一种繁殖体提取物及其应用的制作方法

1.本发明属于生物学、农业和化学领域，具体涉及一种繁殖体(任何能够用于繁殖目的的生物材料)休眠期延长(指通过一定手段，使有生长能力的个体、器官、分生组织和细胞，生长和代谢出现暂时停顿、生命活动显著降低的方法)提取物及其应用。


背景技术：

2.休眠是指在适宜的条件下，有生长能力的个体、器官、分生组织和细胞不能开始生长的现象(rohde a,bhalerao rp.plant dormancy in the perennial context[j].trends in pl ant science,2007,12(5):217～223.)。
[0003]
休眠期是指有生长能力的个体、器官、分生组织和细胞，生长和代谢出现暂时停顿、生命活动显著降低的时期。
[0004]
休眠期延长是指通过一定手段，使有生长能力的个体、器官、分生组织和细胞，生长和代谢出现暂时停顿、生命活动显著降低。其与保鲜的区别在于：(1)对象不同：保鲜主要针对农产品，即农业活动中获得的植物、动物及其产品，对于农产品是否具有繁殖能力不进行要求；而休眠期延长针对的对象为任何可以用于繁殖目的的生物材料。(2)效果不同：保鲜主要针对待保鲜产品的减少蒸腾作用和微生物抑制作用，但经保鲜剂处理后的产品是否具有繁殖能力是未知的，甚至直接丧失了繁殖能力；而休眠期延长除与保鲜共有的作用外，其更为特殊的作用在于虽然暂缓了繁殖体的新陈代谢、延长了休眠期，却能够保持待储存繁殖体的繁殖活力，不影响其后续的繁殖体的繁殖发育。
[0005]
现有技术中通常采用物理处理(低温、低湿、低氧、和/或避光处理)，化学试剂处理，和上述两者的联合处理来延长繁殖体的休眠期，但当前的休眠期化学试剂处理通常存在环境影响危害，甚至致癌的问题，且相当一部分繁殖体并没有开发出休眠期延长产品。
[0006]
例如马铃薯的休眠期延长处理中使用的化学抑芽剂，包括市场化的抑芽药剂青鲜素、萘乙酸甲酯和3～氯苯基氨基甲酸异丙酯cipc，均存在环境危害大的问题；而新型抑芽药剂乙烯、香芹酮等则存在着成本偏高、技术不成熟等问题。
[0007]
还有其他具有生长能力的个体，如种子(如花生、大豆)、插条类植物(如柳条)、受精卵类(如鸡种蛋)等，针对其休眠期延长处理中通常采用物理处理，如降低个体含水量、降低贮藏温度、保证相对环境湿度和通风等；但是单纯物理处理对于个体休眠期限的延长有限，且现有技术中并没有针对某些个体开发出休眠期延长剂类产品。


技术实现要素：

[0008]
本发明的目的在于解决现有技术中繁殖体的休眠期延长剂存在环境危害或尚未开发出部分繁殖体休眠期延长剂的问题，提供了一种原生态的繁殖体休眠期延长提取物及其用途。
[0009]
为实现上述目的，本发明采用技术方案为：
[0010]
一种繁殖体的休眠期延长提取物，为以该繁殖体自身为原料经提取获得的提取
物。
[0011]
本发明中所述“繁殖体”是指任何可以用于繁殖目的的生物材料，包括个体、器官、组织、和细胞等生物有性、无性和孤雌繁殖材料，如植株、苗木(含试管苗)、果实、种子、砧木、接穗、插条、叶片、芽体、块根、块茎、鳞茎、球茎、珠芽、胚状体、花粉等植物培养材料，母体、仔、卵、生殖细胞、以及用于分裂生殖、出芽生殖、和断裂生殖等动物组织和细胞，孢子、菌丝、子实体等有性或无性繁殖菌物材料。
[0012]
本发明所述生物指的是生物体，与非生物相对；其元素包括：在自然条件下，通过化学反应生成的具有生存能力和繁殖能力的有生命的物体以及由它(或它们)通过繁殖产生的有生命的后代，能对外界的刺激做出相应反应，能与外界的环境相互依赖、相互促进；并且，能够排出体内无用的物质，具有遗传与变异的特性。
[0013]
所述有性繁殖，是通过生殖细胞结合，发育成为新的个体的繁殖方式。通常有结合繁殖和配子繁殖。
[0014]
所述无性繁殖(无配子繁殖)，不需要经过受精过程，不涉及生殖细胞，直接由母体或母体的一部分直接形成新后代个体的繁殖方式。
[0015]
所述孤雌繁殖也称单性生殖，即卵(雌性生殖细胞)不经过受精也能发育成正常的新个体。
[0016]
所述分裂生殖又叫裂殖，是无性生殖中一种常见的方式，即是母体分裂成2个(二分裂)或多个(复分裂)大小形状相同的新个体的生殖方式。
[0017]
所述出芽生殖又叫芽殖，是无性繁殖方式之一；亲代藉由细胞分裂产生子代，在一定部位长出与母体相似的芽体，即芽基,芽基并不立即脱离母体，而与母体相连，继续接受母体提供养分，直到个体可独立生活才脱离母体；“出芽生殖”中的“芽”是指在母体上分出的芽体，而不是高等植物上真正的芽(萌发的芽)的结构。
[0018]
所述断裂生殖，为无性生殖方式之一；生物体在一定或不定的部位断裂成两段或几段，然后每小段发育成一新个体。
[0019]
本发明中所述的“休眠”均为暂时性的，不影响其后续的正常生长发育。
[0020]
本发明所述的发育指生命现象的发展，是一个有机体从其生命开始到成熟的变化，是生物有机体的自我构建和自我组织的过程。
[0021]
本发明所述的发育正常是指有机体从其生命开始到成熟的变化过程中均在本领域公知的正常范围内，无明显的异常现象。
[0022]
本发明所述的“提取物”是以繁殖体材料为原料，根据对提取的最终物质的延长繁殖体休眠期用途的需要，经过物理化学提取分离过程，定向获取和/或浓集原料中的某一种或多种目标成分(即具有延长繁殖体休眠期的成分)而形成的物质。包括通过本领域已知的提取方法及本领域已知的提取方法的组合获得的；提取方法包括但不限于溶剂处理、固相提取、超临界co2、热、超声波提取，经受压力或离心力作用，或通过其他化学和/或机械工艺过程从原料中制取目标成分等。因此，本发明所述的“提取物”包括粗提取物、活性组分和活性单体。
[0023]
本发明所述“粗提取物”是指通过溶剂(乙醇、异丙醇等醇类，水，乙酸乙酯等)或生物酶解对原料进行提取分离后，获得的较低浓度目标成分和较高浓度非目标成分的混合物。
[0024]
本发明所述“活性组分”是指针对粗提取物进行进一步处理，如萃取、层析、蒸馏、升华、结晶和沉淀、离子交换、色谱分离、离心分离、电渗析、电解分离、电磁分离、吸附分离、磁力分离等，获得的含有较高浓度目标成分的提取物(相对于粗提取物)。
[0025]
本发明所述的“活性单体”是指“活性组分”中某一种目标化合物(即具有延长繁殖体休眠期作用的活性化合物)。
[0026]
所述繁殖体的休眠期延长提取物为以该繁殖体自身为原料通过有机溶剂或水提取获得的提取物。
[0027]
所述溶剂可分为三类，包括水，亲水性有机溶剂(一般指与水能混溶的有机溶剂，如乙醇、甲醇、异丁醇等醇类溶剂，丙酮等)和亲脂性有机溶剂(一般指与水不能混溶的有机溶剂，如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷、油等)。
[0028]
所述繁殖体的休眠期延长提取物，是将繁殖体浸泡在有机溶剂或水中，静置提取0.5～30h。
[0029]
所述静置提取后可进一步于30～50℃下超声震荡0.5～1h，然后减压抽滤，滤液经浓缩、干燥，得繁殖体休眠期延长提取物。
[0030]
