稠合四环类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用与流程

1.本公开属于医药领域，涉及稠合四环类衍生物、其制备方法及含有该衍生物的药物组合物以及其作为治疗剂，特别是作为kras抑制剂的用途。


背景技术：

2.ras(rat sarcoma viral oncogene homolog)家族属于小gtp酶超家族，广泛表达于各类真核生物。人体中有三种ras基因(hras、kras和nars)，可表达为四种高度相关的ras小gtp酶(hras、kras4a、kars4b和nras)。其作为gdp-gtp调控的二元开关发生作用。通常情况下它们有两种表现形式：非激活状态下的gdp(二磷酸鸟苷)结合形式和激活状态下的gtp(三磷酸鸟苷)结合形式。ras蛋白通过在两种活性状态间切换，来调控包括raf-mek-erk、pi3k/akt/mtor在内的多个下游通路，从而影响细胞的生长、增殖和分化(nat rev cancer,2007,7,295-308)。ras基因在胰腺癌、结直肠癌、非小细胞肺癌等多种肿瘤中突变率较高，激活的突变ras蛋白会促进异常信号转导，从而导致癌症发生和发展，以及对靶向药产生耐药性。其中kras突变是人类致癌基因中突变率最高的基因，占所有肿瘤的20～30％。
3.对于kras蛋白的突变形式和信号通路研究，近年来分子生物学已取得重大进展，然而开发相关的靶向药物却依然挑战重重。在化学药开发方面，由于kras和gtp的亲和力非常高，达到60pm，而且细胞内gtp浓度在mm水平，因此这类直接竞争的分子对化合物亲和力要求极高，目前为止还没有成功的案例。在生物药开发方面，抗体药穿透细胞膜靶向kras蛋白，药物递送效率比较低下。所以不少研究者曾试图另辟蹊径，希望抑制kras下游信号通路中raf、mek和erk等激酶的活性，达到抑制kras通路的目的。这类化合物有一定疗效，但是由于下游抑制剂不能完全阻断kras信号，而且靶点相关毒副作用很大，导致这些化合物在kras突变肿瘤上药效欠佳。因此，开发新作用机理的kras抑制剂有非常大的临床应用价值。
4.kras突变以点突变为主，包括12、13和61位氨基酸的突变。其中12位的甘氨酸突变成半胱氨酸(g12c)最为常见，该突变在肺癌、尤其是非小细胞肺癌中比例较大(14％)，此外还在一些结直肠癌(4％)、胰腺癌(2％)患者体内表达。在美国癌症人群中，该基因突变发生率甚至大于alk、ret、trk基因突变总和。
5.面对kras蛋白成药性的难点，加州大学旧金山分校kevan shokat教授率先验证了某些特殊的化合物可通过共价键绑定kras g12c突变蛋白。通过进一步研究发现，这些共价化合物可与kras突变蛋白12位的半胱氨酸结合，并占据ii号分子开关区域(switch-ii regions)一个疏水别构调节口袋，被绑定的kras g12c突变体会被不可逆地锁定在失活状态，从而阻断依赖该蛋白的信号通路和癌细胞生存能力(nature 2013，503,548
–
551)。kras g12c小分子抑制剂ars-1620在多种kras g12c突变肿瘤模型上都能有效抑制肿瘤生长，甚至使肿瘤完全消退。由于kras g12c是肿瘤细胞中的突变蛋白，而野生型kras并没有这个突变位点，因此提供了一个完美的肿瘤选择性靶标(cell,2018,572,578-589)。以araxas、amgen和mirati为代表的公司发表了若干kras g12c抑制剂的专利(wo2014152588、wo2016164675、wo2017087528、wo2017201161、wo2018119183等)。目前还没有kras g12c的
抑制剂药物被批准上市，进展最快的amgen和mirati的小分子kras g12c抑制剂分别在2018年9月和12月进入临床一期试验，因此相关病患人群中存在重大未满足的医学需求。


技术实现要素：

6.本公开的目的在于提供一种通式(i)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0007][0008]
其中：
[0009]
g为n或c；
[0010]r1a
和r
1b
相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0011]
r2相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、氰基、氨基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、烷氧基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、氰基、氨基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0012]
r3相同或不同，且各自独立地选自氢原子、烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0013]
r4为卤素；
[0014]
s为0、1、2、3、4或5；
[0015]
t为0、1、2、3或4。
[0016]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其为通式(ia)或(ib)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐：
[0017][0018]
其中g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、s和t如通式(i)中所定义。
[0019]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)或(ib)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其为通式(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)或(ib-b)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐：
[0020][0021][0022]
其中g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、s和t如通式(i)、(ia)或(ib)中所定义。
[0023]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)或(ib)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其为通式(ia-1)或(ia-2)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐：
[0024][0025]
其中
[0026]
r3相同或不同，且各自独立地选自烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0027]
g、r
1a
、r
1b
、r2、r4和s如通式(i)、(ia)或(ib)中所定义。
[0028]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)或(ia-2)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其为通式(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)或(ia-2b)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐：
[0029][0030]
其中
[0031]
r3相同或不同，且各自独立地选自烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0032]
g、r
1a
、r
1b
、r2、r4和s如通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)或(ia-2)中所定义。
[0033]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)或(ib)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其为通式(ia-3)或(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐：
[0034][0035]
其中
[0036]
r3相同或不同，且各自独立地选自烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0037]
g、r
1a
、r
1b
、r2、r4和s如通式(i)、(ia)或(ib)中所定义。
[0038]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)或(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中g为n。
[0039]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)或(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r
1a
和r
1b
相同或不同，且各自独立地为氢原子或卤素；优选r
1a
为氢原子或卤素，r
1b
为卤素。
[0040]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)或(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r2相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、氰基、氨基、羟基、羟烷基和环烷基；优选地，r2相同或不同，且各自独立地选自氢原子、烷基和环烷基。
[0041]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)或(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r2相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、氰基、氨基、羟基、c
1-6
羟烷基和3-6元环烷基；优选地，r2相同或不同，且各自独立地选自氢原子、c
1-6
烷基和3-6元环烷基。
[0042]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)或(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r2相同或不同，且各自独立地为c
1-6
烷基，优选为甲基或异丙基。
[0043]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)或(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r3相同或不同，且各自独立地为c
1-6
烷基，优选为甲基。
[0044]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)或(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r4为氟或氯,优选为氟。
[0045]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)或(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中s为1或2，优选为2。
[0046]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)或(ib-b)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中t为0或1。
[0047]
本公开的另一方面涉及一种通式(ii)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0048][0049]
其中：
[0050]
g为n或ch；
[0051]r1a
和r
1b
相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、羟基和羟烷基；
[0052]r2a
和r
2b
相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、氰基、氨基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0053]
r3选自烷基、卤代烷基和羟烷基；且
[0054]
r4为氢原子或卤素。
[0055]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(ii)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其为通式(iia)或(iib)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐：
[0056][0057]
其中g、r
1a
、r
1b
、r
2a
、r
2b
、r3和r4如通式(ii)中所定义。
[0058]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(ii)或(iia)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其为通式(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)或(iia-d)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐：
[0059][0060]
其中g、r
1a
、r
1b
、r
2a
、r
2b
、r3和r4如通式(ii)或(iia)中所定义。
[0061]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)或(iia-d)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中g为n。
[0062]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)或(iia-d)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r
1a
和r
1b
相同或不同，且各自独立地为羟基或卤素；优选r
1a
为卤素，且r
1b
为羟基。
[0063]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)或(iia-d)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r
2a
和r
2b
相同或不同，且
各自独立地为c
1-6
烷基，优选为甲基或异丙基，更优选为r
2a
为异丙基，且r
2b
为甲基。
[0064]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)或(iia-d)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r3为c
1-6
烷基，优选为甲基。
[0065]
在本公开一些优选的实施方案中，所述的通式(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)或(iia-d)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中r4为卤素，优选为氟或氯，更优选为氟。
[0066]
本公开的典型化合物包括但不限于：如下表1结构:
[0067]
表1化合物结构及命名
[0068]
[0069]
[0070]
[0071]
[0072]
[0073]
[0074]
[0075]
[0076]
[0077]
[0078]
[0079]
[0080][0081]
本公开的另一方面涉及一种通式(i-a)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐：
[0082][0083]
其中m为无机酸或有机酸；
[0084]
n为0、1、2或3，优选为0或1，更优选为0；
[0085]
g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、s和t如通式(i)中所定义。
[0086]
本公开的另一方面涉及一种通式(i-a)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐，其中所述的m选自氯化氢、氯化氢的1,4-二氧六环溶液、氯化铵、三氟乙酸、甲酸、乙酸、盐酸、硫酸、甲磺
酸、硝酸、磷酸、对苯甲磺酸和tmsotf，优选为盐酸或三氟乙酸。
[0087]
本公开的另一方面涉及一种通式(ia-a)或(ib-a )所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐：
[0088][0089]
其中g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、m、n、s和t如通式(i-a )中所定义。
[0090]
本公开的另一方面涉及一种通式(ia-1-a )或(ia-2-a )所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐：
[0091][0092]
其中
[0093]
r3相同或不同，且各自独立地选自烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0094]
g、r
1a
、r
1b
、r2、r4、m、n和s如通式(i-a )中所定义。
[0095]
本公开的另一方面涉及一种通式(ii-a)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐：
[0096][0097]
g、r
1a
、r
1b
、r
2a
、r
2b
、r3和r4如通式(ii)中所定义。
[0098]
本公开的另一方面涉及一种通式(iia-a)或(iib-a)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐：
[0099][0100]
g、r
1a
、r
1b
、r
2a
、r
2b
、r3和r4如通式(ii-a)中所定义。
[0101]
本公开的中间体化合物如下表2：
[0102]
表2中间体结构及命名
[0103]
[0104]
[0105]
[0106]
[0107]
[0108]
[0109]
[0110][0111]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(i)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐的方法，该方法包括：
[0112][0113]
通式(i-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(i)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中：
[0114]
x为卤素，优选为氯；
[0115]
g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、s、m、n和t如通式(i-a)中所定义。
