抑制剂活性的药物中的应用。
[0185]
另一方面，本发明提供如前所述的本发明化合物或包含其的药物组合物在制备用于治疗或预防与ret相关的疾病、例如通过ret抑制可治疗或预防的疾病的药物中的用途，其中所述化合物或药物组合物任选地与一种或多种化学治疗或免疫治疗联合。
[0186]
本发明化合物的合成
[0187]
本发明还提供了一种制备式(i)化合物的方法，下文举例说明了合成本发明化合物的通用合成方案。对于各反应步骤而言，适当的反应条件是本领域技术人员已知的或可以常规确定的。如果没有特别说明，在制备这些化合物中使用的原料和试剂通常可商购获得，或者可以通过下文的方法、与下文给出的方法类似的方法或本领域已知的方法制得。如果需要，合成反应流程中的原料和中间体可以采用常规技术进行分离和纯化，所述技术包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱法等。所述材料可以采用包括物理常数和波谱数据在内的常规方法表征。
[0188]
合成方案1：
[0189][0190]
可通过包含下面步骤的方法合成本发明化合物：
[0191]
使式i-1化合物与式i-3化合物反应得到式(i)化合物；
[0192]
其中所述反应可在缩合剂存在下进行，所述缩合剂是本领域众所周知的用于羧酸与胺偶联的缩合剂，包括但不限于1-丙基磷酸酐(t3p)、edc、dcc、hatu、edci等；所述反应优选在适合的有机溶剂中进行，所述有机溶剂可选自二氯甲烷、四氢呋喃、醚类(例如乙醚、乙二醇单甲醚等)、n-甲基吡咯烷酮、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、1,4-二氧六环、二甲基亚砜及其任意组合；所述反应优选在适合的碱存在下进行，所述的碱包括但不限于碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、n,n-二异丙基乙胺、三乙胺、hobt或吡啶，优选地，所述的碱是n,n-二异丙基乙胺；所述反应优选在适合的温度下进行，例如0-200℃、10-100℃、20-50℃或室温(20-25℃)。
[0193]
合成方案2：
[0194]
当
[0195]
可通过包含下面步骤的方法合成本发明化合物：
[0196]
式i-2化合物与式i-3化合物在三光气或cdi作用下得到式(i-i)化合物；
[0197]
其中所述反应优选在适合的有机溶剂中进行，所述有机溶剂可选自二氯甲烷、四氢呋喃、醚类(例如乙醚、乙二醇单甲醚等)、n-甲基吡咯烷酮、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、1,4-二氧六环、二甲基亚砜及其任意组合，并任选含有水；所述反应优选在适合的碱存在下进行，所述的碱包括但不限于碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸铯、n,n-二异丙基乙胺、三乙胺、hobt或吡啶，优选地，所述的碱是n,n-二异丙基乙胺；所述反应优选在适合的温度下进行，例如0-200℃、10-100℃、20-50℃或室温(20-25℃)。
[0198]
上述合成方案只是列举了本发明中部分化合物的制备方法。本发明的化合物或者其立体异构体、互变异构体、稳定的同位素衍生物、药学上可接受的盐或溶剂合物可以通过多种方法、包括上文给出的方法、实施例中给出的方法或与之类似的方法、由本领域普通技术人员在上述合成方案的基础上、结合本领域的常规技术而制备得到。
((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1-甲基-1h-吡唑-5-甲酰胺(化合物1)的合成
[0225][0226]
步骤1：3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯的合成
[0227]
将4-羟基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg,2.09mmol)与tea(0.581ml,4.18mmol)加入到dcm(10.0ml)中。在氮气保护下，并在冰浴下将三氟甲磺酸酐(0.520ml，3.14mmol)滴加到反应液中。滴加完毕后，反应混合物在冰浴下继续搅拌反应1.5小时。减压浓缩除去有机溶剂得到目标化合物(600mg,粗品,黑色油状物)。lc-ms(esi)m/z 370.0[m-h]-。
[0228]
步骤2：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1-甲基-1h-吡唑-5-甲酸甲酯的合成
[0229]
将3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(300mg,0.808mmol)、(5-(甲氧羰基)-1-甲基-1h-吡唑-3-基)硼酸(163mg,0.889mmol)、碳酸钾(223mg,1.62mmol)和pd(dppf)cl2(59.1mg,0.081mmol)加入到1,4-二氧六环(8ml)和水(1ml)的混合溶剂中。在氮气保护下，反应混合物在100℃搅拌反应3小时。将反应混合物冷却至室温，过滤。向滤液中加入水(15ml)，用ea(10ml x 2)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经制备板分离纯化(dcm:甲醇＝20:1)得到目标化合物(95.0mg,两步收率25.2％,棕黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 362.1[m h]

。
[0230]
步骤3：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1-甲基-1h-吡唑-5-甲酸的合成
[0231]
将3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1-甲基-1h-吡唑-5-甲酸甲酯(120mg,0.332mmol)溶于四氢呋喃(2ml)和甲醇(2ml)的混合溶剂中。在室温下，滴加氢氧化钠水溶液(1mol/l,1ml)。反应混合物在室温下搅拌反应过夜。用稀盐酸(1mol/l)将反应液调至ph～4。减压浓缩得到粗品。向粗品中加入dcm和甲醇混合液(20ml,v:v＝10:1)，在室温下搅拌10分钟。过滤，滤液减压浓缩得到目标化合物(110mg,收率95.4％,棕色固体)。lc-ms(esi)m/z[m h]

348.1。
[0232]
步骤4：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1-甲基-1h-吡唑-5-甲酰胺的合成
[0233]
将3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1-甲基-1h-吡唑-5-甲酸(70.0mg,0.202mmol)、6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(46.5mg,0.242mmol)，diea(0.100ml,0.604mmol)和hatu(115mg,0.302mmol)加入到dmf(3ml)中。反应混合物在室温下搅拌反应过夜。将反应液倒入水(15ml)中，ea(10ml x 2)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。用甲醇洗，过滤得到目标化合物
(10.0mg,收率9.52％,棕黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 522.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.29
–
9.20(m,2h),8.69
–
8.64(m,2h),8.45(s,1h),8.38(s,1h),8.10(s,1h),8.00
–
7.93(m,2h),7.93
–
7.85(m,2h),7.41(s,1h),4.53(d,j＝5.7hz,2h),4.16(s,3h),3.87(s,3h)。
[0234]
实施例2：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-5-甲酰胺(化合物2)的合成
[0235][0236]
步骤1:3-羟基-1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡唑-5-甲酸甲酯的合成
[0237]
将(4-甲氧基苄基)肼盐酸盐(2.46g,14.1mmol)和tea(4.40ml,31.7mmol)加入到水(10.0ml)和甲醇(20.0ml)的混合溶剂中。反应混合物在0℃下搅拌15分钟后，加入丁二酸二甲酯(2.00g,14.1mmol)。反应混合物在80℃下搅拌反应4小时。反应液减压浓缩得到粗产品。将粗产品加入到水(30.0ml)中，过滤，滤饼用水(10.0ml)洗。滤饼经真空干燥后得到目标产物(2.70g，收率73.2％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 263.0[m h]

。
[0238]
步骤2:1-(4-甲氧基苄基)-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1h-吡唑-5-甲酸甲酯的合成
[0239]
在0℃下，向3-羟基-1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡唑-5-甲酸甲酯(2.70g,10.3mmol)和tea(2.86ml,20.6mmol)的dcm(25.0ml)溶液中加入三氟甲磺酸酐(5.81g,20.6mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(20.0ml)。分出有机相，水相用dcm(50.0ml
×
2)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝100：1-15：1)得到目标化合物(2.45g，收率60.3％，黄色固体)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.17(d,j＝8.7hz,2h),7.09(s,1h),6.90(d,j＝8.7hz,2h),5.61(s,2h),3.86(s,3h),3.72(s,3h)。
[0240]
步骤3:1-(4-甲氧基苄基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑-5-甲酸甲酯的合成
[0241]
向1-(4-甲氧基苄基)-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1h-吡唑-5-甲酸甲酯(750mg,1.90mmol)和联硼酸频哪醇酯(531mg,2.09mmol)的1,4-二氧六环(10.0ml)溶液中加入乙酸钾(560mg,5.71mmol)、1,1'-双(二苯基膦)二茂铁(52.7mg,0.095mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(81.9mg,0.095mmol)。氩气保护下，反应混合物在100℃下搅拌16小时。将反应液冷却至室温后倒入ea(80.0ml)中，得到黑色溶液。溶液用硅藻土过滤，滤饼用ea(20.0ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(600mg，收率84.7％，黑色固体)。lc-ms(esi)m/z 291.0[m-82 h]

。
[0242]
步骤4:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡唑-5-甲酸甲酯的合成
[0243]
向3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(500mg,1.35mmol)和1-(4-甲氧基苄基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑-5-甲酸甲酯(551mg,1.48mmol)的dmf(6.00ml)混合溶液中加入碳酸钾(372mg,2.69mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(58.0mg,0.067mmol)。氩气保护下，反应混合液在100℃下搅拌反应5小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(20.0ml)中，用ea(60.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝5：1-1：1)得到目标化合物(210mg，收率33.4％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 468.2[m h]

。
[0244]
步骤5:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡唑-5-甲酸的合成
[0245]
向3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡唑-5-甲酸甲酯(210mg,0.449mmol)的水(1.00ml)、四氢呋喃(2.00ml)、甲醇(4.00ml)的混合溶液中加入氢氧化锂(21.5mg,0.898mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应16小时。将反应混合物减压浓缩除去有机溶剂后，溶入到水(10.0ml)中，用1.0m盐酸溶液调节ph＝5后得到悬浊液。悬浊液过滤，滤饼用水(5.00ml)洗。经真空干燥后得到目标化合物(185mg，收率90.8％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 454.1[m h]

。
[0246]
步骤6:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡唑-5-甲酰胺的合成
[0247]
向3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡唑-5-甲酸(90.0mg,0.198mmol)和(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(45.7mg,0.238mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入edci(56.9mg,0.298mmol)、hobt(38.5mg,0.298mmol)和diea(51.3mg,0.397mmol)。反应混合物室温下搅拌反应16小时。将反应混合物倒入水(15.0ml)中，用ea(60.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩，经真空干燥后得到目标化合物(150mg,粗品,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 628.0[m h]

。
[0248]
步骤7:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-5-甲酰胺的合成
[0249]
3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡唑-5-甲酰胺(150mg,0.239mmol)的三氟乙酸(5.00ml)溶液在70℃下搅拌反应1小时。将反应液旋干后溶于甲醇(5.00ml)中，逐滴加入到饱和碳酸氢钠(20.0ml)溶液中，得到黄色悬浊液。过滤，滤饼用清水(10.0ml)洗，经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(9.30mg,两步收率8.47％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 508.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ14.00(s,1h),9.32(s,1h),9.13(s,1h),8.72
–
8.65(m,2h),8.47
–
8.44(m,1h),8.40(s,1h),8.13(s,1h),8.01
–
7.95(m,2h),7.93
–
7.89(m,2h),7.26(s,1h),4.55(d,j＝5.5hz,2h),3.89(s,3h)。
[0250]
实施例3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酰胺(化合物3)及其盐酸盐(化合物3-1)的合成
[0251][0252]
步骤1：4-(5-溴吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的合成
[0253]
向3-溴-5-氟吡啶(5.00g,28.4mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(7.94g,42.6mmol)的n-甲基吡咯烷酮(50.0ml)溶液中加入碳酸钾(7.85g,56.8mmol)。反应混合物在100℃下搅拌反应16小时后，在120℃下继续搅拌反应5小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(100ml)中，用ea(250ml)萃取。有机相用饱和食盐水(50.0ml
×
3)洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝20：1-10：1)得到目标化合物(1.30g,收率13.3％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 342.1,344.1[m h]

。
[0254]
步骤2：1-氨基-3-溴-5-(4-叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)吡啶-1-鎓-2,4,6-三甲基苯磺酸盐的合成
[0255]
将4-(5-溴吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.30g,6.72mmol)和2,4,6-三甲基苯磺酰羟胺(1.74g,8.06mmol)加入到dcm(20.0ml)中。反应混合物在0℃下搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得目标化合物(3.75g,粗品,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 357.1,359.2[m]

。
[0256]
步骤3：4-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的合成
[0257]
在0℃下，向1-氨基-3-溴-5-(4-叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)吡啶-1-鎓-2,4,6-三甲基苯磺酸盐(3.75g,6.73mmol)的1,4-二氧六环(35.0ml)溶液中加入丙烯腈(1.01ml,15.5mmol)及diea(1.45ml,8.75mmol)。反应液在0℃下搅拌反应2小时后，加入2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(3.21g,14.1mmol)。反应液继续在0℃下搅拌反应1小时后，升至室温继续搅拌反应16小时。将反应混合物减压浓缩，向残留物中加入水(60.0ml)，用ea(250ml)萃取。有机相用饱和食盐水(30.0ml
×
5)洗、无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝100：1-9：1)得到目标化合物(1.20g,两步收率43.9％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 306.1,308.1[m-100 h]

。
[0258]
步骤4：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的合成
[0259]
向4-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg,0.492mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(123mg,0.591mmol)的水(1.00ml)和1,4-二氧六环(5.00ml)混合溶液中加入碳酸钠(104mg,0.984mmol)和pd(dppf)cl2(16.0mg,0.025mmol)。置换氩气三次，反应混合物在100℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(50.0ml)中，用ea(100ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3：1-1：1)得到目标化合物(155mg,收率77.5％,黄色油状物)。lc-ms(esi)m/z 408.3[m h]

。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.92(d,j＝1.1hz,1h),8.58(s,1h),8.34(s,1h),8.06(d,j＝0.6hz,1h),7.30(d,j＝1.1hz,1h),3.87(s,3h),3.65
–
3.54(m,4h),3.12
–
3.05
(m,4h),1.43(s,9h)。
[0260]
步骤5：6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0261]
将4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150mg,0.368mmol)加入到氯化氢甲醇溶液(3.0m,8.00ml)中。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。将反应混合物减压浓缩得到目标化合物(130mg,收率99.2％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 308.2[m h]

。
[0262]
步骤6：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酰胺及其盐酸盐的合成
[0263]
向饱和碳酸氢钠水溶液(3.00ml)和dcm(5.00ml)的混合液中依次加入(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(30.3mg,0.158mmol)和三光气(28.1mg,0.095mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。分出有机相，水相用dcm(4.00ml)萃取。合并有机相用饱和食盐水(5.00ml
×
2)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。向滤液中依次加入tea(0.065ml,0.573mmol)和6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(65.0mg,0.189mmol)。应混合物在室温下搅拌反应15分钟。将反应液减压浓缩得到粗产品(化合物3)。经制备hplc(乙腈/含0.05％盐酸的水)纯化，得到盐酸盐形式的目标化合物(化合物3-1)(18.2mg,收率17.2％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 526.3[m h]

。1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ8.68(s,1h),8.62
–
8.23(m,4h),8.24
–
7.87(m,3h),7.77(s,1h),7.25(s,1h),4.46(s,2h),4.09-3.96(m,3h),3.85
–
3.63(m,4h),3.27
–
3.11(m,4h)。
[0264]
实施例4：1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-4-甲基哌啶-4-甲酰胺(化合物4)及其盐酸盐(化合物4-1)的合成
[0265][0266]
步骤1:1-氨基-3-溴-5-氟吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基苯磺酸盐的合成
[0267]
将3-溴-5-氟吡啶(10.0g,56.8mmol)和o-2,4,6-三甲基苯磺酰羟胺(14.7g,68.2mmol)加入到dcm(150ml)中。反应混合物在0℃下搅拌反应1小时。在0℃下向反应液中缓慢加入pe(150ml)，搅拌15分钟得到白色悬浊液。过滤后得到产物(15.5g,白色固体)和粗产物(5.50g,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 191.1,193.1[m]