一种繁殖体休眠期延长提取物的应用，所述休眠期延长提取物在该繁殖体休眠期延长中作为休眠期延长剂的应用。进一步的说是由原料中提取所得提取物作为原料的休眠期延长剂的应用。
[0031]
所述繁殖体的提取物和/或繁殖体的进一步处理后的物质，与水和/或其他具有延长休眠期效果的溶液按0.01～2g：5～100ml混合均匀，即为相应的繁殖体的休眠延长剂。优选为0.1～2g：10～100ml；更优选为0.1～1g：10～100ml。
[0032]
所述溶液为水或其他可用于农业上繁殖体领域的溶液。
[0033]
所述休眠延长提取物和/或休眠延长剂可采用浸泡、喷雾、涂刷或缓释微胶囊中的一种或几种方式，对待延长休眠期的繁殖体进行休眠期延长处理。所述待延长休眠期的产品为休眠延长提取物的原料，进而实现采用自身提取物对本类产品的休眠延长处理。
[0034]
一种可食性繁殖体休眠期延长组合物，该组合物为至少含有一种所述繁殖体经提取获得的提取物中所含的活性单体，即为该繁殖体的休眠期延长组合物。
[0035]
所述组合物与水和/或其他具有延长休眠期效果的溶液按0.01～2g：5～100ml混合均匀，即为相应的繁殖体的休眠期延长剂。优选为0.1～2g：10～100ml。
[0036]
一种可食性繁殖体休眠期延长组合物，所述组合物在该繁殖体延长休眠期中作为休眠期延长剂中的应用。
[0037]
进一步的，产品为植株类繁殖体其休眠期延长提取物为：
[0038]
(1)植物枝叶粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0039]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0040]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为植株类繁殖体休眠期延长粗提取物；
[0041]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到植株类繁殖体休眠期延长活性组分。
[0042]
所述植株类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0043]
所述植株类繁殖体为可供繁殖的植物全株。例如风滚草。
[0044]
进一步的，产品为苗木类繁殖体其休眠期延长提取物为：
[0045]
(1)植物枝叶粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0046]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0047]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为苗木类繁殖体休眠期延长粗提取物；
[0048]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到苗木类繁殖体休眠期延长活性组分。
[0049]
所述植株类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0050]
所述苗木类繁殖体为可供繁殖的苗木全株，例如月季、绣球等。
[0051]
进一步的，产品为果实类繁殖体其休眠期延长提取物为：
[0052]
(1)植物枝叶和/或果实粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0053]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0054]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为果实类繁殖体休眠期延长粗提取物；
[0055]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到果实类繁殖体休眠期延长活性组分。
[0056]
所述果实类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0057]
所述果实为被子植物具有果皮及种子的器官，一般包括果皮和种子两部分，其中，果皮又可分为外果皮、中果皮和内果皮；其中种子起传播与繁殖的作用。
[0058]
进一步的，产品为种子类其休眠期延长提取物为：
[0059]
(1)种子、果皮和/或种皮粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0060]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0061]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为种子类休眠期延长粗提取物；
[0062]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到种子类休眠期延长活性组分。
[0063]
所述种子类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种上述活性单体。
[0064]
所述种子(seed)为裸子植物和被子植物特有的繁殖体，例如花生、大豆、芝麻、小麦、玉米、水稻、高粱、黄瓜、棉花、生菜、白菜、油菜、番茄、人参、黄连、当归、棉花、甘蔗、甜菜、桃、李、苹果、大丽花、牵牛、万寿菊种子等。
[0065]
进一步的，产品为砧木类其休眠期延长提取物为：
[0066]
(1)枝条、叶片和/或根粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，
静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0067]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0068]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为砧木类休眠期延长粗提取物；
[0069]
所述粗提取物可进一步处理，得砧木类休眠期延长活性组分。
[0070]
所述砧木类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0071]
所述砧木是指嫁接繁殖时承受接穗的植株；可以是整株植株，也可以是植株的根段或枝段，有固定、支撑接穗，并与接穗愈合后形成植株生长、结果的作用。例如作为砧木嫁接苹果的西府海棠、嫁接桃的毛桃、嫁接葡萄的山葡萄等。
[0072]
进一步的，产品为接穗类其休眠期延长提取物为：
[0073]
(1)枝条、叶片和/或根粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0074]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0075]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为接穗类休眠期延长粗提取物；