[0116]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(ia)和(ib)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐的方法，该方法包括：
[0117][0118]
通式(ia-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ia)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0119]
通式(ib-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ib)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0120]
其中：
[0121]
x为卤素，优选为氯；
[0122]
g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、s、m、n和t如通式(i-a)中所定义。
[0123]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(ia-1)和(ia-2)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐的方法，该方法包括：
[0124][0125]
通式(ia-1-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ia-1)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0126]
通式(ia-2-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ia-2)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0127]
其中：
[0128]
x为卤素，优选为氯；
[0129]
r3相同或不同，且各自独立地选自烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0130]
g、r
1a
、r
1b
、r2、r4、s、m和n如通式(i-a)中所定义。
[0131]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(ii)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐的方法，该方法包括：
[0132][0133]
通式(ii-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ii)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中：
[0134]
x为卤素，优选为氯；
[0135]
g、r
1a
、r
1b
、r
2a
、r
2b
、r3和r4如通式(ii)中所定义。
[0136]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(iia)和(iib)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐的方法，该方法包括：
[0137][0138]
通式(iia-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(iia)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0139]
通式(iib-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(iib)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0140]
其中：
[0141]
x为卤素，优选为氯；
[0142]
g、r
1a
、r
1b
、r
2a
、r
2b
、r3和r4如通式(ii)中所定义。
[0143]
本公开的另一方面涉及一种药物组合物，所述药物组合物含有治疗有效量的本公开通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0144]
本公开进一步涉及通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，在制备用于抑制kras的药物中的用途，优选在制备用于抑制kras g12c的药物中的用途。
[0145]
本公开进一步涉及通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，在制备用于治疗或预防癌症、炎症、或其它增殖性疾病的药物中的用途，优选在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途；所述的癌症优选选自黑色素瘤、脑瘤、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、鼻咽癌、结肠直肠癌、肺癌(如非小细胞肺癌或小细胞肺癌)、肾癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、皮肤癌、神经母细胞瘤、肉瘤、骨软骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原细胞瘤、睾丸肿瘤、子宫内膜癌、头颈肿瘤、多发性骨髓瘤、恶性淋巴瘤、真性红细胞增多症、白血病、甲状腺肿瘤、输尿管肿瘤、膀胱癌、胆囊癌、胆管癌、绒毛膜上皮癌和儿科肿瘤(以上所述的瘤为相应的恶性肿瘤)。
[0146]
本公开还涉及一种抑制kras的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物。
[0147]
本公开还涉及一种治疗或预防kras介导的疾病的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物。
[0148]
本公开还涉及一种治疗或预防癌症、炎症、或其它增殖性疾病的方法，优选治疗癌症的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物；其中所述的癌症优选选自黑色素瘤、脑瘤、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、鼻咽癌、结肠直肠癌、肺癌(如非小细胞肺癌或小细胞肺癌)、肾癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、皮肤癌、神经母细胞瘤、肉瘤、骨软骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原细胞瘤、睾丸肿瘤、子宫内膜癌、头颈肿瘤、多发性骨髓瘤、恶性淋巴瘤、真性红细胞增多症、白血病、甲状腺肿瘤、输尿管肿瘤、膀胱癌、胆囊癌、胆管癌、绒毛膜上皮癌和儿科肿瘤(以上所述的瘤为相应的恶性肿瘤)。
[0149]
本公开进一步涉及一种通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用作药物。
[0150]
本公开还涉及通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用作kras抑制剂，优选作为kras g12c抑制剂。
[0151]
本公开还涉及通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用于治疗或预防kras介导的疾病，优选用于治疗或预防kras g12c介导的疾病。
[0152]
本公开还涉及通式(i)、(ia)、(ib)、(ia-a)、(ia-b)、(ib-a)、(ib-b)、(ia-1)、(ia-2)、(ia-1a)、(ia-1b)、(ia-2a)、(ia-2b)、(ia-3)、(ia-4)、(ii)、(iia)、(iib)、(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)、(iia-d)和表1所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用于治疗或预防癌症、炎症、或其它增殖性疾病，优选用于治疗或预防癌症；其中所述的癌症优选选自黑色素瘤、脑瘤、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、鼻咽癌、结肠直肠癌、肺癌(如非小细胞肺癌或小细胞肺癌)、肾癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、皮肤癌、神经母细胞瘤、肉瘤、骨软骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原细胞瘤、睾丸肿瘤、子宫内膜癌、头颈肿瘤、多发性骨髓瘤、恶性淋巴瘤、真性红细胞增多症、白血病、甲状腺肿瘤、输尿管肿瘤、膀胱癌、胆囊癌、胆管癌、绒毛膜上皮癌和儿科肿瘤(以上所述的瘤为相应的恶性肿瘤)。
[0153]
可将活性化合物制成适合于通过任何适当途径给药的形式，通过常规方法使用一种或多种药学上可接受的载体来配制本公开的组合物。因此，本公开的活性化合物可以配制成用于口服给药、注射(例如静脉内、肌肉内或皮下)给药，吸入或吹入给药的各种剂型。本公开的化合物也可以配制成持续释放剂型，例如片剂、硬或软胶囊、水性或油性混悬液、
乳剂、注射液、可分散性粉末或颗粒、栓剂、锭剂或糖浆。
[0154]
本公开治疗方法中所用化合物或组合物的剂量通常将随疾病的严重性、患者的体重和化合物的相对功效而改变。不过，作为一般性指导，活性化合物优选是以单位剂量的方式，或者是以患者可以以单剂自我给药的方式。本公开化合物或组合物的单位剂量的表达方式可以是片剂、胶囊、扁囊剂、瓶装药水、药粉、颗粒剂、锭剂、栓剂、再生药粉或液体制剂。合适的单位剂量可以是0.1～1000mg。
[0155]
本公开的药物组合物除活性化合物外，可含有一种或多种辅料，所述辅料选自以下成分：填充剂(稀释剂)、粘合剂、润湿剂、崩解剂或赋形剂等。根据给药方法的不同，组合物可含有0.1至99重量％的活性化合物。
[0156]
片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂、造粒剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。
[0157]
也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂或其中活性成分与水溶性载体或油溶媒混合的软明胶胶囊提供口服制剂。
[0158]
水混悬液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂、分散剂或湿润剂。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。
[0159]
油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油，或矿物油配制而成。油悬浮液可含有增稠剂。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂保存这些组合物。
[0160]
本公开的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油，或矿物油或其混合物。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂，乳剂也可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。
[0161]
本公开的药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本公开化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置。这种装置的实例是deltec cadd-plus.tm.5400型静脉注射泵。
[0162]
本公开的药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何调和固定油。此外，脂肪酸也可以制备注射剂。
[0163]
可按用于直肠给药的栓剂形式给予本公开化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。
[0164]
可通过加入水来制备水混悬的可分散粉末和颗粒给予本公开化合物。可通过将活性成分与分散剂或湿润剂、悬浮剂或一种或多种防腐剂混合来制备这些药物组合物。
[0165]
如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行为、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、化合物的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。
[0166]
术语说明
[0167]
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
[0168]
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)碳原子的烷基，更优选为含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自d原子、卤素、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0169]
术语“亚烷基”指饱和的直链或支链脂肪族烃基，其为从母体烷的相同碳原子或两个不同的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)，更优选含有1至6个碳原子的亚烷基。亚烷基的非限制性实例包括但不限于亚甲基(-ch
2-)、1,1-亚乙基(-ch(ch3)-)、1,2-亚乙基(-ch2ch2)-、1,1-亚丙基(-ch(ch2ch3)-)、1,2-亚丙基(-ch2ch(ch3)-)、1,3-亚丙基(-ch2ch2ch
2-)、1,4-亚丁基(-ch2ch2ch2ch
2-)等。亚烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自烯基、炔基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基和氧代中的一个或多个取代基。
[0170]
术语“烯基”指分子中含有至少一个碳碳双键的烷基化合物，其中烷基的定义如上所述。优选含有2至12个(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)碳原子的烯基，更优选含有2至6个碳原子的烯基。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多
个以下基团，其独立地选自烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0171]
术语“炔基”指分子中含有至少一个碳碳三键的烷基化合物，其中烷基的定义如上所述。优选含有2至12个(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)碳原子的炔基，更优选含有2至6个碳原子的炔基。炔基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0172]
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，优选包含3至8个碳原子(例如3、4、5、6、7和8个)，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基和环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。
[0173]
术语“螺环烷基”指5至20元，单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：
[0174][0175]
术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为3元/4元、3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/4元、5元/5元、5元/6元、6元/3元、6元/4元、6元/5元和6元/6元的双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：
[0176][0177]
术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更优选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：
[0178][0179]
所述环烷基环包括如上所述的环烷基(包括单环、螺环、稠环和桥环)稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚满基(如)、四氢萘基(如)、苯并环庚烷基(如)等；优选
[0180]
环烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0181]
术语“烷氧基”指-o-(烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自d原子、卤素、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基。
[0182]
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧和硫的杂原子，所述的硫可任选被氧代(即形成亚砜或砜)，但不包括-o-o-、-o-s-或-s-s-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个(例如3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)环原子，其中1～4个(例如1、2、3和4个)是杂原子；更优选包含3至8个环原子(例如3、4、5、6、7和8个)，其中1-3是杂原子(例如1、2和3个)；更优选包含3至6个环原子，其中1-3个是杂原子；最优选包含5或6个环原子，其中1-3个(例如1、2和3个)是杂原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、四氢吡喃基、1,2.3.6-四氢吡啶基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。
[0183]
术语“螺杂环基”指5至20元，单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧和硫的杂原子，所述的硫可任选被氧代(即形成亚砜或砜)，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：
[0184][0185]
术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，其中一个或多个环原子为选自氮、氧和硫的杂原子，所述的硫可任选被氧代(即形成亚砜或砜)，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为3元/4元、3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/4元、5元/5元、5元/6元、6元/3元、6元/4元、6元/5元和6元/6元的双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：
[0186][0187]