。
[0268]
步骤2:6-溴-4-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的合成
[0269]
在0℃下，向1-氨基-3-溴-5-氟吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基苯磺酸盐(20.0g,51.1mmol)的1,4-二氧六环(200ml)溶液中加入丙烯腈(7.74ml,118mmol)和diea(11.0ml,66.4mmol)。反应液在0℃下搅拌反应2小时后，加入2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(23.2g,102mmol)。反应液在0℃下继续搅拌反应1小时后，升至室温继续反应16小时。将反应混合物倒入冰水(300ml)中得到棕色悬浊液。悬浊液室温搅拌20分钟后过滤，滤饼用冰水
(100ml)洗涤得到固体粗品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝100：1-10：1)得到目标化合物(5.70g,两步收率41.9％,黄色固体)。
[0270]
步骤3:1-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-4-甲基哌啶-4-甲酸乙酯的合成
[0271]
向6-溴-4-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400mg,1.67mmol)和4-甲基哌啶-4-甲酸乙酯盐酸盐(380mg,1.83mmol)的n-甲基吡咯烷酮(2.00ml)溶液加入碳酸钾(576mg,4.17mmol)。反应混合物在100℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水中(25.0ml)中，用ea(100.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(20.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得粗产物，经柱层析分离纯化(pe：ea＝12:1-10:1)得到目标化合物(600mg,收率81.9％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 390.9,393.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.96(d,j＝1.3hz,1h),8.62(s,1h),7.15(d,j＝1.3hz,1h),4.14(q,j＝7.1hz,2h),3.30
–
3.21(m,2h),2.92
–
2.81(m,2h),2.22
–
2.11(m,2h),1.79
–
1.69(m,2h),1.26
–
1.20(m,6h)。
[0272]
步骤4:1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-4-甲基哌啶-4-甲酸乙酯的合成
[0273]
向1-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-4-甲基哌啶-4-甲酸乙酯(600mg,1.53mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(383mg,1.84mmol)的水(1.50ml)和1,4-二氧六环(7.50ml)混合溶液中加入碳酸钠(325mg,3.07mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(66.0mg,0.077mmol)。置换氩气三次，反应混合物在80℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(25.0ml)中，用ea(60.0ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3：1-2：1)得到目标化合物(490mg,收率81.3％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 393.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.89(d,j＝1.0hz,1h),8.56(s,1h),8.38(s,1h),8.07(s,1h),7.25(d,j＝0.9hz,1h),4.15(q,j＝7.1hz,2h),3.87(s,3h),3.31
–
3.24(m,2h),2.94
–
2.82(m,2h),2.26
–
2.16(m,2h),1.82
–
1.71(m,2h),1.26
–
1.20(m,6h)。
[0274]
步骤5:1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-4-甲基哌啶-4-甲酸的合成
[0275]
向1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-4-甲基哌啶-4-甲酸乙酯(200mg,0.509mmol)的乙醇溶液(10.0ml)中加入氢氧化钠(61.2mg,1.53mmol)。反应混合物在80℃下搅拌反应20小时。将反应混合物减压浓缩除去有机溶剂后，加入到水(10.0ml)中。用3.0m稀盐酸溶液调节ph＝3后得到棕色悬浊液。过滤，滤饼用水(15.0ml)洗，干燥后得到目标化合物(140mg,收率75.3％,棕色固体)。lc-ms(esi)m/z 365.0[m h]

。
[0276]
步骤6:1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-4-甲基哌啶-4-甲酰胺及其盐酸盐的合成
[0277]
在室温下，向1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-4-甲基哌啶-4-甲酸(140mg,0.384mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入edci(110mg,0.576mmol)、hobt(77.8mg,0.576mmol)、diea(99.3mg,0.768mmol)和(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(73.8mg,0.384mmol)。反应混合物室温下搅拌反应2小时。将反应混合
物倒入水中(20.0ml)中，用ea(60.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品(化合物4)。经制备hplc(乙腈/含0.05％盐酸的水)纯化得到盐酸盐形式的目标化合物(化合物4-1)(68.1mg,收率30.9％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 539.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.87(s,1h),8.65-8.63(m,1h),8.55(s,1h),8.42
–
8.38(m,1h),8.37(s,1h),8.35-8.34(m,1h),8.06(s,1h),7.90-7.88(m,1h),7.88-7.86(m,2h),7.21(s,1h),4.37(d,j＝5.8hz,2h),3.86(s,3h),3.26
–
3.20(m,2h),2.95
–
2.88(m,2h),2.28
–
2.23(m,2h),1.77
–
1.71(m,2h),1.21(s,3h)。
[0278]
实施例5：1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-4-甲基哌啶-4-甲酰胺(化合物5)及其盐酸盐(化合物5-1)的合成
[0279][0280]
在室温下，向1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-4-甲基哌啶-4-甲酸(100mg,0.274mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入edci(80.0mg,0.412mmol)、hobt(55.7mg,0.412mmol)、diea(70.9mg,0.549mmol)和1-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(56.6mg,0.274mmol)。反应混合物室温下搅拌反应1小时。将反应混合物倒入水(15.0ml)中，用ea(60.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品(化合物5)。经制备hplc(乙腈/含0.05％盐酸的水)纯化得到盐酸盐形式的目标化合物(化合物5-1)(65.2mg,收率40.4％,灰色固体)。lc-ms(esi)m/z553.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.86(d,j＝0.7hz,1h),8.65(d,j＝4.0hz,1h),8.56(s,1h),8.41(d,j＝2.0hz,1h),8.37(s,1h),8.12(d,j＝7.7hz,1h),8.06(s,1h),7.97
–
7.93(m,1h),7.91
–
7.86(m,2h),7.19(s,1h),5.14
–
5.05(m,1h),3.87(s,3h),3.29
–
3.18(m,2h),2.97
–
2.82(m,2h),2.36
–
2.19(m,2h),1.80
–
1.67(m,2h),1.46(d,j＝7.1hz,3h),1.21(s,3h)。
[0281]
实施例6：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酰胺(化合物6)的合成
[0282][0283]
步骤1：3-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚
烷-6-甲酸叔丁酯的合成
[0284]
向6-溴-4-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400mg,1.67mmol)和3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(398mg,2.01mmol)的n-甲基吡咯烷酮(5.00ml)溶液加入碳酸钾(577mg,4.18mmol)。封管，反应混合物在100℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后，倒入水(20.0ml)中，用ea(20.0ml
×
3)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(20.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝85：15)得到目标化合物(75.0mg,收率11.0％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 418.1,420.1[m h]

。
[0285]
步骤2：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的合成
[0286]
向3-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(75.0mg,0.179mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(44.9mg,0.218mmol)的水(1.00ml)和1,4-二氧六环(5.00ml)溶液中加入碳酸钠(38.1mg,0.359mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(7.80mg,0.009mmol)。氩气保护下，反应混合物在80℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(10.0ml)中，用ea(10.0ml
×
3)萃取。合并有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝2：3)得到目标化合物(60.0mg,收率79.4％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 420.2[m h]

。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.38(d,j＝1.2hz,1h),8.20(s,1h),7.74(d,j＝0.6hz,1h),7.64(s,1h),7.12(d,j＝1.2hz,1h),4.34-4.30(m,2h),3.99(s,3h),2.64
–
2.59(m,1h),2.41-2.38(m,1h),1.46(s,9h),1.34
–
1.23(m,4h)。
[0287]
步骤3:4-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈三氟乙酸盐的合成
[0288]
在0℃下，向3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(50.0mg,0.119mmol)的dcm溶液(2.00ml)中加入三氟乙酸(0.500ml)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。将反应混合物减压浓缩，得到目标化合物(50.0mg,粗品,灰色固体)。lc-ms(esi)m/z 320.2[m h]

。
[0289]
步骤4:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酰胺的合成
[0290]
向(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(66.3mg,0.345mmol)的碳酸氢钠水溶液(2.50ml)与dcm(5.00ml)混合液中加入三光气(61.4mg,0.207mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应混合物用dcm(10.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(4.00ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。向滤液中加入tea(69.8mg,0.690mmol)和4-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈三氟乙酸盐(50.0mg,0.157mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应20分钟。反应液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％氨的水)纯化得到目标化合物(化合物6)(16.1mg,两步收率25.1％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 538.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.87(s,1h),8.57(s,1h),8.46(d,j＝4.3hz,1h),8.34
–
8.30(m,2h),8.03(s,1h),7.88
–
7.82(m,2h),7.75
–
7.71(m,1h),7.35(t,j＝5.7hz,1h),7.27(s,1h),4.34
–
4.27(m,4h),3.86(s,3h),
3.79
–
3.74(m,2h),3.57
–
3.52(m,2h),3.23
–
3.15(m,1h),2.18(d,j＝7.9hz,1h)。
[0291]
实施例7：1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲酰胺(化合物7)及其盐酸盐(化合物7-1)的合成
[0292][0293]
步骤1：1-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌啶-4-甲酸乙酯的合成
[0294]
向6-溴-4-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(600mg,2.50mmol)和哌啶-4-甲酸乙酯盐酸盐(581mg,3.00mmol)的n-甲基吡咯烷酮(6.00ml)溶液中加入无水碳酸钾(863mg,6.30mmol)。封管，反应混合物在100℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后加入水(20.0ml)中，用ea(60.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得粗产物。柱层析分离纯化(ea:pe＝0:100
‑‑
15:100)得到目标化合物(280mg,收率29.7％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 377.2,379.2[m h]

。
[0295]
步骤2：1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌啶-4-甲酸乙酯的合成
[0296]
向1-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌啶-4-甲酸乙酯(120mg,0.318mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(79.7mg,0.383mmol)的水(1.00ml)和1,4-二氧六环(5.00ml)混合溶液中加入无水碳酸钠(67.7mg,0.640mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(13.0mg,0.016mmol)。置换氩气三次，反应混合物在80℃下搅拌反应过夜。将反应液冷却至室温，倒入水(10.0ml)中，用ea(15.0ml
×
3)萃取。合并有机相用饱和食盐水(20.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(ea:pe＝0:100—60:100)得到目标化合物(115mg,收率95.5％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 379.3[m h]

。
[0297]
步骤3:1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌啶-4-甲酸的合成
[0298]
向1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌啶-4-甲酸乙酯(115mg,0.304mmol)的乙醇(8.00ml)和水(2.00ml)混合溶液中加入氢氧化钠(36.5mg,0.913mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应4小时。减压浓缩除去有机溶剂，加入水(10.0ml)，用1.0m的盐酸水溶液调ph到4，得到悬浊液。过滤，滤饼用水(20.0ml)洗，干燥后得到目标化合物(100mg,收率93.9％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 351.2[m h]

。
[0299]
步骤4:1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲酰胺及其盐酸盐的合成
[0300]
将1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌啶-4-甲酸(100mg,0.285mmol)和(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(54.9mg,0.285mmol)溶于dmf(8.00ml)中。加入diea(73.8mg,0.571mmol)、edci(82.1mg,0.428mmol)和hobt(57.8mg,
0.428mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。将反应液缓缓加入水(10.0ml)中，用ea(10.0ml
×
2)萃取。有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
2)洗、无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩得到粗产品(化合物7)。经制备hplc(乙腈/含0.05％盐酸的水)纯化得到盐酸盐形式的目标化合物(化合物7-1)(6.92mg,盐酸盐,收率4.32％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 525.4[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.88(s,1h),8.68(d,j＝4.4hz,1h),8.58
–
8.50(m,2h),8.36(s,2h),8.06(s,1h),7.91(d,j＝4.1hz,1h),7.88(s,2h),7.24(s,1h),4.35(d,j＝5.5hz,2h),3.87(s,3h),3.52
–
3.47(m,2h),2.80(t,j＝10.9hz,2h),2.46
–
2.37(m,1h),2.06
–
1.93(m,2h),1.93
–
1.84(m,2h)。
[0301]
实施例8：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酰胺(化合物8)的合成
[0302][0303]
步骤1:3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲腈的合成
[0304]
将3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-酮(5.95g,27.6mmol)和对甲苯磺酰甲基异氰(9.70g,49.7mmol)加入到1,2-二氯乙烷(185ml)中。在氮气保护下，冰浴下加入无水乙醇(2.90ml,63.5mmol)后，分四次加入叔丁醇钾(10.8g,96.6mmol)。反应混合物在50℃下搅拌反应18小时。将反应混合物冷却至室温，倾入饱和氯化钠水溶液(80ml)中，用ea(100ml
×
3)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。经柱层析分离纯化(pe:ea＝100:1-5:1)得到目标化合物(3.85g,收率61.6％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 227.2[m h]

。
[0305]
步骤2:3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯的合成
[0306]
将3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲腈(1.60g,7.07mmol)加入到氯化氢乙醇溶液(12.0ml)中。封管密闭，反应混合物在80℃下搅拌反应16小时。补加氯化氢乙醇溶液(6.00ml)，反应混合物继续在80℃下搅拌反应16小时。反应液冷却至室温后，缓缓倾入水(60.0ml)中，用饱和碳酸氢钠溶液调节ph到8，用ea(120ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe:ea＝100:1)得到目标化合物(1.05g,收率54.3％,无色油状物)。lc-ms(esi)m/z 274.3[m h]

。
[0307]
步骤3:3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯的合成
[0308]
将3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯(1.05g,3.84mmol)溶于甲醇(20.0ml)中。加入钯碳(100mg)，置换氢气三次。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。过滤，滤饼用甲醇(10.0ml)洗，滤液减压浓缩后得到目标化合物(690mg,收率97.8％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 184.1[m h]

。
[0309]
步骤4:3-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯的合成
[0310]
向6-溴-4-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(600mg,2.50mmol)和3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯(550mg,3.00mmol)的n-甲基吡咯烷酮(5.00ml)溶液中加入diea(646mg,5.00mmol)。反应混合物在100℃下搅拌反应16小时。将反应液冷却至室温后倒入水(20.0ml)中，用ea(80.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥、过滤、滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝20：1-10：1)得到目标化合物(800mg,收率79.4％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 403.1,405.1[m h]

。
[0311]
步骤5:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯的合成
[0312]
向3-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯(300mg,0.744mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑(186mg,0.893mmol)的水(0.600ml)和1,4-二氧六环(3.00ml)混合溶液中加入碳酸钠(158mg,1.49mmol)和pd(dppf)cl2(48.1mg,0.056mmol)。氩气保护下，反应混合物在80℃下搅拌反应16小时。将反应液冷却至室温后倒入水(15.0ml)中，用ea(25.0ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝4：1-2：1)得到目标化合物(120mg,粗品,黄色油状物)。lc-ms(esi)m/z 405.1[m h]

。
[0313]
步骤6:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸的合成
[0314]
将3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯(120mg,0.297mmol)溶于乙醇(5.00ml)中，加入氢氧化钠(23.7mg,0.593mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时。将反应混合物减压浓缩，残留物溶于水(6.00ml)中，加入1.0m盐酸调节ph＝4得到悬浊液，过滤。滤饼用水(5.00ml)洗。真空干燥得到目标化合物(80.0mg,两步收率71.4％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 377.3[m h]