[0076]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到接穗类休眠期延长活性组分。
[0077]
所述接穗类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0078]
所述接穗类植物是指用来嫁接到砧木上的芽、枝等分生组织，通常用于经济林木、蔬菜等领域，例如沃柑、脐橙、柚子、苹果接穗等。
[0079]
进一步的，产品为插条类其休眠期延长提取物为：
[0080]
(1)枝条、叶片和/或根粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0081]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0082]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为插条类休眠期延长粗提取物；
[0083]
所述粗提取物可进一步处理，得到插条类休眠期延长活性组分。
[0084]
所述插条类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0085]
所述插条类即取植株营养器官的一部分进行繁殖，按取用器官的不同，可分为枝插、叶插、根插、和芽插；所述枝插使用植物枝条作为繁殖体，例如柳树、月季、多肉植物等；所述叶插是取叶片或叶片的一部分作为繁殖体，例如长寿花、虎皮兰、海棠、多肉植物(多肉植物是指植物的根、茎、叶三种营养器官中叶是肥厚多汁并且具备储藏大量水分功能的植物，包括自然界中存在的和人工培育的，例如生石花、玉露、仙人掌、蟹爪兰等。)等。所述根插使用根段作为繁殖体，如芍药、蒲公英、苹果等；所述芽插使用植株的芽作为繁殖体，但实际上是将带芽的茎梢或茎的部分，或将腋芽连叶同时从母株切离作为繁殖体，如茶花、茉莉等。
[0086]
进一步的，产品为块根类其休眠期延长提取物为：
[0087]
(1)块根和/或枝叶粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0088]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0089]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为块根类休眠期延长粗提取物；
[0090]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到块根类休眠期延长活性组分。
[0091]
所述块根类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0092]
所述块根类是由营养繁殖的植株不定根或实生苗侧根膨大形成的，例如甘薯、木薯、甜菜、何首乌等。
[0093]
进一步的，产品为块茎类其休眠期延长提取物为：
[0094]
(1)块茎和/或枝叶粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0095]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0096]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为块茎类休眠期延长粗提取物；
[0097]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到块茎类休眠期延长活性组分。
[0098]
所述块茎类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0099]
所述块茎是是植物茎的一种变态，呈块状，故名块茎，具有植物茎的主要特征；所述块茎类包括马铃薯、芋、薯蓣、菊芋、半夏等。
[0100]
进一步的，产品为鳞茎类其休眠期延长提取物为：
[0101]
(1)鳞茎和/或枝叶粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0102]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0103]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为鳞茎类休眠期延长粗提取物；
[0104]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到鳞茎类休眠期延长活性组分。
[0105]
所述鳞茎类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0106]
所述鳞茎为下变态茎的一种，变态茎非常短缩，呈盘状，其上着生肥厚多肉的鳞叶，内贮藏极为丰富的营养物质和水分；鳞茎也具顶芽和腋芽，可从其上发育出地上的花茎，开花结实。例如百合、朱顶红、水仙、风信子、蒜、洋葱等。
[0107]
进一步的，产品为球茎类其休眠期延长提取物为：
[0108]
(1)球茎和/或枝叶粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0109]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0110]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为球茎类休眠
期延长粗提取物；
[0111]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到球茎类休眠期延长活性组分。
[0112]
所述球茎类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0113]
所述球茎是地下变态茎的一种，为节间短缩膨大呈球状或扁球状的地下茎。所述球茎类例如荸荠、慈姑、魔芋、白及、唐菖蒲等。
[0114]
进一步的，产品为胚状体类其休眠期延长提取物为：
[0115]
(1)胚状体原始供体的枝叶粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0116]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0117]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为接穗类休眠期延长提取物；
[0118]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到、胚状体类休眠期延长活性组分。
[0119]
所述胚状体类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0120]
所述胚状体是指在细胞、组织或器官的离体培养中，通过体细胞或性细胞未经受精而分化出与合子胚相似的胚胎；它包括体细胞胚与性细胞胚，人工种子目前主要使用体细胞胚。
