N-乙酰基-D-氨基葡萄糖的晶型及其制备方法、应用与流程

n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的晶型及其制备方法、应用
技术领域
1.本发明涉及一种n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的晶型及其制备方法、应用。


背景技术：

2.n-乙酰基-d-氨基葡萄糖是生物体内多种多糖的组成单位，它是合成双歧因子的重要前体，在生物体内具有许多重要生理功能，例如可以作为几丁质的单体，通过β-1,4-糖苷键连接而成几丁质。其化学式为c8h
15
no6，为白色粉末，具有易溶于水的性质，结构式如式i或式ii所示。
[0003][0004]
n-乙酰基-d-氨基葡萄糖可以作为食品抗氧化剂及婴幼儿食品添加剂，糖尿病患者甜味剂，也可以作为临床上应用的药物。临床主要用于增强人体免疫系统的功能，抑制癌细胞或纤维细胞的过度生长，对癌症和恶性肿瘤起到抑制和治疗作用；能治疗各种炎症，降低体内胆固醇含量；作为合成双歧因子的重要前体，能够促进双岐乳杆菌的生长繁殖，起到调节肠道的作用。
[0005]
药物多晶型现象的研究是制药领域的前沿课题。药物的不同晶型存在内在结构的差异，可能具有不同的理化性质，如溶解度、溶出速率等，影响药物的生物利用度。此外，药物新晶型的发现可以延长药物专利的生命周期并设置技术壁垒，对于固态药物开发具有重要的意义。与改变药物结构相比，改变化合物的晶型明显更加实用、安全、经济。
[0006]
鉴于此，开发具有优势性能的n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的晶型具有十分重要的意义。


技术实现要素：

[0007]
本发明的目的在于提供一种与现有技术不同的n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的晶型及其制备方法、应用。本发明所提供的n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的晶型具有较低的吸湿性，较
好的流动性，较快的溶出速率，且制备方法简单。n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的晶型对药物的优化和开发具有重要的价值。
[0008]
本发明提供了一种n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型，其使用cu-kα辐射，以2 θ角度表示的x射线粉末衍射图在下述位置有衍射峰：10.14
±
0.20
°
，15.47
±
0.20
°
，17.14
±
0.20
°
，19.86
±
0.20
°
，20.19
±
0.20
°
，20.82
±
0.20
°
，27.62
±
0.20
°
，30.81
±
0.20
°
，31.27
±
0.20
°
。
[0009]
本发明中，优选地，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的x射线粉末衍射图谱中，还在下述一个或多个位置有衍射峰：15.99
±
0.20
°
，18.19
±
0.20
°
，23.63
±
0.20
°
，24.05
±
0.20
°
，24.37
±
0.20
°
，24.66
±
0.20
°
，25.18
±
0.20
°
，25.55
±
0.20
°
，25.86
±
0.20
°
，27.12
±
0.20
°
，29.59
±
0.20
°
，29.99
±
0.20
°
，31.95
±
0.20
°
，34.54
±
0.20
°
，35.72
±
0.20
°
，36.07
±
0.20
°
，36.53
±
0.20
°
，37.07
±
0.20
°
，38.23
±
0.20
°
，38.90
±
0.20
°
。
[0010]
本发明中，优选地，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的x射线粉末衍射图在下述位置有衍射峰：10.14
±
0.20
°
，15.47
±
0.20
°
，15.99
±
0.20
°
，17.14
±
0.20
°
，18.19
±
0.20
°
，19.86
±
0.20
°
，20.19
±
0.20
°
，20.82
±
0.20
°
，23.63
±
0.20
°
，24.05
±
0.20
°
，24.37
±
0.20
°
，24.66
±
0.20
°
，25.18
±
0.20
°
，25.55
±
0.20
°
，25.86
±
0.20
°
，27.12
±
0.20
°
，27.62
±
0.20
°
，29.59
±
0.20
°
，29.99
±
0.20
°
，30.81
±
0.20
°
，31.27
±
0.20
°
。
[0011]
本发明中，优选地，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的x射线粉末衍射图在下述位置有衍射峰：10.14
±
0.20
°
，15.47
±
0.20
°
，15.99
±
0.20
°
，17.14
±
0.20
°
，18.19
±
0.20
°
，19.86
±
0.20
°
，20.19
±
0.20
°
，20.82
±
0.20
°
，23.63
±
0.20
°
，24.05
±
0.20
°
，24.37
±
0.20
°
，24.66
±
0.20
°
，25.18
±
0.20
°
，25.55
±
0.20
°
，25.86
±
0.20
°
，27.12
±
0.20
°
，27.62
±
0.20
°
，29.59
±
0.20
°
，29.99
±
0.20
°
，30.81
±
0.20
°
，31.27
±
0.20
°
，31.95
±
0.20
°
，34.54
±
0.20
°
，35.72
±
0.20