。
[0315]
步骤7:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酰胺的合成
[0316]
向3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸(80.0mg,0.213mmol)和(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(40.9mg,0.213mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入edci(61.2mg,0.319mmol)、hobt(41.3mg,0.319mmol)和diea(54.9mg,0.425mmol)。反应混合物室温下搅拌反应1小时。将反应混合物倒入水中(10.0ml)中，用ea(30.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
3)洗，无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(10.1mg,收率7.97％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 551.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.90(s,1h),8.69(d,j＝4.5hz,1h),8.59(s,1h),8.50-8.46(m,1h),8.37
–
8.33(m,2h),8.06(s,1h),7.94
–
7.88(m,2h),7.88
–
7.84(m,1h),7.30(s,1h),4.35(d,j＝5.7hz,2h),3.88(s,3h),3.48
–
3.43(m,2h),3.01
–
2.95(m,2h),2.72
–
2.67(m,2h),2.15
–
2.08(m,2h),1.70
–
1.63(m,2h),1.27
–
1.21(m,1h)。
[0317]
实施例9：(s)-4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(化合物9)的合成
吡唑-4-基)-4-(3-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(80.0mg,0.224mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应20分钟。将反应液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(15.1mg,收率12.5％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 540.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.95(s,1h),8.69(d,j＝4.3hz,1h),8.60(s,1h),8.39
–
8.34(m,2h),8.08(s,1h),7.93
–
7.88(m,3h),7.30(s,2h),4.49
–
4.39(m,1h),4.37
–
4.27(m,2h),3.88(s,3h),3.83
–
3.74(m,1h),3.65
–
3.50(m,3h),3.29
–
3.20(m,1h),3.17
–
3.07(m,1h),1.27(d,j＝6.3hz,3h)。
[0327]
实施例10：(r)-4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(化合物10)的合成
[0328][0329]
步骤1:(r)-4-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的合成
[0330]
向6-溴-4-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300mg,1.25mmol)和(r)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(375mg,1.87mmol)的n-甲基吡咯烷酮(2.00ml)溶液加入碳酸钾(346mg,2.50mmol)。反应混合物在100℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(20.0ml)中，用ea(20.0ml
×
3)萃取。合并有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝9:1)得到目标化合物(80.0mg，收率15.2％，灰色固体)。lc-ms(esi)m/z 364.0,366.0[m-56 h]

。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.42(d,j＝1.4hz,1h),8.20(s,1h),6.87(d,j＝1.4hz,1h),4.54
–
4.46(m,1h),3.95
–
3.88(m,1h),3.84
–
3.76(m,1h),3.67
–
3.61(m,1h),3.17
–
3.12(m,1h),3.05
–
3.00(m,1h),2.60
–
2.52(m,1h),1.48(s,9h),1.37(d,j＝6.8hz,3h)。
[0331]
步骤2:(r)-4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的合成
[0332]
向(r)-4-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(80.0mg,0.190mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑(50.0mg,0.240mmol)的水(1.00ml)和1,4-二氧六环(5.00ml)溶液中加入碳酸钠(42.0mg,0.396mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(8.00mg,0.009mmol)。氮气保护下，反应混合物在80℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(20.0ml)中得到黑色溶液。溶液用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝9:1-5:1)得到目标化合物(70.0mg，收率89.1％，白色固体)。lc-ms(esi)m/z 422.2[m h]

。
[0333]
步骤3:(r)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(3-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0334]
向(r)-4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(76.0mg,0.166mmol)的甲醇(3.00ml)溶液中加入氯化氢甲醇溶液(3.0m,3.00ml)。反应混合物在室温下搅拌反应12小时。将反应混合物减压浓缩后得到目标化合物(50.0mg,收率84.2％,灰色固体)。lc-ms(esi)m/z 322.1[m h]

。
[0335]
步骤4:(r)-4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺的合成
[0336]
向(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(22.4mg,0.116mmol)的饱和碳酸氢钠水溶液(3.00ml)与dcm(5.00ml)混合液中加入三光气(20.8mg,0.070mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。用dcm(10.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(4.00ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。向滤液中加入tea(35.3mg,0.349mmol)和(r)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(3-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(50.0mg,0.140mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应20分钟。将反应液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(16.0mg,收率21.3％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 540.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.15(d,j＝1.2hz,1h),8.98(dd,j＝4.5,0.7hz,1h),8.86(s,1h),8.84(s,1h),8.64(s,1h),8.43-8.41(m,1h),8.40-8.34(m,2h),8.18(d,j＝4.4hz,1h),7.75(d,j＝1.0hz,1h),7.13-7.08(m,1h),5.04-5.00(m,1h),4.92(d,j＝5.9hz,2h),4.39(s,3h),4.31
–
4.26(m,3h),4.17-4.11(m,1h),3.80-3.73(m,1h),3.70-3.64(m,1h),1.82(d,j＝6.7hz,3h)。
[0337]
实施例11：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酰胺(化合物11)的合成
[0338][0339]
步骤1:4-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯的合成
[0340]
将4-氟-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.00g,4.16mmol)和1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(1.00g,4.99mmol)溶于n-甲基吡咯烷酮(5.00ml)中。向反应混合液中加入diea(1.08g,8.32mmol)。反应混合液在90℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(10.0ml)中，用ea(15.0ml
×
3)萃取。合并有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
4)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝12:1-10:1)得到目标化合物(580mg，收率33.1％，淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 442.1,444.1[m na]

。步骤2:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯的合成
[0341]
向4-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯
(250mg,0.595mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑(186mg,0.894mmol)的水(0.500ml)和1,4-二氧六环(3.00ml)溶液中加入碳酸钾(164mg,1.19mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(26.0mg,0.030mmol)。氩气保护下，反应混合液在100℃下搅拌反应6小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(5.00ml)中，用ea(10.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
2)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经反相柱分离纯化(c18，乙腈/含0.05％甲酸的水)得到目标化合物(145mg，收率57.8％,淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 444.3[m na]

。
[0342]
步骤3:4-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0343]
4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(145mg,0.344mmol)的氯化氢甲醇溶液(3.0m,10.0ml)在室温下搅拌反应16小时。将反应混合物减压浓缩得到目标化合物(120mg，收率97.5％，白色固体)。lc-ms(esi)m/z322.3[m h]

。
[0344]
步骤4:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酰胺的合成
[0345]
向碳酸氢钠水溶液(3.00ml)与dcm(5.00ml)的混合液中依次加入(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(60.0mg,0.312mmol)和三光气(55.8mg,0.188mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应混合物用dcm(10.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(5.00ml
×
2)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。向滤液中依次加入tea(94.8mg,0.936mmol)和4-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(120mg,0.335mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应30分钟。将反应混合液减压浓缩得到粗品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(23.81mg,收率13.2％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 540.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.90(s,1h),8.66(d,j＝4.1hz,1h),8.57(s,1h),8.36-8.33(m,2h),8.05(s,1h),7.96
–
7.79(m,3h),7.35(s,1h),7.14
–
7.01(m,1h),4.32(d,j＝4.9hz,2h),3.86(s,3h),3.79
–
3.70(m,2h),3.60
–
3.51(m,2h),3.39
–
3.32(m,4h),2.18
–
2.00(m,2h)。
[0346]
实施例12：1-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)氮杂环丁烷-3-甲酰胺(化合物12)的合成
[0347][0348]
步骤1:1-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯的合成
[0349]
向6-溴-4-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(720mg,3.00mmol)和氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯盐酸盐(500mg,3.30mmol)的n-甲基吡咯烷酮(10.0ml)溶液加入diea(1.16g,9.00mmol)。反应混合液在100℃下搅拌反应8小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水
(30.0ml)中，搅拌1小时，过滤。滤饼用水(10.0ml)洗，干燥后得到目标化合物(625mg，收率62.2％，淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 335.1,337.1[m h]

。
[0350]
步骤2:1-(3-氰基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯的合成
[0351]
向1-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯(1.10g,3.28mmol)和联硼酸频哪醇酯(4.17g,16.4mmol)的干燥1,4-二氧六环(20.0ml)溶液中加入乙酸钾(644mg,6.56mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(141mg,0.164mmol)。氩气保护下，反应混合物在90℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(100ml)中。过滤，滤饼用ea(20.0ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(6.00g，粗品,黑色固体)。lc-ms(esi)m/z 383.2[m h]

。
[0352]
步骤3:1-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯的合成
[0353]
在0℃下，向1-(3-氰基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯(6.00g,15.7mmol)的四氢呋喃(200ml)溶液中加入氢氧化钠(2.51g,62.8mmol)。随后滴加30％过氧化氢(12.8ml,126mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应1小时。向反应混合液中加入饱和氯化铵水溶液(100ml)，在室温下搅拌15分钟。分出有机相，水相用ea(80.0ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产物。经柱层析分离纯化(pe：ea＝4:1-1:1)得到目标化合物(320mg，两步收率35.8％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 273.3[m h]

。
[0354]
步骤4:1-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸的合成
[0355]
向1-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯(300mg,1.10mmol)的四氢呋喃(6.00ml)溶液中加入氢氧化钠水溶液(2.0n,1.10ml,2.20mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应15分钟，然后加入2,2-二甲基环氧乙烷(0.983ml,11.0mmol)。封管密闭条件下，反应混合液在85℃下搅拌反应8小时。将反应混合物减压浓缩得到粗品。经制备hplc(含0.05％甲酸的水/乙腈)纯化得到目标化合物(80.0mg,收率22.0％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 331.0[m h]

。
[0356]
步骤5:1-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)氮杂环丁烷-3-甲酰胺的合成
[0357]
向1-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸(80.0mg,0.242mmol)和(6-甲氧基吡啶-3-基)甲胺(40.2mg,0.291mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入edci(69.5mg,0.363mmol)、hobt(49.1mg,0.363mmol)和diea(62.6mg,0.484mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。将反应混合物倒入水(15.0ml)中，用ea(100ml)萃取。有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(含0.05％甲酸的水/乙腈)纯化得到目标化合物(21.9mg,收率20.0％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 451.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.56
–
8.51(m,1h),8.48(s,1h),8.16(d,j＝1.8hz,1h),8.06(d,j＝2.2hz,1h),7.62
–
7.58(m,1h),6.78(d,j＝8.5hz,1h),6.35(d,j＝1.7hz,1h),4.67(s,1h),4.34
–
4.29(m,2h),4.24(d,j＝5.7hz,2h),4.16
–
4.11(m,2h),3.82(s,3h),3.78(s,2h),3.59
–
3.50(m,1h),1.21(s,6h)。
[0358]
实施例13：1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)氮杂环丁烷-3-甲酰胺(化合物13)的合成
[0359][0360]
步骤1:1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸的合成
[0361]
向1-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯(175mg,0.522mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(130mg,0.627mmol)的水(1.00ml)和1,4-二氧六环(5.00ml)溶液中加入碳酸钠(111mg,1.04mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(22.5mg,0.026mmol)。氮气保护下，反应混合物在100℃下搅拌反应4小时。将反应混合物冷却至室温，浓缩后加水(10.0ml)。用稀盐酸(2.0m)调ph约到4，过滤。滤饼干燥后得到目标化合物(52.0mg，收率30.9％,灰白色固体)。lc-ms(esi)m/z 323.2[m h]

。
[0362]
步骤2:1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)氮杂环丁烷-3-甲酰胺的合成
[0363]
在室温下，向1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸(50.0mg,0.155mmol)、(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(35.7mg,0.186mmol),edci(44.6mg,0.232mmol)和hobt(31.4mg,0.232mmol)的dmf(1.50ml)溶液中加diea(40.1mg,0.310mmol)。反应混合物室温下搅拌反应16小时。将反应混合物倒入水(10.0ml)中，过滤。滤饼经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(18.5mg,收率24.0％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 497.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.75(s,1h),8.72
–
8.65(m,2h),8.56(s,1h),8.40
–
8.34(m,2h),8.07(s,1h),7.94
–
7.86(m,3h),6.80(s,1h),4.41
–
4.34(m,4h),4.26
–
4.19(m,2h),3.88(s,3h),3.66
–
3.59(m,1h)。
[0364]
实施例14：1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)氮杂环丁烷-3-甲酰胺(化合物14)的合成
[0365][0366]
步骤1:1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)氮杂环丁烷-3-甲酰胺的合成
[0367]
1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸(60.0mg,0.186mmol)和(6-甲氧基吡啶-3-基)甲胺(30.9mg,0.223mmol)的dmf(1.50ml)溶液中加入edci(53.4mg,0.279mmol)、hobt(37.7mg,0.279mmol)和diea(48.1mg,0.372mmol)。反应混合物室温下搅拌反应16小时。将反应混合物倒入水(15.0ml)中，用ea(100ml)萃取。有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(10.5mg,收率12.7％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 443.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.75
–
8.74(m,1h),8.58
–
8.53(m,2h),8.37(s,1h),8.07(s,2h),7.62
–
7.59(m,1h),6.80
–
6.76(m,2h),4.38
–
4.33(m,2h),4.24(d,j＝5.7hz,2h),4.23
–
4.18(m,2h),3.88(s,3h),3.82(s,3h),3.64
–
3.55(m,1h)。
[0368]
实施例15：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酰胺(化合物15)的合成
[0369][0370]
步骤1：3-(5-溴吡啶-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的合成
[0371]
向3,5-二溴吡啶(5.50g,23.2mmol)的无水四氢呋喃(50.0ml)溶液中加入(1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-3-基)碘化锌(ii)(8.65g,34.8mmol)(溶于100ml无水四氢呋喃溶液中)和四(三苯基膦)钯(2.68g,2.32mmol)。氮气保护下，反应混合物在60℃下搅拌反应过夜。将反应液冷却至室温后，加入饱和氯化铵溶液(50.0ml)。用ea(75.0ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(c18,乙腈/水含0.05％甲酸)得到粗品。将粗品加入到pe和ea(5:1)的混合溶剂中，在室温下搅拌反应2小时，过滤。滤饼经真空干燥得到目标化合物(1.40g，收率19.3％，白色固体)。lc-ms(esi)m/z313.2,315.2[m h]

。
[0372]
步骤2：1-氨基-3-溴-5-(1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-3-基)吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基苯磺酸盐的合成
[0373]
冰浴下，向3-(5-溴吡啶-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.36g,4.34mmol)的dcm(20.0ml)溶液中缓慢加入2,4,6-三甲基磺酰羟胺(1.03g,4.78mmol)。反应混合物在0℃下搅拌反应4小时。混合物减压浓缩得到目标化合物(2.50g，粗品，白色固体)。lc-ms(esi)m/z 369.1,371.1[m ch3cn]

。
[0374]
步骤3：3-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的合成
[0375]
在0℃下，向1-氨基-3-溴-5-(1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-3-基)吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基苯磺酸盐(2.50g,4.73mmol)的1,4-二氧六环(30.0ml)溶液中加入丙烯腈(577mg,10.9mmol)和diea(795mg,6.15mmol)。反应液在0℃下搅拌反应2小时后，加入2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(2.25g,9.91mmol)。将反应混合物升至室温继续搅拌反应16小时。将反
应混合物倒入ea(20.0ml)中，然后过滤除去滤渣。滤液用饱和碳酸钠(60.0ml
×
5)溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(570mg,两步收率34.8％,粉红色固体)。lc-ms(esi)m/z 418.1,420.1[m ch3cn h]

。
[0376]
步骤4：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的合成
[0377]
向3-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(420mg,1.11mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(255mg,1.23mmol)的水(0.500ml)和1,4-二氧六环(5.00ml)混合溶液中加入碳酸钾(308mg,2.23mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(48.0mg,0.0557mmol)。氩气保护下，反应混合物在90℃下搅拌反应8小时。将反应液冷却至室温后，向反应液中加入ea(15.0ml)，然后用无水硫酸钠干燥，过滤。减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离(pe：ea＝1:1-1:3)纯化得到目标化合物(400mg，收率94.7％，淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 279.1[m-100 h]

。
[0378]
步骤5：4-(氮杂环丁烷-3-基)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0379]
3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(220mg,0.581mmol)的氯化氢甲醇溶液(3.0m,8.00ml)在室温下搅拌反应过夜。将反应混合物减压浓缩后得到目标化合物(180mg，收率98.4％，白色固体)。lc-ms(esi)m/z 279.1[m h]