术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，其中一个或多个环原子为选自氮、氧和硫的杂原子，所述的硫可任选被氧代(即形成亚砜或砜)，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更优选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：
[0188][0189]
所述杂环基环包括如上所述的杂环基(包括单环、螺杂环、稠杂环和桥杂环)稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：
[0190]
等。
[0191]
杂环基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上
被取代，所述取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0192]
术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(稠合多环是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。所述芳基环包括如上所述的芳基环稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：
[0193][0194]
芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0195]
术语“杂芳基”指包含1至4个(1、2、3和4个)杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元(例如5、6、7、8、9或10元)，更优选为5元或6元，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、n-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基等。所述杂芳基环包括如上述的杂芳基稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：
[0196]
[0197]
杂芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0198]
上述环烷基、杂环基、芳基和杂芳基包括从母体环原子上除去一个氢原子所衍生的残基，或从母体的相同或两个不同的环原子上除去两个氢原子所衍生的残基，即“二价环烷基”、“二价杂环基”、“亚芳基”和“亚杂芳基”。
[0199]
术语“氨基保护基”是为了使分子其它部位进行反应时氨基保持不变，用易于脱去的基团对氨基进行保护。非限制性实施例包含(三甲基硅)乙氧基甲基、四氢吡喃基、叔丁氧羰基、乙酰基、苄基、烯丙基和对甲氧苄基等。这些基团可任选地被选自卤素、烷氧基或硝基中的1-3个取代基所取代。
[0200]
术语“羟基保护基”是本领域已知的适当的用于羟基保护的基团，参见文献(“protective groups in organic synthesis”，5
th ed.t.w.greene&p.g.m.wuts)中的羟基保护基团。作为示例，优选地，所述的羟基保护基可以是(c
1-10
烷基或芳基)3硅烷基，例如：三乙基硅基，三异丙基硅基，叔丁基二甲基硅基，叔丁基二苯基硅基等；可以是c
1-10
烷基或取代烷基，优选烷氧基或芳基取代的烷基，更优选c
1-6
烷氧基取代的c
1-6
烷基或苯基取代的c
1-6
烷基，最优选c
1-4
烷氧基取代的c
1-4
烷基，例如：甲基，叔丁基，烯丙基，苄基，甲氧基甲基(mom)，乙氧基乙基，2-四氢吡喃基(thp)等；可以是(c
1-10
烷基或芳香基)酰基，例如：甲酰基，乙酰基，苯甲酰基、对硝基苯甲酰基等；可以是(c
1-6
烷基或c
6-10
芳基)磺酰基；也可以是(c
1-6
烷氧基或c
6-10
芳基氧基)羰基。
[0201]
术语“环烷基氧基”指环烷基-o-，其中环烷基如上所定义。
[0202]
术语“杂环基氧基”指杂环基-o-，其中杂环基如上所定义。
[0203]
术语“芳基氧基”指芳基-o-，其中芳基如上所定义。
[0204]
术语“杂芳基氧基”指杂芳基-o-，其中杂芳基如上所定义。
[0205]
术语“烷硫基”指烷基-s-，其中烷基如上所定义。
[0206]
术语“卤代烷基”指烷基被一个或多个卤素取代，其中烷基如上所定义。
[0207]
术语“卤代烷氧基”指烷氧基被一个或多个卤素取代，其中烷氧基如上所定义。
[0208]
术语“氘代烷基”指烷基被一个或多个氘原子取代，其中烷基如上所定义。
[0209]
术语“羟烷基”指烷基被一个或多个羟基取代，其中烷基如上所定义。
[0210]
术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。
[0211]
术语“羟基”指-oh。
[0212]
术语“巯基”指-sh。
[0213]
术语“氨基”指-nh2。
[0214]
术语“氰基”指-cn。
[0215]
术语“硝基”指-no2。
[0216]
术语“氧代”指“＝o”。
[0217]
术语“羰基”指c＝o。
[0218]
术语“羧基”指-c(o)oh。
[0219]
术语“羧酸酯基”指-c(o)o(烷基)、-c(o)o(环烷基)、(烷基)c(o)o-或(环烷基)c
(o)o-，其中烷基和环烷基如上所定义。
[0220]
本公开的化合物还可包含其同位素衍生物。术语“同位素衍生物”指结构不同仅在于存在一种或多种同位素富集原子的化合物。例如，具有本公开的结构，除了用“氘”或“氚”代替氢，或者用
18
f-氟标记(
18
f同位素)代替氟，或者用
11
c-，
13
c-，或者
14
c-富集的碳(
11
c-，
13
c-，或者
14
c-碳标记；
11
c-，
13
c-，或者
14
c-同位素)代替碳原子的化合物处于本公开的范围内。这样的化合物可用作例如生物学测定中的分析工具或探针，或者可以用作疾病的体内诊断成像示踪剂，或者作为药效学、药动学或受体研究的示踪剂。本公开还包括各种氘化形式的式(i)和式(ii)化合物。与碳原子连接的各个可用的氢原子可独立地被氘原子替换。本领域技术人员能够参考相关文献合成氘化形式的式(i)和式(ii)化合物。在制备氘代形式的式(i)和式(ii)化合物时可使用市售的氘代起始物质，或它们可使用常规技术采用氘代试剂合成，氘代试剂包括但不限于氘代硼烷、三氘代硼烷四氢呋喃溶液、氘代氢化锂铝、氘代碘乙烷和氘代碘甲烷等。氘代物通常可以保留与未氘代的化合物相当的活性，并且当氘代在某些特定位点时可以取得更好的代谢稳定性，从而获得某些治疗优势。
[0221]“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
[0222]“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为1～5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下(通过实验或理论)确定可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
[0223]“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
[0224]“可药用的盐”是指本公开化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。可以在化合物的最终分离和纯化过程中，或通过使合适的基团与合适的碱或酸反应来单独制备盐。通常用于形成药学上可接受的盐的碱包括无机碱，例如氢氧化钠和氢氧化钾，以及有机碱，例如氨。通常用于形成药学上可接受的盐的酸包括无机酸以及有机酸。
[0225]
针对药物或药理学活性剂而言，术语“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。
[0226]
本文所用的术语“药学上可接受的”是指这些化合物、材料、组合物和/或剂型，在合理的医学判断范围内，适用于与患者组织接触而没有过度毒性、刺激性、过敏反应或其他问题或并发症，具有合理的获益/风险比，并且对预期的用途是有效。
[0227]
本文所使用的，单数形式的“一个”、“一种”和“该”包括复数引用，反之亦然，除非上下文另外明确指出。
[0228]
当将术语“约”应用于诸如ph、浓度、温度等的参数时，表明该参数可以变化
±
10％，并且有时更优选地在
±
5％之内。如本领域技术人员将理解的，当参数不是关键的时，通常仅出于说明目的给出数字，而不是限制。
[0229]
本公开化合物的合成方法
[0230]
为了完成本公开的目的，本公开采用如下技术方案：
[0231]
方案一
[0232]
本公开通式(i)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0233][0234]
通式(i-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(i)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中：
[0235]
x为卤素，优选为氯；
[0236]
g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、s、m、n和t如通式(i-a)中所定义。
[0237]
方案二
[0238]
本公开通式(ia)和(ib)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0239]
[0240][0241]
通式(ia-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ia)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0242]
通式(ib-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ib)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0243]
其中：
[0244]
x为卤素，优选为氯；
[0245]
g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、s、m、n和t如通式(i-a)中所定义。
[0246]
方案三
[0247]
本公开通式(ia-1)和(ia-2)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0248]
[0249][0250]
通式(ia-1-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ia-1)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0251]
通式(ia-2-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ia-2)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0252]
其中：
[0253]
r3相同或不同，且各自独立地选自烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0254]
x为卤素，优选为氯；
[0255]
g、r
1a
、r
1b
、r2、r4、s、m和n如通式(i-a)中所定义。
[0256]
方案四
[0257]
本公开通式(ia-3)和(ia-4)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0258]
[0259][0260]
通式(ia-3-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ia-3)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0261]
通式(ia-4-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ia-4)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0262]
其中：
[0263]
r3相同或不同，且各自独立地选自烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0264]
x为卤素，优选为氯；
[0265]
g、r
1a
、r
1b
、r2、r4、s、m和n如通式(i-a)中所定义。
[0266]
方案五
[0267]
本公开通式(ia-a)和(ia-b)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0268][0269]
通式(i-a)或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐进行手性制备，得到通式(ia-a)和(ia-b)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐；
[0270]
其中g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、s和t如通式(i)中所定义。
[0271]
方案六
[0272]
本公开通式(ib-a)和(ib-b)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0273][0274]
通式(i-b)或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐进行手性制备，得到通式(ib-a)和(ib-b)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐；
[0275]
其中g、r
1a
、r
1b
、r
2-r4、s和t如通式(i)中所定义。
[0276]
方案七
[0277]
本公开通式(ia-1a)和(ia-1b)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0278][0279]
通式(ia-1)或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐进行手性制备，得到通式(ia-1a)和(ia-1b)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐；
[0280]
其中
[0281]
r3相同或不同，且各自独立地选自烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0282]
g、r
1a
、r
1b
、r2、r4和s如通式(i)中所定义。
[0283]
方案八
[0284]
本公开通式(ia-2a)和(ia-2b)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0285][0286]
通式(ia-2)或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐进行手性制备，得到通式(ia-2a)和(ia-2b)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐；
[0287]
其中
[0288]
r3相同或不同，且各自独立地选自烷基、卤代烷基和羟烷基；
[0289]
g、r
1a
、r
1b
、r2、r4和s如通式(i)中所定义。
[0290]
方案九
[0291]
本公开通式(ii)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0292][0293]
通式(ii-a )的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(ii)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，其中：
[0294]
x为卤素，优选为氯；
[0295]
g、r
1a
、r
1b
、r
2a
、r
2b
、r3和r4如通式(ii)中所定义。
[0296]
方案十
[0297]
本公开通式(iia)和(iib)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0298][0299][0300]
通式(iia-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(iia)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0301]
通式(iib-a)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其盐与通式(i-b)的化合物在碱性条件下发生反应，得到通式(iib)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
[0302]
其中：
[0303]
x为卤素，优选为氯；
[0304]
g、r
1a
、r
1b
、r
2a
、r
2b
、r3和r4如通式(ii)中所定义。
[0305]
方案十一
[0306]
本公开通式(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)和(iia-d)所示的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：
[0307][0308]
通式(iia)或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐进行手性制备，得到通式(iia-a)、(iia-b)、(iia-c)和(iia-d)的化合物或其阻转异构体、互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐；
[0309]
其中g、r
1a
、r
1b
、r
2a
、r
2b
、r3和r4如通式(ii)中所定义。
[0310]
提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类，所述的有机碱类包括但不限于三乙胺、n,n-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、双三甲基硅基胺基锂、乙酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾和正丁醇钠，所述的无机碱类包括但不限于碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢化钠、磷酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠和氢氧化锂，优选为三乙胺。
[0311]
上述反应优选在溶剂中进行，所用溶剂包括但不限于：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、叔丁醇、甲苯、乙腈、四氢呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、乙二醇二甲醚、水或n,n-二甲基甲酰胺及其混合物，优选为二氯甲烷。
具体实施方式
[0312]
以下结合实施例用于进一步描述本公开，但这些实施例并非限制着本公开的范围。
[0313]
实施例
[0314]
化合物的结构是通过核磁共振(nmr)或/和质谱(ms)来确定的。nmr位移(δ)以10-6
(ppm)的单位给出。nmr的测定是用bruker avance-400核磁仪或bruker avance neo 500m，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)、氘代氯仿(cdcl3)、氘代甲醇(cd3od)，内标为四甲基硅烷(tms)。