°
，36.07
±
0.20
°
，36.53
±
0.20
°
，37.07
±
0.20
°
，38.23
±
0.20
°
，38.90
±
0.20
°
。
[0012]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的xrpd图谱如图1所示。
[0013]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的xrpd图谱解析数据如表1所示：
[0014]
表1n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的xrpd解析数据
[0015]
[0016][0017]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的xrpd图谱解析数据如表2所示：
[0018]
表2n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的xrpd解析数据
[0019]
[0020][0021]
本发明中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型为无溶剂化物。
[0022]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的差示扫描量热曲线(differential scanning calorimetry，dsc)在212.6～219.3℃呈现吸收峰，在217.3℃有最大吸收。
[0023]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的dsc图谱如图2所示。
[0024]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的热重分析曲线(thermogravimetric analysis，tga)在226.76℃失重17.4％。
[0025]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的tga图谱如图3所示。
[0026]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的熔点为196～204℃。
[0027]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的d10为7.10μm。
[0028]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的d50为58.64μm。
[0029]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的d90为188.94μm。
[0030]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的休止角为37
°
。
[0031]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的堆密度为0.58g/cm3。
[0032]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的振实密度为0.94g/cm3。
[0033]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的卡尔指数为38％。
[0034]
本发明还提供了一种n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的制备方法，其包括下述步骤：
[0035]
将混合液a降温后经第一次搅拌得到混合液a1，将所述混合液a1降温后经第二次搅拌，得到n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型；其中：
[0036]
所述混合液a为含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖和乙醇的混合溶液，所述乙醇在所述混合液a中的体积百分比为30～35％；
[0037]
所述混合液a的温度≥55℃；
[0038]
所述第一次搅拌时的温度为45～48℃；
[0039]
所述第二次搅拌时的温度为-2～2℃。
[0040]
本发明中，所述混合液a可采用下述方法制得：将含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液和溶剂a混合，即得得到混合液a；所述溶剂a为无水乙醇。
[0041]
其中，所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液可采用n-乙酰基-d-氨基葡萄糖和水混合制得。
[0042]
所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖可为粗品。
[0043]
当采用n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品时，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品(例如纯度为95～98％的n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品，再例如95％或97.5％的n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品)和所述水的质量比可为(0.5～1):1，例如0.66:1。
[0044]
当采用n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品时，所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液在所述混合之前还可经本领域常规的前处理，例如脱色处理。