[0121]
进一步的，产品为花粉类其休眠期延长提取物为：
[0122]
(1)花粉干燥粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0123]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0124]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为花粉类休眠期延长粗提取物；
[0125]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到花粉类休眠期延长活性组分。
[0126]
所述花粉类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0127]
所述花粉是有花植物雄性器官，是雄蕊中的生殖细胞，外观呈粉末状；例如松花粉。
[0128]
进一步的，产品为卵类其休眠期延长提取物为：
[0129]
(1)将粉碎后卵和/或外壳与有机溶剂按1g：5～10ml的比例混合，冷藏静置提取24～30h，所述粗提溶剂为乙醇、异丙醇和乙酸乙酯按体积比7.7～7.9：1：1.5配得；
[0130]
(2)提取完毕后，30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0131]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为卵类休眠期延长提取物；
[0132]
所述卵类休眠期延长提取物可进一步处理，得卵类休眠期延长活性组分。
[0133]
所述卵类休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0134]
所述卵指是动植物的雌性生殖细胞(孤雌生殖)或受精卵；例如粉虱卵，蝗虫卵、鸡种蛋等。
[0135]
进一步的，产品为分裂生殖类其休眠期延长提取物为：
[0136]
(1)繁殖体干燥、粉碎，室温或加热条件下有机溶剂提取12～48h；所述粗提溶剂为醇类，优选为乙醇；
[0137]
(2)提取完毕后，30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0138]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为分裂生殖类休眠期延长提取物；
[0139]
所述休眠期延长提取物可进一步处理，得分裂生殖类休眠期延长活性组分。
[0140]
所述分类生殖类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0141]
所述分裂生殖由亲体(亲代细胞)通过细胞分裂直接形成形态结构相似的两个个体的生殖方式，为无性繁殖方式之一，单细胞生物如细菌、原生动物(绿眼虫等)、单细胞藻类植物(盘藻、实球藻等)。
[0142]
进一步的，产品为出芽生殖类其休眠期延长提取物为：
[0143]
(1)繁殖体干燥、粉碎，室温或加热条件下有机溶剂提取12～48h；所述粗提溶剂为醇类，优选为乙醇；
[0144]
(2)提取完毕后，30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0145]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为出芽生殖类休眠期延长提取物；
[0146]
所述休眠期延长提取物可进一步处理，得出芽生殖类休眠期延长活性组分。
[0147]
所述出芽生殖类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0148]
所述出芽生殖为亲代藉一种特殊的无性生殖方式，由细胞分裂产生子代，在一定部位长出与母体相似的芽体，即芽基,芽基并不立即脱离母体，而与母体相连，继续接受母体提供养分，直到个体可独立生活才脱离母体。如珊瑚虫、水螅等腔肠动物、海绵动物也有一些原核生物，一些真核生物如酵母菌等。
[0149]
进一步的，产品为断裂生殖类其休眠期延长提取物为：
[0150]
(1)繁殖体干燥、粉碎，室温或加热条件下有机溶剂提取12～48h；所述粗提溶剂为醇类，优选为乙醇；
[0151]
(2)提取完毕后，30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0152]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为断裂生殖类休眠期延长粗提取物；
[0153]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得断裂生殖类休眠期延长活性组分。
[0154]
所述断裂生殖为无性生殖方式之一，生物体在一定或不定的部位断裂成两段或几段，然后每小段发育成一新个体。断裂生殖类如颤藻、涡虫等。
[0155]
进一步的，产品为孢子类其休眠期延长提取物为：
[0156]
(1)孢子干燥后，破壁粉碎，然后与有机溶剂混合，室温或加热提取15～30h；所述有机溶剂为醇类，优选为乙醇；
[0157]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤
液；
[0158]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为孢子类休眠期延长粗提取物；
[0159]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到孢子类休眠期延长活性组分。
[0160]
所述孢子类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0161]
所述孢子是脱离亲本后能直接或间接发育成新个体的生殖细胞，是有丝分裂或减数分裂的产物；多数为单倍体，少数为二倍体；孢子一般为单细胞的，也可能是多细胞的繁殖体。如桫椤、肾蕨、衣藻等。
[0162]
进一步的，产品为菌丝类其休眠期延长提取物为：
[0163]
(1)菌物发酵，发酵产物经分离得菌丝体；
[0164]
(2)菌丝体用有机溶剂在室温或加热条件下进行提取；所述有机溶剂为醇类，优选为乙醇；
[0165]
(3)提取完毕后过滤，滤液浓缩、干燥，即为菌丝类休眠期延长粗提取物；
[0166]
所述休眠期延长粗提取物可进一步处理，得到菌丝类休眠期延长活性组分。
[0167]
所述菌丝类繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种活性单体。
[0168]
所述菌丝，即单条管状细丝，为大多数真菌的结构单位；是由孢子萌发成芽管，再由芽管不断生长成丝状或管状的菌体；分为真菌菌丝(例如香菇、灵芝菌丝)和放线菌菌丝。
[0169]
进一步的，产品为菌物子实体类其休眠期延长提取物为：
[0170]
(1)菌物子实体粉碎后，与水和/或有机溶剂按照1g：5～10ml的比例混合，静置提取15～30h；所述有机溶剂为乙醇、异丙醇、乙酸乙酯中的一种或几种；