。
[0380]
步骤6：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酰胺的合成
[0381]
向cdi(60.3mg,0.372mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(65.9mg,0.343mmol)和diea(73.9mg,0.572mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应过夜。向混合液中加入4-(氮杂环丁烷-3-基)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(90.0mg,0.286mmol)。反应混合物在50℃下搅拌反应2小时。将反应混合物冷却至室温后加入水(10.0ml)中，用ea(15.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
2)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(60.96mg,收率42.9％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 497.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.19-9.16(m,1h),8.67-8.65(m,1h),8.63(s,1h),8.47(s,1h),8.37
–
8.35(m,1h),8.16(s,1h),7.92
–
7.88(m,2h),7.87
–
7.84(m,2h),7.15(t,j＝5.9hz,1h),4.38
–
4.31(m,3h),4.27(d,j＝5.9hz,2h),4.22
–
4.17(m,2h),3.89(s,3h)。
[0382]
实施例16：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-1-甲酰胺(化合物16)的合成
[0383]
[0384]
步骤1:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯的合成
[0385]
向3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(400mg,1.07mmol)和3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯(349mg,1.18mmol)的水(1.00ml)和1,4-二氧六环(4.00ml)混合溶液中加入碳酸钾(297mg,2.15mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(46.3mg,0.054mmol)。氩气保护下，反应混合液在90℃下搅拌反应4小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(10.0ml)中，用ea(15.0ml
×
3)萃取。合并有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤、减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝1:1-1:3)得到目标化合物(300mg，收率71.3％，淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 413.1[m na]

。
[0386]
步骤2:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的合成
[0387]
向3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯(300mg,0.768mmol)的ea溶液(8.00ml)中加入钯碳(100mg)。在氢气氛围下，反应混合物在40℃下搅拌反应24小时。将反应混合物过滤，滤液减压浓缩得到目标化合物(250mg，收率82.9％,淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 293.1[m-100 h]

。
[0388]
步骤3:6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(吡咯烷-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0389]
3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(250mg,0.637mmol)的氯化氢甲醇溶液(3.0m,6.00ml)在室温下搅拌反应过夜。将反应混合物减压浓缩得到目标化合物(200mg，收率95.5％，白色固体)。lc-ms(esi)m/z 293.3[m h]

。
[0390]
步骤4:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-1-甲酰胺的合成
[0391]
在室温下，向cdi(91.3mg,0.563mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入2-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(100mg,0.520mmol)和diea(112mg,0.867mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。向混合液中加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(吡咯烷-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(142mg,0.443mmol)。反应混合物在50℃下搅拌反应3小时。将反应混合物倒入水(10.0ml)中，用ea(15.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤、减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)和手性柱纯化得到目标化合物(23.3mg,收率10.6％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z511.2[m h]

。1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ8.87(d,j＝1.3hz,1h),8.48(dd,j＝4.5,0.8hz,1h),8.40(s,1h),8.37
–
8.35(m,1h),8.06(s,1h),7.90(d,j＝0.7hz,1h),7.88
–
7.81(m,2h),7.69
–
7.66(m,1h),7.57(s,1h),7.06
–
6.99(m,1h),4.49
–
4.37(m,2h),4.17
–
4.10(m,1h),3.96
–
3.88(m,4h),3.84
–
3.76(m,1h),3.62
–
3.53(m,2h),2.58
–
2.50(m,1h),2.38
–
2.30(m,1h)。
[0392]
实施例17：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺(化合物17)的合成
4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(90.0mg,0.275mmol)。反应混合物在50℃下搅拌反应3小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(10.0ml)中，用ea(15.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(50.88mg,收率39.4％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 469.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.24(d,j＝1.3hz,1h),8.68(s,1h),8.38(s,1h),8.14(d,j＝2.4hz,1h),8.12(s,1h),7.88(d,j＝1.2hz,1h),7.75
–
7.71(m,1h),6.78(d,j＝8.6hz,1h),6.61(d,j＝8.0hz,1h),6.37
–
6.34(m,1h),4.91
–
4.86(m,1h),4.62
–
4.57(m,2h),4.38
–
4.33(m,2h),3.88(s,3h),3.82(s,3h),1.42(d,j＝7.1hz,3h)。
[0402]
实施例19：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺(化合物19)及其盐酸盐(化合物19-1)的合成
[0403][0404]
步骤1:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺及其盐酸盐的合成
[0405]
在0℃下，向cdi(71.0mg,0.438mmol)的dmf(4.00ml)溶液中加入1-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(83.3mg,0.404mmol)和diea(87.0mg,0.674mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应过夜。向混合液中加入4-(2,5-二氢-1h-吡咯-3-基)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(110mg,0.337mmol)。反应混合物在50℃下搅拌反应2小时。将反应混合物冷却至室温后加入水(10.0ml)，用ea(10.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品(化合物19)。经制备hplc(乙腈/含0.05％盐酸的水)纯化得到盐酸盐形式的目标化合物(化合物19-1)(54.1mg,两步收率38.7％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 523.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.25(s,1h),8.71
–
8.64(m,2h),8.47(d,j＝1.9hz,1h),8.39(s,1h),8.13(s,1h),8.04
–
7.99(m,1h),7.93
–
7.86(m,3h),6.77(d,j＝7.7hz,1h),6.38(s,1h),5.03
–
4.96(m,1h),4.63(s,2h),4.44
–
4.34(m,2h),3.89(s,3h),1.49(d,j＝7.1hz,3h)。
[0406]
实施例20：3-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺(化合物20)的合成
[0407][0408]
步骤1:3-(3-氰基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯的合成
[0409]
向3-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯(2.20g,5.65mmol)和联硼酸频哪醇酯(7.17g,28.2mmol)的无水1,4-二氧六环(30.0ml)溶液中加入乙酸钾(1.11g,11.3mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(244mg,0.283mmol)。氮气保护下，反应混合物在90℃下搅拌反应过夜。将反应液冷却至室温后倒入ea(30.0ml)中，溶液通过硅藻土过滤后，滤饼再用ea(20.0ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(12.2g，粗品，黑色固体)。
[0410]
步骤2:3-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯的合成
[0411]
在0℃下，向3-(3-氰基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯(12.2g,28.0mmol)的四氢呋喃(300ml)溶液中加入氢氧化钠(4.47g,112mmol)，并慢慢滴加30％的过氧化氢水溶液(22.8ml,224mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应2小时。向反应混合液中加入饱和氯化铵水溶液(150ml)，然后室温下搅拌15分钟。分离有机相，水相用ea(100ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝5:1-1:1)得到目标化合物(1.20g，两步收率65.1％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 227.0[m-100 h]

。
[0412]
步骤3:3-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯的合成
[0413]
向3-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯(400mg,1.23mmol)的四氢呋喃(5.00ml)溶液中加入氢氧化钠水溶液(2.0n,1.23ml,2.46mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应15分钟后加入2,2-二甲基环氧乙烷(1.10ml,12.3mmol)。封管密闭后，反应混合液在80℃下搅拌反应16小时。将反应液冷却至室温，减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3：1-1：1)得到目标化合物(350mg，收率71.7％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 399.1[m h]

。
[0414]
步骤4:4-(2,5-二氢-1h-吡咯-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0415]
将3-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯(250mg,0.627mmol)加入到氯化氢甲醇溶液(3.0m,10.0ml)中。反应混合物在室温下搅拌反应过夜。减压浓缩得到目标化合物(200mg，收率95.2％，白色固体)。lc-ms(esi)m/z 299.1[m h]

。
[0416]
步骤5:3-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺的合成
[0417]
向cdi(63.0mg,0.389mmol)的dmf(3.00ml)溶液中加入(6-甲氧基吡啶-3-基)甲胺(49.5mg,0.358mmol)和diea(77.2mg,0.597mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。向混合液中加入4-(2,5-二氢-1h-吡咯-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(100mg,0.299mmol)。反应混合物在50℃下搅拌反应3小时。将反应混合物冷却至室温后加入水(10.0ml)中。用ea(15.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(67.0mg,收率48.5％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 463.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.67(d,j＝2.0hz,1h),8.61(s,1h),8.09(d,j＝2.0hz,1h),7.66(dd,j＝8.5,2.4hz,1h),7.41(d,j＝1.8hz,1h),6.88(t,j＝5.8hz,1h),6.77(d,j＝8.5hz,1h),6.37(s,1h),4.70(s,1h),4.55
–
4.49(m,2h),4.35
–
4.29(m,2h),4.22(d,j＝5.7hz,2h),3.85(s,2h),3.82(s,3h),1.21(s,6h)。
[0418]
实施例21：3-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺(化合物21)及其盐酸盐(化合物21-1)的合成
[0419][0420]
步骤1:3-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺及其盐酸盐的合成向cdi(63.0mg,0.389mmol)的dmf(3.00ml)溶液中加入(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶3-基)甲胺(68.9mg,0.358mmol)和diea(77.2mg,0.597mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时后,向混合液中加入4-(2,5-二氢-1h-吡咯-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(100mg,0.299mmol)。反应混合物在50℃下搅拌反应3小时。将反应混合物冷却至室温后加入水(10.0ml)，用ea(15.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(10.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品(化合物21)。经制备hplc(乙腈/水含0.05％盐酸)纯化得到盐酸盐形式的目标化合物(化合物21-1)(50.3mg,收率30.4％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 517.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.69
–
8.66(m,2h),8.61(s,1h),8.41(d,j＝1.6hz,1h),7.96
–
7.90(m,2h),7.90
–
7.86(m,1h),7.42(d,j＝1.9hz,1h),7.02(t,j＝5.9hz,1h),6.40
–
6.37(m,1h),4.69(s,1h),4.58
–
4.53(m,2h),4.38
–
4.32(m,4h),3.85(s,2h),1.21(s,6h)。
[0421]
实施例22：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺(化合物22)的合成
1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(130mg,0.398mmol)。反应混合物在50℃下搅拌反应3小时。将反应混合物倒入水(20.0ml)中，用ea(40.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(66.4mg,收率30.1％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 509.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.25
–
9.23(m,1h),8.70
–
8.66(m,2h),8.42
–
8.40(m,1h),8.38(s,1h),8.12(s,1h),7.96
–
7.93(m,1h),7.92
–
7.87(m,3h),7.07
–
7.03(m,1h),6.39
–
6.36(m,1h),4.65
–
4.60(m,2h),4.39
–
4.34(m,4h),3.88(s,3h)。
[0431]
实施例23：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)哌啶-1-甲酰胺(化合物23)及其盐酸盐(化合物23-1)的合成
[0432][0433]
步骤1：1-氨基-3-溴-5-甲氧基吡啶-2,4,6-三甲基苯磺酸盐的合成
[0434]
3-溴-5-甲氧基吡啶(5.00g,26.6mmol)和o-2,4,6-三甲基苯磺酰羟胺(8.59g,39.9mmol)的dcm(75.0ml)溶液在0℃下搅拌反应1小时。在0℃下向反应液中缓慢加入pe(75.0ml)，继续搅拌15分钟得到一个白色悬浊液。悬浊液过滤后得到白色固体。固体干燥后得到目标化合物(10.2g,收率95.1％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 202.9,204.9[m]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.62
–
8.59(m,1h),8.58
–
8.35(m,3h),8.16
–
8.13(m,1h),6.64(s,2h),3.86(s,3h),2.39(s,6h),2.06(s,3h)。
[0435]
步骤2：6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的合成
[0436]
在0℃下，向1-氨基-3-溴-5-甲氧基吡啶-2,4,6-三甲基苯磺酸盐(10.2g,25.3mmol)的1,4-二氧六环(100ml)溶液中在加入丙烯腈(3.09g,58.2mmol)和diea(5.44ml,32.9mmol)。反应液在0℃下搅拌反应2小时后，加入2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(12.1g,53.1mmol)。反应液在室温下搅拌反应1小时后升温至室温继续搅拌16小时。将反应混合物倒入冰水(100ml)中得到棕色悬浊液。悬浊液过滤，滤饼用水(50.0ml)洗，得到类白色固体。经柱层析分离纯化(pe：ea＝100：1-9：1)得到目标化合物(2.60g,收率40.8％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 252.0,254.0[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.95
–
8.91(m,1h),8.60
–
8.56(m,1h),7.24
–
7.22(m,1h),4.03(s,3h)。
[0437]
步骤3：6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的合成
[0438]
氩气保护下，向6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.50g,5.95mmol)的1,2-二氯乙烷(25.0ml)溶液中加入无水三氯化铝(2.38g,17.9mmol)。反应混合物在80℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温，加入稀盐酸(1.0m，15.0ml)和水(30.0ml)。用ea(120ml
×
3)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝5：1-3：1)得到目标化合物(900mg，收率63.5％,黄色固体)。lc-ms
(esi)m/z 239.1[m h]

。
[0439]
步骤4：6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯的合成
[0440]
向6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(900mg,3.78mmol)和1,1,1-三氟-n-苯基-n-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(1.62g,4.54mmol)的n,n-二甲基乙酰胺(8.00ml)溶液中加入diea(1.25ml,7.56mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。补加1,1,1-三氟-n-苯基-n-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(1.35g,3.78mmol)和diea(0.625ml,3.78mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌反应3小时。将反应混合物倒入水(25.0ml)中，用ea(80.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(20.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝12：1)得到目标化合物(1.30g,收率92.9％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 367.9,369.9[m-h]-。
[0441]
步骤5：4-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯的合成
[0442]
向6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(800mg,2.16mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(668mg,2.16mmol)的水(1.50ml)和四氢呋喃(7.50ml)混合溶液中加入乙酸钾(424mg,4.32mmol)和pd(dppf)cl2dcm络合物(140mg,0.162mmol)。置换氩气三次，反应混合物在40℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(25.0ml)中，用ea(60.0ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝12：1-10：1)得到目标化合物(590mg,收率67.5％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 302.9,304.9[m-100 h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.31(d,j＝1.6hz,1h),8.68(s,1h),7.65(d,j＝1.5hz,1h),6.05(s,1h),4.08
–
4.02(m,2h),3.64
–
3.57(m,2h),2.49
–
2.43(m,2h),1.44(s,9h)。
[0443]
步骤6：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯的合成
[0444]
向4-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(200mg,0.496mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡唑(124mg,0.595mmol)的水(0.60ml)和1,4-二氧六环(3.00ml)混合溶液中加入碳酸钠(105mg,0.992mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(21.4mg,0.025mmol)。置换氩气三次，反应混合物在80℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(20.0ml)中，用ea(50.0ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3：1-1：1)得到目标化合物(165mg,收率82.3％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 405.3[m h]

。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.19(d,j＝1.4hz,1h),8.63(s,1h),8.38(s,1h),8.11(d,j＝0.6hz,1h),7.75(d,j＝1.0hz,1h),6.08
–
6.04(m,1h),4.10
–
4.05(m,2h),3.89(s,3h),3.67
–
3.62(m,2h),2.55
–
2.52(m,2h),1.46(s,9h)。
[0445]
步骤7：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
[0446]
向4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(165mg,0.408mmol)的ea(10.0ml)溶液中加入二氧化铂(185mg,0.816mmol)。氢气置换3次。反应混合物在室温下搅拌反应24小时。将反应混合物通过硅藻
土过滤，滤饼用ea(10.0ml)洗。滤液减压浓缩得到粗产品。经反相制备(乙腈/水含0.05％甲酸)纯化得到目标化合物(50.0mg,收率30.1％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 307.4[m-100 h]

。
[0447]
步骤8：6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(哌啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0448]
4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(50.0mg,0.123mmol)的氯化氢甲醇溶液(3.0m,5.00ml)在室温下搅拌反应16小时。将反应混合物减压浓缩得到目标化合物(42.0mg,收率99.5％,淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 307.1[m h]