[0045]
所述脱色处理可为本领域常规的处理方式，例如采用药用炭进行脱色处理。
[0046]
所述脱色处理的温度可为80～85℃。
[0047]
所述脱色处理的时间可根据n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品的量进行确定，例如当所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品为117kg时，脱色的时间可为0.5～1h。
[0048]
所述脱色处理后，可经过滤获得脱色后的所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液。
[0049]
其中，所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液和所述溶剂a的体积比可为(150～200):152，例如187:152。
[0050]
其中，所述混合液a可通过将所述溶剂a添加至所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液中制得。
[0051]
本发明中，优选地，所述乙醇在所述混合液a中的体积百分比为33～34％，例如33.34％。
[0052]
本发明中，所述混合液a的降温速率可为0.5～1.5℃/min，例如1℃/min。
[0053]
本发明中，所述第一次搅拌时的时间可为0.5～3h，例如1h。
[0054]
本发明中，所述混合液a1的降温速率可为0.5～1.5℃/min，例如1℃/min。
[0055]
本发明中，所述第二次搅拌时的时间可为1～5h，例如3h。
[0056]
本发明中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型还可经本领域常规的后处理，例如离心、洗涤和干燥等。
[0057]
其中，所述洗涤的溶剂可为预冷至-2～2℃的95％乙醇，百分比是指体积百分比。
[0058]
其中，所述洗涤可为洗涤两次。
[0059]
其中，所述干燥可为真空干燥。
[0060]
本发明还提供了一种n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型，其采用上述方法制得。
[0061]
本发明提供了一种n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型，其使用cu-kα辐射，以2 θ角度表示的x射线粉末衍射图在下述位置有衍射峰：10.10
±
0.20
°
，15.44
±
0.20
°
，17.12
±
0.20
°
，18.14
±
0.20
°
，19.84
±
0.20
°
，20.16
±
0.20
°
，20.78
±
0.20
°
，27.60
±
0.20
°
，31.30
±
0.20
°
。
[0062]
本发明中，优选地，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型的x射线粉末衍射图谱中，还在下述一个或多个位置有衍射峰：15.92
±
0.2
°
，23.02
±
0.2
°
，23.60
±
0.2
°
，24.68
±
0.2
°
，25.84
±
0.2
°
，30.00
±
0.2
°
，31.88
±
0.2
°
，34.52
±
0.2
°
，36.50
±
0.2
°
，36.96
±
0.2
°
，38.92
±
0.2
°
。
[0063]
本发明中，优选地，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的x射线粉末衍射图在下述位置有衍射峰：10.10
±
0.2
°
，15.44
±
0.2
°
，15.92
±
0.2
°
，17.12
±
0.2
°
，18.14
±
0.2
°
，19.84
±
0.2
°
，20.16
±
0.2
°
，20.78
±
0.2
°
，23.02
±
0.2
°
，23.60
±
0.2
°
，24.68
±
0.2
°
，25.84
±
0.2
°
，27.60
±
0.2
°
，30.00
±
0.2
°
，31.30
±
0.2
°
。
[0064]
本发明中，优选地，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的x射线粉末衍射图在下述位置有衍射峰：10.10
±
0.2
°
，15.44
±
0.2
°
，15.92
±
0.2
°
，17.12
±
0.2
°
，18.14
±
0.2
°
，19.84
±
0.2
°
，20.16
±
0.2
°
，20.78
±
0.2
°
，23.02
±
0.2
°
，23.60
±
0.2
°
，24.68
±
0.2
°
，25.84
±
0.2
°
，27.60
±
0.2
°
，30.00
±
0.2
°
，31.30
±
0.2
°
，31.88
±
0.2
°
，34.52
±
0.2
°
，36.50
±
0.2
°
，36.96
±
0.2
°
，38.92
±
0.2
°
。
[0065]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的xrpd图谱如图4所示。
[0066]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的xrpd图谱解析数据如表3所示：
[0067]
表3n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的xrpd解析数据
[0068]
编号2θ角(
°
)相对强度(％)编号2θ角(
°
)相对强度(％)110.101001124.6815215.44741225.8412315.9271327.6064417.12331430.0017518.14131531.3094619.84391631.889720.16251734.5211820.78311836.508923.0241936.96161023.6092038.9219。