[0315]
ms的测定用agilent 1200/1290dad-6110/6120quadrupole ms液质联用仪(生产商：agilent，ms型号：6110/6120quadrupole ms)；waters acquity uplc-qd/sqd(生产商：
waters，ms型号：waters acquity qda detector/waters sq detector)；thermo ultimate 3000-q exactive(生产商：thermo，ms型号：thermo q exactive)。
[0316]
高效液相色谱法(hplc)分析使用agilent hplc 1200dad、agilent hplc 1200vwd和waters hplc e2695-2489高压液相色谱仪。
[0317]
手性hplc分析测定使用agilent 1260dad高效液相色谱仪。
[0318]
高效液相制备使用waters 2545-2767、waters 2767-sq detecor2、shimadzu lc-20ap和gilson gx-281制备型色谱仪。
[0319]
手性制备使用shimadzu lc-20ap制备型色谱仪。
[0320]
combiflash快速制备仪使用combiflash rf200(teledyne isco)。
[0321]
薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，薄层色谱法(tlc)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
[0322]
硅胶柱层析色谱法一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
[0323]
激酶平均抑制率及ic
50
值的测定用novostar酶标仪(德国bmg公司)。
[0324]
本公开的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自abcr gmbh&co.kg，acros organics，aldrich chemical company，韶远化学科技(accela chembio inc)、达瑞化学品等公司。
[0325]
实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。
[0326]
氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氩气或氮气气球。
[0327]
氢气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氢气气球。
[0328]
加压氢化反应使用parr 3916ekx型氢化仪和清蓝ql-500型氢气发生器或hc2-ss型氢化仪。
[0329]
氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。
[0330]
微波反应使用cem discover-s 908860型微波反应器。
[0331]
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
[0332]
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
[0333]
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(tlc)，反应所使用的展开剂，纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：a：二氯甲烷/甲醇体系，b：正己烷/乙酸乙酯体系，c：乙酸乙酯/二氯甲烷体系，d：甲醇/乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
[0334]
实施例1，1-1，1-2
[0335]
(5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮1
[0336]
(12s,5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体1-1
[0337]
(12r,5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡
啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体1-2
[0338][0339]
第一步
[0340]
1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)脲1b
[0341]
将化合物2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺1a(10.8g，71.89mmol，毕得医药)溶解于500ml二氯甲烷中，加入三乙胺(36.45g，360.21mmol，50ml)，冷却至0℃，加入三光气(12.8g，43.13mmol)，搅拌反应1小时，再加入氨的1,4-二氧六环溶液(0.4m，220ml)，搅拌反应1小时。将反应液减压浓缩，在残余物中加入1l水，搅拌10分钟，过滤，滤饼水洗，真空干燥得标题产物1b(9.73g，产率：70.0％)。
[0342]
第二步
[0343]
6-氨基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮1c
[0344]
将化合物1b(9.2g，47.60mmol)加入至150ml甲醇中，再加入氰乙酸乙酯(5.913g，52.27mmol,5.6ml)和叔丁醇钠(5.490g，57.12mmol)，加热至75℃反应16小时。将反应液冷却至室温，减压浓缩，在残余物中加入1m盐酸至ph值为7，搅拌10分钟后过滤，滤饼真空干燥
得标题化合物1c(9.2g，产率：74.2％)。
[0345]
第三步
[0346]
3-(6-氨基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)-3-氧代丙腈1d
[0347]
将氰基乙酸(6g，70.53mmol)加入至50ml乙酸酐中，加热至85℃反应5分钟，再将反应液倒入化合物1c(9.2g，35.34mmol)中，加热至85℃反应1小时。将反应液冷却至室温后倒入1l水中，搅拌10分钟。过滤干燥得标题化合物1d(9.03g，产率：70.8％)。
[0348]
第四步
[0349]
1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5,7(1h,3h,6h,8h)-四酮1e
[0350]
将化合物1d(12.5g，38.18mmol)加入至40ml氢溴酸中，加热至80℃反应1小时。将反应液冷却至室温后倒入1l冰水中，加入氨水至反应液ph值为7，过滤，滤饼水洗，真空干燥得标题化合物1e(9.03g，产率：72.0％)。
[0351]
第五步
[0352]
6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4,5,7(1h,3h,6h,8h)-四酮1f
[0353]
将化合物1e(10g，30.45mmol)加入到200ml水中，室温下加入氢氧化钠(4.3g，107.5mmol)，搅拌30分钟，再加入1-(氯甲基)-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]庚烷双四氟硼酸盐(32.4g，91.45mmol，韶远)，搅拌反应1小时。然后在反应液中缓慢加入140ml 2m盐酸至反应液ph为1，加入亚硫酸钠(7.68g,60.93mmol)，搅拌5分钟，再加入锌粉(10g，152.9mmol)，加热到60℃反应5小时。将反应液冷却到室温，过滤，滤饼用400ml乙腈和n,n-二异丙基乙胺(v/v＝10:1)的混合溶剂搅拌20分钟，过滤，滤液减压浓缩的到目标化合物1f(3.15g，产率：29.8％)，可直接用于下一步不必进一步纯化。
[0354]
第六步
[0355]
5,7-二氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮1g将化合物1f(2g，5.77mmol)加入到50ml乙腈中，加入三氯氧磷(4.29g，27.97mmol，2.6ml)和n,n-二异丙基乙胺(3.79g，29.32mmol，5.2ml)，加热到80℃反应2小时。将反应液冷却到室温后减压浓缩，将残余物倒入50ml冰水中，再加入饱和碳酸氢钠溶液至反应液ph》7，加入100ml二氯甲烷溶解后分液，水相用二氯甲烷(50ml
×
2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系b纯化得到目标化合物1g(396mg，产率：17.8％)。
[0356]
第七步
[0357]
4,5,7-三氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1h)-酮1h
[0358]
将化合物1g(396mg，1.0334mmol)溶解于30ml乙腈中，再加入三氯氧磷(462mg，3.01mmol，0.28ml)和n,n-二异丙基乙胺(408mg，3.15mmol，0.56ml)，加热到80℃反应2小时。将反应液冷却到室温后减压浓缩得到标题化合物1h(620mg，产率：》100％)，可直接用于下一步不必进一步纯化。
[0359]
第八步
[0360]
(r)-4-(5,7-二氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯1i
[0361]
将化合物1h(620mg，1.54mmol)溶解于40ml二氯甲烷中，冷却到0℃，加入(3r)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250mg，1.15mmol，毕得医药)，再加入n,n-二异丙基乙胺(408mg，3.15mmol，0.56ml)，搅拌反应1小时。加入30ml饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，分液，水相用二氯甲烷(100ml
×
2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物1i(920mg，产率：102.4％)，可直接用于下一步反应不必进一步纯化。
[0362]
第九步
[0363]
(r)-2-氯-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5h)-羧酸叔丁酯1j
[0364]
将化合物1i(920mg，1.58mmol)溶解于30ml四氢呋喃中，加入1，8-二氮杂二环十一碳-7-烯(472mg，3.10mmol，0.46ml，韶远)，搅拌反应3小时。加入30ml水和50ml乙酸乙酯，分液，水相用乙酸乙酯(50ml
×
2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系c纯化得到目标化合物1j(396mg，产率：45.9％)。
[0365]
第十步
[0366]
(5ar)-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5h)-羧酸叔丁酯1k
[0367]
在氮气气氛下，将2-氟-6-羟基苯硼酸(168mg，1.07mmol，上海皓鸿生物医药科技有限公司)，化合物1j(393mg，721.0μmol)，十二水合磷酸氢二钠(775mg，2.16mmol)，四三苯基膦钯(84mg，72.69μmol)加入到30ml水和1,4-二氧六环(v/v＝1:5)的混合溶剂中，加热至95℃反应16小时。将反应液冷却到室温后减压浓缩，再加入50ml二氯甲烷溶解后过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系d纯化得到目标化合物1k(383mg，产率：85.5％)。
[0368]
第十一步
[0369]
(5ar)-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮1l
[0370]
将化合物1k(383mg，617.1μmol)溶解于10ml二氯甲烷中，加入2ml三氟乙酸，搅拌反应1小时。将反应液减压浓缩，残余物中加入饱和碳酸氢钠水溶液至反应液ph大于7，再加入100ml二氯甲烷后分液，水相用二氯甲烷萃取(30ml
×
2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物1l(335mg，产率：104.2％)，可直接用于下一步反应不必进一步纯化。
[0371]
第十二步
[0372]
(5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮1
[0373]
将化合物1l(335mg，643.5μmol)溶解于30ml二氯甲烷中，冷却到0℃，加入三乙胺(365mg，3.60mmol，0.5ml)，再滴加入丙烯酰氯(87mg，961.2μmol，78μl)，搅拌反应1小时。将反应液减压浓缩，残余物溶解于30ml甲醇，再加入碳酸氢钠(250mg，2.97mmol)，加热到60℃
搅拌反应1小时。将反应液冷却到室温，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系a纯化后，再经高效液相色谱法(色谱柱：boston phlex prep c18 5μm 30*150mm；流动相：a-水(10mmol nh4hco3)：b-乙腈＝30％-50％b(15min)，流速：30ml/min)纯化得到目标化合物1(209mg，产率：56.5％)。
[0374]
ms m/z(esi):575.1[m 1]。
[0375]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.15(s,1h),8.35-8.36(m,1h),7.24(q,1h),7.17(d,1h),6.79-6.91(m,1h),6.70(d,1h),6.66(t,1h),6.22(dd,1h),5.78(dd,1h),4.80-4.92(m,2h),4.30-4.61(m,3h),4.01-4.10(m,1h),3.65-3.84(m,2h),3.38-3.45(m,1h),2.65-2.80(m,1h),1.90-1.94(m,3h),1.06(d,3h),0.92-0.95(m,3h)。
[0376]
第十三步
[0377]
(12s,5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体1-1
[0378]
(12r,5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体1-2
[0379]
将化合物1(209mg，0.364mmol)进行手性制备(分离条件：手性制备柱chiralpak if,20
×
250mm,5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：20ml/min)，收集其相应组分，减压浓缩，得到目标化合物1-1(90mg)、1-2(95mg)。
[0380]
单一构型化合物1-1(保留时间较短)：
[0381]
手性hplc分析:保留时间4.277分钟，手性纯度：100％(色谱柱：chiralpak if 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0382]
ms m/z(esi):575.1[m 1]。
[0383]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.15(s,1h),8.35(d,1h),7.24(q,1h),7.17(d,1h),6.79-6.91(m,1h),6.70(d,1h),6.66(t,1h),6.22(dd,1h),5.78(dd,1h),4.82-4.91(m,2h),4.29-4.62(m,3h),4.02-4.08(m,1h),3.66-3.84(m,2h),3.38-3.42(m,1h),2.65-2.71(m,1h),1.93(s,3h),1.06(d,3h),0.92(d,3h)。
[0384]
单一构型化合物1-2(保留时间较长)
[0385]
手性hplc分析:保留时间7.574分钟，手性纯度：98.3％(色谱柱：chiralpak if 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0386]
ms m/z(esi):575.1[m 1]。
[0387]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.15(s,1h),8.35(d,1h),7.24(q,1h),7.17(d,1h),6.79-6.91(m,1h),6.70(d,1h),6.66(t,1h),6.22(dd,1h),5.78(dd,1h),4.80-4.92(m,2h),4.30-4.64(m,3h),4.01-4.10(m,1h),3.65-3.87(m,2h),3.40-3.45(m,1h),2.75-2.80(m,1h),1.90(s,3h),1.06(d,3h),0.94(d,3h)。
[0388]
实施例2，2-1，2-2
[0389]
(5ar,8s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮2
[0390]
(12s,5ar,8s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体2-1
[0391]
(12r,5ar,8s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体2-2
[0392][0393]
采用实施例1的合成路线，将第八步原料(3r)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯替换为化合物(2s,5r)-5-(羟甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(采用公知的方法“journal of medicinal chemistry,2020,63(9),4468
–
4483”制备而得)制得标题化合物2(450mg)。
[0394]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0395]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.13(s,1h),8.35(d,1h),7.24(q,1h),7.15(d,1h),6.81-6.91(m,1h),6.71(d,1h),6.66(t,1h),6.22(dd,1h),5.75(dd,1h),4.79-4.97(m,2h),4.45-4.64(m,2h),4.10-4.34(m,3h),3.30-3.74(m,1h),2.58-2.82(m,1h),1.87-1.95(m,3h),1.15-1.24(m,3h),1.04-1.07(m,3h),0.91-0.96(m,3h)。
[0396]
第一步
[0397]
(12s,5ar,8s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体2-1
[0398]
(12r,5ar,8s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体2-2
[0399]
将化合物2(450mg，0.764mmol)进行手性制备(分离条件：手性制备柱chiralpak ic,5.0cm i.d.