[0171]
(2)提取完毕在30～50℃，功率80w、频率80hz下，超声振荡0.5～1.5h，过滤得滤液；
[0172]
(3)将滤液于45～65℃、真空度为0.06～0.25mpa下浓缩，干燥后即为菌物子实体休眠期延长提取物；
[0173]
所述休眠期延长提取物可进一步纯化，得到纯化后的菌物子实体休眠期延长提取物。
[0174]
所述菌物子实体繁殖体休眠期延长组合物为含至少一种休眠期延长提取物纯化后的化合物。
[0175]
所述子实体是指其里面或上面可产无性或有性孢子(产孢构造)，有一定形态和构造的任何菌丝体组织，为真菌的产生孢子的生殖体；子实体通常为食用菌、药用菌的主要食用、药用部分，例如鸡油菌、灵芝、猴头菌、木耳、羊肚菌、草菇等。
[0176]
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0177]
(1)不同于现有技术中使用的化学试剂，本发明的繁殖体休眠期延长提取物和延长剂是由繁殖体自身中提取所得，进而用于该繁殖体的自身的休眠期延长处理；其为天然的，不含任何外加添加剂或外源化合物，不但高效、安全、无毒的延迟繁殖体休眠期，并且不影响繁殖体后期的发芽率/孵化率，某些繁殖体(如大豆、柳条)的休眠延长提取物在使用后期甚至能够促进繁殖体的繁殖；且后期繁殖体发育正常。
[0178]
(2)本发明所提取获得的繁殖体休眠期延长提取物和/或休眠期延长剂可经喷雾、浸泡、涂刷的方法覆盖于待储存处理的繁殖体的表面覆盖成膜，处理后的繁殖体晾干后可
直接进行常规储存，或是与其他手段(沟藏、筑畦堆藏法、室内贮藏法、冷库贮藏法、气调贮藏法贮藏等)联用进行储存，从而起到抑制微生物、抗氧化、抑制待储存繁殖体的呼吸，并保持待储存繁殖体活力的作用。经本发明处理后的繁殖体，其休眠期可有效延长。
[0179]
(3)本发明繁殖体休眠延长剂基于维持繁殖体的基本生命过程，通过减少蒸腾作用、延缓物质转化、抑制待储存繁殖体的呼吸但不影响繁殖体的活力来达到延长繁殖体储存期的目的，施用的繁殖体休眠延长提取物和/或延长剂不仅安全原生态，同时延迟繁殖体的休眠期，且后期繁殖体发育正常。
附图说明
[0180]
图1为本发明实施例提供的繁殖体休眠期延长剂提取流程图。
[0181]
图2为本发明实施例提供的采用不同休眠延长产物处理后大豆的发芽情况图。
[0182]
图3为本发明实施例提供的采用不同休眠延长产物处理后柳条的发芽情况图。
[0183]
图4为本发明实施例提供的采用不同休眠延长产物处理后马铃薯的发芽情况图。
具体实施方式
[0184]
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0185]
实施例1、花生休眠延长提取物
[0186]
花生材料的选取：选取前一年同一批种植、同一批出土的、成熟饱满的、品种为四粒红的带壳干花生，小心分离花生壳与花生仁。
[0187]
取花生壳5kg，粉碎后按1g：10ml的比例加入水，常温避光条件下浸泡提取24h，24h后在50℃下超声1.5h，过滤、减压抽滤，得滤液；将滤液经减压浓缩、冷冻干燥，得花生休眠期延长粗提取物。
[0188]
随后对该粗提取物进行进一步处理：粗提物加入75l去离子水溶解后，然后经ab-8大孔树脂柱纯化，条件为:上样温度25℃，上样流速1bv/h，上样体积5bv；洗脱液为水溶液，洗脱温度25℃，洗脱流速1.2bv/h，洗脱体积3bv。洗脱液经减压浓缩后，冷冻干燥，将干燥物用无水乙醇溶解后，25℃超声处理10min，5000r/min离心10min，取上清液60℃减压浓缩干燥，得花生休眠期延长活性组分，经分析该活性组分主要包括以下有效活性成分：甲基丙二酸、十二烷基苯磺酸、8-羟基-6-甲基-s-三唑[4,3-b]哒嗪、欧前胡素、奎宁酸和1-甲基-3,6-吡嗪二酮。
[0189]
花生休眠期延长组合物：按重量份数计，甲基丙二酸1300份、十二烷基苯磺酸20份、8-羟基-6-甲基-s-三唑[4,3-b]哒嗪18份、欧前胡素3.5份、奎宁酸3份和1-甲基-3,6-吡嗪二酮2份。
[0190]
1.花生休眠期效果测定：
[0191]
分别用一定量无菌水与花生休眠延长粗提取物、花生休眠延长活性组分、花生休眠延长组合物混合，使各体系中总有效成分质量浓度均为0.5％。并设置清水浸泡对照组，共4组处理。然后每组分别取500粒花生，在室温(25℃)下分别完全浸泡于各处理组溶液中，
时间为24小时。除清水对照组直接取出外，其他组浸泡结束后用清水轻轻漂洗20s；然后分别置于铺有2层滤纸的器皿内于25～27℃下培养，喷无菌水保持花生表面和滤纸湿润，记录花生发芽率；以胚根和胚轴长度≥2mm长度作为发芽标准，用花生发芽率来评价花生休眠性的强弱。不同处理下花生发芽率结果见下表1。
[0192][0193]
表1不同处理下花生发芽率记录表
[0194][0195]
2、花生休眠性破除
[0196]
分别用一定量无菌水与花生休眠延长粗提取物、活性组分和组合物混合，使各体系中总有效成分质量浓度均为0.5％，并设置清水浸泡对照组，共4组处理。然后每组分别取500粒花生，在室温(25℃)下分别完全浸泡于各组处理液中；24h后，试验组用清水轻轻漂洗20s；然后分别置于铺有2层滤纸的器皿内于25～27℃下培养，喷无菌水保持花生表面和滤纸湿润，记录花生发芽率；以胚根和胚轴长度≥2mm长度作为发芽标准。第6天粗提物、活性组分、组合物实验组未发芽花生分别浸泡于1l清水中，12小时后，分别置于铺有2层滤纸的器皿内于25～27℃下培养，喷无菌水保持花生表面和滤纸湿润，记录花生发芽率；以胚根和胚轴长度≥2mm长度作为发芽标准。
[0197]
表2不同处理下破除休眠后花生的发芽率记录表
[0198][0199]
结论：通过实验1发现花生休眠期延长粗提物、活性组分和组合物都能够对花生发芽起到抑制作用，其抑制效果明显是活性组分>粗提物>组合物。通过实验2发现粗提物、活性组分、组合物作用花生后产生的抑芽效果通过清水浸泡能够破除，且不影响其后续发芽率。
[0200]
对实验2中花生休眠延长粗提取物、活性组分和组合物组中生出的花生芽进行种植和观察，发现30天内上述4组的后续发育基本保持一致，无明显差别、迟缓和异常现象。
[0201]
本发明实施例1以花生作为种子类繁殖体代表，经本发明方法提取的花生休眠延长粗提取物和休眠延长活性组分能够充分保留花生壳的生物活性成分，包括甲基丙二酸、十二烷基苯磺酸、8-羟基-6-甲基-s-三唑[4,3-b]哒嗪、欧前胡素、奎宁酸和1-甲基-3,6-吡嗪二酮等；本发明采用休眠延长提取物和活性组分对花生进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它种子类繁殖体。
[0202]
实施例2、大豆休眠延长提取物
[0203]
1.试验材料与仪器
[0204]
试验材料：(本实验在3月进行)，供试大豆采自辽宁抚顺，在同一批播种、同一批收获、成熟度接近的大豆中，挑选无虫害、无机械损伤的大豆。
[0205]
试验仪器：药材粉碎机、分析天平、超声波振荡器、离心机、旋转蒸发仪等。
[0206]
2.试验方法
[0207]