[0069]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的xrpd图谱解析数据如表4所示：
[0070]
表4n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的xrpd解析数据
[0071][0072]
注：上表中“/”表示未检测或无法检测该数据。
[0073]
本发明中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型为无溶剂化物。
[0074]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的差示扫描量热曲线在212.29～226.7℃呈现吸收峰，在214.95℃有最大吸收。
[0075]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的dsc图谱如图5所示。
[0076]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的热重分析曲线在226.60℃失重14.4％。
[0077]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的tga图谱如图6所示。
[0078]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的熔点为196～203℃。
[0079]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的d10为5.51μm。
[0080]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的d50为40.12μm。
[0081]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的d90为147.38μm。
[0082]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的休止角为46
°
。
[0083]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的堆密度为0.40g/cm3。
[0084]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的振实密度为0.69g/cm3。
[0085]
本发明的一些方案中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的卡尔指数为42％。
[0086]
本发明还提供了一种n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型的制备方法，其包括下述步骤：
[0087]
将混合液b降温后经第三次搅拌，得到n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型；其中：
[0088]
所述混合液b为含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖和乙醇的混合溶液，所述乙醇在所述混
合液b中的体积百分比为40～45％；
[0089]
所述混合液b的温度为42～48℃；
[0090]
所述第三次搅拌时的温度为-2～2℃。
[0091]
本发明中，所述混合液b可采用下述方法制得：将含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液和溶剂b混合，得到混合液b；所述溶剂b为95％乙醇。
[0092]
其中，所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液可采用n-乙酰基-d-氨基葡萄糖和水混合制得。
[0093]
所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖可为粗品。
[0094]
当采用n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品时，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品(例如纯度为95～98％的n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品，再例如95％或97.5％的n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品)和所述水的质量比可为(0.5～1):1，例如0.59:1。
[0095]
当采用n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品时，所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液在所述混合之前还可经本领域常规的前处理，例如脱色处理。
[0096]
所述脱色处理可为本领域常规的处理方式，例如采用活性炭进行脱色处理。
[0097]
所述脱色处理的温度可为80～85℃，例如85℃。
[0098]
所述脱色处理的时间可根据n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品的量进行确定，例如当所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品为11.8kg时，脱色的时间可为3min。
[0099]
所述脱色处理后，可经过滤获得脱色后的所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液。