。
[0449]
步骤9：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)哌啶-1-甲酰胺盐酸盐的合成
[0450]
向碳酸氢钠水溶液(2.50ml)与dcm(5.00ml)的混合液中依次加入(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(19.6mg,0.102mmol)和三光气(18.2mg,0.061mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。用dcm(8.00ml)萃取。有机相用饱和食盐水(3.00ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。向滤液中依次加入tea(31.0mg,0.306mmol)和6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(哌啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(42.0mg,0.123mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应20分钟。将反应液倒入水(20.0ml)中，用dcm(30.0ml
×
3)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品(化合物23)。经制备hplc(乙腈/水含0.05％盐酸)纯化得到盐酸盐形式的目标化合物(化合物23-1)(16.0mg,收率23.2％,淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 525.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.14
–
9.11(m,1h),8.67(d,j＝4.4hz,1h),8.63(s,1h),8.42(s,1h),8.39
–
8.36(m,1h),8.11(s,1h),7.93
–
7.86(m,3h),7.67(s,1h),7.34
–
7.26(m,1h),4.34
–
4.30(s,2h),4.25(d,j＝13.0hz,2h),3.88(s,3h),3.43
–
3.33(m,1h),2.91
–
2.82(m,2h),2.00
–
1.92(m,2h),1.80
–
1.68(m,2h)。
[0451]
实施例24：4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酰胺(化合物24)的的合成
[0452][0453]
步骤1:4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯的合成
[0454]
将4-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(400mg,0.992mmol)、2,2-二甲基环氧乙烷(715mg,9.92mmol)、碳酸铯(970mg,2.98mmol)、2-二叔丁基磷-3,4,5,6-四甲基-2',4',6'-三异丙基联苯(76.3mg,0.159mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(36.3mg,0.0397mmol)分别加入到水(2.00ml)和1,4-二氧六环(6.00ml)的混合溶剂中。氩气保护下，反应混合物在100℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温，分出有机相，减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝55:45)得到目标化合物
(65.0mg,收率30.0％,米白色固体)。lc-ms(esi)m/z 313.2[m-100 h]

。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.17(s,1h),8.09(d,j＝2.1hz,1h),7.05(d,j＝1.8hz,1h),6.01
–
5.97(m,1h),4.19
–
4.14(m,2h),3.83(s,2h),3.77(t,j＝5.6hz,2h),2.54-2.45(m,2h),1.50(s,9h),1.38(s,6h)。
[0455]
步骤2:6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0456]
室温下，将4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(65.0mg,0.158mmol)和3.0m的氯化氢甲醇溶液(1.00ml)加入到甲醇(1.00ml)中。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。将反应混合物减压浓缩得到目标化合物(50.0mg,收率90.9％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 313.2[m h]

。
[0457]
步骤3:4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酰胺的合成
[0458]
向碳酸氢钠水溶液(2.50ml)与dcm(5.00ml)的混合液中加入(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(60.6mg,0.315mmol)。搅拌15分钟后，加入三光气(56.1mg,0.189mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。加入dcm(5.00ml)和水(2.50ml)。分出有机相依次用水(5.00ml)和饱和食盐水(5.00ml)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。
[0459]
向上述滤液中依次加入tea(63.7mg,0.630mmol)和6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(50.0mg,0.143mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应半小时。加入水(15.0ml)，用dcm(20.0ml
×
2)萃取。合并有机相依次用水(15.0ml)及饱和食盐水(15.0ml)洗、无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(11.8mg,收率14.0％,米白色固体)。lc-ms(esi)m/z 531.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.67(d,j＝3.2hz,1h),8.61(s,1h),8.55(s,1h),8.38(s,1h),7.95
–
7.85(m,3h),7.34
–
7.21(m,2h),6.09
–
6.03(m,1h),4.74
–
4.65(m,1h),4.33(d,j＝4.4hz,2h),4.06(s,2h),3.83(s,2h),3.69
–
3.59(m,2h),2.55
–
2.50(m,2h),1.21(s,6h)。
[0460]
实施例25：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酰胺(化合物25)的的合成
[0461][0462]
步骤1:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯的合成
[0463]
向3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(80.0mg,0.215mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡
啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(66.6mg,0.215mmol)的水(0.300ml)和四氢呋喃(1.50ml)混合溶液中加入乙酸钾(42.3mg,0.431mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(13.9mg,0.016mmol)。置换氩气三次，反应混合物在50℃下搅拌反应4小时。将反应混合物冷却至室温，静置分层。有机相减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3：1-1：1)得到目标化合物(60mg,收率68.8％,淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 405.1[m h]

。
[0464]
步骤2:6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0465]
将4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(60.0mg,0.148mmol)加入到氯化氢甲醇溶液(3.0m,5.00ml)中。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。反应混合物减压浓缩后得到目标化合物(48.0mg,收率94.9％,淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 305.2[m h]

。
[0466]
步骤3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酰胺的合成
[0467]
向(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(22.6mg,0.117mmol)的碳酸氢钠水溶液(2.50ml)与dcm(5.00ml)混合液中加入三光气(20.9mg,0.070mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。用dcm(10.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(4.00ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。向滤液中加入tea(35.6mg,0.352mmol)和6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(48.0mg,0.141mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应20分钟。将反应液倒入水(10.0ml)中，用dcm(30.0ml
×
3)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(28.2mg,收率46.1％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 523.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.20
–
9.17(m,1h),8.68(d,j＝4.4hz,1h),8.63(s,1h),8.40
–
8.38(m,1h),8.37(s,1h),8.10(s,1h),7.94
–
7.86(m,3h),7.75
–
7.72(m,1h),7.28(t,j＝5.4hz,1h),6.10
–
6.06(m,1h),4.34(d,j＝5.4hz,2h),4.12
–
4.06(m,2h),3.88(s,3h),3.70
–
3.64(m,2h),2.56
–
2.53(m,2h)。
[0468]
实施例26：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)环己酰胺(化合物26)的的合成
[0469][0470]
步骤1:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)环己-3-烯-1-甲酸甲酯的合成
[0471]
向3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(100mg,0.269mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯-1-甲酸甲酯(72.2mg,0.269mmol)的水(0.500ml)和四氢呋喃(2.50ml)混合溶液中加入乙酸钾(52.9mg,0.538mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(17.4mg,0.020mmol)。置换氩气3次。反应
混合物在50℃搅拌反应5小时。将反应液冷却至室温后分离有机相。减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3：1-1：1)得到目标化合物(90.0mg,收率92.5％,淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 362.0[m h]

。
[0472]
步骤2:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)环己烷-1-甲酸甲酯的合成
[0473]
在室温下，将4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)环己-3-烯-1-甲酸甲酯(90.0mg,0.249mmol)加入到甲醇(15.0ml)和ea(15.0ml)混合溶剂中。加入钯碳(30.0mg)。在氢气氛围下，反应混合物在室温下搅拌反应32小时。反应混合物通过硅藻土过滤，滤饼用ea(20.0ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(50.0mg,收率55.2％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 364.3[m h]

。
[0474]
步骤3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)环己烷-1-甲酸的合成
[0475]
向4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)环己烷-1-甲酸甲酯(50.0mg,0.138mmol)的水(0.500ml)、四氢呋喃(1.00ml)和甲醇(2.00ml)的混合溶液中加入一水合氢氧化锂(8.66mg,0.206mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。将反应混合物减压浓缩除去有机溶剂后，加入到水(10.0ml)中。用1.0m盐酸溶液调节ph＝4。混合液用ea(20.0ml
×
3)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％盐酸的水)纯化得到目标化合物(12.0mg,收率25.0％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 350.4[m h]

。
[0476]
步骤4:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)环己酰胺的合成
[0477]
在室温下，向4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)环己烷-1-甲酸(12.0mg,0.034mmol)的dmf(0.500ml)溶液中加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(9.97mg,0.052mmol)、hobt(7.03mg,0.052mmol)、diea(8.88mg,0.069mmol)和(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(6.59mg,0.034mmol)。反应混合物室温下搅拌反应16小时。将反应混合物倒入水(10.0ml)中，用ea(30.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(5.00ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(4.46mg,收率25.1％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 524.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.10(d,j＝0.8hz,1h),8.65
–
8.62(m,1h),8.61(s,1h),8.46-8.41(m,1h),8.40(s,1h),8.38
–
8.35(m,1h),8.07(s,1h),7.92
–
7.86(m,3h),7.49(s,1h),4.39
–
4.34(m,2h),3.87(s,3h),2.69
–
2.63(m,2h),2.19
–
2.13(m,2h),1.92
–
1.85(m,4h),1.79
–
1.71(m,2h)。
[0478]
实施例27：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物27)的的合成
4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈三氟乙酸盐(80.0mg,0.198mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应20分钟。将反应液用水(15.0ml)稀释，dcm(3.00ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(4.10mg,收率4.08％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 508.4[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.45
–
9.41(m,1h),9.27(s,1h),8.81(s,1h),8.71
–
8.67(m,2h),8.49
–
8.46(m,1h),8.39(s,1h),8.26(s,1h),8.13(s,1h),8.03
–
7.96(m,2h),7.95
–
7.90(m,2h),4.55(d,j＝5.7hz,2h),3.89(s,3h)。
[0488]
实施例28：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物28)及其盐酸盐(化合物28-1)的合成
[0489][0490]
步骤1:6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的合成
[0491]
向3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(800mg,2.15mmol)和1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(659mg,2.37mmol)的水(1.20ml)和四氢呋喃(6.00ml)混合溶液中加入碳酸钠(457mg,4.31mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(92.8mg,0.108mmol)。氩气保护下，反应混合物在60℃下搅拌反应5小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(60.0ml)中得到黑色溶液。溶液用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3：1-1：5)得到目标化合物(700mg，收率87.0％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 396.1[m na]

。
[0492]
步骤2:6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0493]
6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(700mg,1.87mmol)的氯化氢甲醇溶液(3.0m,10.0ml)在室温下搅拌反应16小时。将反应混合物减压浓缩得到目标化合物(600mg，收率98.2％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z290.3[m h]

。
[0494]
步骤3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺及其盐酸盐的合成
[0495]
在室温下，向cdi(64.7mg,0.399mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入(6-甲氧基吡啶-3-基)甲胺(46.7mg,0.338mmol)和diea(79.4mg,0.614mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。向反应混合液中加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(100mg,0.307mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应8小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(15.0ml)中，用ea(100ml)萃取。有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品(化合物28)。经制备(乙腈/含0.05％盐酸的水)纯化得到盐酸盐形式的目标化合物(化合物28-1)(19.6mg,收率13.0％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 454.0[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.33
–
9.28(m,1h),9.27
–
9.25(m,1h),8.80
–
8.78(m,1h),8.68(s,1h),8.39(s,1h),8.25
–
8.23(m,1h),8.19
–
8.16(m,1h),8.13(s,1h),7.98
–
7.95(m,1h),7.77
–
7.73(m,1h),6.83(d,j＝8.5hz,1h),4.42(d,j＝6.2hz,2h),3.89(s,3h),3.84(s,3h)。
[0496]
实施例29：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物29)的合成
[0497][0498]
步骤1:1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-酮肟的合成
[0499]
向1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙烷-1-酮(1.00g,6.62mmol)的乙醇(10.0ml)溶液中加入盐酸羟胺(919mg,13.2mmol)和乙酸钠(1.09g,13.2mmol)的水(5.00ml)溶液。反应混合物在90℃下搅拌反应2小时。将反应液减压浓缩后得到的固体残渣加入到水(30.0ml)中。过滤，滤饼用水(30.0ml)洗。滤饼经真空干燥后得到目标产物(1.05g，收率95.5％，白色固体)。lc-ms(esi)m/z 167.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.20(s,1h),8.42
–
8.39(m,1h),8.00
–
7.95(m,1h),6.85
–
6.82(m,1h),3.87(s,3h),2.14(s,3h)。
[0500]
步骤2:1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-胺的合成
[0501]
在-10℃下，向1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-酮肟(1.05g,6.32mmol)的甲醇溶液中(20.0ml)加入六水合氯化镍(3.00g,12.6mmol)，然后缓慢加入硼氢化钠(1.91g,50.5mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时。向反应混合物中加入丙酮(10.0ml)淬灭反应。经硅藻土过滤，ea(100ml)洗涤后得到黑色滤液。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(dcm：甲醇＝100：1-10:1)得到目标化合物(350mg，收率36.4％，黄色油状物)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.15
–
8.10(m,1h),7.77
–
7.72(m,1h),6.78(d,j＝8.5hz,1h),4.11
–
4.00(m,1h),3.82(s,3h),3.51(br s,2h),1.29(d,j＝6.5hz,3h)。
[0502]
步骤3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0503]
在室温下，向cdi(74.7mg,0.460mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-胺(51.4mg,0.338mmol)和diea(79.3mg,0.614mmol)，反应混合物在室温下搅拌反应16小时加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(100mg,0.307mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应5小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(20.0ml)中，用ea(100ml)萃取。有机相分离后用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤、滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(37.5mg,收率26.1％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 468.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.27
–
9.25(m,1h),9.14(d,j＝8.4hz,1h),8.77(s,1h),8.68
(s,1h),8.38(s,1h),8.25(s,1h),8.23
–
8.21(m,1h),8.12(s,1h),7.97
–
7.95(m,1h),7.87
–
7.83(m,1h),6.82(d,j＝8.6hz,1h),5.10-5.03(m,1h),3.89(s,3h),3.83(s,3h),1.58(d,j＝7.1hz,3h)。
[0504]
实施例30：(s)-4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物30)的合成
[0505][0506]
步骤1:(r,e)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)亚乙基)-2-甲基丙基-2-亚磺酰胺的合成
[0507]
向1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-酮(1.25g,8.27mmol)的1,2-二氯乙烷(12.0ml)溶液中加入(r)-2-甲基丙基-2-亚磺胺(1.25g,10.3mmol)和钛酸四乙酯(6.93ml,33.1mmol)。反应混合物在110℃下微波管密闭搅拌反应2小时。将反应混合物冷却至室温。减压浓缩除去有机溶剂后溶于ea(100ml)和水(20.0ml)中得到悬浊液。过滤，滤饼用ea(30.0ml)洗。滤液用无水硫酸钠干燥，过滤。减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝10：1-4:1)得到目标化合物(2.00g，收率95.2％，黄色油状物)。lc-ms(esi)m/z 255.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.74(d,j＝2.3hz,1h),8.21(dd,j＝8.8,2.5hz,1h),6.93(d,j＝8.8hz,1h),3.93(s,3h),2.71(s,3h),1.21(s,9h)。
[0508]
步骤2:(r)-n-((s)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙基-2-亚磺酰胺的合成
[0509]
在-70℃并在氩气保护下，将三仲丁基硼氢化锂(1.0m的thf溶液，8.65ml,8.65mmol)滴加到(r,e)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)亚乙基)-2-甲基丙基-2-亚磺酰胺(2.00g,7.86mmol)的干燥四氢呋喃(60.0ml)溶液中。反应混合液在-70℃下搅拌反应90分钟。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(80.0ml)。分出有机相，水相用ea(80.0ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(dcm：meoh＝100：1-20:1)得到目标化合物(1.50g，收率74.4％，无色油状物)。lc-ms(esi)m/z 257.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.10(d,j＝2.4hz,1h),7.67(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),6.79(d,j＝8.6hz,1h),5.38(d,j＝5.1hz,1h),4.43
–
4.36(m,1h),3.83(s,3h),1.45(d,j＝6.7hz,3h),1.09(s,9h)。
[0510]
步骤3:(s)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-胺的合成
[0511]
在0℃下，将盐酸1,4-二氧六环溶液(4.0m,15.0ml,60.0mmol)滴加到(r)-n-((s)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙基-2-亚磺酰胺(1.50g,5.85mmol)的甲醇(15.0ml)溶液中。反应混合液在室温下搅拌反应1小时。将反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)中，用混合溶剂(dcm：meoh＝10:1，100ml
×
5)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(dcm：meoh＝20：1-10:1)得到目标化合物(650mg，收率73.0％，淡黄色油状物)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.09(d,j＝
乙氧基吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺及其盐酸盐的合成
[0528]
在室温下，向cdi(45.3mg,0.279mmol)的dmf(4.00ml)溶液中加入(6-乙氧基吡啶-3-基)甲胺(39.3mg,0.258mmol)和diea(55.5mg,0.430mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时后，向反应混合物中加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(70.0mg,0.215mmol)。反应混合物在60℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(15.0ml)中，用ea(100ml)萃取。有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品(化合物33)。经制备hplc(乙腈/含0.05％盐酸的水)纯化得到盐酸盐形式的目标化合物(化合物33-1)(14.3mg,收率13.2％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 468.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.30(t,j＝6.1hz,1h),9.27
–
9.25(m,1h),8.79(s,1h),8.68(s,1h),8.39(s,1h),8.24(s,1h),8.16
–
8.14(m,1h),8.13(s,1h),7.98
–
7.95(m,1h),7.73(dd,j＝8.5,2.4hz,1h),6.79(d,j＝8.6hz,1h),4.41(d,j＝6.2hz,2h),4.28(q,j＝7.0hz,2h),3.89(s,3h),1.30(t,j＝7.0hz,3h)。
[0529]
实施例34：4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物34)的合成
[0530][0531]
步骤1:4-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-4-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的合成
[0532]
向6-溴-4-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.00g,2.69mmol)和联硼酸频哪醇酯(2.73g,10.7mmol)的干燥1,4-二氧六环(25.0ml)溶液中加入乙酸钾(527mg,5.37mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(116mg,0.134mmol)。氩气保护下，反应混合物在90℃下搅拌反应5小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(80.0ml)中得到黑色溶液。溶液用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到目标化合物(5.20g，粗品，黑色固体)。lc-ms(esi)m/z 420.2[m h]