选取干的大豆秸秆和豆荚进行粉碎，按1g：7ml的比例加入无水乙醇。封口冷藏24h后，在30℃下超声波振荡器震荡1.5h，抽滤后保留滤液，将滤液减压蒸馏至无馏分，冷冻干燥，得大豆休眠延长粗提取物。
[0208]
大豆休眠延长粗提取物进一步经离子交换液相色谱纯化，以0.0005mol/l稀硫酸作为流动相，收集2～6min部分，即得大豆休眠延长活性组分。将所得活性组分经液相色谱分析，主要包括以下有效成分：苹果酸、柠檬酸、苯甲酸。
[0209]
大豆休眠延长组合物：按重量份计，按重量份计，苹果酸5份、柠檬酸2.5份、苯甲酸
1份。
[0210]
大豆休眠效果测定：分别用一定量无菌水与大豆休眠延长粗提取物、活性组分、组合物混合，得各配制体系中总有效成分质量浓度均为1％的不同休眠延长产品，并设置清水处理组。将大豆分为4组(每组300粒大豆)置于不同处理液体中常温浸泡24h，沥干后用湿纱布覆盖，置于室温(24℃)条件下保存，每4h对纱布喷水一次保持纱布湿润，每24h统计大豆发芽率，3d后将不同处理组大豆置于清水中常温浸泡12h，之后仍每4h对纱布喷水一次保持纱布湿润，每24h统计大豆发芽率。
[0211]
发芽率：以大豆发芽长度为1～2mm作为发芽标准，并计算发芽率；
[0212][0213]
3.结果与分析：
[0214]
处理后的大豆在室温条件下储藏6d，具体发芽情况见图2。由图2可知，大豆休眠延长活性成分粗提取物、活性组分和组合物处理组前2天抑制发芽效果均较为明显，显著低于清水对照组；后期上述三组的大豆发芽率逐渐上升，在第6天时达到了与清水对照组接近的发芽率86％，且活性组分处理中大豆的发芽率为91％，优于对照组。由此可见，大豆休眠延长粗提取物、活性组分和组合物在前期均可有效抑制大豆发芽，且没有对大豆后期的发芽能力造成影响。
[0215]
本发明实施例2以大豆作为种子类繁殖体代表，经本发明方法提取的大豆休眠延长粗提取物和休眠延长活性组分能够充分保留大豆秸秆和豆荚的生物活性成分，包括苹果酸、柠檬酸、苯甲酸等；本发明采用休眠延长提取物和休眠延长活性组分对大豆进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它种子类繁殖体。
[0216]
砧木类产品休眠期延长提取物，以山葡萄为例：
[0217]
实施例3、山葡萄休眠延长提取物
[0218]
1.试验材料与仪器
[0219]
试验材料:供试山葡萄无性系采自营口，挑选表面光洁、无虫害、无机械损伤的、尚未发芽的葡萄枝条。
[0220]
试验仪器：药材粉碎机、分析天平、超声波振荡器、离心机、旋转蒸发仪等。
[0221]
2.试验方法
[0222]
山葡萄枝条水洗、晾干、粉碎，按1g：8ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为无菌水。封口冷藏24h后，在50℃下超声波振荡器震荡0.5～1.5h，抽滤后保留滤液，将滤液减压蒸馏至无馏分，冷冻干燥，得山葡萄休眠延长粗提取物。
[0223]
山葡萄休眠延长粗提取物可进一步处理，得山葡萄休眠期延长活性组分。
[0224]
所得山葡萄休眠延长提取物用于葡萄砧木的休眠期延长。
[0225]
本发明实施例3以山葡萄为砧木类代表，经本发明方法提取的山葡萄休眠延长粗提取物和活性组分能够充分保留山葡萄的生物活性成分；本发明采用山葡萄休眠延长粗提取物和活性组分对山葡萄进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它砧木类。
[0226]
接穗类产品休眠期延长提取物，以葡萄为例：
[0227]
实施例4、葡萄休眠延长提取物
[0228]
1.试验材料与仪器
[0229]
试验材料:供试葡萄无性系采自营口，挑选表面光洁、无虫害、无机械损伤的、尚未发芽的葡萄枝条。
[0230]
试验仪器：药材粉碎机、分析天平、超声波振荡器、离心机、旋转蒸发仪等。
[0231]
2.试验方法
[0232]
葡萄枝条水洗、晾干、粉碎，按1g：8ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为无菌水。封口冷藏24h后，在50℃下超声波振荡器震荡0.5～1.5h，抽滤后保留滤液，将滤液减压蒸馏至无馏分，冷冻干燥，得葡萄休眠延长粗提取物。
[0233]
葡萄休眠延长粗提取物可进一步处理，得葡萄休眠期延长活性组分。
[0234]
所得葡萄休眠延长提取物用于葡萄接穗的休眠期延长。
[0235]
本发明实施例4以葡萄为砧木类代表，经本发明方法提取的葡萄休眠延长粗提取物和活性组分能够充分保留葡萄的生物活性成分；本发明采用葡萄休眠延长粗提取物和活性组分对葡萄进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它接穗类。
[0236]
插条类产品休眠期延长提取物，以旱柳柳条、多肉植物白牡丹(graptoveria
‘
tituba ns’)、蒲公英为例：
[0237]
实施例5、柳条休眠延长提取物
[0238]
1.试验材料与仪器
[0239]
试验材料:实验在3月进行，供试柳树无性系采自柳树种质资源圃，挑选表面光洁、无虫害、无机械损伤的、尚未发芽的旱柳(salix matsudana)枝条。
[0240]
试验仪器：药材粉碎机、分析天平、超声波振荡器、离心机、旋转蒸发仪等。
[0241]
2.试验方法
[0242]
旱柳枝条水洗、晾干、粉碎，按1g：8ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为无菌水。封口冷藏24h后，在50℃下超声波振荡器震荡0.5～1.5h，抽滤后保留滤液，将滤液减压蒸馏至无馏分，冷冻干燥，得柳条休眠延长粗提取物。
[0243]
柳条休眠延长粗提取物进一步经液相色谱纯化，以nh4h2po3水溶液和甲醇作为流动相进行梯度洗脱，收集9～11min部分；废液浓缩后用硅胶进行柱层析分离，以体积比为4：1(5.7l)、7：3(3.0l)、1：1(4.3l)的正己烷/乙酸乙酯，100％乙酸乙酯(4.7l)，4：1(4.0l)的乙酸乙酯/甲醇洗脱，收集不同部分后用甲醇重结晶；将液相色谱收集部分与重结晶部分混合，即柳条休眠延长活性组分。将所得活性组分经液相色谱分析，主要包括有效成分：水杨苷、丁二酸、对羟基苯甲酸。
[0244]
柳条休眠延长组合物：按重量份计，水杨苷10份、丁二酸1份、对羟基苯甲酸2份。
[0245]
效果测定：分别用一定量无菌水与柳条休眠延长粗提取物、柳条休眠延长活性组分、柳条休眠延长组合物混合，得各配制体系中总有效成分质量浓度均为1％的不同休眠延长产品，并设置清水处理与空白对照组。将柳条分为5组至于不同处理液体中常温浸泡7天后(每组100枝柳条)，扦插至土壤中，清水保持土壤湿润；扦插4天后将柳条移出土壤，清理干净柳条表面土壤，滤纸包裹4天，喷水保持柳条湿润，用清水清洗柳条后，清水常温浸泡12小时，沥干后用滤纸包裹置于室温(24℃)条件下保存，喷水保持滤纸湿润。每7天统计柳条发芽率。
[0246]
发芽率：以柳条发芽长度大于1mm作为发芽标准，并计算发芽率；
[0247][0248]