[0100]
其中，所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液和所述溶剂b的体积比可为(1.0～1.5):1，例如1.25:1。
[0101]
其中，所述混合液b可通过将所述溶剂b添加至所述含n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的溶液中制得。
[0102]
本发明中，所述混合液b的温度优选为45℃。
[0103]
本发明中，优选地，所述乙醇在所述混合液b中的体积百分比为42～43％，例如42.22％。
[0104]
本发明中，所述混合液b的降温速率可为0.5～1.5℃/min，例如1℃/min。
[0105]
本发明中，所述第三次搅拌时的温度可为-2℃。
[0106]
本发明中，所述第三次搅拌时的时间可为5～15h，例如10h。
[0107]
本发明中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型还可经本领域常规的后处理，例如离心、洗涤和干燥等。
[0108]
其中，所述洗涤的溶剂可为80％乙醇。
[0109]
其中，所述洗涤可为洗涤两次。
[0110]
其中，所述干燥可为真空干燥。
[0111]
本发明还提供了一种n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的b晶型，其采用上述方法制得。
[0112]
本发明还提供了一种上述晶型a和/或晶型b在制备治疗免疫系统、癌症、炎症、疼痛或肠道相关病症的药物中的应用。
[0113]
本发明还提供了一种药物组合物，其包含所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型和/或b晶型，以及药学上可接受的辅料。
[0114]
其中，所述的晶型可为治疗有效量。
[0115]
其中，所述药学上可接受的辅料的选择因施用途径和作用特点而异，通常是填充剂、稀释剂、表面活性剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、防腐剂、缓冲剂、等渗剂、润滑剂、乳化剂和助悬剂中的一种或多种。
[0116]
其中，所述药学上可接受的辅料可为微晶纤维素、低取代羟丙纤维素和二氧化硅。
[0117]
其中，所述药物组合物可包含下述组分：所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的a晶型和/或b晶型100mg、微晶纤维素102mg、低取代羟丙纤维素23mg、二氧化硅3.5mg。
[0118]
本发明还提供了一种n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的制备方法，其包括下述步骤：
[0119]
(1)在溶剂c中，在三乙胺存在下，将d-氨基葡萄糖和醋酸酐反应，得混合液c，将所述混合液c浓缩，得混合液d；
[0120]
(2)将所述混合液d在-2～2℃的条件下搅拌析晶，即可。
[0121]
步骤(1)中，所述溶剂c可为乙醇。
[0122]
步骤(1)中，所述醋酸酐和所述三乙胺的体积比可为15:6.5。
[0123]
步骤(1)中，所述d-氨基葡萄糖质量kg和所述三乙胺的体积l之比可为本领域常规的比例，例如其比例为10:6.5。
[0124]
步骤(1)中，所述反应的温度可为40～50℃，例如45℃。
[0125]
步骤(1)中，所述反应的时间可根据投料量进行确定，例如d-氨基葡萄糖为10kg时，反应时间可为8h。
[0126]
步骤(2)中，所述搅拌的温度可为0℃。
[0127]
步骤(2)中，所述搅拌的时间可为8h。
[0128]
步骤(2)中，所述n-乙酰基-d-氨基葡萄糖还可经本领域常规的后处理，例如离心、洗涤和干燥等。
[0129]
其中，所述洗涤的溶剂可为80％乙醇。
[0130]
其中，所述洗涤可为洗涤两次。
[0131]
其中，所述干燥可为真空干燥。
[0132]
本发明中，乙醇中的百分比是指体积百分比。
[0133]
在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
[0134]
本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0135]
本发明的积极进步效果在于：
[0136]
本发明所提供的n-乙酰基-d-氨基葡萄糖的晶型具有较低的吸湿性，较好的流动性，较快的溶出速率，且制备方法简单，对药物的优化和开发具有重要的价值。
附图说明
[0137]
图1为实施例2中制得的晶型的cu-kα辐射的xrpd谱图。
[0138]
图2为实施例2中制得的晶型的dsc谱图。
[0139]
图3为实施例2中制得的晶型的tga谱图。
[0140]
图4为实施例3中制得的晶型的cu-kα辐射的xrpd谱图。
[0141]
图5为实施例3中制得的晶型的dsc谱图。
[0142]
图6为实施例3中制得的晶型的tga谱图。
[0143]
图7为实施例2中制得的晶型的晶习图。
[0144]
图8为实施例3中制得的晶型的晶习图。
具体实施方式
[0145]
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0146]
下述实施例、对比例中使用仪器、方法如下：
[0147]
(1)x-射线粉末衍射(x-ray powder diffractometer,xrpd)
[0148]
仪器型号：d/b型转靶x-射线衍射仪
[0149]
测试方法：大约10～20mg样品用于xrpd检测。
[0150]
详细的xrpd参数如下：
[0151]
x-ray发生器：cu,kα,
[0152]
管电压：20kv，管电流：40ma.
[0153]
发射狭缝：0.60mm
[0154]
探测器狭缝：10.50mm
[0155]
防散射狭缝：7.10mm
[0156]
扫描范围(2θ角)：4-40deg.