×
25cm l,10μm；流动相：甲醇＝100％，流速：30ml/min)，收集其相应组分，减压浓缩，得到目标化合物2-1(201mg)/2-2(170mg)。
[0400]
单一构型化合物2-1(保留时间较长)
[0401]
手性hplc分析:保留时间18.139分钟，手性纯度：99.7％(色谱柱：chiralpak ic 250
×
4.6mm，5μm；流动相：a-(甲醇：乙醇＝1:1):b-正己烷＝40/60，流速：1.0ml/min)。
[0402]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0403]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.10(s,1h),8.35(d,1h),7.24(q,1h),7.15(d,1h),6.80-6.91(m,1h),6.70(d,1h),6.66(t,1h),6.22(dd,1h),5.75(dd,1h),4.81-4.88(m,
2h),4.45-4.64(m,2h),4.28-4.34(m,3h),3.30-3.74(m,1h),2.60-2.65(m,1h),1.95(d,3h),1.16-1.24(m,3h),1.06(d,3h),0.92(d,3h)。
[0404]
单一构型化合物2-2(保留时间较短)：
[0405]
手性hplc分析:保留时间8.693分钟，手性纯度：100％(色谱柱：chiralpak ic 250
×
4.6mm，5μm；流动相：a-(甲醇：乙醇＝1:1):b-正己烷＝40/60，流速：1.0ml/min)。
[0406]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0407]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.11(s,1h),8.35(d,1h),7.24(q,1h),7.15(d,1h),6.81-6.91(m,1h),6.71(d,1h),6.66(t,1h),6.22(dd,1h),5.75(dd,1h),4.82-4.90(m,2h),4.46-4.64(m,2h),4.10-4.35(m,3h),3.30-3.74(m,1h),2.78-2.82(m,1h),1.87(s,3h),1.15-1.21(m,3h),1.06(d,3h),0.95(d,3h)。
[0408]
实施例3，3-1，3-2
[0409]
(5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮3(12s,5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体3-1
[0410]
(12r,5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体3-2
[0411]
[0412][0413]
第一步
[0414]
(r)-3-氟-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5h)-羧酸叔丁酯3a
[0415]
在氮气气氛下，将2-氟苯硼酸(206mg，1.47mmol，韶远)，化合物1j(534mg，979.8μmol)，十二水合磷酸氢二钠(1.05g，2.93mmol)，四三苯基膦钯(113mg，97.7μmol)加入到24ml水和1,4-二氧六环(v/v＝1:5)的混合溶剂中，加热到95℃反应16小时。将反应液冷却到室温后减压浓缩，残余物用100ml二氯甲烷溶解后过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物3a(854mg)，可直接用于下一步反应不必进一步纯化。
[0416]
第二步
[0417]
(r)-3-氟-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮3b
[0418]
将化合物3a(854mg，1.41mmol)溶解于15ml二氯甲烷中，加入3ml三氟乙酸，搅拌反应1小时。将反应液减压浓缩，残余物中加入饱和碳酸氢钠水溶液至反应液ph大于7，再加入100ml二氯甲烷后分液，水相用二氯甲烷萃取(30ml
×
2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物3b(788mg)，可直接用于下一步反应不必进一步纯化。
[0419]
第三步
[0420]
(5ar)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮3
[0421]
将化合物3b(788mg，1.56mmol)溶解于30ml二氯甲烷中，冷却到0℃，加入三乙胺(546mg，5.39mmol，0.75ml)，再滴加入丙烯酰氯(140mg，1.54mmol，0.125ml)，搅拌反应1小时。将反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系d纯化后，再经高效液相色谱法(色谱柱：boston phlex prep c18 5μm 30*150mm；流动相：a-水(10mmol nh4hco3)：b-乙腈＝35％-55％b(15min)，流速：30ml/min)纯化得到目标化合物1(280mg，产率：32.1％)。
150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝80/20，流速：1.0ml/min)。
[0450]
ms m/z(esi):573.4[m 1]。
[0451]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.39(d,1h),7.49-7.54(m,1h),7.24-7.34(m,2h),7.17-7.20(m,2h),6.80-6.92(m,1h),6.15-6.24(m,1h),5.73-5.78(m,1h),4.83-4.89(m,2h),4.43-4.65(m,2h),4.09-4.38(m,3h),3.34-3.76(m,1h),2.61-2.68(m,1h),1.97(d,3h),1.19(dd,3h),1.06(d,3h),0.96(d,3h)。
[0452]
单一构型化合物(保留时间较长)：
[0453]
手性hplc分析:保留时间19.150分钟，手性纯度：99.7％(色谱柱：chiralpak ig 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝80/20，流速：1.0ml/min)。
[0454]
ms m/z(esi):573.4[m 1]。
[0455]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.39(d,1h),7.49-7.54(m,1h),7.24-7.33(m,2h),7.17-7.20(m,2h),6.81-6.92(m,1h),6.15-6.24(m,1h),5.73-5.78(m,1h),4.82-4.89(m,2h),4.46-4.65(m,2h),4.11-4.37(m,3h),3.30-3.76(m,1h),2.81-2.86(m,1h),1.90(s,3h),1.15-1.21(dd,3h),1.07(d,3h),0.97(d,3h)。
[0456]
实施例5，5-1，5-2
[0457]
(5ar,8s)-7-丙烯酰基-2-(2,6-二氟苯基)-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮5
[0458]
(12r,5ar,8s)-7-丙烯酰基-2-(2,6-二氟苯基)-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮5-1
[0459]
(12s,5ar,8s)-7-丙烯酰基-2-(2,6-二氟苯基)-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮5-2
lux amylose-2 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝70/30，流速：1.0ml/min)。
[0469]
ms m/z(esi):591.0[m 1]。
[0470]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.36(d,1h),7.54-7.60(m,1h),7.16-7.23(m,3h),6.80-6.92(m,1h),6.15-6.24(m,1h),5.73-5.78(m,1h),4.80-4.93(m,2h),4.43-4.66(m,2h),4.14-4.36(m,3h),3.36-3.77(m,1h),2.79-2.85(m,1h),1.86(s,3h),1.16-1.22(dd,3h),1.06(d,3h),0.94(d,3h)。
[0471]
单一构型化合物5-2(保留时间较短)：
[0472]
手性hplc分析:保留时间7.302分钟，手性纯度：99.4％(色谱柱：ay phenomenex lux amylose-2 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝70/30，流速：1.0ml/min)。
[0473]
ms m/z(esi):591.1[m 1]。
[0474]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.36(d,1h),7.54-7.60(m,1h),7.17-7.23(m,3h),6.79-6.91(m,1h),6.15-6.24(m,1h),5.72-5.78(m,1h),4.85-4.90(m,2h),4.43-4.65(m,2h),4.12-4.35(m,3h),3.27-3.78(m,1h),2.58-2.62(m,1h),1.96(d,3h),1.16-1.23(dd,3h),1.05(d,3h),0.90(d,3h)。
[0475]
实施例6，6-1，6-2
[0476]
(r)-7-丙烯酰基-2-(2,6-二氟苯基)-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮6
[0477]
(12s,5ar)-7-丙烯酰基-2-(2,6-二氟苯基)-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮6-1
[0478]
(12r,5ar)-7-丙烯酰基-2-(2,6-二氟苯基)-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮6-2
[0479][0480]
采用实施例1的合成路线，将将第十步原料2-氟-6-羟基苯硼酸替换为2,6-二氟苯硼酸频哪醇酯制得标题化合物6(126mg)。
[0481]
ms m/z(esi):577.0[m 1]。
[0482]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.36(d,1h),7.51-7.61(m,1h),7.16-7.23(m,3h),6.78-6.90(m,1h),6.19-6.23(m,1h),5.76-5.79(m,1h),4.82-4.95(m,2h),4.33-4.57(m,3h),3.73-4.03(m,3h),3.30-3.49(m,1h),2.65-2.81(m,1h),1.90-1.94(m,3h),1.06-1.07(m,3h),0.91-0.95(m,3h)。
[0483]
第一步
[0484]
(12s,5ar)-7-丙烯酰基-2-(2,6-二氟苯基)-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮6-1
[0485]
(12r,5ar)-7-丙烯酰基-2-(2,6-二氟苯基)-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮6-2
[0486]
将化合物6(126mg，0.502mmol)进行手性制备(分离条件：手性制备柱chiralpak id,20
×
250mm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：20ml/min)，收集其相应组分，减压浓缩，得到目标化合物6-1(30mg)/6-2(30mg)。
[0487]
单一构型化合物6-1(保留时间较短)：
[0488]
手性hplc分析：保留时间5.618分钟，手性纯度：100％(色谱柱：chiralpak id 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0489]
ms m/z(esi):577.3[m 1]。
[0490]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.36(d,1h),7.55-7.61(m,1h),7.16-7.23(m,3h),6.78-6.90(m,1h),6.19-6.23(m,1h),5.77-5.79(m,1h),4.85-4.93(m,2h),4.33-4.61(m,3h),3.67-4.03(m,3h),3.24-3.47(m,1h),2.65-2.71(m,1h),1.94(s,3h),1.06(d,3h),0.91(d,3h)。
[0491]
单一构型化合物6-2(保留时间较长)：
[0492]
手性hplc分析：保留时间6.748分钟，手性纯度：98.1％(色谱柱：chiralpak id 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0493]
ms m/z(esi):577.3[m 1]。