在室温条件下处理后储藏21d观察，由图3中柳条发芽情况可见，从图中可见，柳条休眠延长粗提取物、活性组分和组合物处理组前7天抑制发芽效果均较为明显，显著低于清水和空白对照组；后期上述三处理组的柳条发芽率逐渐上升，在第21天时柳条休眠延长活性组分达到了100％的发芽率，柳条休眠延长粗提取物的发芽率也达到了93％，远高于清水对照组和空白对照组的发芽率。由此可见，柳条休眠延长活性组分和粗提取物均可有效延缓柳条发芽时间，且没有对柳条后期的发芽能力造成影响。
[0249]
本发明实施例5以旱柳柳条作为插条类(枝插)繁殖体代表，经本发明方法提取的柳条休眠延长粗提取物和休眠延长活性组分能够充分保留柳条的生物活性成分，包括丁二酸、对羟基苯甲酸、水杨酸等；本发明采用休眠延长粗提取物和休眠延长活性组分对柳条进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它插条类(枝插)繁殖体。
[0250]
实施例6、多肉植物白牡丹休眠延长提取物
[0251]
1.试验材料与仪器
[0252]
试验材料:供试白牡丹无性系采自沈阳，挑选表面光洁、无虫害、无机械损伤的白牡丹叶片。
[0253]
试验仪器：药材粉碎机、分析天平、超声波振荡器、离心机、旋转蒸发仪等。
[0254]
2.试验方法
[0255]
白牡丹叶片水洗、晾干、粉碎，按1g：8ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为无菌水。封口冷藏24h后，在50℃下超声波振荡器震荡0.5～1.5h，抽滤后保留滤液，将滤液减压蒸馏至无馏分，冷冻干燥，得白牡丹休眠延长粗提取物。
[0256]
白牡丹休眠延长粗提取物可进一步处理，得白牡丹休眠期延长活性组分。
[0257]
所得白牡丹休眠延长提取物用于白牡丹叶片的休眠期延长。
[0258]
本发明实施例6以白牡丹为插条类(叶插)代表，经本发明方法提取的白牡丹休眠延长粗提取物和活性组分能够充分保留白牡丹的生物活性成分；本发明采用白牡丹休眠延长粗提取物和活性组分对白牡丹进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它插条类(叶插)繁殖体。
[0259]
实施例7、蒲公英休眠延长提取物
[0260]
1.试验材料与仪器
[0261]
试验材料:供试蒲公英无性系采自沈阳，挑选表面光洁、无虫害、无机械损伤的蒲公英根部。
[0262]
试验仪器：药材粉碎机、分析天平、超声波振荡器、离心机、旋转蒸发仪等。
[0263]
2.试验方法
[0264]
蒲公英根部和/或叶片水洗、晾干、粉碎，按1g：8ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为无菌水。封口冷藏24h后，在50℃下超声波振荡器震荡0.5～1.5h，抽滤后保留滤液，将滤液减压蒸馏至无馏分，冷冻干燥，得蒲公英休眠延长粗提取物。
[0265]
蒲公英休眠延长粗提取物可进一步处理，得蒲公英休眠期延长活性组分。
[0266]
所得蒲公英休眠延长提取物用于蒲公英的休眠期延长。
[0267]
本发明实施例7以蒲公英为插条类(根插)代表，经本发明方法提取的蒲公英休眠
延长粗提取物和活性组分能够充分保留蒲公英的生物活性成分；本发明采用蒲公英休眠延长粗提取物和活性组分对蒲公英进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它插条类(根插)繁殖体。
[0268]
实施例8、马铃薯休眠延长提取物
[0269]
马铃薯的选择：在同一批播种、同一批收获、成熟度接近的马铃薯中，选择无机械损伤、处于休眠期尚未发芽的马铃薯。
[0270]
马铃薯和/或马铃薯皮洗净、晾干、粉碎，将所得物按照料液比1g:6ml，加入无水乙醇：异丙醇：乙酸乙酯＝8：1：1(v/v/v)的溶液中，25℃下避光静置24h，24h后超声(功率80w、频率80hz)振荡1h(温度45℃)，后经减压抽滤、减压蒸馏、冷冻干燥，得到马铃薯休眠延长粗提取物。
[0271]
随后用制备液相色谱进行纯化，以流动相0.2％磷酸～水、乙腈进行梯度洗脱，分别收集2～4min、9～12min、16～17min、22～23min洗脱液，混合后进行减压浓缩、冷冻干燥，即得马铃薯休眠延长活性组分。对其进行分析，主要包括以下有效成分：山奈酚、表儿茶素、绿原酸、阿魏酸、水杨酸、香豆酸等。
[0272]
马铃薯休眠延长组合物：按重量份计，山奈酚1～3份、表儿茶素10～15份、绿原酸180～200份、阿魏酸6～8份、水杨酸2～4份、香豆酸8～12份。
[0273]
采用撒施方式，将马铃薯休眠延长粗提取物、活性组分和组合物粉末按总有效成分0.8g/kg剂量分别均匀撒施在马铃薯上，使芽眼完全接触到各处理粉末，并设置空白对照，每组处理30个马铃薯(处理当天为第0天)；在室温24℃条件下避光保存，5天后用清水轻轻冲洗马铃薯，滤纸轻轻吸水、阴干后室温下避光保存(清洗当天为第5d)。处理当天调查总芽眼数，之后每天调查发芽个数(以马铃薯发芽长度2mm作为马铃薯的发芽标准)，并计算发芽率。
[0274][0275]
上述撒施时采用的马铃薯休眠延长组合物：按重量份计，山奈酚1份、表儿茶素11份、绿原酸180份、阿魏酸6份、水杨酸2份、香豆酸8份。
[0276]
结果：由图4中马铃薯发芽情况可知，马铃薯休眠延长活性组分处理组前5天抑制发芽效果最为明显，马铃薯不发芽，5天水洗后逐渐恢复发芽；马铃薯休眠延长活性组分、粗提取物、组合物处理组中，前11天均对马铃薯产生抑芽作用，相比空白对照组的发芽率显著降低，且马铃薯休眠延长活性组分对马铃薯发芽的抑制作用最大，粗提取物其次，组合物再次；15d时，马铃薯休眠延长活性组分、粗提取物、组合物和空白对照发芽率基本持平，为98％左右。由此可见，马铃薯休眠延长活性组分和粗提取物可有效延缓马铃薯发芽时间，且没有对后期的发芽能力造成影响。
[0277]
本发明实施例8以马铃薯作为根块类繁殖体代表，经本发明方法提取的马铃薯休眠延长粗提取物和休眠延长活性组分能够充分保留马铃薯的生物活性成分，包括槲皮素、山奈酚、绿原酸、水杨酸、香豆酸和香草酸等；本发明采用休眠延长粗提取物和休眠延长活性组分对马铃薯进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它根块类繁殖体。
[0278]
球茎类产品休眠期延长提取物，以百合为例：
[0279]
实施例9、百合休眠延长提取物
[0280]
试验材料:挑选表面光洁、无虫害、无机械损伤的百合。
[0281]
试验仪器：药材粉碎机、分析天平、超声波振荡器、离心机、旋转蒸发仪等。
[0282]
2.试验方法
[0283]
废弃百合球茎和/或叶片水洗、晾干、粉碎，按1g：8ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为无菌水。封口冷藏24h后，在50℃下超声波振荡器震荡0.5～1.5h，抽滤后保留滤液，将滤液减压蒸馏至无馏分，冷冻干燥，得百合休眠延长粗提取物。
[0284]
百合休眠延长粗提取物可进一步处理，得百合休眠期延长活性组分。
[0285]