[0157]
步长：0.02deg
[0158]
速率：0.1秒
[0159]
样品盘转速：15rpm
[0160]
(2)差热分析(differential scanning calorimeter,dsc)
[0161]
仪器型号：dsc q2000差示扫描量热仪
[0162]
测试方法：取样品(0.5～1mg)置于dsc铝锅内进行测试，在50ml/min n2条件下，以10℃/min的升温速率，加热样品从室温到300℃。
[0163]
(3)热重分析(thermal gravimetric analyzer,tga)
[0164]
仪器型号：ta q5000 ir热重分析仪
[0165]
测试方法：取样品(2～5mg)置于tga铂金锅内进行测试，在25ml/min n2条件下，以10℃/min的升温速率，加热样品从室温到400℃或失重20％。
[0166]
实施例1乙酰氨基葡萄糖粗品的制备
[0167]
在200l反应釜中加乙醇100l，搅拌下投原料d-氨基葡萄糖10kg，三乙胺6.5l，45℃缓缓滴加15l醋酸酐，45℃反应8小时后，用茚三酮检验阴性后，即认为反应完全。真空浓缩，浓缩至有少量晶体析出，冷却析晶，0℃下搅拌结晶8小时，离心机甩干，用10l 80％乙醇分两次洗晶，充分甩干得n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗品湿重约11.8kg，折干粗品收率为95.0％，取少量粗品真空烘干，送检核磁。1hnmr-dmso-d6：7.67(d,1h)，6.44(t,1h)，4.92(m,2h)，4.65(d,1h)，4.45(t,1h)，3.62(m,1h)，3.57(m,1h)，3.51(m,1h)，3.47(m,1h)，3.45(m,1h)，3.13(m,1h)，1.83(t,3h)。
[0168]
实施例2乙酰氨基葡萄糖重结晶精制(方法一)
[0169]
在500l反应釜中加入纯化水177kg，n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗湿品117kg(根据实
施例1中的方法制得，粗品纯度为97.5％)，加入3kg药用炭，搅拌，加热至80～85℃，搅拌脱色0.5小时，趁热过滤至2000l反应釜中，加入10kg纯化水淋洗釜壁及滤饼，压滤至2000l反应罐，控内温≥55℃的条件下，由经滤芯过滤器加入无水乙醇120kg(无水乙醇全部加入后，混合体系中乙醇的体积浓度为33.34％)，开启降温，缓慢降温(缓慢降温的速率约为1℃/min)，并在析晶点保温搅拌1h(析晶点温度约为45～48℃)，继续降温至-2～2℃(该过程中的降温速率约为1℃/min)，并于-2～2℃下搅拌析晶3小时，将料液放至离心机中进行离心，滤饼用预冷至-2～2℃的95％乙醇(10kg/次)洗涤二次，离心至无液体甩出，停止离心，取样，称重，得n-乙酰基-d-氨基葡萄糖湿品，减压真空烘料得成品a(n-乙酰基-d-氨基葡萄糖)69.88kg，收率54.25％(该收率为反应原料
→
粗品
→
成品a的总收率)，纯度为99.94％。
[0170]
成品a经pxrd检测，2θ角在10.14，15.47，17.14，19.86，20.19，20.82，27.62，30.81，31.27处有特征吸收(如图1所示)；
[0171]
dsc检测显示，样品在212.6～219.3℃呈现吸收峰，在217.3℃有最大吸收(如图2所示)；
[0172]
tga检测表明样品在温度升至226.76℃后失重17.4％(如图3所示)。
[0173]
实施例3乙酰氨基葡萄糖重结晶精制(方法二)
[0174]
将11.8kg n-乙酰基-d-氨基葡萄糖粗湿品(根据实施例1中的方法制得，纯度为95％，纯品含量为11.21kg)投入反应釜中，加入20l水和0.2kg活性炭，加热至85℃搅拌脱色3分钟后，趁热压滤至结晶釜中，降温至45℃，保温搅拌下加入95％乙醇16l(95％乙醇全部加入后，混合体系中乙醇的体积浓度为42.22％)，结束后，缓缓降低结晶釜内结晶液温度(降温的速率为1℃/min)，降至-2℃，继续搅拌10小时后放料至离心机离心甩滤，用2l 80％乙醇洗晶，离心再用等量乙醇同法洗晶，离心，出料，真空烘干得成品b(n-乙酰基-d-氨基葡萄糖)5.13kg，收率50.01％(该收率为反应原料
→
粗品
→
成品a的总收率)，纯度为99.80％。
[0175]
成品b经pxrd检测，2θ角在10.10，15.44，17.12，18.14，19.84，20.16，20.78，27.60，31.30处有特征吸收(如图4所示)；
[0176]
dsc检测显示，样品在212.29～226.7℃呈现吸收峰，在214.95℃有最大吸收(如图5所示)；