。
[0533]
步骤2:6-羟基-4-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的合成
[0534]
在0℃下，向4-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-4-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(5.20g,12.4mmol)的四氢呋喃(200ml)溶液中加入氢氧化钠(1.98g,49.6mmol)。随后滴加30％过氧化氢水溶液(10.1ml,99.2mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应1小时。向反应混合液中加入饱和氯化铵水溶液(80.0ml)后在室温下搅拌30分钟。分离有机相，水相用ea(80.0ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3:1-1:1)得到目标化合物(290mg，两步收率34.9％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 332.2[m na]

。
[0535]
步骤3:6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-4-基)
吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的合成
[0536]
向6-羟基-4-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的四氢呋喃(6.00ml)溶液中加入氢氧化钠水溶液(2.0n,0.940ml,1.88mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应15分钟后加入2,2-二甲基环氧乙烷(0.837ml,9.38mmol)。封管密闭后，反应混合液在90℃下搅拌反应8小时。将反应液冷却至室温后倒入ea(50.0ml)中得到黄色溶液。溶液用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3：1-1：2)得到目标化合物(255mg，收率71.3％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 404.2[m na]

。
[0537]
步骤4:6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的合成
[0538]
将6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(255mg,0.669mmol)加入到氯化氢甲醇溶液(3.0m,5.00ml)中。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。减压浓缩后得到目标化合物(215mg，收率96.3％，淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 298.1[m h]

。
[0539]
步骤5:4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0540]
向(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(124mg,0.644mmol)的碳酸氢钠水溶液(10.0ml)与dcm(15.0ml)混合液中加入三光气(191mg,0.644mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。用dcm(15.0ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
2)洗、无水硫酸钠干燥、过滤后得黄色滤液。向上述滤液中加入tea(0.179ml,1.29mmol)和6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(215mg,0.644mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应15小时。将反应液减压浓缩得到粗品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(20.0mg,收率6.21％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 516.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.44
–
9.36(m,1h),8.77(s,1h),8.73
–
8.66(m,2h),8.60(s,1h),8.47(s,1h),8.23(s,1h),8.02
–
7.97(m,1h),7.96
–
7.88(m,2h),7.51(s,1h),4.72(s,1h),4.58
–
4.49(m,2h),3.88(s,2h),1.23(s,6h)。
[0541]
实施例35：4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物35)及其盐酸盐(化合物35-1)的合成
[0542][0543]
步骤1:4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺盐酸盐的合成
[0544]
向cdi(28.4mg,0.175mmol)的dmf(1.50ml)溶液中加入1-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(30.5mg,0.148mmol)和diea(34.8mg,0.269mmol)。反应混合物在室
甲酸乙酯(120mg,0.332mmol)的水(1.00ml)和乙醇(6.00ml)的混合溶液中加入氢氧化钠(26.6mg,0.664mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应16小时。将反应混合物减压浓缩除去有机溶剂后，加入到水(3.00ml)中，用1.0m盐酸溶液调节ph＝5后得到悬浊液。悬浊液过滤，滤饼用水(10.0ml)洗，干燥后得到目标化合物(100mg，收率90.3％，白色固体)。lc-ms(esi)m/z 334.1[m h]

。
[0561]
步骤4:1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-4-甲酰胺的合成
[0562]
在室温下，1-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1h-吡唑-4-甲酸(100mg,0.300mmol)和(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(63.4mg,0.330mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入edci(86.3mg,0.450mmol)、hobt(60.8mg,0.450mmol)和diea(77.5mg,0.600mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入水(15.0ml)中，用ea(80.0ml)萃取。有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(15.3mg,收率10.0％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 508.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.39(s,1h),8.98(t,j＝6.0hz,1h),8.85(s,1h),8.72(s,1h),8.69(d,j＝4.2hz,1h),8.45(s,1h),8.42(s,1h),8.30(s,1h),8.21(s,1h),8.16(s,1h),7.98
–
7.89(m,3h),4.55(d,j＝5.4hz,2h),3.89(s,3h)。
[0563]
实施例39：5-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-1,3,4-噻二唑-2-甲酰胺(化合物39)的合成
[0564][0565]
步骤1：6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的合成
[0566]
向3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸酯(200mg,0.539mmol)和联硼酸频哪醇酯(684mg,2.69mmol)的干燥1,4-二氧六环(5.00ml)溶液中加入乙酸钾(106mg,1.08mmol)和pd(dppf)cl
2 dcm络合物(23.2mg,0.027mmol)。氩气保护下，反应混合物在90℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入水(20.0ml)中，用ea(50.0ml x 3)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到目标化合物(200mg，粗品，黑色固体)。lc-ms(esi)m/z 350.1[m h]

。
[0567]
步骤2：5-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1,3,4-噻二唑-2-甲酸乙酯的合成
[0568]
向6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.573mmol)和5-溴-1,3,4-噻二唑-2-甲酸乙酯(163mg,0.687mmol)的甲苯(6.00ml)和水(3.00ml)混合溶液中加入4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(9.95mg,0.017mmol)、乙酸钯(3.86mg,0.017mmol)和n-甲基吗啉(174mg,
1.72mmol)。氩气保护下，反应混合物在80℃下搅拌反应5小时。将反应液减压浓缩后加入到水(30.0ml)和ea(50.0ml)中。分出有机相，水相用混合溶剂(dcm：甲醇＝10:1,80.0ml x 3)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到目标化合物(70.0mg，两步收率34.3％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 380.0[m h]

。
[0569]
步骤3:5-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1,3,4-噻二唑-2-甲酸钾的合成
[0570]
在0℃下，向5-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1,3,4-噻二唑-2-甲酸乙酯(70.0mg,0.185mmol)的水(1.00ml)和乙醇(3.00ml)混合溶液中加入氢氧化钾(12.8mg,0.194mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应5小时。将反应液减压浓缩得到目标化合物(80.0mg，粗品，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 393.2[m h 41]

。
[0571]
步骤4:5-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-1,3,4-噻二唑-2-甲酰胺的合成
[0572]
在室温下，向5-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-1,3,4-噻二唑-2-甲酸钾(80.0mg,0.205mmol)和1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-胺(37.5mg,0.247mmol)的dmf(3.00ml)溶液中加入edci(59.1mg,0.308mmol)、hobt(41.6mg,0.308mmol)和diea(53.1mg,0.411mmol)。反应混合物室温下搅拌反应16小时后，将反应混合物在50℃下继续搅拌反应4小时。将反应混合物倒入ea(100ml)中，用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗。有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(4.05mg,两步收率4.52％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 486.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.00(d,j＝8.4hz,1h),9.49(d,j＝1.4hz,1h),8.76(s,1h),8.45(s,1h),8.34(d,j＝1.4hz,1h),8.23(d,j＝2.4hz,1h),8.18(s,1h),7.85(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),6.83(d,j＝8.5hz,1h),5.23
–
5.18(m,1h),3.90(s,3h),3.83(s,3h),1.57(d,j＝7.1hz,3h)。
[0573]
实施例40：(r)-3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺(化合物40)
[0574][0575]
3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺(50mg溶于约20ml乙醇，进样体积1.5ml)经waters sfc 150(室温,100bar,214nm)和250*25mm 10μm dr.maish reprosil chiral-om(超临界二氧化碳：乙醇，65:35,5.0min,70ml/min)分离得到化合物40(15.2mg，白色固体，ret.time＝3.609min,e.e.99.1％)和化合物41(20.7mg，白色固体，ret.time＝4.225min,e.e.98.2％)。手性分析方法:手性柱:od-h 250*4.6mm 5μm；流动
相:a:supercritical co2,b:etoh(0.1％dea)；梯度:a 60％,b 40％for 12min；流速:2.8ml/min；柱温:35℃。
[0576]
化合物40:lc-ms(esi)m/z 469.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.24(d,j＝1.2hz,1h),8.68(s,1h),8.38(s,1h),8.14(d,j＝2.3hz,1h),8.12(s,1h),7.88(d,j＝1.2hz,1h),7.74(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),6.78(d,j＝8.5hz,1h),6.61(d,j＝8.0hz,1h),6.37
–
6.33(m,1h),4.93
–
4.84(m,1h),4.63
–
4.56(m,2h),4.39
–
4.30(m,2h),3.88(s,3h),3.82(s,3h),1.42(d,j＝7.1hz,3h)。
[0577]
实施例41：(s)-3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺(化合物41)的合成
[0578][0579]
步骤1:(s)-3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2,5-二氢-1h-吡咯-1-甲酰胺的合成
[0580]
在室温下，向cdi(49.6mg,0.306mmol)的dmf(2.00ml)溶液中加入(s)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-胺(34.9mg,0.230mmol)和diea(39.5mg,0.306mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。向混合液中加入4-(2,5-二氢-1h-吡咯-3-基)-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(50.0mg,0.153mmol)。反应混合物在55℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(100ml)中。用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％碳酸氢铵的水)纯化得到目标化合物(27.0mg,收率37.7％,ret.time＝4.220min,e.e.96.2％,白色固体)。手性分析方法(与实施例40的合成中的方法一致:手性柱:od-h 250*4.6mm 5μm；流动相:a:supercritical co2,b:etoh(0.1％dea)；梯度:a 60％,b 40％for 12min；流速:2.8ml/min；柱温:35℃)。lc-ms(esi)m/z 469.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.24(d,j＝1.3hz,1h),8.68(s,1h),8.38(s,1h),8.14(d,j＝2.4hz,1h),8.12(s,1h),7.88(d,j＝1.2hz,1h),7.73(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),6.78(d,j＝8.5hz,1h),6.61(d,j＝8.0hz,1h),6.37
–
6.34(m,1h),4.93
–
4.84(m,1h),4.62
–
4.58(m,2h),4.37
–
4.33(m,2h),3.88(s,3h),3.82(s,3h),1.42(d,j＝7.1hz,3h)。
[0581]
实施例42：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-异丙氧基吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物42)的合成
[0582][0583]
步骤1:(6-异丙氧基吡啶-3-基)甲胺的合成
[0584]
在室温下，6-异丙氧基-3-氰基吡啶(300mg,1.85mmol)和雷尼镍(300mg)的氨水(28％，4.00ml)和乙醇(14.0ml)溶液在氢气环境下搅拌反应16小时。过滤，滤饼用乙醇(10.0ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(270mg,收率87.8％,绿色油状物)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.00(s,1h),7.63(s,1h),6.69(s,1h),5.27
–
5.14(m,1h),3.92
–
3.42(m,2h),2.34
–
1.43(m,2h),1.26(d,j＝6.1hz,6h)。
[0585]
步骤2:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-异丙氧基吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0586]
在室温下，向cdi(79.6mg,0.491mmol)的dmf(4.00ml)溶液中加入(6-异丙氧基吡啶-3-基)甲胺(61.2mg,0.368mmol)和diea(63.5mg,0.491mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时后，加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(80.0mg,0.246mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(100ml)中。用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％盐酸的水)纯化得到目标化合物粗品。再经超临界流体色谱(二氧化碳/甲醇)纯化得到目标化合物(9.18mg,收率7.76％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 482.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.29(t,j＝6.3hz,1h),9.26(d,j＝1.4hz,1h),8.79(s,1h),8.68(s,1h),8.39(s,1h),8.24(s,1h),8.14(d,j＝2.3hz,1h),8.13(s,1h),7.96(d,j＝1.4hz,1h),7.70(dd,j＝8.5,2.4hz,1h),6.73(d,j＝8.5hz,1h),5.26
–
5.19(m,1h),4.40(d,j＝6.1hz,2h),3.89(s,3h),1.27(d,j＝6.2hz,6h)。
[0587]
实施例43：3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡咯-1-甲酰胺(化合物43)的合成
[0588][0589]
步骤1:3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡咯的合成
[0590]
在0℃下，向3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-(三异丙基硅烷基)-1h-吡咯(350mg,1.00mmol)的四氢呋喃(6.00ml)溶液中加入四丁基氟化铵(1.0m的thf溶液,2.00ml,2.00mmol)。反应混合液在室温下搅拌反应2小时。加入饱和氯化铵溶液
(15.0ml)，用ea(50.0ml x 3)萃取。合并有机相用饱和食盐水(15.0ml x 3)洗，无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到目标化合物(190mg，收率98.3％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 194.1[m h]

。
[0591]
步骤2:n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡咯-1-甲酰胺的合成
[0592]
在室温下，向cdi(239mg,1.48mmol)的dmf(5.00ml)溶液中加入2-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(227mg,1.18mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时得反应液。向3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊环-2-基)-1h-吡咯(190mg,0.984mmol)的dmf(5.00ml)溶液中加入氢化钠(51.2mg,1.28mmol)，反应混合物在0℃下搅拌反应2小时后加入上述反应液。反应混合物继续在室温下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入饱和氯化铵(20.0ml)中，用ea(60.0ml
×
3)萃取。合并有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到目标化合物(220mg,粗品，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z412.2[m h]