所得百合休眠延长提取物用于百合休眠期的延长。
[0286]
本发明实施例9以百合为球茎类繁殖体代表，经本发明方法提取的百合休眠延长粗提取物和活性组分能够充分保留百合的生物活性成分；本发明采用百合休眠延长粗提取物和活性组分对百合进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它球茎类繁殖体。
[0287]
花粉类产品休眠期延长提取物，以松花粉为例：
[0288]
实施例10、松花粉休眠延长提取物
[0289]
1.试验材料与仪器
[0290]
试验材料:挑选表面光洁、无机械损伤的松花粉。
[0291]
试验仪器：药材粉碎机、分析天平、超声波振荡器、离心机、旋转蒸发仪等。
[0292]
2.试验方法
[0293]
松花粉、马尾松和/或油松的枝叶水洗、晾干、粉碎，按1g：8ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为无水乙醇。封口冷藏24h后，在50℃下超声波振荡器震荡0.5～1.5h，抽滤后保留滤液，将滤液减压蒸馏至无馏分，冷冻干燥，得松花粉休眠延长粗提取物。
[0294]
松花粉休眠延长粗提取物可进一步处理，得松花粉休眠期延长活性组分。
[0295]
所得松花粉休眠延长提取物用于松花粉休眠期的延长。
[0296]
本发明实施例10以松花粉为花粉类繁殖体代表，经本发明方法提取的松花粉休眠延长粗提取物和活性组分能够充分保留松花粉的生物活性成分；本发明采用松花粉休眠延长粗提取物和活性组分对松花粉进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它花粉类繁殖体。
[0297]
卵类产品休眠期延长提取物，以鸡种蛋为例：
[0298]
实施例11、东亚飞蝗受精卵休眠延长提取物
[0299]
安徽省东亚飞蝗越冬卵块，运输全程未进行冷冻处理，实验室检测卵块呈较为新鲜的浅棕色、保存完整。
[0300]
选取东亚飞蝗卵块：选取新鲜完整的东亚飞蝗卵块，清水漂洗小心除去泥沙(不破坏卵块)，获取表面清洁的东亚飞蝗卵块。
[0301]
用石油醚浸提东亚飞蝗卵块油脂(石油醚：东亚飞蝗卵块＝1:3)，75℃下提取时间2h，得石油醚提取液和脱脂东亚飞蝗卵块；脱脂东亚飞蝗卵块用85％乙醇(脱脂东亚飞蝗卵块：85％乙醇＝1:10)回流提取，待残留石油醚挥干后回流提取2h；得提取液，旋蒸浓缩至小体积浓缩液；浓缩液用等体积乙酸乙酯萃取；将石油醚提取液、乙酸乙酯相分别旋蒸浓缩至无馏分，得石油醚液体提取物和乙酸乙酯液体提取物。
[0302]
随后对得到的提取物进行分析，经分析，石油醚液体提取物包括以下有效活性成分：奈、油酸乙酯、十六酸甲酯、十六酸乙酯；
[0303]
乙酸乙酯提取物包括以下有效活性成分：油酸、肉豆蔻酸乙酯、亚油酸、肉豆蔻酸、木蜡酸、辛二酸、茉莉酸。
[0304]
本发明实施例11以东亚飞蝗受精卵作为卵类繁殖体代表，经本发明方法提取的东亚飞蝗受精卵休眠延长提取物和休眠延长活性成分提取物能够充分保留东亚飞蝗受精卵的生物活性成分，包括奈、油酸乙酯、十六酸甲酯、十六酸乙酯、油酸、肉豆蔻酸乙酯、亚油酸、肉豆蔻酸、木蜡酸新二酸和茉莉酸等；本发明采用休眠延长提取物和休眠延长活性组分对东亚飞蝗受精卵进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它卵类繁殖体。
[0305]
分裂生殖类产品休眠期延长提取物，以绿眼虫为例：
[0306]
实施例12、绿眼虫休眠延长提取物
[0307]
绿眼虫干燥虫体、粉碎，按1g：8ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为85％乙醇，室温下搅拌提取3次，每次48h；过滤，合并乙醇并减压蒸馏，得浸膏，即为得绿眼虫休眠延长粗提取物。
[0308]
绿眼虫休眠延长粗提取物可进一步处理，得绿眼虫休眠期延长活性组分。
[0309]
所得绿眼虫休眠延长提取物用于绿眼虫休眠期的延长。
[0310]
本发明实施例12以绿眼虫为分裂生殖类代表，经本发明方法提取的绿眼虫休眠延长粗提取物和活性组分能够充分保留绿眼虫的生物活性成分；本发明采用绿眼虫休眠延长粗提取物和活性组分对绿眼虫进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它分裂生殖类繁殖体。
[0311]
出芽生殖类产品休眠期延长提取物，以水蛭为例：
[0312]
实施例13、水蛭休眠延长提取物
[0313]
水蛭干燥虫体、粉碎，按1g：8ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为污水乙醇，室温下搅拌提取3次，每次3天；过滤，合并乙醇并减压蒸馏，得浸膏，即为得水蛭休眠延长粗提取物。
[0314]
水蛭休眠延长粗提取物可进一步处理，经100～200目的减压硅胶柱层析，石油醚/丙酮梯度洗脱(100:1到1:2,v/v)，得水蛭休眠期延长活性组分。
[0315]
所得水蛭休眠延长提取物用于水蛭休眠期的延长。
[0316]
本发明实施例13以水蛭为出芽生殖类代表，经本发明方法提取的水蛭休眠延长粗提取物和活性组分能够充分保留水蛭的生物活性成分；本发明采用水蛭休眠延长粗提取物和活性组分对水蛭进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它出芽生殖类繁殖体。
[0317]
断裂生殖类产品休眠期延长提取物，以涡虫为例：
[0318]
实施例13、涡虫休眠延长提取物
[0319]
新鲜涡虫虫体粉碎，按1g：10ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为95％乙醇，搅拌回流提取3次，每次24h；过滤，合并乙醇并减压蒸馏，得浸膏，即为得涡虫休眠延长粗提取物。
[0320]
涡虫休眠延长粗提取物可进一步处理，得涡虫休眠期延长活性组分。
[0321]
所得涡虫休眠延长提取物用于涡虫休眠期的延长。
[0322]
本发明实施例13以涡虫为断裂生殖类代表，经本发明方法提取的涡虫休眠延长粗提取物和活性组分能够充分保留涡虫的生物活性成分；本发明采用涡虫休眠延长粗提取物和活性组分对涡虫进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它断裂生殖类繁殖体。
[0323]
孢子类产品休眠期延长提取物，以肾蕨为例：
[0324]
实施例14、肾蕨休眠延长提取物
[0325]
肾蕨干燥茎干粉碎，按1g：10ml的比例加入粗提溶剂，所述粗提溶剂为95％乙醇，搅拌回流提取2次，每次3h；过滤，合并乙醇并减压蒸馏指无馏分，得浸膏，即为得肾蕨休眠延长粗提取物。
[0326]
肾蕨休眠延长粗提取物可进一步处理，得肾蕨休眠期延长活性组分。
[0327]
所得肾蕨休眠延长提取物用于肾蕨休眠期的延长。
[0328]
本发明实施例14以肾蕨为孢子类代表，经本发明方法提取的肾蕨休眠延长粗提取物和活性组分能够充分保留肾蕨的生物活性成分；本发明采用肾蕨休眠延长粗提取物和活性组分对肾蕨孢子进行休眠期延长，其具有普遍性同样适用于其它孢子类繁殖体。