[0177]
tga检测表明样品在温度升至226.60℃后失重14.4％(如图6所示)。
[0178]
效果实施例1
[0179]
1、外观
[0180]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b观察其外观，如表5所示。
[0181]
表5
[0182]
方法一方法二白色晶体淡黄色细粉
[0183]
2、熔点
[0184]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b检测其熔点，如表6所示。
[0185]
表6
[0186]
方法一方法二196～204℃196～203℃
[0187]
3、溶解度
[0188]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b检测其溶解度，如表7所示。
[0189]
表7
[0190][0191]
4、纯度
[0192]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b检测其纯度，如表8所示。
[0193]
纯度的检测方法参照高效液相色谱法(2020年版中国药典第四部通则0512)测定。具体条件如下：
[0194]
色谱条件
[0195]
色谱柱：4.6mm
×
25cm；5μm packing l8；
[0196]
缓冲液：称取3.5g磷酸氢二钾，加水至1000ml，再加入0.25ml氢氧化铵，用磷酸调ph至7.5；
[0197]
流动相：乙腈：缓冲液(75:25)；
[0198]
检测波长：210nm；
[0199]
流速：1.5ml/min；
[0200]
取样量：10μl；
[0201]
柱温：35℃；
[0202]
运行时间：10min。
[0203]
溶液配制
[0204]
稀释液：乙腈：水(50:50)；
[0205]
空白溶液：稀释液。
[0206]
对照品溶液：取乙酰氨基葡萄糖对照品约200mg，精密称定，置10ml量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。
[0207]
供试品溶液：取本品约200mg，精密称定，置10ml量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。(同法配制2份)
[0208]
步骤
[0209]
待系统稳定后，进空白溶液1针，对照品溶液5针，供试品溶液各1针。
[0210]
要求
[0211]
5针对照品溶液峰面积rsd％不得大于2.0％，主峰与其相邻杂质的分离度大于1.5；主峰的保留时间约7min。
[0212]
计算方法
[0213]
含量％＝(ru/rs)
×
(cs/cu)100
[0214]ru
：供试品溶液峰面积；
[0215]rs
：5针对照品溶液平均峰面积
[0216]cs
：对照品溶液的浓度(mg/ml)；
[0217]cu
：供试品溶液的浓度(mg/ml)。
[0218]
表8
[0219]
方法一方法二
100.3％99.8％
[0220]
5、引湿性
[0221]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b检测其引湿性，如表9所示。
[0222]
按照(chp通则9103药物引湿性试验指导原则)测定。具体步骤如下：
[0223]
取干燥的具塞玻璃称量瓶，于试验前一天置于适宜的25℃
±
1℃恒温干燥器(下部放置氯化铵或硫酸铵饱和溶液)，精密称定重量(m1)。取供试品适量平铺于上述称量瓶中，精密称定重量(m2)。将称量瓶敞口并与瓶盖同置于上述恒温恒湿条件下24小时。盖好称量瓶盖子，精密称定重量(m3)，计算增重百分(％)。
[0224][0225]
表9
[0226]
方法一方法二0.09％0.18％
[0227]
6、晶习
[0228]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b观察其晶习，如图7、图8所示。
[0229]
根据图7、图8可知，成品a为柱状，成品b为板状，故成品a较成品b会有更好的流动性，便于制剂的生产。
[0230]
7、粒度分布
[0231]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b检测其粒度分布，如表10所示。
[0232]
粒度分布的检测方法如下：
[0233]
仪器：helos-rodos粒度仪；
[0234]
分散方法：干法2.0bar 65％2mm；
[0235]
进样方式：手动；
[0236]
镜头：r5。
[0237]
表10
[0238]