[0494]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.37(d,1h),7.55-7.61(m,1h),7.17-7.23(m,3h),6.78-6.90(m,1h),6.19-6.23(m,1h),5.77-5.79(m,1h),4.82-4.95(m,2h),4.34-4.60(m,3h),3.67-4.03(m,3h),3.30-3.49(m,1h),2.76-2.81(m,1h),1.91(s,3h),1.07(d,3h),0.94(d,3h)。
[0495]
实施例7，7-1，7-2
[0496]
(5ar,8s)-7-丙烯酰基-3-氯-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮7
[0497]
(12s,5ar,8s)-7-丙烯酰基-3-氯-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体7-1
[0498]
(12r,5ar,8s)-7-丙烯酰基-3-氯-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体7-2
[0499]
基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯7d
[0512]
将化合物7c(23g，55.01mmol)溶解于150ml二氯甲烷中，冷却到0℃，加入化合物(2s,5r)-5-(羟甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5g，21.71mmol，采用公知的方法“journal of medicinal chemistry,2020,63(9),4468
–
4483”制得)，再加入n,n-二异丙基乙胺(10.206g，78.96mmol,14ml)，搅拌反应1小时。加入100ml饱和碳酸氢钠水溶液搅拌15分钟淬灭，分液，水相用二氯甲烷(100ml
×
2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到目标化合物7d(19.1g，产率：56.7％)，可直接用于下一步反应无需进一步纯化。
[0513]
ms m/z(esi):611.0[m 1]。
[0514]
第五步
[0515]
(5ar,8s)-2,3-二氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5h)-羧酸叔丁酯7e
[0516]
将化合物7d(19.1g，31.21mmol)溶解于150ml四氢呋喃中，加入1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(10.18g，66.86mmol，10ml)，搅拌反应3小时。加入100ml水和150ml乙酸乙酯，分液，水相用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物经硅胶柱色谱以洗脱剂体系d纯化得到目标化合物7e(8.2g，产率：45.6％)。
[0517]
ms m/z(esi):575.1[m 1]。
[0518]
第六步
[0519]
(5ar,8s)-3-氯-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5h)-羧酸叔丁酯7f
[0520]
在氮气气氛下，将2-氟苯硼酸(0.485g,3.4663mmol)，化合物7e(1.33g,2.3111mmol)，十二水合磷酸氢二钠(2.48g,6.9246mmol)，四三苯基膦钯(267mg,231.0569μmol)加入到60ml水和1,4-二氧六环(v/v＝1:5)中，加热到100℃反应16小时。将反应液冷却到室温，减压浓缩，残余物用300ml二氯甲烷溶解后过滤，滤液减压浓缩得到目标化合物7f(2g，产率：》100％)，可直接用于下一步反应无需进一步纯化。
[0521]
第七步
[0522]
(5ar,8s)-3-氯-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮7g
[0523]
将化合物7f(2g,3.149mmol)溶解于20ml二氯甲烷中，加入4ml三氟乙酸，搅拌反应1小时。将反应液减压浓缩，残余物中加入30ml饱和碳酸氢钠水溶液，再加入50ml二氯甲烷溶解后分液，水相用二氯甲烷(50ml
×
2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到目标化合物7g(1.686g，产率：100.0％)。
[0524]
第八步
[0525]
(5ar,8s)-7-丙烯酰基-3-氯-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮7
[0526]
将化合物7g(1.686g，3.151mmol)加入到50ml二氯甲烷中，冷却到0℃，加入三乙胺
酮阻转异构体8-2
[0542][0543]
采用实施例7的合成路线，将第四步原料(2s,5r)-5-(羟甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯替换为化合物(3r)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(毕得医药)制得标题化合物8(520mg)。
[0544]
ms m/z(esi):575.0[m 1]。
[0545]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.35-8.36(m,1h),7.46-7.50(m,1h),7.22-7.29(m,2h),7.13-7.17(m,2h),6.80-6.92(m,1h),6.20-6.23(m,1h),5.76-5.79(m,1h),4.83-4.96(m,2h),4.55-4.61(m,1h),4.36-4.49(m,1h),4.28-4.29(m,1h),4.03-4.06(m,1h),3.66-3.78(m,2h),3.34-3.38(m,1h),2.68-2.80(m,1h),1.93-1.96(m,3h),1.06-1.07(m,3h),0.93-0.95(m,3h)。
[0546]
第一步
[0547]
(12s,r)-7-丙烯酰基-3-氯-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体8-1
[0548]
(12r,r)-7-丙烯酰基-3-氯-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮阻转异构体8-2
[0549]
将化合物8(520mg，0.904mmol)进行手性制备(分离条件：手性制备柱chiralpak ig 20*250mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：20ml/min)，收集其相应组分，减压浓缩，得到目标化合物8-1(207mg)/8-2(192mg)。
[0550]
单一构型化合物8-1(保留时间较短)：
[0551]
手性hplc分析:保留时间5.674分钟，手性纯度：100％(色谱柱：chiralpak ig 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0552]
ms m/z(esi):575.0[m 1]。
[0553]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.35-8.36(m,1h),7.46-7.48(m,1h),7.14-7.28(m,4h),6.79-6.90(m,1h),6.19-6.22(m,1h),5.76-5.78(m,1h),4.88-4.93(m,2h),4.54-4.62(m,1h),4.35-4.49(m,1h),4.27-4.28(m,1h),4.02-4.11(m,1h),3.65-3.77(m,2h),3.39-3.49(m,1h),2.66-2.75(m,1h),1.90-1.98(m,3h),1.05-1.07(m,3h),0.93-0.94(m,3h)。
[0554]
单一构型化合物8-2(保留时间较长)：
[0555]
手性hplc分析:保留时间7.708分钟，手性纯度：100％(色谱柱：chiralpak ig 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0556]
ms m/z(esi):575.0[m 1]。
[0557]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.34-8.35(m,1h),7.45-7.49(m,1h),7.22-7.28(m,2h),7.13-7.16(m,2h),6.79-6.91(m,1h),6.19-6.23(m,1h),5.76-5.79(m,1h),4.82-4.96(m,2h),4.57-4.61(m,1h),4.35-4.49(m,1h),4.27-4.29(m,1h),4.01-4.05(m,1h),3.66-3.77(m,2h),3.37-3.50(m,1h),2.74-2.80(m,1h),1.91-1.95(m,3h),1.05-1.07(m,3h),0.93-0.94(m,3h)。
[0558]
实施例9
[0559]
(5ar,8r)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮9
[0560][0561]
采用实施例1的合成路线，将第八步原料(3r)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯替换为化合物(2r,5r)-5-(羟基甲基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(毕得医药)，将第十步原料2-氟-6-羟基苯硼酸替换为2-氟苯硼酸制得标题化合物9(620mg)。
[0562]
ms m/z(esi):573.1[m 1]。
[0563]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.38-8.40(m,1h),7.49-7.54(m,1h),7.24-7.33(m,2h),7.16-7.20(m,2h),6.79-6.80(m,1h),6.22-6.25(m,1h),5.76-5.79(m,1h),4.90-4.93(m,1h),4.62-4.71(m,1h),4.40-4.54(m,3h),4.09-4.28(m,3h),2.64-2.80(m,1h),1.92-1.96(m,3h),1.23-1.24(m,3h),1.05-1.07(m,3h),0.94-0.97(m,3h)。
氟苯硼酸制得标题化合物11(480mg)。
[0574]
ms m/z(esi):573.1[m 1]。
[0575]1h nmr(500mhz,cdcl3)δ8.52-8.55(m,1h),7.35-7.41(m,1h),7.11-7.25(m,4h),6.51-6.68(m,2h),5.87-5.90(m,1h),5.20-5.25(m,1h),4.97-4.99(m,1h),4.30-4.53(m,4h),3.83-3.86(m,1h),3.65-3.68(m,1h),2.71-2.83(m,1h),2.05-2.09(m,3h),1.37-1.39(m,3h),1.24-1.25(m,3h),1.06-1.10(m,3h)。
[0576]
实施例12
[0577]
(5as,8s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮12
[0578][0579]
采用实施例1的合成路线，将第八步原料(3r)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯替换为化合物(2s,5s)-5-(羟基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(采用公知的方法“wo2020/6018,2020,a1，740-741”制备而得)制得标题化合物12(360mg)。
[0580]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0581]1h nmr(500mhz,cdcl3)δ9.24-9.29(m,1h),8.63-8.65(m,1h),7.21-7.25(m,2h),6.48-6.69(m,4h),5.88-5.90(m,1h),5.20-5.25(m,1h),5.02-5.05(m,1h),4.36-4.56(m,4h),3.84-3.88(m,1h),3.50-3.65(m,1h),2.80-2.84(m,1h),2.10-2.14(m,3h),1.37-1.40(m,3h),1.27-1.29(m,3h),1.10-1.12(m,3h)。
[0582]
实施例13
[0583]
(5as,8r)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮13
[0584][0585]
采用实施例1的合成路线，将第八步原料(3r)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯替换为化合物(2r,5s)-5-(羟基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(采用公知的方法“wo2019/215203,2019,a1,page 44”制备而得)，将第十步原料2-氟-6-羟基苯硼酸替换为2-氟苯硼酸制得标题化合物13(250mg)。
[0586]