。
[0593]
步骤3:3-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡咯-1-甲酰胺的合成
[0594]
向三氟甲基磺酸3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯(160mg,0.431mmol)和n-((6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡咯-1-甲酰胺(213mg,0.517mmol)的水(1.00ml)和1,4-二氧六环(10.0ml)溶液中加入碳酸钠(91.3mg,0.862mmol)和pd(dppf)cl2.dcm(18.6mg,0.022mmol)。氩气保护下，反应混合物在100℃下搅拌反应5小时。将反应混合物减压浓缩得到粗品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝3：1-1：2)得到目标化合物粗品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(9.02mg,收率3.79％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 507.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.20(d,j＝1.4hz,1h),9.06(t,j＝5.5hz,1h),8.70(dd,j＝4.6,0.6hz,1h),8.66(s,1h),8.48(d,j＝1.6hz,1h),8.40(s,1h),8.12(s,1h),8.02
–
7.98(m,1h),7.94
–
7.90(m,3h),7.83(d,j＝1.4hz,1h),7.60
–
7.57(m,1h),6.72
–
6.69(m,1h),4.56(d,j＝5.4hz,2h),3.88(s,3h)。
[0595]
实施例44：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物44)的合成
[0596][0597]
步骤1:6-(吡咯烷-1-基)-3-氰基吡啶的合成
[0598]
向6-氯-3-氰基吡啶(1.00g,7.22mmol)和四氢吡咯(616mg,8.66mmol)的dmf(10.0ml)溶液中加入碳酸钾(1.99g,14.4mmol)。氩气保护下，反应混合物在70℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(200ml)中。用饱和食盐水(20.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝10：1)得到目
标化合物(1.15g，收率92.0％，淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 174.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.45(d,j＝1.8hz,1h),7.79(dd,j＝9.0,2.3hz,1h),6.53(d,j＝8.9hz,1h),3.54
–
3.34(m,4h),2.01
–
1.88(m,4h)。
[0599]
步骤2:(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲胺的合成
[0600]
向6-(吡咯烷-1-基)-3-氰基吡啶(100mg,0.577mmol)的氨水(28％，1.50ml)和乙醇(10.0ml)溶液中加入雷尼镍(30.0mg)。室温下，反应混合物在氢气环境下搅拌反应16小时。过滤，滤饼用乙醇(10.0ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(90.0mg,收率88.0％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 178.2[m h]

。1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ7.94(d,j＝2.1hz,1h),7.53(dd,j＝8.7,2.4hz,1h),6.48(d,j＝8.7hz,1h),3.64(s,2h),3.43
–
3.39(m,4h),2.04
–
2.00(m,4h)。
[0601]
步骤3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0602]
在0℃下，向cdi(69.7mg,0.430mmol)的干燥dmf(3.00ml)溶液中加入(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲胺(57.1mg,0.322mmol)和diea(55.6mg,0.430mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时后加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(70.0mg,0.215mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(100ml)中，用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(20.4mg,收率17.7％,黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 493.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.26(d,j＝1.0hz,1h),9.16(t,j＝6.1hz,1h),8.78(s,1h),8.68(s,1h),8.24
–
8.19(m,2h),8.13(s,1h),8.07(d,j＝1.9hz,1h),7.96(d,j＝1.0hz,1h),7.53(dd,j＝8.6,2.2hz,1h),6.42(d,j＝8.7hz,1h),4.31(d,j＝6.1hz,2h),3.89(s,3h),3.37
–
3.33(m,4h),1.95
–
1.89(m,4h)。
[0603]
实施例45：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物45)的合成
[0604][0605]
步骤1:3-氰基-6-(三氟甲氧基)吡啶的合成
[0606]
在氩气环境下，2-羟基-5-氰基吡啶(500mg,4.16mmol)和1-三氟甲基-1,2-苯碘酰-3(h)-酮(658mg，2.08mmol)的硝基甲烷(6.00ml)溶液在100℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入dcm(25.0ml)中。过滤，滤饼用dcm(10.0ml)洗。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝20：1)得到目标化合物(60.0mg，收率7.66％，类白色固体)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.95
–
8.89(m,1h),8.55(dd,j＝8.6,2.3hz,1h),7.57
–
7.50(m,1h)。
19
f nmr(376mhz,dmso-d6)δ-55.37(s)。
[0607]
步骤2:(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)甲胺的合成
[0608]
在室温下，3-氰基-6-(三氟甲氧基)吡啶(60.0mg,0.319mmol)和雷尼镍(30.0mg)的氨水(28％,1.00ml)和乙醇(5.00ml)的混合溶液在氢气环境下搅拌反应16小时。将反应液过滤，滤饼用乙醇(5.00ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(45.0mg,收率73.4％,绿色油状物)。lc-ms(esi)m/z 193.3[m h]

。
19
f nmr(376mhz,dmso-d6)δ-55.07(s)。
[0609]
步骤3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0610]
在室温下，向cdi(44.8mg,0.276mmol)的干燥dmf(2.00ml)溶液中加入(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)甲胺(42.5mg,0.221mmol)和diea(47.6mg,0.368mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时后，加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(60.0mg,0.184mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(120ml)中。用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。减压浓缩。所得残留经制备(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(5.08mg,收率5.44％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 508.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.42(t,j＝6.2hz,1h),9.27(d,j＝1.3hz,1h),8.80(s,1h),8.68(s,1h),8.39
–
8.37(m,2h),8.26(s,1h),8.13(s,1h),8.03(dd,j＝8.4,2.4hz,1h),7.97(d,j＝1.3hz,1h),7.31(d,j＝8.4hz,1h),4.54(d,j＝6.2hz,2h),3.89(s,3h)。
[0611]
实施例46：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-((四氢-2h-吡喃-4-基)氧基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物46)的合成
[0612][0613]
步骤1:6-((四氢-2h-吡喃-4-基)氧基)-3-氰基吡啶的合成
[0614]
氩气保护，在冰水浴下，向氢化钠(426mg,10.6mmol)的干燥dmf(10.0ml)溶液中加入四氢-2h-吡喃-4-醇(1.00g,9.83mmol)，并在冰浴下搅拌反应10分钟后加入6-氟-3-氰基吡啶(1.00g,8.19mmol)的干燥dmf(5.00ml)溶液。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(30.0ml)。用ea(100ml
×
2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(25.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝10：1)得到目标化合物(1.32g，收率78.9％，白色固体)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.71
–
8.65(m,1h),8.15(dd,j＝8.7,2.4hz,1h),7.03
–
6.96(m,1h),5.34
–
5.19(m,1h),3.93
–
3.79(m,2h),3.57
–
3.42(m,2h),2.11
–
1.90(m,2h),1.74
–
1.57(m,2h)。
[0615]
步骤2:(6-((四氢-2h-吡喃-4-基)氧基)吡啶-3-基)甲胺的合成
[0616]
向6-((四氢-2h-吡喃-4-基)氧基)-3-氰基吡啶(100mg,0.490mmol)的氨水(28％，1.50ml)和乙醇(10.0ml)混合溶液中加入雷尼镍(30.0mg)。室温下，反应混合物在氢气环境下搅拌反应16小时。过滤，滤饼用乙醇(10.0ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(90.0mg,收率88.3％,无色油状物)。1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ8.05(d,j＝2.1hz,1h),7.67(dd,j＝8.5,2.4hz,1h),6.75(d,j＝8.5hz,1h),5.19
–
5.11(m,1h),3.98
–
3.92(m,2h),3.72(s,2h),
3.63
–
3.56(m,2h),2.08
–
2.00(m,2h),1.78
–
1.67(m,2h)。
[0617]
步骤3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-((四氢-2h-吡喃-4-基)氧基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0618]
在0℃下，向cdi(69.7mg,0.430mmol)的干燥dmf(3.00ml)溶液中加入(6-((四氢-2h-吡喃-4-基)氧基)吡啶-3-基)甲胺(67.1mg,0.322mmol)和diea(55.6mg,0.430mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时后，加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(70.0mg,0.215mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(100ml)中。用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(24.5mg,收率21.8％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 524.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.30(t,j＝6.2hz,1h),9.26(d,j＝1.1hz,1h),8.79(s,1h),8.68(s,1h),8.39(s,1h),8.24(s,1h),8.14(d,j＝2.1hz,1h),8.13(s,1h),7.96(d,j＝1.1hz,1h),7.73(dd,j＝8.5,2.3hz,1h),6.79(d,j＝8.5hz,1h),5.20
–
5.13(m,1h),4.41(d,j＝6.1hz,2h),3.89(s,3h),3.88
–
3.82(m,2h),3.52
–
3.45(m,2h),2.02
–
1.95(m,2h),1.66
–
1.56(m,2h)。
[0619]
实施例47：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-吗啉代吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物47)的合成
[0620][0621]
步骤1:6-吗啉代-3-氰基吡啶的合成
[0622]
室温下，将diea(1.19ml,7.22mmol)和吗啉(0.692ml,7.94mmol)分别滴加到6-氯-3-氰基吡啶(1.00g,7.22mmol)的水(2.50ml)和dmf(8.00ml)溶液中。氩气保护下，反应混合物在90℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(200ml)中。用饱和食盐水(25.0ml
×
5)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到目标化合物(1.30g，收率95.2％，黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 190.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.52
–
8.49(m,1h),7.88(dd,j＝9.1,2.4hz,1h),6.95
–
6.90(m,1h),3.70
–
3.66(m,4h),3.64
–
3.60(m,4h)。
[0623]
步骤2:(6-吗啉代吡啶-3-基)甲胺的合成
[0624]
向6-吗啉代-3-氰基吡啶(100mg,0.528mmol)的氨水(28％，1.50ml)和乙醇(10.0ml)溶液中加入雷尼镍(30.0mg)。室温下，反应混合物在氢气环境下搅拌反应16小时。过滤，滤饼用乙醇(10.0ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(90.0mg,收率88.1％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 177.1[m-16]

。1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ8.07(d,j＝2.2hz,1h),7.60(dd,j＝8.7,2.5hz,1h),6.81(d,j＝8.7hz,1h),3.80
–
3.76(m,4h),3.68(s,2h),3.45
–
3.41(m,4h)。
[0625]
步骤3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-吗啉代吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0626]
在0℃下，向cdi(69.7mg,0.430mmol)的干燥dmf(3.00ml)溶液中加入(6-吗啉代吡啶-3-基)甲胺(62.3mg,0.322mmol)和diea(55.6mg,0.430mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时后加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(70.0mg,0.215mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(100ml)中。用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(14.7mg,收率13.5％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 509.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.26(d,j＝1.4hz,1h),9.22(t,j＝6.2hz,1h),8.78(s,1h),8.68(s,1h),8.39(s,1h),8.23(s,1h),8.15(d,j＝2.2hz,1h),8.13(s,1h),7.96(d,j＝1.4hz,1h),7.60(dd,j＝8.7,2.4hz,1h),6.83(d,j＝8.8hz,1h),4.35(d,j＝6.1hz,2h),3.89(s,3h),3.70
–
3.67(m,4h),3.43
–
3.39(m,4h)。
[0627]
实施例48：4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-((四氢呋喃-3-基)氧基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物48)的合成
[0628][0629]
步骤1:6-((四氢呋喃-3-基)氧基)-3-氰基吡啶的合成
[0630]
氩气保护，在冰水浴下，向氢化钠(426mg,10.6mmol)的干燥dmf(10.0ml)溶液中加入四氢呋喃-3-醇(866mg,9.83mmol)，并在冰浴下搅拌反应10分钟后加入6-氟-3-氰基吡啶(1.00g,8.19mmol)的干燥dmf(5.00ml)溶液。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(30.0ml)，用ea(100ml x 2)萃取。合并有机相用饱和食盐水(25.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝5：1)得到目标化合物(1.30g，收率83.5％，白色固体)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.71
–
8.68(m,1h),8.16(dd,j＝8.7,2.2hz,1h),7.01(d,j＝8.7hz,1h),5.59
–
5.55(m,1h),3.93
–
3.82(m,2h),3.81
–
3.73(m,2h),2.32
–
2.20(m,1h),2.06
–
1.98(m,1h)。
[0631]
步骤2:(6-((四氢呋喃-3-基)氧基)吡啶-3-基)甲胺的合成
[0632]
向6-((四氢呋喃-3-基)氧基)-3-氰基吡啶(100mg,0.526mmol)的氨水(28％，1.50ml)和乙醇(10.0ml)溶液中加入雷尼镍(30.0mg)。室温下，反应混合物在氢气环境下搅拌反应16小时。过滤，滤饼用乙醇(10.0ml)洗。滤液减压浓缩得到目标化合物(95.0mg,收率93.0％,无色油状物)。1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ8.06(d,j＝2.4hz,1h),7.68(dd,j＝8.5,2.5hz,1h),6.75(d,j＝8.5hz,1h),5.52
–
5.46(m,1h),4.02
–
3.91(m,2h),3.90
–
3.84(m,2h),3.72(s,2h),2.31
–
2.21(m,1h),2.14
–
2.06(m,1h)。
[0633]
步骤3:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-((6-((四氢呋喃-3-基)氧基)吡啶-3-基)甲基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0634]
在0℃下，向cdi(69.7mg,0.430mmol)的干燥dmf(3.00ml)溶液中加入(6-((四氢呋喃-3-基)氧基)吡啶-3-基)甲胺(62.6mg,0.322mmol)和diea(55.6mg,0.430mmol)。反应混
合物在室温下搅拌反应2小时后，加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(70.0mg,0.215mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后倒入ea(100ml)中。用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经制备hplc(乙腈/含0.05％甲酸的水)纯化得到目标化合物(19.8mg,收率18.0％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 510.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.31(t,j＝6.1hz,1h),9.26(d,j＝1.2hz,1h),8.79(s,1h),8.68(s,1h),8.39(s,1h),8.24(s,1h),8.15(d,j＝2.0hz,1h),8.13(s,1h),7.96(d,j＝1.3hz,1h),7.74(dd,j＝8.5,2.4hz,1h),6.81(d,j＝8.5hz,1h),5.51
–
5.46(m,1h),4.42(d,j＝6.1hz,2h),3.93
–
3.90(m,1h),3.89(s,3h),3.86
–
3.80(m,1h),3.78
–
3.72(m,2h),2.28
–
2.17(m,1h),2.02
–
1.93(m,1h)。
[0635]
实施例49：(s)-4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物49)的合成
[0636][0637]
步骤1:2-异丙氧基-5-氰基吡啶的合成
[0638]
在0℃下，向叔丁醇钾(12.1g,108mmol)的无水四氢呋喃(300ml)溶液中加入异丙醇(8.28ml,108mmol)。反应混合物在0℃下搅拌反应5分钟。向反应混合物中加入6-氯烟酸腈(10.0g,72.2mmol)后继续在室温下搅拌反应2小时。反应混合物用饱和氯化铵(120ml)淬灭后用ea(200ml
×
3)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝100：1-20:1)得到目标化合物(10.0g，收率85.4％，白色固体)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.67(d,j＝2.0hz,1h),8.12(dd,j＝8.7,2.4hz,1h),6.93(d,j＝8.7hz,1h),5.36
–
5.27(m,1h),1.31(d,j＝6.2hz,6h)。
[0639]
步骤2:1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙-1-酮的合成
[0640]
在0℃和氩气保护下，向2-异丙氧基-5-氰基吡啶(10.0g,61.7mmol)的无水四氢呋喃(180ml)溶液中滴加甲基溴化镁溶液(3.0m in thf，61.7ml，185mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。在0℃下反应液用稀盐酸(1.0m，100ml)淬灭后用ea(200ml
×
3)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(pe：ea＝100：1-20：1)得到目标化合物(5.00g，收率49.8％，黄色油状物)。lc-ms(esi)m/z 180.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.81(d,j＝2.4hz,1h),8.14(dd,j＝8.7,2.4hz,1h),6.84(d,j＝8.7hz,1h),5.40
–
5.29(m,1h),2.54(s,3h),1.32(d,j＝6.2hz,6h)。
[0641]
步骤3:(r,e)-n-(1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)亚乙基)-2-甲基丙基-2-亚磺酰胺的合成
[0642]
向1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙-1-酮(5.00g,27.9mmol)和(r)-2-甲基丙基-2-亚磺酰胺(3.72g,30.7mmol)的无水四氢呋喃(80.0ml)溶液中加入钛酸四乙酯(11.7ml,
55％)纯化得到目标化合物(410mg,收率29.9％,ret.time＝5.94min,e.e.96.7％,白色固体)。手性分析方法:手性柱:daicelad；流动相:a:supercritical co2，b:meoh(0.1％dea)；梯度:a 60％,b 40％for 8min；流速:2.0ml/min；柱温:35℃。lc-ms(esi)m/z 496.4[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.26(s,1h),9.12(d,j＝8.4hz,1h),8.77(s,1h),8.68(s,1h),8.38(s,1h),8.25(s,1h),8.19(d,j＝2.4hz,1h),8.12(s,1h),7.95(s,1h),7.82(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),6.73(d,j＝8.6hz,1h),5.26
–
5.18(m,1h),5.09
–
5.02(m,1h),3.89(s,3h),1.58(d,j＝7.1hz,3h),1.27(d,j＝6.2hz,6h)。
[0651]
实施例50：(r)-4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物50)的合成
[0652][0653]
步骤1:1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙-1-酮的合成
[0654]
在0℃和氩气保护下，向2-异丙氧基-5-氰基吡啶(730mg,4.50mmol)的无水四氢呋喃(20.0ml)溶液中滴加甲基溴化镁溶液(3.0m in thf,4.50ml,13.5mmol)。反应混合物在0℃下搅拌反应2小时后在室温下继续搅拌反应16小时。反应液用1.0m盐酸溶液淬灭，用饱和碳酸氢钠溶液调节ph～9。用ea(80.0ml
×
2)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(硅胶，pe：ea＝100：1-10:1)得到目标化合物(550mg，收率68.2％，黄色油状物)。lc-ms(esi)m/z 180.3[m h]