/方法一方法二d(10)(μm)7.105.51d(50)(μm)58.6440.12d(90)(μm)188.94147.38
[0239]
注：d10：一个样品的累计粒度分布数达到10％时所对应的粒径。它的物理意义是粒径小于它的颗粒占10％。d10常用来表示微粒细端的粒度指标。
[0240]
d50：表示整个样品粒径分布中，颗粒累积分布为50％的微球粒径，即小于此粒径的颗粒体积含量占全部颗粒的50％。d50也常被用来表示样品的平均粒径。d50常用来表示微粒的平均粒度。
[0241]
d90：一个样品的累计粒度分布数达到90％时所对应的粒径。它的物理意义是粒径小于它的颗粒占90％。d90常用来表示微粒粗端的粒度指标。
[0242]
8、流动性
[0243]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b检测其流动性，如表11所示。
[0244]
休止角测定法：将粉末从距水平板25mm的漏斗中自然下落到水平板上，直至漏斗
下端无粉末流出，形成的圆锥和水平板间的角度θ即为休止角。测量圆锥的半径r(单位mm)，θ＝tan-1
(25/r)。
[0245]
表11
[0246]
/方法一方法二休止角37
°
46
°
[0247]
9、堆密度
[0248]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b检测其堆密度、振实密度和卡尔指数，如表12所示。
[0249]
堆密度、振实密度及卡尔指数的检测方法为：
[0250]
仪器：svm22振实密度仪(erweka)；
[0251]
称取粉末重m，缓缓加入量筒中，记录体积v1，然后采用振实密度测定仪震动5min，记录振实体积v2，计算颗粒的堆密度、振实密度和卡尔指数。堆密度＝m/v1；振实密度＝m/v2；卡尔指数％＝(振实密度-堆密度)/振实密度*100％。
[0252]
表12
[0253]
指标方法一方法二堆密度0.58g/cm30.40g/cm3振实密度0.94g/cm30.69g/cm3卡尔指数38％42％
[0254]
10、制剂溶出
[0255]
取实施例2、3中的制得的成品a、成品b检测其制剂溶出度，如表13所示。
[0256]
制剂的处方及制备工艺为：
[0257]
处方组成：原料药100mg(43.8％)、微晶纤维素102mg(44.6％)、低取代羟丙纤维素23mg(10.1％)、二氧化硅3.5mg(1.5％)。
[0258]
制备：
[0259]
1、将原料药粉碎后过80目筛，微晶纤维素、低取代羟丙纤维素过40目筛；
[0260]
2、称取处方量原料药、微晶纤维素、低取代羟丙纤维素至多向运动混合机内，混合15min；
[0261]
3、将上步混合后的物料置于干法制粒机中，进行干法制粒，1.2号筛网整粒，整粒转速15～20hz；
[0262]
4、将上步制得颗粒与处方量二氧化硅加入多向运动混合机中，总混15min；
[0263]
5、根据总混颗粒含量测定结果，计算标准装量及装量范围，填充胶囊；
[0264]
6、装瓶，将合格胶囊装入聚乙烯塑料药瓶中，30粒/瓶，电磁感应封口机封口。
[0265]
制剂溶出的检测方法参照中国药典第四部通则0931第三法(小杯法)，水介质100ml，50rpm。
[0266]
累积溶出度的检测方法为：
[0267]
取本品6粒，照溶出度测定法(中国药典2020年版第四部通则0931第三法)，以100ml经脱气的水为溶剂，转速为每分钟50转，依法操作，分别经5min、10min、15min、30min时取适量溶液滤过，取续滤液作为供试品溶液；另精密称取对照品适量，用水溶解并配制成每1ml中含1.0mg乙酰氨基葡萄糖的溶液，作为对照品溶液；照高效液相色谱法(2020年版中
国药典第四部通则0512)，分别将两种溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算出每粒在各个时间点的溶出量。
[0268]
色谱条件：
[0269]
色谱柱：4.6mm
×
25cm；5μm packing l8；
[0270]
缓冲液：称取3.5g磷酸氢二钾，加水至1000ml；再加入0.25ml氢氧化铵，用磷酸调ph至7.5；
[0271]
流动相：乙腈：缓冲液(75:25)；
[0272]
检测波长：210nm；
[0273]
流速：1.5ml/min；
[0274]
取样量：10μ1；
[0275]
柱温：35℃；
[0276]
运行时间：10min。
[0277]
表13
[0278]
取样时间点方法1方法25min60.1％40.1％10min99.8％80.6％15min101.3％100.5％30min100.8％101.1％