ms m/z(esi):573.1[m 1]。
[0587]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.39(d,1h),7.49-7.54(m,1h),7.20-7.33(m,2h),73.17-7.19(m,2h),6.80-6.92(m,1h),6.15-6.23(m,1h),5.73-5.79(m,1h),4.80-4.92(m,2h),4.46-4.65(m,2h),4.10-4.37(m,3h),3.35-3.76(m,1h),2.56-2.85(m,1h),1.90-1.98(m,3h),1.15-1.26(m,3h),1.06-1.08(m,3h),0.95-0.98(m,3h)。
[0588]
实施例14
[0589]
(5as,8r)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮14
[0590][0591]
采用实施例1的合成路线，将第八步原料(3r)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯替换为化合物(2r,5s)-5-(羟基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(采用公知的方法“wo2019/215203,2019,a1,page 44”制备而得)制得标题化合物14(310mg)。
[0592]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0593]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.11(s,1h),8.35-8.36(m,1h),7.15-7.25(m,2h),6.68-6.85(m,1h),6.64-6.72(m,2h),6.15-6.23(m,1h),4.84-4.88(m,2h),4.10-4.64(m,
5h),3.55-3.74(m,1h),3.15-3.29(m,1h),2.61-2.81(m,1h),1.87-1.96(m,3h),1.05-1.08(m,3h),1.01-1.04(m,3h),0.92-0.96(m,3h)。
[0594]
实施例15
[0595]
(9s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-9-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮15
[0596]
(12s,5as,9s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-9-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮15-1
[0597]
(12r,5as,9s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-9-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮15-2
[0598]
(12s,5ar,9s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-9-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮15-3
[0599]
(12r,5ar,9s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-9-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮15-4
[0600]
[0601][0602]
第一步
[0603]
(s)-n1,n
2-二苄基丙烷-1,2-二胺15b
[0604]
将(2s)-丙烷-1,2-二胺二盐酸盐15a(20g，136.0mmol，皓鸿生物(乐研)，溶解于200ml甲醇，加入二异丙基乙胺(36.1g，219.3mmol)，冷却到0℃，滴加入苯甲醛(29g，273.2mmol)。加毕升温到室温后搅拌反应2小时。再冷却到0℃，分批加入硼氢化钠(10g，264.3mmol),再升温到室温反应2小时。加1m盐酸至反应也ph至7，过滤，滤液减压浓缩，加入500ml乙酸乙酯和300ml水，并加入碳酸钠至水相ph至9，分液，水相用乙酸乙酯(150ml
×
2)萃取，再用二氯甲烷和甲醇(v/v＝10:1)混合溶剂(200ml
×
2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系a纯化得到标题化合物15b(21.7g，产率：62.7％)。
[0605]
第二步
[0606]
(6s)-1,4-二苄基-6-甲基哌嗪-2-羧酸甲酯15c
[0607]
将化合物15b(10g，39.3mmol)溶解于50ml甲苯，加入三乙胺(10.7g，105.7mmol)，加热到40℃，再滴加入2,3-二溴丙酸乙酯(11.2g，43.1mmol)的50ml甲苯溶液，再升温到80℃搅拌反应6小时。将反应液冷却到室温，加入300ml乙酸乙酯和150ml水，分液，水相用乙酸乙酯(150ml
×
1)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系a纯化得到标题化合物15c(6.78g，产率：48.9％)。
[0608]
第三步
[0609]
((6s)-1,4-二苄基-6-甲基哌嗪-2-基)甲醇15d
[0610]
将化合物15c(5.6g，15.88mmol)溶解于200ml四氢呋喃，冷却到0℃，滴加入四氢铝锂(645mg，19.01mmol，19ml)，加毕，搅拌反应1小时。依次滴加入0.6ml水，0.6ml 15％氢氧化钠水溶液，1.8ml水，再加入无水硫酸钠搅拌10分钟，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物15d(5.12g，产率：》100％)。
[0611]
第四步
[0612]
((6s)-6-甲基哌嗪-2-基)甲醇15e
[0613]
在氢气气氛下，将化合物15d(6.2g，19.97mmol)溶解于70ml甲醇，再加入10％钯碳(1.78g，50％含水量)，搅拌反应过夜。过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物15e(2.6g，产率：100％)。
[0614]
第五步
[0615]
(5s)-3-(羟基甲基)-5-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯15f
[0616]
将化合物15e(2.61g，20.04mmol)溶解于50ml甲醇中，冷却到0℃，加入三乙胺(7.29g，72.04mmol，10ml)，再加入二碳酸二叔丁酯(9.7g，44.44mmol)，加毕升温到室温后搅拌16小时。将反应液减压浓缩后加入100ml水和乙醇(v/v＝1:1)混合溶剂溶解，再加入氢氧化钠(2.4g，460.04mmol)，加热到90℃搅拌反应16小时。将反应冷却到室温后减压浓缩，在残余物中加入1n盐酸至反应液ph约为10，然后用二氯甲烷(100ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系a纯化得到标题化合物15f(3.2g，产率：69.30％)。
[0617]
第六步
[0618]
(5s)-4-(5,7-二氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]
[0619]
嘧啶-4-基)-3-(羟基甲基)-5-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯15g
[0620]
将化合物1h(3.8g,9.46mmol)溶解于50ml二氯甲烷中，冷却到0℃，再加入化合物15f(1.2g，5.21mmol)和二异丙基乙胺(2.916g，22.56mmol，4ml)，搅拌反应3小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液搅拌30分钟，分液，水相用二氯甲烷(50ml
×
2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物15g(3.93g，产率：69.8％)。
[0621]
第七步
[0622]
(9s)-2-氯-3-氟-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-9-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5h)-羧酸叔丁酯15h
[0623]
将化合物15g(3.93g，6.60mmol)溶解于四氢呋喃中，加入1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(4.072g，26.74mmol，4ml)，搅拌反应16小时。在反应液中加入50ml水和50ml乙酸乙酯，
全溶后分液，水相用乙酸乙酯(50ml
×
2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系d纯化得到标题化合物15h(155mg，产率：4.2％)。
[0624]
第八步
[0625]
(9s)-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-9-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5h)-羧酸叔丁酯15i
[0626]
在氮气气氛下，将化合物15h(155mg，0.277mmol)，2-氟-6-羟基苯硼酸(64mg，0.41mmol)，十二水合磷酸氢二钠(300mg，0.837mmol)和四三苯基膦钯(32mg，27.69μmol)加入到12ml水和1,4-二氧六环(v/v＝1:5)的混合溶剂中，加热到95℃反应16小时。将反应液冷却到室温，减压浓缩，残余物中加入100ml二氯甲烷溶解后过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶薄层色谱法以展开体系a纯化得到标题化合物15i(140mg，产率：79.5％)。
[0627]
第九步
[0628]
(9s)-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-9-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮15j
[0629]
将化合物15i(140mg，0.22mmol)溶解于10ml二氯甲烷中，加入2ml三氟乙酸，搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，在残余物中加入饱和碳酸氢钠水溶液至反应液ph》7，加入二氯甲烷(30ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到目标化合物15j(134mg，产率：》100％)。
[0630]
第十步
[0631]
(9s)-7-丙烯酰基-3-氟-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-9-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-1,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12h)-酮15
[0632]
将化合物15j(134mg，0.25mmol)溶解于10ml二氯甲烷中，加入三乙胺(182mg，1.77mmol，0.25ml)，冷却到0℃，再滴加入丙烯酰氯(45mg，0.497mmol，40μl)，搅拌反应1小时。加入10ml饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，分液，水相用二氯甲烷(30ml
×
2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后溶解于20ml甲醇中，再加入250mg碳酸氢钠，加热到60℃反应1小时。将反应液冷却到室温，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶薄层色谱法以展开体系a纯化得到标题化合物15(80mg，产率：54.21mmol)。
[0633]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0634]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.11-10.12(m,1h),8.35(d,1h),7.22-7.27(m,1h),7.15-7.16(m,1h),6.74-6.81(m,1h),6.64-6.71(m,2h),6.21-6.27(m,1h),5.77-5.83(m,1h),4.80-4.92(m,2h),4.42-4.72(m,3h),3.97-4.27(m,2h),3.42-3.88(m,1h),2.62-2.78(m,1h),1.88-1.95(m,3h),1.24-1.42(m,3h),1.05-1.09(m,3h),0.91-0.97(m,3h)。
[0635]
将化合物15(80mg，0.904mmol)进行手性制备(分离条件：手性制备柱chiralpak id 20*250mm，10μm；流动相：正己烷：乙醇( 0.1％氨甲醇)＝50/50，流速：30ml/min)，收集其相应组分，减压浓缩，得到目标化合物15-2(15.07mg)/15-1(15.93mg)和一混合物，所得的混合物再经手性制备(分离条件：手性制备柱chiralpak ad 20*250mm，10μm；流动相：正