。
[0655]
步骤2:1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙-1-酮肟的合成
[0656]
向1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙-1-酮(550mg,3.07mmol)的乙醇(6.00ml)溶液中加入盐酸羟胺(427mg,6.14mmol)和乙酸钠(503mg,6.14mmol)的水(3.00ml)溶液。反应混合物在90℃下搅拌反应2小时。将反应混合物冷却后减压浓缩。加入ea(100ml)。分出有机相用饱和食盐水(15.0ml
×
2)洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到目标化合物(580mg，收率97.3％，淡黄色固体)。lc-ms(esi)m/z 195.2[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.17(s,3h),8.40
–
8.35(m,1h),7.94(dd,j＝8.7,2.5hz,1h),6.78
–
6.71(m,1h),5.32
–
5.20(m,1h),2.13(s,3h),1.29(d,j＝6.2hz,6h)。
[0657]
步骤3:1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙-1-胺的合成
[0658]
在-10℃下，向1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙-1-酮肟(580mg,2.99mmol)的甲醇(15.0ml)溶液中加入六水合氯化镍(1.42g,5.97mmol)，然后缓慢加入硼氢化钠(904mg,23.9mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。向反应液中加入丙酮(10.0ml)淬灭反应。减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(dcm：meoh＝20:1-7:1)得到目标化合物(265mg，收率49.2％，黑色油状物)。1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ8.06(d,j＝2.5hz,1h),7.70(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),6.71(d,j＝8.6hz,1h),5.21
–
5.14(m,1h),4.11
–
4.02(m,1h),1.40(d,j＝6.7hz,3h),1.31(d,j＝6.2hz,6h)。
[0659]
步骤4:4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0660]
在室温下，向cdi(318mg,1.96mmol)的dmf(12.0ml)溶液中加入1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙-1-胺(266mg,1.47mmol)和diea(254mg,1.96mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时后，加入6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(320mg,0.984mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后用ea(200ml)稀释，用饱和食盐水(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经柱层析分离纯化(dcm：meoh＝100:1-30:1)得粗品。粗品经液相制备(乙腈/水含0.05％甲酸)纯化得到目标化合物(45.0mg,收率9.24％,类白色固体)。lc-ms(esi)m/z 496.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.26(d,j＝1.3hz,1h),9.12(d,j＝8.4hz,1h),8.78
–
8.76(m,1h),8.68(s,1h),8.38(s,1h),8.26
–
8.24(m,1h),8.19(d,j＝2.3hz,1h),8.12(s,1h),7.96(d,j＝1.3hz,1h),7.82(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),6.73(d,j＝8.5hz,1h),5.26
–
5.18(m,1h),5.10
–
5.01(m,1h),3.89(s,3h),1.58(d,j＝7.0hz,3h),1.27(d,j＝6.2hz,6h)。
[0661]
步骤5:(r)-4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺的合成
[0662]
消旋体4-(3-氰基-6-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(45mg溶于约16ml甲醇，进样体积8.0ml)经waters sfc150(室温,100bar,214nm)和a 250*25mm 10μm dr.maish reprosil chiral-om(超临界二氧化碳：甲醇，45:55,5.6min,100ml/min)分离得到化合物50(23.68mg，白色固体，ret.time＝2.95min,e.e.100％)和化合物49(18.47mg，白色固体，ret.time＝5.94min,e.e.100％)。通过上面实施例49的合成中所用的手性分析方法确证了化合物的构型和纯度。lc-ms(esi)m/z496.1[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.26(d,j＝1.2hz,1h),9.12(d,j＝8.5hz,1h),8.80
–
8.75(m,1h),8.68(s,1h),8.38(s,1h),8.27
–
8.22(m,1h),8.19(d,j＝2.3hz,1h),8.12(s,1h),7.96(d,j＝1.3hz,1h),7.82(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),6.73(d,j＝8.6hz,1h),5.29
–
5.16(m,1h),5.15
–
4.96(m,1h),3.89(s,3h),1.58(d,j＝7.1hz,3h),1.27(d,j＝6.2hz,6h)。
[0663]
实施例51：(s)-4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-n-(1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基)-1h-吡唑-1-甲酰胺(化合物51)的合成
[0664][0665]
在室温下，向6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(1h-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(120mg,0.360mmol)和diea(0.119ml,0.719mmol)的dmf(4.00ml)溶液中加入(s)-(1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基)氨基甲酸苯酯(130mg,0.431mmol)。反应混合物在70℃下搅拌反应16小时。将反应混合物冷却至室温后用ea(80.0ml)稀释。再用饱和食盐水
(15.0ml
×
3)洗、无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得到粗产品。经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷：甲醇＝100：1-30：1)得到粗品。粗品经反相制备(乙腈/水含0.01％甲酸)纯化得到目标化合物(85.1mg,收率47.0％,白色固体)。lc-ms(esi)m/z 504.3[m h]

。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.10(d,j＝8.4hz,1h),8.73(s,1h),8.70(d,j＝2.0hz,1h),8.60(s,1h),8.23
–
8.21(m,1h),8.18(d,j＝2.4hz,1h),7.81(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),7.50(d,j＝2.0hz,1h),6.73(d,j＝8.6hz,1h),5.25
–
5.18(m,1h),5.08
–
4.99(m,1h),4.70(s,1h),3.87(s,2h),1.57(d,j＝7.1hz,3h),1.27(d,j＝6.2hz,6h),1.22(s,6h)。
[0666]
活性实施例
[0667]
如无特别说明，以下活性实施例中所用的实验材料、试剂、操作和方法均可从市售渠道获得或基于现有技术容易地获知或制备。
[0668]
活性实施例1：激酶ret抑制测定
[0669]
采用类似于文献(vivek subbiah,j.f.g.,precision targeted therapy with blu-667for ret-driven cancers.cancer discov,2018.8(7):836-849)所述的方法进行激酶ret抑制测定。利用caliper mobility shift assay方法检测化合物对激酶ret的抑制效果，化合物测试终浓度为从1000nm起始，3倍系列稀释，共计10个浓度，复孔检测。
[0670]
将待测化合物溶解在100％dmso(sigma,d8418-1l,shbg3288v)中，配制成10mm储存液，于氮气柜中避光保存。配制1
×
kinase buffer，同时如下配制化合物浓度梯度：待测化合物起始测试浓度为1000nm，在384孔板(corning,3573,12619003)中用dmso 3倍系列稀释，共10个浓度，复孔测试，终浓度分别为1000、333、111、37、12.3、4.12、1.37、0.457、0.152、0.0508nm，然后用echo550(labcyte，型号：echo 550)转移250nl到384反应板中备用，阴性对照孔和阳性对照孔中分别加250nl 100％dmso。用1
×
kinase buffer配制2.5倍终浓度(终浓度为1nm)的ret(carna,货号08-159,批号13cbs-0134e)的激酶溶液。在化合物孔和阳性对照孔分别加10μl 2.5倍终浓度的激酶溶液；在阴性对照孔中加10μl 1
×
kinase buffer。
[0671]
将反应板1000rpm离心(eppendorf，型号：5430)30秒，将反应板振荡混匀后室温孵育10分钟。用1
×
kinase buffer配制25倍终浓度(终浓度为16μm)的atp和15倍终浓度(终浓度为3μm)的kinase substrate 2(gl,货号112394，批号p171207-mj112394)的混合溶液，并加入15μl该混合溶液至各孔中，开始反应。将384孔板1000rpm离心30秒，振荡混匀后室温孵育60分钟。加入30μl含edta的终止检测液停止激酶反应，1000rpm离心30秒，振荡混匀。用酶标仪(perkin elmer，型号：caliper ez readerⅱ)读取转化率。
[0672]
采用以下公式进行计算：
[0673]
％抑制＝(转化％_max-转化％_样品)/(转化％_样品-转化％_min)*100
[0674]
其中：“转化％_样品”是样品的转化率读数；“转化％_min”是阴性对照孔均值，代表没有酶活的孔的转化率读数；“转化％_max”是阳性对照孔均值，代表没有化合物抑制的孔的转化率读数。
[0675]
以浓度的log值作为x轴，百分比抑制率为y轴，采用分析软件graphpad prism 5的log(inhibitor)vs.response-variable slope拟合量效曲线，
[0676]
计算公式：y＝bottom (top-bottom)/(1 10^((logic50-x)*hillslope))
[0677]
从而得出各个化合物对酶活性的ic
50
值。
[0678]
表1 ret激酶实验结果
[0679]
[0680][0681]
活性实施例2：细胞增殖试验
[0682]
采用celltiter-glo
tm
活细胞检测试剂盒，测试了本发明化合物对细胞增殖的抑制作用。该试剂盒采用萤光素酶作检测物，发光过程中萤光素酶需要atp的参与，向细胞培养基中加入celltiter-glo
tm
试剂，测量发光值，光信号和体系中atp量成正比，而atp又和活细胞数正相关，由此确定细胞的增殖活性。
[0683]
细胞培养和接种：收获处于对数生长期的细胞(ba/f3 kif5b-ret,得自康源博创，rpmi1640(hyclone,sh30027.01) 10％fbs(gbico,10099-141)中稳定转染)，并采用血小板计数器进行细胞计数。用台盼蓝排斥法检测细胞活力，确保细胞活力在90％以上。分别添加90μl细胞悬液至96孔透明平底黑壁板(thermo,165305)中，调整细胞浓度到3000/孔/90ul。将96孔板中的细胞置于37℃、5％co2、95％湿度条件下培养过夜(thermo，model 3100series)。
[0684]
先用dmso作为溶剂配制10000μm的待测化合物母液，然后用pbs稀释100倍，配制成10倍终浓度的溶液，最高浓度为100μm，在接种有细胞的96孔板中每孔加入10μl待测化合物溶液，即又稀释10倍，浓度达到最终终浓度10μm。将待测化合物终浓度从10μm开始，3倍系列
稀释，共9个浓度，每个3个复孔。将已加入待测化合物和细胞的96孔板置于37℃、5％co2、95％湿度条件下继续培养72小时，之后进行celltiter-glo分析。
[0685]
融化celltiter-glo试剂(luminescent cell viability assay,promega,g7572)并平衡细胞板至室温30分钟。每孔加入等体积的celltiter-glo溶液，在定轨摇床上振动5分钟使细胞裂解。将细胞板放置于室温20分钟以稳定冷光信号，用spectramax多标记微孔板检测仪(md,m3)读取冷光值。
[0686]
使用graphpad prism 7.0软件分析数据，利用非线性s曲线回归来拟合数据得出剂量-效应曲线，并由此计算ic
50
值。
[0687]
细胞存活率(％)＝(lum
待测药-lum
培养液对照
)/(lum
细胞对照-lum
培养液对照
)
×
100％
[0688]
表2细胞增殖实验结果
[0689]
[0690][0691]
活性实施例3：人和小鼠肝微粒体代谢稳定性实验
[0692]
根据本领域常规的体外代谢稳定性研究的标准方法，例如(kerns,edward h.and di li(2008).drug-like properties:concepts,structure design and methods:from adme to toxicity optimization.san diego:academic press；di,li等人，optimization of a higher throughput microsomal stability screening assay for profiling drug discovery candidates,j.biomol.screen.2003,8(4),453.)中所述的方法，类似地如下进行本发明化合物的肝微粒体代谢稳定性试验。
[0693][0694]
将肝微粒体(蛋白浓度为0.56mg/ml)加入1μm化合物工作液(由10mm dmso储备液用100％乙腈稀释到100μm，有机相含量：99％acn，1％dmso)，37℃预孵育10min后，加入辅助因子(nadph)(由氯化镁溶液配制)启动反应。孵育适当时间(如5、10、20、30和60分钟)后取样，加入适当终止液(含有200ng/ml甲苯磺丁脲和200ng/ml拉贝洛尔的冰乙腈(即4℃的乙
腈))，终止反应。
[0695]
样品处理(n＝1)：各加合适样品，涡旋后高速离心，取上清液，采用hplc-ms/ms对底物进行检测。把0min时间点峰面积作为100％。其他时间点的峰面积转换为百分剩余量，各时间点的百分剩余量的自然对数对孵育时间作图，求算出斜率(-k)，然后按固有清除率(clint)＝(k*孵育液体积)/肝微粒体质量，计算出clint(ul/min/mg)及化合物半衰期(t1/2，min)。结果见表3。
[0696]
表3.人和小鼠肝微粒体代谢稳定性实验结果
[0697][0698]
活性实施例4：本发明化合物在小鼠中的药代动力学(pk)测定
[0699]
每个化合物的pk测定方法如下：6只cd-1小鼠(来源上海灵畅生物科技有限公司)分为两组，每组3只。其中一组通过静脉(iv)给药，剂量为1mg/kg，溶媒为5％dmso/95％(20％captisol)；一组通过口服(po)灌胃给药，剂量为5mg/kg，溶媒为1％hpmc。每一组在给药后0、0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、24h分别通过小腿隐静脉采血。将约40μl血液收集到含edta-k2的抗凝管中。在收集完成后迅速将采血管倒置至少5次，以确保混合均匀，然后放置在冰上。采集到的各时间点血液在4℃，8000rpm离心5分钟以获得血浆。另取1.5ml离心管标记好化合物名称，动物编号，时间点，将血浆转移至该管中。血浆保存在-80℃直至分析。
[0700]
采用uplc-ms/ms方法测定血浆中化合物浓度，用phoenix winnolin 6.4药代动力学软件对所得数据进行药代动力学参数计算。
[0701]
具体实验结果如下，结果表明化合物药代吸收较好，具有药代动力学优势。
[0702]
表4.实施例化合物体内pk结果
[0703][0704]
表5.实施例化合物体内pk结果
[0705][0706]
本领域技术人员将了解，上文描述本质上为示例性及说明性的，且欲说明本发明及其优选实施方案。通过常规实验，技术人员将了解可作出明显修正及变化而不悖离本发
明的精神。在随附申请专利范围内的所有此类修正欲包括于其中。因此，本发明意欲并非由上述描述而是由以下权利要求范围及其等效物定义。
[0707]
本说明书中所引用的所有公开出版物以引用方式并入本文中。