己烷：乙醇( 0.1％氨甲醇)＝50/50，流速：30ml/min)得到目标化合物15-4(10.91mg)/15-3(20.38mg)。
[0636]
单一构型化合物15-4：
[0637]
手性hplc分析:保留时间6.138分钟，手性纯度：95.4％(色谱柱：oz phenomenex lux cellulose-2 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0638]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0639]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.11(s,1h),8.35(d,1h),7.24(q,1h),7.15(d,1h),6.80(brs,1h),6.71(d,1h),6.66(t,1h),6.23-6.30(m,1h),5.78(d,1h),4.88-4.92(m,1h),4.69-4.72(m,1h),4.43-4.51(m,3h),3.97-4.23(m,3h),2.61-2.66(m,1h),1.95(s,3h),1.25(s,3h),1.06(d,3h),0.91(d,3h)。
[0640]
单一构型化合物15-3：
[0641]
手性hplc分析:保留时间7.416分钟，手性纯度：100％(色谱柱：oz phenomenex lux cellulose-2 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0642]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0643]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.12(s,1h),8.35(d,1h),7.25(q,1h),7.15(d,1h),6.80(brs,1h),6.71(d,1h),6.66(t,1h),6.22-6.26(m,1h),5.77(d,1h),4.88-4.90(m,1h),4.63-4.67(m,1h),4.52-4.55(m,1h),4.41-4.43(m,2h),4.00-4.19(m,3h),2.73-2.78(m,1h),1.88(s,3h),1.25(s,3h),1.06(d,3h),0.96(d,3h)。
[0644]
单一构型化合物15-2：
[0645]
手性hplc分析:保留时间21.443分钟，手性纯度：94.7％(色谱柱：oz phenomenex lux cellulose-2 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0646]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0647]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.12(s,1h),8.35(d,1h),7.24(q,1h),7.15(d,1h),6.74-6.81(m,1h),6.71(d,1h),6.66(t,1h),6.22-6.27(m,1h),5.76-5.83(m,1h),4.80-4.92(m,2h),4.56-4.72(m,2h),4.17-4.27(m,1h),3.97-4.10(m,1h),3.75-3.87(m,1h),3.40-3.47(m,1h),2.65-2.71(m,1h),1.94(s,3h),1.39-1.42(m,3h),1.08(d,3h),0.93(d,3h)。
[0648]
单一构型化合物15-1：
[0649]
手性hplc分析:保留时间8.421分钟，手性纯度：100％(色谱柱：oz phenomenex lux cellulose-2 150
×
4.6mm，5μm；流动相：正己烷：乙醇＝50/50，流速：1.0ml/min)。
[0650]
ms m/z(esi):589.1[m 1]。
[0651]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.11(s,1h),8.35(d,1h),7.24(q,1h),7.15(d,1h),6.74-6.81(m,1h),6.71(d,1h),6.66(t,1h),6.22-6.27(m,1h),5.76-5.83(m,1h),4.86-4.92(m,2h),4.59-4.66(m,2h),4.17-4.27(m,1h),3.97-4.11(m,1h),3.75-3.89(m,1h),3.40-3.48(m,1h),2.73-2.78(m,1h),1.90(s,3h),1.39-1.48(m,3h),1.07(d,3h),0.94(d,3h)。
[0652]
生物学评价
[0653]
测试例1：h358细胞erk磷酸化抑制实验生物学评价
[0654]
一、测试目的
[0655]
本实验通过检测化合物对h358细胞erk磷酸化抑制作用，根据ic
50
大小评价本公开化合物对kras靶点(含g12c突变)的抑制作用。
[0656]
二、实验方法
[0657]
h358细胞(atcc，crl-5807)用含有10％胎牛血清的rpmi1640(hyclone，sh30809.01)完全培养基进行培养。实验第一天，使用完全培养基将h358细胞以25,000个/孔的密度种于96孔板，每孔190μl细胞悬液，放置37℃，5％co2细胞培养箱培养过夜。第二天，每孔加入10μl用完全培养基配制的梯度稀释的待测化合物，化合物的终浓度是从10μm开始进行6倍梯度稀释的9个浓度点，设置含有0.5％dmso的空白对照，孔板放置37℃，5％co2的细胞培养箱孵育3个小时。3小时后，取出96孔细胞培养板，吸掉培养基，每孔加入200μl pbs(上海源培生物科技股份有限公司，b320)洗一遍。吸掉pbs，每孔加入50μl含封闭液(blocking reagent，cisbio，64kb1aac)的裂解缓冲液(lysis buffer，cisbio，64kl1fdf)，孔板放置振荡器上室温震荡裂解30分钟。裂解后用移液器吹打混匀，每孔各转移16μl裂解液分别至两块htrf 96孔检测板(cisbio，66pl96100)中，之后两块板分别加入4μl预混的phospho-erk1/2抗体溶液(cisbio，64aerpeg)或4μl预混的total-erk1/2抗体溶液(cisbio，64nrkpeg)。微孔板用封板膜密封，在微孔板离心机中离心1分钟，室温避光孵育过夜。第三天，使用pherastar多功能酶标仪(bmg labtech，s/n 471-0361)读取337nm波长激发，665nm和620nm波长发射的荧光值。
[0658]
三、数据分析
[0659]
用graphpad prism软件根据化合物浓度和perk/总erk的比值计算化合物抑制活性的ic
50
值，结果参见下表3。
[0660]
表3本公开化合物对h358细胞erk磷酸化抑制作用的ic
50
值。
[0661]
实施例编号ic
50
(nm)110.61-135.81-24.928.52-114.22-22.63123-1107.83-23.5513.85-1115-291.66106-161.96-24.574.27-112
7-21.781.98-114.18-20.61158.3123.213191411.4150.715-46.315-357.515-20.515-16.6
[0662]
结论：本公开化合物对h358细胞erk磷酸化具有很好的抑制作用。
[0663]
测试例2：mia paca-2细胞erk磷酸化抑制实验生物学评价
[0664]
一、测试目的
[0665]
本实验通过检测化合物对mia paca-2细胞erk磷酸化抑制作用，根据ic
50
大小评价本公开化合物对kras靶点(含g12c突变)的抑制作用。
[0666]
二、实验方法
[0667]
mia paca-2细胞(atcc，crl-1420)用含有10％胎牛血清和2.5％马血清的dmem/high glucose(ge，sh30243.01)完全培养基进行培养。实验第一天，使用完全培养基将mia paca-2细胞以25,000个/孔的密度种于96孔板，每孔190μl细胞悬液，放置37℃，5％co2细胞培养箱培养过夜。第二天，每孔加入10μl用完全培养基配制的梯度稀释的待测化合物，化合物的终浓度是从10μm开始进行6倍梯度稀释的9个浓度点，设置含有0.5％dmso的空白对照，孔板放置37℃，5％co2的细胞培养箱孵育4个小时。4小时后，取出96孔细胞培养板，吸掉培养基，每孔加入200μl pbs(上海源培生物科技股份有限公司，b320)洗一遍。吸掉pbs，每孔加入50μl含封闭液(blocking reagent，cisbio，64kb1aac)的裂解缓冲液(lysis buffer，cisbio，64kl1fdf)，孔板放置振荡器上室温震荡裂解30分钟。裂解后用移液器吹打混匀，每孔各转移16μl裂解液分别至两块htrf96孔检测板(cisbio，66pl96100)中，之后两块板分别加入4μl预混的phospho-erk1/2抗体溶液(cisbio，64aerpeg)或4μl预混的total-erk1/2抗体溶液(cisbio，64nrkpeg)。微孔板用封板膜密封，在微孔板离心机中离心1分钟，室温避光孵育过夜。第三天，使用pherastar多功能酶标仪(bmg labtech，s/n 471-0361)读取337nm波长激发，665nm和620nm波长发射的荧光值。
[0668]
三、数据分析
[0669]
用graphpad prism软件根据化合物浓度和perk/总erk的比值计算化合物抑制活性的ic
50
值，结果参见下表4。
[0670]
表4本公开化合物对mia paca-2细胞erk磷酸化抑制作用的ic
50
值。
[0671][0672][0673]
结论：本公开化合物对mia paca-2细胞erk磷酸化具有很好的抑制作用。
[0674]
测试例3：mia paca-2细胞增殖实验生物学评价
[0675]
一、测试目的
[0676]
通过测试本公开化合物对mia paca-细胞的增殖抑制作用，评价本公开化合物对kras靶点(含g12c突变)的抑制作用。
[0677]
二、实验方法
[0678]
mia paca-2细胞(atcc，crl-1420)用完全培养基即含有10％胎牛血清和2.5％马血清的dmem/high glucose(ge，sh30243.01)完全培养基进行培养。实验第一天，使用完全培养基将mia paca-2细胞以500个细胞/孔的密度种于96孔板，每孔90μl细胞悬液，放置37℃，5％co2细胞培养箱培养过夜。第二天，每孔加入10μl用完全培养基配制的梯度稀释的待测化合物，化合物的终浓度是从10μm开始进行5倍梯度稀释的9个浓度点，设置含有0.5％dmso的空白对照，孔板放置37℃，5％co2的细胞培养箱培养72小时。第五天，取出96孔细胞培养板，每孔加入50μlluminescent cell viability assay(发光细胞活性检测试剂)(promega，g7573)，室温放置10分钟后，使用多功能微孔板酶标仪(perkinelmer，victor 3)读取发光信号值。
[0679]
三、数据分析
[0680]
用graphpad prism软件计算化合物抑制活性的ic
50
值，结果参见下表5。
[0681]
表5本公开化合物对mia paca-2细胞增殖抑制的ic
50
值。
[0682]
实施例编号ic
50
(nm)16.71-141.91-26.8211.52-23.52-140.0539.3610.36-172.26-28.97-161.17-29.88118-175.98-211.81241.51388.21441.8152.315-413.415-20.315-145.6
[0683]
结论：本公开化合物对mia paca-2细胞增殖具有很好的抑制作用。
[0684]
测试例4：h358细胞增殖实验生物学评价
[0685]
一、测试目的
[0686]
通过测试本公开化合物对h358细胞的增殖抑制作用，评价本公开化合物对kras靶
点(含g12c突变)的抑制作用。
[0687]
二、实验方法
[0688]
h358细胞(atcc，crl-5807)用完全培养基即含有10％胎牛血清(corning，35-076-cv)的rpmi1640培养基(hyclone，sh30809.01)进行培养。实验第一天，使用完全培养基将h358细胞以1500个细胞/孔的密度种于96孔板，每孔100μl细胞悬液，放置37℃，5％co2细胞培养箱培养过夜。第二天，每孔加入10μl用完全培养基配制的梯度稀释的待测化合物，化合物的终浓度是从10μm开始进行5倍梯度稀释的9个浓度点，设置含有0.5％dmso的空白对照，孔板放置37℃，5％co2的细胞培养箱培养120小时。第七天，取出96孔细胞培养板，每孔加入50μl luminescent cell viability assay(发光细胞活性检测试剂)(promega，g7573)，室温放置10分钟后，使用多功能微孔板酶标仪(perkinelmer，victor 3)读取发光信号值。
[0689]
三、数据分析
[0690]
用graphpad prism软件计算化合物抑制活性的ic
50
值，结果参见下表6。
[0691]
表6本公开化合物对h358细胞增殖抑制的ic
50
值。
[0692]
实施例编号ic
50
(nm)13.71-131.71-24.328.42-121.12-23.6512.65-121.45-286.466.36-193.86-27.373.57-119.37-2289.18-25.715-47.115-374.915-20.315-116.7
[0693]
结论：本公开化合物对h358细胞增殖具有很好的抑制作用。